OBTENCIN DE BLASTOCISTOS HUMANOS POR PARTENOGNESISI A

PARTIR DE VULOS CRIOPRESERVADOS NO INSEMINADOS

Autores: Ester Polak de Fried, Pablo Ross, Gisela Zang, Andrea Divita,
Kerrianne Cunnit, Flavia Denaday, Daniel Salamone, Ann Kiessling, Jos
Cibelli.
RESUMEN
Objetivo: el objetivo de esta presentacin es reportar el primer caso de
obtencin de blastocistos partenogenticos humanos y su adhesin in vitro,
generados a partir de la activacin qumica de vulos criopreservados no
inseminados.
Material y Mtodos: treinta y ocho vulos frescos no inseminados en metafase
II (MII) fueron criopreservados usando el mtodo de congelamiento lento con
1,2 propanediol y 0.3M sacarosa. Los ovocitos fueron provistos por 5 donantes
saludables (edad promedio 32.2 3.4), quienes, previo consentimiento, se
sometieron a una estimulacin controlada y a una aspiracin

folicular con

control ecogrfico. Despus del descongelamiento, los vulos fueron activados

con 10uM de Ionomicina y 2nM de 6-Dimetilamino Purina para inducir la
formacin de proncleos (PN). Los ovocitos activados (partenotes) fueron
cultivados a 37C, 6% CO2 para lograr la formacin de blastocistos
partenogenticos fueron ubicados sobre fibroblastos de cordn umbilical
humanos mitticamente inactivos y chequeados a diario para realizar un
seguimiento de su crecimiento y su adhesin.
Resultados: 36 de 38 ovocitos humanos criopreservados no inseminados
sobrevivieron despus del descongelamiento (porcentaje de sobrevida: 94.7%).
31 de 36 ovocitos mostraron un PN (porcentaje de activacin de: 86.1%), 30 de
31 clivaron (porcentaje de clivaje: 96.8%). Tres partenotes en da 6 y dos en da
7 despus de la activacin mostraron cavitacin. Los blastocistos as formados
fueron plateados. Luego de lo cual un partenote exhibi adhesin incipiente y
otro mostr adhesin completa. No se observ mayor desarrollo. Quince
partenotes clivados no evolutivos fueron plateados en da 9 despus de

activacin. Seis de 15 mostraron adhesin. Dos das despus tres continuaron

adheridos hasta el da de la presente comunicacin (56 das).
Conclusiones: de acuerdo al presente estudio el alto porcentaje de sobrevida
de vulos criopreservados no inseminados permite un alto porcentaje de
formacin partenogentica, desarrollo de blastocistos y adhesin. Este
acercamiento provee un nuevo desafo para obtener clulas madres humanas
no adultas evitando problemas ticos que surgen con el uso de gametas y
embriones humanos. Por otro lado, vulos humanos criopreservados no
inseminados podran ser una fuente permanente y segura de produccin de
partenotes evitando as el largo proceso de reclutamiento de donantes,
seleccin y tratamiento. Tambin ofrece la posibilidad de almacenar vulos
inmunolgicamente compatibles para su posible utilizacin futura.