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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE PUEBLA

ESCUELA DE BIOLOGIA

BIOLOGIA DE HONGOS

PRACTICA NUMERO 1
CULTIVO Y DISPERSION DE HONGOS

INTEGRANTES:
MONICA REYES REYES
MAYTE MENDEZ LOZANO
IRIS DE PALOMA SOLANO DOMINGUEZ
CLAUDIA ALICIA NERI DE LOS SANTOS
ZAIRA

Introduccin
Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de
microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio.
El medio de cultivo es una sustancia o solucin que permite el desarrollo
de microorganismos, mientras que el cultivo es el producto del
crecimiento de un organismo. La humedad es fundamental para el
desarrollo de los hongos, porque cuando sta comienza a disminuir, la
formacin de micelio tambin disminuye y el hongo tiene que asegurar
su perpetuidad formando estructuras propagativas (esporas, conidias) y
de conservacin (clamidosporas).
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin
de medios de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua
hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas
excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es
atacado por aquellas que crecen en l.
El caldo de patata y dextrosa son medios comunes de cultivo
microbiolgico que se preparan a partir de infusin de patata y dextrosa.
El agar de patata y dextrosa es el medio ms utilizado para el
crecimiento de hongos y levaduras que atacan a las plantas vivas o
materia vegetal muerta en descomposicin.
La primera noticia de la utilizacin de medios de cultivo nos llega del
miclogo Brefeld, que consigui aislar y cultivar esporas de hongos en
medios slidos realizados a base de gelatina.
Koch realiz sus investigaciones utilizando en un primer momento
rodajas de patata como soporte nutritivo slido, pero no tard en recurrir
al caldo de carne lquido, diseado por Loeffler, al que, en 1881, aadi
gelatina, logrando un medio slido transparente ideal para la
observacin de la morfologa macroscpica de las colonias microbianas.
En el ao 1882 tiene lugar uno de los grandes avances de la
microbiologa en relacin con los medios de cultivo: el mdico alemn
Walter Hesse introduce el agar-agar (polisacrido extrado de algas
rojas) como solidificante.
En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri, comienza a utilizar placas
de cristal planas, que se llaman desde entonces placas de Petri, para

sustituir a las clsicas bandejas de vidrio cubiertas con campanas que se


usaban hasta entonces.

OBJETIVOS:

Aprender la utilidad de los medios de cultivo


Realizar medios de cultivo
Cultivar Mohos

MATERIAL Y MTODOS
-

Papa
Cajas Petri
Dextrosa
Agar
Agua
Gasas
Cmara de flujo laminar
Autoclave
Alimentos con moho:
Tortilla
Guayabn
Pan
Aza bacteriolgica
Dos mecheros
Parrilla elctrica
Microondas
Para esta prctica se realiz un medio de cultivo, para esto se
necesit una papa pequea cortada en cubos de 1cm
aproximadamente, en un vaso de precipitado se hirvi 50 gr de la
papa y 250 ml de agua destilada usando una parrilla elctrica. Ya
hervido, el jugo de la papa se vaci en un matraz utilizando una
gaza para colarlo y evitar el paso de algunos trozos de la papa, en
este mismo matraz se le agregaron 2.5 gr de dextrosa y 3.5 gr de
agar y se movi constantemente para su eficaz disolucin, luego
de esto el matraz fue introducido en la autoclave por 15 minutos
aproximadamente para ser pasteurizado; das despus el matraz y
su contenido fueron calentados en un microondas para recuperar
su forma lquida ya que haban adoptado un estado slido, luego
de esto el contenido del matraz fue llevado a la cmara de flujo
laminar, ah se vaci en 8 cajas Petri, las cuales se sellaron con

parafil. Una semana despus se ocuparon los alimentos con


moho: tortilla, guayabn y pan para realizar el cultivo as como el
aislamiento de un cultivo de aspergillus: esto haciendo uso del aza
bacteriolgica en un medio estril entre los mecheros para evitar
la contaminacin de los cultivos, primero calentando el aza en uno
de los mecheros para eliminar residuos que pudiera tener,
posteriormente haciendo contacto (el aza) con el moho del
alimento y sembrando en forma de zigzag sobre el agar, sin salir
del medio estril, al terminar el aza se volva a calentar para
eliminar los residuos, finalmente las cajas se sellaron nuevamente
con parafil. En total se usaron 4 de las 8 cajas Petri. Luego de una
semana ms pudimos observar nuestros cultivos y los resultados
fueron los siguientes:

RESULTADOS

A travs de la observacin en los cultivos obtuvimos los siguientes


resultados:
Aspergillus: Presenta un color amarillo verdoso con el contorno
blancuzco por el anverso. Se pueden distinguir pequeas esferas
de color amarillo claro y forman pequeas colonias, alrededor
tiene una textura algodonosa y en el centro una textura rugosa.
Guayabn: Presenta un color blanco con tonos amarillos en su
parte superior, su textura es algodonosa. Es posible que exista una
contaminacin (por parte de otro organismo) que es de apariencia
verdosa que crece en pequeas colonias comparado con el hongo
cultivado, el cual abarca gran parte de la caja.
Tortilla: Al igual que en el cultivo del pan se observa un micelio
areo de color blanco con pequeas esferas oscuras pegadas en
los extremos de la tapa de las cajas, incluso llegan hasta el parafil.
Tambin se puede observar agua condensada en la parte superior
de la misma, la textura algodonosa va acompaada de filamentos
separados entre s, estos filamentos adquieren un color verde olivo
al acercarse a la parte superior.
Debido a la contaminacin en dos de los cuatro cultivos (tortilla y
pan) se realiz un aislamiento de los cultivos no contaminados en
este caso solo el de guayabn ya que de aspergillus ya estaba
hecho.

Discusin

Dentro del marco de discusiones podemos enmarcar diversos aspectos


importantes y fundamentales de la prctica. Destacamos el resultado
positivo sobre los medios de cultivo, ya que en l aplicamos toda la
teora estudiada en la clase, es decir, los diversos modos de cultivo
fueron necesarios para hacer comparaciones entre ellos, y de esta
manera definir el que se acomodara de mejor forma a la prctica que
elaboraramos.
Despus de aplicar y utilizar el medio de cultivo donde se utiliz AgarAgar, es preciso decir que la consistencia de nuestra solucin era mucho
ms oscura ya que le agregamos demasiado Agar que la de algunos
compaeros.
Otro punto a debatir es la diversidad de microorganismos que creci n el
cultivo. Hablamos de que dentro del cultivo crecieron hongos y bacterias
primordialmente, logramos definir sus caractersticas mediante la
observacin.

Conclusiones
Mediante el desarrollo de esta prctica definimos, estudiamos y
aplicamos procedimientos que se deben realizar para elaboracin de un
medio de cultivo, es claro que esto es referido para con la unidad que
estamos estudiando, por otro lado conocimos y utilizamos tcnicas para
poder elaborar esta prctica. Creemos que la prctica fue muy amena y
fructfera para con los objetivos trazados al inicio de la misma.
Se logr conocer los diferentes medios de cultivo para sembrar
microorganismos. Aprendimos los pasos para elaborar un medio de
cultivo, sus clculos respectivos de las cantidades necesarias para su
preparacin.

Bibliografa
Laboratory Exercices in Microbiology, R. A. Pollack. 2002 John Wiley
& sons,
Inc
J.G. y N. Sherman.1992. Microbiology a Laboratory Manual 3ra
edicin
Cappuccino Benjamin/Cummings Inc.

A.E. Greenberg, L.S. Clesceri y A. D. Eaton 1992.


Standard Methods for Examination of Water and
Wastewater 18th edicin

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