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todos los derechos de autor conforme lo dispuesto en la legislación civil de la materia. Apartado Postal: 107. sea electrónico o mecánico. cintas magnetofónicas.gob. reservándose dicho Ministerio. edición 2004. El presente Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad. acumulación de información con memoria ni através de ninguna otra forma. Anita Matamoros García Revisión de texto: Equipo Técnico Científico del CNDR y Hospitales Cuidado de la Edición: Dr. Concepción Palacios.ni Complejo Nacional de Salud Dra. Componente “Modernización de Hospitales” . Consuelo Vega Reyes Diagramación: Martha Medina Ruiz Diseño de portada: MSc. ii Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Edición 2004 Levantado de Texto: MSc. PBX (505) 289-4700. incluyendo copias fotostáticas. no puede reproducirse o transmitirse por método o forma alguna. Impresión: Litografía Nicaragüense (LITONIC) MINISTERIO DE SALUD El presente documento constituye un esfuerzo del Equipo Técnico Científico del Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia del Ministerio de Salud. Anita Matamoros García Ing. Gianfranco Profeti MSc.minsa. sin autorización por escrito del Ministerio de Salud de Nicaragua. Anita Matamoros García Realización de portada: Roberto Carlos Martínez Ch. Managua. L a edición 2004 del Manual de PProcedimientos rocedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad fue financiada por el PMSS. www.

Es responsabilidad de los representantes de establecimientos proveedores de servicios de salud. aprobar. y su Reglamento. principalmente lo dispuesto en la Constitución Política (Arto. como Manual de Procedimientos tiene su sustento legal dentro del marco jurídico y regulatorio existente para el Sector Salud. De igual manera. encaminados a garantizar el derecho a la salud de todos los nicaragüenses. en su Arto.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad iii MARCO LEGAL El presente documento. entre otras consignadas en la Ley General de Salud. y su Reglamento. ordenar y vigilar las acciones en salud. sin perjuicio de las funciones que deba ejercer frente a las instituciones que conforman el sector salud. como ente rector del Sector. supervisar. controlar. proyectos.4 establece: “Corresponde al Ministerio de Salud. organizar. supervisar. así como elaborar. controlar y evaluar el cumplimiento de la presente Ley y su Reglamento. coordinar. aplicar. su Reglamento y en la Ley Ejecutivo”. inspeccionar. supervisar y evaluar normas técnicas. regular. La Ley No.59). garantizar el cumplimiento de los manuales relativos a la salud y estándares de calidad establecidos por el Órgano Rector de la Salud.423 “Ley General de Salud”. planes. programas. manuales e instructivos que sean necesarios para su aplicación. en su Arto. la Ley General de Salud. Ley No. en concordancia con lo dispuesto en disposiciones legales especiales”. formular políticas.2 establece que este Ministerio es el órgano competente para aplicar. independientemente de su naturaleza jurídica. . 423 “Ley General de Salud.

Alden Mendoza Hospital Asunción Lic. Francisco Rodríguez Hospital Fernando Vélez Páiz Lic. Consuelo Vega Reyes Directora Laboratorio Clínico Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia Equipo Técnico Científico que colaboró en la revisión del Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad: Lic. Enrique Alvarado Abaunza Secretario General Dr. Maritza Baca Hospital Bertha Calderón Lic. Josefina Salinas Hospital Alejandro Dávila Bolaños . Alex Ramírez Hospital Alemán Nicaragüense Lic. Agustina Canales Hospital Manuel de Jesús Rivera Lic. Gianfranco Profeti Asesor Programa de Control de Calidad en los Laboratorios Clínicos MSc. Anita Matamoros García Resp. Rosa Padilla Hospital Humberto Alvarado Lic. Bioquímica Clínica Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia Ing. Alcidez González Mairena Director General Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia Equipo Técnico Científico del Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia (CNDR) del Ministerio de Salud de Nicaragua Dr. iv Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad REPUBLICA DE NICARAGUA MINISTERIO DE SALUD Lic. Cándida Pérez Hospital Antonio Lenin Fonseca Lic. Dpto. Margarita Gurdián López Ministra de Salud Dr. Israel Kontorovsky Artola Vice-ministro de Salud Dr. Noel Olivas Hospital Alfonso Moncada Guillén Lic. Marlene Montiel Hospital Amistad Japón-Nicaragua Lic. Rosa Emelina Alonso Hospital Escuela Oscar Danilo Rosales Lic.

........1 Finalidad .....7 Validación ...............................................12 Modalidad de conservación................................5........................5.....................3 Generalidad ............................5..................... 9 1....................................................................4................ 23 ......................................................................... 19 2..............................................................................................................9 Organización del trabajo ...........................................................6 Gestión de la sesión de trabajo ................................................................. 3 1................................5............................................................................5........................................................................5..........4 Programación y reservación de los servicios de laboratorio ..........................2 Acceso a los servicios de salud .....................................8 Entrega de resultados ...........10 Criterios de conformidad de las muestras ...............5............................1 Preparación de los pacientes ................ ix INTRODUCCIÓN .. 13 1.................................................................................................................... xi PRIMERA PARTE 1.........................................................1 Aspectos éticos .....4..............2 Instrucción . 6 1...............................................4 Operaciones preliminares ...5........ 6 1............................................................... 19 2................................................. 3 1.................................................. 6 1......................5........... 4 1... 8 1.........................................................................................................5..........7 Toma de muestra de heces ............ 19 2..... 15 SEGUNDA PARTE 2................................. 4 1..........................................................................5......................... 5 1..................................3 Modalidad de toma de muestras ......4 Toma de muestra de sangre ........5.................5 Calibración y control ... 3 1............8 Modalidad de transporte .1 Finalidad ...... 12 1..... 3 1.............2 Ámbito de referencia ....................................................................... 5 1................................................ 23 2.........................................4.. 14 1.................6 Exámenes urgentes ............................................ 5 1..2 Modalidad de la demanda de los exámenes ..............................................................................5 Criterios para evitar errores en la fase pre-analítica .............. 12 1................3 Acceso a las prestaciones de laboratorio .............3 Responsabilidad ...... 10 1.....................4.................... 15 1............................................................................................... 13 1...............................................................Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad v Tabla de Contenido PRESENTACIÓN ....................... 19 2.................................................................................................. Informaciones generales.................................4....6 Toma de muestra de orina ........... 10 1.............5 Curva de tolerancia a la glucosa ....... 3 1.....7 Inicio del trabajo .....................................................................................................................................11 Centrifugación de las muestras .... 22 2........................................................

...14 Archivo .................................................................... 30 3........................ 32 3.. 38 3............................................................................... 52 4.....................................8 Errores en la fase analítica ............... 72 4.. 36 3..................................................................................11 Gestión de las situaciones fuera de control .............................................. 29 3............................................9 Límites de confianza ................................. 29 3...................................................9 Gestión de las situaciones “fuera de control” ..........8 CALCIO ............ 76 4......................................5 Organización ..................................................................................................9 CREATINA CINASA (CK) ..................................7 BILIRRUBINA INDIRECTA ................. 62 4...................0 Finalidad ............................. 32 3...........................8 Estudio estadístico de los datos ..........................................................................10.......... 79 ..................................................................................................1 Finalidad ............................ 54 4...............................................................................10 CREATINA CINASA (CK) MB ....................................................... 69 4................................................10...................................................................2 Objetivos del programa de CCI ....... 31 3......................................................................................................... 37 3.................... 48 4.........................................................................2 ALBÚMINA ..........10 Fin de la sesión de trabajo ................7 Aceptación de los resultados ...........................................................................................4............................................................. 32 3...........4....................................................................................................................................................................5 BILIRRUBINA TOTAL .................................................6 Descripción de los controles ................................... 64 4.............................................................................................11 COLESTEROL TOTAL .....1 ÁCIDO ÚRICO ......................1 Presentación gráfica de los resultados encontrados por medio de un programa de computadora................................................................. 25 TERCERA PARTE 3............................... 42 CUARTA PARTE 4.........6 BILIRRUBINA DIRECTA ............................................................13 Evaluación retrospectiva ...... 40 3.... 64 4..................................................................................... 41 3...... 33 3............. 24 2..................................................... 29 3..............................4 Generalidad ... vi Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 2.... con aplicación práctica del algoritmo de Westgard (reglas sencillas y múltiples) ..........12 Control de Calidad Interno sin sueros de control .......................... 40 3... 29 3............ 23 2................................................................................................................1 Evaluación inmediata de los resultados .............................................. Presentación gráfica manual de los resultados .................... 45 4............ 32 3....................................................................2 Ámbito de referencia ........................3 ALBÚMINA (en orina) ...... 58 4..................................................................................7................................................................4 AMILASA .......... 45 4........................................1 Control de Calidad Interno ......12 COLESTEROL HDL .3 Responsabilidad ..

.......................................................................................................................... 137 4................ 134 4.....13 COLESTEROL LDL .......... 154 ........................................................15 ACLARAMIENTO DE LA CREATININA ................................................25 GLUCOSA .......................................................................................................................21 FOSFATASA ÁCIDA .................................... 84 4.......... 95 4.....................................................................................22 FOSFATASA ALCALINA ............................... 151 5..................... 109 4...........................31 UREA ..................................19 SODIO ..............................................18 POTASIO ..................................................................................................................................................................................................................................................................................28 TRANSAMINASA (TGO-AST) ......................................................................................26 DESHIDROGENASA LÁCTICA ...................................................................................................................................................................................................................... 101 4. 141 4......... 120 4...................................................................16 CLORO ..............................................................1 BIBLIOGRAFÍA .......................... 126 4...................17 MAGNESIO ............................ 130 4....................20 HIERRO .................................................................................................................................................................2 LÉXICO ............................................. 91 4........................23 FÓSFORO INORGÁNICO ...........29 TRANSAMINASA (TGP-ALT) ......... 98 4..... 122 4........... 116 4..............................30 TRIGLICÉRIDOS .............. 112 4.. 88 4................... 144 QUINTA PARTE: ANEXOS 5............27 PROTEINAS TOTALES ......14 CREATININA .................................................................................................................................... 82 4.............. 105 4.........24 GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA ............Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad vii 4..............

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Dicho Manual es el resultado de una revisión bibliográfica detallada y de un proceso de encuentros técnicos que surgió ante la necesidad de estandarizar metodologías. Sirva entonces este Manual como guía a todos los Profesionales de Laboratorios. es una herramienta básica y fundamental para mejorar la calidad de los análisis bioquímicos que se realizan tanto a nivel hospitalario así como en las diferentes Unidades de Salud. que permitiera unificar los conocimientos y velar en forma conjunta por la calidad que brindan los servicios de laboratorio clínico. en el área de Bioquímica Clínica. todo el proceso anterior recibió el apoyo del Programa Modernización del Sector Salud. Margarita Gurdián L.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad ix PRESENTACIÓN El presente “Manual de procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad”. de tal manera que proporcionará los elementos necesarios para lograr la confiabilidad de los resultados de laboratorios. lo cual constituirá un valioso apoyo para el diagnóstico de las diferentes enfermedades que padece la población nicaragüense. Ministra de Salud . el cual ayudará a mejorar la calidad de los resultados en todos los laboratorios del Sistema de Salud.

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Con este manual esperamos contribuir con el mejoramiento del servicio de los Laboratorios Clínicos. Para iniciar el Control de Calidad Interno en el Laboratorio Clínico se debe establecer un conjunto de acciones. la precisión. el gran reto para los Laboratorios Clínicos ha sido su readecuación y reorganización. entendiendo por veracidad de los resultados analíticos. para garantizar los requisitos especificados y la conformidad de los productos. El propósito de este manual. El laboratorio de análisis de Bioquímica Clínica tiene que predisponer. caracteriza de modo global un resultado analítico. la sensibilidad. analítica y post-analítica. supervisión y evaluación de las diferentes fases del laboratorio: pre-analítica. la especificidad y la eficiencia instrumental. La veracidad. en forma tal que permita satisfacer no sólo la demanda diagnóstica de las enfermedades infecciosas. toma de la muestra. En Nicaragua. Además proporciona información sobre los métodos de determinación enzimáticos y colorimétricos de punto final. Para lograr altos estándares de calidad es necesario el seguimiento. cubriendo así todas las fases del laboratorio. conservación y transporte de la misma. en el que se incluyen preparación del paciente. como índice de calidad. la exactitud. para asegurar la calidad en los resultados finales.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad xi INTRODUCCIÓN Este primer manual de procedimientos es el resultado de un proyecto iniciado por el Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia. Gianfranco Profeti Asesor Control de Calidad en Bioquímica Clínica . En el se cristaliza gran parte del trabajo de los profesionales y técnicos. es ofrecer un servicio profesional a los Laboratorios Clínicos. de la familia de Laboratorio Clínico. documentar y mantener activo un sistema de calidad. sino también para atender las enfermedades no transmisibles y cubrir la creciente demanda en Bioquímica Clínica. Es tarea fundamental de un laboratorio el proveer resultados confiables.

PRIMERA PARTE PROCEDIMIENTO DESDE EL ACCESO A LAS PRESTACIONES DE QUÍMICA CLÍNICA EN LA FASE ANALÍTICA EXÁMENES URGENTES VALIDACIÓN DE LOS RESULTADOS ENTREGA DE LOS RESULTADOS .

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3. c) Minimizar los dolores que se le pueden causar al paciente cuando se le tome la muestra y excluir eventuales situaciones de riesgo. Responsabilidad La responsabilidad debe ser conocida y distribuida según sus funciones por: X El director del hospital X El responsable del laboratorio X Los responsables de las diferentes secciones del laboratorio 1. 1. b) Limitar la variabilidad de las condiciones de la toma de muestra para lograr siempre el mismo procedimiento con los diferentes pacientes. .Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 3 1. la clase de examen que será analizado y cómo podrá ser utilizado luego el resultado de su examen.4. desde las secciones hospitalarias. a través de una correcta información. Ámbito de referencia El presente procedimiento está aplicado a un laboratorio de análisis. Aunque no es necesario lograr el consenso escrito u oral del paciente. a otros lugares de toma de muestras. Aspectos éticos Los principios de ética médica deben estar presentes en las diferentes etapas que constituyen el diagnóstico de laboratorio. empezando desde la toma de muestra. 1. y a los lugares de entrega de resultados. La información para el paciente consiste en explicar el procedimiento médico que constituye la operación de la toma de muestra. se recomienda cumplir con tres objetivos fundamentales: a) Lograr una muestra apropiada con el volumen deseado. seguramente que es muy importante contar con su colaboración. Finalidad El presente procedimiento explica la organización del laboratorio de análisis y sus relaciones con los clientes externos e internos de acuerdo con la modalidad de: X Acceso a las prestaciones diagnósticas X Ejecución de muestras biológicas X Envío y conservación de muestras X Entrega de resultados X Exámenes urgentes X Validación del trabajo 1.2.1.4. Informaciones generales Para la recolección de las muestras que se analizarán en el laboratorio de química clínica.1.

X Utilizar correctamente el tubo de ensayo para la recolección de la muestra de sangre. X Aplicar las etiquetas para la identificación de la muestra de modo que no se desprenda y de forma vertical. Acceso a los Servicios de Salud El acceso a los servicios de laboratorio clínico que den respuesta a las necesidades de cada paciente. la disponibilidad y los costos de la atención. Acceso a las prestaciones de laboratorio Para obtener una muestra biológica. volantes que informan sobre la naturaleza. las metas. de toma de muestra. se pone en duda la veracidad de los resultados. 1. El respeto de estos procedimientos es esencial porque. 4 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Cualquiera que sea el procedimiento realizado en el paciente. La información a pacientes y familiares acerca de los servicios durante el proceso de admisión. tiene que respetar el secreto profesional. El laboratorio es responsable completamente de las actividades propias: X Aceptar directamente las diferentes muestras X Preparar las muestras para realizar los exámenes X Ejecutar el examen . se garantiza a través de la planificación mensual y anual que realiza el responsable del servicio. murales. para que permita la observación de la muestra por transparencia.3. el resultado del análisis debe ser confidencial y protegido de la indiscreción. cada vez que no se cumplen. de transporte o de entrega de resultados. la brinda el personal del laboratorio clínico. se tiene que cumplir los siguientes procedimientos: X Respetar los horarios de salida y llegada de las muestras biológicas. Todo el personal de laboratorio. Poner las indicaciones necesarias para la identificación del paciente (en lo posible sexo y edad) y el tipo de exámenes solicitados. de modo que para éstos es esencial el respeto de los horarios de la entrega de las muestras al laboratorio. X Utilizar correctamente frascos de boca ancha para la recolecta de otro material biológico. tomando en cuenta: X Misión y capacidad de la institución. consulta externa. Algunos analitos tienen un tiempo de ejecución preciso. 1. no mayor de 15 minutos. X Transportar correctamente los materiales biológicos. de 8:00 AM a 3:00 PM. X Programación de insumos acorde a la producción de servicio y al perfil de la institución. X Tiempo de espera razonable. X Registrar correctamente las muestras.4. Los resultados de los pacientes de consulta externa pueden ser entregados a una persona extraña.2. sea de recepcion. siempre y cuando ésta presente una autorización firmada por el paciente. a través de afiches. X Cobertura del servicio con personal en horarios de 24 horas para hospitalizados y emergencia.4.

Modalidad de conservación. el paciente debe mantener un ayuno de 6–8 horas en particular para exámenes del metabolismo lipídico y glucídico.1 Preparación de los pacientes La consulta del laboratorio para un fin de diagnóstico se realiza normalmente por la mañana.5.5. ya que la nicotina puede aumentar los valores del cortisol. catecolamina urinaria).Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 5 X Compilar los resultados X Entregar los resultados. Modalidad de toma de muestra 4. . prolactina. calcio. El monitoreo de éstos puede dar diversos valores distintos en las diferentes horas (ACTH. 1. toma de muestras. Modalidad de la demanda de los exámenes 3. 1. puede elevar los valores de la determinación de amonio. Organización del trabajo 6. Acceso de exámenes “URGENTE”. Acceso directo por exámenes de rutina.4. Se debe evitar fumar en las horas antes de la toma de muestra. cortisol. Programación y reservación de los servicios de laboratorio Existen dos modalidades de acceso a los servicios de laboratorio: 1. Criterios para evitar errores en la fase pre-analítica El primer paso es minimizar los errores en la fase pre-analítica (modalidad de registro de muestras. Preparación del paciente 2. recolección de muestras. Así como también el técnico de laboratorio que realiza las extracciones sanguíneas no debe estar estresado porque el estrés libera amonio. El humo de cigarrillo del paciente o presente en el cuarto. y disminuir los eosinófilos. El fumador crónico puede tener falsamente elevados algunos valores de parámetros oncológicos (CEA) y cardíacos (CK). con posible interferencia en la fase analítica. Conformidad de la muestra 7. Modalidad de transporte 5. conservación de las muestras. y 2. Un procedimiento pre-analítico bajo control es un elemento de seguridad en el laboratorio para garantizar la calidad. Para pruebas de tolerancia a la glucosa. Criterios específicos por verificar: 1. Centrifugación y separación correcta de la muestra 8. de las catecolaminas. es necesaria una dieta glucídica equilibrada.4. Algunos parámetros bioquímicos tienen particulares ritmos biológicos y están sometidos a importantes variaciones circadianas. Para efectuar la toma de muestra. los granulocitos y monocitos. 1. hierro. transporte. La falta de ayuno puede hacer el suero opalescente.

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Otros parámetros tienen mínimas variaciones de poco significado (cloro, VSG, potasio,
factores de coagulación y hormonas de la fertilidad).
Muchos fármacos pueden interferir en la determinacion de algunos analitos. Antes de la toma
de muestra, es importante observar una abstención total de fármacos, excluyendo claramente
aquéllos fármacos salvavidas y las terapias que no se pueden interrumpir.

1.5.2. Modalidad de la demanda de los exámenes
Cada muestra tiene que estar acompañada de una orden de examen bien escrita: con
nombre, apellidos y, si es posible, la edad, el sexo y la procedencia.

1.5.3. Modalidad de toma de muestras
Existen diferentes modalidades de toma de muestras: sangre, orina y heces.

1.5.4. Toma de muestra de sangre
La sangre periférica constituye el material biológico de elección sobre el cual se realiza la
mayor parte de las investigaciones de laboratorio relacionadas con la química clínica.
X La toma de muestra de sangre puede ser venosa, capilar y arterial.
X La sangre arterial se utiliza para estudiar los parámetros de los equilibrio ácido-base.
X La sangre venosa o capilar se utiliza indiferentemente para determinar todos los analitos.
X Los instrumentos que se utilicen para la toma de muestra tienen que ser absolutamente
estériles, químicamente inertes (para evitar hemólisis), muy eficientes para la penetra-
ción a través de la piel y, consecuentemente, poco traumáticos (óptimo es el sistema
vacutainer).

a) Desinfección
La zona de la toma de la muestra tiene que estar limpia, desinfectada con sustancias eficaces
y que no puedan hacer interferencia con el examen requerido: secar la piel con desinfectante
antes de la punción para evitar su aspiración.

b) Toma de muestra
Para la técnica de la toma de muestra venosa, se deben seguir las recomendaciones
internacionales del NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards).
El personal deberá usar guantes de látex para realizar operaciones de recolección de sangre
y para toda manipulación de sangre, suero, plasma y otros especimenes.
La toma de muestra se efectúa preferiblemente de una vena anterior del brazo: en la mayoría,
se escoge la vena cefálica o la vena cubital mediana. También pueden utilizarse para la toma
otras venas de menor calibre; sin embargo, se tiene que considerar que el flujo de la sangre
puede ser lento y que la vena puede colapsarse con facilidad. En caso de dificultad, la toma
de muestra se puede efectuar también de una vena del dorso de la mano o del pie. Se coloca
el torniquete por encima del sitio a puncionar, haciendo un nudo de manera que se pueda
quitar fácilmente, halando el extremo libre.

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 7

Para prevenir la hemoconcentración, se precisa evitar estasis venosa prolongada: es
importante quitar el torniquete cuando la aguja está ingresada en la vena.
El tiempo prolongado de aplicación del torniquete es responsable de variaciones significativas
de la concentración de numerosos componentes de la sangre (después de 3 min., aumenta
el 13.0 % la concentración del colesterol total y del colesterol HDL; el 12.0% del hierro,
los triglicéridos, las proteínas totales y CPK, la TGO puede aumentar más del 16.0% después
de la aplicación muy estrecha del torniquete). Solicitar al paciente que empuñe la mano para
facilitar la aparición de la vena. El área seleccionada debe estar limpia y seco de alcohol.
Introducir la aguja con el bisel hacia arriba de 1 a 2 cm hasta ver que fluya la sangre,
formando un ángulo de 15º con la piel.
Retirar el pistón, retirando despacio de modo que permita fluir la sangre espontáneamente.
Sacar la aguja de la jeringa, transferir suavemente la sangre en el tubo de ensayo sin ejercer
alguna presión sobre el pistón (hemólisis). La sangre tiene que fluir regulamente sin crear
vórtices. Mezclar pronto la sangre con el anticoagulante por inversión con un suave
movimiento. Agitar enérgicamente la muestra podría producir hemólisis mecánica.
Es importante la relación entre el anticoagulante y la sangre, de modo particular para los
análisis de coagulación y de hematología (PT, TPT, fibrinógeno, VSG, BHC, etc.). Una
inadecuada relación invalida la precisión de los resultados.
Todas las muestras de coagulación tienen que estar examinadas al menos entre dos horas,
y el examen realizarse dos veces. En caso de toma de muestra complicada con el riesgo de
aspiración de líquido intersticial (sumamente coagulante), se debe comunicar el problema por
escrito.
La elección de un anticoagulante idóneo tiene que hacerse según el tipo de análisis que se
va a realizar, tomando en consideración también que algunos anticoagulantes pueden
interferir en la determinación de algunos análisis de química clínica.
Recordar siempre que la heparina inhibe la fosfatasa ácida, el oxalato inhibe: la amilasa, la
fosfatasa ácida y LDH , el citrato inhibe la fosfatasa alcalina y la amilasa y el EDTA la fosfatasa
alcalina y CPK.
En caso que el paciente tenga una infusión venosa, es necesario efectuar la toma de muestra
en otro brazo o en lugar lejano desde el punto de infusión.
El laboratorio tiene que preparar un documento con todas las informaciones para establecer
el tipo de anticoagulante que se va a utilizar, el volumen necesario de sangre y el tipo de
tubos de ensayo, conforme las diferentes metódicas analíticas usadas. Establecer también si
se utiliza un conservante (fluoruro para glucosa), en caso de ejecutar la investigación clínica
en un segundo momento.
El incumplimiento de estas recomendaciones generales puede crear graves alteraciones de
la toma de muestra de la sangre como microcoágulos, hemólisis, activación de los factores
de coagulación y de las plaquetas, alteración de los valores de muchos parámetros de química
clínica.

8 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad

Una de las causas más importante para que una muestra de sangre se considere no idónea
está representada por la hemólisis. La hemólisis es la ruptura del glóbulo rojo y el pasaje
al plasma o suero de hemoglobina (coloración de la muestra) y de todas las sustancias
contenidas (potasio y enzimas).
Las causas más frecuentes de hemólisis son:
X Aguja de calibre pequeño.
X Presencia de alcohol sobre la piel.
X Excesiva aspiración (toma de muestra con jeringa).
X Excesiva presión en el pasaje de la sangre con la jeringa al tubo de ensayo.
X Mezcla muy violenta de la toma de muestra.
X Toma de muestra muy dificultosa y prolongada.
X Toma de muestra de zonas edematosas.

Existen varios tipos de hemólisis:
1. Mecánica: Provocada por excesiva fuerza de aspiración en la toma de la muestra o por
una presión excesiva sobre el pistón en el momento de la expulsión de la sangre desde
la jeringa (antes sacar siempre la aguja).
2. Física: Por conservación prolongada de la muestra en condiciones no idóneas de
temperatura (calor o congelación).
3. Osmótica o química: Por presencia de agua, alcohol o metales pesados en la aguja,
jeringa o en los tubos de ensayo.

1.5.5. Curva de tolerancia a la glucosa
Existen al menos tres tipos de curvas de tolerancia a la glucosa: el protocolo está compuesto
de una parte común y de una modalidad diferente en la suministración del carbohidrato y
en el tiempo de la toma de muestra.

Procedimiento común:
X Efectuar la toma de muestra para una glicemia basal utilizando, si es posible, un tubo
de ensayo con inhibidor de la glicolisis (monoiodoacetato).
X Enviar la muestra al laboratorio y esperar el resultado.
Antes de proceder con la suministración del carbohidrato, es necesario conocer si el paciente
tiene una glicemia muy alterada y si toma alguna terapia hipoglicemizante oral o parenteral.
En caso afirmativo, no se puede proceder sin la autorización de responsabilidad del médico
tratante.
Excluyendo la práctica de la terapia hipoglicemizante, se puede proceder con un valor de
glucosa inferior a 140.0 mg/dl. Con un valor igual o superior a 140.0 mg/dl, no proceder,
y aconsejar al paciente que realice una glicemia horaria.

luego de ingerir la glucosa.0 g de glucosa disuelta en 300 ml de agua. X Efectuar la toma de muestra después de 60 y 120 minutos de ingerir la glucosa. X Efectuar la toma de muestra después de 60 minutos. eventual daño de los cilindros). es oportuno repetir el examen efectuando la toma de muestra con las siguientes modalidades: X Extender el paciente sobre la cama. Toma de muestra de confirmación: En caso que los valores de la primera toma de muestra estuviera sobre el valor de referencia.5. X Llenar el tubo de ensayo para enviar al laboratorio. 60. 90. debe ser la primera de la mañana. X Enviar el tubo de ensayo correctamente etiquetado al laboratorio. Curva de tolerancia con tres tomas de muestra X Sumistrar por vía oral al paciente una carga de 100. X Enviar los tubos de ensayo correctamente etiquetados al laboratorio. Las muestras tienen que ser enviadas al laboratorio lo antes posible para evitar modificaciones de la morfología de los componentes del sedimento (crecimiento de las bacterias.0 g de glucosa. X Suministrar por vía oral a la paciente una carga de 50.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 9 Procedimiento diferenciado: Curva de tolerancia con seis tomas de muestra X Suministrar por vía oral al paciente una carga de glucosa igual a un gramo de glucosa por kilogramo de peso corporal. X Aplicar una venoclisis con solución fisiológica. La muestra. X Enviar el tubo de ensayo correctamente etiquetado al laboratorio. 1. Curva de tolerancia con dos tomas de muestra (típica del monitoreo en estado de gravidez).6. Disolver la glucosa anhidra en 300 ml de agua. cerrar la venoclisis. 120 y 180 minutos luego de haber ingerido la glucosa. preferiblemente. X Efectuar la toma de muestra después de 30. Tomar muy rápidamente. Modalidad de toma de muestra para PROLACTINA Efectuar: Primera toma de muestra: El paciente tiene que estar en descanso absoluto por 30 minutos ante de la toma de sangre. . Toma de muestra de orina Las muestras de orina tienen que ser recogidas “a medio chorro” en envases limpios para evitar la contaminación con sustancias azucaradas. aspirar y eliminar dos ml de sangre. X Después de 5 minutos. X Después de 30 minutos.

10 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Las muestras de orina que son recogidas para análisis pueden ser de tres tipos: X Primera orina de la mañana. vaciar de nuevo la vejiga y depositar toda la orina en el frasco. si es necesario.3. Evitar contaminar la muestra de heces con orina. Para la recogida de orina. esterilizar. después de un período de 8 horas de descanso. d) Entregar la muestra cuanto antes en el laboratorio. las muestras de sangre deben ser enviadas en termos con gradillas. En el transporte a lo interno del hospital. . En caso de estreñimiento. En cada caso debe observarse las siguientes reglas: a) Limpiar las manos y los genitales antes de la micción. Modalidad de transporte El transporte puede ser dentro o fuera del hospital. X Muestra de orina casuales o a cualquier hora. que se puedan lavar fácilmente y. se tiene que utilizar un frasco de 2.0 litros de boca ancha.5. se procede de la siguiente manera: a) En el tiempo preestablecido. la modalidad de recogida y envío al laboratorio. con etiqueta y con las órdenes de los exámenes. c) Usar contenedores de monouso con capacidad suficiente. Recolección de orina de 24 horas Para la recolección de orina de 24 horas. Conservar las orinas a 2-4oC. 1.8. recoger la muestra después de aplicar un enema para obtener la muestra. es importante la colaboración del paciente. X Muestra de orina recogida para un tiempo preestablecido. con tapa de rosca o prefe- riblemente con boca ancha y etiqueta idónea para anotar la información necesaria. vaciar la vejiga y eliminar toda la orina. de plástico o de vidrio. comenzar a recoger toda la orina de 24 horas.5 . c) Al cumplir las 24 horas. Al finalizar la recolección de orina.7. Añadir al frasco un estabilizante. con tapón de rosca. 1. No recoger las heces en el período menstrual. El frasco debe ser limpio. b) Posteriormente. el volumen de las heces para recoger debe ser igual al tamaño de una nuez. b) Limpiar las manos después de la recogida. posiblemente. los tubos de ensayo deben estar tapados. Toma de muestra de heces Para la recolección de muestra de heces. de boca ancha y con tapa de rosca. debe ser enviada inmediatamente al laboratorio.5.

Las muestras para exámenes de coagulación deben examinarse dentro de 2-3 horas. debe ser educado en la ciencia y técnica de la toma de muestras y así mejorar el sistema de calidad. es necesario transportarlas en termos con refrigerantes. En el transporte de estas muestras. cuando sean necesarias) debe ser acordada con la dirección del hospital y el responsable del laboratorio. evitando una inútil estancia en las diferentes secciones del hospital o en otra parte. esta modalidad de transporte no representa un problema para el buen resultado de la realización de los exámenes. El transporte de muestras susceptibles a adulteración con el tiempo. “metodología especial de los diferentes analitos”. garantizar una adecuada temperatura y evitar roturas con eventual esparcimiento de material. nombre del examen solicitado y eventuales informaciones clínicas. . es indispensable el empleo de termos de polietileno con hielo sintético o refrigerante. La modalidad del transporte de las muestras debe garantizar la seguridad de quien las transporta. En la cuarta parte de este manual. Es necesario que el personal destinado a la toma de muestras en las distintas secciones hospitalarias. debe realizarse con rapidez. resistente a los choques y a las compresiones. En caso de temperaturas más elevada. a) Sangre En la mayor parte. Si la muestra exige una conservación a baja temperatura. del laboratorio y de quien las recibe. Para el transporte de muestras de sangre total o sueros fuera de la unidad de salud. Todas las muestras tienen que llegar cuanto antes al laboratorio. se aconseja usar tubos de material de polietileno con tapones. colocar los tubos en un porta tubos de cartón.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 11 Tienen que ser lo suficientemente fuertes y manejables. Para evitar o disminuir los efectos de las vibraciones. comunicando la llegada al personal de laboratorio. los problemas están correlacionados a la temperatura y al tiempo. esto para evitar variaciones de temperatura. El laboratorio acepta y analiza sólo muestras acompañadas con toda la información y con la orden de solicitud del análisis. la temperatura no representa un factor crítico en el transporte de la muestra. Tiempo: Las muestras de bioquímica clínica tienen que ser examinadas dentro de 8 horas a partir de la extracción sanguínea. Temperatura: En general. La mayor parte de las muestras puede ser transportada a temperatura ambiente (18-20o C). se describe la eventual particularidad de la modalidad de transporte. La modalidad de la demanda (con informaciones para identificar al paciente.

o rechazar la muestra. Criterios para evaluar la aceptabilidad del material biológico: X Respeto del horario de llegada y salida de las muestras X Registro correcto de las muestras X Transporte correcto de los materiales biológicos X Identificación correcta X Tubo de ensayo idóneo X Cantidad suficiente de la muestra X Proporción correcta entre la sangre y el anticoagulante adecuado . utilizable para varios exámenes. Contiene la identificación del paciente y el tipo de examen por ejecutar: es muy importante no equivocar la secuencia o invertir muestras. 1.5. En el Laboratorio debe existir una documentación detallada diaria de las muestras rechazadas o señaladas de no conformidad y de las causas que motivaron tal decisión. Los criterios deben ser conocidos por todo el personal del laboratorio y las diferentes secciones del hospital. 12 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad b) Orina El transporte de la muestra de orina puede realizarse a más tardar entre 4-5 horas a partir de la recolección. por falta de idoneidad comprobada de la muestra. X Un tubo para cada sección del laboratorio. por paciente. y la naturaleza del problema debe ser escrito en el resultado). En función de los criterios abajo expuestos. Cuando se cuenta con una computadora.10. puede aceptar con reserva (escribiendo la anomalía encontrada.9. es necesario refrigerar las muestras. el responsable del laboratorio encarga a un técnico para la compilación de las hojas de trabajo. se puede utilizar: X Un único tubo. Al mismo tiempo. el técnico responsable de recibir la muestra verifica la adopción de todas las medidas previstas para aceptar la muestra en las diferentes fases pre-analíticas. c) Heces Pueden ser transportadas a temperatura ambiente en un tiempo no mayor de una hora para examen de citología. Organización del trabajo Para la toma de muestra. se le comunicará al remitente que envíe otra muestra. La hoja de trabajo se envía a cada sección con los sueros–plasmas por examinar. 1. Criterios de conformidad de las muestras A la llegada del material.5.

En caso que las muestras no se puedan transferir dentro de tres horas al laboratorio. X Para lograr plasma. se debe centrifugar cuanto antes. potasio. se recomienda efectuar la determinación en el más breve lapso de tiempo o. conservar la muestra en hielo. X Para lograr suero. Modalidad de conservación a) Sangre Un intervalo de tiempo muy largo desde la toma de la muestra hasta la realización de los análisis puede causar una modificación en la concentración del analito y en la actividad biológica. cloro. la bilirrubina.12. Los tubos tienen que estar tapados para evitar aerosol o fenómenos de evaporación. a 1. 1.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 13 X Uso correcto del conservante X Ausencia de coágulo (hematología o coagulación) X Ausencia de o moderada hemólisis X Suero no muy opalescente X Conservación a temperatura adecuada X No exposición a la luz solar directa X Respeto de régimen dietético (sangre oculta en heces). lipoclean. La exposición de la muestra a la luz solar puede determinar un descenso de hasta el 50% de la bilirrubina. Centrifugación de las muestras X La sangre proveniente de fuera del hospital debería llegar al laboratorio separada de la parte figurada. mediante la centrifugación. es necesario separar el suero o plasma desde la parte corpuscular.000– 1200 g. Centrifugar 5-15 min. X Se establece entre 45 minutos y 1 hora desde la toma de muestra. o por más tiempo en tubos de plástico. Para las otras determinaciones. X Muestras opalescentes se pueden clarificar con sustancias tipo PEG.11. X El tapón debe quitarse con mucho cuidado para evitar el esparcimiento de material potencialmente peligroso y para no mezclar las partes separadas (en modo particular el plasma). Para establecer la glucosa. iodio). En la mayor parte de los analitos. para química-clínica y 5. . la muestra se deja normalmente a temperatura ambiente por 30 minutos en tubos de vidrio. se puede conservar la concentración manteniendo a 20oC. 1. se usa una sustancia que inhibe la glicólisis (fluoro. para evitar hemólisis. El tiempo puede reducirse. si se usan sustancias especiales que activan la coagulación. en caso de imposibilidad.000 g. hay que efectuar los exámenes de hematología entre 4-8 horas a partir de la toma de muestras. para hemocoagulación. el suero se puede conservar hasta 8 horas a partir de la toma de la muestra a temperatura ambiente y por 24 horas en refrigeración. Para evitar el fenómeno de hemólisis y alteración de la morfología celular. por 15 min.5. Para los exámenes de coagulación. para proceder a la centrifugación y a la separación del suero. Hacen excepción el sodio.5. fosfatasa alcalina y glucosa.

1. se puede realizar a 2-4°C. c) Heces La conservación por varios días para el examen químico-físico y el examen de sangre oculta. b) Orina Existen varias modalidad de conservación de la orina. En general. X La orden del examen del servicio de emergencia debe contener la siguiente información: X Nombre y apellidos X Fecha X Procedencia X Sexo y edad (si es posible) X Diagnóstico presuntivo X Otras eventuales informaciones.6. cortisol. Acido Acético: La agregación de ácido acético (15 ml de ácido acético glacial) permite la determinación de muchos constituyentes. según el tipo de examen requerido: Refrigeración: La conservación a 2-4o C es el método más sencillo. tratamiento y entrega de resultados de muestras urgentes. metanefrina) y metabolitos especiales (histamina). Es indispensable la firma y sello del médico tratante. Carbonato de Sodio: La agregación de carbonato de sodio (5 g para una recolección de 24 horas) sirve como alcalinizante y está recomendada para la determinación de algunos analitos como: beta2-microbulina. La entidad de la reducción podrá ser desde 5 hasta 10 veces. porfirine. Por examen urgente se entiende aquéllos que se tienen que realizar en el más breve tiempo posible: X El examen de urgencia debe realizarse en un período no mayor de 1 hora. evitando la degradación y una orina alcalina (aldosterona. conforme la temperatura ambiente. las temperaturas más cercanas a 0°C (no congelar) reducen notablemente todas las reacciones de naturaleza química enzimática. urobilinógeno. . Exámenes urgentes El laboratorio define un procedimiento documentado para la recepción. estrógeno). Acido Clorhídrico: La agregación de ácido clorhídrico (15 ml de ácido clorhídrico concentrado para 1500-2000 ml de orina) se aconseja para la determinación de algunas hormonas (catecolaminas. El laboratorio define una política escrita para demandas verbales de muestras urgentes. especificando interferencia sólo con la determinación del peso específico. para la conservación de las muestras. 14 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Existen tablas para medir la glicólisis en relación con la temperatura y el tiempo de la toma de muestra y la realización del examen. X Las prestaciones de emergencia-urgencia deben brindar el servicio las 24 horas.

La toma de muestra que no cumpla con los requisitos previstos en los procedimientos de este Manual. y deben ser entregados sólo al paciente. X Sólo en caso de necesidad. con autorizacion escrita por el paciente. se pueden comunicar al médico tratante. Potasio. Estos límites de alarma podrían definirse previamente con los médicos clínicos que utilizan el servicio de laboratorio. 1. 1. Validación Todos los resultados son validados (confrontados con los valores de otros parámetros analíticos para verificar una eventual correlación clínica diagnóstica) y aprobados por el responsable del laboratorio o una persona designada.8. X Los resultados no se pueden entregar por teléfono. Entrega de resultados Los resultados deben ser retirados según el horario con la modalidad prevista en cada laboratorio. La valoración comprende también el Control de Calidad Interno y todas las fases de preparación. Los resultados pueden ser entregados a otra persona. interpretación y transmisión del informe de los resultados. X La entrega de resultados tiene que preservar la privacidad del paciente. podrá ser excluida con el señalamiento de no conformidad. El laboratorio establece procedimientos para notificar inmediatamente al médico sobre los resultados críticos. . Se pueden considerar exámenes urgentes de acuerdo al perfil de cada hospital los siguientes: X GLUCOSA X UREA X CREATININA X ELECTROLITOS (Sodio.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 15 El registro debe ser escrito de forma muy clara y legible. Cloro) X BILIRRUBINA TOTAL Y FRACCIONADA X TRANSAMINASAS (GOT Y GPT) X AMILASA X CK X CK MB X LDH X TEST DE EMBARAZO X EXAMEN GENERAL DE ORINA X BIOMETRIA HEMATICA COMPLETA X TIEMPO DE PROTOMBINA X APTT X FIBRINOGENO X CALCIO (cuando es útil en el diagnóstico de la hipocalcemia y de la pancreatitis) X BETA HCG (para el diagnóstico del embarazo extra uterino).7.

SEGUNDA PARTE INSTRUCCIONES INFORMATIVAS GUÍA PARA EL USO DE LOS SISTEMAS ANALÍTICOS COMIENZO DEL TRABAJO ERRORES EN LA FASE ANALÍTICA GESTIÓN DE LA SITUACIONES FUERA DE CONTROL TRABAJO FINAL .

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Finalidad a) Las presentes instrucciones informativas constituyen la guía para el funcionamiento correcto de los sistemas analíticos en química clínica. Operaciones preliminares Todas las informaciones detalladas para cada equipo deben estar accesibles en el puesto de trabajo. las metódicas deben permanecer en su caja.2.4. muestras. 2. 2. etc. La utilización óptima de los sistemas analíticos determinan: X El comportamiento igual de todo el personal (con mayor o menor experiencia). Generalidad Un sistema analítico está compuesto de: X Tecnología X Metódica X reactivos X calibradores X estándares X Controles Si al sistema analítico se añaden los operadores que lo usan y lo controlan. agua destilada. X Encender el equipo con el interruptor específico. reactivos y controles.3. Instrucción Las intrucciones informativas están en relación a todo el proceso de trabajo desde las operaciones preliminares hasta el fin de la sesión. X El intercambio entre los operadores sin alterar la calidad del servicio. papel. X La aplicación de controles sencillos de los sistemas. X Encender eventual impresora. X Verificar que se tenga todo lo necesario (cubetas. 2. X Verificar el correcto enchufe eléctrico del equipo y la ausencia de riesgo (humedad). se establece un sistema organizativo.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 19 2. Las siguientes intrucciones toman en consideración los sistemas analíticos conforme los puntos anteriores. reactivos. X Esperar que los programas operativos estén cargados. b) Generalidad y posibles causas de error en la fase analítica. . residuos. reactivos y material que pueda interferir con el correcto funcionamiento sean eliminados.). Para la reconstitución de los calibradores.1. Se identifican distintos procedimientos para: INSTRUMENTOS: X Verificar que todos los eventuales productos. estándares.

X Consultar el manual específico del equipo para resolver el problema. 20 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad X Verificar si se encuentran situaciones no previstas u otros problemas. llamar al responsable del laboratorio y. también llamar al técnico para el mantenimiento correctivo. X Si el problema persiste. conozcan claramente su rol en el equipo de trabajo así como el del conjunto del laboratorio. . La comunicación permanente de los distintos niveles de responsabilidad permite controlar la observación de los procedimientos establecidos y de las medidas de seguridad. Inspección diaria por parte del técnico o analista antes de comenzar a trabajar: Espectrofotómetro Pipetas Destilador o desionizador Balanzas Cubetas de lectura fotométricas Limpieza semanal: Cambio de agua de Baño María Mensual: Calibración de espectrofotómetros Calibración de pipetas Limpieza y control de balanzas Trimestral: Descongelamiento y limpieza de refrigeradores Limpieza del destilador Semestral: Descongelamiento y limpieza de congeladores Control general de la instalación eléctrica y de gas Anual: Calibración de balanzas de precisión. si el problema persiste. X Por cualquier problema muy grave. como el personal de apoyo que realice tareas de limpieza o mantenimiento. responsable de la ejecución de procedi- mientos de diagnóstico y control de calidad. Es recomendable que tanto el personal técnico. es preciso informar al responsable del laboratorio. así como la optimización de los mismos con el aporte de cada experiencia. Mantenimiento y control periódico de equipos Se debe contar con un programa anual de mantenimiento y control preventivo de los aparatos y equipos de laboratorio.

Un tipo de control muy frecuente para estos equipos es el patrón de absorbancia de sulfato de cobre y amonio a 540 nm. X Abrir delicadamente el frasco de reactivo sin crear aerosol (si es liofilizado). Algunos equipos de abertura normal hay que controlarla y mantenerla estrecha y uniforme para cada método. fecha de preparación y vencimiento. El ancho de la banda espectral de un fotómetro no es controlable. REACTIVOS: X Verificar que los reactivos sean suficientes e idóneos en cantidad. En los fotómetros el sistema de selección de la longitud de onda se desajusta y el error que ello ocasiona puede llegar a un 16%. Una abertura ancha deja entrar la luz dispersada disminuyendo la pureza espectral. X Antes de usar nuevos reactivos verificar: X Fecha de vencimiento: Si está vencido. es un factor variable que igualmente influye en la pureza espectral. Se obtienen absorbancias menores que con luz de alta pureza espectral y aún se puede perder la linealidad de una curva de calibración. X Número de lote: Usar preferiblemente el mismo lote corriente para evitar la recalibracion del equipo. Un error fotométrico sistemático resulta cuando se utiliza un fotómetro de filtro con rango espectral ancho. sin embargo cada día el laboratorio depende en mayor grado de los resultados de diversos equipos. También debe tomar en cuenta la temperatura del laboratorio debe estar entre 22 y 24oC y la humedad de 60 ± 10% para la protección de los filtros. el ancho de la banda de la luz está determinado por las aberturas de entrada y salida del monocromador. El analista debe conocer los límites de su equipo respecto a la pureza espectral para no utilizar su fotómetro inadecuadamente para ciertos métodos. siendo muy importante sobre todo para métodos cuyo resultado se calculan en base de un coeficiente de absorbancia y que por algún motivo no pueden ser controlados permanentemente por un patrón de la misma sustancia por ser esta inestable. es un factor intrínseco a la construcción del aparato. X Preparar los reactivos para el uso diario con los siguientes procedimientos: X Llevar a temperatura ambiente (si es necesario). etc. estos equipos se fundamentan en la ley de Beer.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 21 EQUIPO: Con frecuencia el control de calidad se limita al estudio del error total del análisis y la contribución de los equipos a este error se subestima. . cara. Sin embargo el ancho de la banda de luz en los fotómetros de espectro continuo. no se puede usar por motivo alguno. con el que se hace estudio de la reproducibilidad. El espectrofotómetro tiene que ser calibrado y controlado regularmente (seis meses) con patrones. Usar siempre los reactivos con el vencimiento más cercano.

X Verificar que los valores de la calibración son aquellos esperados. . X El número de lote: Usar preferiblemente siempre el mismo lote. Usar siempre los calibradores con el vencimiento más cercano. 30 segundos antes de volver a tapar el frasco de reactivo. X Después de 10 minutos. Si es posible. X Añadir pipeteando suavemente la cantidad necesaria de líquido para reconstituir el liofilizado. haciendo bajar suavemente por la pared del frasco y nunca crear vórtices. X Si se usan productos congelados. sin crear aerosol. agitar suavemente invirtiendo el frasco de tanto en tanto. haciéndolo por las paredes del frasco sin crear vórtices. 22 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad X “Pipetear” la cantidad necesaria de líquido para reconstituir el liofilizado.5 Calibración y control CALIBRACIÓN: Si no es necesario efectuar una nueva calibración. X Número de lote del reactivo. estándares y controles conforme los siguientes procedimientos: X Llevar a temperatura ambiente. 2. X Destapar suavemente el frasco de reactivo. Evitar absolutamente el descongelamiento y congelamiento. X Esperar. o usar los específicos agitadores durante otros 15 minutos. X Es obligatorio proceder con una nueva calibración cada vez que se cambia el lote de los reactivos. ESTANDARES Y CONTROLES: Antes de usar calibradores. Terminada la calibración. Preparar los calibradores. X Verificar que no hay variaciones significativas entre los valores de las calibraciones de los últimos 15 días. al menos. X Vencimiento de la calibración. X Después de los primeros 15 minutos. verificar: X Fecha de la última calibración. mezclar suavemente de tanto en tanto por inversión. no se puede usar por motivo alguno. verificar: X La fecha de vencimiento: Si está vencido. utilizar agitadores específicos otros 15 minutos. (indispensable para los controles). es necesario: X Verificar que las reacciones son lineales. X Dejar en reposo el tiempo necesario. CALIBRADORES. estándares y controles. X Esperar al menos 30 segundos antes de volver a tapar el frasco de reactivo. normalmente entre 10-15 minutos. descongelar rápidamente a 37oC y luego agitar con suavidad unas cuantas veces por inversión del recipiente.

8. Error dependiente de una alteración constante que se mantiene durante un período determinado. de la gestión de las situaciones “fuera de control” y de la gestión del fin de la sesión de trabajo. todos altos) es preciso verificar con el uso del C. X Errada la reconstitución o el uso de los reactivos. y reaplicar las reglas de bajo o fuera de control. buscando de forma individual el problema: X Errada la reconstitución o el uso de los calibradores. Para su valoración. X Errado el funcionamiento del equipo (temperatura. Inicio del trabajo Una vez verificadas las perfectas condiciones de los diferentes requisitos específicos de los equipos.7.I. o sea. sino que estén distribuidos según un comportamiento Gaussiano.C. Errores en la fase analítica Los errores en la fase analítica pueden ser: de sistema. y grosero.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 23 X Archivar al menos por un mes los valores de las calibraciones para un eventual control. El primero y el más importante de los controles por realizar es verificar que la mayoría de los resultados presentados por el mismo analista no estén todos “a la deriva”. verificando si una o más reglas establecidas son violadas. con suero de control con valores conocidos. En caso que las calibraciones no sean aceptables. CONTROL: Para evaluar el correcto funcionamiento de los sistemas analíticos. aleatorio o casual. Error de sistema Influye siempre de la misma manera sobre cada determinación. limpieza. La negatividad indica una situación “subcontrol”. En cada caso. se precisa evaluar pronto el C. 2.). es posible empezar la sesión de trabajo. 2. . etc.C. el examen de los controles tiene que efectuarse en un tiempo lo suficientemente breve para lograr las medidas correctivas antes de la validación de la entrega de los resultados. provoca la desviación unívoca (arriba o abajo) del valor medio medido.I. Si se verifica un comportamiento anómalo de los valores (todos bajos. se precisa repetirlas.6. 2. Gestión de la sesión de trabajo Se compone desde un inicio. con respecto al valor esperado. La violación de una o más reglas significa una situación “fuera de control” que precisa oportunas medidas correctivas. el resultado del control se confronta con los valores esperados.

En teoría. Se plantean algunas líneas de comportamiento: . se tendría que eliminar todos los resultados engendrados en el contexto. No es posible dar indicaciones de comportamiento unívoco. X Empleo errado de pipetas. Error aleatorio o casual Es (normalmente) de pequeña entidad. Gestión de las situaciones “fuera de control” El programa del CCI tiene la finalidad de verificar si. El procedimiento analítico tendrá que ser descompuesto en todos sus elementos. X Descuidos graves en el procedimiento de la técnica. coincide con la precisión-imprecisión. 24 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Coincide con exactitud (concordancia entre el valor “verdadero” y el valor encontrado). ligado al desarrollo de la determinación. Son errores difícilmente controlables. X Selección errada de filtros. Error grosero Cae completamente fuera y alejado del rango del colectivo de los datos normales permisibles. 2. Este tipo de error da lugar a que la repetición de una misma medición obtenga en cada ocasión un valor distinto. y repetir la serie analítica. La gestión de las situaciones “fuera de control” representa el aspecto que necesita un mayor empeño profesional y el mayor conocimiento de los aspectos técnicos de los diferentes análisis y una gran experiencia. con una probabilidad estadística aceptable. las características iniciales del sistema analítico (en su conjunto) presentó variaciones tan importantes para estar señaladas desde el sistema de control. generando situaciones fuera de control. Esto. casi nunca es posible. antes de emitir los informes de los resultados de las muestras analizadas en el curso de la serie. La señalación fuera de control tiene que estar disponible en un tiempo lo suficientemente breve que permita activar acciones correctivas para alcanzar la situación bajo control.9. X Errores en los cálculos. debido a causas no evidentes. en la práctica. Estos errores se pueden disminuir o eliminar. Los valores normalmente se distribuyen alrededor de un valor medio. Las medidas correctivas son tarea del director del laboratorio y de los técnicos con mayor experiencia. los cuales tendrán que ser valorados individualmente para eliminar la causa del error. al ejecutar una o más series analíticas. buscar y eliminar las causas. Posibles causas: X Descuidos graves en la manipulación de la muestra.

. es necesario reanalizar los controles en el contexto a un número consistente de muestras desconocidas. buscar posibles causas de la anomalía y repetir los análisis. el responsable puede decidir ignorar temporalmente la señal fuera de control y considerarlo como señal de alarma. lo suficiente para generar situaciones fuera de control). X Los resultados están controlados y validados para el instrumento. Sólo cuando todas estas instrucciones están ejecutadas. se puede reanalizar sólo los controles y contextualmente un número limitado de muestras desconocidas: si los resultados de los controles no generan más situaciones fuera de control. 2. el técnico o el director asume la responsabilidad de la decisión. sobre todo si es acompañado de una distribución decididamente irregular de los valores de las muestras desconocidas (todos altos o todos bajos). En cada caso. d) En caso de alejamiento decididamente marcado. es posible apagar (si es indicado) o dejar encendido el equipo. b) En la situación como la del precedente punto a) alejamiento pequeño con valores de las muestras de los enfermos substancialmente regulares. X Los equipos están en perfecto estado de uso para el día siguiente o para el trabajo de la tarde o de la noche.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 25 a) Si el alejamiento de los valores de control es pequeño (sin embargo. Fin de la sesión de trabajo La sesión de trabajo se puede considerar terminada cuando: X Todos los exámenes para aquel equipo estén terminados según las reglas. se puede aceptar la serie. se puede aceptar la serie.10. Si los valores de controles están en el rango prefijado y los valores de las muestras desconocidas no se modifican substancialmente. c) Si el alejamiento de los resultados de control desde el valor esperado es más consistente. la cual tendrá que registrarse con la respectiva nota explicativa de la motivación y conservarse (archivo). o limitado a un solo valor (en caso que se usen dos sueros de control) y la distribución de los valores obtenidos para las muestras desconocidas analizadas en el contexto es sustancialmente regular. y terminar el propio turno de trabajo. se tiene que considerar atentamente la oportunidad de suspender la validación de los valores analíticos. X Los controles están archivados. La modalidad de esta intervención depende de la experiencia del responsable y de las características del sistema analítico. X Todas las operaciones de mantenimiento preventivo se han ejecutado con la tecnología prevista.

TERCERA PARTE NORMAS DE PROCEDIMIENTO DE CONTROL DE CALIDAD INTERNO VALIDACIÓN RETROSPECTIVA ARCHIVO .

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y efectúa los exámenes y el CCI. Ámbito de referencia Este procedimiento está aplicado a laboratorios de análisis para todo el personal. El control de calidad es parte integrante del sistema de calidad. Generalidades El laboratorio tiene que planear un sistema que permita verificar un buen funcionamiento de los sistemas analíticos.1. El laboratorio de análisis de químicas clínicas tiene que predisponer. . X El técnico que trabaja directamente sobre los sistemas analíticos. X Usa material idóneo de referencia. El laboratorio verifica seriamente el mantenimiento de las tecnologías y activa procesos de control de calidad para individualizar los errores en el curso de los análisis. De manera que. para cambiar: X El sistema analítico X La organización total del trabajo X El técnico 3. Este monitoreo tiene que ser ejecutado mediante la verificación del control de calidad interno.3. el cual garantiza la conformidad de sus productos y los requisitos específicos. cada uno de cuyos miembros debe conocer los principios sobre los cuales ha de tomar las propias decisiones. La verificación se basa además en la utilización óptima de las tecnologías (mantenimiento) sobre la idoneidad del CCI. Responsabilidad La responsabilidad en la aplicación de estos procedimientos es trabajo de: X El director del laboratorio para la correcta aplicación del procedimiento de mantenimiento y de control de los sistemas analíticos. documentar y mantener activo un sistema de calidad.2. o bien.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 29 3.4. las metódicas y los técnicos. 3. Finalidad El presente procedimiento identifica la modalidad de verificar y controlar los sistemas analíticos para garantizar la idoneidad de la “sesión analítica”. El procedimiento tiene la finalidad de: X Verificar en tiempo real los procedimientos de la serie analítica. 3. las tecnologías. el laboratorio: X Realiza un programa de CCI. X Señalar las situaciones “fuera de control” y activar en tiempo lo suficientemente breve medidas correctivas para volver a llevar la situación “bajo control”. X Conocer retrospectivamente la precisión y la exactitud.

X Poner el suero de control todos los días en las diferentes series analíticas. etc. y no aquél que piensa el técnico encargado. valorándolos de manera individual como posible causa de error casual o de sistema. En caso de errores. vencimiento. A partir de estas premisas. A través del CCI. El control de calidad interno se realiza insertando entre las muestras por examinar una o más muestras apropiadas (suero de control). usa métodos reconocidos en la literatura (cusum. mal calibrado. reactivos. analista. método de la media diaria). X Anotar el resultado obtenido. Control de Calidad Interno El control interno de calidad —a través del uso de procedimientos idóneos— permite descubrir y cuantificar los errores en la fase analítica y clasificarlos y. deterioro.. se logra el control de la veracidad del sistema analítico. X No realizar ningún tratamiento preferencial a los sueros de control. . 30 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad X Cuando no es posible usar sueros de control para el CCI. almacenamiento inadecuado. resulta claro que el CCI no tiene la finalidad y tampoco la posibilidad de resolver problemas que controlan la imprecisión y la inexactitud de los resultados: sirve simplemente para descubrir. dentro de determinados límites. después refrigeración. equipo. espera de temperatura ambiente. comprobando después la correspondencia entre el valor obtenido y el valor “verdadero” (exactitud) y la correspondencia entre los resultados de más determinaciones efectuadas sobre la misma muestra en la misma serie o en series distintas (precisión). Equipos: Longitud de onda equivocada. minimizarlos. el procedimiento analítico tendrá que revisarse en sus elementos: método.1. exposición a la luz).4. puede dar la desviación de la linealidad: con aumento de absorbancia y extinción no lineal. sea como precisión (concordancia entre los valores conseguidos con repetidas determinaciones sobre la misma muestra). y para eliminarlos o disminuirlos. oxidación. identificar y cuantificar los errores en la fase analítica. deterioro (contaminación. 3. Se logra una mejoría de la calidad sólo tomando las respectivas medidas correctivas. vencimiento. sea como exactitud (concordancia entre el valor “verdadero” y el valor conseguido) y sea como sistema utilizado de trabajo (sensibilidad. Concepto fundamental e informador: X Analizar los controles de manera idéntica a las muestras de los pacientes. estándares. especificidad y eficiencia instrumental). Reactivos: Preparación inadecuada. voltaje eléctrico (estabilizador). evidenciar. X Aplica reglas severas para el monitoreo de la sesión analítica y para introducir eventuales medidas correctivas. Posibles causas de error Estándares: Preparación inadecuada. Filtros: Calidad insatisfactoria.

impericia o ignorancia. cumplirse el tiempo. sin perjuicio de la adecuada supervisión y apoyo por parte de otros niveles jerárquicos. Cubetas: Sucia por contactos de los dedos por el lado donde pasa la luz. X Descuidos graves en el procedimiento de la técnica. rayadas. húmedas por fuera. Técnico: Errada manualidad.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 31 Lámpara: Envejecimiento. las caracte- rísticas iniciales del sistema analítico (en su conjunto) hubo variaciones importantes de señalar desde el sistema de control. Incubación: Temperatura adecuada. burbujitas en la solución. Pipetas: En mal estado. 4) Garantizar una dinámica alimentación y retroalimentación entre los elementos que producen los resultados de los análisis y el nivel que supervisa su calidad.2. las posibles causas son: X Descuidos graves en la manipulación de la muestra.4. con idóneas medidas antes de proceder a la entrega del resultado. con una probabilidad estadística aceptable. antes de emitir los resultados de las muestras analizadas de la serie. esperar calentamiento. Blanco: Utilizar el blanco respectivo por cada muestra. escrito en español. nocturna) para aprobar la intervención. 2) Contribuye al mejoramiento de la calidad analítica de las determinaciones diagnósticas y promueve la introducción de procedimientos de mayor sensibilidad y/o especificidad. cuando la metódica lo indica. 3) Debe ser una actividad ejecutada íntegramente en cada laboratorio. en cualquiera momento. al ejecutar una o más series analíticas. generando situaciones fuera de control. En el caso de error grosero (que cae completamente fuera y alejado del rango del colectivo de los datos normales permisibles). turbidez. Objetivos del programa de CCI 1) Asegura la confiabilidad y el funcionamiento eficiente del laboratorio. X Selección errada de filtros. X Errores en los cálculos. El programa tiene el fin de verificar si. El procedimiento analítico bien documentado. Muestra: Compuestos coloreados podrían sufrir cambios de intensidad de color. Factor de cálculo: Empleo no correcto. Agua: Mala calidad. . Ejecutar el CCI todos los días y sobre todas las series analíticas (emergencia. X Empleo errado de pipetas. si es necesario. Método: Poca sensibilidad. La señalación fuera de control debe estar disponible en un tiempo breve que permita activar acciones correctivas para alcanzar la situación bajo control. 3. no suficientemente llena.

Organización La correcta ejecución. 3. en medio o al final de la muestras. la casa comercial. 32 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad El programa sirve también para acumular a través del tiempo los mecanismos de la evaluación retrospectiva. Evaluación inmediata de los resultados En este contexto. se cierra un período y se abre otro. con el objetivo de individualizar las condiciones ideales. 3. X Para cada control tiene que conocerse su matriz. X Al cambiar un lote de reactivo. los datos útiles para el conocimiento de las características de la precisión de los procedimientos analíticos (desviación estándar y coeficiente de variación). Algunos criterios fundamentales en la aplicación del CCI son: X Duración por un año.2 o +/. X Ubicar los sueros de control antes de las muestras y. los explica detalladamente.7. de controlar en tiempo real el procedimiento de cada analito y de aplicar reglas que pueden corregir la sección analítica. 3.5. facilita las cartas de control para consultas y las archiva. 3. Las cartas del CCI deben ser fácilmente consultables por todo el personal. registro. Descripción de los controles El control de calidad permite la verificación interna diaria. Aceptación de los resultados En la evaluación de los valores del control de calidad interno se tendrá en consideración: 1. si es posible a dos niveles: uno normal y uno patológico. Un valor de tendencia central (media aritmética o target). En caso negativo. si es necesario. 2. Los controles deben ser puestos al comienzo de la serie analítica.7.1. y se verifica al mismo tiempo si son violadas una o más reglas. “inmediato” indica que la valoración se da en un tiempo lo suficientemente breve que permita efectuar las eventuales medidas correctivas antes de emitir el informe de los resultados para las muestras desconocidas analizadas contextualmente. una segunda corrida en posición casual o después de un número fijo de muestras. El director de laboratorio vigila la ejecución y aplicación de los controles. por personas externas y por eventuales visitas de inspección. Los valores encontrados de los sueros de control se comparan con los rangos preestablecidos de los valores conocidos (por la casa comercial). en casos particulares.6.3 desviación estándar y coeficiente de variación). Una medida de dispersión (+/. divulgación y archivo del CCI es responsabilidad directa de los técnicos y profesionales de laboratorio. X Utilización con valores conocidos. establecidas en precedencia. la situación está .

. La violación de una o más reglas íntegra o una situación de alarma o una fuera de control. permite realizar medidas correctivas de modo oportuno. se acerque a la clásica campana de Gauss o de distribución normal. de modo que cuando el número de medidas sea lo suficientemente grande.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 33 bajo control. la desviación estándar y el coeficiente de variación. X2. por un mismo operador y condiciones. 3. XN N= número total de datos El tamaño de la medida. Estudio estadístico de los datos Medidas de posición y variabilidad de los datos. Figura 1. Si se repite una medida con todos los cuidados recomendados. Curva de distribución normal (gaussiana). Esos valores se distribuirán en torno a uno más frecuente. X = Σ Xi N donde: X= es igual a la media aritmética o promedio aritmético Σ= es la sumatoria Xi= representa cualquiera de los N valores X1. la cual expresa el error casual. Las medidas de posición y variabilidad que se definen son la media aritmética o media. la representación gráfica de estas frecuencias versus sus valores. tal como está referida en la figura 1. Media aritmética o media (X): Es el valor promedio del conjunto de las mediciones (Xi).8. la variabilidad o dispersión de cada valor alrededor del valor medio está representada por la desviación estándar. X3. Cada medida es afectada por un cierto error. está demostrado estadísticamente que los valores obtenidos no serán idénticos sino presuntamente semejantes entre ellos.

se abarca el 95. dividido entre el número total de los valores examinados. La desviación estándar se utiliza para definir los límites entre los cuales un valor de control puede definirse como aceptable. 68. se puede decir que la desviación estándar es igual a la raíz cuadrada de la sumatoria de los cuadrados de las diferencias de cada valor de un grupo. Si se considera el área comprendida entre (X) ± 3 desviación estándar. el 68.3 95.3% de las mediciones se estiman comprendidas en ese rango. se abarca el 99.8% de las mediciones. En una distribución normal o Gaussiana.5 99.8 µ−σ µ+σ µ−2σ µ+2σ µ−3σ µ+3σ Figura 2.Curva de distribución normal con áreas cubiertas hasta 3 desvíos estándar (ds) . o sea. el área comprendida entre la media (X) ± 1 desviación estándar representa cerca del 68% del área total. desde la media aritmética de ellos. menos uno.55% de las mediciones.. 34 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad La desviación estándar se calcula con la fórmula: donde: s = desviación estándar n = número de las pruebas X = cada valor X = promedio X – X = diferencia entre cada valor y el promedio Σ (X – X)² = sumatoria de los cuadrados de las diferencias En la práctica. Si se considera el área comprendida entre (X) ± 2 desviación estándar.

Impresisa y exacta: muchas variaciones en el nivel de desempeño la persona que ejecuta una prueba. Precisión y exactitud están. el problema se resuelve con la implantación de programas internos y externos del control de calidad. sea en la misma serie (precisión en la serie). se obtendrá precisión entre días. La imprecisión se expresa cuantitativamente con la desviación estándar = s . sea en varias series (precisión entre las series). Con tal parámetro se mide la inexactitud (diferencia entre el valor alcanzado y el valor “verdadero”). lo que se mide con este parámetro es la imprecisión de los resultados. La mejora del desempeño puede lograrse mediante el uso de programa interno de control de calidad. La precisión se cuantifica por el promedio (X). y alta desviación estándar (s). con graves repercusiones técnicas. Porcentaje de error (% E) alto. En realidad. aunque los resultados no fuesen de valor real. por su parte. indica la correspondencia entre el valor obtenido en una muestra (o mejor el promedio de una serie de determinaciones sobre la misma muestra) y el valor “verdadero”. tanto aleatorios como sistemáticos. que será tanto mayor cuanto mayor resulte la dispersión de los resultados. la desviación estándar (ds) y el coeficiente de variación. Porcentaje de error (%E) bajo y alto desviación estándar (s). Imprecisa e inexacta: indica la presencia de errores brutos. . por tanto. dos parámetros completamente independientes entre ellos. La exactitud. El ejemplo clásico del polígono de tiro aclara los dos diferentes conceptos. Si las series pertenecen a varios días.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 35 Precisión y Exactitud El análisis de los errores puede hacerse con gráficos que muestran las diferentes posibilidades: Por precisión se indica la dispersión de los resultados obtenidos con análisis repetidos sobre la misma muestra.

Porcentaje de error (% E) alto. 36 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Buena precisión. Buena precisión y exactitud: módica dispersión dispuesta simétricamente alrededor del blanco. incluyendo así prácticamente todos los resultados de medida con relación al error casual o inevitable. . en términos estadísticos “límites de confianza” del resultado: son los límites de concentración entre los cuales se puede tener “confianza”. En el laboratorio clínico asumen. 3. el límite ± 3s. y baja desviación estándar (s). y baja desviación estándar (s). pero cometen siempre un error sistemático. escasa exactitud: los golpes están concentrados. está incluida con probabilidad igual al 95. si no. sin embargo. Indica que los componentes de un laboratorio realizan un proceso de manera semejante. Porcentaje de error (%E) bajo. intervalo entre el cual se encuentra el 99.8% de todos los resultados de medida. En cuanto a la concentración “verdadera” de la sustancia analizada en la muestra.9 Límites de confianza Los valores correspondientes a X ± 2 s se denominan. Muestra un buen desempeño de la prueba y del laboratorio. no se disponen uniformemente alrededor del blanco. La mejora del desempeño puede lograrse mediante el uso de programa externo.55%.

El límite 2s se denomina límite de alarma. El gráfico se alcanza. insertando diariamente los valores encontrados de los sueros de control sobre el papel. Predisponer papel por un período de aproximadamente un mes. de modo que los límites 3ds estén cómodamente incluidos. límite de acción. Presentación gráfica manual de los resultados Es de gran ventaja recurrir a un tipo de soporte gráfico para la presentación numérica de los resultado de los valores de los sueros de control con un intervalo preestablecido (± 3 ds). Las líneas ± 2ds se denominan “límite de alarma” y las líneas ± 3ds. sólo 5 sobre 100 valores tendrían que estar fuera de este intervalo. preparada y realizada manualmente. Se calcula con la fórmula: s . que está representado por la “Tabla de Control”. en los últimos años.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 37 El intervalo entre los límites 2s se define como intervalo de alarma. . Dar una justa expansión al eje de las “ordenadas”. Trazar sobre el papel las líneas (horizontales) correspondientes a 2ds y 3ds.10. con la adopción de técnicas específicas que permiten alcanzar una mayor exactitud. Tal porcentaje se llama coeficiente de variación. 3. la tecnología ha permitido mejorar notablemente la precisión analítica. y para verificar las observaciones de un sistema de reglas preestablecidas. La desviación estándar puede expresarse como porcentaje del valor medio. Al elaborar la “tabla de control”. se deben tener presentes las siguientes reglas: 1. y el límite 3s. límite de acción o “intervención”. y se llama papel de control de la media o de SHEWART- LEVEY-JANNINGS. porque en relación con las leyes de estadística. 2. 100 CV = _________ % X donde: CV = coeficiente de variación S = desviación estándar X = promedio Hay que tener presente que. 3.

38 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad

RECONOCIMIENTO DE ALGUNOS ERRORES ANALÍTICOS
POR MEDIO DE LAS TABLAS DE CONTROL
Anomalía comprobada Causa probable de anomalía Medidas por adoptar
Descarte excesivo entre Escasa precisión al ejecutar Controlar volumen, tiempos
dos estándares o dos los análisis. analíticos, temperatura, cristalería
controles. estabilidad fotométrica.
Imprevista descendencia Incompleto desarrollo de color Repetir serie analítica.
de valores analíticos, o parcial decoloración de Si la descendencia no es excesiva,
estándares y de controles. estándares o controles. se puede repetir sólo algunos análisis
Impureza en los reactivos. y utilizar la serie, si los resultados
obtenidos están sobrepuestos.
Controlar tiempo y reactivos.
Descendencia progresiva Deteriorado estándar. Preparar un nuevo estándar.
analítica.

3.10.1 Presentación gráfica de los resultados encontrados por medio de
un programa de computadora, con aplicación práctica del
algoritmo de Westgard (reglas sencillas y múltiples)

REGLAS Y ALGORITMOS QUE SE UTILIZAN
PARA EVIDENCIAR SITUACIONES FUERA DE CONTROL

Con la evaluación de los controles, se comprueba la violación o no de las reglas
preestablecidas, conocidas y aceptadas por todo el personal del laboratorio.
La violación de una o más reglas engendra una situación fuera de control o de alarma, e
impone oportunas intervenciones correctivas.
Las reglas pueden ser “sencillas” o “múltiples”.
En el primer caso, se tiene que verificar la violación de cada regla (separadamente, si se usan
dos controles para diferentes concentraciones).
En las reglas múltiples, la evaluación fuera de control y de alarma está integrada según un
prefijado algoritmo secuencial. Es de difícil aplicación en la tabla de control manual; no
obstante, se puede aplicar en computadora con un programa idóneo.
Para las reglas múltiples, sirven dos sueros de control a diferentes niveles.

Reglas sencillas
X 2 sobre 3 valores de control consecutivos se posicionan al extremo de las líneas 2ds en
la misma dirección.
X 4 sobre 5 valores de control consecutivos se posicionan al extremo de las líneas 1ds en
la misma dirección (normalmente, estas líneas no están trazadas sobre la tabla de control
por simplificación).

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 39

X 7 valores consecutivos de control se posicionan por encima o por debajo de la media.
X 7 valores de control consecutivos se disponen en tendencia (creciente o decreciente)
continua, pudiendo una línea que los junte y que corte la línea del promedio.
X Los valores de control se posicionan a lo extremo de la línea 3ds.

Reglas múltiples
X El error relativo en dos controles es superior a ± 2ds. Puede tratarse de los 2 materiales
incluidos en una misma serie o de un solo material que infrinja la regla en dos series
consecutivas. Es una alarma por error de sistema.
X Uno u otro de los dos valores de control se posicionan al extremo de las líneas 3ds: error
casual, o podría ser el comienzo de un considerable error de sistema.
X Ambos valores de control se posicionan al extremo de las líneas 2ds, en la misma
dirección y en la misma serie analítica: Error de sistema.
X Un valor de control se posiciona al extremo de la línea 2ds y otro al extremo de otra
línea 2ds (la distancia entre los dos valores supera 4ds): es una regla aplicada sólo a lo
interno de la sesión: Error de imprecisión.
X Los últimos 4 valores de control (2+2) se posicionan al extremo de la línea 1ds en la
misma dirección: Error sistemático.
X Los últimos 10 valores de control (5+5) se posicionan por encima o por debajo de la
línea del promedio: Error sistemático.
La tabla siguiente (en un programa de CCI en computadora) muestra una aplicación práctica
del algoritmo de Westgard (reglas múltiples). Utilizando dos sueros de control, se entra en
una rutina de reglas de control (algoritmo de Westgard) que se examinan en secuencia. Las
alarmas son:
1 3s: El error relativo en uno cualquiera de los dos controles es superior a ± 3s.

2 2s: El error relativo en dos controles es superior a ± 2s. Puede tratarse de los 2
materiales incluidos en una misma serie o de un solo material que infrinja la regla
en dos series consecutivas. Error de sistema.

R 4s : La diferencia entre los errores relativos obtenidos en los dos controles de la misma
serie es superior a 4s. Por ejemplo, uno desvía +2,3s y el otro -1,8s. Error en
la precisión.

4 1s: Se han obtenido cuatro errores relativos consecutivos superiores a ± 1s en el
mismo sentido (positivo o negativo). Puede ocurrir con los dos materiales en dos
series consecutivas o con un material en cuatro series consecutivas. Error de
sistema.

10 Xm: Se han obtenido diez errores relativos consecutivos, todos ellos positivos o todos
ellos negativos. Puede ocurrir con los dos materiales en cinco serie consecutivas
o con un material en diez series consecutivas. Error de sistema.

40 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad

El procedimiento de las reglas múltiples se considera el más “poderoso” y en capacidad de
proveer la menor cantidad de falsa alarma.

3.11 Gestión de las situaciones fuera de control
La violación de una o más reglas integra una situación “fuera de control”.
Representa el aspecto que necesita un mayor empeño profesional y el mayor conocimiento
de los aspectos técnicos de los diferentes análisis, lo mismo que gran experiencia.
No es posible dar indicaciones de comportamiento unívoco.
En teoría, se tendría que eliminar todos los resultados generados en el contexto, buscar y
eliminar las causas, y repetir la serie analítica. Esto, en la práctica, casi nunca es posible.
El procedimiento analítico tendría que estar descompuesto en todos sus elementos, los cuales
tendrían que ser valorados uno a uno para eliminar la causa del error.
Se plantean algunas líneas de comportamiento:
A) Si el alejamiento de los valores de control es pequeño (aunque suficiente para generar
situaciones fuera de control), o limitado a un solo valor (en caso que se usen dos sueros
de control) y la distribución de los valores obtenidos para las muestras desconocidas
analizadas contextualmente es sustancialmente regular, el responsable puede decidir
ignorar temporalmente la señal fuera de control y considerarla como señal de alarma.
B) En una situación como la descrita en el punto anterior (poco alejamiento con valores de
las muestra de los enfermos substancialmente regular), se puede reanalizar sólo los
controles y un número limitado de muestras desconocidas: si los resultados de los
controles no generan más situaciones fuera de control, se puede aceptar la serie.
C) Si el alejamiento de los resultados de control desde el valor esperado es más consistente,
se precisa reanalizar los controles contextualmente en un número consistente de muestras
desconocidas. Si los valores de controles están en el rango prefijado y los valores de las
muestras desconocidas no se modifican substancialmente, se puede aceptar la serie.
D) En caso de alejamiento decididamente marcado, sobre todo si está acompañado de una
distribución irregular de los valores de las muestras desconocidas (todos altos o todos
bajos), se tiene que considerar atentamente la oportunidad de suspender la validación de
los valores analíticos, buscar posibles causas de la anomalía y repetir los análisis. La
modalidad de esta intervención depende de la experiencia del responsable y de las
características del sistema analítico.
En cada caso, el técnico o el director asume la responsabilidad de la decisión, que debe
registrarse con nota explicativa de la motivación y conservarse (archivo).

3.12 Control de Calidad Interno sin sueros de control
Método de la suma cumulativa “cusum”
Se calcula la media de todas las determinaciones de un parámetro bioquímico, ejecutadas
cada día (ej. glucosa, colesterol, etc.), excluyendo los resultados patológicos con un límite

Este método es más eficaz en la medida que es más numerosa la población examinada. se logrará que la media de los resultados sea casi constante en el tiempo. desde la media calculada sobre los valores. Si se verificará un error de sistema de los análisis. se efectúan evaluaciones retrospectivas basadas substancialmente sobre el cálculo de: X Media aritmética X Desviación estándar X Coeficiente de variación o C. X sobre la verificación de cada característica analítica. la media diaria de los pacientes externos es diferente de aquélla de los enfermos internos. 3. y las diferencias obtenidas teniendo presente el signo.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 41 arbitrario preestablecido.). de cualquier manera. se logra una mutación (hacia arriba o abajo) en la inclinación total del gráfico “cusum”. se sustrae este valor K. las diferencias de cada día tienden a anularse estadísticamen- te y se obtendrá una línea con variaciones bastante paralela a la línea central (abscisa). se grafican en un papel de control. etc. plaquetas). Variando la exactitud. X sobre el mantenimiento de los sistemas implicados. por ejemplo mensual o. blancos. cuando estén disponibles al menos veinte resultados de controles consecutivos.13 Evaluación retrospectiva Con plazo prefijado. Los valores encontrados del coeficiente de variación son valores típicos de precisión- imprecisión del laboratorio en un determinado período.V. Si el número de las determinaciones periódicas es suficientemente alto. Establecer para cada parámetro un valor de referencia (K). se modificará la exactitud de los resultados y la media periódica. . Muy útil para el control de tamaños. Si el método está bajo control. Método de la media diaria Algunos autores recomiendan utilizar sólo los resultados contenidos en un intervalo normal (también con un número bajo de resultados: sólo 10) para lograr una media diaria lo suficientemente estable. Es el único método de control de calidad para evidenciar también variaciones pre-analíticas. y sufre variaciones en relación con la población (pacientes hospitalizado y externos). Para algunos parámetros (sodio o proteínas totales. para los cuales no está siempre disponible el material de control (glóbulos rojos. Esta técnica tiene un valor esencialmente retrospectivo. el más cercano a la media periódica: cada día. Variaciones de estos parámetros estadísticos imponen intervenciones: X sobre la calibración. Las mutaciones son fácilmente observables a simple vista.

Mantener registros. X Proveer una base de datos para la evaluación a mediano y largo plazo.14 Archivo El archivo de los datos tiene en el CCI el fin de: X Documentar la ejecución diaria del CCI. El archivo puede realizarse sobre un soporte de papel o en magnético. de modo que permita hacer una pronta consulta cuanto se desee. un año para la realización de las eventuales intervenciones correctivas. 42 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 3. Tiene que estar ordenado. X Realizar evaluaciones periódicas de las situaciones fuera de control. . al menos.

CUARTA PARTE PROCEDIMIENTO DE METODOLOGÍA ESPECÍFICA PARA LOS EXÁMENES DE QUÍMICA CLÍNICA .

.

Indicaciones 3. Modo de escribir los resultados 4. neoplasia linfomielo-proliferativa (como linfomas. Conservación 8. policitemia). La determinación del nivel del ácido úrico está indicado en el diagnóstico y monitoreo de algunos desórdenes metabólicos dietéticos: gota. Criterio de validación 12. Modalidad de solicitud Sólo en rutina. La mayor parte del ácido úrico es eliminada por el riñón a través de un mecanismo de filtración.1 ÁCIDO ÚRICO Generalidad El ácido úrico es el producto final del catabolismo de las purinas (adenina. Valores de referencia 11. guanina) provenientes del exterior con la alimentación (parte exógena) y del interior con el ácido nucleico (parte endógena). a diferencia de todas las especies animales.0 Finalidad El presente procedimiento describe. Indicaciones La alteración puede estar relacionada con dietas ricas en purinas o con aumentada producción endógena o con una reducida excreción. síndrome dismetabólico alimenticio. Modalidad de solicitud 4. se encuentra en forma de urato monosódico y está ligado a proteínas (albúmina. Todas las purinas se transforman en xantina e hipoxantina. detallada y específicamente cada examen de química clínica: 1. Transporte 7.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 45 4. enfermedad del riñón y pacientes en terapias citostática o radioterapia. y no puede transformar el ácido úrico en alantoína. Preparación del paciente 5. la enzima xantina-oxidada las oxida y las convierte en ácido úrico. El ácido úrico es poco soluble en la sangre. Metódicas de determinación con relativas interferencias 10. reabsorción y excreción. después. Generalidad 2. Al hombre. leucemias. Modalidad de la toma de muestra 6. anemia hemolítica. alfa 1 y alfa 2 globulina). le falta la enzima uricasa. Verificación de la muestra 9. .

46 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Preparación del paciente Ayuno. Por la disminución de la extinción óptica. la intensidad del color es proporcional a la cantidad de ácido úrico. filamentos de fibrina.p. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. la toma de muestra se puede conservar por cinco días de 2-4oC y por 6 meses a –20oC. la absorbancia a esa longitud de onda está completamente eliminada por la acción de la uricasa. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. en el resultado la no idoneidad de la muestra. la cual transforma el ácido úrico en alantoína. turbidez. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Transporte Se puede transportar a temperatura ambiente. Método físico-enzimático El ácido úrico presenta en ultravioleta un pico de absorbancia alrededor de 290 nm. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. Antes de desproteinizar con el Folin Wu. se conoce la concentración del ácido úrico. Conservación Centrifugación y separación del suero. A) Registro Escrito claramente.m. presencia de coágulos. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. Señalar. . Metódicas de determinación: Método colorimetrico El ácido úrico en ambiente alcalino reduce el ácido fosfotúngstico con formación de color azul. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. eventualmente.

. control normal y patológico. Ácido úrico + O2 + 2 H2O uricasa a alantoína + CO2 + H2O2 ———> H2O2 + 4. en las mismas condiciones que las muestras. en presencia de POD y 4-AF y DCPS.0 mg/dl. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica es lineal hasta 25.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 47 Método enzimático El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno que. Control de Calidad Se deberá usar sueros.Amino antipirina + DCFS peroxidasa Quinoneimina + 4 H2O ————> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. forma un compuesto rosáceo.

Modo de escribir los resultados El ácido úrico se escribe con una sola cifra decimal. metildopa. 48 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 0.248 Ángstrom.2 ALBÚMINA Generalidad La albúmina es una proteína. X Antes de la sintomatología dolorosa en la gota. X Controlar los parámetros de alteración metabólica: glucosa. VSG.0 mg/dl Mujer 2. .0 g/l. la hemólisis: HB ≥ 10.0 mg/dl. fibrinógeno. que contiene el 55-65 % de la cantidad proteica en el plasma.4-5. Otra función importante es la de regular la presión osmótica. Tiene un peso molecular de 66. numerosos fármacos. aminofenolo. examen de orina.2 mg/dl.0 mg/dl. parámetros oncológicos. Sus funciones principales son de transporte en la sangre de numerosas sustancias como ácido graso libre. sin embargo. idralazina. apolipoproteínas. Valores de referencias Hombre 3. levadopa. muchas hormonas. se eleva el nivel de ácido úrico. calcio. electrolitos.4-7. Especificidad La metódica de uricasa es específica para el ácido úrico. X Controlar los parámetros de la funcionalidad del riñón: creatinina. 4. el ácido ascórbico ≥ a 30. también para los otros derivados de las purinas. Interferencias Pueden presentar interferencias: El suero ictérico con bilirrubinas ≥ 40. colesterol. X Controlar los parámetros de los procesos displásicos: VSG. fórmula leucocitaria y glóbulos rojos.7 mg/dl Criterios de validación Con valores muy elevados: X Confrontar otros parámetros en relación con procesos inflamatorios: conteo de glóbulos blancos. el suero lipémico: triglicéridos ≥ 2000 mg/dl. Algunos fármacos pueden dar valores falsamente bajos de ácido úrico: fenacetina. triglicéridos. PCR. bilirrubina.

y de manifestaciones edematosas.) y exógenas (quemaduras). Modalidad de toma de muestra Ninguna particularidad. debajo de 25-30. Conservación Centrifugación y separación del suero cuanto antes. X Disminución alimenticia y mala absorción.0 g/l. Transporte Se puede transportar a temperatura ambiente. Indicaciones La determinación de la albúmina sérica es importante en el diagnóstico de hipoalbuminemia.0 g/l. A) Registro Escrito claramente.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 49 La concentración normal sérica es de 35-50. la cual representa 2/5 parte de toda la albúmina presente en el organismo. Los neonatos y ancianos tienen una cantidad de albúmina más baja. . síndrome nefrótico. cirrosis. Modalidad de solicitud Sólo en rutina. Se habla de hipoalbuminemia. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. la toma de muestra se puede conservar para tres días a 2 – 4o C.0 g/l.). X Eliminación por causas endógenas (diarrea masiva. Las principales causas son: X Disminución de síntesis (hepatopatía grave. etc. Preparación del paciente Ayuno. y por 6 meses a –20o C. cuando el contenido de albúmina está de 32. etc.

50 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad

C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.

Metódicas de determinación:

Metódica con la separación de la albúmina desde otras proteínas
1. Método de precipitación fraccionado: Las globulinas son precipitadas, y las albúminas se
miden con el método de biuret.
2. Método electroforético: Con electrofóresis, se analiza la composición cuantitativa y
cualitativa de las proteínas del suero.

Metódicas directas

a) Metódicas inmunoquímicas
Esta metódica se aplica en inmunodifusión radial (inmunoturbometría, Inmunonefolometría).

b) Metódicas fluorimétricas
Reacción de la albúmina con sustancias fluorescentes y relativa medida fluorométrica.

c) Metódicas con colorantes
La albúmina presente en la muestra reacciona con el verde de bromocresol en medio ácido,
originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría.

Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul

Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 51

X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul

Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.

Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.

Notas sobre la metódica:

Linealidad
La metódica es lineal desde 0.2-8.0 g/dl.

Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 0.2 g/dl.

Especificidad
La metódica es específica para la determinación de albúmina.

Interferencias
Suero ictérico con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.
Hemólisis: HB ≥ 10.0 g/dl.
Lipemia: ≥ 2000 mg/dl.
Acetona: ≥ 50.0 mg/dl.

Valores de referencia
Adulto: 3.4 - 4.8 g/dl
Neonatos hasta 4 días: 2.8 - 5.4 g/dl
Niños: 3.8 - 5.4 g/dl

Criterios de validación
X Confrontar con la funcionalidad del riñón: creatinina, urea, potasio, densidad urinaria.
X Confrontar con funcionalidad del hígado: transaminasas, G.G.T, F. alcalina, LDH.
X Confrontar con parámetros del equilibrio electrolíticos: sodio, cloro, potasio.
X Controlar sexo y eventual estado de embarazo.
X Controlar parámetros de inflamación: VSG, PCR, biometría hemática completa.

52 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad

Modo de escribir los resultados
La albúmina se escribe con una cifra decimal en gramos por ciento.

4.3 ALBÚMINA (en orina)
Generalidad
La albúmina es una proteína que contiene el 55-65% de la cantidad proteica en el plasma.
Tiene un peso molecular de 66,248 Ángstrom. Sus funciones principales son de transporte
en la sangre de numerosas sustancias como ácido graso libre, bilirrubina, muchas hormonas,
calcio, numerosos fármacos. Otra función importante es la de regular la presión osmótica.
Normalmente, el riñón impide que la albúmina sérica se pueda eliminar con las orinas. Sin
embargo, en las orinas normales se encuentran pequeñas cantidades de albúmina.
Se elimina mayor cantidad de albúmina en las enfermedades glomerulares.

Indicaciones
La determinación de la albúmina en la orina es de particular importancia, como señal de una
disfunción glomerular. Un pequeño aumento de albúmina en la orina, conocida como
microalbuminuria, es particularmente importante en el diagnóstico precoz de la nefropatía
diabética, que se desarrolla en cerca del 40.0% de los diabéticos insulino dependientes.

Modalidad de solicitud
Sólo en rutina.

Modalidad de toma de muestra
Se puede encontrar dos tipos de determinación:
A) Determinación cuantitativa en orinas de 24 horas:
Para la recolección de orina de 24 horas, se tiene que utilizar frascos de 2.5-3.0 litros, de
boca ancha, con tapón de rosca. Añadir al frasco, si es necesario, un estabilizante. Para la
recogida de orina, se procede del modo siguiente:
a) En el tiempo preestablecido, vaciar la vejiga e eliminar toda la orina.
b) Posteriormente, comenzar a recoger toda la orina durante 24 horas.
c) Al cumplir las 24 horas, vaciar de nuevo la vejiga y depositar toda la orina en el frasco.
d) Conservar las orinas a 2-4oC.
e) Al finalizar la recolección de orina, debe ser enviada inmediatamente al laboratorio.
B) Determinación cualitativa:
Para la determinación cualitativa de la albuminuria, se necesitan muestras de orina, recogida
en el momento oportuno.

. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. en el resultado la no idoneidad de la muestra.0 g/dl. Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 0. Señalar. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r.2 g/dl. Especificidad La metódica es específica para la determinación de albúmina. filamentos de fibrina. eventualmente. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica es lineal desde 0.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 53 Transporte La recogida de la muestra de orina de 24 horas debe ser transportada en refrigeración. Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.m. turbidez. Cálculo de la albuminuria: Valor obtenido (mg/dl) x ml diuresis. Conservación Centrifugar la muestra antes del análisis: no congelar la muestra.p. La albúmina es estable una semana a 2-4oC. Metódica de determinación: Metódica con colorantes La albúmina presente en la muestra reacciona con el verde de bromocresol en medio ácido. Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. que se cuantifica por espectrofotometría. originando un complejo coloreado. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia.2-8. Registro Escrito claramente. presencia de coágulos.

urea. cloro. potasio. Parece que la amilasa sube más en correlación con el edema. 54 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Interferencias La interferencia más significativa se debe a elementos corpusculares: antes de la ejecución del examen. Preparación del paciente Ayuno en rutina. La amilasa puede aumentar también en otras enfermedades pancreáticas: neoplasia del páncreas. y en pequeña concentración. Indicaciones La determinación de la amilasa es de importancia fundamental en el diagnóstico de las enfermedades pancreáticas. el riñón y las trompas de Falopio.4 – alfa-glicósido en lo interno de la molécula de los polisacáridos de los vegetales y animales. la amilasa sérica sube en casi la totalidad de los pacientes. X Controlar sexo y posible estado de embarazo. La amilasa se produce en el páncreas y las glándulas salivales. 4. En estas enfermedades. 5-6 horas después de la sintomatología clínica. potasio. Se puede distinguir amilasa pancreática (isoamilasa P) y amilasa extrapancreática (isoamilasa S). neoplasia de la papila de Vater. . centrifugar la muestra. en el hígado. y del glicógeno. provocando la despolimerización del almidón a destrina. X Confrontar con parámetros del equilibrio electrolíticos: sodio. Modo de escribir los resultados La albúmina en 24 horas se escribe con una cifra decimal. y es eliminada por el riñón.3 g/24 horas Criterios de validación X Confrontar con la funcionalidad del riñón: creatinina. a azúcar sencillo (glucosa). densidad urinaria. Valores de referencias Orina de 24 horas: 2.4 AMILASA Generalidad La amilasa es una enzima que cataliza la división de 1. en vez que en relación con la necrosis pancreática. La amilasa es útil en el diagnóstico para el control de la pancreatitis aguda. Modalidad de solicitud En rutina y/o emergencia. Puede añadir valores de 10-30 veces mayor de los valores normales.

Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Señalar. filamentos de fibrina. La toma de muestra se puede conservar por un día a + 20-25oC. Transporte Se puede transportar a temperatura ambiente. . turbidez. Metódicas de determinación: Metódica amilo clásica La medida de la actividad de la enzima se efectúa con metódicas basadas sobre la disminución o desaparición de la concentración del sustrato con: X Medida turbidimétrica X Medida viscosimétrica X Medida colorimétrica yodo. en el resultado la no idoneidad de la muestra.m. presencia de coágulos. A) Registro Escrito claramente. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado.p. eventualmente.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 55 Modalidad de toma de muestra Ninguna particularidad. Conservación Centrifugación y separación el suero. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. Metódica sacarogenética La medida de la actividad de la enzima se efectúa con metódica basada sobre la producción de azúcar reductora. 1 mes a -20oC. cinco días 2-4o C. almidón.

que actúa con un nuevo substrato 2-cloro-4-nitrofenil –maltotriosido (CNPG3). CNPG3 α amilasa 3 CNP + CNPG2 + 3G3 + 2 G ———> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. 56 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Metódica enzimática La α amilasa es un test colorimétrico. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. Control de calidad Se deberán usar sueros. X Si el valor del resultado repetido es diferente. repetir la medida. Verificar el resultado X Si el valor de la amilasa en ≥ 1000-2000 U/I. . se puede entregar. control normal y patológico. X Si el valor del resultado repetido es el mismo. Este substrato reacciona directamente con la α amilasa. y no requiere la presencia del cambio del 2. en las mismas condiciones que las muestras.cloro-4-nitrofenil (CNP) del substrato. y la lectura de la absorbancia está incrementada directamente por la actividad de la α amilasa en la muestra.

El ácido ascórbico ≥ 30 mg/dl. se puede entregar el resultado. Especificidad La metódica es específica para la amilasa total y para todas las isoamilasas (P. siempre usando el control patológico. diluir la muestra 1:4. S). Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica es lineal hasta 1500 U/I.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 57 X Con valores de amilasa ≥ de 1500 U/I. Valor de referencia Menor a 220 U/I. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente. X Si está dentro los rangos establecidos. Criterio de validación X Confrontar con lipasa. X Controlar glucosa y metabolismo glucídico. 1:16 con solución fisiológica. calcio. .0 U/I. repetir la medida. funcionalidad del hígado. con valores ≥ 800. X Controlar parámetros de procesos inflamatorios. El citrato y el floruro inhiben la reacción.0 mg/dl. Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 7. Ictérico: bilirrubina ≥ 20. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado. Modo de escribir los resultados La amilasa se escribe sin cifras decimales. Interferencias Hemólisis: Con Hb ≥ 2.0 U/I.0 g/l. 1:8. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica con un control patológico.

parasitarias. Hepatocelular: Debido a lesiones hepatocelulares. Una parte del bilinógeno es eliminada en las heces (estercobilinógeno). o desde la misma hemoglobina derivada de la hemólisis intra medular de los eritrocitos. en la médula ósea. La patología fundamental es la anemia hemolítica hereditaria (drepanocítica. otra es reabsorbida por vía portal desde el hígado y nuevamente es excretada con la bilis (bilinógeno). tóxicas. . se liga con ácido glucurónico. y es eliminada por el riñón (urobilinógeno). En el intestino. correspondiente a bilirrubina conjugada (glucuronada). para el daño del hepatocito puede aumentar la fracción indirecta. En este caso. Posthepático obstructivo: Debido a un obstáculo orgánico y/o funcional al flujo de la bilis. etc. tóxica. X La bilirrubina total.).). patología tumoral intrínsica al hígado. autoinmune. la fracción que aumenta es la bilirrubina directa. el hígado no es capaz de capturar la bilirrubina y conjugarla con ácido glucorónico. sólo en un segundo tiempo. correspondiente a la forma no conjugada libre. X Una fracción indirecta. En el interior del hepatocito. Indicaciones La determinación de la bilirrubina es un elemento fundamental para el diagnóstico de las patologías ictéricas del hígado. y anemia hemolítica inmunológica del neonato. donde se liga con la albúmina y después es capturada desde el hepatocito.5 BILIRRUBINA TOTAL Generalidad La bilirrubina se forma en el sistema retículo endotelial por la apertura del núcleo tetrapirrólico en el 70–90%. La cantidad producida es derivada en la sangre. se puede evidenciar: X Una fracción directa. La obstrucción puede ser provocada desde litiasis. desde aquí. venenos vegetales o animales. Modalidad de solicitud En rutina y/o emergencia. y después es excretada en el canal biliar y. la fracción aumentada es la indirecta. y el 10-30%. Las causas pueden ser: infecciosas degenerativas. La bilirrubina se origina por degradación de los grupos hemo producido para la síntesis de hemoglobina. por compresión externa (pancreática. Una parte del bilinógeno huye de la captación del hígado. o extrínseca. parasitosis. talasemia etc. puede aumentar la fracción directa e indirecta. etc. Se distinguen tres tipos de ictero: Prehepático o hemolítico: Debido al aumento de la cantidad de bilirrubina que llega al hígado por fenómenos de hemólisis. correspondiente a la suma de las dos fracciones. En estos casos.) y la anemia adquirida (infecciosas. se encuentra con la bilis en el intestino. Se forma en pequeña parte desde la mioglobulina. tumoral. la bilirrubina conjugada es reducida por la flora bacteriana a bilinógeno. En la determinación de la bilirrubina. En este caso. 58 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 4.

A) Registro Escrito claramente. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. eventualmente. protegida de la luz. Metódicas de determinación: Metódica con medida del color de la bilirrubina en el suero La bilirrubina presenta un espectro de absorbancia a 463 nm. filamentos de fibrina. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Conservación Centrifugación y separación del suero.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 59 Preparación del paciente Ayuno en rutina. Transporte Se puede transportar a temperatura ambiente. La muestra debe ser conservada y protegida de la luz. en el resultado la no idoneidad de la muestra.p. presencia de coágulos. Metódica con oxidación La bilirrubina por oxidación en ambiente ácido forma productos coloreados en verde con relativa medida colorimétrica. y 3 meses a -20oC. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. Señalar. . Modalidad de toma de muestra Ninguna particularidad. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. 4 días a 2-4oC.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. la toma de muestra se puede conservar por dos día a temperatura ambiente. Metódica poca usada porque también la hemoglobina en pequeña cantidad puede interferir. turbidez.

control normal y patológico. .. en un medio alcalino. repetir la medida. La bilirrubina conjugada (directa). la bilirrubina no conjugada (indirecta). reacciona directamente en medio acuoso con el diazoreactivo. Ácido sulfanílico + nitrito de sodio —————> ASD Bilirrubina + ASD —————> Azobilirrubina directa Bilirrubina + ASD + acelerador —————> Azobilirrubina total Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. Control de Calidad Se deberán usar sueros. 60 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Metódica con sales diaconio del ácido sulfanílico La bilirrubina reacciona en presencia de ácido sulfanílico diazotado (ASD). requiere la presencia de un desarrollador acuoso que posibilite la reacción diazotación. Verificar el resultado Si el valor de la bilirrubina total es ≥ 10. poco polar. en las mismas condiciones que las muestras. Para que reaccione la bilirrubina total (conjugada y no conjugada) presente en la muestra. debe agregarse benzoato de cafeína al medio de reacción. cuya intensidad es proporcional a la cantidad de bilirrubina total presente en la muestra. forma un azo-compuesto de color rojo-violáceo (azobilirrubina).0 mg/dl. muy polar. no da directamente la reacción.

diluir nuevamente la muestra 1:4.T. X Controlar biometría hematica completa y hierro.0 mg/dl. colinesterasa. X Controlar enzimas cardíacas. X Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G. Valor de referencia Hasta 1. que pueden producir variaciones del resultado de bilirrubina sérica. hasta 10.T. Neonatos al quinto día.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 61 X Si el valor del resultado repetido es el mismo. 1:8. Neonatos de 48 horas. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro los rangos establecidos. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado. X Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus. X Si el valor del resultado repetido es diferente. evitar las muestras hemolizadas. Neonatos de 24 horas. La lipemia interfiere de modo relevante. 1:16 con solución fisiológica.0 mg/dl. se puede entregar el resultado.G. X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia). Criterio de validación X Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas. hasta 9. drogas en especial. siempre usando el control patológico.0 mg/dl. B. análisis de hepatitis A. Se han señalado muchas sustancias. hasta 13. C y delta). urobilinógeno. .5 mg/dl.0 mg/dl. Prematuros de 2-4 días. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica es lineal hasta 20 mg/dl Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 0. repetir la medida. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. Interferencias Hemólisis: También con valor muy bajo de Hb. hasta 4. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica con un control patológico.). X Con valores de bilirrubina total ≥ de 20. G.05 mg/dl Especificidad La metódica es específica para la bilirrubina total. TP.0 mg/dl.G. se puede entregar.

. sin desarrollador. De forma que. debe agregarse el benzoato de cafeína y. Verificar el resultado X Si el valor de la bilirrubina directa es ≥ 2. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 12. X Si el valor del resultado repetido es el mismo. para la determinación de la bilirrubina total. 62 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Modo de escribir los resultados La bilirrubina total se escribe con dos cifras decimales. se puede entregar. la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia de un desarrollador acuoso (benzoato de cafeína) que posibilite su reacción. 4.6 BILIRRUBINA DIRECTA La bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazoreactivo (Met.0 mg/dl. Jendrassik). Control de Calidad Se deberán usar sueros. para la directa. Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial.5 mg/dl. control normal y patológico. repetir la medida. . en las mismas condiciones que las muestras.

003 mg/dl Especificidad La metódica es específica para la bilirrubina directa. siempre usando el control patológico. repetir la medida sea concentrada o diluida 1:2 con solución fisiológica con un control patológico.G.G. drogas en especial. urobilinógeno. TP.). B. X Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G. X Controlar biometría hemática completa y hierro.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 63 X Si el valor del resultado repetido es diferente.0 mg/dl Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 0. que pueden producir variaciones del resultado de bilirrubina sérica. Interferencias Hemólisis: también con valor muy bajo de Hb. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado.T. se puede entregar el resultado. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro de los rangos establecidos. 1:16 con solución fisiológica. Criterio de validación X Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas.3 mg/dl.0 mg/dl. Se han señalado muchas sustancias. C y delta). G. X Con valores de bilirrubina directa ≥ de 5.T. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de la bilirrubina directa es lineal hasta 5. diluir nuevamente la muestra 1:4. evitar las muestras hemolizadas. análisis de hepatitis A. X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia). colinesterasa. 1:8. X Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. . Valor de referencia Hasta 0. Modo de escribir los resultados La bilirrubina directa se escribe con dos cifras decimales. X Controlar enzimas cardíacas. La lipemia interfiere de modo relevante.

ligado a ácidos débiles y no disociable (citrato). C y delta). urobilinó- geno. Valor de referencia Hasta 0. X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia). X Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G. ligado a las proteínas. El calcio cataliza también muchas reacciones enzimáticas e interviene en la coagulación de la sangre. el calcio está presente en formas distintas: el 35-45%.).7 BILIRRUBINA INDIRECTA Metódica Los valores para bilirrubina no conjugada (indirecta) se obtienen sustrayendo la bilirrubina conjugada (directa) a la bilirrubina total. 4. la mayor parte del cual está contenida en los huesos y en los dientes. TP. Modo de escribir los resultados La bilirrubina indirecta se escribe con dos cifras decimales. GGT. en particular para la acción de la . La absorción se realiza primero en el tracto del intestino delgado. como calcio ionizado. X Controlar enzimas cardíacas. X Controlar biometría hemática completa y hierro. 64 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 3. y el restante.0 mg/dl. B. 4. colinesterasa.7 mg/dl. X Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus.8 CALCIO Generalidad El calcio sérico representa aproximadamente el 1% del calcio total del organismo. El calcio ligado a las proteínas y el no disociable son biológicamente inactivos. el 5-6%. En el suero. Criterio de validación X Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas. El calcio sérico se encuentra en equilibrio dinámico con los líquidos extracelulares.T. análisis de hepatitis (A.G. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 7.0 mg/dl. muy importante como regulador en la excitación neuro-muscular y de la permeabilidad celular.

linfoma. cirugía intestinal. del pH intestinal y en relación con fosfato en la dieta. porque el prolongado contacto del suero con el coágulo puede disminuir los valores del calcio. Transporte Se puede transportar a temperatura ambiente. Es eliminado con las heces y la orina.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 65 vitamina D. . Conservación Centrifugar y separar el suero. 3 semanas 2-4oC. y 8 meses a -20oC. aumentada destrucción de los huesos. pancreatitis. Modalidad de toma de muestra Ninguna particularidad. alcoholismo. tapones de hule y tapas plásticas son fuentes de contaminación que deben evitarse. Se distinguen: X Hipocalcemia debida a: Hipofuncionalidad de las paratiroides. Existen pequeñas modificaciones circadianas de la calcemia. Indicaciones La determinación se utiliza en el monitoreo del metabolismo del calcio. El calcio es estable 7 días a temperatura ambiente de 20-25oC. Tipo de cristalería La cristalería y cualquier recipiente que tenga contacto con la muestra debe ser previamente lavado con ácido para evitar contaminación por calcio. insuficiencia crónica del riñón. escasa absorción por disminución de vitamina D. leucemia. Modalidad de solicitud En rutina y/o emergencia. Preparación del paciente Ayuno en rutina. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. osteoporosis. neoplasia de la mama. cirrosis. Los corchos. gravidez. morbo de Paget. X Hipercalcemia debida a: Hiperparatiroidismo. metástasis de los huesos. aumentada absorción intestinal. neoplasia de la próstata y de la tiroides.

66 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad A) Registro Escrito claramente. Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul . La 8-hidroxiquinolina elimina la interferencia producida por el magnesio. presencia de coágulos.p. turbidez.m. Metódica colorimetría y procedimiento analítico El calcio en suero se determina por reacción directa con o-cresolftaleína complexona. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Calcio + O-Cresolftaleína complexona medio alcalino ———————> Calcio – Cresolftaleína complexona (color violeta). Este colorante forma un complejo violeta en presencia de calcio en medio alcalino. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. Espectrometría de absorción atómica Con flama área acetileno o protosido de asoto se puede medir con línea analítica a 422. Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra.. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. debidas al óxido.7 nm. Metódicas de determinación: Fotometría de llama El calcio a temperatura de llama emite dos bandas moleculares con picos a 556 y 626 nm. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. filamentos de fibrina.

. diluir nuevamente la muestra 1:4. repetir la medida.6.0 y/o ≥ 13. tot g/dl / 3) Ca++ = _____________________________________ Prot. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica con un control patológico. .0 mg/dl. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado. repetir la medida. X Si el valor del resultado repetido es el mismo.0 . en las mismas condiciones que las muestras. se puede entregar el resultado. X Con valores de calcio ≥ de 16. X Si el valor del resultado repetido es diferente. Verificar el resultado: X Si el valor del calcio es < 7. control normal y patológico. 1:16 con solución fisiológica siempre usando el control patológico. Control de Calidad Se deberán usar sueros. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. 1:8.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 67 Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial.(Prot.0 mg/dl Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica es lineal hasta 16 mg/dl. tot g/dl + 6 Los valores de referencia del calcio ionizado son: 5. se puede entregar..0 mg/dl. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro el rango establecido. Para transformar los valores del calcio en calcio ionizado (Ca++) se usa la siguiente fórmula: (Ca tot mg/dl x 6) .

2 mg/dl. X Comparar con parámetros del equilibrio electrolítico (sodio. Valor de referencia Neonato de edad hasta 10 días 8. oxalato). potasio y cloro). X Comparar con parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea.0 mg/dl. Modo de escribir los resultados El calcio se escribe con una cifra decimal. no existe alguna interferencia significativa del suero.0 mg/dl.2 mg/dl. X Controlar parámetros de funcionalidad de riñón (creatinina. X Comparar con parámetros de funcionalidad pancreática (amilasa.0 mg/dl y ≥ 12. La interferencia se puede presentar con: Hemólisis > de 10 g/l. Adultos 8. Es necesario reducir la absorción de CO2 para evitar una reducción de la estabilidad de los reactivos y de la calibración.8-11. La lipemia > de 1000 mg/dl de triglicéridos. Interferencias particulares pueden deberse a sustancias anticoagulantes o quelantes (EDTA. proteinuria y densidad urinaria). citrato. .4 mg/dl. X Controlar eventual terapia diurética.0 mg/dl.6-10. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores inferiores a 7. Bilirrubinas > de 60 mg/dl. clareamiento de la creatinina. Neonatos niños de 10 días hasta 2 años 7. X Controlar edad del paciente y eventual estado de gravidex. Niños de 2 hasta 12 años de edad 9. Interferencias En la práctica. Criterio de validación X Comparar con otros parámetros del metabolismo: fósforo. 68 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 0. lipasa).0-11. Especificidad La metódica es específica para el calcio.6-10.

la CPK aumenta muy precozmente. . bajo la fórmula de CK-MM. y con pequeñas cantidades de CK-MB (1-3. evitar estrés muscular en los días antes de la toma de muestra.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 69 4. cirugía muscular. la CK–MM y la CK-MB.MB CK . LDH). en la vejiga. normalmente después de 4-6 horas a partir de la sintomatología dolorosa. El interés en la determinación de la CPK para el diagnóstico del infarto de miocardio. Indicaciones La determinación de CPK en el suero es importante en el diagnóstico del infarto del miocardio.9 CREATINA CINASA (CK) Generalidad La CPK o CK es una enzima fundamental en el metabolismo energético de la célula. como puede verificarse con la TGO. Se encuentran tres principales isoenzimas con formas moleculares dimeras: CK . en el cerebro y el intestino. La determinación de CPK en el suero es importante también en alteraciones patológicas y fisiológicas de los músculos esqueléticos (distrofia muscular. En el músculo cardíaco. sino también porque el aumento en el suero no está en relación con un daño del hígado.MM CK .0%). La CPK tiene la capacidad de formar ATP. y regresa a los valores normales después 3-4 días. almacenando o librando energía. padecimiento muscular en general. estrés muscular. no sólo interesa porque consigue ser un precoz diagnóstico. El aumento máximo se da después de 18-24 horas. trauma muscular. Modalidad de la toma de muestra Reducir al mínimo el trauma y la éxtasis hemática. En el infarto del miocardio agudo (IMA). está presente como enzima CK–BB. con reversibilidad de la reacción. a partir del ADP y fosfocreatina. El aumento del CPK es más precoz en relación con otros parámetros del corazón (TGO. están bien representadas dos de las tres isoenzimas citoplasmáticas.BB La CK se encuentra en cantidades elevadas en músculos esqueléticos casi exclusivamente. Preparación del paciente Ayuno. inyecciones musculares. Modalidad de solicitud En rutina y/o emergencia. neoplasia).

a partir de la velocidad de formación del NADPH. Se inactiva en la congelación. filamentos de fibrina. presencia de coágulos. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. se determina empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa 6-fosfato deshidrogenasa. Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra.m. Metódica de determinación: Metódica cinética UV y procedimiento analítico La creatina kinasa cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina y ATP. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. A) Registro Escrito claramente. La concentración catalítica. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. hemólisis. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. Conservación Centrifugación y separación del suero.p. turbidez. 8704 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Transporte Transportar a temperatura ambiente. y 10 días en la oscuridad a + 4oC. ADP + fosfocreatina CPK ATP creatina —> ATP + glucosa HK ADP + glucosa 6-P —> Glucosa 6-P + NADP+ G6PDH 6-fosfogluconato + NADPH + H+ ———> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm .

se puede entregar el resultado. X Con valores de CPK ≥ de 1000 U/L. Verificar el resultado X Si el valor de la CPK es ≥ 600 U/L. Control de Calidad Se deberá usar suero liofilizado de origen humano que sirve para el control de la exactitud o precisión en los ensayos de CK-Nac y CK-MB. . X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido. repetir la medida. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado. repetir la medida. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica con un control patológico.0 U/L. X Si el valor del resultado repetido es diferente.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 8715 X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. X Si el valor del resultado repetido es el mismo. 1:8 con solución fisiológica. y el control está dentro los rangos establecidos. diluir la muestra 1:4. siempre usando el control patológico. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica es lineal hasta 1000 U/L. Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 5. se puede entregar.

BB Las CK se encuentran en cantidades elevadas en músculos esqueléticos. Se encuentran tres isoenzimas principales con formas moleculares dimeras: CK . La CPK tiene la capacidad de formar ATP a partir del ADP y fosfocreatina con reversibilidad de la reacción. Controlar eventuales parámetros tóxicos (alcoholemia y colinesterasa). almacenando o librando energía.0 U/L Hombre: hasta 190.0 g/l (muy sensible). Controlar parámetros tumorales. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 400. mioglobina y troponina. colinesterasa. TGO. casi exclusivamente bajo la fórmula de CK-MM. y con pequeñas cantidades de CK-MB (1-3. aldolasa.0%) en el cerebro y .10 CREATINA CINASA (CK) MB Generalidad La CPK o CK es una enzima fundamental en el metabolismo energético de la célula.0 mg/dl Valor de referencia Mujer: hasta 167. Confrontar parámetros musculares: LDH.0 U/L Criterio de validación Controlar todos los otros parámetros cardíacos: LDH. 72 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Especificidad La metódica es específica para la CPK. Controlar parámetros de funcionalidad hepática: TGP. 4.0 mg/dl (poco significativo). TP.MB CK .MM CK . GGT. Lipemia: triglicéridos ≥ 1000. Interferencias Hemólisis: con Hb ≥ 1. parámetros de hepatitis A y B.0 U/L. CPK-MB. Ictérico: bilirrubina ≥ 60. Modo de escribir los resultados La CPK se escribe sin cifras decimales.

inyecciones musculares. La determinación de CPK en el suero es importante también en alteraciones patológicas y fisiológicas de los músculos esqueléticos (distrofia muscular. en la vejiga. . trauma muscular. como puede verificarse con la TGO. evitar estrés muscular en los días antes de la toma de muestra. El aumento máximo se da después de 18-24 horas. A) Registro Escrito claramente. padecimiento muscular en general. están bien representadas dos de las tres isoenzimas citoplasmáticas: la CK–MM y la CK-MB. En el músculo cardíaco. explicando obligatoriamente el diagnóstico.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 73 el intestino. Conservación Centrifugación y separación del suero. estrés muscular. cirugía muscular. Modalidad de la toma de muestra Reducir al mínimo el trauma y la éxtasis hemática. neoplasia). El aumento del CPK es más precoz en relación con otros parámetros del corazón (TGO. Indicaciones La determinación de CPK en el suero es importante en el diagnóstico del infarto del miocardio. está presente como enzima CK–BB. Preparación del paciente Ayuno. Se inactiva en la congelación. y regresa a los valores normales después 3-4 días. Modalidad de solicitud En rutina y/o emergencia. En el infarto del miocardio agudo (IMA). Transporte Transportar a temperatura ambiente. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. LDH). sino también porque el aumento en el suero no está en relación con un daño del hígado. no sólo porque consigue ser un precoz diagnóstico. normalmente después de 4-6 horas a partir de la sintomatología dolorosa. El interés en la determinación de la CPK para diagnóstico del infarto del miocardio. la CPK aumenta muy precozmente. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC y 10 días en la oscuridad a + 4oC.

La restante actividad de esta fracción. La concentración catalítica se determina empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa 6-fosfato deshidrogenasa. Señalar. filamentos de fibrina. La fracción CK-M está inhibida por un anticuerpo específico que no influye en la fracción CK-B.p. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. La creatina kinasa cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina y ATP. eventualmente. que corresponde a la mitad de la actividad de la CK-MB. Metódica de determinación: Metódica cinética inmunológica y procedimiento analítico La CK–MB está formada por las subunidades CK-B y CK-M. 74 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. en el resultado la no idoneidad de la muestra. ADP +fosfocreatina CPK ATP + creatina —> ATP + glucosa HK ADP + glucosa 6-P —> Glucosa 6-P + NADP+ G6PDH 6-fosfogluconato + NADPH + H + ———> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul .m. a partir de la velocidad de formación del NADPH. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. turbidez. presencia de coágulos. es determinada mediante técnicas cinéticas UV al igual que CK. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado.

Interferencias Hemólisis: Hb: > de 10 g/l (poca interferencia). Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 5. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica con un control patológico.0 mg/dl. Especificidad La metódica es específica para la CK-MB. repetir la medida. Notas sobre las metódicas: Linealidad La metódica es lineal hasta 1500 U/L.0 U/L. . procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. Existen casos en los cuales en pacientes con patologías oncológicas y con deficiencias inmunitarias.0 mg/dl (poco significativo). Esto es posible porque la metódica utilizada es inmunológica y usa un anticuerpo policlonal. sin embargo. X Si el valor del resultado repetido es el mismo. Verificar el resultado: X Si el valor de la CK-MB es ≥ 100 U/L.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 75 Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. X Con valores de CK-MB ≥ de 1500 U/L. Lipemia: triglicéridos ≥ 1000. X Si el valor del resultado repetido es diferente. diluir la muestra 1:4. Puede verificarse el caso en el cual CK-MB es mayor que el CK total. Control de Calidad Se deberá usar suero liofilizado de origen humano que sirve para el control de la exactitud o precision en los ensayos de CK-Nac y CK-MB. puede interferir la presencia de concentraciones elevadas de otras isoenzimas del CPK. repetir la medida. se puede verificar el aumento de la fracción CK-MB superior al CK-total. se puede entregar. que inhibe la actividad de la subunidad CK-B. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado. 1:8 con solución fisiológica. siempre usando el control patológico. Ictérico: bilirrubina ≥ 60. se puede entregar el resultado. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro los rangos establecidos. para la fracción CK-M.

y algunos factores de la coagulación. Debido a que la CK-MB está presente de modo particular en el miocardio. 4. su mayor aumento del 6. menor importancia la tiene la TGO y LDH. como el fibrinógeno. Indicaciones La determinación del colesterol se hace en la patología del metabolismo lipídico y lipoproteico.0% del CK. en las gónadas y la aorta. . es estereficado desde las células intestinales.11 COLESTEROL TOTAL Generalidad El colesterol es un esteroide sintetizado en muchos tejidos.total.0% del CK total indica la presencia de un daño a cargo del miocardio. La cuota endógena es estereficada desde el hígado. Criterio de validación El CK-MB.total. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 100. especialmente en el hígado. la corteza supra-renal. 76 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Valor de referencia Hasta 24. La cuota de colesterol intestinal está controlada por la concentración en el intestino de las sales biliares. HDL: aporte desde las células. en relación con la alimentación. La estereficación se cumple en el hígado. Modo de escribir los resultados La CK-MB se escribe con una cifra decimal. El colesterol. en la pared intestinal. la troponina y la mioglobina son los parámetros más importantes en el diagnóstico del infarto al miocadio agudo. comunicar al médico para verificar si existe una condición patológica que justifique ese resultado. El colesterol circula en parte libre y en parte estereficado con ácidos grasos. LDL: medio de transporte a las células.0 U/L Inferior al 6. Un aumento en la dieta de colesterol disminuye la cuota endógena. El colesterol origina ¼ de la alimentación y ¾ de la síntesis endógena. El significado del colesterol en cada una de sus fracciones es diferente: VLDL: incierto (utilización directa con los tejidos periféricos).0 U/L y/o además el 25.0% del CPK total. En caso que la fracción MB sea superior al CK.

un aumento de colesterol hemático. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. hipertiroidismo. en la diabetes mellitus. mala nutrición. Transporte Transportar a temperatura ambiente. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. X La disminución del colesterol se encuentra en el déficit de alfa lipoproteína. y también en las glomerulonefritis.m. filamentos de fibrina. eventualmente. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. presencia de coágulos. no tomar alcohol al menos 72 horas antes de la toma de muestra. en la pancreatitis. VI. Modalidad de solicitud Sólo rutina. Conservación Centrifugación y separación del suero. Modalidad de la toma de muestra Evitar éxtasis venosa porque provoca hemoconcentración y la liberación de colesterol tisular y. en la insuficiencia hepática. en la glicogenosis tipo I. Preparación del paciente Necesario ayuno al menos 6-8 horas. uremia. caquexia. Señalar. por consiguiente. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. septicemia.p. enfermedad de Addison. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. en la enfermedad de Cushing. III. en el hipotiroidismo. turbidez. en el resultado la no idoneidad de la muestra. y 5-7 días a + 4oC.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 77 X El aumento del colesterol se encuentra en algunas enfermedades hereditarias y en la alimentación no adecuada. . en el síndrome nefrótico. A) Registro Escrito claramente. 2 meses a –20oC. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia.

Control de Calidad Se deberán usar sueros.ácido graso —> Colesterol + O2 CHO colesteno 3-ona + H2O ——> H2O2 + aminoantipirina + fenol POD quinonamino + 4 H2O ——> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica es lineal hasta 800. . Colesterolester + H2O CHE colesterol. 78 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Metódica de determinación: Metótica enzimática colorimétrica (CHOD-POD) El colesterol es determinado por la hidrólisis y oxidación enzimática. en las mismas condiciones que las muestras. control normal y patológico.0 mg/dl. El indicador quinonamine es formado de peróxido de hidrógeno y 4 amino antipirina con la presencia de fenol y peroxidasa.

Hemólisis hemoglobina > 7.0 mg/dl.0% apoA). Interferencias Suero ictérico con bilirrubina > 25. VLDL. X Controlar parámetros del metabolismo glucídico.0 mg/dl.0%. El aumento de la concentración del colesterol HDL tiene un efecto protector en las cardiopatías coronarias. Especificidad La metódica es específica para colesterol. . a través de la bilis.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 79 Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 3. El colesterol HDL es producido en el hígado. el 18. Valor de referencia Hasta 200. es eliminado en el intestino. colesterol HDL.12 COLESTEROL HDL Generalidad El colesterol HDL constituye la parte de las lipoproteínas de alta densidad (High Density Lipoproteins). Indicaciones El control del colesterol HDL es importante en la determinación del diagnóstico del riesgo de aterosclerosis. El colesterol que se encuentra en las células está inmerso en las secreciones biliares y.0 mg/dl. citrato.0%. fluoruro) pueden interferir y dar resultados falsamente bajos. 4. algunos anticoagulantes (oxalato.0% de proteínas (de las cuales el 90. fosfolípidos.0%. el 2. de la funcionalidad del riñón. Lipemia: triglicéridos > 2500.0 mg/dl. apolipoproteínas). triglicéridos. mientras la disminución en particular con un aumento de los triglicéridos puede comportar un aumento del riesgo de enfermedad cardiovascular. Modo de escribir los resultados El colesterol se escribe sin cifra decimal. formadas por el 50. Ácido ascórbico.0 g/L. colesterol. funcionalidad del hígado (GGT en alcoholismo) y la funcionalidad tiroidea. y el 30. Criterio de validación X Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (triglicéridos.

5-7 días a + 4oC y 2 meses a – 20oC. en el resultado la no idoneidad de la muestra. Señalar. Modalidad de solicitud Sólo rutina. eventualmente. A) Registro Escrito claramente. Metódicas de determinación: Metódica enzimática colorimétrica (CHOD-POD) La precipitación de las lipoproteínas de baja densidad y las de muy baja densidad o quilomicrones (LDL y VLDL) con Mg++/sulfato de dextrano determinará el colesterol HDL. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. filamentos de fibrina. es mejor evitar la congelación porque puede alterar los contenidos lipídicos y apolipoproteicos. 80 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Las indicaciones principales son: diagnóstico de riesgo aterosclerótico. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. en el diagnóstico de la disfunción del metabolismo lipídico y lipoproteico. turbidez. Modalidad de la toma de muestra Evitar éxtasis venosa porque provoca hemoconcentración y la liberación de colesterol tisular. al menos 72 horas antes de la toma de muestra. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Conservación Centrifugación y separación del suero.p. Sin embargo. la muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. no tomar alcohol. . presencia de coágulos. Preparación del paciente Necesario ayuno. Transporte Transportar a temperatura ambiente.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. al menos 6-8 horas.

En presencia de iones de magnesio. se reduce la reactividad de las enzimas. especialmente en los quilomicrones (así. . control normal y patológico. El colesterol esterasa y el colesterol oxidasa modificados desde el PEG dan una actividad catalítica selectiva en relación con las diferentes fracciones lipoproteicas con actividad creciente desde el LDL < VLDL = quilomicrones < HDL. Control de Calidad Se deberán usar sueros.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 81 Ester de colesterol colesterol esterasa colesterol + RCOOH ————————> Colesterol + O2 colesterol-oxidasa colestenona + H2O2 ————————> H2O2 + indicador (incoloro) POD colorante (azul) + H2O ——> Metódica enzimática colorimétrica (PEG) y procedimiento analítico Metódica enzimática sin precipitación con uso de las enzimas PEG modificadas. Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. no es necesaria la precipitación de la muestra). en las mismas condiciones que las muestras.

Interferencias Limpiar muy bien la cristalería para evitar contaminación (después de la ejecución de albúmina.13 COLESTEROL LDL Generalidad La determinación del colesterol LDL es muy importante para su correlación con la hipercolesterolemia esencial y con la hipercolesterolemia secundaria (diabetes mellitus.0 mg/dl. hipotiroidismo.0 mg/dl.0 mg/dl. ceroplasmina.0 mg/dl Mujer: > 65. Lipemia: triglicéridos ≥ 1000. Ácido ascórbico. funcionalidad del hígado (GGT en alcoholismo) y la funcionalidad tiroidea. Especificidad La metódica es específica para el Colesterol HDL. citrato. X Controlar parámetros del metabolismo glucídico. PCR. EDTA) pueden dar valores falsamente bajos.0 g/l. de la funcionalidad del riñón. Valores elevados de inmunoglobulinas pueden provocar valores falsamente elevados de HDL. y también para el riesgo aterógeno). algunos anticoagulantes (oxalato. nefrosis. colesterol. Sensibilidad La metódica tiene una sensibilidad de 3. Ictérico: bilirrubina ≥ 25.0 mg/dl Criterio de validación X Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (triglicéridos. . 4. apolipoproteínas). Valor de referencia Hombre: > 55. 82 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica es lineal hasta 120. Hemólisis: con Hb ≥ 7.0 mg/dl. Modo de escribir los resultados El HDL-colesterol se escribe sin cifra decimal. VLDL. magnesio).

m. enfermedad de Addison. en el resultado la no idoneidad de la muestra. uremia. Metódicas de determinación Las metódicas hacen referencia a la determinación del colesterol total. El colesterol LDL se determina por cálculo. Conservación Centrifugación y separación del suero. . B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. Modalidad de solicitud Sólo rutina. hipertiroidismo. HDL-colesterol y de los triglicéridos. insuficiencia del hígado. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. septicemia. es mejor evitar la congelación porque puede alterar los contenidos lipídicos y apolipoproteínas. 5-7 días a + 4oC. 2 meses a –20oC.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 83 La disminución se encuentra en el déficit de alfa lipoproteína. Transporte Transportar a temperatura ambiente. turbidez. presencia de coágulos. Sin embargo. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. mala nutrición. Modalidad de la toma de muestra Evitar éxtasis venosa porque provoca hemoconcentración y la liberación de colesterol tisular. Preparación del paciente Necesario ayuno al menos 6-8 horas. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. no tomar alcohol al menos 72 horas antes de la toma de muestra. caquexia. A) Registro Escrito claramente. la muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente. eventualmente. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. filamentos de fibrina. Señalar. enfermedades infecciosas.p.

Modo de escribir los resultados El LDL-colesterol se escribe sin cifra decimal.0 mg/dl.0 mg/dl Criterio de validación Referirse a las metódicas de colesterol. 4. de los cuales puede ser excretada. Con valores de triglicéridos > de 500. es proporcional dentro de ciertos límites a la masa muscular.0 mg/dl Moderado riesgo 130. el cálculo no es significativo. . Sensibilidad Referirse a las metódicas de colesterol.0-160. liso y cardíaco) de la creatina y representa el subproducto de excreción. especialmente cuando se aumenta la concentración hemática. el cálculo no tiene significado. colesterol-HDL y triglicéridos. El aumento de la creatinina en el suero empieza a ser evidente cuando el filtrado glomerular es por debajo de 60 ml por minuto. Se libera de los glomérulos y no es reabsorbida por los túbulos.0 mg/dl Alto riesgo > 160. colesterol-HDL y triglicéridos.14 CREATININA Generalidad La creatinina es una sustancia que deriva del metabolismo muscular (músculo estriado. Valor de referencia Hasta 130. colesterol-HDL y triglicéridos. Interferencias Referirse a las metódicas de colesterol. colesterol-HDL y triglicéridos. colesterol-HDL y triglicéridos. Especificidad Referirse a las metódicas de colesterol. Notas sobre las metódicas: Linealidad Referirse a las metódicas de colesterol. sin embargo. 84 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad LDL= Colesterol total – (HDL + 1/5 triglicéridos) Con valores de triglicéridos por encima de 500.0 mg/dl. La producción de creatinina es independiente de la dieta y del ejercicio muscular.

La creatinina representa el índice más fiel de la insuficiencia renal. filamentos de fibrina. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. eventualmente. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. Preparación del paciente Ayuno. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. 7 días 2-4oC y 6 meses en congelación. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. turbidez. Modalidad de solicitud En rutina y/o emergencia. .p. la creatinina se correlaciona casi exclusivamente a la eficiencia de la filtración glomerular. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. Señalar. El aumento de la creatinina es un índice de la insuficiencia glomerular en cuanto ésta es eliminada por filtración glomerular. Transporte Transportar a temperatura ambiente.m. Mientras la uremia en la sangre puede ser controlada a través de una oportuna dieta. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 85 Indicaciones La determinación de la cratinina es utilizada en el diagnóstico de las enfermedades renales agudas o crónicas. y también para el monitoreo de la diálisis renal. A) Registro Escrito claramente. en el resultado la no idoneidad de la muestra. presencia de coágulos. Conservación Centrifugación y separación del suero. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia.

la creatincinasa. Método colorimétrico y procedimiento analítico Además de la determinación de la creatinina con una técnica de punto final. 86 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Metódicas de determinación: Método físico Absorción de la cratinina sobre la resina a cambio iónico y medir la absorbancia a 235 nm. . más frecuentemente se utiliza una técnica cinética en la cual la creatinina en medio alcalino reacciona con picrato produciendo un complejo coloreado rojo-naranja. esta enzima transforma la creatinina en creatina con medida final a 340 nm de la creatina. Creatinina + ácido pícrico ———> creatinina picrato (complejo) Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. antes y después de una reacción con la enzima específica. la diferencia de absorción durante el tiempo de conversión es directamente proporcional a la concentración de creatinina en la muestra. Método cinético enzimático El método enzimático colorimétrico consiste en la medida del color desarrollado con el reactivo de Jaffe.

0 mg/dl.0 mg/dl. Sensibilidad Su sensibilidad es 0. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica y con un control patológico. Ictérico: bilirrubina ≥ 40. se puede entregar. pueden dar valores falsamente elevados. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. siempre usando el control patológico.1 mg/dl Neonatos o niños Hasta 0. Las muestras de suero tienen proteínas que pueden reaccionar no específicamente con el método Jaffe. Verificar el resultado: X Si el valor de la creatinina es ≥ 7. X Si el valor del resultado repetido es el mismo. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado. repetir la medida.0 g/l. en las mismas condiciones que las muestras. control normal y patológico. X Con valores de creatinina ≥ de 25.0 mg/dl. Acetona ≥ 50. es necesario corregir el valor de 0.7 mg/dl . Notas sobre la metódica: Linealidad Es lineal hasta 25.1 mg/dl.0 mg/dl. Lipemia: triglicéridos ≥ 2000. X Si el valor del resultado repetido es diferente.0 mg/dl. Algunos antibióticos. repetir la medida. se puede entregar el resultado. diluir la muestra 1:3 con solución fisiológica. Especificidad La metódica es específica para la creatinina. como las cefalosporinas. Valor de referencia Hombres Hasta 1.3 mg/dl Mujeres Hasta 1.3 mg/dl para lograr valores más correctos. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 10.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 87 Control de Calidad Se deberán usar sueros. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro el rango establecido.0 mg/dl.

a la masa muscular. especialmente cuando se aumenta la concentración hemática. Modo de escribir los resultados La creatinina se escribe con una cifra decimal. proteínas. La medida de la cantidad de creatinina en la orina. es proporcional. La producción de creatinina es independiente de la dieta y del ejercicio muscular. La creatinina es una sustancia que deriva del metabolismo muscular (músculo estriado. . en particular el aclaramiento de la creatinina. míoglobulina). un índice de funcionalidad renal muy sensible y seguramente más significativo que la urea. 88 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Criterios de validación Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea. sin embargo. hacen de la creatinina. cloro). Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 6. densidad urinaria). producida en un determinado período de tiempo. Controlar parámetros del metabolismo muscular (CPK. potasio. Se libera desde los glomérulos y no es reabsorbida por los túbulos. potasio. simultáneamente a la medida de la concentración plasmática. liso y cardíaco) de la creatina. lleva al cálculo el aclaramiento de la creatinina (volumen del plasma en ml que es depurado de la creatinina en un minuto de tiempo): C= U x V/P (ml/min) donde: C= aclaramiento U= concentración de creatinina en la orina V= volumen de la orina eliminada P= concentración de creatinina en el plasma Indicaciones La estrecha correlación entre la velocidad de filtración glomerular y el valor de la creatinina plasmática. dentro de algunos límites.15 ACLARAMIENTO DE LA CREATININA Generalidad La cantidad de creatinina excretada con la orina está en relación con la filtración glomerular. 4. Controlar sexo y edad del paciente y también eventual estado de embarazo.0 mg/dl. Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio. de los cuales puede ser excretada. y el hecho que la concentración de la creatinina hemática no es influenciada por la dieta. El aumento de la creatinina en el suero empieza a ser evidente cuando el filtrado glomerular es por debajo de 60 ml por minuto. y representa el subproducto de excreción.

a temperatura ambiente. Conservar las orinas a 2-4oC. es necesario efectuar la toma de muestra de sangre. vaciar de nuevo la vejiga y depositar toda la orina en el frasco. obstrucción de la vía renal). Al finalizar la recolección de orina. riñón policístico. Conservar las orinas a 2-4oC. se tiene que utilizar un frasco de 2. Conservación Centrifugación y separación del suero. c) Al cumplir las 24 horas. 7 días 2-4oC y 6 meses en congelación. B) Cuando se entrega la muestra de orina.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 89 El aclaramiento de la creatinina se modifica en relación con la enfermedad renal (glomerulonefritis agudas o crónicas. con tapón de rosca. si es necesario. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. ésta debe ser enviada inmediatamente al laboratorio. Modalidad de la toma de muestra A) Recoger la orina de 24 horas con el siguiente procedimiento: Para la recolección de orina de 24 horas.0 litros. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. b) Posteriormente. Transporte La muestra de orina debe ser transportada de 2-4oC. A) Registro Escrito claramente. . comenzar a recoger toda la orina de 24 horas. Modalidad de solicitud En rutina y con explicación de su solicitud. Para la recogida de la orina. de boca ancha. Preparación del paciente Ayuno. vaciar la vejiga e eliminar toda la orina. se procede del modo siguiente: a) En el tiempo preestablecido. Añadir al frasco un estabilizante. la muestra de sangre.5 3.

en el resultado la no idoneidad de la muestra. Especificidad Referirse a las metódicas de creatinina. 90 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. eventualmente.0 mg/dl. V/min= volumen por minuto (cantidad de la diuresis entre 1440). Metódica de determinación: Cu x V/min Aclaramiento de la creatinina = ———————————— Ps donde: Cu= concentración de creatinina en la orina expresado en mg/dl. Es lineal hasta 25. filamentos de fibrina.3 mg/dl para lograr valores más correctos. Su sensibilidad es 0. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. Es necesario corregir el valor de 0. de barbitúricos. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Ps = concentración de creatinina en suero expresado en mg/dl. turbidez. Procedimiento analítico Ver metódica de la creatinina.m. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. Interferencias Las interferencias significativas se deben: Para las orinas: Presencia de partículas en suspensión (centrifugar las orinas). Sensibilidad Referirse a las metódicas de creatinina. Presencia de bacterias. Las muestras de suero tienen proteínas que pueden reaccionar no específicamente con el método Jaffe. Mala recolección de orina.1 mg/dl. Notas sobre la metódica: Linealidad Referirse a las metódicas de creatinina. .p. Señalar. de cuerpos cetónicos. presencia de coágulos.

El cloro ingresa en las células en medidas insignificantes. X Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio.0 mg/dl. el cloro se correlaciona no sólo con el equilibrio osmótico y el balance hídrico.0 g/l. ELECTROLITROS 4.0 mg/dl.16 CLORO Generalidad El cloro representa el principal anión extracelular. por este motivo. y también eventual estado de embarazo. y en la hemoconcentración (diabetes insípida y en la nefropatía). sino que también se correlaciona con el equilibrio ácido-base. X Controlar sexo y edad del paciente. . Indicaciones La determinación del cloro es importante en la condición de hemodilución y/o deshidratación hipoosmótica (enfermedad de Addison). proteínas. cloro). Acetona ≥ 50. como el sodio. Criterios de validación X Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea. Lipemia: triglicéridos ≥ 2000. Valor de referencia ≥ 70ml/min. mioglobulina). potasio. Mientras el sodio es el principal catión. el cloro comparte esta característica con los bicarbonatos. potasio. X Controlar parámetros del metabolismo muscular (CPK. en los cuales sustituye los bicarbonatos que pasan al plasma. Modo de escribir los resultados El aclaramiento de la creatinina se escribe en ml/minutos sin cifra decimal. en la acidosis y en la alcalosis metabólicas (vómito). densidad urinaria).Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 91 Para la sangre: Hemólisis: con Hb ≥ 10. el principal catión. Modalidad de solicitud En rutina y emergencia.0 mg/dl. Ictérico: bilirrubina ≥ 40. con la excepción de los glóbulos rojos.

. Metódicas de determinación: Método de Halmilton modificado por Schosinsky El ión cloruro presente en la muetra reacciona con tiocianato de mercurio II produciendo cloruro de mercurio no disociado y ión tiocianato libre.+ Hg (SCN)2 ———> HgCl2 + 2SCN- 3SCN. emiten radiaciones luminosas proporcionales a la cantidad de la sustancia nebolizada.m. y cuando vuelven a la temperatura inicial. 7 días + 2-4oC y 6 meses en congelación. presencia de coágulos. 2Cl. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. se oxidan átomos y moléculas. Transporte La muestra de sangre debe ser transportada a temperatura ambiente. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. eventualmente. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. cuya intensidad es proporcional a la concentración de cloruro. Conservación Centrifugación y separación del suero. A) Registro Escrito claramente. 92 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Preparación del paciente Ninguna. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. turbidez. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia.p. filamentos de fibrina. en el resultado la no idoneidad de la muestra. Señalar. Este reacciona con ión férrico produciendo tiocianato férrico de color rojo ladrillo. + Fe+3 ———> Fe (SCN)3 Fotometría de llama A temperatura de llama.

repetir la medida. Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Fotómetro de potenciometría directa X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. Verificar el resultado: X Si el valor del cloro es < 85. Electrodos a iones selectivos (ISE) Electrodos selectivos para los iones cloro. potasio y sodio permiten utilizar esta técnica potensiométrica y ejecutar una medida electrométrica del catión. Control de Calidad Se deberán usar sueros. control normal y patológico.0 mEq/l ó ≥ 130. Procedimiento analítico El método ISE (potenciometría directa) se basa en la calibración del cloro a través de dos estándares acuosos: uno con baja y uno con alta concentración conocida. en las mismas condiciones que las muestras. y con un estándar interno de referencia con una concentración que se pone en medio de los valores de la calibración alta y baja durante la medida.0 mEq/l. .Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 93 Espectrofotometría de absorción atómica El cloro puede ser medido con esta técnica.

procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. TSH. densidad urinaria). . Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 10. 94 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad X Si el valor del resultado repetido es el mismo. potasio. X Si el valor del resultado repetido es diferente. Criterios de validación Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea. Controlar algunas hormonas (aldosterona. cortisol. proteínas.0 g/l (el cloro se encuentra en concentraciones elevadas en los glóbulos rojos). tranquilizantes (tricíclicos. Fármacos diuréticos. fenotiazinas). potasio. X Con valores de cloro ≥ de 150. Especificidad La metódica es específica para el ion cloro. se puede entregar el resultado. repetir la medida. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb > 10. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado. Notas sobre la metódica: Linealidad Es lineal hasta 150.0 mEq/l.0 mEq/l. se puede entregar. Modo de escribir los resultados El cloro se escribe sin cifra decimal.0 mEq/l. sea concentrada y diluida 1:2 con agua destilada y con un control patológico. osmolaridad). Valor de referencia 95-110 mEq/l. Controlar glucosa y eventual terapia diurética. ACTH. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro los rangos establecidos. FT4). diluir la muestra 1:3 con agua destilada. Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio. renina. siempre usando el control patológico.

X Hipertiroidismo. El nivel de magnesio en el plasma se mantiene de forma constante en un límite muy estrecho entre 1. X Infección por HIV.58 . El ion Mg es el cofactor de muchos sistemas enzimáticos. Se evidencia una correlación entre disminución de magnesio. hiperparatiroidismo). Modalidad de solicitud En rutina. terapia diurética.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 95 Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente. X Uso de antiácidos. antibióticos. uremia. fósforo y algunas enfermedades cardíacas (arritmia ventricular. . Una cantidad excesiva de calcio y fósforo en los alimentos disminuye la absorción del magnesio. rescisión intestinal. Del magnesio presente en los alimentos. glomerulonefritis. con valores inferiores a 75 mEq/l y superiores a 126. El aumento del magnesio se debe a: X Reducida pérdida por vía renal (insuficiencia renal. cirrosis hepática. laxantes que contienen magnesio. X Reducida absorción y pérdida intestinal (diarrea. el magnesio representa el catión intracelular más importante.2. alcoholismo. alcoholismo).0 mEq/l.55 mg%. El magnesio se encuentra en muchos vegetales y en la carne. X Cetoacidosis diabética. se elimina por la vía renal. se presenta en forma ionizada. X Embarazo. insuficiencia renal. 1/3 se absorbe a nivel del primer tracto intestinal. hiperaldosteronismo.17 MAGNESIO Generalidad Además del potasio. la otra parte participa en el metabolismo intermedio. alteraciones del calcio. 4. En la sangre se encuentra en los glóbulos rojos y. enfermedad de Crohn). X Aumento de la pérdida por vía renal (hipoparatiroidismo. El 69.0% del magnesio se encuentra en el tejido óseo. diabetes. Indicaciones Se emplea en el diagnóstico para el monitoreo del metabolismo del magnesio. potasio. pielonefritis. en el plasma. enteritis. X Quemaduras. La disminución del magnesio se debe a: X Reducida introducción con dieta pobre en carne y vegetales. y es indispensable en todas las reacciones ATP dependientes. X Hipotiroidismo. espasmos de las arterias coronarias).

debido a que los eritrocitos contienen aproximadamente 3 veces más iones de magnesio. Transporte Se puede transportar a temperatura ambiente. originando un complejo coloreado que puede determinarse espectrofotométricamente. 7 días + 2 + 4oC y 12 meses en congelación. La toma de muestra se puede conservar por 3 días a temperatura ambiente de 20-25oC. Señalar. . La presencia de EGTA en el reactivo evita la interferencia del calcio. Modalidad de toma de muestra Ninguna particularidad. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. presencia de coágulos. Conservación Centrifugación y pronta separación del suero de la parte corposcular. en el resultado la no idoneidad de la muestra. A) Registro Escrito claramente. ya que el contacto prolongado con el coágulo puede aumentar los valores del magnesio. filamentos de fibrina. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. 96 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Preparación del paciente Ayuno. turbidez.p. eventualmente.m. Metódicas de determinación: Metódica de Calmagita El magnesio presente en la muestra reacciona con la calmagita en medio alcalino. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r.

X Controlar parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea (PTH. cloro). .0 g/l. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 10.5 mg/dl Criterios de validación X Confrontar analitos del metabolismo (calcio. X Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea.4-2. TSH.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 97 Metódica colorimétrica y procedimiento analítico El magnesio forma con el azul de xilidil.5-2. Es necesario reducir la absorción de CO2 para evitar una reducción de la estabilidad de los reactivos y de la calibración. Lipemia: triglicérido ≥ 1000. Fármacos diuréticos.2 mg/dl Niños de 5-6 meses 1. Valor de referencia Neonatos de 2-4 días 1. Notas sobre la metódica: Linealidad Es lineal hasta 29. proteínas. potasio. X Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio. en ambiente alcalino. Especificidad La metódica es específica para el magnesio. densidad urinaria). hormonas tiroideas).1 mg/dl Adultos 1.0 mg/dl. Ictericia: bilirrubina ≥ 60. fosfaturia). la concentración del magnesio se determina midiendo fotométricamente el descenso del azul de xilidil. fósforo. laxantes.7-2.0 mg/dl. Modo de escribir los resultados El magnesio se escribe con una cifra decimal. calciuria.3 mg/dl Niños 6-12 años 1.7-2. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 0.07 mg/dl.0 mg/dl. un complejo de color rojo.

X Destrucción celular (hemólisis. Preparación del paciente Ayuno en rutina. contenido en el 98. como el sodio. transfusión de sangre conservada). pequeñas cantidades se eliminan con las heces. Indicaciones La determinación de la potasemia tiene una gran importancia para la función del miocardio. necrosis de parénquima). parenteral. equilibrio hidroelectrolítico y también para el monitoreo de la terapia diurética.0 % de los espacios intracelulares. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. La cantidad de la potasemia puede disminuir: X En insuficiencias de contribución alimenticia y por enfermedades gastrointestinales (vómitos y diarrea). Modalidad de toma de muestra Ninguna particularidad. Tiene la tarea de mantener la osmolaridad. intestinal. Conservación Centrifugación y separación del suero. 98 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 4. El potasio puede aumentar por: X Una excesiva introducción (alimenticia. y también regula la función de la excitabilidad de las fibrocélulas musculares. Modalidad de solicitud En rutina y/o emergencia. y también por acidosis diabética. y también del equilibrio ácido–base. X Alteraciones orgánica y funcional del riñón.18 POTASIO Generalidad El potasio es el principal catión intracelular. La cantidad de potasio intracelular es regulada. La principal vía de eliminación del potasio es renal. Transporte Se puede transportar a temperatura ambiente. 7 días + 2-4oC y 6 meses en congelación. La medida del potasio sirve también en la enfermedad del riñón. X Por excesiva eliminación del riñón (exceso de la hormona córtico surenal). por la bomba de sodio potasio. .

poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. potasio y sodio permiten utilizar esta técnica potensiométrica directa y ejecutar una medida electrométrica del catión. Verificar idoneidad del suero o plasma: ictericia. emiten radiaciones luminosas (776 nm).p. y con un estándar interno de referencia con una concentración que se pone en medio de los valores de la calibración alta y baja durante la medida.m. A) Registro Escrito claramente. Espectrofotometría de absorción atómica El potasio puede ser medido con esta técnica. Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra. presencia de coágulos. turbidez. Electrodos a iones selectivos (ISE) Electrodos selectivos para los iones cloro. y cuando vuelven a la temperatura inicial. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. filamentos de fibrina. proporcionales a la cantidad de la sustancia nebolizada. Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul . Metódicas de determinación: Fotometría de llama A temperatura de llama. Procedimiento analítico El método ISE (potenciometría directa) se basa en la calibración del potasio a través de dos estándares acuosos: uno con baja y uno con alta concentración conocida. se oxidan átomos y moléculas.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 99 Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.

procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido.5 mEq/l ó > 6. Control de Calidad Se deberán usar sueros. siempre usando el control patológico.0 mEq/l. en las mismas condiciones que las muestras. . sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica y con un control patológico.2 mEq/l. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 0. Verificar el resultado: X Si el valor del potasio es < 2. diluir la muestra 1:3 con solución fisiológica. y el control está dentro de los rangos establecidos. X Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado. repetir la medida. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de potasio es lineal hasta 7. se puede entregar el resultado. se puede entregar. X Si el valor del resultado repetido es diferente. repetir la medida.0 mEq/l. X Si el valor del resultado repetido es el mismo. 100 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Fotómetro electrodo selectivo de potenciometria directa X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. X Con valores de potasio ≥ de 7.0 mEq/l. control normal y patológico.

0 g/l (el potasio se encuentra en concentraciones elevadas en los glóbulos rojos). por la bomba de sodio potasio. y también de los equilibrios ácido–base.7 mEq/l y superiores a 6.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 101 Especificidad La metódica es específica para el potasio. proteínas. X Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio. como el sodio. X Controlar parámetros de funcionalidad cardíaca. La cantidad de potasio intracelular es regulada. que se puede difundir libremente. a fin de mantener la electro neutralidad. en menor cantidad. El sodio condiciona las variaciones del equilibrio hídrico. La salida del sodio desde la célula está compensada por la penetración del potasio. por las heces y el sudor. la absorción de sodio es controlada por la hormona aldosterona. La cantidad de sodio en el organismo se mantiene constante para la regulación renal. cloro). densidad urinaria). Fármacos diuréticos.2 mEq/l. X Controlar eventual terapia diurética. . con valores inferiores a 2. aunque además tiene una cierta importancia el cortisol.19 SODIO Generalidad El sodio es el principal catión extracelular. La principal eliminación del sodio es por el riñón.7-5. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 10. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente. Modo de escribir los resultados El potasio se escribe con una cifra decimal. 4.5 mEq/l Criterios de validación X Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea. La principal función del sodio es la de mantener la cantidad de los líquidos extracelulares y el volumen de todos los líquidos en el organismo. Valor de referencia 3. X Controlar glucosa.

7 días 2-4oC y 6 meses en congelación. X Por excesiva diuresis. X En diarreas imponentes. hipo nutrición. X Daño de la bomba sodio-potasio (caquexia. Conservación Centrifugación y separación del suero. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. A) Registro Escrito claramente. estrés después de intervención por cirugía). Preparación del paciente Ayuno en rutina. X Excesiva retención de agua o por alteración del centro de la sed. X Deshidratación. . X Enfermedad crónica del riñón. Modalidad de toma de muestra Ninguna particularidad. Modalidad de solicitud En rutina y/o emergencia. Transporte Se puede transportar a temperatura ambiente. El sodio puede aumentar: X Contribución excesiva de sodio. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. 102 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Indicaciones El sodio puede disminuir por: X Excesiva suministración de agua con disminuida capacidad de eliminación. X Pérdida enorme de sodio con la orina (diabetes insípida). X Por quemaduras graves.

Electrodos a iones selectivos (ISE) Electrodos selectivos para los iones cloro. y cuando vuelven a la temperatura inicial. emiten radiaciones luminosas (589 nm) proporcionales a la cantidad de la sustancia nebolizada. potasio y sodio permiten utilizar esta técnica potensiométrica y ejecutar una medida electrométrica del catión.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 103 B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. Procedimiento analítico El método ISE (potenciometría directa) se basa en la calibración del sodio a través de dos estándares acuosos: uno con baja y uno con alta concentración conocida. filamentos de fibrina. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. se oxidan átomos y moléculas.p. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. Metódicas de determinación: Fotometría de llama A temperatura de llama. y con un estándar interno de referencia con una concentración que se pone en medio de los valores de la calibración alta y baja durante la medida.m. presencia de coágulos. Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra. Espectrofotometría de absorción atómica El sodio puede ser medido con esta técnica. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. turbidez. Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul .

X Si el valor del resultado repetido es el mismo.0 mEq/l.0 mEq/l ó ≥ 156. X Si el valor del resultado repetido es diferente. Verificar el resultado X Si el valor de sodio es < 126. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica del sodio es lineal hasta 180. en las mismas condiciones que las muestras. sea concentrada y diluida 1:2 con agua destilada y con un control patológico. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. . X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro el rango establecido. se puede entregar el resultado.0 mEq/l. diluir la muestra 1:3 con agua destilada. X Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado. control normal y patológico. repetir la medida. X Con valores de sodio ≥ de 180. Control de Calidad Se deberán usar sueros. repetir la medida. 104 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Equipos X Centrífuga X Fotómetro electrodo selectivo de potenciometría directa X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial.0 mEq/l. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 10. Especificidad La metódica es específica para el sodio. siempre usando el control patológico. se puede entregar.0 mEq/l.

La ceroplasmina provoca la oxidación a Fe+++. potasio. Cada proteína de trasferrina puede transportar al máximo 2 iones de hierro. ACTH.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 105 Interferencias Interferencias más significativas: Algunos fármacos que bajan los niveles de sodio: diuréticos. Criterios de validación X Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea.0 mEq/l. la cual puede cargarse de nuevo de hierro desde los depósitos tisulares o desde las células de la mucosa intestinal.0 mg. TSH y FT4. como hierro Fe++. densidad urinaria). tranquilizantes tricíclicos. renina.0 mEq/l. el transporte del hierro se hace con el complejo transferrina hierro. X Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (cloro.20 HIERRO Generalidades El hierro se absorbe a nivel duodenal y en la parte superior del yeyuno. El hierro se liga a las proteínas de transporte antes de ingresar al plasma. Comunicación de riesgo Se debe comunicar inmediatamente con valores inferiores a 125. La otra parte proviene del catabolismo hemoglobínico. 4. Valor de referencia 132. la cual es utilizada más despacio por el organismo. de modo particular. cortisol. La parte residual del hierro se fija en los depósitos tisulares como ferritina. osmolaridad).0 mEq/l y superiores a 158. El hierro presente en el nivel intestinal proviene en gran parte de los alimentos de forma trivalente. El hierro se libera también desde los glóbulos rojos maduros y es nuevamente utilizado para la síntesis de nueva hemoglobina. X Controlar glucosa. Para ser absorbido. el hierro tiene que ser reducido mediante la vitamina C.0 – 148. aumenta la cantidad de transferrina insaturada en la sangre. X Controlar eventual terapia diurética. X Controlar algunos parámetros hormonales: aldosterona. . que bajo tal forma se liga a la transferrina. fenotiazina. Cuando los iones férricos son sustraídos a la sangre desde el órgano hemopoyético. Modo de escribir los resultados El sodio se escribe sin cifra decimal. proteínas. la cantidad diaria es de 1.

X Hemorragia crónica. Disminución de hierro: X Insuficiente introducción de hierro con la dieta (niños con nutrición exclusivamente de leche). en el diagnóstico de hemocromatosi. X Enfermedad infecciosa crónica y en otras enfermedades en las cuales el hierro se acumula en las células del sistema retículo endotelial. nefropatía crónica. X Elimina una pequeña cantidad de hierro a través de la bilis. en mucho tiempo con elevada cantidad de hierro. vía oral. Preparación del paciente Necesario ayuno. Modalidad de solicitud Sólo rutina. X Hepatitis aguda. . X Con el término de hierro se indica el hierro presente en el plasma. X Necesidad aumentada como en el embarazo y en la lactancia. 106 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad El hígado tiene una importancia fundamental en el metabolismo del hierro: X Sirve como depósito principal. como en la anemia perniciosa. X Insuficiencia en la absorción por diarrea crónica. en las cual las células del hígado liberan en la sangre el hierro contenido en el citoplasma. El nivel de hierro en el organismo disminuye por la tarde y sube por la mañana. esta es la cuota de hierro que constituye el hierro de transporte. Las anemias por carencia de hierro son de tipo microcítico e hipocrómico. Aumento de hierro: X Aumentada destrucción de los glóbulos rojos como en la anemia hemolítica. Indicaciones La determinación de hierro sirve en el diagnóstico de anemia por carencia de hierro. X Alterada síntesis de la hemoglobina. X Sintetiza la transferrina. X Participa en la eritropoyesi. X Hemosiderosis por muchas transfusiones o por introducción. X Participa en la regulación de la absorción intestinal. Los valores del hierro varían mucho con la edad y con el ciclo biológico circadiano. El hierro no se puede considerar un índice fiel del contenido de hierro en el organismo. X Insuficiente absorción en caso de aclorhidria en los pacientes gastroresegados.

Señalar. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. X En función del reactivo cromógeno (ferrozina. turbidez. Conservación Centrifugación y separación del suero. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. en el resultado la no idoneidad de la muestra. después deproteinización.p. X En función de la modalidad de acidificación y de las condiciones deproteinización. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. Metódica de determinación: Espectrofotometría por absorción atómica Con atomización con acetileno. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. A) Registro Escrito claramente. por 3 semanas a 2-4oC y algunos años en congelación. Transporte Transportar a temperatura ambiente.).Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 107 Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. . filamentos de fibrina. La toma de muestra se puede conservar por 7 días a temperatura ambiente de 20-25oC.m. Metódica colorimétrica con deproteinización Estas metódicas se diferencian entre ellas: X En función de la sustancia usada para la reducción del Fe+++ a Fe++. etc. presencia de coágulos. eventualmente.3 nm. se mide a 248.

Especificidad La metódica es específica para el hierro. Fe++ + Ferrozine ———> complejo coloreado Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. El ácido ascórbico reduce los iones férricos a ferrosos. el hierro es liberado de la transferrina en iones férricos libres. en las mismas condiciones que las muestras. .0 ug/dl. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 5.0 ug/dl. 108 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Metódica colorimétrica sin deproteinización En medio ácido. Control de Calidad Se deberán usar sueros. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de hierro es lineal hasta 500. control normal y patológico. los cuales reaccionan con la Ferrozine formando un complejo coloreado de violeta.

infecciosas. PCR. Muestras con precipitados deben ser bien centrifugados. ANA. valor medio globular. Lipemia > 2000. La próstata sintetiza la fosfatasa ácida bajo el estímulo de la testosterona: las células prostáticas no estimuladas no producen fosfatasa ácida. índice de anisocitosis). Normalmente. hemoglobina. ferritina).0 g/L.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 109 Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis con hemoglobina superiores a 1. y se encuentra además en la próstata.0 mg/dl. donde se localiza la concentración más elevada.0 mg/dl de triglicéridos. también la fracción prostática se encuentra en cantidad muy pequeña. aptoglobulina). . El oxalato y el EDTA pueden dar valor bajo. hematuria). hígado. leucocitos. valor medio de hemoglobina. 4. proveniente de los glóbulos rojos y plaquetas. Criterios de validación X Confrontar con los diferentes parámetros eritrocitarios (glóbulos rojos. hematócritos. la fosfatasa ácida se encuentra en el plasma sólo en pequeña cantidad. La fosfatasa ácida es muy difundida en el organismo. Modo de escribir los resultados El hierro se escribe sin cifra decimal. cerca de 100 veces más que en otros tejidos. X Controlar eventual terapia farmacológica. en el estómago.0. neoplásicas.21 FOSFATASA ACIDA Generalidad La fosfatasa ácida está constituida por un grupo de enzimas. fibrinógeno. marcadores neoplásicos). en los glóbulos rojos y las plaquetas. X Controlar parámetros de pérdida de sangre (sangre oculta en las heces. las cuales hidrolizan los esteres fosfóricos en ambiente ácido. reticulocitos. Valor de referencia Hombre 60-158 ug/dl.8 – 6. X Controlar parámetros índice de hemólisis (bilirrubina. X Controlar parámetros de enfermedades inflamatoria. bazo. LDH. Suero ictérico: bilirrubina > 60. autoinmunes y degenerativas (VSG. El pH óptimo de la actividad enzimática oscila entre 4. X Controlar otros parámetros del metabolismo del hierro (transferrina. Mujer 37-145 ug/dl.

Transporte Transportar a temperatura ambiente dentro de las cuatros horas después de obtenida la muestra. X alteraciones de las plaquetas. como leucemia. por 8 días a + 4oC y por 2 meses a –20oC. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. A) Registro Escrito claramente. X alteraciones de los glóbulos blancos. presencia de . de suero. Ejecutar el examen cuanto antes: si no se puede proceder antes. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. Se puede encontrar aumento de la fosfatasa ácida en: X alteraciones de los glóbulos rojos. en cantidad de una gota por cada ml. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. Modalidad de solicitud Sólo rutina. La toma de muestra se puede conservar por 2 días a temperatura ambiente de 20-25oC. como en muchas anemias. Preparación del paciente Ninguna particularidad. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r.8 mol/l ). Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. especialmente en los enfermos con metástasis ósea.p. añadir a la muestra una gota de ácido acético (0. Conservación Centrifugación y separación del suero. 110 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Indicaciones La determinación de la fosfatasa ácida está correlacionada a las enfermedades neoplásicas de la próstata.m.

α –Naftil-fosfato + H2O FAC α.0 U/L.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 111 coágulos. El α –naftol producido reacciona con una sal de diazonio (FRTR). Control de Calidad Se deberán usar sueros. Señalar. filamentos de fibrina. control normal y patológico. . formando un cromógeno. turbidez. Metódica colorimétrica y procedimiento de determinación: La fosfatasa ácida cataliza en medio ácido la hidrólisis del α –naftil fosfato. en el resultado la no idoneidad de la muestra.Naftol + fosfato —> α –Naftol + FRTR ———> Cromógeno azoico Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. en las mismas condiciones que las muestras. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de la fosfatasa ácida es lineal hasta 200. eventualmente.

22 FOSFATASA ALCALINA Generalidades La fosfatasa alcalina es un grupo de enzimas que cataliza la hidrólisis del ligamiento estérico. pulmones. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 2. TP. mucosa intestinal. entre álcali y ácido fosfórico. en los niños. después aumentan el doble valor. Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000. tejido del hueso y la mucosa intestinal. La isoenzima de origen hepático constituye la principal fracción de la fosfatasa alcalina en adultos. X Confrontar con parámetros de estasis biliares (bilirrubina. 112 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es 0.0 g/l (porque la fosfatasa ácida se encuentra en los glóbulos rojos). Criterios de validación X Confrontar con funcionalidad del hígado (transaminasa. y después vuelven a los valores de los adultos. X Confrontar parámetros oncológicos. hasta los 10 años. colinesterasa). Modo de escribir los resultados La fosfatasa ácida se escribe sin cifra decimal.0 U/L. hígado. La presencia de oxalato. se evidencia la producida en los huesos. . Ictericia: con bilirrubina ≥ 60. El valor de la fosfatasa alcalina en el plasma es diferente con la edad: en el nacimiento. etc.1 U/L. los valores son iguales a los de adultos. Valor de referencia Hasta 10. GGT). La fosfatasa alcalina en el plasma se encuentra constituida por algunas isoenzimas producidas por el hígado. bazo. se mantienen estos valores elevados entre 11 y 16 años. en particular PSA.0 mg/dl. La fosfatasa alcalina se encuentra en muchos tejidos: huesos. con liberación de fosfato inorgánico. 4. tiroides. Especificidad La metódica es específica para la fosfatasa ácida.0 mg/dl. citrato y EDTA pueden disminuir la actividad de la fosfatasa ácida. fosfatasa alcalina.

X Hepatopatías celulares. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. La muestra se puede conservar por 2 días a temperatura ambiente de 20-25oC. Transporte Transportar a temperatura ambiente. porque éste es el ión necesario para la actividad de la fosfatasa alcalina. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. osteomalacia. A) Registro Escrito claramente. . Modalidad de solicitud Sólo rutina.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 113 En los hombres. enfermedad de Paget. Conservación Centrifugación y separación del suero. debido a la incrementada actividad de los osteoblastos (raquitismo. trauma o fracturas ósea). la fosfatasa alcalina es mayor que en las mujeres. Indicaciones El aumento de la fosfatasa alcalina se encuentra en: X Enfermedad del hígado por un aumento de la fracción hepática o de la fracción de los huesos por obstrucción de la vía biliares. X Hepatopatía obstructiva. Preparación del paciente Ayuno. X Enfermedad ósea por un aumento de la fracción ósea. La disminución de la fosfatasa alcalina se origina en la disminución del magnesio. 7 días 2-4oC y 4 semanas en congelación a -20oC. hiperparatiroidismo. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. neoplasia del tejido óseo.

poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. 114 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado.m. control normal y patológico. Control de Calidad Se deberán usar sueros. turbidez. eventualmente. en las mismas condiciones que las muestras. p-nitrofenilfosfato + H2O ALP p-nitrofenol + fosfato ——> <—— Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. Metódica de determinación: Metódica colorimétrica cinética optimizada El sustrato p-nitrofenilfosfato es hidrolizado por la enzima. Señalar. presencia de coágulos. en el resultado la no idoneidad de la muestra. produciendo p-nitrofenol y ácido fosfórico. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. La reacción se interrumpe con hidróxido de sodio que convierte el p-nitrofenol en ión paranitrofenilato. . filamentos de fibrina.p.

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 115 Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de la fosfatasa alcalina es lineal hasta 2000. X Confrontar el valor del magnesio. X Confrontar con funcionalidad del hígado (transaminasa.0 g/l (porque la fosfatasa alcalina se encuentra en los glóbulos rojos). colinesterasa). Modo de escribir los resultados La fosfatasa alcalina se escribe sin cifra decimal. . citrato y EDTA puede disminuir la actividad de la fosfatasa alcalina por la pérdida de iones de magnesio.0 U/L Mujeres hasta 240. fósforo).0 mg/dl.0 U/L. Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000. X Confrontar con parámetros de estasis biliares (bilirrubina.0 mg/dl. GGT). Especificidad La metódica es específica para la fosfatasa alcalina.0 U/L Niños de 7-12 años hasta 720. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 2.0 U/L. X Confrontar con parámetros del metabolismo óseo: (calcio. Valor de referencia Hombres hasta 279.0 U/L Neonatos inferior 600. X Controlar eventual estado tóxico (alcoholismo). Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 5.0 U/L Criterios de validación X Controlar la edad del paciente.0 U/L Niños de 6 días a 1 año inferior 1100 U/L Niños de 2.7 años hasta 650. Ictericia: con bilirrubina ≥ 60. X Controlar los parámetros de hepatitis. TP. La presencia de oxalato.

una alta concentración de calcio hace disminuir la absorción de los fosfatos y provoca la formación en el intestino de fosfato de calcio insoluble. hipovitaminosis A). en la noche. hace productos insolubles. se tiene un aumento del 30. pues este último ejerce una influencia directa sobre los niveles de fosfato a través de una regulación. en los líquidos intracelulares y en todas las estructuras celulares. El fósforo es absorbido en los primeros tractos del intestino delgado en ambiente ácido. el restante. X En el transporte de los metabolitos a través de las membranas celulares y sobre la transferencia de energía (ATP. El 80. La PTH (paratohormona) aumenta la absorción de modo indirecto. La regulación del fósforo se da principalmente a través de los riñones. en el tejido muscular. Es importante: X En el procedimiento de formación de absorción del tejido óseo. . El fósforo se encuentra de forma orgánica en los glóbulos rojos y en el plasma como fosfolípido. osteomalacia. mientras.0%. y se encuentra en forma orgánica e inorgánica. el fósforo está ligado a los lípidos (fosfolípidos) y a las proteínas (fosfoproteínas). mala absorción intestinal. en ambiente alcalino. El fósforo está presente en muchos alimentos con altos contenidos proteicos (leche y productos derivados de la leche). en la cual. la hormona del crecimiento (GH) aumenta la absorción intestinal directa del fósforo.0% está en equilibrio dinámico en los huesos. X En la composición de los fosfolípidos. X En la absorción intestinal de glúcidos y vitaminas. UTP. fosfocreatina). un 11. En los líquidos extracelulares. en el laboratorio se determina el fósforo inorgánico. El fósforo puede disminuir en: X La reducción de la absorción intestinal (raquitismo. en relación con el calcio. 116 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 4. Los niveles del fósforo en el suero son diferentes durante el día. estimulando la vitamina D. Normalmente.23 FÓSFORO INORGÁNICO Generalidad El fósforo es un importante anión intra-extracelular. X En la regulación de la reacción de la actividad de las diferentes fases metabólicas (constituyente del AMP cíclico). El metabolismo del fósforo está estrechamente ligado al calcio. Indicaciones La determinación del fósforo sérico es importante en el diagnóstico de enfermedades óseas y renales. Los factores que regulan los niveles de fosfatos en el organismo son los mismos que regulan los del calcio.0% con referencia a los valores de la mañana.

Preparación del paciente Ayuno. algunas leucemias. turbidez. X La osteolisis (metástasis ósea. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Modalidad de solicitud Sólo rutina. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado.m.p. filamentos de fibrina. 1 día 2-4oC y 1 año en congelación. presencia de coágulos. eventualmente. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. X El aumento del GH (somatotropina). en el resultado la no idoneidad de la muestra. Conservación Centrifugación y separación del suero. El fósforo puede aumentar por: X La excesiva absorción (hipervitaminosis D). Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. plasmocitoma). X El excesivo pasaje intracelular (suministro parenteral de glucosa o insulina). . La muestra se puede conservar por 8 horas a temperatura ambiente de 20-25oC. raquitismo renal). A) Registro Escrito claramente. Señalar.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 117 X La eliminación renal excesiva (hiperparatiroidismo. Transporte Transportar a temperatura ambiente. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.

El arsenito/citrato se combina con el exceso de molibdato. . desarrollándose el color en medio arsenito/citrato. El color obtenido se mide entre 620-650 nm. para dar fosfomolibdado que es reducido por el ácido ascórbico a azul de molibdeno. Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. en presencia de glucógeno y de la enzima fosforilasa. Formación de un complejo fosfomolibdato y procedimiento analítico El fosfato inorgánico reacciona en medio ácido con el molibdato. 118 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Metódicas de determinación: Formación de fosfomolibdato-vanadato El fósforo inorgánico reacciona en ambiente ácido con molibdato y vanadato con formación de un compuesto de color amarillo. Metódica enzimática El fosfato inorgánico. forma glucosa- 1-fosfato que produce a través de la enzima 6-fosfogluconato NADPH y que es medido a 340 nm. impidiendo su reacción posterior con el fosfato liberado de los esteres labiles.

Valor de referencia Adulto Hasta 4.0 mg/dl.0 mg/dl.0 g/l. calciuria. Modo de escribir los resultados El fósforo se escribe sin cifra decimal. X Confrontar con parámetros de funcionalidad renal (creatinina. fosfaturia). X Confrontar con parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea (TSH. Ictericia: con bilirrubina ≥ 56. X Confrontar con parámetros de equilibrio electrolítico (sodio. hormonas tiroideas). lipasa). Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000. en las mismas condiciones que las muestras.5 mg/dl Niños Hasta 6. potasio. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de fósforo es lineal hasta 20. cloro). Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 0. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 2. control normal y patológico. X Confrontar con funcionalidad pancreática (amilasa. . proteinuria.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 119 Control de Calidad Se deberán usar sueros.5 mg/dl Criterios de validación X Confrontar con los analitos del metabolismo fósforo-cálcico (calcio. PTH. aclaramiento de la creatinina. densidad urinaria).0 mg/dl.3 mg/dl. Especificidad La metódica es específica para el fósforo inorgánico.

Se usa también en el diagnóstico para identificar el alcoholismo. La toma de muestra se puede conservar por 3 días a temperatura ambiente de 20-25oC. Parece que el aumento de la g-GT en las enfermedades hepáticas está en relación con una aumentada síntesis de la enzima a nivel hepático. A) Registro Escrito claramente. Indicaciones Un aumento de la g-GT se encuentra en todas las enfermedades del hígado y de las vías biliares. está presente tres isoenzimas que migran de modo distinto en la electroforesis. en las enfermedades del hígado. La g-GT está presente en muchos tejidos (hígado. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. bazo. pulmón. intestino y tiroides). El aumento más alto se encuentra en la obstrucción de las vías biliares. La determinación es importante en el diagnóstico de la metástasis hepática. Transporte Transportar a temperatura ambiente. La g-GT también se encuentra en la orina. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. . riñón.24 GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA Generalidad La gamma glutamil transferasa cataliza el transporte del grupo gamma–glutamínico. Modalidad de solicitud Emergencia y rutina. En el suero. para el monitoreo de la abstención del alcohol en la terapia de desintoxicación. 7 días 2-4oC y 1 año en congelación. donde su concentración es más elevada que en el suero. Preparación del paciente Ninguna. páncreas. 120 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 4. Conservación Centrifugación y separación del suero.

Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. eventualmente. desde el sustrato L-gamma glutamil p-nitroanilida. .p. En las condiciones de reacción. presencia de coágulos. turbidez. Control de Calidad Se deberán usar sueros. en el resultado la no idoneidad de la muestra. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. liberando p-nitroanilina en cantidades equimoleculares. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Señalar. γ -glutamil p-nitroanilida + glicilglicina γ-GT γ -glutamil glicilglicina + p-nitroanilina ——> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial.m. en las mismas condiciones que las muestras. a una molécula de glicilglicina (aceptor). la cantidad de p-nitroanilina liberada es directamente proporcional a la actividad γ –GT del suero. control normal y patológico. filamentos de fibrina.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 121 B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. Metódica de determinación: La g–glutamil transferasa es una carboxipeptidasa que cataliza la transferencia del grupo gamma-glutamilo.

X Controlar eventual absorción de terapia con antibióticos. Especificidad La metódica es específica para γ– GT. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 3.0 U/L Criterios de validación X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática. Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000. La oxidación de la glucosa es la principal fuente de energía para las células del organismo. Muchos antibióticos pueden dar valores elevados.0 mg/dl. Valor de referencia Hombres Hasta 50.0 U/L. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 1. Modo de escribir los resultados La γ – GT se escribe sin cifra decimal. Ictericia: con bilirrubina ≥ 40.0 mg/dl.25 GLUCOSA Generalidad La glucosa es el carbohidrato más importante presente en la sangre. X Controlar eventual estado tóxico (alcoholismo).5 g/l. 4. 122 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de γ – GT es lineal hasta 1200. La contribución de la glucosa con la dieta se hace fundamentalmente bajo la forma de polisacárido y almidón: . X Confrontar con parámetros de estasis biliar (bilirrubina.0 U/L Mujeres Hasta 36. X Controlar parámetros serológicos para la mononucleosis infecciosa y el citomegalovirus. fosfatasa alcalina).0 U/L.

endógenas. como diabetes mellitus en sus diferentes formas. La diabetes puede ser primaria o secundaria en relación con enfermedades del páncreas. por la glicólisis.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 123 dos enzimas —la ptialina salival y la amilasa pancreática— los dividen en monosacáridos: bajo esta forma. en modo particular. El glucagón y la adrenalina promueven la glicogenólisis hepática. Preparación del paciente Ayuno desde 6-8 horas. Muchas hormonas intervienen en el metabolismo glucídico. La glucosa no utilizada inmediatamente es polimerizada a glicógeno. como en la hiperpirexia y en la tirotoxicosis. . La toma de muestra se puede conservar por 8 horas a temperatura ambiente de 20-25oC y por 3 días a 2-4oC. puede ser insulino resistente por reducida tolerancia a los carbohidratos. etc. puede preverse una alimentación particular antes de la toma de muestra. Se puede utilizar como anticoagulante con fluoro o iodio. La insulina promueve la utilización de la glucosa. desde la contaminación de bacterias y. hipoglicemias neonatales. Transporte Transportar a temperatura ambiente. Para particulares indicaciones. los corticoides y ACTH favorecen la glicogénesis. Evitar estrés. Todas estas hormonas mantienen la concentración de glucosa entre los límites precisos. Indicaciones La determinación de glucosa se usa en el diagnóstico y control de la enfermedad del metabolismo de los carbohidratos. ya que puede comportase como una falsa hiperglicemia por una descarga de adrenalina. en accidente cerebro vascular y en el infarto del miocardio. la disfunción de la tiroides. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. se conserva en el hígado y en los tejidos musculares y/o se transforma en ácidos grasos que se acumulan como grasas. facilitando el pasaje entre las células. el cual los transforma en glucosa. Centrifugar y separar lo más pronto el suero de la parte celular. Puede existir exceso de consumo de glucosas en el trabajo muscular. hormonales. son absorbidos y entregados al hígado. Conservación La estabilidad de la glucosa en las muestras es influenciada por la temperatura de conservación. Modificaciones de la glucosa se pueden encontrar en la pancreatitis. en el traumatismo craneal. la somatropina inhibe la fosforilación de la glucosa. Modalidad de solicitud Emergencia y rutina. y también la fosforilación y la polimerización a glicógeno.

A) Registro Escrito claramente. lo cual se valora mediante la reacción de Trinder. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. turbidez. Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra. Metódicas de determinación: Método colorimétrico o–toluidina La glucosa en solución ácida por ácido acético se condensa con o-toluidina. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. Glucosa + O2 + H2O GOD H2O2 + Gluconato ——> 2H2O2 + fenol + 4-AF POD Quinona + 4 H2O —> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul .p. con formación de un complejo de color verde que se puede medir fotométricamente. filamentos de fibrina. ictericia. Verificar la idoneidad del suero o plasma: hemólisis. 124 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. presencia de coágulos.m. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. dando lugar a una quinona coloreada. Método enzimático GOD-POD y procedimiento analítico La glucosa oxidasa cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico y peróxido de hidrógeno.

Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 2. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro el rango establecido. Control de Calidad Se deberán usar sueros. Notas sobre la metódica Linealidad La metódica de glucosa es lineal hasta 450. Verificar el resultado: X Si el valor de la glucosa es < 50. se puede entregar el resultado.0 mg/dl. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. X Si el valor del resultado repetido es diferente.0 mg/dl. en las mismas condiciones que las muestras. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado. mg/dl. X Con valores de glucosa ≥ de 450. X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. siempre usando el control patológico.0 mg/dl y ≥ 350. diluir la muestra 1:3 con solución fisiológica. Especificidad La metódica es específica para la glucosa. .Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 125 Equipos X Centrífuga. repetir la medida.0 mg/dl. se puede entregar. X Si el valor del resultado repetido es el mismo. control normal y patológico. repetir la medida. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica y con un control patológico.

insulinemia).0 . Valor de referencia Adultos y niños 60. en el corazón. X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática.0 . cloro. Ictericia: con bilirrubina ≥ 36. potasio. Lipemia: con triglicéridos ≥ 430. el ácido ascórbico.0 g/l. en el riñón. X Controlar eventual parámetros de funcionalidad tiroidea y suprarrenal. que tienen difusión y están contenidas en concentraciones elevadas en el músculo esquelético. 4. en el hígado. Algunas hormonas.0 mg/dl. Modo de escribir los resultados La glucosa se escribe sin cifra decimal.60.26 DESHIDROGENASA LÁCTICA Generalidad Las deshidrogenasas lácticas son enzimas catalíticas del metabolismo intermedio de gran importancia.110. todas las sustancias reducientes pueden dar valor bajo de glucosa.0 mg/dl. en el cerebro. 126 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Interferencias Las interferencias mas significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 8.0 mg/dl Neonatos > de 6 horas 40.0 . algunas drogas y los derivados de las anfetaminas pueden dar valor alto de glucosa.0 mg/dl Neonatos > de 5 días 50.80. .0 mg/dl. La hormona adrenalina.0 mg/dl y superiores a 500. X Controlar parámetros del metabolismo glucósido (hemoglobina glicosilada. magnesio). en los pulmones y en los eritrocitos.0 mg/dl Criterios de validación X Controlar primeramente el examen de orina para eventual presencia de glucosa y/o cuerpos cetónicos. X Controlar parámetros del metabolismo lipídico y el valor del ácido úrico. X Controlar electrolitos (sodio. Las LDH son enzimas intracelulares citoplasmáticas. en el páncreas. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores inferiores a 50. las cuales catalizan la dehidrogenación del ácido láctico con formación de ácido pirúvico.

La toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. Los valores máximos se añaden después de 24-60 horas. . el derrame es seguramente de origen inflamatorio. eritrocitos. X LDH-5 2-13 % : hígado. El primer aumento de los valores se tiene después de 6-12 horas. riñón y pulmón. X LDH-2 24-40 % : miocardio. músculos y riñón. carcinoma metastásico). eritrocitos. ofreciendo así la posibilidad de hacer el diagnóstico del infarto. Modalidad de solicitud Emergencia y rutina. Se encuentra presente en estos pacientes. X LDH-3 18-30 % : riñón y cerebro. en las neoplasias malignas. La LDH también se emplea en el diagnóstico y monitoreo de enfermedades del hígado (hepatitis viral. músculos. en cantidad inclusive. si su nivel es elevado. Un aumento de la actividad de la LDH se encuentran en algunas hemopatías (anemia perniciosa. Es muy importante el diagnóstico de la LDH en el derrame seroso: si su nivel es bajo. Conservación Centrifugación y separación del suero. 4 días a + 4oC y 6 semanas congelada. X LDH-4 6-16 % : hígado. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. permanece elevado por un largo período. Preparación del paciente Ayuno en rutina.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 127 Se conocen cinco isoenzimas: X LDH-1 18-33 % : miocardio. cerebro.). Transporte Transportar a temperatura ambiente. 10 veces superior a los valores normales. músculo. músculos y riñón. cerebro. etc. en el linfoma maligno y en la pericarditis tuberculosa. es de naturaleza neoplásica. en el infarto cerebral. también si es de pequeña entidad. en caso de enfermedad reumática. en las leucemias agudas y crónicas. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. Indicaciones La determinación del LDH en el suero está indicada en el monitoreo del infarto del miocardio. cirrosis. crisis hemolítica. riñón y pulmón. y los valores regresan a la normalidad después de 7–15 días.

Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. 128 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad A) Registro Escrito claramente. turbidez. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. lipemia. Metódica de determinación: La enzima deshidrogenasa láctica cataliza la reducción de ácido pirúvico a ácido láctico en presencia de la coenzima niacín adenín dinucleótido reducido (NADH). presencia de coágulos.m.p. filamentos de fibrina. hemólisis. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. Piruvato + NADH + H+ LDH Lactato + NAD+ ——> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra. .

repetir la medida. X Con valores de LDH ≥ de 1200 U/L. Especificidad La metódica es específica para la LDH. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 6.0 mg/dl.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 129 Control de Calidad Se deberán usar sueros. X Si el valor del resultado repetido es el mismo.0 U/L. control normal y patológico. se puede entregar el resultado. Lipemia: con triglicéridos ≥ 1000. Valor de referencia Adultos 230-460 U/l Niños 250-580 U/L . se puede entregar. 1:8 con solución fisiológica siempre usando el control patológico.0 mg/dl. X Si el valor del resultado repetido es diferente. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica y con un control patológico.0 g/l.0 U/L y ≥ 800. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro el rango establecido. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. Verificar el resultado X Si el valor de la LDH es < 100. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de LDH es lineal hasta 1200. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 2. en las mismas condiciones que las muestras.0 U/L. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado.0 U/L. El paracetamol puede interferir. repetir la medida. diluir la muestra 1:4. Ictericia: con bilirrubina ≥ 60.

X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (TGP. las proteínas se fraccionan en albúmina (hidrosoluble) y globulinas (solubles en solución salina). colinesterasa. X Controlar biometría hemática completa. formadas de numerosos aminoácidos unidos con enlace peptídico. CK-MB. X Enzimáticas. La síntesis proteica se da en el citoplasma celular sobre la superficie de los ribosomas. mioglobina. X Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK. colinesterasa). parámetros de hepatitis A. 130 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Criterios de validación X Controlar el valor de otras enzimas de los parámetros cardíacos (CPK.27 PROTEINAS TOTALES Generalidad Las proteínas son sustancias orgánicas de elevado peso molecular. Los aminoácidos están activados enzimáticamente en presencia de ATP. X Mantenimiento de la presión osmótica. . X Coagulación y fibrinolisis. CK–MB masa. Las proteínas séricas constituyen una solución coloidal estable: la disminución de la albúmina por debajo del 50. B.0% del total y un aumento de las fracciones globulínicas causan una progresiva disminución de la estabilidad coloidal del suero. electroforesis de proteína. aldolasa). Las funciones principales de las proteínas son: X Nutritiva (asimilable a la fracción albumínica). X Función tapón (proteinas/proteinatos). Las proteínas introducidas con los alimentos. después de un proceso de hidrólisis gástrica e intestinal. La secuencia de los aminoácidos en la cadena interna. 4. y el número de las cadenas determinan la estructura primaria de las proteínas. X Hormonales. se dividen en aminoácidos y son absorbidos como tales. Modo de escribir los resultados La LDH se escribe sin cifra decimal. GGT. X Inhibición de las enzimas. C). X Transporte. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superior a 800. TP. X Inmunitaria. X Controlar parámetros tumorales.0 U/L. TGO. En relación con las características generales de solubilidad. troponina). X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia.

etc. de algunas enfermedades metabólicas. Las proteínas se pueden encontrar aumentadas en: X Deshidratación grave. El plasma tiene un significado completamente diferente del suero. excepto las inmunoglobulinas de origen plasmacelular y algunos componentes del complemento de origen macrofágico y de lipoproteínas de origen intestinal. X Disminución del aporte dietético y mala absorción. X Disminución por hipercatabolismo (hipertiroidismo. neoplasia. hemorragias traumáticas). diarrea masiva.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 131 Las proteínas plasmáticas son sintetizadas en el hígado. beta y gamma globulina. Conservación Centrifugación y separación del suero. Indicaciones La determinación de las proteínas es útil en el diagnóstico y monitoreo de muchas enfermedades del hígado. Modalidad de la toma de muestra Evitar la extasis venosa. enfermedad nefrótica. . por 6 días a + 4oC y 6 meses congelada. por la presencia del fibrinógeno. X Displasia por hiperproducción proteica. Modalidad de solicitud Sólo rutina. X Disminución por pérdidas de causas endógenas (hemorragias. X Mieloma múltiple. Con la electroforesis se pueden separar distintos componentes proteicos como: Albúmina. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. del riñón.) y exógena (quemaduras. cirrosis con disminución de las albúminas y aumento de las globulinas). y de errores en la alimentación. Preparación del paciente Ayuno. Se puede verificar: X Una disminución de la síntesis (hepatopatías graves. alfa2. alfa1. Transporte Transportar a temperatura ambiente. endotelial. de la medula ósea. síndrome de Cushing).

La intensidad del color es directamente proporcional a la concentración de proteínas presentes en la muestra. luego la mineralización de éstas en presencia de un catalizador. eventualmente.m. Metódica de Biuret y procedimiento analítico Las proteínas y los péptidos. ácido úrico y aminoácidos). Este método se caracteriza por ser simple. reaccionan con iones de cobre en solución alcalina. A) Registro Escrito claramente. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. 132 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. presencia de coágulos. Se mide el contenido de nitrógeno de las proteínas. a diferencia de otros compuestos nitrogenados (urea. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. Metódica espectrofotométrica e índice de refracción Es poco usada por la interferencia de otras sustancias. Metódicas de determinación: Metódica de Kjeldahi De exclusivo uso para referencia de la estandarización de las proteínas en suero de control. filamentos de fibrina. formando un quelato de color violeta de configuración desconocida. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. preciso y exacto. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Señalar. creatinina. en el resultado la no idoneidad de la muestra.p. Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul . turbidez.

6-7.0 mg/dl. control normal y patológico.6-6.7 g/dl Prematuros 3.0 g/dl Niños 6.0 g/dl . Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb > 6.0 g/dl.0 g/dl Neonatos 4. en las mismas condiciones que las muestras. Lipemia: con triglicéridos > 2000. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 0. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de proteínas totales es lineal hasta 15.0-8.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 133 Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. Control de Calidad Se deberán usar sueros.2 g/dl. Valor de referencia Adultos 6.0 mg/dl.5 g/l. Ictericia: con bilirrubina > 21. Especificidad La metódica es específica para las proteínas totales.6-8.

hepatopatía. en menor medida. potasio. electro- foresis de proteína. potasio. B. C). X Controlar posible estado de embarazo. en las hepatitis.28 TRANSAMINASA (TGO-AST) Generalidad La transaminasa glutámica oxalacética (TGO) o aspartato aminotransferasa pertenece al grupo de las transaminasas. de las mitocondrias. . algunos antibióticos). colinesterasa. distrofia muscular. riñón. La AST puede aumentar también en el infarto pulmonar. proviene en mayor medida de las mitocondrias. leucocitos. Modalidad de solicitud En emergencia y rutina. ésta proviene del citoplasma y. Los tejidos más ricos de AST son: corazón. Preparación del paciente Ayuno en rutina. en el envenenamiento por hongos (Amanita falloide). La AST está presente en cantidad elevada en muchos tejidos con localización celular en las mitocondrias y en el citoplasma. músculo. Los valores más elevados de la AST se relacionan con los procesos necróticos del órgano: infarto del miocardio. biometría hemática completa). parámetros de hepatitis A. las cuales catalizan la transformación de los aminoácidos a los respectivos alfaceto-ácidos. TP. 134 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Criterios de validación X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (TGP. La determinación de la AST es útil en presencia de un informe dudoso de electrocardiograma. X Controlar parámetros de funcionalidad muscular y cardíaca (CPK. si la concentración de la enzima está elevada en relación con fenómenos lesivos y necróticos de la célula. X Controlar parámetros inflamatorios (VSG. X Confrontar con parámetros del equilibrio electrolítico (sodio. Si la concentración de la enzima en el suero es moderada. cloro). páncreas. aldolasa). rifampicina. PCR. 4. o por la absorción de algunos fármacos (isoniazide. hígado. Modo de escribir los resultados Las proteínas totales se escriben con una cifra decimal. densidad urinaria). cerebro. en la pancreatitis aguda. urea. Indicaciones La determinación de la AST en el suero está indicada para seguir los fenómenos lesivos de las células. pulmón y bazo. GGT. X Confrontar con funcionalidad del riñón (creatinina. eritrocitos. a través de la transferencia del grupo amino y viceversa.

lipemia.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 135 Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. 1 año congelada. a partir de la velocidad de desaparición del NADH. Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra. Transporte Transportar a temperatura ambiente. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. Aspartato + α cetoglutarato AST oxalacetato + Glutamato —> Oxalacetato + NADH + H MDH Malato + NAD+ + ——> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul . Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. filamentos de fibrina. presencia de coágulos. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. formando oxalacetato y glutamato.p. A) Registro Escrito claramente. turbidez. 7 días a + 4oC. Metódicas de determinación: La enzima aspartato aminotransferasa (AST) o glutámico-oxalacética (TGO) cataliza la transferencia del grupo amino del aspartato al cetoglutarato. La concentración catalítica se determina empleando la reacción acoplada de la malato deshidrogenasa (MDH). Conservación Centrifugación y separación del suero.m. hemólisis. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia.

se puede entregar el resultado. 1:8 con solución fisiológica.0 U/L. Control de Calidad Se deberán usar sueros. Notas sobre la metódica Linealidad La metódica de AST es lineal hasta 800. en las mismas condiciones que las muestras. . control normal y patológico. diluir la muestra 1:4. X Con valores de AST ≥ de 800 U/L.0 U/L. repetir la medida. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro el rango establecido. se puede entregar.0 U/L. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 4. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica y con un control patológico. X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado. 136 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. X Si el valor del resultado repetido es diferente. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. X Si el valor del resultado repetido es el mismo. siempre usando el control patológico. repetir la medida. Verificar el resultado X Si el valor de la AST es ≥ 300.

GGT. los valores de la ALT son más elevados que la AST y viceversa. rifampicina. TP. cloranfenicol. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 6. CK-MB. en el corazón y en el riñón. La ALT está presente en cantidad elevada en el hígado. Modo de escribir los resultados La AST se escribe sin cifra decimal. aldolasa). . Muchos fármacos (cefalosporina. Lipemia: con triglicéridos ≥ 1000.0 U/L Criterios de validación X Controlar el valor de otras enzimas de los parámetros cardíacos (CPK. Valor de referencia Hombres Hasta 40.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 137 Especificidad La metódica es específica para la AST. La localización es en el citoplasma. En el daño celular leve. mioglobina. a través de la transferencia de un grupo amino y viceversa. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superior a 300. parámetros de hepatitis A. colinesterasa). X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia. CK–MB masa.0 g/l. troponina). Ictericia: con bilirrubina ≥ 60. alfametildopa) pueden dar valores elevados. X Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK.0 U/L Mujeres Hasta 30.0 mg/dl. C). La ALT permanece mayor tiempo aumentada con respecto a la AST. isoniazide. B.0 mg/dl. y en pequeña cantidad en el músculo. colinesterasa. 4. electroforesis de proteína.0 U/L.29 TRANSAMINASA (TGP-ALT) Generalidad La transaminasa glutámica pirúvica o alanina aminotransferasa pertenece al grupo de aquellas transaminasas que catalizan la transformación de los aminoácidos a los respectivos alfacetoácidos. X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (ALT.

Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. B. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. el aumento de la ALT es inferior a la AST. Es útil el reporte de AST/ALT: X En la obstrucción extrahepática. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. Modalidad de solicitud En emergencia y rutina. 7 días a + 4oC y 1 año congelada. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. en la hepatitis alcohólica. La ALT aumenta también en la mononucleosis infecciosa y citomegalovirus. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. el aumento principal es el de la ALT. hemólisis. neoplasia del hígado. La ALT se encuentra muy elevada en las diferentes hepatitis virales (A. Transporte Transportar a temperatura ambiente.p. delta. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. . Preparación del paciente Ayuno en rutina. ictero hemolítico. 138 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Indicaciones La determinación de la ALT está relacionada con las enfermedades del hígado. hemopatía y pancreopatía. X En la cirrosis. Conservación Centrifugación y separación del suero. Se puede verificar leve aumento de ALT en las miopatías.m. C. colagenopatía. A) Registro Escrito claramente. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. E) con valores 20-50 veces más elevados con respecto a los valores de referencia.

formando piruvato y glutamato.0 U/L. presencia de coágulos. control normal y patológico. turbidez. Control de Calidad Se deberán usar sueros. en las mismas condiciones que las muestras. Metódica de determinación: La enzima alanina aminotransferasa (ALT) o transaminasa glutámica pirúvica (TGP) cataliza la transferencia del grupo amino de la alanina al cetoglutarato.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 139 lipemia. Alanina + α cetoglutarato ALT piruvato + Glutamato —> piruvato + NADH + H+ LDH Lactato + NAD+ —> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. filamentos de fibrina. Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra. La concentración catalítica se determina empleando la reacción acoplada de la lactato deshidrogenasa (LDH). . Verificar el resultado X Si el valor de la ALT es ≥ 300. se puede entregar. repetir la medida. a partir de la velocidad de desaparición del NADH. X Si el valor del resultado repetido es el mismo.

0 U/L Criterios de validación X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (AST. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro el rango establecido. . repetir la medida. cloranfenicol. Especificidad La metódica es específica para la ALT. X Con valores de ALT ≥ de 600 U/L.0 U/L Mujeres Hasta 36. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica y con un control patológico.0 g/l. parámetros de hepatitis A. X Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK. procesar nuevamente la muestra. se puede entregar el resultado. Muchos fármacos (cefalosporina.0 mg/dl. colinesterasa. electroforesis de proteína.0 U/L. TP. 140 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad X Si el valor del resultado repetido es diferente.0 U/L. B. diluir la muestra 1:4. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 6. C). aldolasa). alfametildopa) pueden dar valor elevado. CK-MB. 1:8 con solución fisiológica. CK–MB masa. X Controlar parámetros de las enzimas cardíacas (CPK. Ictericia: con bilirrubina ≥ 60. Lipemia: con triglicéridos ≥ 1000. siempre usando el control patológico. troponina). mioglobina. isoniazide. X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia. rifampicina. colinesterasa). X Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado. GGT. X Controlar parámetros serológicos para la mononucleosis infecciosa y para citomegalovirus.0 mg/dl. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 4. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de ALT es lineal hasta 600. Valor de referencia Hombres Hasta 40. utilizando un control patológico.

Se puede encontrar hipertrigliceridemia por: X Falta de lipasa proteica. Modalidad de solicitud En rutina. es sintetizada desde el hígado. Preparación del paciente Es necesario el ayuno. la otra parte. síndrome nefrótico y muchas enfermedades endógenas.0% del tejido adiposo está constituido por triglicéridos. Los triglicéridos son utilizados en los tejidos con la intervención de la lipasa lipoproteica. al menos de 6-8 horas.0 U/L. diabetes mellitus. Los triglicéridos alimenticios son transportados por los quilomicrones. . X Endógena (congénita). Indicaciones La determinación de los triglicéridos se emplea en los distintos dismetabolismos: alterado metabolismo lipídico. 4. X Exógena (introducción excesiva de alcohol. al menos 72 horas antes de la toma de muestra.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 141 Modo de escribir los resultados La ALT se escribe sin cifra decimal. No consumir alcohol. con la alimentación y. Son absorbidos. El 95. una parte. mientras el transporte de la cantidad endógena a los tejidos se hace con las VLDL. Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superiores a 300. Transporte Transportar a temperatura ambiente. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad. glúcidos y lípidos).30 TRIGLICÉRIDOS Generalidad Los triglicéridos están compuestos de un alcohol trivalente (glicerol) y de tres cadenas largas de ácidos grasos.

eventualmente. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. El glicerol. para producir un complejo coloreado cuya intensidad de color es proporcional a la concentración de triglicéridos en la muestra. filamentos de fibrina. posteriormente. y el piruvato formado es reducido a lactato en presencia del NADH. en presencia de peroxidasa (POD). Método enzimático colorimétrico Los triglicéridos son hidrolizados a glicerol y ácidos grasos por medio de una lipasa. El glicerol fosforilado es oxidado con producción de H2O2. 5 días a + 4oC y 3 meses congelada. El glicerol es fosforilado por medio de la glicerol kinasa (GK) y. El glicerol por acción de la glicerol kinasa (GK) es fosforilado en presencia de ATP. La cantidad del NADH oxidado se mide en absorbancia a 340 nm. C) Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado. oxidado por la glicerol fosfato oxidasa (GPO). por acción de la glicerol Kinasa (GK). El ADP producido es reconvertido en ATP a través de la piruvatokinasa (pk). . El peróxido reacciona con un compuesto fenolado y la 4-aminofenazona.p. A) Registro Escrito claramente. el cual se oxida a NAD. turbidez. presencia de coágulos. es fosforilado en presencia de ATP. Señalar. 142 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Conservación Centrifugación y separación del suero. Método enzimático colorimétrico y procedimiento analitico Los triglicéridos son hidrolizados a glicerol y ácidos grasos por medio de una esterasa. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. Metódicas de determinación: Método enzimático UV Los triglicéridos son hidrolizados a glicerol y ácidos grasos por medio de una lipasa. en el resultado la no idoneidad de la muestra. en presencia de la peroxidasa (POD). produciendo peróxido de hidrógeno. forma con la antipirina un complejo coloreado estable. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. Este. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente de 20-25oC. el color del cual es proporcional a la concentración de los triglicéridos. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.m.

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 143 Triglicéridos + 3 H2O esterasa glicerol + 3 RCOOH ———> Glicerol + ATP GK glicerol –3 – fosfato + ADP ———> Glicerol –3 – fosfato +O2 GPO H2O2 + dihidroxiacetona fosfato —> H2O2 POD indicador ——> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial. en las mismas condiciones que las muestras. Control de Calidad Se deberán usar sueros. .0 mg/dl.0 mg/dl. control normal y patológico. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de los triglicéridos es lineal hasta 1000. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 4.

0 mg/dl. Ictericia: con bilirrubina ≥ 27. por toxicidad alcohólica). ácido úrico. amonio. . LDL. polipéptidos. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 6. Valor de referencia Hasta 170. se tiene que restar 10. X Controlar los parámetros de la funcionalidad del riñón (urea.31 UREA Generalidad Las sustancias nitrogenadas de la sangre se dividen en dos fracciones: nitrógeno proteico y nitrógeno no proteico. El grado de absorción varía con la cantidad de agua reabsorbida. proteínas. En condiciones normales. potasio.0%. HDL. X Controlar los parámetros del metabolismo glucídico. X Controlar la funcionalidad tiroidea (en el hipotiroidismo > triglicéridos y colesterol). purinas. cuando los triglicéridos están mayor de 400. Modo de escribir los resultados Los triglicéridos se escriben sin cifra decimal. El nitrógeno no proteico comprende diferentes sustancias: urea. X Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (colesterol. densidad urinaria). La urea contenida en el plasma es filtrada desde los glomérulos del riñón. la intensidad del catabolismo se adapta a la contribución exógena y. aminoácidos. creatinina.0 mg/dl. apolipoproteína). por tanto.0 mg/dl al valor encontrado de los triglicéridos.0 g/l. y sus valores se identifican con los del nitrógeno no proteico. la cual corresponde a la cantidad exógena. El acido ascórbico puede interferir con valores falsamente bajos. fenol e indol. después de la desaminación oxidativa de los aminoácidos. 144 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Especificidad La metódica es específica para los triglicéridos: si desea tener en cuenta el glicerol libre. La urea es producida desde el hígado. X Controlar la funcionalidad hepática (particularmente la GGT. nucleótidos. la cantidad de nitrógeno excretada es la misma a la de origen catabólico. La urea representa la fracción principal. y es reabsorbida por los túbulos en el 40. 4.0 mg/dl). Criterios de validación X Observar el aspecto del suero (aspecto lipémico.

alteración del flujo sanguíneo renal por enfermedad intrínseca del riñón. riñón policístico. el 90. Conservación Centrifugar y separar el suero. excesivo catabolismo proteico.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 145 La urea es muy soluble. heces).0% se excreta a través de la vía urinaria. A) Registro Escrito claramente. Indicaciones La determinación de la urea representa el diagnóstico más común para la valoración de la funcionalidad renal. Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto. insuficiencia cardíaca. B) Muestra Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad. necrosis tubular. de 20-25oC 7 días a + 4oC y 1 año congelada. X Hiperuremia post-renal: obstrucción de las vías urinarias (cálculos.0% por vía extrarenal (sudor. Preparación del paciente Ninguna. la toma de muestra se puede conservar por 1 día a temperatura ambiente. Modalidad de solicitud En rutina y emergencia. . hipertrofia prostática. nefrosclerosis). En el diagnóstico diferencial se emplea (con la determinación de la creatinina) en: X Hiperuremia prerenal: deshidratación (disminuida absorción o excesiva pérdida de agua). neoplasia). X Hiperuremia renal: alteraciones de la filtración glomerular y/o de la absorción tubular (glomérulo nefritis. y el restante 10. Transporte Transportar a temperatura ambiente. Modalidad de la toma de muestra Ninguna particularidad.

Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra. Urea + H2O ureasa 2 NH4 + CO2 ———> NH4 + salicilato + NaClO nitroprusiato indofenol ——————> Materiales X Guantes descartables no estériles X Tubos de ensayo 16 x 100 mm X Puntas de pipeta 10-50 ul X Puntas de pipeta 50-200 ul X Puntas de pipeta 200-1000 ul X Puntas de pipeta 1000-5000 ul Equipos X Centrífuga X Espectrofotómetro X Baño María X Reloj marcador X Pipetas automáticas 10-50 ul X Pipetas automáticas 50-200 ul X Pipetas automáticas 200-1000 ul X Pipetas automáticas 1000-5000 ul . formándose azul de indofenol. poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r. filamentos de fibrina. Metódicas de determinación: Método de diacetilmonosina La urea reacciona a temperaturas altas en presencia de ácido fosfórico con la diacetilmonosina. La reacción es catalizada por iones férricos. 146 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Centrifugación Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado.p.m. transformándola en iones de amonio. con formación de un producto coloreado en amarillo. Método de Berthelot La enzima ureasa reacciona sobre la urea. hemólisis. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia. turbidez. presencia de coágulos. cuya intensidad de color es proporcional a la concentración de urea. Después. lipemia. el amonio se hace reaccionar en medio alcalino con fenol y hipoclorito.

0 g/l Ictericia: con bilirrubina ≥ 60. Verificar el resultado X Si el valor de la urea ≥ 150. Interferencias Las interferencias más significativas son: Hemólisis: con Hb ≥ 10. se puede entregar el resultado. procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico. X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro el rango establecido. Notas sobre la metódica: Linealidad La metódica de urea es lineal hasta 400.0 mg/dl. repetir la medida.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 147 Procedimiento Seguir las instrucciones de la casa comercial.0 mg/dl Neonatos. Sensibilidad La sensibilidad de la metódica es de 5.0 mg/dl Valor de referencia Adultos Hasta 50.0 mg/dl Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl Niños Hasta 48. control normal y patológico. X Con valores de urea ≥ de 400 mg/dl. Control de Calidad Se deberán usar sueros. se puede entregar.0 mg/dl. sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica y con un control patológico. X Si el valor del resultado repetido es el mismo.0 mg/dl . diluir la muestra 1:3 con solución fisiológica. hasta 6 meses Hasta 42. Especificidad La metódica es específica para la urea. X Si el valor del resultado repetido es diferente. repetir la medida. X Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado.0 mg/dl. siempre usando el control patológico. en las mismas condiciones que las muestras.

acido úrico). X Confrontar parámetros del equilibrio electrolítico (sodio. ALT. GGT). 148 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad Criterios de validación X Confrontar los parámetros de la funcionalidad del riñón (creatinina. LDL. Modo de escribir los resultados La urea se escribe sin cifra decimal. HDL. densidad urinaria). Comunicación de riesgo Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superiores a 100.0 mg/dl. X Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (colesterol. potasio. apolipoproteína). X Confrontar con funcionalidad sobrerenal. X Controlar eventual estado de embarazo. . aclaramiento de la creatinina. cloro). X Controlar parámetros metabólicos (glucosa. proteínas urinarias. X Confrontar parámetros de funcionalidad hepática (AST.

QUINTA PARTE ANEXOS .

Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 151

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provoca la desviación unívoca del valor medio encontrado con respecto al valor esperado. con elevado grado de pureza. Error de Error que influye siempre del mismo modo sobre cada determinación. la desviación estándar y desde el coeficiente de variación. Error Diferencia entre el valor “verdadero” y el valor encontrado. Estándar Solución usada como Estándar. 154 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 5. normalmente de pequeña entidad. se expresa desde la varianza. Expresa cuán grande es el error casual o la imprecisión de la medida. Error casual Error. Coeficiente de Medida de precisión-imprecisión. Arrastramiento Efecto de una muestra sobre aquélla sucesiva. Son errores por eliminar. es sistema decir. debido a causas no evidentes. en la cual la sustancia ha estado Secundario determinada con método analítico de segura confianza. valor en porcentaje de la desviación Variación C. Primario Linearidad Habilidad de un procedimiento de medición para proporcionar un resultado de medición proporcional al valor real de una cantidad mensurable sobre un intervalo de medición determinado. Estándar Sustancia de composición química conocida.V. Estándar Material o solución con la cual se confronta la muestra para determinar la concentración u otra calidad. ligado a la espera experimental de la determinación. Son inevitables. . Interferencia Error sistemático de medición ocasionado por un obstructor analítico. Los valores de norma se distribuyen alrededor de un valor medio. analítica Imprecisión Dispersión de los datos en una serie analítica de determinaciones.2 LÉXICO Alejamiento El alejamiento medio % o Bias o índice de exactitud expresa la diferencia medio entre el promedio en porcentaje de los valores encontrados y el valor esperado puesto igual a 100. Desviación Parámetro estadístico de la dispersión de los datos en una serie analítica Estándar (DS). estándar referido al valor medio. (Carry over) Bias Ver alejamiento medio. Se cuanti- tifica por el porcentaje de error (%E). Exactitud Concordancia entre el valor “verdadero” y el valor encontrado.

. Valor Valor en una muestra de valores que se aleja importantemente del aberrante remanente como para sugerir que puede provenir de una población diferente. LÉXICO Índice de Ver alejamiento medio. Tendencia Cambio lento de una característica metrológica de un instrumento de medición o sistema de medición. exactitud Inexactitud Alejamiento entre el promedio de una serie analítica de determinaciones y el valor “verdadero” o de referencia. Media (Valor medio) Precisión Concordancia entre los valores alcanzados con determinaciones repetidas sobre la misma muestra. pero que ocasiona un aumento o una depresión del valor indicado. Promedio o Valor obtenido al dividir la suma de los valores por el número de los valores.Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 155 . del cual. especificidad y eficiencia instrumental. .. Varianza Parámetro estadístico de la dispersión de los datos. como resultado del proceso de consenso consenso. Sensibilidad La más pequeña cantidad de sustancia determinable significativamente diversa desde el blanco. sensibilidad.. Valor Valor desconocido. cada valor experimental es una evaluación verdadero aproximada. Veracidad Concepto complejo de un método analítico: encierra en sí todas las características de precisión. la cual no produce por sí misma una señal en el sistema de medición./. exactitud.. Valor de Valor asignado a una cantidad mensurable. Obstructor Componente de muestra que también es el componente de una cantidad analítico de influencia.

Tiraje: 100 ejemplares en papel bond Enero 2005. . Este libro se terminó de imprimir en los talleres de Litografía Nicaragüense.