APNDICES

APNDICEA:CLCULODELACONCENTRACIONDECOMPUESTOSFENOLICOS,
ANTOCIANINASYCAPACIDADANTIOXIDANTE

EJEMPLODECLCULODECONCENTRACINDECOMPUESTOSFENLICOS

EXTRACTOSFLORDEJAMAICA
Datosextractoconagua:
Absorbanciaa765nm:0.2455
Volumendeextractodeflordejamaicaempleado:0.05mL
Volumentotaldelmatrazaforado:50mL

1) Sedespejaxdelaecuacindelarectadecidoglicoysesustituyeelvalorde
absorbanciaobtenidoeneltrminoydelaecuacin2

y = u.126x -u.u18 (Ec.1)

x = (y +u.126)u.u18 (Ec.2)

x =
0.2455+0.126
0.018
(Ec.3)

x = 2.u91S
mg
L
= u.uu21
mg
mL
= C1

2) SedespejaC2delasiguienterelacin:

C1I1 = C2I2 (Ec.4)

C2 =
C1v1
v2
(Ec.5)

Donde:
C1=x=Concentracindecompuestosfenlicosenelvolumentotaldelmatrazaforado
(0.0021mg/mL)
V1=Volumentotalenmatrazaforado(50mL)
V2=Volumendelextractodeflordejamaicaempleado(0.05)
C2=Concentracindecompuestosfenlicosenelvolumendeextractodeflorde
jamaicaempleado

91

3) Seintroducentodoslostrminosconocidosenlaecuacin6yseresuelvela
ecuacin

C2 =
Su mL - u.uu21 gmL
u.uS mL

C2 =2.0913mgdecidoglico/mLdeextracto
C2 = 2u9.12mgdecidoglico/100mLdeextracto

4) Paraexpresarelresultadopor100gdeclicesdeflordejamaicaseempleala
siguienterelacin

209.13 mg cdo gIco

100 mL dc cxtucto dc ]Io dc ]umucu
x
25 mL dc cxtucto dc ]Io dc ]umucu
2.5 g dc cIccs dc ]Io dc ]umucu
=

=20.913mgcidoglico/gdeclicesdeflordejamaica
=2091.3mgcidoglico/100gdeclicesdeflordejamaica

MICROENCAPSULADOS
Datosmicroencapsulado1%degoma
Preparacindisolucin(muestralquida):0.1gdepolvodisueltosen3mLdeagua
destilada
Volumendemuestralquidaempleado:0.15mL
Volumentotaldelmatrazaforado:50mL
Absorbanciaa765nm:0.4734

1) Sedespejaxdelaecuacindelarectadecidoglicoysesustituyeelvalorde
absorbanciaobtenidoeneltrminoydelaecuacin2

y = u.126x -u.u18 (Ec.1)

x = (y +u.126)u.u18 (Ec.2)

x =
0.4734+0.126
0.018
(Ec.3)

x = S.9uu
mg
L
= u.uuS9
mg
mL
= C1

2) SedespejaC2delasiguienterelacin:

C1I1 = C2I2 (Ec.4)

92

C2 =
C1v1
v2
(Ec.5)

Donde:
C1=x=Concentracindecompuestosfenlicosenelvolumentotaldelmatrazaforado
(0.0021mg/mL)
V1=Volumentotalenmatrazaforado(50mL)
V2=Volumenmuestralquidaempleado(0.15)
C2=Concentracindecompuestosfenlicosenelvolumendemuestralquida

3) Seintroducentodoslostrminosconocidosenlaecuacin6yseresuelvela
ecuacin

C2 =
Su mL - u.uuS9 gmL
u.1S mL

C2 =1.3mgdecidoglico/mLdemuestralquida
C2 = 1Su.uumgdecidoglico/100mLmuestralqu

4) Paraexpresarelresultadoporgdepolvo(microencapsulado)seempleala
siguienterelacin

130 mg cdo gIco

100 mL dc mucstu Iiqudu
x
3 mL dc mucstu Iiqudu
0.1 g dc poIo (mcocncupsuIudo)
=

=39mgcidoglico/gdepolvo(microencapsulado)

5) Paraexpresarelresultadoporgdeslidossolublesseemplealasiguiente
relacintomandoencuentalossiguientesdatosparacadamicroencapsulado;
elclculosebasaenquesetieneungramodepolvo(microencapsulado),
conformadoporlahumedad,lagomaylosslidossolublesdejamaica,comolo
muestralafigura.

Porloquepormedioderelacionessevaeliminando,la
humedad,lagomayporltimoseobtienenlosslidossolublesdejamaica.

93

Datosmicroencapsulados
(g)gomaen
elpolvo
humedadb.h
polvo
Bx
extracto
goma
gdepolvo
obtenidos
1 2.99 19.1 14.00
2 2.84 19.9 14.70
3 2.01 20.7 15.50
4 2.94 21.5 16.10
5 2.3 22.5 16.05
Extracto
concentrado 18.4

Datosmicroencapsulado1%degoma:
Gramosdepolvoobtenidos:14g
Humedad:2.99%(b.h)(2.99gdeaguaen100gdepolvo,97.01gdeslidos
secosen100gdepolvo)
Slidossolublesmezclaextractoconcentradogoma(1%):19.1(Bx)
Slidossecos=slidossolubles

14 g Jc pol:o -
97.1 g soliJos sccos
1uu g pol:o
-
1g gomo
19.1 soliJos solublcs

=0.71gdegoma
14 g Jc pol:o -u.71 g Jc gomo = 1S.29 g Jc soliJos solublcs

6) Usandoelvalordecompuestosfenlicosobtenidoanteriormente(mgdecido
glico/gdepolvo)sehacelasiguienterelacin:

S9 mg Jc ciJo glico
g Jc pol:o
-
14 g Jc pol:o
1S.29 g Jc soliJos solublcs

=
41.u9 mg Jc ciJo glico
g Jc soliJos solublcs Jc ]omoico

94

EJEMPLODECLCULODECONCENTRACINDEANTOCIANINAS
MONOMRICASTOTALES

EXTRACTOSFLORDEJAMAICA
Datosextractoconagua:
SolucinbufferpH=1
Absorbanciaa520nm:0.2818
Absorbanciaa700nm:0.006
Absorbancia520Absorbancia700nm=0.2757

SolucinbufferpH=4.5
Absorbanciaa520nm:0.0614
Absorbanciaa700nm:0.0091
Absorbancia520Absorbancia700nm=0.0522

Volumendeextractodeflordejamaicaempleado:0.2mL
Volumentotaldeltubodeensayo:7.2mL
PMcianidina3glucsido:449.2g/mol
FDfactordedilucin(vol.Total/vol.Extracto):36
absortividadcianidina3glucsido:26900L/mol*cm

1) Conlosdatosobtenidossecalculalaabsorbanciafinaldeacuerdoalasiguiente
ecuacin

A = (A
520nm
-A
700nm
)
pH1.0
- (A
520nm
-A
700nm
)
pH4.5
(Ec.1)
A = u.27S7 -u.uS22=0.2235

2) Conlaabsorbanciafinalobtenida,sesustituyenlosdatosenlaecuacin2:

Antocioninos monomricos [
mg
L
=
A-PM-P-1000
s-1
(Ec.2)

Antocioninos monomricos [
mg
I
=
u.22SS - 449.2 - S6 - 1uuu
269uu - 1

Antocioninos monomricos = 1S6.68 mgI

=13.67mgdecianidina3glucsido/100mLdeextracto

95

3) Paraexpresarlosresultadospor100gdeclicesdeflordejamaica,seemplela
siguienterelacin
1S.67 mg Jc cioniJino -S -glucosiJo
1uu mI cxtrocto Jc lor Jc ]omoico
x
2S mI Jc cxtrocto Jc lor Jc ]omoico
2.S g Jc cliccs Jc lor Jc ]omoico

=1.37mgdecianidina3glucsido/gdeclicesdeflordejamaica
=13.7mgdecianidina3glucsico/100gdeclicesdeflordejamaica

MICROENCAPSULADOS
Datosmicroencapsulado1%degoma
Preparacindisolucin(muestralquida):0.1gdepolvodisueltosen3mLdeagua
destilada
Volumendeextractodemuestralquidaempleado0.8mL
Volumentotaldeltubodeensayo:7.8mL
FDfactordedilucin(vol.Total/vol.Extracto):9.75
PMcianidina3glucsido:449.2g/mol
absortividadcianidina3glucsido:26900L/mol*cm

SolucinbufferpH=1

Absorbanciaa520nm:1.0298
Absorbanciaa700nm:0.0829
Absorbancia520Absorbancia700nm=0.947

SolucinbufferpH=4.5
Absorbanciaa520nm:0.337
Absorbanciaa700nm:0.0885
Absorbancia520Absorbancia700nm=0.2485

1) Conlosdatosobtenidossecalculalaabsorbanciafinaldeacuerdoalasiguiente
ecuacin

A = (A
520nm
-A
700nm
)
pH1.0
- (A
520nm
-A
700nm
)
pH4.5
(Ec.1)
A = u.947 -u.248S=0.6985

2) Conlaabsorbanciafinalobtenida,sesustituyenlosdatosenlaecuacin2:
96

Antocioninos monomricos [
mg
L
=
A-PM-P-1000
s-1
(Ec.2)

Antocioninos monomricos [
mg
I
=
u.698S - 449.2 - S6 - 1uuu
269uu - 1

Antocioninos monomricos = 11S.72 mgI

=11.37mgdecianidina3glucsido/100mLdemuestra
lquida

3) Paraexpresarlosresultadosporgdepolvo(microencapsulado),seemplela
siguienterelacin

11.S7 mg Jc cioniJino -S -glucosiJo

1uu mI mucstro liquiJo
x
S mI Jc mucstro liquiJo
u.1 g Jc pol:o (microcncopsuloJo)

=3.41mgdecianidina3glucsido/gdepolvo(microencapsulado)

4) Paraexpresarelresultadoporgdeslidossolublesseemplealasiguiente
relacintomandoencuentalossiguientesdatosparacadamicroencapsulado;
elclculosebasaenquesetieneungramodepolvo(microencapsulado),
conformadoporlahumedad,lagomaylosslidossolublesdejamaica,comolo
muestralafigura.

Porloquepormedioderelacionessevaeliminando,la
humedad,lagomayporltimoseobtienenlosslidossolublesdejamaica.

Datosmicroencapsulado1%degoma:
Gramosdepolvoobtenidos:14g
Humedad:2.99%(b.h)(2.99gdeaguaen100gdepolvo,97.01gdeslidos
secosen100gdepolvo)
Slidossolublesmezclaextractoconcentradogoma(1%):19.1(Bx)
Slidossecos=slidossolubles

97

14 g Jc pol:o -
97.1 g soliJos sccos
1uu g pol:o
-
1g gomo
19.1 soliJos solublcs

=0.71gdegoma
14 g Jc pol:o -u.71 g Jc gomo = 1S.29 g Jc soliJos solublcs

5) Usandoelvalordeantocianinasmonomricastotalesobtenidoanteriormente
(mgdecianidina3glucsido/gdepolvo)sehacelasiguienterelacin:

S.41 g Jc cioniJino -S -glucosiJo

g Jc pol:o
-
14 g Jc pol:o
1S.29 g Jc soliJos solublcs

=
S.S9 mg Jc cioniJino -S -glucosiJo
g Jc soliJos solublcs Jc ]omoico

EJEMPLODECLCULOPARALACUANTIFICACINDELASANTOCIANINAS
IDENTIFICADASENELPERFILANTOCINICO

Datosextractoconagua
reabajolacurvaa520nm(V*s)obtenidosdelcromatograma
PicoA:3591043(delfinidina3sambubisido)
PicoB:200454(delfinidina3glucsido)
PicoC:2010760(cianidina3sambubisido)
Vol.extractopurificadoenelcartuchoSeppack:0.25mL
Vol.totalelqueseredisolvieronlasantocianinaspurificadas:0.5
Factordedilucin(Vol.total/vol.extractopurificado): 2

Datosdelestndar
READEL
ESTANDAR
READEL
ESTNDAR/PUREZA
(95%)
CONCENTRACIN
ESTNDARmg/mL
21766486 22912090.53 0.2
21862093 23012729.47 0.2
21814289 22962409.47 0.2
MEDIA 22962409.82 0.2

1) Se relaciona el rea del estndar y su concentracin con el rea obtenida y as

se obtiene la concentracin deseada. Esta ltima se multiplica por el factor de
dilucinempleado.

98

ParaelpicoA:
22962409.82=0.2
3591043=x
x=0.031*2=0.0625mg/mL=6.25mg/100mL

ParaelpicoB:
22962409.82=0.2
200454=x
x=0.0017*2=0.00349mg/mL=0.349mg/100mL

ParaelpicoC:
22962409.82=0.2
2010760=x
x=0.0175*2=0.035mg/mL=3.5mg/100mL

1) Paraobtenerlaconcentracintotaldelasantocianinasidentificadasenelperfil
antocinicosesumanlasconcentracionesobtenidasparalasantocianinasA,By
C.

Concentracintotalantocianinas:
=0.1009mgdeclorurodecianidina3Oglucsido/mLdeextractodeflorde
jamaica
=10.09mgdeclorurodecianidina3Oglucsido/100mLdeextractodeflorde
jamaica

2) Paraexpresarelresultadoanteriorpor100gdeclices,seemplealasiguiente
relacin:

1u.u9 mg Jc cloruro Jc cioniJino -S -0 - glucosiJo

1uu mI cxtrocto Jc lor Jc ]omoico
x
2S mI Jc cxtrocto Jc lor Jc ]omoico
2.S g Jc cliccs Jc lor Jc ]omoico

=

EJEMPLODECLCULODEACTIVIDADANTIOXIDANTE

EXTRACTOSFLORDEJAMAICA
Datosextractoconagua
Abs.Inicial:0.7009
Abs.Final:0.3357
Volumendeextractodeflordejamaicadiluidoenetanol:1mL
Volumendeetanolabsolutoempleado:13mL
99

Factordedilucin(Vol.deetanol/vol.deextractodeflordejamaica):13
Volumentotalenlaceldadecuarzo:1mL
Volumendeextractodeflordejamaicaaadidoalaceldadecuarzo:0.20mL

1) Secalculael%deinhibicindelradicalconlasiguienteecuacin:

% Jc inbibicion =
Abs. iniciol -Abs. inol
Abs. inciol
X1uu
(Ec.1)
% Jc inbibicion =
u.7uu9 -u.SSS7
u.7uu9
X1uu
%deinhibicin=52.1044
2) Se despeja x de la ecuacin de la recta de Trolox, se sustituye el valor del
porcentajedeinhibicinobtenidoyseresuelvelaecuacin

y = S.u4Sx +2.S62
x =
y -2.S62
S.u4S

x =
S2.1u44 -2.S62
S.u4S

X=9.866M=C1

3) Se despeja C2 de la siguiente ecuacin y se introducen todos los trminos

conocidosenlaEc.3.

C1I1 = C2I2 (Ec.2)

C2 =
C1v1
v2
(Ec.3)

Donde:
C1=actividadantioxidanteequivalenteaTrolox(MdeTrolox)enelvolumentotalde
lacelda(1mL)
V1=Volumentotalenlacelda(1mL)
V2=Volumen del extracto de flor de jamaica (diluido en etanol), empleado en la celda
(0.02L)
100

C2= actividad antioxidante equivalente a Trolox (M de Trolox) en el volumen de

extractoempleadoenlacelda(0.02mL)

C2 =
(9.866 pH)(1mI)
(u.u2 mI)

C2=493.3M

4) El valor obtenido se multiplica por el factor de dilucin del extracto de flor de

jamaica
=493.3M*13
=6412.9M=641.29moldeTrolox/100mLdeextractodeflordejamaica

5) Para expresar el resultado por 100g de clices de flor de jamaica se emplea la

siguienterelacin:

641.29 moI dc 1oIox

100 mL dc cxtucto dc ]Io dc ]umucu
x
25 mL dc cxtucto dc ]Io dc ]umucu
2.5 g dc cIccs dc ]Io dc ]umucu
=

=64.129molequivalenteaTrolox/gdeclicesdeflordejamaica
=6,412.9molequivalenteaTrolox/100gdeclicesdeflordejamaica

MICROENCAPSULADOS
Datosmicroencapsulado1%degoma
Abs.Inicial:0.7192
Abs.Final:0.2333
Preparacindisolucin(muestralquida):0.1gdepolvodisueltosen3mLdeagua
destilada

Volumendeextractodemuestralquidadiluidoenetanol:1mL
Volumendeetanolabsolutoempleado:30mL
Factordedilucin(Vol.deetanol/vol.deextractodeflordejamaica):30
Volumentotalenlaceldadecuarzo:1mL
Volumendeextractodeflordejamaicaaadidoalaceldadecuarzo:0.20mL

1) Secalculael%deinhibicindelradicalconlasiguienteecuacin:

101

% Jc inbibicion =
Abs. iniciol -Abs. inol
Abs. inciol
X1uu
(Ec.1)
% Jc inbibicion =
u.7192 -u.2SSS
u.7192
X1uu
%deinhibicin=51.95
2) Se despeja x de la ecuacin de la recta de Trolox, se sustituye el valor del
porcentajedeinhibicinobtenidoyseresuelvelaecuacin

y = S.u4Sx +2.S62
x =
y -2.S62
S.u4S

x =
S1.9S -2.S62
S.u4S

X=9.84M=C1

3) Se despeja C2 de la siguiente ecuacin y se introducen todos los trminos

conocidosenlaEc.3.

C1I1 = C2I2 (Ec.2)

C2 =
C1v1
v2
(Ec.3)

Donde:
C1=actividadantioxidanteequivalenteaTrolox(MdeTrolox)enelvolumentotalde
lacelda(1mL)
V1=Volumentotalenlacelda(1mL)
V2=Volumendemuestralquida(diluidaenetanol),empleadaenlacelda(0.02L)
C2= actividad antioxidante equivalente a Trolox (M de Trolox) en el volumen de
muestralquidaempleadaenlacelda(0.02mL)

C2 =
(9.84 pH)(1mI)
(u.u2 mI)

C2=491.79M
102

4) El valor obtenido se multiplica por el factor de dilucin del extracto de flor de

jamaica
=493.3M*30
=14,753.94M=641.29moldeTrolox/100mLdeextractodeflordejamaica

5) Para expresar el resultado por g de polvo (microencapsulado) se emplea la

siguienterelacin:

14 753.94 moI dc 1oIox

100 mL dc mucstu Iiqudu
x
3 mL dc mucstu Iiqudu
0.1 g dc poIo (mcocncupsuIudo)
=

=442.62molequivalenteaTrolox/gdepolvo(microencapsulado)

6) Paraexpresarelresultadoporgdeslidossolublesseemplealasiguiente
relacintomandoencuentalossiguientesdatosparacadamicroencapsulado;
elclculosebasaenquesetieneungramodepolvo(microencapsulado),
conformadoporlahumedad,lagomaylosslidossolubles,comolomuestrala
figura.

Porloquepormedioderelacionessevaeliminando,la
humedad,lagomayporltimoseobtienenlosslidossolublesdejamaica.

Datosmicroencapsulado1%degoma:
Gramosdepolvoobtenidos:14g
Humedad:2.99%(b.h)(2.99gdeaguaen100gdepolvo,97.01gdeslidos
secosen100gdepolvo)
Slidossolublesmezclaextractoconcentradogoma(1%):19.1(Bx)
Slidossecos=slidossolubles

103

14 g Jc pol:o -
97.1 g soliJos sccos
1uu g pol:o
-
1g gomo
19.1 soliJos solublcs

=0.71gdegoma
14 g Jc pol:o -u.71 g Jc gomo = 1S.29 g Jc soliJos solublcs

7) Usandoelvalordeactividadantioxidanteobtenidoanteriormente(molde
Trolox/gdepolvo)sehacelasiguienterelacin:

442.62 pmol Jc Irolox

g Jc pol:o
-
14 g Jc pol:o
1S.29 g Jc soliJos solublcs

=
466.Su pmol Jc Irolox
g Jc soliJos solublcs Jc ]omoico