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PROFESOR:
BLGO. ALVAREZ ALVAREZ,
Felix
CURSO:
TOXICOLOGIA
AO/SECCION:
3er - TA
INTEGRANTES:
ALMONACID SARA, Ral
VILA ARAUCO, ngel
PEREYRA BORDA, Mary
ZIGA BUSTILLOS, Juver
CONTENIDO
I. INTRODUCCIN................................................................................................ 1
II. OBJETIVOS....................................................................................................... 1
III. GENERALIDADES............................................................................................ 1
3.1. PEZ CEBRA................................................................................................ 1
3.1.1. Descripcin......................................................................................... 1
3.1.2. Dimencines....................................................................................... 1
3.1.3. Diferencias sexuales...........................................................................1
3.1.4. Comportamiento................................................................................. 1
3.1.5. Ambiente y cuidado............................................................................ 1
3.1.6. Alimentacin....................................................................................... 1
3.1.7. Reproduccin...................................................................................... 1
3.2. MICRONUCLEOS........................................................................................ 1
3.2.1. Descripcin......................................................................................... 1
3.2.2. Mtodo de medida de inestabilidad gentica: ensayo de
microncleos................................................................................................ 1
IV. MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS...................................................................1
4.1. MATERIALES.............................................................................................. 1
4.1.1. Lminas porta y cubreobjetos.............................................................1
4.1.2. Tijera................................................................................................... 1
4.1.3. Pipetas pasteur................................................................................... 1
4.1.4. Cmara para lminas portaobjetos.....................................................1
4.1.5. Peces cebra........................................................................................ 1
4.1.6. Microscopio......................................................................................... 1
4.1.7. Giemsa al 10%.................................................................................... 1
4.2. PROCEDIMIENTO....................................................................................... 1
V. RESULTADOS................................................................................................... 1
VI. DISCUSIN DE RESULTADOS..........................................................................1
VII. CONCLUSIONES............................................................................................. 1
VIII. BIBLIOGRAFA............................................................................................... 1
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I. INTRODUCCIN
Los peces pueden actuar como organismos centinela para inferir el nivel de
exposicin de poblaciones humanas a sustancias qumicas txicas presentes en
los ecosistemas acuticos. En este sentido, la realizacin de bioensayos para
determinar los efectos de sustancias contaminantes de origen antropognico o
industrial, empleando peces como bioindicadores, proporciona informacin
sobre los efectos de contaminantes qumicos en ambientes acuticos,
permitiendo un mejor monitoreo de las condiciones ambientales.
Los microncleos son fragmentos o cromosomas completos que quedan fuera
del ncleo durante la mitosis; mediante su estudio se pueden evaluar los
efectos de genotxicos ambientales y ocupacionales. Esta prueba es
ampliamente utilizada y es una alternativa eficaz, sencilla y econmica para
detectar la perdida de material gentico.
En el siguiente informe describir los procedimientos llevados a cabo en una
prueba de microncleos en los glbulos rojos del pez cebra, expuestos a etanol
al 99%, as como la interpretacin de los resultados encontrados.
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II. OBJETIVOS
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III. GENERALIDADES
III.1. PEZ CEBRA
Nombre cientfico: Danio Rerio
III.1.1. Descripcin
Pertenece a la familia ciprnidos. Distribucin geogrfica Pakistn,
regiones orientales de la India. Su hbitat natural ros de las montaas,
aguas estancadas, canales y campos de arroz. Forma del cuerpo
pequeo, esbelto muy comprimido lateralmente, tiene dos pares de
barbillones. Dorso de color entre verde oliva y pardusco, flancos de color
azul brillante con cuatro estras longitudinales de un esplndido color
dorado, el vientre es de color blanco amarillento. Estriaciones de color
azul dorado tambin en la aleta anal, la aleta dorsal es de color amarillo
en la base. El ris de color rojo dorado, el oprculo azulado con manchas
y estras doradas.
III.1.2. Dimencines
Tiene de 5 a 6 cm.
III.1.4. Comportamiento
Es un pez vivaz y pacfico. Se mantiene en cardmenes, por lo que es
recomendable mantener entre 6-10 individuos. Son grandes nadadores,
suelen permanecer en las capas medias y superiores del agua. La
mayor preocupacin, que pueden saltar, por lo tanto hay que cubrir con
una tapa de cristal. Forman parejas estables.
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III.1.6. Alimentacin
Especie omnvora, no muy voraz. Acepta todo tipo de alimentos sin
ningn problema en escamas o granulado. Antes de procrear es
recomendable suministrar un alimento vivo de pequeo tamao.
III.1.7. Reproduccin
A la madurez sexual Pez Cebra llega a los 3-6 meses, teniendo en
cuenta la esperanza de vida de estos peces de 3-5 aos. Pez Cebra son
capaces de reproducirse en cualquier poca del ao. Para empezar
durante unos das las hembras y los machos se colocan en grandes
acuarios (10 litros) con la temperatura del agua de 20 C, preparados
especialmente para el desove y se alimentan en abundancia con larvas
de mosquito rojo rico en nutrientes o daphnia vivo. Disposicin para
hembras en desove se determina por la forma del abdomen, durante la
maduracin de los huevos, se convierte en mucho ms gruesa, no slo
en la parte delantera, pero tambin en la parte de la aleta anal. Slo
para el desove debe elegir pequeos recipientes con fondo de cristal
transparente (por ejemplo, frascos de vidrio o acuarios 3-10 litros). La
arena en el fondo no es necesaria, para poder observar mejor el
desarrollo de los huevos. En la parte inferior del acuario se coloca
musgo, presionado cuidadosamente con piedras. El nivel del agua en el
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rea de desove debe ser de al menos 5-8 cm por encima del musgo. Es
mejor poner el acuario cerca de una ventana, donde llega bien la luz
natural. Productores (generalmente 2-3 machos y una hembra) se
colocan en el rea de desove a la tarde. La temperatura del agua no
debe ser demasiado baja. Durante la noche los peces se acostumbran, y
a la maana siguiente, cuando el desove est bien iluminada, y las
plantas comenzarn a producir activamente el oxgeno, para iniciar el
desove. Los peces estn empezando a moverse muy rpido. Los machos
persiguen a la hembra, tratando de pegarle en el abdomen, batiendo los
huevos y el esperma a la liberacin. Todo el proceso por lo general toma
alrededor de una hora. El nmero de huevos desovados de una hembra
depende del tamao y el grado de disposicin a desovar, y es de hasta
400 huevos. Despus deben trasplantar a los padres, ya que pueden
comer a los huevos. Los huevos generalmente maduran pasados los 3036 horas a 26-28 C, a temperaturas ms bajas, la maduracin puede
durar hasta 7 das. Los alevines unos das se aferran a las plantas o las
paredes del acuario, y luego poco a poco comienzan a nadar. En los
primeros das los alevines se alimentan con infusorias y luego a
medida que crecen, pueden trasladarse a otro acuario ms amplio. La
temperatura ptima del agua para el buen desarrollo de los jvenes
Peces Cebra es de 26 27 C, con abundante comida. En estas
condiciones los peces alcanzan la madurez sexual a los 2,5-3 meses.
III.2. MICRONUCLEOS
III.2.1. Descripcin
Los microncleos son cuerpos citoplasmticos de naturaleza nuclear, se
corresponden con material gentico no incorporado correctamente a las
clulas hijas durante la divisin celular, reflejan aberraciones
cromosmicas y se originan por roturas cromosmicas, por errores
durante la replicacin y posterior divisin celular del ADN y/o por la
exposicin a agentes genotxicas. Existen factores capaces de influir o
modificar el nmero de microncleos presentes en una clula (edad,
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IV.1.2. Tijera
Este material nos sirvi para decapitar al pez raya y as poder obtener su
sangre.
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IV.1.6. Microscopio
Observacin del estado del nucleo del pez cebra.
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IV.2. PROCEDIMIENTO
De los peces cebras que se tenan como muestra, se escogi uno para
que le corten la
cabeza y as poder obtener su sangre arterial.
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V. RESULTADOS
Como resultado, tenemos microncleos del tipo II, los cuales se caracterizan
por una deformacin del ncleo, ms no de una fragmentacin.
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VII. CONCLUSIONES
Al realizar el ensayo en peces cebra sometidos al etanol al 99% se pudo
observar que los glbulos rojos sufren daos considerables, puesto que al
observar al microscopio con un aumento de 400X se logra diferenciar glbulos
rojos con microncleos de diferentes tipos.
El ensayo de microncleos es una alternativa al test de aberraciones
cromosmicas convencional, en el que se analizan las alteraciones presentes
en metafases mitticas y permite detectar aberraciones cromosmicas que
responden a alteraciones de tipo estructural (efecto clastognico) o
alteraciones numricas (efecto aneugnico) del agente en estudio.
Adems, con el ensayo de microncleos se consigue:
a) Reducir la dificultad a la hora de realizar el recuento.
b) Mejorar la sensibilidad del ensayo, ya que los MN slo se cuentan en
clulas que han completado una divisin nuclear.
c) Incrementar la potencia estadstica de los estudios al analizar miles de
clulas en lugar de cientos de ellas.
d) Reducir el coste del ensayo.
El ensayo de microncleos es, por tanto, un ensayo prctico, universalmente
validado y accesible tecnolgicamente, til para evaluar la inestabilidad
gentica inducida por agentes genotxicos.
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VIII. BIBLIOGRAFA
Salas, H., Lobos, J., Dos Santos, J., De Ferncola, N. (2001). Seccin 1
Perspectiva. En Organizacin Panamericana de la Salud (Ed.), Manual de
evaluacin y manejo de sustancias txicas en aguas superficiales. Lima:
Centro Panamericano de Ingeniera Sanitaria y Ciencias del Ambiente.
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