El estrs materno induce firmas epigenticas de

enfermedades psiquitricas y neurolgicas en la descendencia.

Zucchi FC 1 ,Yao Y , Ward, ID , Ilnytskyy Y , Olson DM , Benzies K , Kovalchuk I , Kovalchuk
O , Metz GA .Datos del autor1 Departamento de Neurociencia de la Universidad de Lethbridge,
Lethbridge, Alberta, Canad.

Resumen
El estado de gestacin es un perodo de especial vulnerabilidad a las
enfermedades que afectan a la salud materna y fetal. El estrs durante la gestacin
puede representar una poderosa influencia sobre la salud mental materna y la
plasticidad cerebral y el desarrollo de la descendencia. Aqu nos muestran que el
transcriptoma del feto, a travs de la regulacin del microRNA (miRNA), responde al
estrs prenatal en asociacin con firmas epigenticos de enfermedades
psiquitricas y neurolgicas. Ratas Embarazadas fueron sometidas al estrs desde
el da 12 a 18 de gestacin, mientras que otros sirvieron como controles
manipulados. Estrs gestacional en la presa interrumpe la conducta maternal
parturienta y fue acompaado por los perfiles caractersticos miARN cerebro de la
madre y su descendencia, y los perfiles transcriptmicos cerebrales alterados en la
descendencia. En los cerebros descendencia, el estrs prenatal aumenta miR-103,
que est implicada en patologas cerebrales y reduce su potencial objetivo gen
Ptplb. El estrs prenatal reduce miR-145, un marcador de la esclerosis mltiple en
seres humanos. El estrs prenatal tambin aumenta miR-323 y miR-98, que puede
alterar las respuestas inflamatorias en el cerebro. Adems, el estrs prenatal
aumenta miR-219, que dirige al gen Dazap1. Tanto el miR-219 y Dazap1 son
marcadores putativos de la esquizofrenia y el trastorno afectivo bipolar en los seres
humanos. Cambios transcriptmicos en la descendencia incluyen genes
relacionados con el desarrollo, la gua axonal y neuropatologa. Estos hallazgos
indican que el estrs prenatal modifica firmas epigenticos relacionados con la
enfermedad durante los perodos crticos del desarrollo cerebral del feto. Estas
observaciones proporcionan una nueva asociacin mecnica entre los factores de
riesgo ambientales y genticos en la enfermedad psiquitrica y neurolgica.
El estado de gestacin es un perodo de especial vulnerabilidad para la madre y
su descendencia. La experiencia de la angustia durante embarazo puede
determinar crticamente la salud materna y alterar la fisiologa del cerebro y el
comportamiento en la descendencia con consecuencias para toda la vida [1,2]. El
estrs gestacional interrumpe los cuidados maternos posparto, lo que impide el
desarrollo del cerebro y de comportamiento de la descendencia [3,4]. Se propuso

que los efectos de la atencin materna se transmiten posiblemente a travs de las

generaciones a travs de los mecanismos no-genmicos [3]. Estos mecanismos de
transferencia incluyen la alteracin endocrina del medio gestacional, la conducta
maternal y la programacin transgeneracional epigentica [5-9]. Por otra parte, el
estrs gestacional influye directamente en el desarrollo del cerebro del feto y la
programacin y funcin del eje hipotalmico-pituitario-adrenal (HPA) [10,11] para
inducir cambios de larga duracin en la capacidad de respuesta de estrs [12] y,
posiblemente, mayor vulnerabilidad a los trastornos psiquitricos, como la
depresin y el trastorno afectivo bipolar [13-16] y la esquizofrenia [17-20]. La
corteza prefrontal, en particular, es relevante en la salud mental y en los trastornos
de la salud, que se pueden precipitar o exagerar porel estrs en el embarazo y el
parto [21-23].
Cambios conductuales y fisiolgicos en las madres estresadas y su descendencia
pueden estar vinculados a la expresin gnica alterada en el cerebro, que es
regulada epigenticamente por la experiencia. Los cambios epigenticos,
incluyendo la expresin de microARN (miARN) permiten ajustes rpidos en la
expresin de genes sin alterar secuencias del nucletido. Alterada la expresin de
miRNA se sugiri para cebar procesos de neuroplasticidad y fisiolgicos en
respuesta a temprana medio ambiente [8,24] y la experiencia de estrs [7,25].
miRNA puede ser un componente crtico para mediar los efectos del estrs prenatal
y la atencin materna en el desarrollo de la descendencia [26,27]. En particular, los
genes miARN expresin se alteran en muchos y comunes trastornos psiquitricos y
neurolgicos, como el trastorno bipolar, esquizofrenia, el autismo, la depresin y las
enfermedades inflamatorias [28-33]. La mayora de estas condiciones comparten
una sospecha de etiologa que incluye tanto la influencia de los orgenes perinatales
adversos, as como una componente transcriptmico, lo que sugiere que la
regulacin epigentica de la expresin de genes puede representar una
caracterstica comn central en etiologa de la enfermedad individuo [34].
Aqu proporcionamos un vnculo entre la experiencia gestacional adversa y la
reprogramacin epigentica del transcriptoma mediante miRNA en los cerebros de
las presas grvidas y sus cras. El estrs materno altera la conducta materna antes
del parto y los patrones miARN cerebrales de expresin en la corteza frontal, una
regin implicada en el cuidado de la madre, toma de decisiones y las respuestas de
estrs. Estos cambios traducidos al descendiente alteran firmas miARN relacionados
a la enfermedad. Nuestras observaciones permiten proponer un mecanismo por el
que la experiencia gestacional modula la expresin de genes con consecuencias
fenotpicas posiblemente de larga vida en la descendencia.

Materiales y METODOS
1.

Diseo Experimental
Las ratas hembra destacaron durante el final de la gestacin y su no estresados
contrapartes embarazadas [Estrs (n = 9) vs. no estrs (n = 6) Grupos] fueron
analizados en cuanto a su comportamiento antes del parto. Tres represas
adicionales por grupos de estrs y la No-estrs fueron sacrificados el da del parto
(de 1 a 5 horas despus del parto) y la corteza frontal se diseccion para el para el
anlisis de la microRNAome (miRNAome). Un cachorro macho de cada uno de estas
seis presas se utiliz para anlisis de la expresin de los genes miARN(n = 3 para
cada estrs prenatal y grupos no estrs). Este estudio se centr en la corteza frontal
de las presas, debido a la su correlacin con rasgos cognitivos y relacionados con el
estrs, y todo cerebro de cras recin nacido de sexo masculino. Para investigar los
efectos epigenticos del estrs materno en la descendencia, los cerebros de
hombres el perodo prenatal estresado (grupo prenatal estresado) y no estresados
( grupo prenatal no estresado) ratas recin nacidas se recogieron para el anlisis de
miRNAome y transcriptoma.

2.

Los animales
Veintin cronometrada embarazadas nulparas femenina largo Evans ratas,
criados y criadas en el vivero local se utilizaron. Las hembras se combina con un
hombre durante una hora por da hasta el apareamiento ocurri. El embarazo de las
ratas fue confirmada por el aumento de peso Once das ms tarde. Ratas
embarazadas fueron alojados individualmente desde da 19 de gestacin hasta el
parto y grabada por un vdeo de infrarrojos sistema de vigilancia (CCTV Cmaras,
Panasonic, EE.UU.).

3.

Declaracin de tica
Todos los procedimientos se realizaron de acuerdo con el directrices del Consejo
Canadiense de Cuidado de Animales y aprobado por la Universidad de Lethbridge
Bienestar Animal Comit (# 0803 ) .

4.

Procedimientos Estrs
Gestacional . Ratas temporizado embarazadas se destacaron dos veces al da
desde el da 12 de gestacin a da 18. Dos factores estresantes , la moderacin de
la cuerpo durante 20 minutos [ 35-37 ] y la natacin forzada en agua a la habitacin

temperatura durante 5 min [ 38-39 ] se aplicaron diariamente. Restriccin ocurrido

en la maana y de natacin forzada en la tarde horas .
5.

Anlisis de preparto materna Comportamiento

Conducta materna se anot en las presas grvidas 19-18 horas antes de la
entrega de la primera cra. Tail persiguiendo comportamiento las presas se puntu
como un indicador de la preparatoria materna la actividad y la atencin [ 40,9 ] . La
cantidad de tiempo dedicado dedica a persiguiendo (segundo) y la manipulacin de
la cola y el nmero total de rotaciones se midieron como se describe anteriormente
[9].

6.

coleccin Tejido Cerebro.

Entre 1 y 5 horas despus del parto, las presas y su descendencia recibi una
dosis letal de pentobarbital( Euthansol 100 mg / kg; CDMV Inc. , Que'bec , Canad).
Las ratas fueron rpidamente corteza decapitada y frontal de las madres y los
cerebros enteros de los recin nacidos fueron disecados y flash-congelados de
ARNm y miARN anlisis.

7.

miARNARNm y Anlisis de Expresin

7.1. La extraccin de RNA. ARN total fue extrado de las presas y los cerebros de
ratas recin nacidas utilizando la solucin de reactivo TRI reactivo TRI (Aplicada
Biosystems, Foster City, CA) de acuerdo con el fabricante de protocolo.
Las muestras de las presas El estrs y de Prenatal subrayan ratas recin nacidas
se compararon con los controles no estresado (presas y los recin nacidos del grupo
No-estrs) para la investigacin de los efectos de la gestacin estrs en las presas,
y el estrs prenatal en los recin nacidos en el cerebro miRNAome y transcriptoma.
7.2. microarraysmiARN. Se analiz la expresin de miRNA utilizando la tecnologa
de microarray realizado por Ciencias LC (Houston, TX) como se describe
anteriormente [41,42]. Los datos fueron analizados por primero restando el fondo y
entonces la normalizacin de las seales utilizando un filtro LOWESS (localmente
ponderado de regresin) [43]. Los objetivos de genes putativos para miRNAs
expresadas diferencialmente por el estrs Se hicieron bsquedas en el tratamiento
mediante anlisis computacional (TargetScan, Instituto Whitehead para la
Investigacin Biomdica, MIT, Cambridge, MA), que proporciona una lista de
objetivos de genes predichos y relacionados procesos biolgicos.

7.3. Cuantitativo en tiempo real PCR (QRT-PCR). A fin de que validar miRNAs
moduladas por el estrs gestacional en las presas, y estrs prenatal en los recin
nacidos determinado por microarrays, que realizado QRT-PCR anlisis de ocho
regulados diferencialmente miRNAs [44]. Las mismas muestras utilizadas para el
anlisis de microarrays tambin se utilizaron para la validacin de QRT-PCR (n = 3
por grupo, tres repeticiones por muestra). Se analizaron las siguientes miRNAs (59 a
39): MIRR-181 y miR-186 (presas); miR-103, miR-151, miR-323, miR-145, miR-425,
miR-98 (recin nacidos). Se utiliz U6 snRNA como un control de referencia para el
clculo de la relacin de expresin. Los Se llev a cabo la generacin de ADNc a
partir de las muestras de ARN total utilizando M-MuLV la transcriptasa reversa, NEB
# M0253S (Nuevo Inglaterra Biolab, Ipswich, MA; vase la Tabla 1 para cebadores
RT). QRTPCR reacciones se llevaron a cabo con Bio-Rad CFX96TMRealTime PCR
Systems, utilizando SsoFast TM EvaGreenHSupermix (BioRad, Mississauga, ON) de
premezcla de reaccin aadido a los ADNc plantillas y cebadores especficos, de
acuerdo con el fabricante de protocolo (vase la Tabla 1 para la referencia
imprimacin). Un volumen total de 12 ml se utiliz, con 2,5 ml de cDNA plantilla,
400 nM cebador directo, 400 Nm cebador inverso, y 6 ml de SsoFast TM
EvaGreenHSupermix (Bio-Rad, Mississauga, ON). Diluciones ptimas y Las
temperaturas fueron adaptados para cada reaccin miARN QRT-PCR.
7.4. El anlisis de microarrays de expresin gnica. El estrs prenatal efectos
sobre la expresin gnica global fueron evaluados por microarray la tecnologa.
Tambin se utilizaron muestras utilizadas para los anlisis miRNAome para la
investigacin transcriptoma (n = 3 por grupo). ARN total fue purific usando el RNA
total RNeasy limpiar protocolo (Qiagen, Manchester, Reino Unido). RNA de muestras
se sometieron a pruebas de Bioanalyzer Eucariota Total RNA Nano Chip (Agilent,
Mississauga, ON). Los microarray protocolo utilizado aqu permite el anlisis
simultneo de perfiles globales de expresin de ARNm. Anlisis de microarrays
(sonda sntesis, hibridacin, y escaneado) se realiz con un protocolo estndar
Illumina plataforma [45].

8. Los anlisis estadsticos

Los anlisis estadsticos de comportamiento maternal se realizaron conStatview
versin de software 5.0 (SAS Institute, 1998). Comportamientodatos fueron
normalizados por transformacin de raz cuadrada para ajustarse a unCurva de
histograma de la distribucin gaussiana normal. Anlisis dede la varianza (ANOVA) y
Student t-tests fueron utilizados paracomparaciones entre grupos. Un valor de p
menor de 0,05 fue elegido como nivel de significacin. Todos los datos se presentan
como media 6error estndar de la media (SEM). El anlisis estadstico de miARNy
mRNAmicroarrays de datos se realiz mediante la prueba t entregrupos. Se
calcularon los T- valores para cada miARN o ARNm , conp-valores por debajo de un
p- valor crtico ( 0.01 ) seleccionada para el anlisis de conglomerados.Los anlisis
de agrupacin utiliza un mtodo jerrquico y mediavinculacin y la distancia
euclidiana mtricas [46]. La relativa miARNniveles se cuantificaron mediante el
Administrador de Bio Rad CFX en elvalidacin de QRT -PCR.

Resultados
El estrs gestacional Interrumpe preparto maternaComportamiento junto con los
perfiles de miARNPreparto cola materna comportamiento persiguiendo fue anotado
frameby marco de las cintas de vdeo jaula de sitio. Durante la observacin periodo,
presas Estrs pasaron significativamente menos tiempo que no el estrspresas
dedicadas a la cola persiguiendo comportamientos, como horizontalrotaciones (F

(1,13) = 5.35 , p, 0,05 ; Figura 1 ) . Adems, el estrs gestacional redujo el nmero

de rotaciones, aunque en un grado no significativo (F (1,13) = 4.43, p = 0.055).

Figura 1. Estrs gestacional interrumpe materna antes del parto behaviour. Time dedicado
involucrado en comportamientos persiguiendo la cola y la nmero de rotaciones realizadas en 19-18
horas antes de la entrega (todos los datos transformados a raz cuadrada). Estrs gestacional se
redujo el tiempo gastado en las actividades de la cola de persecucin y el nmero de rotaciones, lo
que indica reduccin de la actividad preparatoria materna (n = 6 controles no estrs, n = 9 estrs
gestacional). * p # 0,05, mean6SEM. doi: 10.1371 / journal.pone.0056967.g001

Alteraciones conductuales preparto inducida por el estrs se acompaa de

expresin alterada miRNA en la corteza frontal de las presas Desde miRNAs en
animales inhiben principalmente traduccin de metaARNm , disminuye los niveles
de miRNA debera dar lugar a una mayortraduccin de ARNm , mientras que los
aumentos en los niveles de miRNA resultadoinhibicin de la traduccin (Figura 2A) .
Un total de 342 miRNAs fueronexpresado diferencialmente en respuesta al estrs
gestacional ( Stressvs.Nonstressgroups ) . En total, 195 miRNAs se downregulated y
147miRNAs se upregulated . Estrs gestacional downregulatedabundancia de miR329 ,miR- 380 , miR- 20a y miR- 500 (todop # 0,05 ; Figura 2B- C). El estrs tambin
dio lugar a disminuciones importantes en let - 7c ,miR- 23b , miR- 181 , y las
cantidades miR186 . A la inversa , el estrsupregulatedmiR- 24-1 . Los objetivos de
genes putativos de estos miRNAsestaban relacionados con neuropatologas ,
neurotransmisin , hormonalesregulacin , factores neurotrficos , respuesta al
estrs , el estrs oxidativo ymetabolismo (Figura 2C ) . miR- 181 y miR -186 fueron
elegidos paraverificacin mediante QRT-PCR anlisis . Regulacin a la baja de
ambosmiRNAs por el estrs gestacional se confirm (Figura 2D) .

Figura 2. Estrs gestacional induce diferencial miARN expresin en la corteza frontal. Un, vista
general esquemtica de miARN biognesis pathways.B, mapa de calor representacin de miRNAs
diferencialmente regulados, segn lo observado por microarraysanalysis.C, Mesa de genes diana
para miRNAs modulada por el estrs gestacional (miR-329, miR-380, miR-20a y miR-500; p # 0,05),
y su implications.D fisiolgica, grupo relacin Expresin promedios de miRNAs como observados por
QRT-PCR anlisis (p # 0,05). Tenga en cuenta que el estrs prenatal downregulated miR-181 y miR186 expresin en el corteza frontal. Anlisis miARN se realizaron en represas que mostr
caractersticas de comportamiento representativos (n = 3 por grupo, tres repeticiones por de la
muestra). Todos los datos se presentan como mean6SEM. doi: 10.1371 / journal.pone.0056967.g002

El estrs prenatal Modula cerebro miRNAome yTranscriptoma en ratas recin

nacidasAnlisis de la miRNAome cerebro del recin nacido (Prenatal stressVs.No el
estrs grupos Figura 3) muestra un total de 336 miRNAsexpresado diferencialmente
en respuesta al estrs prenatal, incluyendo131 miRNAs cuya abundancia fue
downregulated
y
205miRNAs
que
se
upregulated.
Los
miRNAs
diferencialmenteregulado por el estrs prenatal incluye miR-23a (arriba), el miR129-2(Arriba), el miR-361 (hacia abajo), let-7f (arriba), el miR-17-5p (abajo), el miR98 (arriba),miR-425 (hacia abajo), el miR-345-5p (abajo), el miR-9 (arriba), miR2165p(Arriba), el miR-667 (arriba), y miR-505 (hacia abajo) (Figura 3). Por otra parte,No
se encontraron cambios significativos en la expresin debido a estrs prenatalen el
miR-103 (hacia abajo), el miR-151 (hacia abajo), y miR-219-2-3p (arriba).
Losobjetivos de genes putativos de estos miRNAs incluye genes relacionados
conbiognesis miARN, la apoptosis, patologas del cerebro, la neurotransmisin, el
neurodesarrollo, la regulacin hormonal, neurotrficofactores, la angiognesis
cerebral, sealizacin celular, respuesta al estrs, ymetabolismo (Figura 3B).

Figura 3. Estrs prenatal modula el cerebro miRNAome en los hijos recin nacidos de sexo
masculino. A, mapa de calor representacin de diferencialmente regulada miARN segn lo
observado por microarraysanalyses.B, Mesa de genes diana putativos para miRNAs moduladas (miR103, miR-151, miR-y 219-2-3p; p # 0,05) y su functions.C fisiolgica, los promedios de grupo
cociente expresin de miRNAs como observados por QRT-PCR anlisis (p # 0,05). Cerebros enteros
de los recin nacidos nacidos de vacas muestran en las Figuras 1 y 2 (n = 3 por grupo, tres
repeticiones por muestra; 1 cra por presa) se utilizaron. Todos los datos se presentan como
mean6SEM. doi: 10.1371 / journal.pone.0056967.g003

A
partir
de
los
miRNAs
regulados
por
estrs
prenatal
(grupos
StressVs.Nonstress ), segn lo observado por anlisis de microarrays , el
siguientelos candidatos fueron seleccionados para su verificacin por QRT-PCR
anlisis :miR- 151 , miR- 145 , miR- 425 (todo hacia abajo) y miR - 103 , miR- 323
,miR- 98 (arriba) (Figura 3C ) .
Anlisis global de la expresin gnica revel que 39 genes estabandownregulated
por el estrs prenatal en los cerebros de ratas recin nacidas (ms de 2 veces el
cambio ; Abhd14a , Argbp2 , CD47 , RGD1559704 ,LOC310926 , Klf10 , Nsmce2 ,
RGD1309216 , Gramd1b , Itpr1 , Tst , animales Pfkm ,Vps11 , Echs1 , Zswim5 ,
RGD1309388 , Tmem176b, CIB1 , Sfxn5 , CLN8 , Gucy1b3, Flii, Txnl4b, LDHA,
RGD1561179, Zfp216, Ptplb, Galntl4,Pdia5, HERC1, RGD1305557, RGD1303003,
RGD1305514, Aph1a,Visa, Clpb, RGD1563963, Snx1, GSTM1) y 47 genes se
upregulated(Ms
de
2
veces
el
cambio;
P4HB,
RGD1560212,
RGD735065,LOC498346, Rps3a, LOC497732, Wbp11, Taf9b, RGD1560975,LPAR1,
Rnf7, LOC500829, CHP, LOC300760, Pgrmc1, LOC500398,LOC688712, Cd2bp2,
RGD1561219, RGD1565840, RGD1560186,LOC497745, LOC497720, LOC500344,
Mcts1, RGD1564956,LOC498644, Rala, Sfrs6, Mrlcb, Ptn, Sfrs5, HDAC2,
LOC500533,LOC501553, Dazap1, Fem1b, RGD1563431, Cct4, Rbbp7,RGD1308165,
ACSL4, Ppp1r14b, LOC498449, Usmg5, RGD1560729).
Los procesos biolgicos afectados por estos genes incluyen la metilacin del ADN,
el neurodesarrollo, la neurotransmisin, la respuesta inmune,factor de crecimiento,
la diferenciacin celular, la diferenciacin neuronal, axnorientacin, la apoptosis, la

vigilancia del ARNm, la traduccin, especfica del cerebromembraneprotein,

proteinprocessing, respuesta al estrs, el desarrollo,ciclo celular, la desintoxicacin,
la neuropatologa, mantenimiento estructural,la transcripcin, la sealizacin
celular y el metabolismo (Figura 4A).

Figura 4. estrs prenatal altera el transcriptoma del cerebro en los hijos recin nacidos de sexo
masculino. A, La expresin gnica diferencial global en los cerebros de prenatalmente subrayado
objetivos rats.PtplbandDazap1are nacidos de miR-103 y miR-219, respectively.B, agrupacin de
anlisis de la expresin gnica mostraron grupos de animales estresados y no el estrs, a excepcin
de una animal.C no estresado, estrs prenatal elevada expresin de miR-103, que coincide
regulacin a la baja de su potencial targetPtplb (media 6SEM). Cerebros completos de los recin
nacidos nacidos de vacas que se muestran en las Figuras 1 y 2 eran analizadas (n = 3 por grupo,
tres repeticiones por muestra; 1 cra por DAM). doi: 10.1371 / journal.pone.0056967.g004

Clusteringanlisis de la expresin gnica revel grupos de animales

fromPrenatalstressandNon-stressgroups, a excepcin de un animal de THENON-

estrsgrupo (Figura 4B).Entre los genes modulados por el estrs prenatal con
funcin enprocesos metablicos, los genePtplbwasdownregulated.Ptplbis unobjetivo
putativo de miR-103, que se upregulated de prenatalestrs (Figura 4C). Adems,
Dazap1was upregulated porprenatal stress.Dazap1is un gen relacionado con la
vigilancia de mRNA, es decir,regulacin de la expresin de genes, que es un
objetivo putativo para miR-219.

Discusin
Los orgenes de la salud y la enfermedad se han convertido en untema de inters
actual . Aunque es ampliamente aceptado que la perodo perinatal representa una
etapa de especial vulnerabilidad parael cerebro en desarrollo, los mecanismos
causales y largo plazoconsecuencias de la programacin perinatal son poco
conocidos.
Aqu nos muestran que la regulacin epigentica travs miARNrepresenta un
paso crtico en la expresin gnica inducida por el estrs y esacompaado por los
rasgos de comportamiento caractersticos y maternasanlogos de la firma
psiquitrica y neurolgica humanaenfermedad.El cerebro en desarrollo es
particularmente vulnerable a la adversacondiciones intrauterinos y responde a
medio endocrino alteradocon la reprogramacin del hipotlamo-pituitarioadrenal(HPA) y conductuales y fisiolgicos asociados respuestas[47,48]. Estos
cambios endocrinos pueden tener importantes implicaciones para la vulnerabilidad
a los trastornos mentales. El estrs deda gestacional de 12 a 18 en ratas
corresponde a la segundatrimestre del embarazo en los seres humanos, que se
piensa que es el msperodo sensible para influir en la morfologa de la
descendencia cerebro [49] ydeterminar la salud mental en la edad adulta [50,51].
Nuestros hallazgos indicanque el estrs materno puede afectar perodos crticos del
desarrollo neurolgico del feto a travs de la regulacin dinmica de miRNA, tanto
en elmadre y su descendencia.
El estrs gestacional Interrumpe preparto maternaComportamiento Junto con
epigentica Re-programacinComportamiento maternal preparto, como persecucin
de la cola ycomportamientos de rotacin, pueden ser el reflejo de las actividades
preparatorias.Los preparativos incluyen la construccin del nido, que aumentan
durantela ltimas 24 horas anteriores al parto [52]. Desde aproximadamente la
misma horaPor supuesto se encontr para el comportamiento persecucin de la
cola [9], el presentehallazgos sugieren que las actividades preparatorias son
sensibles a la maternaestrs. La falta de actividad observado en presas estresados
puede reflejar unafalta de motivacin, un componente central de la depresin-

comocomportamiento vinculado a las experiencias estresantes [53,54]. Si antes del

partoactividades son algo predictivo de la atencin materna postparto[55,26,3],
incluso un cambio de comportamiento moderado de la madrecomportamiento
puede potencialmente tener consecuencias significativas paradesarrollo de las
cras.
Hallazgos conductuales en presas estresadas fueron acompaados poralterado
los perfiles epigenticos en la corteza frontal, incluyendoregulacin a la baja de
miR-181b. La familia miR-181 es particularmenteenriquecido en el cerebro y est
implicado en los trastornos del espectro autista[56], la esquizofrenia [57], la
enfermedad de Alzheimer [58], en el que sonencontrado principalmente para ser
upregulated. Downregulation de miR-181contribuye a la demencia asociada al VIH
acelerado en opiceosabusadores [59]. A nivel celular, el miR-181 regula la
apoptosisfactores tales como bcl-2 en astrocitos. Downregulation de miR-181fue
demostrado tener efectos protectores contra la apoptosis ydisfuncin mitocondrial
[60]. Estrs gestacional tambin downregulated miR-186 en la corteza frontal
materna, que est en contrastea la regulacin al alza encontrado en la corteza
frontal, el hipocampo, ycerebelo en ratas macho [25]. Los presentes hallazgos no
permitendibujo de una relacin causal entre el fenotipo conductualy cambios
epigenticos, sin embargo, alteran la expresin de miRNA enla corteza frontal
materna puede tener relevancia para pregnancyrelated cambios mentales y
emocionales en las madres estresadas.
El estrs prenatal altera miARN firmas en la descendenciaEl estrs prenatal
modifica la expresin de genes que son fundamentales parael desarrollo del cerebro
y la plasticidad, incluyendo la apoptosis, la neurotransmisin, factores neurotrficos,
y la sealizacin celular. Uno en particularhallazgo interesante es la regulacin al
alza de miR-103 y regulacin a la baja de sus destinatarios gen putativo cerebros
Ptplbin. miR-103 esenriquece en la corteza [61] y su expresin aumenta
duranteneurodesarrollo, en particular la diferenciacin celular [62,63] y traduccin
[64]. En el cerebro maduro, sin embargo, la regulacin positiva demiR-103 puede
suprimir la sntesis de BDNF en los seres humanos [65] ypromover procesos
neuropatolgicos en un modelo de ratn deEnfermedad de Alzheimer [66]. En
consecuencia, la adversidad perinatal puedeaumentar el riesgo de deterioro
cognitivo [67,68] y elevar elvulnerabilidad de las neuronas colinrgicas [69]. Altered
miR-103expresin en el cerebro en desarrollo, por tanto, puede contribuir acambios
cognitivos en la edad adulta. El objetivo gen putativo de miR-103, Ptplb, es esencial
para la biosntesis de tirosina fosfatasa-comomiembro de b, que est implicado en
una amplia gama de neuronalfunciones, incluyendo la formacin de sinapsis [70],
trastornos que implicanla corteza frontal como la enfermedad de Alzheimer [71,72]

yesquizofrenia [73]. mediada por miR-103 ofPtplbtranslation inhibicin puede

contribuir a alteraciones en la conducta y neuronalplasticidad en prenatalmente
subray descendencia.
Otro do, miR-219 y su gen putativo targetDazap1wereupregulated por el estrs
prenatal en los recin nacidos, lo que sugiere paralelointerferencia regulador en la
expresin gnica. Cabe destacar que el miR-219 puedeestar implicados en la
patologa de la esquizofrenia y bipolartrastornos afectivos [30], los cuales estn
estrechamente vinculados aestrs prenatal [20,18] y alterado la actividad del eje
HPA [74,14,16].miR-219 modula la plasticidad sinptica excitatoria a travs de
Nmethyl-D-aspartato (NMDA), los receptores de glutamato [28,75]. La alteracin en
la funcin del receptor NMDA mediante la regulacin de miR-219resultados en el
comportamiento hyperlocomotor aberrante en ratones [28]. Por lo tanto,estrs a
travs de la regulacin de miR-219 podra interferir con la plasticidad neuronal del
desarrollo y comportamiento.
Otros cambios en los perfiles de miARN incluidos miR-323, quemodula las
interacciones husped-patgeno, como los que participan enVIH-1 [76] y la
Influenza A H1N1 [31]. miR-323 se une a laGen del virus PB1 y puede ayudar en la
defensa contra los virusreplicacin [31] y por lo tanto tienen funciones de
proteccin contra la vulnerabilidad stressinduced a patgenos [77,78]. Por el
contrario, recienteevidencia apunta hacia el miR-323 como un regulador positivo de
Wnt /cadherina sealizacin para regular al alza los mecanismos proinflamatoriosy
potenciar la migracin celular, proliferacin y adhesin en elpatognesis de la
artritis reumatoide [79,80]. Por otra parte,estrs prenatal tambin upregulated miR98 expresin, quemodula la respuesta inmune a travs de vas de citoquinas [81],y
fue demostrado que regular a la baja la produccin de la citoquina proinflamatoria
IL-10 en los macrfagos [82]. Tanto el miR-323y miR-98 regulacin al alza en los
cerebros de prenatalmente destac la descendenciapuede indicar un estado
proinflamatorio alterada en el cerebro. Por el contrario, en general se supone que el
estrs prenatal aumenta elvulnerabilidad a los trastornos del sistema inmune [83],
que tambin pueden aplicarse ael cerebro [84]. Sin embargo, en lnea con efectos
potencialmente protectoresde miR-323 sobrerregulacin, estudios en ratones han
descubierto tambin queestrs materno puede mejorar la inmunidad anti-viral, por
ejemplo, porpromover la proteccin contra el virus del herpes simple [85,86].
Esposible que estos miARN cambios parcialmente mediar una defensivarespuesta
frente a las infecciones agudas en los recin nacidos.
Tambin se sugirieron respuestas alteradas a los retos inmunes durante el
desarrollo temprano de la patognesis de la esclerosis mltiple(MS) [29]. Mientras

que el miR-145 tiene un papel regulador en la embrionariala diferenciacin neuronal

en ratas [87], tambin es diferencialmenteexpresado en pacientes humanos
afectados-MS, proporcionando as unapotencial marcador epigentico de esta
condicin [29]. El actualhallazgos muestran que el estrs prenatal downregulates
cerebro miR-145, comooposicin a su regulacin al alza en las clulas de la sangre
humana en MS [29]. Desdela herencia representa un factor de riesgo propuesto
para MS [88], a principiosexperiencias adversas pueden traducir influencias
ambientales enfirmas epigenticos afectan a la plasticidad neuronal y
lapredisposicin a la enfermedad neurolgica en la edad adulta [89,90].
A pesar de la reprogramacin epigentica continua a lo largo de uncurso de la
vida [91-93], huellas epigenticos primeros pueden persistir hasta la tardevida [9496]. Por ejemplo, la modificacin epigentica en las clulas somticaspuede
perpetuar durante toda la vida por mitosis estable [5,96]. Loscorteza frontal, en
particular, puede ser relativamente resistente a la epigenticareprogramacin por
influencias ambientales vida til en comparacina otras reas del cerebro, como se
indica por la corteza del desarrollo humanomapas [97]. Por lo tanto, la
programacin perinatal por patrones persistentes enregulacin miARN puede
contribuir a psiquitrica y neurolgicacondiciones en la vida posterior.
Integracin Materno Fetal fisiolgica yCaractersticas epigenmicosLos efectos del
estrs prenatal han sido bien caracterizados conrespecto a los perodos crticos en
el desarrollo temprano [98,99,90]. Losnaturaleza y duracin del estrs materno
probable determinan larespuestas fisiolgicas y epigenmicos en la descendencia,
sin embargo,el tiempo de gestacin del factor estresante puede representar un
particularinfluencia crucial en el desarrollo del cerebro y la maduracin [100].
EsTodava no est claro exactamente cmo la respuesta endocrina al estrs
maternoprogramas el epigenoma de su descendencia. Se sabe queniveles de
glucocorticoides excesivas pueden cruzar la proteccin enzimticabarrera de la
placenta para llegar al cerebro del feto [101]. Aqu,niveles elevados de
glucocorticoides puede, a travs de la regulacin dinmicade la expresin de los
genes miARN, alterar la expresin de genes crticosinvolucrado en la organizacin
del cerebro dimorfismo sexual [90]. Adems, se ha demostrado recientemente que
el estrs psicolgico eninfluencias edad adulta miARN central de expresin [25].
Estos directaefectos del estrs en el cerebro mircoRNAome puede al menos en
partecontribuir a una huella epigenmico en el cerebro de la madre ycontribuir a la
plasticidad cortical y remodelacin neuromorphological que es caracterstico para el
cerebro post-parto [102].

Conclusiones

Aqu proporcionamos evidencia de una posible relacin entre gestacin a la

experiencia adversa y epigentica re-programacin a travs alteracin de la
expresin del ARN en los cerebros de las presas grvidas y su descendencia. Estrs
gestacional leve interrumpido comportamiento en el presa parturienta y mi RNAs
alterados en la corteza frontal, unaregin involucrada en la atencin materna, la
toma de decisiones, y el estrs respuestas, y reguladores epigentica de la
expresin gnica en el newborn. Los presentes hallazgos proponen un mecanismo
por el que la experiencia gestacional modula la expresin de genes con posibles
consecuencias fenotpicas. Debido miRNAs han sido reconocido como
biomarcadores importantes de los estados de enfermedad en los seres humanos,su
regulacin dinmica por el estrs propone una va teraputica prometedora para la
intervencin de la predisposicin a la enfermedad en al riesgo embarazos.

Agradecimientos
Los autores agradecen a ErinFalkenberg, MajkenVilliger y Danyel J.Oliveira para
obtener ayuda con los procedimientos experimentales, y el Dr. JodyFilkowski para
comentarios sobre el manuscrito.
Autor Aportes
Concebido y diseado los experimentos: FCRZ gasm. Realizado los experimentos:
FCRZ YY IDW YI. Analizados los datos: FCRZ YY IDW YI.Contribuido reactivos /
materiales / herramientas de anlisis: IK Aceptar gasm. Escribi lapapel: FCRZ YY KB
Organismos IK gasm.