Laboratorio de Qumica Analtica II

Prctica 3. Determinacin espectrofotomtrica de tiocianato en

saliva humana

Objetivo: Aplicar el mtodo de curva de calibracin externa mediante

espectroscopa de UV-visible, para calcular la concentracin de tiocianato en
saliva.
Marco terico
Esta prctica se basa en el equilibrio entre el hierro(III) y el ion tiocianato SCN -,
para formar tiocianato frrico que es de color rojo-sangre.

Fe3+(ac) + SCN-(ac) FeSCN2+(ac)

El tiocianato frrico tiene un mximo de absorcin a max=447 nm, lo cual lo
hace medible por espectrofotometra de UV-visible.
En el cuerpo humano, el ion tiocianato es un producto de la desintoxicacin del
cianuro y el tiosulfato en el hgado. Dicho ion est presente en la saliva y, en
menor proporcin, en la sangre. Su concentracin depende de la dieta y del
consumo de cigarro. Las personas que no fuman tienen niveles de tiocianato en
saliva de 0.5 a 2 mM; mientras que los fumadores pueden alcanzar una
concentracin de tiocianato 6 mM. Por lo tanto, una alta concentracin de
tiocianato en la saliva es un indicador de la exposicin al humo de tabaco.
Existe otra posibilidad ya que el metabolismo de la vitamina B12 y los
alimentos que contienen cianuro o glucsidos cianognicos como las nueces,
almendras y duraznos tambin aumentan la cantidad de tiocianato en la
saliva.
Materiales y reactivos
Material
Micropipeta de 100 a 1000 L
Microesptula
Pipeta graduada de 10 mL
Vaso de precipitado de 250 mL
Matraz aforado de 50 mL
Escobetilla
Vidrio de reloj

Cloruro de cobalto(II)
Etilendiamina
HCl al 50%
NaOH al 50%

Gua Experimental

Cantidad
1
1
1
2
1
1
1

Material
Puntas para micropipeta
Agitador de vidrio
Piseta
Vaso de precipitado de 100 mL
Celdas de plstico
Pipeta Pasteur de plstico
Matraz aforado de 100 mL

Reactivos
Nitrato de nquel
Azul de timol
Agua destilada

Cantidad
3
1
1
2
6
2
1

1. Prepare 100 mL de una solucin 0.2 M de Fe(NO 3)3 en HNO3 1 M.

2. Prepare 50 mL de una solucin 2x10-4 M de KSCN en agua.
3. Para realizar una curva de calibracin, haga las siguientes diluciones con los
reactivos preparados anteriormente:
Tabla 1. Diluciones para la curva de calibracin

Tub
o
A
B
C
D
E
F

Volumen (mL)
Fe(NO3)3 0.2 M KSCN 2x10-4
5
0
5
1
5
2
5
3
5
4
5
5

Agua
5
4
3
2
1
0

4.
5.
6.
7.

Mida la absorbancia a 447 nm de cada una de las diluciones de la tabla 1.

Deposite una muestra de 5 mL de saliva en un tubo Falcon.
Centrifugue la muestra a 6000 rpm durante 5 minutos.
Tome 1 mL del sobrenadante y transfiralo a un matraz aforado de 50 mL.
Afore con la solucin de Fe(NO3)3 que prepar en el punto 1.
8. Mida la absorbancia de esta muestra a 447 nm usando Fe(NO 3)3 como blanco.
9. Calcule la concentracin de tiocianato en cada tubo de la tabla 1 y grafique la
absorbancia para cada uno.
10.Haga una regresin lineal, encuentre la ecuacin de la recta que mejor se
ajuste a sus datos y determine cul es el coeficiente de absortividad molar del
KSCN.
11.Calcule la concentracin de SCN en la muestra inicial de saliva.

Cuestionario
1. Por qu el tiocianato frrico es de color rojo intenso?
2. Cmo encontr el coeficiente de absortividad molar del SCN -?
3. Puede decir si la persona que proporcion la muestra es fumador? Cmo?

Referencias
Lahti, M., Vilpo, J., Hovinen, J. 1999. Spectrophotometric Determination of
Thiocyanate in Human Saliva. Journal of Chemical Education. 76:1281-1282.