BIOLOGIA MOLECULAR DEL CANCER Y APOPTOSIS

Dr. Juan Aquino P.

CANCER Hasta hace solo unas cuantas dcadas, los investigadores ignoraban de cmo se originaba el cncer, as como los trastornos celulares que provocan que una clula sana pierda el control y empiece a dividirse desordenadamente. Tampoco acertaban a explicar los mecanismos por los que ese grupo de clulas amotinadas establecen un particular sistema de vasos sanguneos que las ayudan a degenerar en un tejido canceroso que, con el tiempo, invade otras partes del organismo y amenaza de muerte al individuo. Hoy, sin embargo, el desarrollo de los tumores ha dejado de ser un misterio, ya que a lo largo de los ltimos aos se ha llevado a cabo un esfuerzo titnico para desentraar las diferencias que existen entre una clula normal y una cancerosa. Tambin se han producido progresos trascendentales en el esclarecimiento de los mecanismos moleculares que ponen en marcha el desarrollo de una neoplasia o tumor. Desde pocas remotas, se han descrito numerosos factores etiolgicos para esta enfermedad. Los ms comunes son el tabaco, productos qumicos, y radiacin solar, as como factores biolgicos y genticos. Estos dos ltimos, han sido los ms estudiados de un tiempo a esta parte en busca de nuevos horizontes para hallar la cura definitiva. As, el hallazgo de dos familias de genes mutantes ( oncogenes y antioncogenes), que participan de forma activa en la aparicin de tumores, ha brindado valiosa informacin sobre la biologa del cncer. Los primeros indicios sobre la existencia de estos genes salieron a la luz en 1911 cuando Peyton Rous demostr que un virus, denominado posteriormente virus del sarcoma de Rous, era el agente infeccioso que causaba sarcomas en pollos; Tuvieron que pasar muchas dcadas para que Michael Bishop, Harold Varmus y sus colegas de la Universidad de San Francisco en California comprobaran que el oncogn transmitido por el virus del sarcoma de Rous se encuentra tambin de forma natural en clulas sanas. Estos estudios permitieron llegar a la conclusin de que el enigma del cncer se halla oculto en genes sanos que de algn modo pierden el control y se transforman en oncogenes , conocindose en la

actualidad alrededor de un centenar de genes implicados directamente en la aparicin del cncer.

Clula normal

Figura.- Cambios (mutaciones)en la clula para producir el cancer

Clula neoplsica

Priimera mutacin

Segunda mutacin y proliferacin

Inestabilidad genmica

Definicin La palabra cncer deriva del griego karkinos, significa 'cangrejo'. Se dice que las formas corrientes de cncer avanzado adoptan una forma abigarrada, con ramificaciones, que se adhiere a todo lo que agarra, con la obstinacin y forma similar a la de un cangrejo marino, y de ah su nombre. Se considera a veces sinnimo de los trminos 'neoplasia' y 'tumor'; sin embargo, el cncer siempre es una neoplasia o tumor maligno. En realidad el cncer es un conjunto de enfermedades en las cuales el organismo produce un exceso de clulas malignas (conocidas como cancergenas o cancerosas), con crecimiento y divisin ms all de

los lmites normales, (invasin del tejido circundante y, a veces, metstasis). La metstasis es la propagacin a distancia, por va fundamentalmente linftica o sangunea, de las clulas originarias del cncer, y el crecimiento de nuevos tumores en los lugares de destino de dicha metstasis. Estas propiedades diferencian a los tumores malignos de los benignos, que son limitados y no invaden ni producen metstasis. Las clulas normales al sentir el contacto con las clulas vecinas inhiben su divisin, pero las clulas malignas no tienen este freno. La mayora de los cnceres forman tumores pero algunos no (como la leucemia). El cncer puede afectar a todas las edades, incluso a fetos, pero el riesgo de sufrir los ms comunes se incrementa con la edad. Etiologa del cncer: El cncer es causado por anormalidades en el material gentico de las clulas. Estas anormalidades pueden ser provocadas por agentes carcingenos (exgenas), como la radiacin (ionizante, ultravioleta, etc), de productos qumicos (procedentes de la industria, del humo del tabaco y de la contaminacin en general, etc) o de agentes infecciosos. Otras anormalidades genticas cancergenas son adquiridas durante la replicacin normal del ADN, al no corregirse los errores que se producen durante la misma, o bien son heredadas y, por consiguiente, se presentan en todas las clulas desde el nacimiento (causando una mayor probabilidad de desencadenar la enfermedad). Existen complejas interacciones entre el material gentico y los carcingenos, un motivo por el que algunos individuos desarrollan cncer despus de la exposicin a carcingenos y otros no. Nuevos aspectos de la gentica del cncer, como la metilacin del ADN y los microARNs, estn siendo estudiados como importantes factores a tener en cuenta por su implicacin. Se habla mucho sobre las causas del cncer sin poder an establecer cules son estas y es que en realidad no existe una sola y nica causa sino un grupo de factores cuyos efectos actan sinrgicamente y predisponen al cncer en el hombre. As, en forma muy general se plantean dos factores fundamentales: las exgenas, responsables del 80-90 % de todas las neoplasias, y los endgenas responsables del 10-20 % restante. Estas ltimas, a diferencia de las primeras, ocurren en el organismo independiente a cualquier

incidencia externa. Pueden ser mutaciones espontneas debidas a fallas en procesos biolgicos endgenos naturales que ocurren en la clula como es el caso de la reparacin del ADN que realizan enzimas correctoras especficas o; por herencia, es decir, transmisin de mutaciones en genes recesivos llamados supresores que se trasmiten de generacin en generacin en las llamadas familias con sndrome de cncer. Las anormalidades genticas encontradas en las clulas cancerosas pueden ser de tipo mutacin puntual, translocacin, amplificacin, delecin, y ganancia/prdida de todo un cromosoma. Existen genes que son ms susceptibles a sufrir mutaciones que desencadenen cncer. Esos genes, cuando estn en su estado normal, se llaman protooncogenes, y cuando estn mutados se llaman oncogenes. Lo que esos genes codifican suelen ser receptores de factores de crecimiento, de manera que la mutacin gentica hace que los receptores producidos estn permanentemente activados, o bien codifican los factores de crecimiento en s, y la mutacin puede hacer que se produzcan factores de crecimiento en exceso y sin control. El hombre como ser biosicosocial se mantiene en estrecha relacin con el ambiente que lo rodea y este influye de varias formas en su salud. Los carcingenos (cualquier agente capaz de incrementar la incidencia de la malignidad neoplsica) son los factores principales de las causas exgenas o ambientales. Estos pueden ser como ya se refiri antes: Qumicos, fsicos, biolgicos e incluso sociales. Carcingenos qumicos: El uso cotidiano de medicamentos variados, aditivos alimenticios, cosmticos, pesticidas, productos industriales y del hogar; el tabaquismo activo o pasivo, la ingestin de bebidas alcohlicas, de estimulantes, la variada exposicin ocupacional y los tipos de alimentos que ingerimos o dejamos de ingerir en la dieta, son algunos de los factores a que voluntaria o involuntariamente, nos vemos a diario expuestos. Estos carcingenos qumicos pueden ser genotxicos, cuando causan un dao directo en el ADN, y no genotxicos cuando inducen proliferacin siendo el dao indirecto; y desde un punto de vista general se pueden clasificar como sintticos y/o naturales. Carcingenos fsicos: Los cnceres causados por agentes fsicos son en su mayora debidos a radiaciones genotxicas tanto ionizantes como no ionizantes. Las ltimas estn representadas bsicamente por las radiaciones

ultravioletas que como presentan bajo contenido energtico no Cncer puedende piel atravesar la materia viviente ni generar radicales libres, pero en cambio interacta con el ADN induciendo formacin de dmeros entre dos bases timinas vecinas e interfiriendo as con el proceso normal de replicacin. Las ionizantes (radiacin gamma, X, neutrones y partculas cargadas) poseen en cambio un elevado poder energtico y logran atravesar la materia viva ionizando a su paso tomos y generando radicales libres, en extremo nocivos para la clula. En cuanto a las radiaciones no genotxicas, correspondientes al espectro electromagntico con longitudes de onda correspondientes al infrarrojo, visible, entre otros; se conoce poco aunque se ha relacionado con la aparicin de leucemias y linfomas. Agentes biolgicos: Hace ms de cien aos atrs los investigadores comenzaron a considerar la posibilidad de que los tumores fueran causados por virus u otros agentes infecciosos. Hoy en da ya se sabe que los patgenos ms comunes causantes de cncer son los virus de ADN los cuales se propagan por invasin a la clula de un hospedero usando la sntesis celular y la maquinaria de produccin proteica para producir copias virales. El virus ms estudiado de todos los cancergenos es el Papiloma virus humano (PVH), un pequeo virus que causa tumores epiteliales. Hasta el momento se han descubierto ms de 75 PVH la mayora asociados a lesiones benignas aunque algunas a cnceres, en particular a cervicales, estos son los tipos 16 y 18 (9). Otro virus, tambin trasmitido sexualmente, es el de la hepatitis B, el cual se considera un factor etiolgico para el cncer de hgado (alrededor del 80 % de todas las neoplasias de hgado en el mbito mundial). El virus de Epstein- Barr que produce mononucleosis es responsable tambin de 50 % de los cnceres de faringe, 30 % de enfermedades Hodgkin y 10 % de linfomas no Hodgkin, adems de algunos cnceres gstricos. El virus de la inmunodeficiencia adquirida, causante del SIDA, puede producir sarcoma de Kaposi y algunos linfomas relacionados con la proliferacin de linfocitos . Otra clase de virus, los retrovirus, tambin estn muy relacionados con el desarrollo del cncer. En 1911 Peyton Rous demostr que el retrovirus del sarcoma de Rous provoca la formacin de sarcomas en pollos. De esta forma un estudio que comenz con el anlisis de retrovirus de vertebrados acab permitiendo el descubrimiento de genes virales que poseen sus homlogos en clulas humanas y que participan en la induccin de tumores. En algn momento de su historia infecciosa el genoma de

estos virus debe haberse recombinado con una secuencia celular, que puede ser reintroducida en el genoma celular formando parte de un provirus. Normalmente la estructura del oncogen viral (v-oncogen) est modificada respecto a su contraparte celular (c-oncogen). Otros retrovirus importantes, son el de sarcoma de simios, sarcoma felino, sarcoma murino de Harvey, sarcoma murino de Kirsten, entre otros. En cuanto a los cnceres causados por bacterias solo se conoce el cncer estomacal producido por la Helicobacter pilori, que adems de provocar esta enfermedad produce lcera gstrica. Eventos secundarios a la infeccin de cualquiera de estos patgenos, como la accin del sistema inmune hace que no en todos los infestados aparezcan neoplasias. La accin conjunta de la mayora de estos factores etiolgicos del cncer sobre el ADN provoca mutaciones, si estos ocurren en genes implicados en la proliferacin y crecimiento celular se ponen de manifiesto una serie de manifestaciones que traen como resultado el desarrollo de una neoplasia. Trminos relacionados al cncer. Neoplasia. El trmino neoplasia: significa de acuerdo a sus races etimolgicas: "tejido de nueva formacin". "Neoplasia" se aplica generalmente a los tumores malignos (proliferaciones de clulas con comportamiento rebelde); aunque puede emplearse de manera genrica, donde significar simplemente "tumor". Las enfermedades o lesiones cuyos nombres tienen el sufijo oma indican neoplasia, como por ejemplo adenoma, osteosarcoma, leiomioma, lipoma, melanoma, etc. Existen, en resumen, dos tipos de neoplasias, que son las benignas o tumores benignos y las malignas o cncer (neoplasias rebeldes) Tumor. Inicialmente, el trmino tumor, se aplic a la tumefaccin, hinchazn, "bulto" o aumento localizado de tamao, en un rgano o tejido. Incluso, el concepto an se aplica cuando se dice que los cuatro signos cardinales de la inflamacin son "tumor, dolor, calor y rubor". Con el transcurso del tiempo se olvid el sentido no neoplsico de la palabra tumor y en la actualidad el trmino es el equivalente o sinnimo de neoplasia; y por lo tanto, se dice que hay tumores benignos y tumores malignos.

Oncologa. El trmino oncologa proviene del griego "onkos", tumor. Es la parte de la medicina que estudia los tumores o neoplasias, sobre todo malignos Carcinognesis. La carcinognesis es la formacin del cncer por medio de los carcingenos o de enfermedades genticas. APOPTOSIS Definicin La apotosis, muerte celular programada o suicidio celular, define un proceso que consiste en la activacin de una maquinaria molecular letal que produce la autodestruccin de la clula, muy selectiva y altamente regulada. Este trmino aparece por primera vez en la literatura biomdica en 1972 ( Kerr y col. 1972 ) y hace alusin a la analoga encontrada con la cada de las hojas de los rboles en otoo ( del griego apo: lejos de y ptosis: caer ). Es un proceso cotidiano en los organismos multicelulares y tiene un papel clave tanto en el desarrollo del organismo as como en el mantenimiento de la poblacin celular en los diferentes rganos y tejidos y en la propia funcin celular. Caractersticas e importancia en los seres vivos La apoptosis es un mecanismo que permite mantener la cantidad normal de clulas en los tejidos y elimina clulas transformadas, infectadas o afectada de deleciones superfluas de manera muy selectiva en varios sistemas biolgicos. La apoptosis est involucrada en la embriognesis, metamorfosis, atrofia de tejidos endocrino-dependientes, recambio de tejidos normales y en una amplia variedad de condiciones patolgicas (Ellis y col. 1991). El nmero de clulas de un tipo determinado depende de un equilibrio entre su formacin y su muerte; por ejemplo las del tubo digestivo o las del endometrio experimentan un ciclo vital que finaliza con su desaparicin por apoptosis. Una activacin anmala de este proceso provocara un descenso del nmero de clulas, como ocurre en ciertas enfermedades degenerativas del sistema nervioso o por el contrario una inhibicin de ste conducira a un incremento en el nmero de clulas, circunstancias que juegan un papel muy importante en el desarrollo del cncer.

Decimos que la apoptosis tiene un rol clave durante el desarrollo del organismo, ya que por ejemplo durante el desarrollo del sistema nervioso y de los rganos, se producen un nmero de clulas superior al que va a formar el sistema ya maduro; por otra parte, la eliminacin de ciertos vestigios evolutivos como la membrana interdigital en el embrin humano tienen lugar por apoptosis; otro ejemplo lo constituye la reabsorcin de la cola en los renacuajos durante su metamorfosis y esto tambin se da a travs de la apoptosis. As mismo, la apoptosis elimina clulas con graves daos al DNA, protegiendo as al organismo de la persistencia de clulas con mutaciones potencialmente transformantes. La muerte celular programada se caracteriza por rasgos morfolgicos especficos y por la actividad de una nucleasa especfica que corta al DNA en sitios internucleosmicos, originando la aparicin de fragmentos de DNA de aproximadamente 180 o mltiplos de 180 pares de bases (Steller 1995) (Nagata 1996). La apoptosis es un proceso que requiere de energa, caracterizada por alteraciones morfolgicas, condensacin nuclear, formacin de ampollas blebs en la membrana citoplasmtica. Es obvio que la integridad de un organismo pluricelular, se beneficia con el suicidio selectivo de aquellas clulas con genomas daados. Por consiguiente, la apoptosis debe representar un importante mecanismo de proteccin contra el cncer; debido a esto no debe de sorprender el hecho de que varios oncogenes y antioncogenes tengan impacto sobre el ndice de apoptosis. Sin embargo, el dao al DNA y la expresin inadecuada de oncogenes no seran los nicos estmulos que activan a la apoptosis; ya que como se ha mencionado antes ste proceso juega un rol crtico en muchos eventos celulares como por ejemplo en la embriognesis normal. En otros casos como en las clulas del cristalino del ojo o en las clulas de la piel, la clula apopttica tiene an una funcin importante que realizar. As, los queratinocitos de la piel son clulas epiteliales muertas por apoptosis que forman una capa protectora de la piel . Asimismo, el cristalino est formado por clulas apoptsicas que en este proceso han sustituido sus propias protenas por cristalina. Un caso aparte lo constituye el linfocito T. Estas clulas se forman en la mdula sea y maduran en el timo. Este proceso implica la eliminacin por apoptosis de un nmero

elevado de linfocitos que pueden llegar a atacar las otras clulas del organismo. De otro lado, el descubrimiento reciente de que de que algunos factores de supervivencia celular, de un modo distinto al de los factores de proliferacin, est comenzando a indicar que la apoptosis sera un proceso capaz de ser acelerado o inhibido por hormonas de manera teraputicamente significativa (Thompsom 1995). La muerte por apoptosis se distingue de la muerte por necrosis en que la necrosis ocurre en una situacin patolgica y tiene como consecuencia una reaccin inflamatoria en el tejido afectado. Normalmente la necrosis ocurre en muchas clulas que se encuentran prximas entre s, tiene lugar a lo largo de das y el volumen celular aumenta antes de su ruptura. En cambio la apoptosis puede ocurrir tanto en condiciones fisiolgicas como patolgicas (desarrollo embriolgico, recambio celular, incremento de radicales libres, etc.) y no tiene como consecuencia la reaccin inflamatoria del tejido adyacente. La apoptosis puede ocurrir en una nica clula aislada y adems suele tener lugar en periodos de horas y contrariamente a la necrosis, una clula apopttica disminuye su tamao hasta un tercio de su volumen inicial (Corcoran y col. 1994). TABLA.- Diferencias entre los cambios morfolgicos que ocurren

en la necrosis celular y la apoptosis celular

NECROSIS Clula hinchada Orgnulos daados Cromatina alterada Clula lisada Orgnulos destruidos Cromatina destruida Contenido celular liberado Inflamacin Fagocitosis APOPTOSIS Clula encogida Orgnulos no daados Cromatina marginada Cuerpos apoptticos Orgnulos intactos Cromatina fragmentada Contenido celular retenido Fagocitosis No inflamacin