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ph y equilibrios acido-base
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En los casos 3 & 4 tambin hay que tener en cuenta el equilibrio cido-base del disolvente.
NUNCA se valora un cido o base dbil con una base cido dbil.
Las curvas de titulacin son las representaciones grficas de la variacin del pH durante el
transcurso de la valoracin. Dichas curvas nos permiten:
- estudiar los diferentes casos de valoracin (cido fuerte vs. base fuerte; base fuerte vs.
cido fuerte; cido dbil vs. base fuerte; base dbil vs. cido fuerte).
- determinar las zonas tamponantes y el pKa.
- determinar el intervalo de viraje y el punto de equivalencia.
- seleccionar el indicador cido-base ms adecuado.
Los casos ms frecuentes en Bioqumica son las valoraciones de cidos y bases dbiles, ya que
muchos metabolitos presentan un cierto carcter cido bsico. A modo de ejemplo, a
continuacin se presenta la curva de titulacin del Tris, una base dbil, que se ha de titular con
un cido fuerte (ej. HCl)
cido fuerte = cido titulante (HCl) vs. base dbil = analito (Tris)
Grfica V vs. pH
H 2O
Tris + HCl
TrisH+ + Cl
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BH + + OH B + H 2O
2. Al ir aadiendo el cido titulante (HCl), se forman las especies B = Tris y BH+ = TrisH+.
La relacin entre la abundancia de las distintas especies y el pH se puede establecer mediante la
ecuacin de Henderson-Hasselbalch. Tal y como se ha descrito anteriormente, cuando
[ A ] = [ AH ] , entonces pH = pK a . El pKa supone un punto de mnima pendiente en la curva
de titulacin y se sita en el punto medio de la zona tampn.
Zona tampn: tramo de la curva de titulacin en el que se producen mnimas variaciones de pH
al aadir equivalentes H3O+/OH- ; se localiza en el intervalo de pH = pKa 1 unidad de pH. En
esta regin, el cido y su base conjugada se presentan en concentraciones similares (factor de
10; es decir cuando pH- pKa = 1, el cido se encuentra desprotonado en un 90%).
4. En este tramo de la curva existe un exceso de H3O+ provenientes de la hidrlisis del cido
fuerte, y por lo tanto, el pH de la disolucin viene definido por el exceso del cido titulante.
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Tris( NH 3+ ) Tris ( NH 2 ) + H 3O +
En esta prctica se realizar una titulacin cido-base de una solucin 0.1 M de TRIS con HCl
1 M, un cido fuerte. Una vez realizada la titulacin, se determinarn los valores para la constante
de disociacin Ka y del pKa. Para realizar esta prctica es necesario disponer de un pHmetro.
II. El pHmetro
El pH metro es un potencimetro que mide la diferencia de potencial (E) entre dos electrodos,
que estn en contacto a travs de una solucin con H3O+. Uno de los electrodos (electrodo de
referencia) posee un potencial conocido e invariable (+ 0.250 V a 25 C). El otro es el electrodo
indicador, en el que se genera un potencial que depende de la concentracin de H3O+ de la
solucin. La diferencia de potencial (E) que existe entre los dos electrodos depende del
potencial generado en el electrodo de referencia y el indicador, y est relacionada con la
concentracin de H3O+ y el pH de la solucin: E = ERe f Esolucion
Donde ERe f es el potencial del electrodo de referencia y Esolucion es el potencial del electrodo
indicador.
El pHmetro es un aparato caro y manejarlo con cuidado. Algunas consideraciones a tener en
cuenta son:
- El bulbo de vidrio que contiene los dos electrodos es muy frgil y no ha de tocarse con los
dedos.
- El bulbo del pHmetro tiene que estar continuamente humedecido
- Las soluciones a valorar deben estar a temperatura ambiente.
- Antes de introducir el electrodo en la solucin hay que lavarlo con agua destilada y secarlo con
papel. Esta operacin ha de repetirse siempre y cuando se cambie de solucin.
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- Cuando no haya solucin alguna para medir con el pHmetro, el bulbo ha de volverse a lavar,
secar e introducir en la solucin de KCl 3 M.
- Antes de realizar la titulacin, hay que calibrar el pHmetro.
- Cada adicin de cido base valorante debe mezclarse mediante agitacin antes de realizar
la medida del pH.
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Resultados esperables
Normas a tener en cuenta a la hora de realizar esta tarea.
A continuacin se muestra una tabla modelo, donde se han completado las casillas siguiendo las
instrucciones anteriores. Los datos de esta tabla se han representado grficamente,
obtenindose una curva de valoracin.
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VT (L)
5,00E-02
5,05E-02
5,10E-02
5,15E-02
5,20E-02
5,25E-02
5,30E-02
5,35E-02
5,40E-02
5,45E-02
5,50E-02
5,55E-02
5,60E-02
5,63E-02
5,70E-02
pH medido
10,6
9,06
8,71
8,49
8,3
8,14
7,98
7,82
7,64
7,42
7,1
6,06
4,25
2,31
1,35
[H3O+] (M)
2,51E-11
8,71E-10
1,95E-09
3,24E-09
5,01E-09
7,24E-09
1,05E-08
1,51E-08
2,29E-08
3,80E-08
7,94E-08
8,71E-07
5,62E-05
4,90E-03
4,47E-02
Zona tampn
10
9
pH medido
8
7
6
pKa
5
4
PE
3
2
1
0
0
V HCl (L)
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punto medio =
7.1 + 9.06
= 8.08
2
Por lo tanto, el valor del pKa del Tris hallado a partir de la grfica es pKa = 8.08
El valor de K a = 10 pK a = 108.08 = 8.32 *109
- para calcular el punto de equivalencia, se establecen los lmites del intervalo de viraje (si bien
es ms complicado que establecer los lmites de la zona tampn) y se halla el punto medio.
2.31 < intervalo de viraje < 7.1
punto medio =
2.31 + 7.1
= 4.71
2
N .meq.acido = N .meq.base , debera haber 6 meq de base. Si el volumen inicial de Tris era de
60 mL 0.1 M, hay 6 meq de base. Se esta forma se comprueba la propiedad que define el punto
de equivalencia.
V. Preguntas adicionales
1. Cul es la forma predominante del Tris a pH = 3?
2. Cules son las unidades en las que se expresa el pKa?
3. Cuntos moles de Tris hay en 100 mL de una disolucin 500 mM y pH = 8?
4. Si se prepara una disolucin de Tris 0.1 M, y el pH medido es igual a 5, Cul es la
concentracin de [H3O+] en solucin?
5. Utilizando el dato de pKa obtenido para el Tris, y sabiendo que la relacin entre
[A-]/[AH] = 10-2, Cul es el pH de la disolucin?
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