Determinacin de la naturaleza proteica de las enzimas.

En el sistema 01: Solucin de tripsina 0.25% (2ml); Agua destilada (2ml)

Evidencia: Se observa que la enzima es soluble en agua, es decir forma una mezcla
homognea, sin cambio de color.
En el sistema 02: Solucin de tripsina 0.25% (2ml); Solucin de hidrxido de sodio NaOH 2.5%
(2ml)
Evidencia: Formacin de partculas en la parte inferior del tubo de ensayo, sin ningn cambio de
color.
En el sistema 3: Solucin de tripsina 0.25% (2ml); Solucin de H2SO4 50% (2ml)
Evidencia: Formacin de partculas en mayor cantidad a comparacin del tubo anterior ubicadas
en la parte inferior del tubo de ensayo, sin ningn cambio de color.
En el sistema 04: Solucin de tripsina 0.25% (2ml); Solucin de acetato de plomo 10% (2ml)
Evidencia: Se observa un cambio de color de transparente a un blanco lechoso.
En el sistema 05: Solucin de tripsina 0.25% (2ml); Alcohol etlico (2ml)
Evidencia: Se observa la formacin de un anillo en la parte media de la solucin.
En el sistema 06: Solucin de tripsina 0.25% (2ml); Reactivo de Biuret (2ml)
Evidencia: Se observa un cambio de color de transparente a un azul violceo que se hizo
evidente al agregar el Biuret.
En el sistema 07: Solucin de tripsina 0.25% (2ml); Agua destilada; Se somete esta solucin al
bao mara por 5 minutos
Evidencia: No se observa ningn cambio, esto demuestra la desnaturalizacin de la enzima.
Demostracin de la actividad cataltica de la peroxidasa
En el sistema 01: Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml); Agua destilada. (4ml); Se observa por 15 minutos
Evidencia: No son visibles las evidencias.
Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml); Agua destilada. (4ml; Alcohol etlico (2ml); Reactivo de schiff. (1ml)
Evidencia: Se hace visible un cambio de color a morado claro.

En el sistema 02: Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml); Agua destilada. (4ml); Agua oxigenada; Se
observa por 15 minutos
Evidencia: No son visibles las evidencias.
Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml); Agua destilada. (4ml; Agua oxigenada.(3ml); Alcohol etlico (2ml); Reactivo
de schiff. (1ml)
Evidencia: Se hace visible un cambio de color a fucsia.

En el sistema 03: Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml); Limaduras de fierro. .(0,5g); Agua oxigenada. (3ml);
Se observa por 15 minutos
Evidencia: Se hace visible un cambio de color a marrn claro.
Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml); Agua oxigenada. (3ml); Alcohol etlico (2ml); Reactivo de schiff. (1ml)
Evidencia: Se hace visible un cambio de color a morado claro.

En el sistema 04: Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml); Agua oxigenada. (3ml);Trozos de papa (0.5 g) Se
observa por 15 minutos
Evidencia: Es evidente espuma por las paredes del tubo de ensayo.(efervescencia)

Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml);Trozos de papa; Agua oxigenada. (4ml; Alcohol etlico (2ml); Reactivo de
schiff. (1ml)
Evidencia: Ms presencia de espuma con un cambio de color a fucsia fuerte.
H2O2 + CH3 - CH2 OH

CH 3 CHO + 2 C20-H20-Cl-N3
Rosado

Schiff

En el sistema 05: Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml); Agua oxigenada. (3ml);Trozos de papa (0.5 g) Se
observa por 15 minutos
Evidencia: Es evidente espuma por las paredes del tubo de ensayo.(efervescencia)
Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml);Trozos de higado; Agua oxigenada. (3ml; Alcohol etlico (2ml); Reactivo de
schiff. (1ml)
Evidencia: Ms presencia de espuma con un cambio de color a fucsia fuerte.

En el sistema 06: Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml);Levadura de panificacion; Agua oxigenada.
(3ml);Trozos de papa (0.5 g) Se observa por 15 minutos
Evidencia: Es evidente espuma por las paredes del tubo de ensayo.(efervescencia)
Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml);Levadura de panificacion; Agua oxigenada. (4ml; Alcohol etlico (2ml);
Reactivo de schiff. (1ml)
Evidencia: Ms presencia de espuma con un cambio de color a morado claro fuerte.

Sistemas buffer fosfato: Pares conjugados de cido-base que amortiguan y evitan los cambios
bruscos de pH en el medio donde ellos se encuentran.
Reactivo de schiff: En qumica, el reactivo de Schiff es un reactivo para la deteccin de aldehdos.
Cambia a color violeta prpura con un aldehdo, al perder cido sulfuroso, por la reaccin, pues ste es
un cido inestable.

FACTORES FISICOQUMICOS QUE MODIFICAN LA VELOCIDAD DE LAS REACCIONES

ENZIMTICAS
ETAPA A: No se produce ningn cambio.
ETAPA B:Control de la actividad enzimtica por el sustrato residual.
Reaccin I: Mezclar 1,0 mL del incubado correspondiente de cada uno de los tubos de la
ETAPA A con 5.0 mL de cido clorhdrico 0,05N de solucin yodada. Se observa un cambio de
color a azul.
Reaccin II: Mezclar 1,0 mL del incubado correspondiente de cada uno de los tubos de la
ETAPA A con 5.0 mL de acido clorhdrico 0,05N de solucin yodada. Se observa un cambio de
color a amarillo.
Reaccin III: Mezclar 1,0 ml del incubado correspondiente de cada uno de los tubos de la etapa
a con 5.0 ml de cido clorhdrico 0,05n de solucin yodada. Se observa un cambio de color a
amarillo

Reaccin IV: Mesclar 1,0 mL del incubado correspondiente de cada uno de los tubos de la
ETAPA A con 5.0 mL de cido clorhdrico 0,05N de solucin yodada. Se observa un cambio de
color a azul.
Reaccin V: Mezclar 1,0 ml del incubado correspondiente de cada uno de los tubos de la
ETAPA A con 5.0 ml de acido clorhdrico 0,05N de solucin yodada. Se observa un cambio de
color a amarillo fuerte tomamos esta muestra como una muestra ideal.
Reaccin VI: Mesclar 1,0 mL del incubado correspondiente de cada uno de los tubos de la
ETAPA A con 5.0 mL de cido clorhdrico 0,05N de solucin yodada. Se observa un cambio de
color a amarillo
Reaccin VII: Mesclar 1,0 mL del incubado correspondiente de cada uno de los tubos de la
ETAPA A con 5.0 mL de cido clorhdrico 0,05N de solucin yodada. Se observa un cambio de
color a azul.
Reaccin VIII: Mesclar 1,0 mL del incubado correspondiente de cada uno de los tubos de la
ETAPA A con 5.0 mL de cido clorhdrico 0,05N de solucin yodada. Se observa un cambio de
color a azul.
ETAPA C: CONTROL DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA POR LOS PRODUCTOS
FORMADOS.
Reaccin I: De los tubos incubados III y v agregar 1,0 ml ms 1,0 de solucin cprica alcalina.
Lo que produce un cambio de color debido a la presencia de glucosa..
Reaccin II: De los tubos incubados III y V agregar 1,0 mL ms 1,0 de solucin cprica
alcalina. Lo que produce un cambio de color debido a la presencia de glucosa..

Primer proceso:
Presencia de cido lctico

COMPONENTES

EVIDENCIA

SISTEMA 01
Leche( 5.0 ml)
Cloruro frrico 0.5M en HCl
(1.0ml)

SISTEMA 02
Yogurt
Cloruro frrico 0.5M en HCl
(1.0ml)

RESULTADOS

No hay ningn cambio debido

a que la leche debido a que
no tiene componentes cidos.

Se presencia un cambio de
color debido a la presencia de
cido lctico

Segundo proceso:
Determinacin de la acidez en volumen (ml)

COMPONENTES

SISTEMA 01
Leche( 20.0 ml)
Fenolftalena (IV
gotas)
NaOH (gotas hasta
obtener coloracin
rosada)

SISTEMA 02
Yogurt (20.0ml)
Fenolftalena (IV
gotas)
NaOH (gotas hasta
obtener coloracin
rosada)

Se presencia un cambio de
color a los 0,45 ml.

Se presencia un cambio de
color 0,5 ml.

EVIDENCIA

RESULTADOS