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Guía de Laboratorio de Microbiologia Estudiante
Guía de Laboratorio de Microbiologia Estudiante
DATOS INFORMATIVOS
MATERIA O MDULO:
LABORATORIO MICROBIOLOGA PRCTICAS
CARRERA:
MEDICINA
NIVEL:
CUARTO
N CRDITOS:
5
-CRDITOS TEORA:
4
-CRDITOS PRCTICA:
1
DATOS DEL PROFESOR:
Nombre: Celia Annabel Bowen Fernndez
Grado Acadmico o Ttulo Profesional: Dra. Bioqumica y Farmacia opcin Bioq. Clnica
Breve indicacin de la lnea de actividad acadmica: Docencia en diferentes en diferentes ramas de la
patologa clnica (Laboratorio clnico y Microbiologa), coordinadora de los laboratorios en el rea de
Destrezas Clnico Quirrgicas
Indicacin de horario de atencin a estudiantes: Martes, Mircoles y Viernes 12:00 a 13.00 horas
Correo Electrnico: bowencelia@yahoo.es
Telfono: 084678618
PROFESOR:
Grado acadmico o ttulo profesional: Dra. Bioqumica y Farmacia opcin: Bioq. Clnica/ Diplomado
Superior en Pedagogas Innovadoras
2.
DESCRIPCIN DE LA MATERIA:
La unidad tiene como propsito facilitar el aprendizaje de los principales mtodos de diagnstico
microbiolgico, en lo que se refiere a las enfermedades infecciosas humanas: medios de cultivo,
tinciones, pruebas inmunolgicas y de microscopa y relacionarlos con los objetivos de la teora
de Microbiologa.
3. OBJETIVO GENERAL:
Introducir al estudiante de medicina en los mtodos de identificacin de microorganismos patgenos
responsables de las principales enfermedades infecciosas humanas.
4.
OBJETIVOS ESPECFICOS:
4.1. ACTITUDINALES:
a. Cumplir las normativas de bioseguridad
b. Escoger las pruebas de laboratorio adecuadas de acuerdo al tipo de infeccin
c. Compartir conocimientos y experiencias durante el proceso de aprendizaje
4.2. COGNITIVOS:
a. Identificar los diferentes microorganismos como bacterias, parsitos, hongos y virus
causantes de enfermedades
b. Conocer los principales mtodos de anlisis inmunolgico
c. Revisar los principales mtodos, medios de cultivos y coloraciones empleados para la
identificacin de microorganismos infecciosos
4.3. PROCEDIMENTALES:
a. Ejecutar correctamente la toma y recogida de muestras para anlisis microbiolgicos
b. Reconocer a travs del microscopio, los principales microorganismos patgenos a travs de
tinciones y montajes bsicos
c. Realizar siembras en los medios de cultivos comunes
d. Observar las caractersticas de crecimiento y multiplicacin de los microorganismos
5.
CONTENIDOS
PARALELO 1,2,3,4
1.
2.
3.
6.
7.
CRONOGRAMA DE EVALUACIONES:
a.
1ra. Evaluacin: Sptima semana
b.
2da. Evaluacin: Dcima sexta semana
c.
3era. Evaluacin: Dcima sptima semana
SISTEMA DE CALIFICACIN:
EVALUACIONES PARCIALES PRCTICA Y TERICA: 30 puntos
10 puntos de cada prueba parcial (dos parciales) ms 10 puntos entre examen prctico al
microscopio (6 puntos) y trabajos (consultas, reportes, otros) (4 puntos)
PRCTICA No. 1
TEMA: Bioseguridad en el Laboratorio de Microbiologa
EL MECHERO DE BUNSEN
La llama ms utilizada en el laboratorio es la producida por la combustin de un gas
(propano, butano o gas ciudad), con el oxgeno del aire.
La combustin completa (con exceso de oxgeno) produce agua y dixido de carbono,
una llama poco luminosa y de gran poder calorfico.
La combustin incompleta produce, adems de dixido de carbono y agua, carbono,
nonxido de carbono y otros productos intermedios, da origen a llamas de bajo poder
calorfico y altamente luminosas (debido a la incandescencia de las partculas de
carbono que se producen).
Para controlar las llamas se utiliza el mechero de laboratorio que, a pesar de existir
diversos tipos, el mecanismo de funcionamiento es similar en todos ellos.
Esencialmente constan de un tubo, llamado can, a cuya base llega la entrada de gas a
traves de un pequeo orificio (chicl).
En esta zona existen unas aberturas, regulables mediante una anilla (virola), que
permiten la entrada del aire al can.
La expansin del gas a travs del pequeo orificio succiona el aire exterior
produciendose, de este modo, una mezcla gas-oxgeno que asciende por el can hasta
la boca del mismo que es donde se produce la llama.
Sosteniendo con unas pinzas una cpsula de porcelana en la parte superior de la llama
producida con la entrada de aire cerrada, se observa un ennegrecimiento producido por
el depsito de carbn, lo que indica que la combustin es incompleta.
Sosteniendo con unas pinzas una cpsula de porcelana en la parte superior de la llama
producida con la entrada de aire abierta, se observa el depsito de pequeas gotitas de
agua, lo que indica la combustin completa del gas a dixido de carbono y agua.
Si el mechero arde con la entrada de aire cerrada, la combustin es incompleta y la
llama presenta un color anaranjado debido a la presencia de partculas incandescentes
de
carbono.
Al abrir el paso de aire, la combustin es completa y en la llama se aprecian dos zonas
claramente
separadas
por
un
cono
azul
plido.
En el exterior del cono la combustin es completa, existe un exceso de oxgeno y se
producen
altas
temperaturas
(zona
oxidante).
En el interior del cono los gases todava no se han inflamado y en el cono mismo hay
zonas donde la combustin no es todava completa y existen gases no oxidados a
dixido de carbono y agua por lo que se tiene una zona reductora de la llama
ENCENDIDO DEL MECHERO
Cerrar totalmente la entrada de aire, abrir ligeramente la llave de paso del gas y acercar,
lateralmente, una cerilla encendida a la boca del can. Regular la llave hasta obtener
una llama con la altura deseada, gradualmente, abrir la entrada de aire. No abrir
repentinamente porque puede apagarse el mechero.
Para obtener mayor temperatura, abrir ms el flujo de gas y la entrada de aire.
EL MECHERO SE APAGA AL CERRAR LA LLAVE DE GAS.
PRCTICA No. 2
TEMA: Coloraciones: Gram, Ziehl-Neelsen, Giemsa (ver pg. 8 del manual de
prcticas Lab. Microbiologa del Dr. F. Prez y mirar atlas con el nmero de
prctica correspondiente colocado en la pgina ftp.puce.edu.ec)
PRCTICA No. 3
TEMA: Medios de cultivo (ver pg. 13 del manual de prcticas Lab.
Microbiologa del Dr. F. Prez y mirar atlas con el nmero de prctica
correspondiente colocado en la pgina ftp.puce.edu.ec)
Metodologa para realizar un cultivo bacteriano:
Antes de realizar un cultivo es necesario contar con todo el material debidamente
esterilizado, adems de tener la precaucin de trabajar junto a una fuente de calor que
impida tanto un contagio de la persona que procesa la muestra, as como una posible
contaminacin del cultivo donde se va a trabajar.
Para realizar un cultivo bacteriano es necesario tomar el asa e introducirla al fuego para
que se esterilice, dejar enfriar unos segundos y tomar la muestra que se va a estudiar;
abrir la caja petri y flamear delante del mechero, con el asa impregnada de la muestra
se efecta un pequeo inculo en el borde, de all se parte la primera estriacin; luego
de la esquina de una de las estras de la primera estriacin se realiza la segunda
estriacin y finalmente de la esquina de una de las estras de la segunda estriacin, se
realiza la tercera estriacin, procurando hacer las estras mucho ms separadas de las
dos primeras, con la finalidad de separar las colonias que sean sembradas; se tapa la
caja y se lleva a la incubadora, colocndola de lado contrario al que se sembr y se la
deja en las condiciones apropiadas para el crecimiento de cada bacteria (temperatura,
atmsfera, potencial rdox, tiempo, etc.)
PRCTICA No. 4
TEMA: Tcnica para la realizacin del antibiograma (ver pg. 23 del manual de
prcticas Lab. Microbiologa del Dr. F. Prez y mirar atlas con el nmero de
prctica correspondiente colocado en la pgina ftp.puce.edu.ec)
PRCTICA No. 5
1. TEMA: ESTUDIO MICROBIOLGICO DEL ESPUTO: Coloraciones,
siembras e interpretacin (ver pg. 26 del manual de prcticas Lab.
Microbiologa del Dr. F. Prez)
PRCTICA No. 6
2. TEMA: IDENTIFICACIN DE COCOS GRAM POSITIVOS:
Estafilococos y estreptococos (ver pg. 44 del manual de prcticas Lab.
7
la temperatura ambiente
Encendemos el mechero de bunsen, colocamos las asas y las muestras
de esputo cerca del mismo
Tomamos un cotonete de algodn estril y tomamos un poco de muestra
de esputo en una lado del agar, luego tomamos el asa lo esterelizamos en
el mechero y luego de enfriar lo pasamos por el agar, justo en el sitio por
donde paso el cotonete, estriamos en tres direcciones alrededor de la
caja
Tapamos el agar y colocamos en la incubadora alrededor de 35- 37C y
dejamos por 24 a 48 horas en la misma
Una vez transcurrido el tiempo de incubacin se realiza la lectura de la
siembra y la interpretacin de la misma
b.Siembra en caldo de tioglicolato
Con el cotonete de algodn que se tom la muestra de esputo y se sembr en agar
sangre, introducir un poco de la misma en el caldo e incubar de 35 a 37C durante
48 horas.
Este medio se usa para determinar el efecto del oxgeno sobre el crecimiento
microbiano. Un tubo con medio semislido contiene tioglicolato para reducir el
potencial redox del medio. As slo hay oxgeno en la superficie y no en el resto del
tubo.
Si el microorganismo es aerobio estricto crecer en la parte de arriba del tubo, si es
anaerobio estricto no crecer en la parte ms alta del tubo y si es anaerobio
facultativo crecer por todo el medio.
c. Observacin de placas coloreadascon coloracin gram de muestra de esputo
Mirar al microscopio con el lente de gran aumento (100 x) y con aceite de
inmersin, las colonias de Stafilococcus, de Streptecoccus, de otras bacterias y otros
elementos patgenos presentes anotar el color y las formas que presentan.
2.2. Tcnica o procedimiento: Identificacin de cocos gram positivos
2.2.1. Catalasa
En una placa portaobjetos aadir 1 o 2 gotas de perxido de hidrgeno al 3%
(diluir la solucin al 30% con agua destilada), transferir clulas del centro de una
colonia bien aislada y mezclar. La rpida aparicin y produccin sostenida de
burbujas de gas o efervescencia indica una reaccin positiva.
2.2.2.Coagulasa
Prueba en tubos (coagulasa libre):
1.- colocar aspticamente 0.5 ml de plasma de conejo reconstituido en el fondo de
un tubo estril.
3.- mezclar por rotacin suave del tubo, evitando remover o agitar el contenido.
4.- colocar el tubo en la incubadora de 4 a 24 horas. Observar la formacin de un
coagulo visible.
La reaccin se considera positiva ante cualquier grado de coagulacin visible
dentro del tubo.
2.2.3. Prueba de la Bacitracina
9
Reactivos
Placas coloreadas por
mtodo de gram
Incubadora a temperatura Agar sangre
35-37 C
Mechero de Bunsen
Caldo de tioglicolato
Cajas petri
Muestras de esputo
Hisopos estriles
Perxido de hidrgeno
Microscopio
Plasma de conejo
Placas portaojetos
Discos de bacitracina
Tubos de ensayo
Palillos de dientes
PRCTICA No. 7
TEMA:
UROCULTIVOS (ver pg. 29 del manual de prcticas Lab.
Microbiologa del Dr. F. Prez y mirar atlas con el nmero de prctica
correspondiente colocado en la pgina ftp.puce.edu.ec)
1
c.
d.
e.
f.
g.
h.
i.
j.
k.
OBSERVACIN: Para el siguiente literal por favor revisar el atlas para segundo
nivel ubicado en el internet cuya pgina es ftp.puce.edu.ec
2.1.
Cilindros urinarios
Cristales
Grasa
Moco
13
Reactivos
14
Agar Mc conkey
Agar sangre
Muestras de orina
15
PRCTICA No. 8
TEMA: IDENTIFICACIN BIOQUMICA DE BACILOS GRAM NEGATIVOS
(mirar atlas con el nmero de prctica correspondiente colocado en la pgina
ftp.puce.edu.ec)
A. Disponer a la temperatura ambiente en gradilla una serie doble de tubos de
cultivo para reacciones bioqumicas.
B. Resembrar del medio de cultivo que contiene las colonias de bacilos
gramnegativos selecionadas como sospechosas a los medios para bioqumicas
En los medios inclinados sembrar por estrias
En los medios verticales sembrar por picadura
En los medios lquidos sembrar por emulsin
C. Etiquetar con los datos correspondientes. Llevar a la incubadora por 24 horas.
D. Retirar las series de tubos con las reacciones bioqumicas.
E. Interpretar las reacciones bioqumicas en cada uno de los tubos, de la siguiente
manera.
1. ENSAYO DEL ROJO DE METILO
I. Principio
El test se usa para determinar la presencia de iones hidrgeno cuando un
microorganismo fermenta glucosa. Todos los miembros de la familia
Enterobacteriaceae convierten glucosa en cido pirvico por el camino de EmbdenMeyerhof. Los organismos que metabolizan cido pirvico producen cido y bajan
el pH a menos de 4.4. Los organismos que utilizan, en cambio, el camino del
butilenglicol producen acetona y butanodiol (diacetilo). El indicador del medio,
rojo de metilo, es rojo a pH < 5.0 y amarillo a pH > 5.8. El test es til para la
diferenciacin de Escherichia coli (rojo metilo positivo) de Klebsiella (rojo metilo
negativo).
II. Procedimiento
A. Con un asa estril tomar material e inocular un tubo con caldo RM/VP.
B. Incubar a 35 C por un mnimo de 48 horas.
C. Transferir 2.5 ml de la suspensin a un tubo.
D. Agregar 5 gotas del indicador y observar si hay cambio de color.
III. Resultados
Ensayo positivo: el reactivo permanece rojo.
Ensayo negativo: el reactivo se torna amarillo-naranja.
Si el resultado es negativo continuar la incubacin de la bacteria por 24 horas ms.
2. ENSAYO DE VOGES-PROSKAUER
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I. Principio
El piruvato es un intermediario en el metabolismo de la glucosa. A partir del cido
pirvico un microorganismo puede seguir varios caminos. Algunos lo rompen para
formar como productos finales cidos lctico, actico o frmico. Otros metabolizan
el piruvato por el camino del butilenglicol para formar como productos finales
acetona (acetilmetilcarbinol) y 2,3-butanodiol (diacetilo). El ensayo de VogesProskauer (VP) detecta estos productos metablicos. En presencia de oxgeno e
KOH, la acetona se oxida a diacetilo, que da un complejo rojo. La sensibilidad del
ensayo se aumenta por el agregado de -naftol antes del agregado de KOH.
II. Procedimiento
A. Con un asa estril tomar material e inocular un tubo de caldo RM/VP
B. Incubar a 37C por un mnimo de 48 horas
C. Transferir 2.5 ml de la suspensin a otro tubo
D. Agregar 0.6 ml del reactivo de -naftol
E. Agregar 0.2 ml del reactivo de KOH
F. Agitar el tubo y dejar descansar 10 a 15 minutos
G. Observar la formacin de un color rosado a rojo
III. Resultados
Ensayo positivo: desarrollo de color rojo dentro de los 15 minutos
Ensayo negativo: no hay desarrollo de color
3. PRUEBA DE LA UREA
I. Principio
La urea es una diamida del cido carbnico, cuya hidrlisis por accin de la ureasa
da 2 molculas de amonaco. La ureasa es una enzima constitutiva que se sintetiza
independientemente de la presencia o no de la urea. La prueba determina la
capacidad de la bacteria de desdoblar la urea, con la consiguiente alcalinizacin del
medio. Es una actividad caracterstica de especies de Proteus y se usa para
diferenciar Klebsiella (+) de Escherichia (-) y Proteus (+ rpido) de Providencia
(-); Yersinia pseudotuberculosis (+) de Yersinia pestis (-)
II. Procedimiento
A) Con un asa estril se toma abundante material y se inocula por puncin
B) Se incuba a 37C y se efectan lecturas a las 2, 4, 6 y 18 horas. Los tubos
negativos se observan
diariamente por 4 a 7 das para detectar reacciones tardas que dan ciertos
miembros de la
familia, registrando los resultados da por da.
III. Resultados
Ensayo positivo: aparicin de color rojo en el medio por una alcalinizacin del
mismo.
Ensayo negativo: no hay cambio de color.
4.
I.
Principio del Indol
El indol es uno de los productos del metabolismo del aminocido triptofano. Con
un medio rico en triptofano, el indol se puede detectar por su habilidad para
combinarse con ciertos aldehidos para formar un compuesto coloreado. El ensayo
constituye un mtodo rpido para detectar organismos productores de indol. Como
indicador de la presencia del aldehdo se usa el reactivo de Erlich. Es especialmente
til en la identificacin preliminar de Escherichia coli, y para diferenciar
Edwardsiella (+)de Salmonella (-).
II. Procedimiento
1) Con un asa tomar material de una colonia aislada e inocular el caldo que
contiene triptofano.
2) Incubar a 37C por 18 a 24 horas.
3) Transferir 2 ml de la suspensin de caldo a un segundo tubo.
4) Agregar 5 gotas del reactivo de Erlich por la pared del tubo.
5) Agitar el tubo y observar un color rosado en la interfase entre el caldo y el
reactivo.
6) Si el ensayo es negativo, el cultivo se debe reincubar otras 24 horas.
III. Resultados
Ensayo positivo: desarrollo de un color rojo en la interfase del reactivo y el caldo,
segundos despus
de agregar el reactivo.
Ensayo negativo: no hay cambio de color o hay un color amarillo en la interfase.
5. AGAR KLIGLER
I.Principio
El agar de Kligler contiene dos azcares: lactosa (1%) y glucosa (0.1%).
Si el microorganismo fermenta glucosa, tanto la puncin como la estra aparecern
de color amarillo. Si el organismo fermenta lactosa y, la estra permanecer cida
(amarilla). Si no fermenta lactosa, la estra se vuelve alcalina (roja). Los organismos
que no fermentan glucosa no producen cambios en el pH del medio o producirn
productos alcalinos y el medio permanecer rojo. La produccin de SH2 se
manifiesta por un ennegrecimiento del medio.
II. Resultados
A. Estra cida/fondo cido (amarillo/amarillo): fermentacin de glucosa, lactosa
(E. coli)
B. Estra alcalina/fondo cido (rojo/amarillo): fermentacin de glucosa solamente
(Shigella spp.)
C. Estra alcalina/fondo alcalino (rojo/rojo): no fermentador (Pseudomonas
aeruginosa)
D. Precipitado negro en el fondo: produccin de SH2 (Salmonella spp)
E. Burbujas o roturas: produccin de gas (E. coli, Salmonella spp.)
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Principio
Es uno de los test del IMVIC (Indol, Rojo de metilo, Vogues-proskauer y Citrato)
usado para diferenciar enterobacterias. Hay microorganismos capaces de utilizar el
citrato como nica fuente de carbono produciendo alcalinidad, se detecta en un
medio de cultivo con citrato como nica fuente de carbono mediante el crecimiento
y la alcalinizacin del medio Este aumento de pH se visualiza con el indicador azul
de bromotimol que vira al alcalino a pH 7,6. Cuando el resultado es positivo el
medio de cultivo se vuelve azul y cuando es negativo se mantiene verde.
II.
Procedimiento
Se inocula el agar inclinado en una sola estra en el pico. Utilizar un cultivo de 24
horas en un medio slido y cuidando no arrastrar medio de cultivo, ya que se
pueden producir falsos positivos por crecimiento a partir del medio de cultivo del
inculo. Incubar a 35C durante 4 das. El ensayo es positivo cuando se observa
crecimiento a lo largo de la estra, acompaado o no de un viraje del indicador al
azul.
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III.
Resultados
(+)Klebsiella spp , ( - ) Escherichia Coli
8. FENILALANINA DESAMINASA
Las desaminasas catalizan la prdida de NH3 en un aminocido originando un cido
carboxlico. Las bacterias que desaminan la fenilalanina producen cido
fenilpirvico que con Fe3Cl en solucin cida produce un color verdoso ( resultado
positivo) y cuando es negativo es de color amarillo (reactivo es de color amarillo).
9. MALONATO
El fundamento es igual al citrato, para ver si se utiliza al malonato como fuente de
carbono.
PRCTICA No. 9
TEMA: HECES FECALES. EXAMEN COPROPARASITARIO
(ver pg. 33-41 del manual de prcticas Lab. Microbiologa del Dr. F. Prez y
mirar atlas con el nmero de prctica correspondiente colocado en la pgina
ftp.puce.edu.ec)
1. MARCO TERICO:
I.1. Parsitos
NEMATODOS: Gusanos redondos
Ascaris lumbricoides: Se observan huevos miden aprox. 45-75 x 30-50 mm,
presenta una clula rodeada por tres capas, producen una patologa de dolor de
estmago y desnutricin.
Tricocfalo: El huevo mide de 50-55 x 22-25 mm Tiene la forma de baln de ftbol
americano, produce anemia intensa, dolores abdominales, prolapso rectal ocasional.
Uncinarias: Tienen una forma elptica, estn cubiertas de una membrana lisa,
transparente y fina, mide de 60 - 40 x mm producen anemia.
Strongyloides stercolaris: Se observan larvas. Produce diarrea, vmito,
desnutricin.
Enterobius vermiculares (Oxyurus):Los huevos son ovoides con una cara convexa y
una plana, presenta una membrana interna y delicada y otra gruesa hialina y
mamelonada, mide de 50-60 x 20-30 mm. Produce prurito en la regin perianal,
insomnio, cambios de conducta.
CESTODOS: Gusanos planos
Taenia: Los huevos miden 20-30 x 30-40 mm, son ovoides con membrana gruesa,
amarillenta que se encuentra estriada en forma de empalizada y encierra un embrin
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21
22
I.2. Rotavirus:
Los rotavirus del grupo A constituyen la principal causa de gastroenteritis grave en
nios de todo el mundo. Producen unos 125 millones de infecciones cada ao en los
pases en desarrollo y son causa de 873.000 fallecimientos anuales .
Tres protenas estructurales de rotavirus tienen gran importancia para clasificar a
estos virus segn su antigenicidad. La protena VP6, que constituye la cpsida
interna del virin, es responsable de la existencia de siete serogrupos (A-G). Las
infecciones humanas son producidas principalmente por rotavirus del grupo A y, en
menor medida, o con otras caractersticas epidemiolgicas, por los grupos B y C. El
resto de grupos de rotavirus producen infecciones en los animales, aun cuando los
del A infectan tambin algunas especies animales, adems del hombre. Los
rotavirus humanos del grupo A se subdividen en dos subgrupos (I y II) en funcin
de la especificidad de la VP6.
PRCTICA No. 10
TEMA: HECES FECALES. Coprocultivo. Aislamiento de enterobacterias (ver
pg. 42-43 del manual de prcticas Lab. Microbiologa del Dr. F. Prez y mirar
atlas con el nmero de prctica correspondiente colocado en la pgina
ftp.puce.edu.ec)
AISLAMIENTO.
1. Sembrar una asada de materia fecal sospechosa en el tubo de caldo de
tetrationato. Inocular con asa por emulsin.
2. De la misma manera sembrar otra asada de la misma muestra en el tubo de
caldo nutritivo.
3. Etiquetar con los datos respectivos
4. Levar a la incubadora a 37C durante 24 horas. Colocar los tubos en gradilla, de
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tal manera que se mantengan en posicin vertical para evitar que el lquido se
derrame.
5. A las 24 horas retirar los tubos de la incubadora.
6. Disponer sobre la mesa el medio selectivo (agar entrico Hektoen) para
resembrar el cultivo del caldo de tetrationato.
7. Resembrar en cada placa el inculo correspondiente
8. Tapar las placas. Etiquetar con los datos correspondientes
9. Llevar las placas a la incubadora. Colocarlas en posicin invertida. Mantenerlas
durante 24 horas.
10. Al da siguiente:
11. Retirar las placas de la incubadora.
12. Efectuar anlisis macroscpico de cada una para valoracin de la prueba
presuntiva
13. Efectuar anlisis microscpico por el mtodo de Gram de cada una de las placas
para confirmacin de la morfologa de los bacilos entricos gramnegativos
PRCTICA No. 11
TEMA: INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL (ver pg. 48 del manual
de prcticas Lab. Microbiologa del Dr. F. Prez y mirar atlas con el nmero de
prctica correspondiente colocado en la pgina ftp.puce.edu.ec)
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PRCTICA No. 12
TEMA: MICOSIS (ver pg. 52 del manual de prcticas Lab. Microbiologa del Dr.
F. Prez y mirar atlas con el nmero de prctica correspondiente colocado en la
pgina ftp.puce.edu.ec)
PRCTICA No. 13
TEMA: TCNICAS BSICAS DE INMUNOLOGA (ver pg. 55 del manual de
prcticas Lab. Microbiologa del Dr. F. Prez y mirar atlas con el nmero de
prctica correspondiente colocado en la pgina ftp.puce.edu.ec)
Durante la prctica los estudiantes se realizarn voluntariamente pruebas de ASTO,
VIH, y VDRL para poder observar la reaccin Ag-Ac. Estas pruebas tienen los
siguientes fundamentos:
VIH:
La prueba VIH 1&2 es un inmunoensayo rpido de un solo uso basasdo en
inmunocromatografa. Emplea reactivos nicos para la deteccin rpida y segura de
anicuerpos a VIH1 y VIH2 en suero y plasma humano sin instrumental.
Las protenas recombinantes que representan las regiones inmunodominantes de las
protenas envoltura y gag de VIH-1 y VIH-2 son inmovilizadas en la regin de Prueba
de la tira de nitrocelulosa y un agente bioqumico que reconoce anticuerpos humanos es
dispersado en la regin de Control de la tira. Las protenas de VIH-1 y VIH-2, unidas a
oro coloidal, son impreganadas por debajo de la regin de Prueba del dispositivo. Una
banda estrecha de la membrana de nitrocelulosa es tambin sensibilizada como regin
de control.
Los complejos de anticuerpos de protena VIH-oro coloidal se desplazan por
cromatografa a lo largo de la membrana nitrocelulosa hacia las regiones de pruebas. Se
indica una reaccin positiva mediante la presencia de dos bandas de color (ver en la
prctica).
ASTO:
Es una prueba rpida por el mtodo de aglutinacin utilizando partculas de ltex para
la deteccin de anticuerpos anti-estreptolisina del grupo O (ASO) en suero humano.
Los anticuerpos ASO son encontrados en el suero del paciente en respuesta a una
infeccin con Streptococo hemoltico del grupo A, C o G (ver el mtodo de
aglutinacin en el atlas).
PRCTICA No. 14
TEMA: INVESTIGACIN DE HEMATOZOARIOS (ver pg. 57 del manual de
prcticas Lab. Microbiologa del Dr. F. Prez y mirar atlas con el nmero de
prctica correspondiente colocado en la pgina ftp.puce.edu.ec)
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