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Edición 2004
Levantado de Texto:
MSc. Anita Matamoros García
Revisión de texto:
Equipo Técnico Científico del CNDR y Hospitales
Cuidado de la Edición:
Dr. Gianfranco Profeti
MSc. Anita Matamoros García
Ing. Consuelo Vega Reyes
Diagramación:
Martha Medina Ruiz
Diseño de portada:
MSc. Anita Matamoros García
Realización de portada:
Roberto Carlos Martínez Ch.
Impresión:
Litografía Nicaragüense (LITONIC)
MINISTERIO DE SALUD
El presente documento constituye un esfuerzo del Equipo Técnico Científico del Centro Nacional de Diagnóstico y
Referencia del Ministerio de Salud, reservándose dicho Ministerio, todos los derechos de autor conforme lo
dispuesto en la legislación civil de la materia.
El presente Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad, edición 2004, no
puede reproducirse o transmitirse por método o forma alguna, sea electrónico o mecánico, incluyendo copias
fotostáticas, cintas magnetofónicas, acumulación de información con memoria ni através de ninguna otra forma,
sin autorización por escrito del Ministerio de Salud de Nicaragua.
www.minsa.gob.ni
MARCO LEGAL
REPUBLICA DE NICARAGUA
MINISTERIO DE SALUD
Tabla de Contenido
PRESENTACIÓN .............................................................................................................. ix
INTRODUCCIÓN ............................................................................................................. xi
PRIMERA PARTE
1.1 Finalidad ............................................................................................................... 3
1.2 Ámbito de referencia ............................................................................................ 3
1.3 Responsabilidad .................................................................................................... 3
1.4. Informaciones generales........................................................................................ 3
1.4.1 Aspectos éticos .......................................................................................... 3
1.4.2 Acceso a los servicios de salud ............................................................... 4
1.4.3 Acceso a las prestaciones de laboratorio ................................................. 4
1.4.4 Programación y reservación de los servicios de laboratorio ..................... 5
1.5 Criterios para evitar errores en la fase pre-analítica ............................................. 5
1.5.1 Preparación de los pacientes .................................................................... 5
1.5.2 Modalidad de la demanda de los exámenes ............................................ 6
1.5.3 Modalidad de toma de muestras .............................................................. 6
1.5.4 Toma de muestra de sangre .................................................................... 6
1.5.5 Curva de tolerancia a la glucosa ............................................................. 8
1.5.6 Toma de muestra de orina ...................................................................... 9
1.5.7 Toma de muestra de heces .................................................................... 10
1.5.8 Modalidad de transporte ......................................................................... 10
1.5.9 Organización del trabajo ......................................................................... 12
1.5.10 Criterios de conformidad de las muestras .............................................. 12
1.5.11 Centrifugación de las muestras ............................................................... 13
1.5.12 Modalidad de conservación...................................................................... 13
1.6 Exámenes urgentes ............................................................................................... 14
1.7 Validación .............................................................................................................. 15
1.8 Entrega de resultados ........................................................................................... 15
SEGUNDA PARTE
2.1 Finalidad .............................................................................................................. 19
2.2 Instrucción ........................................................................................................... 19
2.3 Generalidad ......................................................................................................... 19
2.4 Operaciones preliminares ..................................................................................... 19
2.5 Calibración y control ........................................................................................... 22
2.6 Gestión de la sesión de trabajo .......................................................................... 23
2.7 Inicio del trabajo ................................................................................................. 23
vi Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
TERCERA PARTE
3.1 Finalidad .............................................................................................................. 29
3.2 Ámbito de referencia ........................................................................................... 29
3.3 Responsabilidad ................................................................................................... 29
3.4 Generalidad ......................................................................................................... 29
3.4.1 Control de Calidad Interno ........................................................................ 30
3.4.2 Objetivos del programa de CCI ................................................................ 31
3.5 Organización ........................................................................................................ 32
3.6 Descripción de los controles ................................................................................ 32
3.7 Aceptación de los resultados ............................................................................... 32
3.7.1 Evaluación inmediata de los resultados ..................................................... 32
3.8 Estudio estadístico de los datos .......................................................................... 33
3.9 Límites de confianza ............................................................................................ 36
3.10. Presentación gráfica manual de los resultados .................................................... 37
3.10.1 Presentación gráfica de los resultados encontrados por medio
de un programa de computadora, con aplicación práctica del
algoritmo de Westgard (reglas sencillas y múltiples) ............................... 38
3.11 Gestión de las situaciones fuera de control ........................................................ 40
3.12 Control de Calidad Interno sin sueros de control ............................................... 40
3.13 Evaluación retrospectiva ....................................................................................... 41
3.14 Archivo ................................................................................................................ 42
CUARTA PARTE
4.0 Finalidad .............................................................................................................. 45
4.1 ÁCIDO ÚRICO ..................................................................................................... 45
4.2 ALBÚMINA ........................................................................................................... 48
4.3 ALBÚMINA (en orina) ......................................................................................... 52
4.4 AMILASA ............................................................................................................. 54
4.5 BILIRRUBINA TOTAL ........................................................................................... 58
4.6 BILIRRUBINA DIRECTA ....................................................................................... 62
4.7 BILIRRUBINA INDIRECTA .................................................................................... 64
4.8 CALCIO ............................................................................................................... 64
4.9 CREATINA CINASA (CK) ..................................................................................... 69
4.10 CREATINA CINASA (CK) MB ............................................................................... 72
4.11 COLESTEROL TOTAL ........................................................................................... 76
4.12 COLESTEROL HDL ............................................................................................... 79
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad vii
PRESENTACIÓN
Sirva entonces este Manual como guía a todos los Profesionales de Laboratorios,
en el área de Bioquímica Clínica, el cual ayudará a mejorar la calidad de los
resultados en todos los laboratorios del Sistema de Salud.
Margarita Gurdián L.
Ministra de Salud
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad xi
INTRODUCCIÓN
Gianfranco Profeti
Asesor
Control de Calidad en Bioquímica Clínica
PRIMERA PARTE
FASE ANALÍTICA
EXÁMENES URGENTES
1.1. Finalidad
El presente procedimiento explica la organización del laboratorio de análisis y sus relaciones
con los clientes externos e internos de acuerdo con la modalidad de:
X Acceso a las prestaciones diagnósticas
X Ejecución de muestras biológicas
X Envío y conservación de muestras
X Entrega de resultados
X Exámenes urgentes
X Validación del trabajo
1.3. Responsabilidad
La responsabilidad debe ser conocida y distribuida según sus funciones por:
X El director del hospital
X El responsable del laboratorio
X Los responsables de las diferentes secciones del laboratorio
Cualquiera que sea el procedimiento realizado en el paciente, el resultado del análisis debe
ser confidencial y protegido de la indiscreción. Todo el personal de laboratorio, sea de
recepcion, de toma de muestra, de transporte o de entrega de resultados, tiene que respetar
el secreto profesional.
Los resultados de los pacientes de consulta externa pueden ser entregados a una persona
extraña, siempre y cuando ésta presente una autorización firmada por el paciente.
Otros parámetros tienen mínimas variaciones de poco significado (cloro, VSG, potasio,
factores de coagulación y hormonas de la fertilidad).
Muchos fármacos pueden interferir en la determinacion de algunos analitos. Antes de la toma
de muestra, es importante observar una abstención total de fármacos, excluyendo claramente
aquéllos fármacos salvavidas y las terapias que no se pueden interrumpir.
a) Desinfección
La zona de la toma de la muestra tiene que estar limpia, desinfectada con sustancias eficaces
y que no puedan hacer interferencia con el examen requerido: secar la piel con desinfectante
antes de la punción para evitar su aspiración.
b) Toma de muestra
Para la técnica de la toma de muestra venosa, se deben seguir las recomendaciones
internacionales del NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards).
El personal deberá usar guantes de látex para realizar operaciones de recolección de sangre
y para toda manipulación de sangre, suero, plasma y otros especimenes.
La toma de muestra se efectúa preferiblemente de una vena anterior del brazo: en la mayoría,
se escoge la vena cefálica o la vena cubital mediana. También pueden utilizarse para la toma
otras venas de menor calibre; sin embargo, se tiene que considerar que el flujo de la sangre
puede ser lento y que la vena puede colapsarse con facilidad. En caso de dificultad, la toma
de muestra se puede efectuar también de una vena del dorso de la mano o del pie. Se coloca
el torniquete por encima del sitio a puncionar, haciendo un nudo de manera que se pueda
quitar fácilmente, halando el extremo libre.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 7
Una de las causas más importante para que una muestra de sangre se considere no idónea
está representada por la hemólisis. La hemólisis es la ruptura del glóbulo rojo y el pasaje
al plasma o suero de hemoglobina (coloración de la muestra) y de todas las sustancias
contenidas (potasio y enzimas).
Las causas más frecuentes de hemólisis son:
X Aguja de calibre pequeño.
X Presencia de alcohol sobre la piel.
X Excesiva aspiración (toma de muestra con jeringa).
X Excesiva presión en el pasaje de la sangre con la jeringa al tubo de ensayo.
X Mezcla muy violenta de la toma de muestra.
X Toma de muestra muy dificultosa y prolongada.
X Toma de muestra de zonas edematosas.
Procedimiento común:
X Efectuar la toma de muestra para una glicemia basal utilizando, si es posible, un tubo
de ensayo con inhibidor de la glicolisis (monoiodoacetato).
X Enviar la muestra al laboratorio y esperar el resultado.
Antes de proceder con la suministración del carbohidrato, es necesario conocer si el paciente
tiene una glicemia muy alterada y si toma alguna terapia hipoglicemizante oral o parenteral.
En caso afirmativo, no se puede proceder sin la autorización de responsabilidad del médico
tratante.
Excluyendo la práctica de la terapia hipoglicemizante, se puede proceder con un valor de
glucosa inferior a 140.0 mg/dl. Con un valor igual o superior a 140.0 mg/dl, no proceder,
y aconsejar al paciente que realice una glicemia horaria.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 9
Procedimiento diferenciado:
Curva de tolerancia con dos tomas de muestra (típica del monitoreo en estado
de gravidez).
X Suministrar por vía oral a la paciente una carga de 50.0 g de glucosa.
X Efectuar la toma de muestra después de 60 minutos, luego de ingerir la glucosa.
X Enviar el tubo de ensayo correctamente etiquetado al laboratorio.
Las muestras de orina que son recogidas para análisis pueden ser de tres tipos:
X Primera orina de la mañana, después de un período de 8 horas de descanso.
X Muestra de orina casuales o a cualquier hora.
X Muestra de orina recogida para un tiempo preestablecido.
En cada caso debe observarse las siguientes reglas:
a) Limpiar las manos y los genitales antes de la micción.
b) Limpiar las manos después de la recogida.
c) Usar contenedores de monouso con capacidad suficiente, con tapa de rosca o prefe-
riblemente con boca ancha y etiqueta idónea para anotar la información necesaria.
d) Entregar la muestra cuanto antes en el laboratorio.
Tienen que ser lo suficientemente fuertes y manejables, garantizar una adecuada temperatura
y evitar roturas con eventual esparcimiento de material.
La modalidad del transporte de las muestras debe garantizar la seguridad de quien las
transporta, del laboratorio y de quien las recibe.
El laboratorio acepta y analiza sólo muestras acompañadas con toda la información y con
la orden de solicitud del análisis.
La modalidad de la demanda (con informaciones para identificar al paciente, nombre del
examen solicitado y eventuales informaciones clínicas, cuando sean necesarias) debe ser
acordada con la dirección del hospital y el responsable del laboratorio.
Todas las muestras tienen que llegar cuanto antes al laboratorio, evitando una inútil estancia
en las diferentes secciones del hospital o en otra parte.
El transporte de muestras susceptibles a adulteración con el tiempo, debe realizarse con
rapidez, comunicando la llegada al personal de laboratorio.
Es necesario que el personal destinado a la toma de muestras en las distintas secciones
hospitalarias, debe ser educado en la ciencia y técnica de la toma de muestras y así mejorar
el sistema de calidad.
Para el transporte de muestras de sangre total o sueros fuera de la unidad de salud, se
aconseja usar tubos de material de polietileno con tapones.
Si la muestra exige una conservación a baja temperatura, es indispensable el empleo de
termos de polietileno con hielo sintético o refrigerante, esto para evitar variaciones de
temperatura.
Para evitar o disminuir los efectos de las vibraciones, colocar los tubos en un porta tubos
de cartón, resistente a los choques y a las compresiones.
a) Sangre
En la mayor parte, esta modalidad de transporte no representa un problema para el buen
resultado de la realización de los exámenes. En el transporte de estas muestras, los
problemas están correlacionados a la temperatura y al tiempo.
En la cuarta parte de este manual, “metodología especial de los diferentes analitos”, se
describe la eventual particularidad de la modalidad de transporte.
Temperatura:
En general, la temperatura no representa un factor crítico en el transporte de la muestra.
La mayor parte de las muestras puede ser transportada a temperatura ambiente (18-20o C).
En caso de temperaturas más elevada, es necesario transportarlas en termos con refrigerantes.
Tiempo:
Las muestras de bioquímica clínica tienen que ser examinadas dentro de 8 horas a partir de
la extracción sanguínea. Las muestras para exámenes de coagulación deben examinarse
dentro de 2-3 horas.
12 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
b) Orina
El transporte de la muestra de orina puede realizarse a más tardar entre 4-5 horas a partir
de la recolección, es necesario refrigerar las muestras.
c) Heces
Pueden ser transportadas a temperatura ambiente en un tiempo no mayor de una hora para
examen de citología.
a) Sangre
Un intervalo de tiempo muy largo desde la toma de la muestra hasta la realización de los
análisis puede causar una modificación en la concentración del analito y en la actividad
biológica. En caso que las muestras no se puedan transferir dentro de tres horas al
laboratorio, es necesario separar el suero o plasma desde la parte corpuscular, mediante la
centrifugación. En la mayor parte de los analitos, se puede conservar la concentración
manteniendo a 20oC. Hacen excepción el sodio, potasio, cloro, la bilirrubina, fosfatasa alcalina
y glucosa. Para establecer la glucosa, se usa una sustancia que inhibe la glicólisis (fluoro,
iodio). Para los exámenes de coagulación, se recomienda efectuar la determinación en el más
breve lapso de tiempo o, en caso de imposibilidad, conservar la muestra en hielo. Para evitar
el fenómeno de hemólisis y alteración de la morfología celular, hay que efectuar los exámenes
de hematología entre 4-8 horas a partir de la toma de muestras.
La exposición de la muestra a la luz solar puede determinar un descenso de hasta el 50%
de la bilirrubina. Para las otras determinaciones, el suero se puede conservar hasta 8 horas
a partir de la toma de la muestra a temperatura ambiente y por 24 horas en refrigeración.
14 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Existen tablas para medir la glicólisis en relación con la temperatura y el tiempo de la toma
de muestra y la realización del examen. En general, para la conservación de las muestras,
las temperaturas más cercanas a 0°C (no congelar) reducen notablemente todas las
reacciones de naturaleza química enzimática. La entidad de la reducción podrá ser desde 5
hasta 10 veces, conforme la temperatura ambiente.
b) Orina
Existen varias modalidad de conservación de la orina, según el tipo de examen requerido:
Refrigeración: La conservación a 2-4o C es el método más sencillo, especificando interferencia
sólo con la determinación del peso específico.
Acido Acético: La agregación de ácido acético (15 ml de ácido acético glacial) permite la
determinación de muchos constituyentes, evitando la degradación y una orina alcalina
(aldosterona, cortisol, estrógeno).
Acido Clorhídrico: La agregación de ácido clorhídrico (15 ml de ácido clorhídrico concentrado
para 1500-2000 ml de orina) se aconseja para la determinación de algunas hormonas
(catecolaminas, metanefrina) y metabolitos especiales (histamina).
Carbonato de Sodio: La agregación de carbonato de sodio (5 g para una recolección de 24
horas) sirve como alcalinizante y está recomendada para la determinación de algunos analitos
como: beta2-microbulina, porfirine, urobilinógeno.
c) Heces
La conservación por varios días para el examen químico-físico y el examen de sangre oculta,
se puede realizar a 2-4°C.
El registro debe ser escrito de forma muy clara y legible. La toma de muestra que no cumpla
con los requisitos previstos en los procedimientos de este Manual, podrá ser excluida con
el señalamiento de no conformidad.
Se pueden considerar exámenes urgentes de acuerdo al perfil de cada hospital los siguientes:
X GLUCOSA
X UREA
X CREATININA
X ELECTROLITOS (Sodio, Potasio, Cloro)
X BILIRRUBINA TOTAL Y FRACCIONADA
X TRANSAMINASAS (GOT Y GPT)
X AMILASA
X CK
X CK MB
X LDH
X TEST DE EMBARAZO
X EXAMEN GENERAL DE ORINA
X BIOMETRIA HEMATICA COMPLETA
X TIEMPO DE PROTOMBINA
X APTT
X FIBRINOGENO
X CALCIO (cuando es útil en el diagnóstico de la hipocalcemia y de la pancreatitis)
X BETA HCG (para el diagnóstico del embarazo extra uterino).
1.7. Validación
Todos los resultados son validados (confrontados con los valores de otros parámetros
analíticos para verificar una eventual correlación clínica diagnóstica) y aprobados por el
responsable del laboratorio o una persona designada. La valoración comprende también el
Control de Calidad Interno y todas las fases de preparación, interpretación y transmisión del
informe de los resultados.
El laboratorio establece procedimientos para notificar inmediatamente al médico sobre los
resultados críticos. Estos límites de alarma podrían definirse previamente con los médicos
clínicos que utilizan el servicio de laboratorio.
INSTRUCCIONES INFORMATIVAS
SISTEMAS ANALÍTICOS
GESTIÓN DE LA SITUACIONES
FUERA DE CONTROL
TRABAJO FINAL
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 19
2.1. Finalidad
a) Las presentes instrucciones informativas constituyen la guía para el funcionamiento
correcto de los sistemas analíticos en química clínica.
La utilización óptima de los sistemas analíticos determinan:
X El comportamiento igual de todo el personal (con mayor o menor experiencia).
X El intercambio entre los operadores sin alterar la calidad del servicio.
X La aplicación de controles sencillos de los sistemas.
b) Generalidad y posibles causas de error en la fase analítica.
2.2. Instrucción
Las intrucciones informativas están en relación a todo el proceso de trabajo desde las
operaciones preliminares hasta el fin de la sesión.
2.3. Generalidad
Un sistema analítico está compuesto de:
X Tecnología
X Metódica
X reactivos
X calibradores
X estándares
X Controles
Si al sistema analítico se añaden los operadores que lo usan y lo controlan, se establece un
sistema organizativo. Las siguientes intrucciones toman en consideración los sistemas
analíticos conforme los puntos anteriores.
INSTRUMENTOS:
X Verificar que todos los eventuales productos, residuos, muestras, reactivos y material que
pueda interferir con el correcto funcionamiento sean eliminados.
X Verificar el correcto enchufe eléctrico del equipo y la ausencia de riesgo (humedad).
X Encender el equipo con el interruptor específico.
X Encender eventual impresora.
X Esperar que los programas operativos estén cargados.
X Verificar que se tenga todo lo necesario (cubetas, reactivos, agua destilada, papel, etc.).
20 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Inspección diaria por parte del técnico o analista antes de comenzar a trabajar:
Espectrofotómetro
Pipetas
Destilador o desionizador
Balanzas
Cubetas de lectura fotométricas
Limpieza semanal:
Cambio de agua de Baño María
Mensual:
Calibración de espectrofotómetros
Calibración de pipetas
Limpieza y control de balanzas
Trimestral:
Descongelamiento y limpieza de refrigeradores
Limpieza del destilador
Semestral:
Descongelamiento y limpieza de congeladores
Control general de la instalación eléctrica y de gas
Anual:
Calibración de balanzas de precisión.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 21
EQUIPO:
Con frecuencia el control de calidad se limita al estudio del error total del análisis y la
contribución de los equipos a este error se subestima, sin embargo cada día el laboratorio
depende en mayor grado de los resultados de diversos equipos.
El espectrofotómetro tiene que ser calibrado y controlado regularmente (seis meses) con
patrones, siendo muy importante sobre todo para métodos cuyo resultado se calculan en base
de un coeficiente de absorbancia y que por algún motivo no pueden ser controlados
permanentemente por un patrón de la misma sustancia por ser esta inestable, cara, etc.
En los fotómetros el sistema de selección de la longitud de onda se desajusta y el error que
ello ocasiona puede llegar a un 16%.
Un error fotométrico sistemático resulta cuando se utiliza un fotómetro de filtro con rango
espectral ancho. Se obtienen absorbancias menores que con luz de alta pureza espectral y
aún se puede perder la linealidad de una curva de calibración.
El ancho de la banda espectral de un fotómetro no es controlable, es un factor intrínseco
a la construcción del aparato.
Sin embargo el ancho de la banda de luz en los fotómetros de espectro continuo, es un
factor variable que igualmente influye en la pureza espectral, el ancho de la banda de la luz
está determinado por las aberturas de entrada y salida del monocromador.
Una abertura ancha deja entrar la luz dispersada disminuyendo la pureza espectral. Algunos
equipos de abertura normal hay que controlarla y mantenerla estrecha y uniforme para cada
método.
Un tipo de control muy frecuente para estos equipos es el patrón de absorbancia de sulfato
de cobre y amonio a 540 nm, con el que se hace estudio de la reproducibilidad, estos equipos
se fundamentan en la ley de Beer.
El analista debe conocer los límites de su equipo respecto a la pureza espectral para no
utilizar su fotómetro inadecuadamente para ciertos métodos.
También debe tomar en cuenta la temperatura del laboratorio debe estar entre 22 y 24oC
y la humedad de 60 ± 10% para la protección de los filtros.
REACTIVOS:
X Verificar que los reactivos sean suficientes e idóneos en cantidad, fecha de preparación
y vencimiento.
X Antes de usar nuevos reactivos verificar:
X Fecha de vencimiento: Si está vencido, no se puede usar por motivo alguno. Usar
siempre los reactivos con el vencimiento más cercano.
X Número de lote: Usar preferiblemente el mismo lote corriente para evitar la
recalibracion del equipo.
X Preparar los reactivos para el uso diario con los siguientes procedimientos:
X Llevar a temperatura ambiente (si es necesario).
X Abrir delicadamente el frasco de reactivo sin crear aerosol (si es liofilizado).
22 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
CALIBRACIÓN:
Si no es necesario efectuar una nueva calibración, verificar:
X Fecha de la última calibración.
X Vencimiento de la calibración.
X Número de lote del reactivo.
X Es obligatorio proceder con una nueva calibración cada vez que se cambia el lote de los
reactivos.
Terminada la calibración, es necesario:
X Verificar que las reacciones son lineales.
X Verificar que los valores de la calibración son aquellos esperados.
X Verificar que no hay variaciones significativas entre los valores de las calibraciones de los
últimos 15 días.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 23
X Archivar al menos por un mes los valores de las calibraciones para un eventual control.
En caso que las calibraciones no sean aceptables, se precisa repetirlas, buscando de forma
individual el problema:
X Errada la reconstitución o el uso de los calibradores.
X Errada la reconstitución o el uso de los reactivos.
X Errado el funcionamiento del equipo (temperatura, limpieza, etc.).
CONTROL:
Para evaluar el correcto funcionamiento de los sistemas analíticos, se precisa evaluar pronto
el C.C.I. con suero de control con valores conocidos.
En cada caso, el examen de los controles tiene que efectuarse en un tiempo lo
suficientemente breve para lograr las medidas correctivas antes de la validación de la entrega
de los resultados.
Para su valoración, el resultado del control se confronta con los valores esperados,
verificando si una o más reglas establecidas son violadas.
La negatividad indica una situación “subcontrol”. La violación de una o más reglas significa
una situación “fuera de control” que precisa oportunas medidas correctivas.
Error de sistema
Influye siempre de la misma manera sobre cada determinación, o sea, provoca la desviación
unívoca (arriba o abajo) del valor medio medido, con respecto al valor esperado.
Error dependiente de una alteración constante que se mantiene durante un período
determinado.
24 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Error grosero
Cae completamente fuera y alejado del rango del colectivo de los datos normales
permisibles. Posibles causas:
X Descuidos graves en la manipulación de la muestra.
X Descuidos graves en el procedimiento de la técnica.
X Errores en los cálculos.
X Empleo errado de pipetas.
X Selección errada de filtros.
NORMAS DE PROCEDIMIENTO
DE CONTROL DE CALIDAD INTERNO
VALIDACIÓN RETROSPECTIVA
ARCHIVO
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 29
3.1. Finalidad
El presente procedimiento identifica la modalidad de verificar y controlar los sistemas
analíticos para garantizar la idoneidad de la “sesión analítica”. La verificación se basa además
en la utilización óptima de las tecnologías (mantenimiento) sobre la idoneidad del CCI. El
laboratorio de análisis de químicas clínicas tiene que predisponer, documentar y mantener
activo un sistema de calidad, el cual garantiza la conformidad de sus productos y los
requisitos específicos. El control de calidad es parte integrante del sistema de calidad. El
procedimiento tiene la finalidad de:
X Verificar en tiempo real los procedimientos de la serie analítica.
X Señalar las situaciones “fuera de control” y activar en tiempo lo suficientemente breve
medidas correctivas para volver a llevar la situación “bajo control”.
X Conocer retrospectivamente la precisión y la exactitud.
3.3. Responsabilidad
La responsabilidad en la aplicación de estos procedimientos es trabajo de:
X El director del laboratorio para la correcta aplicación del procedimiento de mantenimiento
y de control de los sistemas analíticos.
X El técnico que trabaja directamente sobre los sistemas analíticos, y efectúa los exámenes
y el CCI.
3.4. Generalidades
El laboratorio tiene que planear un sistema que permita verificar un buen funcionamiento
de los sistemas analíticos, las tecnologías, las metódicas y los técnicos. Este monitoreo tiene
que ser ejecutado mediante la verificación del control de calidad interno. De manera que,
el laboratorio:
X Realiza un programa de CCI.
X Usa material idóneo de referencia.
30 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
X Cuando no es posible usar sueros de control para el CCI, usa métodos reconocidos en
la literatura (cusum, método de la media diaria).
X Aplica reglas severas para el monitoreo de la sesión analítica y para introducir eventuales
medidas correctivas.
El programa sirve también para acumular a través del tiempo los mecanismos de la
evaluación retrospectiva, los datos útiles para el conocimiento de las características de la
precisión de los procedimientos analíticos (desviación estándar y coeficiente de variación).
3.5. Organización
La correcta ejecución, registro, divulgación y archivo del CCI es responsabilidad directa de
los técnicos y profesionales de laboratorio. El director de laboratorio vigila la ejecución y
aplicación de los controles, los explica detalladamente, facilita las cartas de control para
consultas y las archiva.
Las cartas del CCI deben ser fácilmente consultables por todo el personal, por personas
externas y por eventuales visitas de inspección.
bajo control. La violación de una o más reglas íntegra o una situación de alarma o una fuera
de control, permite realizar medidas correctivas de modo oportuno.
Las medidas de posición y variabilidad que se definen son la media aritmética o media, la
desviación estándar y el coeficiente de variación.
Media aritmética o media (X): Es el valor promedio del conjunto de las mediciones (Xi).
X = Σ Xi
N
donde:
X= es igual a la media aritmética o promedio aritmético
Σ= es la sumatoria
Xi= representa cualquiera de los N valores X1, X2, X3, XN
N= número total de datos
El tamaño de la medida, la variabilidad o dispersión de cada valor alrededor del valor medio
está representada por la desviación estándar, la cual expresa el error casual.
34 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
donde:
s = desviación estándar
n = número de las pruebas
X = cada valor
X = promedio
X – X = diferencia entre cada valor y el promedio
Σ (X – X)² = sumatoria de los cuadrados de las diferencias
Precisión y Exactitud
El análisis de los errores puede hacerse con gráficos que muestran las diferentes
posibilidades:
Por precisión se indica la dispersión de los resultados obtenidos con análisis repetidos sobre
la misma muestra, sea en la misma serie (precisión en la serie), sea en varias series
(precisión entre las series). Si las series pertenecen a varios días, se obtendrá precisión entre
días. En realidad, lo que se mide con este parámetro es la imprecisión de los resultados.
La precisión se cuantifica por el promedio (X), la desviación estándar (ds) y el coeficiente
de variación.
La imprecisión se expresa cuantitativamente con la desviación estándar = s , que será tanto
mayor cuanto mayor resulte la dispersión de los resultados.
La exactitud, por su parte, indica la correspondencia entre el valor obtenido en una muestra
(o mejor el promedio de una serie de determinaciones sobre la misma muestra) y el valor
“verdadero”. Con tal parámetro se mide la inexactitud (diferencia entre el valor alcanzado y
el valor “verdadero”). Precisión y exactitud están, por tanto, dos parámetros completamente
independientes entre ellos.
El ejemplo clásico del polígono de tiro aclara los dos diferentes conceptos.
Impresisa y exacta: muchas variaciones en el nivel de desempeño la persona que ejecuta una
prueba, aunque los resultados no fuesen de valor real. La mejora del desempeño puede
lograrse mediante el uso de programa interno de control de calidad. Porcentaje de error (%E)
bajo y alto desviación estándar (s).
36 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Buena precisión, escasa exactitud: los golpes están concentrados; si no, no se disponen
uniformemente alrededor del blanco. Indica que los componentes de un laboratorio realizan
un proceso de manera semejante, pero cometen siempre un error sistemático. Porcentaje de
error (% E) alto, y baja desviación estándar (s). La mejora del desempeño puede lograrse
mediante el uso de programa externo.
El intervalo entre los límites 2s se define como intervalo de alarma, porque en relación con
las leyes de estadística, sólo 5 sobre 100 valores tendrían que estar fuera de este intervalo.
El límite 2s se denomina límite de alarma, y el límite 3s, límite de acción.
La desviación estándar puede expresarse como porcentaje del valor medio. Tal porcentaje se
llama coeficiente de variación.
Se calcula con la fórmula:
s . 100
CV = _________ %
X
donde:
CV = coeficiente de variación
S = desviación estándar
X = promedio
Hay que tener presente que, en los últimos años, la tecnología ha permitido mejorar
notablemente la precisión analítica, con la adopción de técnicas específicas que permiten
alcanzar una mayor exactitud.
Reglas sencillas
X 2 sobre 3 valores de control consecutivos se posicionan al extremo de las líneas 2ds en
la misma dirección.
X 4 sobre 5 valores de control consecutivos se posicionan al extremo de las líneas 1ds en
la misma dirección (normalmente, estas líneas no están trazadas sobre la tabla de control
por simplificación).
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 39
Reglas múltiples
X El error relativo en dos controles es superior a ± 2ds. Puede tratarse de los 2 materiales
incluidos en una misma serie o de un solo material que infrinja la regla en dos series
consecutivas. Es una alarma por error de sistema.
X Uno u otro de los dos valores de control se posicionan al extremo de las líneas 3ds: error
casual, o podría ser el comienzo de un considerable error de sistema.
X Ambos valores de control se posicionan al extremo de las líneas 2ds, en la misma
dirección y en la misma serie analítica: Error de sistema.
X Un valor de control se posiciona al extremo de la línea 2ds y otro al extremo de otra
línea 2ds (la distancia entre los dos valores supera 4ds): es una regla aplicada sólo a lo
interno de la sesión: Error de imprecisión.
X Los últimos 4 valores de control (2+2) se posicionan al extremo de la línea 1ds en la
misma dirección: Error sistemático.
X Los últimos 10 valores de control (5+5) se posicionan por encima o por debajo de la
línea del promedio: Error sistemático.
La tabla siguiente (en un programa de CCI en computadora) muestra una aplicación práctica
del algoritmo de Westgard (reglas múltiples). Utilizando dos sueros de control, se entra en
una rutina de reglas de control (algoritmo de Westgard) que se examinan en secuencia. Las
alarmas son:
1 3s: El error relativo en uno cualquiera de los dos controles es superior a ± 3s.
2 2s: El error relativo en dos controles es superior a ± 2s. Puede tratarse de los 2
materiales incluidos en una misma serie o de un solo material que infrinja la regla
en dos series consecutivas. Error de sistema.
R 4s : La diferencia entre los errores relativos obtenidos en los dos controles de la misma
serie es superior a 4s. Por ejemplo, uno desvía +2,3s y el otro -1,8s. Error en
la precisión.
10 Xm: Se han obtenido diez errores relativos consecutivos, todos ellos positivos o todos
ellos negativos. Puede ocurrir con los dos materiales en cinco serie consecutivas
o con un material en diez series consecutivas. Error de sistema.
40 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
3.14 Archivo
El archivo de los datos tiene en el CCI el fin de:
X Documentar la ejecución diaria del CCI.
X Proveer una base de datos para la evaluación a mediano y largo plazo.
X Realizar evaluaciones periódicas de las situaciones fuera de control.
El archivo puede realizarse sobre un soporte de papel o en magnético. Tiene que estar
ordenado, de modo que permita hacer una pronta consulta cuanto se desee.
Mantener registros, al menos, un año para la realización de las eventuales intervenciones
correctivas.
CUARTA PARTE
PROCEDIMIENTO DE
4.0 Finalidad
El presente procedimiento describe, detallada y específicamente cada examen de química
clínica:
1. Generalidad
2. Indicaciones
3. Modalidad de solicitud
4. Preparación del paciente
5. Modalidad de la toma de muestra
6. Transporte
7. Conservación
8. Verificación de la muestra
9. Metódicas de determinación con relativas interferencias
10. Valores de referencia
11. Criterio de validación
12. Modo de escribir los resultados
Indicaciones
La alteración puede estar relacionada con dietas ricas en purinas o con aumentada producción
endógena o con una reducida excreción.
La determinación del nivel del ácido úrico está indicado en el diagnóstico y monitoreo de
algunos desórdenes metabólicos dietéticos: gota, síndrome dismetabólico alimenticio,
neoplasia linfomielo-proliferativa (como linfomas, leucemias, policitemia), anemia hemolítica,
enfermedad del riñón y pacientes en terapias citostática o radioterapia.
Modalidad de solicitud
Sólo en rutina.
46 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Transporte
Se puede transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero, la toma de muestra se puede conservar por cinco días
de 2-4oC y por 6 meses a –20oC.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Método colorimetrico
El ácido úrico en ambiente alcalino reduce el ácido fosfotúngstico con formación de color
azul; la intensidad del color es proporcional a la cantidad de ácido úrico. Antes de
desproteinizar con el Folin Wu.
Método físico-enzimático
El ácido úrico presenta en ultravioleta un pico de absorbancia alrededor de 290 nm; la
absorbancia a esa longitud de onda está completamente eliminada por la acción de la uricasa,
la cual transforma el ácido úrico en alantoína. Por la disminución de la extinción óptica, se
conoce la concentración del ácido úrico.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 47
Método enzimático
El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno que, en presencia
de POD y 4-AF y DCPS, forma un compuesto rosáceo.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberá usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Linealidad
La metódica es lineal hasta 25.0 mg/dl.
48 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 0.2 mg/dl.
Especificidad
La metódica de uricasa es específica para el ácido úrico; sin embargo, también para los otros
derivados de las purinas.
Interferencias
Pueden presentar interferencias: El suero ictérico con bilirrubinas ≥ 40.0 mg/dl; la hemólisis:
HB ≥ 10.0 g/l; el suero lipémico: triglicéridos ≥ 2000 mg/dl; el ácido ascórbico ≥ a 30.0
mg/dl.
Algunos fármacos pueden dar valores falsamente bajos de ácido úrico: fenacetina,
aminofenolo, idralazina, metildopa, levadopa.
Valores de referencias
Hombre 3.4-7.0 mg/dl
Mujer 2.4-5.7 mg/dl
Criterios de validación
Con valores muy elevados:
X Confrontar otros parámetros en relación con procesos inflamatorios: conteo de glóbulos
blancos, VSG, PCR, fibrinógeno.
X Controlar los parámetros de alteración metabólica: glucosa, colesterol, triglicéridos,
apolipoproteínas.
X Controlar los parámetros de los procesos displásicos: VSG, parámetros oncológicos,
fórmula leucocitaria y glóbulos rojos.
X Controlar los parámetros de la funcionalidad del riñón: creatinina, electrolitos, examen de
orina.
X Antes de la sintomatología dolorosa en la gota, se eleva el nivel de ácido úrico.
4.2 ALBÚMINA
Generalidad
La albúmina es una proteína, que contiene el 55-65 % de la cantidad proteica en el plasma.
Tiene un peso molecular de 66,248 Ángstrom. Sus funciones principales son de transporte
en la sangre de numerosas sustancias como ácido graso libre, bilirrubina, muchas hormonas,
calcio, numerosos fármacos. Otra función importante es la de regular la presión osmótica.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 49
La concentración normal sérica es de 35-50.0 g/l, la cual representa 2/5 parte de toda la
albúmina presente en el organismo. Los neonatos y ancianos tienen una cantidad de albúmina
más baja. Se habla de hipoalbuminemia, cuando el contenido de albúmina está de 32.0 g/l, y
de manifestaciones edematosas, debajo de 25-30.0 g/l.
Indicaciones
La determinación de la albúmina sérica es importante en el diagnóstico de hipoalbuminemia.
Las principales causas son:
X Disminución de síntesis (hepatopatía grave, cirrosis, etc.).
X Disminución alimenticia y mala absorción.
X Eliminación por causas endógenas (diarrea masiva, síndrome nefrótico, etc.) y exógenas
(quemaduras).
Modalidad de solicitud
Sólo en rutina.
Transporte
Se puede transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero cuanto antes; la toma de muestra se puede conservar
para tres días a 2 – 4o C, y por 6 meses a –20o C.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
50 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Metódicas directas
a) Metódicas inmunoquímicas
Esta metódica se aplica en inmunodifusión radial (inmunoturbometría, Inmunonefolometría).
b) Metódicas fluorimétricas
Reacción de la albúmina con sustancias fluorescentes y relativa medida fluorométrica.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 51
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Linealidad
La metódica es lineal desde 0.2-8.0 g/dl.
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 0.2 g/dl.
Especificidad
La metódica es específica para la determinación de albúmina.
Interferencias
Suero ictérico con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.
Hemólisis: HB ≥ 10.0 g/dl.
Lipemia: ≥ 2000 mg/dl.
Acetona: ≥ 50.0 mg/dl.
Valores de referencia
Adulto: 3.4 - 4.8 g/dl
Neonatos hasta 4 días: 2.8 - 5.4 g/dl
Niños: 3.8 - 5.4 g/dl
Criterios de validación
X Confrontar con la funcionalidad del riñón: creatinina, urea, potasio, densidad urinaria.
X Confrontar con funcionalidad del hígado: transaminasas, G.G.T, F. alcalina, LDH.
X Confrontar con parámetros del equilibrio electrolíticos: sodio, cloro, potasio.
X Controlar sexo y eventual estado de embarazo.
X Controlar parámetros de inflamación: VSG, PCR, biometría hemática completa.
52 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Indicaciones
La determinación de la albúmina en la orina es de particular importancia, como señal de una
disfunción glomerular. Un pequeño aumento de albúmina en la orina, conocida como
microalbuminuria, es particularmente importante en el diagnóstico precoz de la nefropatía
diabética, que se desarrolla en cerca del 40.0% de los diabéticos insulino dependientes.
Modalidad de solicitud
Sólo en rutina.
Transporte
La recogida de la muestra de orina de 24 horas debe ser transportada en refrigeración.
Conservación
Centrifugar la muestra antes del análisis: no congelar la muestra. La albúmina es estable una
semana a 2-4oC.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
Registro
Escrito claramente.
Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódica de determinación:
Linealidad
La metódica es lineal desde 0.2-8.0 g/dl.
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 0.2 g/dl.
Especificidad
La metódica es específica para la determinación de albúmina.
54 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Interferencias
La interferencia más significativa se debe a elementos corpusculares: antes de la ejecución
del examen, centrifugar la muestra.
Valores de referencias
Orina de 24 horas: 2.3 g/24 horas
Criterios de validación
X Confrontar con la funcionalidad del riñón: creatinina, urea, potasio, densidad urinaria.
X Confrontar con parámetros del equilibrio electrolíticos: sodio, cloro, potasio.
X Controlar sexo y posible estado de embarazo.
4.4 AMILASA
Generalidad
La amilasa es una enzima que cataliza la división de 1,4 – alfa-glicósido en lo interno de
la molécula de los polisacáridos de los vegetales y animales, provocando la despolimerización
del almidón a destrina, y del glicógeno, a azúcar sencillo (glucosa).
La amilasa se produce en el páncreas y las glándulas salivales, y en pequeña concentración,
en el hígado, el riñón y las trompas de Falopio, y es eliminada por el riñón. Se puede
distinguir amilasa pancreática (isoamilasa P) y amilasa extrapancreática (isoamilasa S).
Indicaciones
La determinación de la amilasa es de importancia fundamental en el diagnóstico de las
enfermedades pancreáticas. La amilasa es útil en el diagnóstico para el control de la
pancreatitis aguda. En estas enfermedades, la amilasa sérica sube en casi la totalidad de los
pacientes, 5-6 horas después de la sintomatología clínica. Puede añadir valores de 10-30
veces mayor de los valores normales. Parece que la amilasa sube más en correlación con
el edema, en vez que en relación con la necrosis pancreática.
La amilasa puede aumentar también en otras enfermedades pancreáticas: neoplasia del
páncreas, neoplasia de la papila de Vater.
Modalidad de solicitud
En rutina y/o emergencia.
Transporte
Se puede transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por un día
a + 20-25oC, cinco días 2-4o C, 1 mes a -20oC.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Metódica sacarogenética
La medida de la actividad de la enzima se efectúa con metódica basada sobre la producción
de azúcar reductora.
56 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Metódica enzimática
La α amilasa es un test colorimétrico, que actúa con un nuevo substrato 2-cloro-4-nitrofenil
–maltotriosido (CNPG3). Este substrato reacciona directamente con la α amilasa, y no
requiere la presencia del cambio del 2- cloro-4-nitrofenil (CNP) del substrato, y la lectura
de la absorbancia está incrementada directamente por la actividad de la α amilasa en la
muestra.
CNPG3 α amilasa 3 CNP + CNPG2 + 3G3 + 2 G
———>
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado
X Si el valor de la amilasa en ≥ 1000-2000 U/I, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 57
X Con valores de amilasa ≥ de 1500 U/I, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2
con solución fisiológica con un control patológico.
X Si está dentro los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,
1:8, 1:16 con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.
Linealidad
La metódica es lineal hasta 1500 U/I.
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 7.0 U/I.
Especificidad
La metódica es específica para la amilasa total y para todas las isoamilasas (P, S).
Interferencias
Hemólisis: Con Hb ≥ 2.0 g/l.
Ictérico: bilirrubina ≥ 20.0 mg/dl.
El citrato y el floruro inhiben la reacción.
El ácido ascórbico ≥ 30 mg/dl.
Valor de referencia
Menor a 220 U/I.
Criterio de validación
X Confrontar con lipasa, calcio, funcionalidad del hígado.
X Controlar parámetros de procesos inflamatorios.
X Controlar glucosa y metabolismo glucídico.
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente, con valores ≥ 800.0 U/I.
58 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Indicaciones
La determinación de la bilirrubina es un elemento fundamental para el diagnóstico de las
patologías ictéricas del hígado.
Se distinguen tres tipos de ictero:
Prehepático o hemolítico: Debido al aumento de la cantidad de bilirrubina que llega al
hígado por fenómenos de hemólisis. En este caso, la fracción aumentada es la indirecta. La
patología fundamental es la anemia hemolítica hereditaria (drepanocítica, talasemia etc.) y
la anemia adquirida (infecciosas, parasitarias, tóxicas, venenos vegetales o animales, etc.),
y anemia hemolítica inmunológica del neonato.
Posthepático obstructivo: Debido a un obstáculo orgánico y/o funcional al flujo de la bilis.
En estos casos, la fracción que aumenta es la bilirrubina directa; sólo en un segundo tiempo,
para el daño del hepatocito puede aumentar la fracción indirecta. La obstrucción puede ser
provocada desde litiasis, parasitosis, patología tumoral intrínsica al hígado, o extrínseca, por
compresión externa (pancreática, etc.).
Hepatocelular: Debido a lesiones hepatocelulares, el hígado no es capaz de capturar la
bilirrubina y conjugarla con ácido glucorónico. En este caso, puede aumentar la fracción
directa e indirecta. Las causas pueden ser: infecciosas degenerativas, autoinmune, tóxica,
tumoral.
Modalidad de solicitud
En rutina y/o emergencia.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 59
Transporte
Se puede transportar a temperatura ambiente, protegida de la luz.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por dos día
a temperatura ambiente, 4 días a 2-4oC, y 3 meses a -20oC. La muestra debe ser conservada
y protegida de la luz.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado
Si el valor de la bilirrubina total es ≥ 10.0 mg/dl., repetir la medida.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 61
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 0,05 mg/dl
Especificidad
La metódica es específica para la bilirrubina total.
Interferencias
Hemólisis: También con valor muy bajo de Hb, evitar las muestras hemolizadas.
La lipemia interfiere de modo relevante.
Se han señalado muchas sustancias, drogas en especial, que pueden producir variaciones del
resultado de bilirrubina sérica.
Valor de referencia
Hasta 1.0 mg/dl.
Prematuros de 2-4 días, hasta 10.0 mg/dl.
Neonatos de 24 horas, hasta 4.0 mg/dl.
Neonatos de 48 horas, hasta 9.0 mg/dl.
Neonatos al quinto día, hasta 13.5 mg/dl.
Criterio de validación
X Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas, G.G.T, TP, colinesterasa,
urobilinógeno, análisis de hepatitis A, B, C y delta).
X Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus.
X Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G.G.T.).
X Controlar biometría hematica completa y hierro.
X Controlar enzimas cardíacas.
X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia).
62 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 12.0 mg/dl.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado
X Si el valor de la bilirrubina directa es ≥ 2.5 mg/dl., repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 63
Linealidad
La metódica de la bilirrubina directa es lineal hasta 5.0 mg/dl
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 0,003 mg/dl
Especificidad
La metódica es específica para la bilirrubina directa.
Interferencias
Hemólisis: también con valor muy bajo de Hb, evitar las muestras hemolizadas.
La lipemia interfiere de modo relevante.
Se han señalado muchas sustancias, drogas en especial, que pueden producir variaciones del
resultado de bilirrubina sérica.
Valor de referencia
Hasta 0.3 mg/dl.
Criterio de validación
X Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas, G.G.T, TP, colinesterasa,
urobilinógeno, análisis de hepatitis A, B, C y delta).
X Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus.
X Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G.G.T.).
X Controlar biometría hemática completa y hierro.
X Controlar enzimas cardíacas.
X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia).
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 3.0 mg/dl.
Valor de referencia
Hasta 0.7 mg/dl.
Criterio de validación
X Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas, GGT, TP, colinesterasa, urobilinó-
geno, análisis de hepatitis (A, B, C y delta).
X Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus.
X Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G.G.T.).
X Controlar biometría hemática completa y hierro.
X Controlar enzimas cardíacas.
X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia).
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 7.0 mg/dl.
4.8 CALCIO
Generalidad
El calcio sérico representa aproximadamente el 1% del calcio total del organismo, la mayor
parte del cual está contenida en los huesos y en los dientes. El calcio sérico se encuentra
en equilibrio dinámico con los líquidos extracelulares.
En el suero, el calcio está presente en formas distintas: el 35-45%, ligado a las proteínas;
el 5-6%, ligado a ácidos débiles y no disociable (citrato); y el restante, como calcio ionizado,
muy importante como regulador en la excitación neuro-muscular y de la permeabilidad
celular. El calcio cataliza también muchas reacciones enzimáticas e interviene en la
coagulación de la sangre.
El calcio ligado a las proteínas y el no disociable son biológicamente inactivos. La absorción
se realiza primero en el tracto del intestino delgado, en particular para la acción de la
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 65
vitamina D, del pH intestinal y en relación con fosfato en la dieta. Es eliminado con las heces
y la orina.
Indicaciones
La determinación se utiliza en el monitoreo del metabolismo del calcio. Se distinguen:
X Hipocalcemia debida a:
Hipofuncionalidad de las paratiroides, escasa absorción por disminución de vitamina D,
cirugía intestinal, pancreatitis, cirrosis, alcoholismo, insuficiencia crónica del riñón.
X Hipercalcemia debida a:
Hiperparatiroidismo, aumentada destrucción de los huesos, metástasis de los huesos,
neoplasia de la mama, neoplasia de la próstata y de la tiroides, osteoporosis, leucemia,
linfoma, morbo de Paget, aumentada absorción intestinal, gravidez.
Modalidad de solicitud
En rutina y/o emergencia.
Tipo de cristalería
La cristalería y cualquier recipiente que tenga contacto con la muestra debe ser previamente
lavado con ácido para evitar contaminación por calcio. Los corchos, tapones de hule y tapas
plásticas son fuentes de contaminación que deben evitarse.
Transporte
Se puede transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugar y separar el suero, porque el prolongado contacto del suero con el coágulo puede
disminuir los valores del calcio.
El calcio es estable 7 días a temperatura ambiente de 20-25oC, 3 semanas 2-4oC, y 8 meses
a -20oC.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
66 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Fotometría de llama
El calcio a temperatura de llama emite dos bandas moleculares con picos a 556 y 626 nm.,
debidas al óxido.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 67
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado:
X Si el valor del calcio es < 7.0 y/o ≥ 13.0 mg/dl., repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de calcio ≥ de 16.0 mg/dl., repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2
con solución fisiológica con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control
está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir nuevamente la
muestra 1:4, 1:8, 1:16 con solución fisiológica siempre usando el control patológico.
Para transformar los valores del calcio en calcio ionizado (Ca++) se usa la siguiente fórmula:
Los valores de referencia del calcio ionizado son: 5.0 - 6.0 mg/dl
Linealidad
La metódica es lineal hasta 16 mg/dl.
68 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 0,2 mg/dl.
Especificidad
La metódica es específica para el calcio. Es necesario reducir la absorción de CO2 para evitar
una reducción de la estabilidad de los reactivos y de la calibración.
Interferencias
En la práctica, no existe alguna interferencia significativa del suero.
La interferencia se puede presentar con:
Hemólisis > de 10 g/l.
Bilirrubinas > de 60 mg/dl.
La lipemia > de 1000 mg/dl de triglicéridos.
Interferencias particulares pueden deberse a sustancias anticoagulantes o quelantes (EDTA,
citrato, oxalato).
Valor de referencia
Neonato de edad hasta 10 días 8.6-10.2 mg/dl.
Neonatos niños de 10 días hasta 2 años 7.6-10.4 mg/dl.
Niños de 2 hasta 12 años de edad 9.0-11.0 mg/dl.
Adultos 8.8-11.0 mg/dl.
Criterio de validación
X Comparar con otros parámetros del metabolismo: fósforo.
X Comparar con parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio y cloro).
X Comparar con parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea.
X Comparar con parámetros de funcionalidad pancreática (amilasa, lipasa).
X Controlar parámetros de funcionalidad de riñón (creatinina, clareamiento de la creatinina,
proteinuria y densidad urinaria).
X Controlar edad del paciente y eventual estado de gravidex.
X Controlar eventual terapia diurética.
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores inferiores a 7.0 mg/dl y ≥ 12.0 mg/dl.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 69
Generalidad
La CPK o CK es una enzima fundamental en el metabolismo energético de la célula. La CPK
tiene la capacidad de formar ATP, a partir del ADP y fosfocreatina, con reversibilidad de la
reacción, almacenando o librando energía.
Se encuentran tres principales isoenzimas con formas moleculares dimeras:
CK - MM
CK - MB
CK - BB
La CK se encuentra en cantidades elevadas en músculos esqueléticos casi exclusivamente,
bajo la fórmula de CK-MM, y con pequeñas cantidades de CK-MB (1-3.0%), en el cerebro
y el intestino; en la vejiga, está presente como enzima CK–BB. En el músculo cardíaco, están
bien representadas dos de las tres isoenzimas citoplasmáticas, la CK–MM y la CK-MB.
Indicaciones
La determinación de CPK en el suero es importante en el diagnóstico del infarto del
miocardio.
En el infarto del miocardio agudo (IMA), la CPK aumenta muy precozmente, normalmente
después de 4-6 horas a partir de la sintomatología dolorosa. El aumento máximo se da
después de 18-24 horas, y regresa a los valores normales después 3-4 días.
El aumento del CPK es más precoz en relación con otros parámetros del corazón (TGO, LDH).
El interés en la determinación de la CPK para el diagnóstico del infarto de miocardio, no sólo
interesa porque consigue ser un precoz diagnóstico, sino también porque el aumento en
el suero no está en relación con un daño del hígado, como puede verificarse con la TGO.
La determinación de CPK en el suero es importante también en alteraciones patológicas y
fisiológicas de los músculos esqueléticos (distrofia muscular, estrés muscular, inyecciones
musculares, trauma muscular, cirugía muscular, padecimiento muscular en general,
neoplasia).
Modalidad de solicitud
En rutina y/o emergencia.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, y 10 días en la oscuridad a + 4oC. Se inactiva en
la congelación.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, hemólisis,
presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultado
la no idoneidad de la muestra.
Metódica de determinación:
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 8715
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberá usar suero liofilizado de origen humano que sirve para el control de la exactitud
o precisión en los ensayos de CK-Nac y CK-MB.
Verificar el resultado
X Si el valor de la CPK es ≥ 600 U/L, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de CPK ≥ de 1000 U/L, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2 con
solución fisiológica con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido, y el control
está dentro los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,
1:8 con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.
Linealidad
La metódica es lineal hasta 1000 U/L.
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 5.0 U/L.
72 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Especificidad
La metódica es específica para la CPK.
Interferencias
Hemólisis: con Hb ≥ 1.0 g/l (muy sensible).
Ictérico: bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl (poco significativo).
Lipemia: triglicéridos ≥ 1000.0 mg/dl
Valor de referencia
Mujer: hasta 167.0 U/L
Hombre: hasta 190.0 U/L
Criterio de validación
Controlar todos los otros parámetros cardíacos: LDH, TGO, CPK-MB, mioglobina y troponina.
Confrontar parámetros musculares: LDH, aldolasa.
Controlar parámetros de funcionalidad hepática: TGP, GGT, TP, colinesterasa, parámetros de
hepatitis A y B.
Controlar eventuales parámetros tóxicos (alcoholemia y colinesterasa).
Controlar parámetros tumorales.
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 400.0 U/L.
el intestino; en la vejiga, está presente como enzima CK–BB. En el músculo cardíaco, están
bien representadas dos de las tres isoenzimas citoplasmáticas: la CK–MM y la CK-MB.
Indicaciones
La determinación de CPK en el suero es importante en el diagnóstico del infarto del
miocardio.
En el infarto del miocardio agudo (IMA), la CPK aumenta muy precozmente, normalmente
después de 4-6 horas a partir de la sintomatología dolorosa. El aumento máximo se da
después de 18-24 horas, y regresa a los valores normales después 3-4 días.
El aumento del CPK es más precoz en relación con otros parámetros del corazón (TGO, LDH).
El interés en la determinación de la CPK para diagnóstico del infarto del miocardio, no sólo
porque consigue ser un precoz diagnóstico, sino también porque el aumento en el suero no
está en relación con un daño del hígado, como puede verificarse con la TGO.
La determinación de CPK en el suero es importante también en alteraciones patológicas y
fisiológicas de los músculos esqueléticos (distrofia muscular, estrés muscular, inyecciones
musculares, trauma muscular, cirugía muscular, padecimiento muscular en general,
neoplasia).
Modalidad de solicitud
En rutina y/o emergencia, explicando obligatoriamente el diagnóstico.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC y 10 días en la oscuridad a + 4oC. Se inactiva en la
congelación.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
74 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódica de determinación:
Metódica cinética inmunológica y procedimiento analítico
La CK–MB está formada por las subunidades CK-B y CK-M. La fracción CK-M está inhibida por
un anticuerpo específico que no influye en la fracción CK-B. La restante actividad de esta
fracción, que corresponde a la mitad de la actividad de la CK-MB, es determinada mediante
técnicas cinéticas UV al igual que CK.
La creatina kinasa cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina y ATP. La
concentración catalítica se determina empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa
y glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, a partir de la velocidad de formación del NADPH.
———>
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 75
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberá usar suero liofilizado de origen humano que sirve para el control de la exactitud
o precision en los ensayos de CK-Nac y CK-MB.
Verificar el resultado:
X Si el valor de la CK-MB es ≥ 100 U/L, repetir la medida. Puede verificarse el caso en el
cual CK-MB es mayor que el CK total. Esto es posible porque la metódica utilizada es
inmunológica y usa un anticuerpo policlonal, para la fracción CK-M, que inhibe la actividad
de la subunidad CK-B. Existen casos en los cuales en pacientes con patologías oncológicas
y con deficiencias inmunitarias, se puede verificar el aumento de la fracción CK-MB
superior al CK-total.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de CK-MB ≥ de 1500 U/L, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2
con solución fisiológica con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control
está dentro los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,
1:8 con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.
Linealidad
La metódica es lineal hasta 1500 U/L.
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 5.0 U/L.
Especificidad
La metódica es específica para la CK-MB; sin embargo, puede interferir la presencia de
concentraciones elevadas de otras isoenzimas del CPK.
Interferencias
Hemólisis: Hb: > de 10 g/l (poca interferencia).
Ictérico: bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl (poco significativo).
Lipemia: triglicéridos ≥ 1000.0 mg/dl.
76 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Valor de referencia
Hasta 24.0 U/L
Inferior al 6.0% del CPK total.
Criterio de validación
El CK-MB, la troponina y la mioglobina son los parámetros más importantes en el diagnóstico
del infarto al miocadio agudo; menor importancia la tiene la TGO y LDH, y algunos factores
de la coagulación, como el fibrinógeno. Debido a que la CK-MB está presente de modo
particular en el miocardio, su mayor aumento del 6.0% del CK total indica la presencia de
un daño a cargo del miocardio.
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 100.0 U/L y/o además el 25.0% del
CK- total.
En caso que la fracción MB sea superior al CK- total, comunicar al médico para verificar si
existe una condición patológica que justifique ese resultado.
Indicaciones
La determinación del colesterol se hace en la patología del metabolismo lipídico y
lipoproteico. El colesterol circula en parte libre y en parte estereficado con ácidos grasos.
La estereficación se cumple en el hígado.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 77
Modalidad de solicitud
Sólo rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, y 5-7 días a + 4oC, 2 meses a –20oC.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
78 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Metódica de determinación:
Metótica enzimática colorimétrica (CHOD-POD)
El colesterol es determinado por la hidrólisis y oxidación enzimática. El indicador
quinonamine es formado de peróxido de hidrógeno y 4 amino antipirina con la presencia
de fenol y peroxidasa.
Colesterolester + H2O CHE colesterol- ácido graso
—>
Colesterol + O2 CHO colesteno 3-ona + H2O
——>
H2O2 + aminoantipirina + fenol POD quinonamino + 4 H2O
——>
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 3.0 mg/dl.
Especificidad
La metódica es específica para colesterol.
Interferencias
Suero ictérico con bilirrubina > 25.0 mg/dl.
Hemólisis hemoglobina > 7.0 g/L.
Lipemia: triglicéridos > 2500.0 mg/dl.
Ácido ascórbico, algunos anticoagulantes (oxalato, citrato, fluoruro) pueden interferir y dar
resultados falsamente bajos.
Valor de referencia
Hasta 200.0 mg/dl.
Criterio de validación
X Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (triglicéridos, colesterol HDL, VLDL,
apolipoproteínas).
X Controlar parámetros del metabolismo glucídico, de la funcionalidad del riñón,
funcionalidad del hígado (GGT en alcoholismo) y la funcionalidad tiroidea.
Indicaciones
El control del colesterol HDL es importante en la determinación del diagnóstico del riesgo
de aterosclerosis. El aumento de la concentración del colesterol HDL tiene un efecto protector
en las cardiopatías coronarias, mientras la disminución en particular con un aumento de los
triglicéridos puede comportar un aumento del riesgo de enfermedad cardiovascular.
80 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Modalidad de solicitud
Sólo rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la muestra se puede conservar por 1 día a temperatura
ambiente de 20-25oC, 5-7 días a + 4oC y 2 meses a – 20oC. Sin embargo, es mejor evitar
la congelación porque puede alterar los contenidos lipídicos y apolipoproteicos.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
82 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 3.0 mg/dl.
Especificidad
La metódica es específica para el Colesterol HDL.
Interferencias
Limpiar muy bien la cristalería para evitar contaminación (después de la ejecución de
albúmina, PCR, ceroplasmina, magnesio).
Hemólisis: con Hb ≥ 7.0 g/l.
Ictérico: bilirrubina ≥ 25.0 mg/dl.
Lipemia: triglicéridos ≥ 1000.0 mg/dl.
Ácido ascórbico, algunos anticoagulantes (oxalato, citrato, EDTA) pueden dar valores
falsamente bajos.
Valores elevados de inmunoglobulinas pueden provocar valores falsamente elevados de HDL.
Valor de referencia
Hombre: > 55.0 mg/dl
Mujer: > 65.0 mg/dl
Criterio de validación
X Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (triglicéridos, colesterol, VLDL,
apolipoproteínas).
X Controlar parámetros del metabolismo glucídico, de la funcionalidad del riñón,
funcionalidad del hígado (GGT en alcoholismo) y la funcionalidad tiroidea.
Modalidad de solicitud
Sólo rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la muestra se puede conservar por 1 día a temperatura
ambiente, 5-7 días a + 4oC, 2 meses a –20oC. Sin embargo, es mejor evitar la congelación
porque puede alterar los contenidos lipídicos y apolipoproteínas.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación
Las metódicas hacen referencia a la determinación del colesterol total, HDL-colesterol y de
los triglicéridos. El colesterol LDL se determina por cálculo.
84 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Linealidad
Referirse a las metódicas de colesterol, colesterol-HDL y triglicéridos.
Sensibilidad
Referirse a las metódicas de colesterol, colesterol-HDL y triglicéridos.
Especificidad
Referirse a las metódicas de colesterol, colesterol-HDL y triglicéridos.
Interferencias
Referirse a las metódicas de colesterol, colesterol-HDL y triglicéridos.
Con valores de triglicéridos > de 500.0 mg/dl, el cálculo no es significativo.
Valor de referencia
Hasta 130.0 mg/dl
Moderado riesgo 130.0-160.0 mg/dl
Alto riesgo > 160.0 mg/dl
Criterio de validación
Referirse a las metódicas de colesterol, colesterol-HDL y triglicéridos.
4.14 CREATININA
Generalidad
La creatinina es una sustancia que deriva del metabolismo muscular (músculo estriado, liso
y cardíaco) de la creatina y representa el subproducto de excreción. La producción de
creatinina es independiente de la dieta y del ejercicio muscular; sin embargo, es proporcional
dentro de ciertos límites a la masa muscular. Se libera de los glomérulos y no es reabsorbida
por los túbulos, de los cuales puede ser excretada, especialmente cuando se aumenta la
concentración hemática. El aumento de la creatinina en el suero empieza a ser evidente
cuando el filtrado glomerular es por debajo de 60 ml por minuto.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 85
Indicaciones
La determinación de la cratinina es utilizada en el diagnóstico de las enfermedades renales
agudas o crónicas, y también para el monitoreo de la diálisis renal. El aumento de la
creatinina es un índice de la insuficiencia glomerular en cuanto ésta es eliminada por filtración
glomerular. Mientras la uremia en la sangre puede ser controlada a través de una oportuna
dieta, la creatinina se correlaciona casi exclusivamente a la eficiencia de la filtración
glomerular. La creatinina representa el índice más fiel de la insuficiencia renal.
Modalidad de solicitud
En rutina y/o emergencia.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días 2-4oC y 6 meses en congelación.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
86 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Metódicas de determinación:
Método físico
Absorción de la cratinina sobre la resina a cambio iónico y medir la absorbancia a 235 nm.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 87
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado:
X Si el valor de la creatinina es ≥ 7.0 mg/dl, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de creatinina ≥ de 25.0 mg/dl, repetir la medida, sea concentrada y diluida
1:2 con solución fisiológica y con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control
está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3
con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.
Sensibilidad
Su sensibilidad es 0.1 mg/dl.
Especificidad
La metódica es específica para la creatinina.
Las muestras de suero tienen proteínas que pueden reaccionar no específicamente con el
método Jaffe; es necesario corregir el valor de 0.3 mg/dl para lograr valores más correctos.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/l.
Ictérico: bilirrubina ≥ 40.0 mg/dl.
Lipemia: triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.
Acetona ≥ 50.0 mg/dl.
Algunos antibióticos, como las cefalosporinas, pueden dar valores falsamente elevados.
Valor de referencia
Hombres Hasta 1.3 mg/dl
Mujeres Hasta 1.1 mg/dl
Neonatos o niños Hasta 0.7 mg/dl
88 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Criterios de validación
Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, potasio, proteínas, densidad urinaria).
Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, potasio, cloro).
Controlar sexo y edad del paciente y también eventual estado de embarazo.
Controlar parámetros del metabolismo muscular (CPK, míoglobulina).
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores ≥ 6.0 mg/dl.
C= U x V/P (ml/min)
donde:
C= aclaramiento
U= concentración de creatinina en la orina
V= volumen de la orina eliminada
P= concentración de creatinina en el plasma
Indicaciones
La estrecha correlación entre la velocidad de filtración glomerular y el valor de la creatinina
plasmática, y el hecho que la concentración de la creatinina hemática no es influenciada por
la dieta, hacen de la creatinina, en particular el aclaramiento de la creatinina, un índice de
funcionalidad renal muy sensible y seguramente más significativo que la urea.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 89
Modalidad de solicitud
En rutina y con explicación de su solicitud.
Transporte
La muestra de orina debe ser transportada de 2-4oC; la muestra de sangre, a temperatura
ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días 2-4oC y 6 meses en congelación.
Conservar las orinas a 2-4oC.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
90 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódica de determinación:
Cu x V/min
Aclaramiento de la creatinina = ————————————
Ps
donde:
Cu= concentración de creatinina en la orina expresado en mg/dl.
Ps = concentración de creatinina en suero expresado en mg/dl.
V/min= volumen por minuto (cantidad de la diuresis entre 1440).
Procedimiento analítico
Ver metódica de la creatinina.
Linealidad
Referirse a las metódicas de creatinina. Es lineal hasta 25.0 mg/dl.
Sensibilidad
Referirse a las metódicas de creatinina. Su sensibilidad es 0.1 mg/dl.
Especificidad
Referirse a las metódicas de creatinina.
Las muestras de suero tienen proteínas que pueden reaccionar no específicamente con el
método Jaffe. Es necesario corregir el valor de 0.3 mg/dl para lograr valores más correctos.
Interferencias
Las interferencias significativas se deben:
Para las orinas:
Presencia de partículas en suspensión (centrifugar las orinas).
Mala recolección de orina.
Presencia de bacterias, de barbitúricos, de cuerpos cetónicos.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 91
Para la sangre:
Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/l.
Ictérico: bilirrubina ≥ 40.0 mg/dl.
Lipemia: triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.
Acetona ≥ 50.0 mg/dl.
Valor de referencia
≥ 70ml/min.
Criterios de validación
X Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, potasio, proteínas, densidad
urinaria).
X Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, potasio, cloro).
X Controlar sexo y edad del paciente, y también eventual estado de embarazo.
X Controlar parámetros del metabolismo muscular (CPK, mioglobulina).
ELECTROLITROS
4.16 CLORO
Generalidad
El cloro representa el principal anión extracelular, como el sodio, el principal catión. Mientras
el sodio es el principal catión, el cloro comparte esta característica con los bicarbonatos; por
este motivo, el cloro se correlaciona no sólo con el equilibrio osmótico y el balance hídrico,
sino que también se correlaciona con el equilibrio ácido-base.
El cloro ingresa en las células en medidas insignificantes, con la excepción de los glóbulos
rojos, en los cuales sustituye los bicarbonatos que pasan al plasma.
Indicaciones
La determinación del cloro es importante en la condición de hemodilución y/o deshidratación
hipoosmótica (enfermedad de Addison), en la acidosis y en la alcalosis metabólicas (vómito),
y en la hemoconcentración (diabetes insípida y en la nefropatía).
Modalidad de solicitud
En rutina y emergencia.
92 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Transporte
La muestra de sangre debe ser transportada a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días + 2-4oC y 6 meses en congelación.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Método de Halmilton modificado por Schosinsky
El ión cloruro presente en la muetra reacciona con tiocianato de mercurio II produciendo
cloruro de mercurio no disociado y ión tiocianato libre. Este reacciona con ión férrico
produciendo tiocianato férrico de color rojo ladrillo, cuya intensidad es proporcional a la
concentración de cloruro.
2Cl- + Hg (SCN)2 ———> HgCl2 + 2SCN-
3SCN- + Fe+3 ———> Fe (SCN)3
Fotometría de llama
A temperatura de llama, se oxidan átomos y moléculas, y cuando vuelven a la temperatura
inicial, emiten radiaciones luminosas proporcionales a la cantidad de la sustancia nebolizada.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 93
Procedimiento analítico
El método ISE (potenciometría directa) se basa en la calibración del cloro a través de dos
estándares acuosos: uno con baja y uno con alta concentración conocida, y con un estándar
interno de referencia con una concentración que se pone en medio de los valores de la
calibración alta y baja durante la medida.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Fotómetro de potenciometría directa
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado:
X Si el valor del cloro es < 85.0 mEq/l ó ≥ 130.0 mEq/l, repetir la medida.
94 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 10.0 mEq/l.
Especificidad
La metódica es específica para el ion cloro.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb > 10.0 g/l (el cloro se encuentra en concentraciones elevadas en los
glóbulos rojos).
Fármacos diuréticos, tranquilizantes (tricíclicos, fenotiazinas).
Valor de referencia
95-110 mEq/l.
Criterios de validación
Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, potasio, proteínas, densidad urinaria).
Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, potasio, osmolaridad).
Controlar algunas hormonas (aldosterona, renina, cortisol, ACTH, TSH, FT4).
Controlar glucosa y eventual terapia diurética.
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente, con valores inferiores a 75 mEq/l y superiores a
126.0 mEq/l.
4.17 MAGNESIO
Generalidad
Además del potasio, el magnesio representa el catión intracelular más importante. El ion Mg
es el cofactor de muchos sistemas enzimáticos, y es indispensable en todas las reacciones
ATP dependientes. El magnesio se encuentra en muchos vegetales y en la carne. Del
magnesio presente en los alimentos, 1/3 se absorbe a nivel del primer tracto intestinal; se
elimina por la vía renal. Una cantidad excesiva de calcio y fósforo en los alimentos disminuye
la absorción del magnesio. El 69.0% del magnesio se encuentra en el tejido óseo, la otra
parte participa en el metabolismo intermedio. En la sangre se encuentra en los glóbulos rojos
y, en el plasma, se presenta en forma ionizada. El nivel de magnesio en el plasma se
mantiene de forma constante en un límite muy estrecho entre 1.58 - 2.55 mg%.
Indicaciones
Se emplea en el diagnóstico para el monitoreo del metabolismo del magnesio. Se evidencia
una correlación entre disminución de magnesio, alteraciones del calcio, potasio, fósforo y
algunas enfermedades cardíacas (arritmia ventricular, espasmos de las arterias coronarias).
La disminución del magnesio se debe a:
X Reducida introducción con dieta pobre en carne y vegetales, alcoholismo.
X Reducida absorción y pérdida intestinal (diarrea, rescisión intestinal, enteritis, cirrosis
hepática, enfermedad de Crohn).
X Aumento de la pérdida por vía renal (hipoparatiroidismo, diabetes, hiperaldosteronismo,
insuficiencia renal, terapia diurética, antibióticos, alcoholismo).
X Hipertiroidismo.
X Embarazo.
X Infección por HIV.
El aumento del magnesio se debe a:
X Reducida pérdida por vía renal (insuficiencia renal, uremia, pielonefritis, glomerulonefritis,
hiperparatiroidismo).
X Hipotiroidismo.
X Uso de antiácidos, laxantes que contienen magnesio.
X Cetoacidosis diabética.
X Quemaduras.
Modalidad de solicitud
En rutina.
96 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Transporte
Se puede transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y pronta separación del suero de la parte corposcular, ya que el contacto
prolongado con el coágulo puede aumentar los valores del magnesio, debido a que los
eritrocitos contienen aproximadamente 3 veces más iones de magnesio. La toma de muestra
se puede conservar por 3 días a temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días + 2 + 4oC y 12
meses en congelación.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Metódica de Calmagita
El magnesio presente en la muestra reacciona con la calmagita en medio alcalino, originando
un complejo coloreado que puede determinarse espectrofotométricamente.
La presencia de EGTA en el reactivo evita la interferencia del calcio.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 97
Linealidad
Es lineal hasta 29.0 mg/dl.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 0.07 mg/dl.
Especificidad
La metódica es específica para el magnesio. Es necesario reducir la absorción de CO2 para
evitar una reducción de la estabilidad de los reactivos y de la calibración.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/l.
Ictericia: bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.
Lipemia: triglicérido ≥ 1000.0 mg/dl.
Fármacos diuréticos, laxantes.
Valor de referencia
Neonatos de 2-4 días 1.4-2.2 mg/dl
Niños de 5-6 meses 1.7-2.3 mg/dl
Niños 6-12 años 1.7-2.1 mg/dl
Adultos 1.5-2.5 mg/dl
Criterios de validación
X Confrontar analitos del metabolismo (calcio, fósforo, calciuria, fosfaturia).
X Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, potasio, cloro).
X Controlar parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea (PTH, TSH, hormonas
tiroideas).
X Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, proteínas, densidad urinaria).
4.18 POTASIO
Generalidad
El potasio es el principal catión intracelular, contenido en el 98.0 % de los espacios
intracelulares. Tiene la tarea de mantener la osmolaridad, y también regula la función de la
excitabilidad de las fibrocélulas musculares.
La cantidad de potasio intracelular es regulada, como el sodio, por la bomba de sodio
potasio, y también del equilibrio ácido–base. La principal vía de eliminación del potasio es
renal; pequeñas cantidades se eliminan con las heces.
Indicaciones
La determinación de la potasemia tiene una gran importancia para la función del miocardio.
La medida del potasio sirve también en la enfermedad del riñón, intestinal, equilibrio
hidroelectrolítico y también para el monitoreo de la terapia diurética.
El potasio puede aumentar por:
X Una excesiva introducción (alimenticia, parenteral, transfusión de sangre conservada).
X Destrucción celular (hemólisis, necrosis de parénquima).
X Alteraciones orgánica y funcional del riñón.
La cantidad de la potasemia puede disminuir:
X En insuficiencias de contribución alimenticia y por enfermedades gastrointestinales
(vómitos y diarrea).
X Por excesiva eliminación del riñón (exceso de la hormona córtico surenal), y también por
acidosis diabética.
Modalidad de solicitud
En rutina y/o emergencia.
Transporte
Se puede transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días + 2-4oC y 6 meses en congelación.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 99
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Fotometría de llama
A temperatura de llama, se oxidan átomos y moléculas; y cuando vuelven a la temperatura
inicial, emiten radiaciones luminosas (776 nm), proporcionales a la cantidad de la sustancia
nebolizada.
Procedimiento analítico
El método ISE (potenciometría directa) se basa en la calibración del potasio a través de dos
estándares acuosos: uno con baja y uno con alta concentración conocida, y con un estándar
interno de referencia con una concentración que se pone en medio de los valores de la
calibración alta y baja durante la medida.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
100 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Equipos
X Centrífuga
X Fotómetro electrodo selectivo de potenciometria directa
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado:
X Si el valor del potasio es < 2.5 mEq/l ó > 6.0 mEq/l, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de potasio ≥ de 7.0 mEq/l, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2
con solución fisiológica y con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido, y el control
está dentro de los rangos establecidos, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3
con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.
Linealidad
La metódica de potasio es lineal hasta 7.0 mEq/l.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 0.2 mEq/l.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 101
Especificidad
La metódica es específica para el potasio.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/l (el potasio se encuentra en concentraciones elevadas en los
glóbulos rojos).
Fármacos diuréticos.
Valor de referencia
3.7-5.5 mEq/l
Criterios de validación
X Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, proteínas, densidad urinaria).
X Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, cloro).
X Controlar eventual terapia diurética.
X Controlar parámetros de funcionalidad cardíaca.
X Controlar glucosa.
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente, con valores inferiores a 2.7 mEq/l y superiores a
6.2 mEq/l.
4.19 SODIO
Generalidad
El sodio es el principal catión extracelular, que se puede difundir libremente. La salida del
sodio desde la célula está compensada por la penetración del potasio, a fin de mantener la
electro neutralidad. La cantidad de potasio intracelular es regulada, como el sodio, por la
bomba de sodio potasio, y también de los equilibrios ácido–base. La principal eliminación
del sodio es por el riñón; en menor cantidad, por las heces y el sudor. La principal función
del sodio es la de mantener la cantidad de los líquidos extracelulares y el volumen de todos
los líquidos en el organismo. El sodio condiciona las variaciones del equilibrio hídrico. La
cantidad de sodio en el organismo se mantiene constante para la regulación renal; la
absorción de sodio es controlada por la hormona aldosterona, aunque además tiene una
cierta importancia el cortisol.
102 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Indicaciones
El sodio puede disminuir por:
X Excesiva suministración de agua con disminuida capacidad de eliminación.
X Excesiva retención de agua o por alteración del centro de la sed.
X Pérdida enorme de sodio con la orina (diabetes insípida).
X Daño de la bomba sodio-potasio (caquexia, hipo nutrición, estrés después de intervención
por cirugía).
El sodio puede aumentar:
X Contribución excesiva de sodio.
X Deshidratación.
X Por excesiva diuresis.
X Por quemaduras graves.
X Enfermedad crónica del riñón.
X En diarreas imponentes.
Modalidad de solicitud
En rutina y/o emergencia.
Transporte
Se puede transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días 2-4oC y 6 meses en congelación.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 103
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Fotometría de llama
A temperatura de llama, se oxidan átomos y moléculas, y cuando vuelven a la temperatura
inicial, emiten radiaciones luminosas (589 nm) proporcionales a la cantidad de la sustancia
nebolizada.
Procedimiento analítico
El método ISE (potenciometría directa) se basa en la calibración del sodio a través de dos
estándares acuosos: uno con baja y uno con alta concentración conocida, y con un estándar
interno de referencia con una concentración que se pone en medio de los valores de la
calibración alta y baja durante la medida.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
104 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Equipos
X Centrífuga
X Fotómetro electrodo selectivo de potenciometría directa
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado
X Si el valor de sodio es < 126.0 mEq/l ó ≥ 156.0 mEq/l, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de sodio ≥ de 180.0 mEq/l, repetir la medida, sea concentrada y diluida
1:2 con agua destilada y con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control
está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3
con agua destilada, siempre usando el control patológico.
Linealidad
La metódica del sodio es lineal hasta 180.0 mEq/l.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 10.0 mEq/l.
Especificidad
La metódica es específica para el sodio.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 105
Interferencias
Interferencias más significativas:
Algunos fármacos que bajan los niveles de sodio: diuréticos, tranquilizantes tricíclicos,
fenotiazina.
Valor de referencia
132.0 – 148.0 mEq/l.
Criterios de validación
X Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, proteínas, densidad urinaria).
X Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (cloro, potasio, osmolaridad).
X Controlar eventual terapia diurética.
X Controlar glucosa.
X Controlar algunos parámetros hormonales: aldosterona, renina, cortisol, ACTH, TSH y
FT4.
Comunicación de riesgo
Se debe comunicar inmediatamente con valores inferiores a 125.0 mEq/l y superiores a
158.0 mEq/l.
4.20 HIERRO
Generalidades
El hierro se absorbe a nivel duodenal y en la parte superior del yeyuno, de modo particular,
como hierro Fe++. El hierro presente en el nivel intestinal proviene en gran parte de los
alimentos de forma trivalente. La otra parte proviene del catabolismo hemoglobínico. Para
ser absorbido, el hierro tiene que ser reducido mediante la vitamina C; la cantidad diaria
es de 1.0 mg. El hierro se liga a las proteínas de transporte antes de ingresar al plasma.
La ceroplasmina provoca la oxidación a Fe+++, que bajo tal forma se liga a la transferrina,
el transporte del hierro se hace con el complejo transferrina hierro. Cada proteína de
trasferrina puede transportar al máximo 2 iones de hierro.
Cuando los iones férricos son sustraídos a la sangre desde el órgano hemopoyético, aumenta
la cantidad de transferrina insaturada en la sangre, la cual puede cargarse de nuevo de hierro
desde los depósitos tisulares o desde las células de la mucosa intestinal. El hierro se libera
también desde los glóbulos rojos maduros y es nuevamente utilizado para la síntesis de
nueva hemoglobina. La parte residual del hierro se fija en los depósitos tisulares como
ferritina, la cual es utilizada más despacio por el organismo.
106 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Indicaciones
La determinación de hierro sirve en el diagnóstico de anemia por carencia de hierro, en el
diagnóstico de hemocromatosi, nefropatía crónica. Las anemias por carencia de hierro son
de tipo microcítico e hipocrómico.
Disminución de hierro:
X Insuficiente introducción de hierro con la dieta (niños con nutrición exclusivamente de leche).
X Insuficiente absorción en caso de aclorhidria en los pacientes gastroresegados.
X Insuficiencia en la absorción por diarrea crónica.
X Hemorragia crónica.
X Necesidad aumentada como en el embarazo y en la lactancia.
X Enfermedad infecciosa crónica y en otras enfermedades en las cuales el hierro se acumula
en las células del sistema retículo endotelial.
Aumento de hierro:
X Aumentada destrucción de los glóbulos rojos como en la anemia hemolítica.
X Alterada síntesis de la hemoglobina, como en la anemia perniciosa.
X Hepatitis aguda, en las cual las células del hígado liberan en la sangre el hierro contenido
en el citoplasma.
X Hemosiderosis por muchas transfusiones o por introducción, vía oral, en mucho tiempo
con elevada cantidad de hierro.
Modalidad de solicitud
Sólo rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero. La toma de muestra se puede conservar por 7 días
a temperatura ambiente de 20-25oC, por 3 semanas a 2-4oC y algunos años en congelación.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódica de determinación:
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Linealidad
La metódica de hierro es lineal hasta 500.0 ug/dl.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 5.0 ug/dl.
Especificidad
La metódica es específica para el hierro.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 109
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis con hemoglobina superiores a 1.0 g/L.
Suero ictérico: bilirrubina > 60.0 mg/dl.
Lipemia > 2000.0 mg/dl de triglicéridos.
Muestras con precipitados deben ser bien centrifugados.
El oxalato y el EDTA pueden dar valor bajo.
Valor de referencia
Hombre 60-158 ug/dl.
Mujer 37-145 ug/dl.
Criterios de validación
X Confrontar con los diferentes parámetros eritrocitarios (glóbulos rojos, hemoglobina,
hematócritos, valor medio globular, valor medio de hemoglobina, índice de anisocitosis).
X Controlar otros parámetros del metabolismo del hierro (transferrina, ferritina).
X Controlar parámetros de enfermedades inflamatoria, infecciosas, neoplásicas, autoinmunes
y degenerativas (VSG, fibrinógeno, PCR, leucocitos, ANA, marcadores neoplásicos).
X Controlar parámetros índice de hemólisis (bilirrubina, reticulocitos, LDH, aptoglobulina).
X Controlar parámetros de pérdida de sangre (sangre oculta en las heces, hematuria).
X Controlar eventual terapia farmacológica.
Indicaciones
La determinación de la fosfatasa ácida está correlacionada a las enfermedades neoplásicas
de la próstata, especialmente en los enfermos con metástasis ósea.
Se puede encontrar aumento de la fosfatasa ácida en:
X alteraciones de los glóbulos rojos, como en muchas anemias.
X alteraciones de los glóbulos blancos, como leucemia.
X alteraciones de las plaquetas.
Modalidad de solicitud
Sólo rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente dentro de las cuatros horas después de obtenida la
muestra.
Conservación
Centrifugación y separación del suero. Ejecutar el examen cuanto antes: si no se puede
proceder antes, añadir a la muestra una gota de ácido acético (0.8 mol/l ), en cantidad de
una gota por cada ml. de suero. La toma de muestra se puede conservar por 2 días a
temperatura ambiente de 20-25oC, por 8 días a + 4oC y por 2 meses a –20oC.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 111
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Linealidad
La metódica de la fosfatasa ácida es lineal hasta 200.0 U/L.
112 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es 0.1 U/L.
Especificidad
La metódica es específica para la fosfatasa ácida.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 2.0 g/l (porque la fosfatasa ácida se encuentra en los glóbulos rojos).
Ictericia: con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.
Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.
La presencia de oxalato, citrato y EDTA pueden disminuir la actividad de la fosfatasa ácida.
Valor de referencia
Hasta 10.0 U/L.
Criterios de validación
X Confrontar con funcionalidad del hígado (transaminasa, TP, colinesterasa).
X Confrontar con parámetros de estasis biliares (bilirrubina, fosfatasa alcalina, GGT).
X Confrontar parámetros oncológicos, en particular PSA.
Indicaciones
El aumento de la fosfatasa alcalina se encuentra en:
X Enfermedad del hígado por un aumento de la fracción hepática o de la fracción de los
huesos por obstrucción de la vía biliares.
X Hepatopatías celulares.
X Hepatopatía obstructiva.
X Enfermedad ósea por un aumento de la fracción ósea, debido a la incrementada actividad
de los osteoblastos (raquitismo, enfermedad de Paget, hiperparatiroidismo, osteomalacia,
neoplasia del tejido óseo, trauma o fracturas ósea).
La disminución de la fosfatasa alcalina se origina en la disminución del magnesio, porque
éste es el ión necesario para la actividad de la fosfatasa alcalina.
Modalidad de solicitud
Sólo rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero. La muestra se puede conservar por 2 días a
temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días 2-4oC y 4 semanas en congelación a -20oC.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
114 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódica de determinación:
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 115
Linealidad
La metódica de la fosfatasa alcalina es lineal hasta 2000.0 U/L.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 5.0 U/L.
Especificidad
La metódica es específica para la fosfatasa alcalina.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 2.0 g/l (porque la fosfatasa alcalina se encuentra en los glóbulos
rojos).
Ictericia: con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.
Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.
La presencia de oxalato, citrato y EDTA puede disminuir la actividad de la fosfatasa alcalina
por la pérdida de iones de magnesio.
Valor de referencia
Hombres hasta 279.0 U/L
Mujeres hasta 240.0 U/L
Neonatos inferior 600.0 U/L
Niños de 6 días a 1 año inferior 1100 U/L
Niños de 2- 7 años hasta 650.0 U/L
Niños de 7-12 años hasta 720.0 U/L
Criterios de validación
X Controlar la edad del paciente.
X Confrontar con funcionalidad del hígado (transaminasa, TP, colinesterasa).
X Confrontar con parámetros de estasis biliares (bilirrubina, GGT).
X Confrontar con parámetros del metabolismo óseo: (calcio, fósforo).
X Confrontar el valor del magnesio.
X Controlar eventual estado tóxico (alcoholismo).
X Controlar los parámetros de hepatitis.
Generalidad
El fósforo es un importante anión intra-extracelular, y se encuentra en forma orgánica e
inorgánica.
El 80.0% está en equilibrio dinámico en los huesos, en relación con el calcio; un 11.0%,
en el tejido muscular; el restante, en los líquidos intracelulares y en todas las estructuras
celulares.
En los líquidos extracelulares, el fósforo está ligado a los lípidos (fosfolípidos) y a las
proteínas (fosfoproteínas).
Es importante:
X En el procedimiento de formación de absorción del tejido óseo.
X En la composición de los fosfolípidos.
X En el transporte de los metabolitos a través de las membranas celulares y sobre la
transferencia de energía (ATP, UTP, fosfocreatina).
X En la regulación de la reacción de la actividad de las diferentes fases metabólicas
(constituyente del AMP cíclico).
X En la absorción intestinal de glúcidos y vitaminas.
El metabolismo del fósforo está estrechamente ligado al calcio, pues este último ejerce una
influencia directa sobre los niveles de fosfato a través de una regulación, en la cual, una alta
concentración de calcio hace disminuir la absorción de los fosfatos y provoca la formación
en el intestino de fosfato de calcio insoluble. Los factores que regulan los niveles de fosfatos
en el organismo son los mismos que regulan los del calcio.
El fósforo está presente en muchos alimentos con altos contenidos proteicos (leche y
productos derivados de la leche). El fósforo es absorbido en los primeros tractos del intestino
delgado en ambiente ácido; mientras, en ambiente alcalino, hace productos insolubles. La
PTH (paratohormona) aumenta la absorción de modo indirecto, estimulando la vitamina D;
la hormona del crecimiento (GH) aumenta la absorción intestinal directa del fósforo. La
regulación del fósforo se da principalmente a través de los riñones.
El fósforo se encuentra de forma orgánica en los glóbulos rojos y en el plasma como
fosfolípido. Normalmente, en el laboratorio se determina el fósforo inorgánico. Los niveles
del fósforo en el suero son diferentes durante el día; en la noche, se tiene un aumento del
30.0% con referencia a los valores de la mañana.
Indicaciones
La determinación del fósforo sérico es importante en el diagnóstico de enfermedades óseas
y renales.
El fósforo puede disminuir en:
X La reducción de la absorción intestinal (raquitismo, osteomalacia, mala absorción
intestinal, hipovitaminosis A).
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 117
Modalidad de solicitud
Sólo rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero. La muestra se puede conservar por 8 horas a
temperatura ambiente de 20-25oC, 1 día 2-4oC y 1 año en congelación.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
118 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Metódicas de determinación:
Formación de fosfomolibdato-vanadato
El fósforo inorgánico reacciona en ambiente ácido con molibdato y vanadato con formación
de un compuesto de color amarillo.
Metódica enzimática
El fosfato inorgánico, en presencia de glucógeno y de la enzima fosforilasa, forma glucosa-
1-fosfato que produce a través de la enzima 6-fosfogluconato NADPH y que es medido a
340 nm.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 119
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Linealidad
La metódica de fósforo es lineal hasta 20.0 mg/dl.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 0.3 mg/dl.
Especificidad
La metódica es específica para el fósforo inorgánico.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 2.0 g/l.
Ictericia: con bilirrubina ≥ 56.0 mg/dl.
Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.
Valor de referencia
Adulto Hasta 4.5 mg/dl
Niños Hasta 6.5 mg/dl
Criterios de validación
X Confrontar con los analitos del metabolismo fósforo-cálcico (calcio, calciuria, fosfaturia).
X Confrontar con parámetros de equilibrio electrolítico (sodio, potasio, cloro).
X Confrontar con parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea (TSH, PTH, hormonas
tiroideas).
X Confrontar con funcionalidad pancreática (amilasa, lipasa).
X Confrontar con parámetros de funcionalidad renal (creatinina, aclaramiento de la
creatinina, proteinuria, densidad urinaria).
Indicaciones
Un aumento de la g-GT se encuentra en todas las enfermedades del hígado y de las vías
biliares. El aumento más alto se encuentra en la obstrucción de las vías biliares. La
determinación es importante en el diagnóstico de la metástasis hepática. Se usa también en
el diagnóstico para identificar el alcoholismo, para el monitoreo de la abstención del alcohol
en la terapia de desintoxicación, en las enfermedades del hígado. Parece que el aumento de
la g-GT en las enfermedades hepáticas está en relación con una aumentada síntesis de la
enzima a nivel hepático.
Modalidad de solicitud
Emergencia y rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero. La toma de muestra se puede conservar por 3 días
a temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días 2-4oC y 1 año en congelación.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 121
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódica de determinación:
La g–glutamil transferasa es una carboxipeptidasa que cataliza la transferencia del grupo
gamma-glutamilo, desde el sustrato L-gamma glutamil p-nitroanilida, a una molécula de
glicilglicina (aceptor), liberando p-nitroanilina en cantidades equimoleculares. En las
condiciones de reacción, la cantidad de p-nitroanilina liberada es directamente proporcional
a la actividad γ –GT del suero.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
122 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Linealidad
La metódica de γ – GT es lineal hasta 1200.0 U/L.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 3.0 U/L.
Especificidad
La metódica es específica para γ– GT.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 1.5 g/l.
Ictericia: con bilirrubina ≥ 40.0 mg/dl.
Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.
Muchos antibióticos pueden dar valores elevados.
Valor de referencia
Hombres Hasta 50.0 U/L
Mujeres Hasta 36.0 U/L
Criterios de validación
X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática.
X Confrontar con parámetros de estasis biliar (bilirrubina, fosfatasa alcalina).
X Controlar eventual estado tóxico (alcoholismo).
X Controlar eventual absorción de terapia con antibióticos.
X Controlar parámetros serológicos para la mononucleosis infecciosa y el citomegalovirus.
4.25 GLUCOSA
Generalidad
La glucosa es el carbohidrato más importante presente en la sangre. La oxidación de la
glucosa es la principal fuente de energía para las células del organismo. La contribución de
la glucosa con la dieta se hace fundamentalmente bajo la forma de polisacárido y almidón:
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 123
dos enzimas —la ptialina salival y la amilasa pancreática— los dividen en monosacáridos:
bajo esta forma, son absorbidos y entregados al hígado, el cual los transforma en glucosa.
La glucosa no utilizada inmediatamente es polimerizada a glicógeno, se conserva en el hígado
y en los tejidos musculares y/o se transforma en ácidos grasos que se acumulan como grasas.
Muchas hormonas intervienen en el metabolismo glucídico. La insulina promueve la
utilización de la glucosa, facilitando el pasaje entre las células, y también la fosforilación y
la polimerización a glicógeno. El glucagón y la adrenalina promueven la glicogenólisis
hepática; los corticoides y ACTH favorecen la glicogénesis; la somatropina inhibe la
fosforilación de la glucosa. Todas estas hormonas mantienen la concentración de glucosa
entre los límites precisos.
Indicaciones
La determinación de glucosa se usa en el diagnóstico y control de la enfermedad del
metabolismo de los carbohidratos, como diabetes mellitus en sus diferentes formas,
hipoglicemias neonatales, etc. La diabetes puede ser primaria o secundaria en relación con
enfermedades del páncreas; endógenas, hormonales; puede ser insulino resistente por
reducida tolerancia a los carbohidratos. Modificaciones de la glucosa se pueden encontrar en
la pancreatitis, la disfunción de la tiroides, en el traumatismo craneal, en accidente cerebro
vascular y en el infarto del miocardio. Puede existir exceso de consumo de glucosas en el
trabajo muscular, como en la hiperpirexia y en la tirotoxicosis.
Modalidad de solicitud
Emergencia y rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
La estabilidad de la glucosa en las muestras es influenciada por la temperatura de
conservación, desde la contaminación de bacterias y, en modo particular, por la glicólisis.
Centrifugar y separar lo más pronto el suero de la parte celular. Se puede utilizar como
anticoagulante con fluoro o iodio. La toma de muestra se puede conservar por 8 horas a
temperatura ambiente de 20-25oC y por 3 días a 2-4oC.
124 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: hemólisis, ictericia,
presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultado
la no idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 125
Equipos
X Centrífuga.
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado:
X Si el valor de la glucosa es < 50.0 mg/dl y ≥ 350. mg/dl, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de glucosa ≥ de 450.0 mg/dl, repetir la medida, sea concentrada y diluida
1:2 con solución fisiológica y con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control
está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3
con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.
Linealidad
La metódica de glucosa es lineal hasta 450.0 mg/dl.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 2.0 mg/dl.
Especificidad
La metódica es específica para la glucosa.
126 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Interferencias
Las interferencias mas significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 8.0 g/l.
Ictericia: con bilirrubina ≥ 36.0 mg/dl.
Lipemia: con triglicéridos ≥ 430.0 mg/dl.
Algunas hormonas, el ácido ascórbico, todas las sustancias reducientes pueden dar valor bajo
de glucosa. La hormona adrenalina, algunas drogas y los derivados de las anfetaminas
pueden dar valor alto de glucosa.
Valor de referencia
Adultos y niños 60.0 - 110.0 mg/dl
Neonatos > de 6 horas 40.0 - 60.0 mg/dl
Neonatos > de 5 días 50.0 - 80.0 mg/dl
Criterios de validación
X Controlar primeramente el examen de orina para eventual presencia de glucosa y/o
cuerpos cetónicos.
X Controlar parámetros del metabolismo glucósido (hemoglobina glicosilada, insulinemia).
X Controlar eventual parámetros de funcionalidad tiroidea y suprarrenal.
X Controlar parámetros del metabolismo lipídico y el valor del ácido úrico.
X Controlar electrolitos (sodio, potasio, cloro, magnesio).
X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática.
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores inferiores a 50.0 mg/dl y superiores a
500.0 mg/dl.
Indicaciones
La determinación del LDH en el suero está indicada en el monitoreo del infarto del miocardio.
Se encuentra presente en estos pacientes, en cantidad inclusive, 10 veces superior a los
valores normales; permanece elevado por un largo período, ofreciendo así la posibilidad de
hacer el diagnóstico del infarto, también si es de pequeña entidad. El primer aumento de
los valores se tiene después de 6-12 horas. Los valores máximos se añaden después de
24-60 horas, y los valores regresan a la normalidad después de 7–15 días. La LDH también
se emplea en el diagnóstico y monitoreo de enfermedades del hígado (hepatitis viral, cirrosis,
carcinoma metastásico).
Un aumento de la actividad de la LDH se encuentran en algunas hemopatías (anemia
perniciosa, crisis hemolítica, etc.), en las neoplasias malignas, en caso de enfermedad
reumática, en las leucemias agudas y crónicas, en el infarto cerebral, en el linfoma maligno
y en la pericarditis tuberculosa. Es muy importante el diagnóstico de la LDH en el derrame
seroso: si su nivel es bajo, el derrame es seguramente de origen inflamatorio; si su nivel
es elevado, es de naturaleza neoplásica.
Modalidad de solicitud
Emergencia y rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero. La toma de muestra se puede conservar por 1 día
a temperatura ambiente de 20-25oC, 4 días a + 4oC y 6 semanas congelada.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
128 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, hemólisis,
lipemia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el
resultado la no idoneidad de la muestra.
Metódica de determinación:
La enzima deshidrogenasa láctica cataliza la reducción de ácido pirúvico a ácido láctico en
presencia de la coenzima niacín adenín dinucleótido reducido (NADH).
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 129
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado
X Si el valor de la LDH es < 100.0 U/L y ≥ 800.0 U/L, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de LDH ≥ de 1200 U/L, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2 con
solución fisiológica y con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control
está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,
1:8 con solución fisiológica siempre usando el control patológico.
Linealidad
La metódica de LDH es lineal hasta 1200.0 U/L.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 6.0 U/L.
Especificidad
La metódica es específica para la LDH.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 2.0 g/l.
Ictericia: con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.
Lipemia: con triglicéridos ≥ 1000.0 mg/dl.
El paracetamol puede interferir.
Valor de referencia
Adultos 230-460 U/l
Niños 250-580 U/L
130 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Criterios de validación
X Controlar el valor de otras enzimas de los parámetros cardíacos (CPK, TGO, mioglobina,
CK-MB, CK–MB masa, troponina).
X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (TGP, GGT, TP, colinesterasa,
electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).
X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia, colinesterasa).
X Controlar parámetros tumorales.
X Controlar biometría hemática completa.
X Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK, aldolasa).
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superior a 800.0 U/L.
Indicaciones
La determinación de las proteínas es útil en el diagnóstico y monitoreo de muchas
enfermedades del hígado, del riñón, de la medula ósea, de algunas enfermedades
metabólicas, y de errores en la alimentación.
Se puede verificar:
X Una disminución de la síntesis (hepatopatías graves, cirrosis con disminución de las
albúminas y aumento de las globulinas).
X Disminución del aporte dietético y mala absorción.
X Disminución por pérdidas de causas endógenas (hemorragias, diarrea masiva,
enfermedad nefrótica, etc.) y exógena (quemaduras, hemorragias traumáticas).
X Disminución por hipercatabolismo (hipertiroidismo, neoplasia, síndrome de Cushing).
Las proteínas se pueden encontrar aumentadas en:
X Deshidratación grave.
X Mieloma múltiple.
X Displasia por hiperproducción proteica.
Modalidad de solicitud
Sólo rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, por 6 días a + 4oC y 6 meses congelada.
132 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Metódica de Kjeldahi
De exclusivo uso para referencia de la estandarización de las proteínas en suero de control.
Se mide el contenido de nitrógeno de las proteínas, luego la mineralización de éstas en
presencia de un catalizador.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 133
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Linealidad
La metódica de proteínas totales es lineal hasta 15.0 g/dl.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 0.2 g/dl.
Especificidad
La metódica es específica para las proteínas totales.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb > 6.5 g/l.
Ictericia: con bilirrubina > 21.0 mg/dl.
Lipemia: con triglicéridos > 2000.0 mg/dl.
Valor de referencia
Adultos 6.6-8.7 g/dl
Prematuros 3.6-6.0 g/dl
Neonatos 4.6-7.0 g/dl
Niños 6.0-8.0 g/dl
134 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Criterios de validación
X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (TGP, GGT, TP, colinesterasa, electro-
foresis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).
X Confrontar con funcionalidad del riñón (creatinina, urea, potasio, densidad urinaria).
X Confrontar con parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio, cloro).
X Controlar posible estado de embarazo.
X Controlar parámetros de funcionalidad muscular y cardíaca (CPK, aldolasa).
X Controlar parámetros inflamatorios (VSG, PCR, biometría hemática completa).
Indicaciones
La determinación de la AST en el suero está indicada para seguir los fenómenos lesivos de
las células. Si la concentración de la enzima en el suero es moderada, ésta proviene del
citoplasma y, en menor medida, de las mitocondrias; si la concentración de la enzima está
elevada en relación con fenómenos lesivos y necróticos de la célula, proviene en mayor
medida de las mitocondrias.
Los valores más elevados de la AST se relacionan con los procesos necróticos del órgano:
infarto del miocardio, hepatopatía, distrofia muscular. La determinación de la AST es útil en
presencia de un informe dudoso de electrocardiograma. La AST puede aumentar también en
el infarto pulmonar, en la pancreatitis aguda, en las hepatitis, en el envenenamiento por
hongos (Amanita falloide), o por la absorción de algunos fármacos (isoniazide, rifampicina,
algunos antibióticos).
Modalidad de solicitud
En emergencia y rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días a + 4oC, 1 año congelada.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, hemólisis,
lipemia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el
resultado la no idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
La enzima aspartato aminotransferasa (AST) o glutámico-oxalacética (TGO) cataliza la
transferencia del grupo amino del aspartato al cetoglutarato, formando oxalacetato y
glutamato. La concentración catalítica se determina empleando la reacción acoplada de la
malato deshidrogenasa (MDH), a partir de la velocidad de desaparición del NADH.
Aspartato + α
cetoglutarato AST oxalacetato + Glutamato
—>
Oxalacetato + NADH + H MDH Malato + NAD+
+
——>
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
136 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado
X Si el valor de la AST es ≥ 300.0 U/L, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de AST ≥ de 800 U/L, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2 con
solución fisiológica y con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control
está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:4,
1:8 con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.
Linealidad
La metódica de AST es lineal hasta 800.0 U/L.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 4.0 U/L.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 137
Especificidad
La metódica es específica para la AST.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 6.0 g/l.
Ictericia: con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.
Lipemia: con triglicéridos ≥ 1000.0 mg/dl.
Muchos fármacos (cefalosporina, cloranfenicol, rifampicina, isoniazide, alfametildopa) pueden
dar valores elevados.
Valor de referencia
Hombres Hasta 40.0 U/L
Mujeres Hasta 30.0 U/L
Criterios de validación
X Controlar el valor de otras enzimas de los parámetros cardíacos (CPK, mioglobina,
CK-MB, CK–MB masa, troponina).
X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (ALT, GGT, TP, colinesterasa,
electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).
X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia, colinesterasa).
X Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK, aldolasa).
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superior a 300.0 U/L.
Indicaciones
La determinación de la ALT está relacionada con las enfermedades del hígado. La ALT se
encuentra muy elevada en las diferentes hepatitis virales (A, B, C, delta, E) con valores
20-50 veces más elevados con respecto a los valores de referencia. La ALT aumenta también
en la mononucleosis infecciosa y citomegalovirus. Se puede verificar leve aumento de ALT
en las miopatías, colagenopatía, hemopatía y pancreopatía.
Es útil el reporte de AST/ALT:
X En la obstrucción extrahepática, el aumento principal es el de la ALT.
X En la cirrosis, neoplasia del hígado, ictero hemolítico; en la hepatitis alcohólica, el
aumento de la ALT es inferior a la AST.
Modalidad de solicitud
En emergencia y rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, 7 días a + 4oC y 1 año congelada.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, hemólisis,
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 139
Metódica de determinación:
La enzima alanina aminotransferasa (ALT) o transaminasa glutámica pirúvica (TGP) cataliza
la transferencia del grupo amino de la alanina al cetoglutarato, formando piruvato y
glutamato. La concentración catalítica se determina empleando la reacción acoplada de la
lactato deshidrogenasa (LDH), a partir de la velocidad de desaparición del NADH.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado
X Si el valor de la ALT es ≥ 300.0 U/L, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
140 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Linealidad
La metódica de ALT es lineal hasta 600.0 U/L.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 4.0 U/L.
Especificidad
La metódica es específica para la ALT.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 6.0 g/l.
Ictericia: con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.
Lipemia: con triglicéridos ≥ 1000.0 mg/dl.
Muchos fármacos (cefalosporina, cloranfenicol, rifampicina, isoniazide, alfametildopa) pueden
dar valor elevado.
Valor de referencia
Hombres Hasta 40.0 U/L
Mujeres Hasta 36.0 U/L
Criterios de validación
X Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (AST, GGT, TP, colinesterasa,
electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).
X Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia, colinesterasa).
X Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK, aldolasa).
X Controlar parámetros serológicos para la mononucleosis infecciosa y para citomegalovirus.
X Controlar parámetros de las enzimas cardíacas (CPK, mioglobina, CK-MB, CK–MB masa,
troponina).
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 141
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superiores a 300.0 U/L.
4.30 TRIGLICÉRIDOS
Generalidad
Los triglicéridos están compuestos de un alcohol trivalente (glicerol) y de tres cadenas largas
de ácidos grasos. Son absorbidos, una parte, con la alimentación y, la otra parte, es
sintetizada desde el hígado. Los triglicéridos alimenticios son transportados por los
quilomicrones, mientras el transporte de la cantidad endógena a los tejidos se hace con las
VLDL. Los triglicéridos son utilizados en los tejidos con la intervención de la lipasa
lipoproteica. El 95.0% del tejido adiposo está constituido por triglicéridos.
Indicaciones
La determinación de los triglicéridos se emplea en los distintos dismetabolismos: alterado
metabolismo lipídico, diabetes mellitus, síndrome nefrótico y muchas enfermedades
endógenas.
Se puede encontrar hipertrigliceridemia por:
X Falta de lipasa proteica.
X Exógena (introducción excesiva de alcohol, glúcidos y lípidos).
X Endógena (congénita).
Modalidad de solicitud
En rutina.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
142 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Conservación
Centrifugación y separación del suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente de 20-25oC, 5 días a + 4oC y 3 meses congelada.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de
coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar, eventualmente, en el resultado la no
idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Método enzimático UV
Los triglicéridos son hidrolizados a glicerol y ácidos grasos por medio de una lipasa. El
glicerol, por acción de la glicerol Kinasa (GK), es fosforilado en presencia de ATP. El ADP
producido es reconvertido en ATP a través de la piruvatokinasa (pk), y el piruvato formado
es reducido a lactato en presencia del NADH, el cual se oxida a NAD. La cantidad del NADH
oxidado se mide en absorbancia a 340 nm.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 4.0 mg/dl.
144 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Especificidad
La metódica es específica para los triglicéridos: si desea tener en cuenta el glicerol libre, se
tiene que restar 10.0 mg/dl al valor encontrado de los triglicéridos.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 6.0 g/l.
Ictericia: con bilirrubina ≥ 27.0 mg/dl.
El acido ascórbico puede interferir con valores falsamente bajos.
Valor de referencia
Hasta 170.0 mg/dl.
Criterios de validación
X Observar el aspecto del suero (aspecto lipémico, cuando los triglicéridos están mayor de
400.0 mg/dl).
X Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (colesterol, HDL, LDL, apolipoproteína).
X Controlar los parámetros del metabolismo glucídico.
X Controlar los parámetros de la funcionalidad del riñón (urea, potasio, proteínas, densidad
urinaria).
X Controlar la funcionalidad hepática (particularmente la GGT, por toxicidad alcohólica).
X Controlar la funcionalidad tiroidea (en el hipotiroidismo > triglicéridos y colesterol).
4.31 UREA
Generalidad
Las sustancias nitrogenadas de la sangre se dividen en dos fracciones: nitrógeno proteico y
nitrógeno no proteico. El nitrógeno no proteico comprende diferentes sustancias: urea,
aminoácidos, ácido úrico, creatinina, amonio, polipéptidos, purinas, nucleótidos, fenol e
indol.
La urea representa la fracción principal, y sus valores se identifican con los del nitrógeno
no proteico. La urea es producida desde el hígado, después de la desaminación oxidativa
de los aminoácidos. En condiciones normales, la intensidad del catabolismo se adapta a la
contribución exógena y, por tanto, la cantidad de nitrógeno excretada es la misma a la de
origen catabólico, la cual corresponde a la cantidad exógena.
La urea contenida en el plasma es filtrada desde los glomérulos del riñón, y es reabsorbida
por los túbulos en el 40.0%. El grado de absorción varía con la cantidad de agua reabsorbida.
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 145
La urea es muy soluble, el 90.0% se excreta a través de la vía urinaria, y el restante 10.0%
por vía extrarenal (sudor, heces).
Indicaciones
La determinación de la urea representa el diagnóstico más común para la valoración de la
funcionalidad renal.
En el diagnóstico diferencial se emplea (con la determinación de la creatinina) en:
X Hiperuremia prerenal: deshidratación (disminuida absorción o excesiva pérdida de agua),
insuficiencia cardíaca, excesivo catabolismo proteico.
X Hiperuremia renal: alteraciones de la filtración glomerular y/o de la absorción tubular
(glomérulo nefritis, riñón policístico, necrosis tubular, nefrosclerosis), alteración del flujo
sanguíneo renal por enfermedad intrínseca del riñón.
X Hiperuremia post-renal: obstrucción de las vías urinarias (cálculos, hipertrofia prostática,
neoplasia).
Modalidad de solicitud
En rutina y emergencia.
Transporte
Transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugar y separar el suero; la toma de muestra se puede conservar por 1 día a
temperatura ambiente, de 20-25oC 7 días a + 4oC y 1 año congelada.
Verificación de la muestra
Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
146 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar la idoneidad del suero o plasma: ictericia, hemólisis,
lipemia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el
resultado la no idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación:
Método de diacetilmonosina
La urea reacciona a temperaturas altas en presencia de ácido fosfórico con la
diacetilmonosina, con formación de un producto coloreado en amarillo. La reacción es
catalizada por iones férricos.
Método de Berthelot
La enzima ureasa reacciona sobre la urea, transformándola en iones de amonio. Después,
el amonio se hace reaccionar en medio alcalino con fenol y hipoclorito, formándose azul de
indofenol, cuya intensidad de color es proporcional a la concentración de urea.
Materiales
X Guantes descartables no estériles
X Tubos de ensayo 16 x 100 mm
X Puntas de pipeta 10-50 ul
X Puntas de pipeta 50-200 ul
X Puntas de pipeta 200-1000 ul
X Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Equipos
X Centrífuga
X Espectrofotómetro
X Baño María
X Reloj marcador
X Pipetas automáticas 10-50 ul
X Pipetas automáticas 50-200 ul
X Pipetas automáticas 200-1000 ul
X Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 147
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Se deberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las
muestras.
Verificar el resultado
X Si el valor de la urea ≥ 150.0 mg/dl, repetir la medida.
X Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
X Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando
un control patológico.
X Con valores de urea ≥ de 400 mg/dl, repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2
con solución fisiológica y con un control patológico.
X Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control
está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.
X Si el suero diluido no esta en relación con el suero concentrado, diluir la muestra 1:3
con solución fisiológica, siempre usando el control patológico.
Linealidad
La metódica de urea es lineal hasta 400.0 mg/dl.
Sensibilidad
La sensibilidad de la metódica es de 5.0 mg/dl.
Especificidad
La metódica es específica para la urea.
Interferencias
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis: con Hb ≥ 10.0 g/l
Ictericia: con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl
Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl
Valor de referencia
Adultos Hasta 50.0 mg/dl
Neonatos, hasta 6 meses Hasta 42.0 mg/dl
Niños Hasta 48.0 mg/dl
148 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
Criterios de validación
X Confrontar los parámetros de la funcionalidad del riñón (creatinina, aclaramiento de la
creatinina, proteínas urinarias, densidad urinaria).
X Confrontar parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio, cloro).
X Confrontar parámetros de funcionalidad hepática (AST, ALT, GGT).
X Controlar parámetros metabólicos (glucosa, acido úrico).
X Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (colesterol, HDL, LDL, apolipoproteína).
X Controlar eventual estado de embarazo.
X Confrontar con funcionalidad sobrerenal.
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores superiores a 100.0 mg/dl.
QUINTA PARTE
ANEXOS
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 151
5.1 BIBLIOGRAFÍA
2.- Arce J. Herramientas del Control de Calidad. CEFOF. Costa Rica. 1999.
5.- Bonvicini P., Cerotti G., Giorn. It. Chim. 3 245 (1978).
7.- Cali J.P., G.N. Bowers e D.S. Young, Clin. Chem. 19 1208 (1973).
14.- Dybkaer R. Internal quality control in the clinical laboratori. Biochim. Clin. 1991.
18.- Fraser CG. Hyltoft Petersen P. The importance of imprecision. Ann. Clin . Biocem. 1991.
19.- Franzini C. Requisiti qualitativi auspicabili per le prestazioni rese dal laboratorio di
biochimica clinica. Biocim. Clin. 1998.
21.- Gornal A.G., C.J. Balwell e David , J. Biol. Chem. 177 651 (1949).
22.- Gruppo di lavoro sull armonizzazione dei sistemi di qualità e accreditamento della
Confederazione di chimica clinica delle Comunità Europee. Criteri essenziali ed
aggiuntivi per i sistemi qualità dei laboratori medici. Biochim. Clin. 1998.
24.- Hyltoft Petersen P. Ricos C. Stockl D. Libere JC. Baadenhuijsen H. Fraser CG. Thienpont
L. Proposed guidelines for the internal quality control of analytical results in the medical
laboratory. Eur J. Clin: Chem. Clin . Biochem. 1996.
26.- I.F.C.C Comitato di esperti per il controllo di qualità in chimica clinica. Controllo di
qualità in chimica clinica. Biochim. Clin. 1992.
37.- Método manual COBAS INTEGRA 400. II parte. Diagnostics. Roche. 1999.
38.- Niño H., Barrera L. Garantía de Calidad en el Laboratorio Clínico. PAHO. 1993.
40.- Prandini B.D. Spandrio L., Atti 2 Congr. Sibioc 576 (1972).
Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad 153
46.- Stockl D. Baadenhuijsen H. Fraser CG. Libere JC. Hyltoft Petersen P. Ricos C.
Desiderable routine analitycal goals for quantities assayed in serum. Eur. J. Clin. Chem.
Clin. Biochem. 1995.
53.- Westgard JO. Barry PL. Hunt MR. Groth T. Proposed selected method. A multirule
Shewart chart for quality control in clinical chemistry. Ciln. Chem. 1981.
154 Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
5.2 LÉXICO
Error de Error que influye siempre del mismo modo sobre cada determinación; es
sistema decir, provoca la desviación unívoca del valor medio encontrado con
respecto al valor esperado. Son errores por eliminar.
.../... LÉXICO
Promedio o Valor obtenido al dividir la suma de los valores por el número de los valores.
Media
(Valor medio)
Valor de Valor asignado a una cantidad mensurable, como resultado del proceso de
consenso consenso.
Valor Valor desconocido, del cual, cada valor experimental es una evaluación
verdadero aproximada.