UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLAREAL

FOPCA EPIA

Asignatura

Microbiologa (Practica)

Tema Bacterias

Observacin Microscpica de

Docente

Ing. Nilda Quispe

Alumnas

Jimnez Herrera Edith Valero Orihuela Mariela S.

Seccin

Horario

10am-12 pm

Miraflores, 1 de octubre del 2011.

DETERMINACION DE ENTEROCOCOS I.- OBJETIVOS - Aprender a determinar el grupo de enterococos presentes en los alimentos. II.- FUNDAMENTO Se basa en determinar la cantidad de microorganismos en un alimento a travs del numero de enterococos como indicador de calidad sanitaria. III.- MARCO TEORICO Los enterococos son miembros del genero streptococos que son cocos gran (+) de cadenas largas o cortas y se diferencian de los dems cocos en que son catalasa negativos. La temperatura de crecimiento esta dada entre 0c a 50c, pero en la naturaleza estos m.o son bsicamente mesofilos y tambin muchas cepas son psicrofilas facultativas. Los intervalos de crecimiento en pH son de mayor. Enterococcus causa importantes infecciones clnicas, incluyendo infeccin urinaria, bacteremia, endocarditis, diverticulitis y meningitis. Las cepas sensibles de estas bacterias pueden tratarse con ampicilina y vancomicina.3 Desde un punto de vista mdico, la caracterstica ms importante de este gnero es su alto nivel de resistencia antibitica. Algunos enterococos son intrnsecamente resistentes a los antibiticos basados en -lactam (algunas penicilinas y todas las cefalosporinas) y tambin a muchos aminoglicsidos.4 Desde 1980, han aparecido cepas particularmente virulentas de Enterococcus resistentes a la vancomicina (VRE) en infecciones hospitalarias de pacientes hospitalizados, especialmente en EE.UU. Otros pases desarrollados como UK han parado la epidemia, y en 2005, Singapur logr detener una epidemia de VRE. VRE puede tratarse con quinupristina/dalfopristina (Synercid) con respuestas favorables del 70 %.5 La meninguitis por enterococos es una complicacin rara en neurociruga. Suelen requerir tratamiento intravenoso de vancomicina. La vancomicina intratecal es usada a menudo y hay un debate sobre si tiene impacto en el sistema nervioso. La extracccin de cualquier dispositivo neurolgico es una parte crucial del tratamiento de estas infecciones. Enterococcus es responsable de un sinnmero de procesos spticos siendo importante que su papel etiolgico sea siempre evaluado con detencin (es un patgeno difcil de estudiar en el laboratorio de manera que si no tiene importancia clnica, se efecta innecesariamente una multiplicidad de tests). Constituye una de las principales causas de infecciones del tracto urinario -cerca de 10% las ITU nosocomiales- especialmente en pacientes con malformaciones estructurales y pacientes sometidos a manipulacin genitourinaria. Tambin es copatgeno importante de infecciones intraabdominales y plvicas, procesos que son generalmente de etiologa polimicrobiana, en estos casos debe cuestionarse si Enterococcus est

desempeando un rol patgeno porque en ocasiones basta con tratar las otras especies excluyendo Enterococcus, para que la infeccin cure. Es importante tener en mente que el gnero Enterococcus surgi como consecuencia de la presin selectiva ejercida por los antimicrobianos ya que es intrnsecamente ms resistente a los antimicrobianos que otras especies bacterianas. Si esta presin selectiva es muy importante, su repercusin clnica se tornar ms prevalente. La caracterizacin preliminar de enterococo es relativamente fcil, con pocas pruebas se consigue llegar al diagnstico de gnero Enterococcus. Es muy importante la diferenciacin con algunas especies intrnsecamente resistentes a vancomicina y que pueden ser confundidas con enterococo provocando medidas de control de infecciones hospitalarias precipitadas o innecesarias. El laboratorio tiene que estar atento para diferenciar especialmente de Leuconostoc y Pediococcus. La identificacin de especies dentro del gnero Enterococcus es un poco ms trabajosa para hacerla cotidianamente en el laboratorio; es sin embargo, muy importante porque nuevos antimicrobianos como quinupristina/dalfopristina no tienen actividad anti Enterococcus faecalis. Algunas especies sin importancia epidemiolgica son intrnsicamente resistentes a vancomicina. Los mtodos automatizados tienen baja seguridad para discriminar entre especies no E. faecalis, pudindose confundir Enterococcus faecium con Enterococcus gallinarum o Enterococcus casseliflavus, estos dos ltimos, intrnsicamente resistentes a vancomicina pero sin importancia epidemiolgica alguna. Las limitaciones son tanto de softword, como en algunas pruebas de motilidad que los equipos automatizados no pueden hacer. El sistema API tambin presenta problemas, es muy costoso y la realizacin manual de todas las pruebas necesarias es muy complejo, preconizamos que se trabaje con las formas automatizadas pero deben practicarse algunas pruebas adicionales manualmente. Casi el 100% de las muestras de E. faecalis son sensibles a ampicilina, hemos descrito resistencia en Argentina en forma espordica. En oposicin, E. faecium tiene altas tasas de resistencia a ampicilina, pero con bajos niveles de CIM que an permiten el uso de ampicilina en altas dosis para su tratamiento bajo un efecto de sinergismo. Es importante la realizacin de una CIM porque si bien Enterococcus es resistente en el test de difusin (Kirby Bauer) o en los equipos automatizados, la determinacin de su CIM apoya el que se pueda utilizar ampicilina en altas dosis. La resistencia normalmente se debe a alteracin del sitio de accin con lo cual se alcanza resistencia cruzada a todos los -lactmicos, inclusive los carbapenmicos. En algunos casos la resistencia puede ser debida a produccin de -lactamasas, en estos casos otros -lactmicos ms estables que ampicilina pueden ser activos, condicin infrecuente. Para conseguir efectos bactericida contra enterococos es necesario la combinacin de antimicrobianos, uno que acte sobre la pared, (por ejemplo un -lactmico o un glicopptido), ms un aminoglucsido; con esta combinacin se consigue efecto singico y bactericida siempre que la bacteria sea sensible a ambos anti-microbianos. Los enterococos tienen un menor grado de resistencia intrnseca a aminoglucsidos lo que no impide sus efectos sinrgicos. Es recomendable verificar si existe un alto grado de resistencia, la que depende de una mutacin gentica que eleva la produccin de enzima inactivadora, o si se debe a alteracin del sitio activo.

Si existe un alto grado de resistencia no se alcanza efectos bactericidas. A diferencia de otros patgenos, se necesita de tests especiales para la pesquisa de resistencia de alto grado en Enterococcus. El laboratorio slo debe hacer test de susceptibilidad a gentamicina que es el aminoglucsido ms potente. Si la cepa es resistente a gentamicina, normalmente ser resistente a todos los otros.