Prcticas de Anlisis Instrumental

Prctica 1 ANALISIS CUANTITATIVO DE UNA MEZCLA DE PERMANGANATO Y DICROMATO POTSICOS POR ESPECTROFOTOMETRIA UV-VISIBLE.
Objeto de la prctica Adquirir destreza en la realizacin de medidas experimentales de absorbancia y su aplicacin a la determinacin de la concentracin de una mezcla de permanganato y dicromato potsicos. Fundamento Cuando en una disolucin hay varias sustancias que absorben radiacin, es posible, en muchos casos, llevar a cabo su determinacin sin necesidad de separar previamente los distintos componentes. Cuando se trata de dos componentes, M y N, cuyos espectros de absorcin estn superpuestos a todas las longitudes de onda, la forma de proceder es medir las absorbancias A1 y A2 a las longitudes de onda 1 y 2 respectivamente, y planteando las ecuaciones siguientes: A1 = M1 b CM + N1 b CN (a 1) A2 = M2 b CM + N2 b CN (a 2)

M+N

N M

Esto es posible porque la ley de Beer establece que la absorbancia es una propiedad aditiva, de forma que la absorbancia total de una disolucin a una

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longitud de onda dada es igual a la suma de las absorbancias de los componentes individuales presentes. En las ecuaciones anteriores, b representa el camino ptico y M1, M2, N1 y N2 las absortividades molares de M y N a las longitudes de onda 1 y 2, que deben ser determinadas previamente a partir de disoluciones patrn, o mejor, a partir de las pendientes de sus representaciones de la ley de Beer. Reactivos Disolucin patrn de KMnO4 0.003 M Disolucin patrn de K2Cr2O7 0.015 M Disolucin de H2SO4 3.75 M Material y aparatos Matraces aforados de 50 mL Pipetas de varios volmenes Espectrofotmetro provisto de cubetas de 1 cm de paso ptico. Tcnica experimental a) Determinacin de las absortividades molares el permanganato y del dicromato a las longitudes de onda de medida

Poner en matraces aforados de 50 mL los siguientes volmenes de la disolucin de permanganato potsico: 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0 y 10.0 mL. A continuacin aadir a cada uno de ellos 20 mL de la disolucin de cido sulfrico y enrasar con agua desionizada. Medir las absorbancias de las disoluciones preparadas anteriormente a 440 nm y a 545 nm, frente a un blanco preparado con 20 ml de disolucin de H2SO4 y dilucin a 50 mL. Repetir el procedimiento anterior para el dicromato potsico.
b) Anlisis cuantitativo de una mezcla problema de permanganato y dicromato

Transferir 5.0 mL de la disolucin problema a un matraz de 50.0 mL, aadir 20 mL de cido sulfrico 3.75 M y enrasar con agua desionizada. Medir las absorbancias a 440nm y a 545 nm frente al

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mismo blanco que en el caso anterior. Calcular las concentraciones de permanganato y dicromato en la disolucin problema.
Resultados

KMnO4
Volumen KMnO4 A A Volumen KMnO4 A A mL M 440 nm 545 nm mL M 440 nm 545 nm 0.5 1.0 2.0 3.0 Ecuaciones de las rectas de regresin: A 440 nm: A 545 nm: 4.0 5.0 7.0 10.0

Absrtividades del KMnO4: a 440 nm: ...................................... L mol-1 cm-1 a 545 nm: ....................................... L mol-1 cm-1

K2Cr2O74
A A Volumen K2Cr2O7 A A Volumen K2Cr2O7 M 440 nm 545 nm mL M 440 nm 545 nm mL 0.5 1.0 2.0 3.0 Ecuaciones de las rectas de regresin: A 440 nm: 4.0 5.0 7.0 10.0

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A 545 nm:

Absrtividades del K2Cr2O7: a 440 nm:.........................................L mol-1 cm-1 a 545 nm:......................................... L mol-1 cm-1 Mezcla problema Absorbancia a 440 nm: Absorbancia a 545 nm:

Clculos

Concentracin de KMnO4 en la mezcla: Concentracin de K2Cr2O7 en la mezcla:

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Prctica 2 DETERMINACION DE HIERRO EN VINOS ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA

Objeto de la prctica Llevar a cabo medidas de absorbancia atmica para la determinacin de elementos a nivel de trazas en muestras reales utilizando el mtodo de adicin estndar El hierro en los vinos El contenido de hierro en los vinos suele oscilar entre 4 y 20 mg por litro, con contenidos medios de 6 a 12 mg/L. Su origen puede ser diverso. Una cantidad que apenas sobrepase los 3 4 mg por litro constituye el hierro normal o hierro biolgico absorbido por las races de la via. Otra parte procede de la tierra o de los polvos terrosos que puedan manchar la superficie de las uvas. Adems, ciertas cantidades pueden proceder de las herramientas metlicas utilizadas en su elaboracin (trituradoras de uvas, prensas de acero, herramientas de vendimia, etc.) o en su almacenamiento (tornillos de las compuertas de los barriles, etc.) Las sales de hierro se encuentran en el vino en los estados de oxidacin (II) y (III). Las sales ferrosas son totalmente solubles y dejan el vino lmpido, mientras que ciertas sales frricas (que pueden originarse por oxidacin de las sales ferrosas por el oxgeno atmosfrico) son insolubles o coloreadas. Este es el caso del fosfato frrico, sal blanquecina origen de la "quiebra blanca". Por otra parte, las combinaciones del hierro (III) con los poli-fenoles, coloreados de azul oscuro, son la causa de la "quiebra azul". Los vinos blancos estn ms sujetos a la primera, y, por el contrario, los vinos tintos, ricos en taninos, dejan un poso azulado o ennegrecido: "quiebra negra". Una concentracin total de hierro del orden de los 10 mg/litro indica riesgo de quiebras frricas, si bien, este valor lmite vara mucho en funcin de la composicin del vino. .

POR

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Reactivos FeSO4.(NH4)2.SO4.6 H2O (Sal de Mohr) slido Material y aparatos Matraces aforados de 50 mL Pipetas de varios volmenes Espectrofotmetro de absorcin atmica con llama

Tcnica experimental En cinco matraces aforados de 50 mL se ponen 10 mL de vino (o el volumen adecuado al contenido de hierro). Aadir a continuacin a cada uno de ellos, 0, 5, 10, 15 y 20 mL de una disolucin patrn de hierro conteniendo 10 p.p.m. de Fe. (Esta disolucin se obtendr por dilucin de otra que contenga 500 p.p.m. de Fe, preparada a partir de sal de Mohr ). Seguidamente se aade una gotita de n-octanol a cada matraz, se enrasan con agua desionizada y se mide la absorbancia atmica del hierro. Resultados Fe aadido mL 0 5 10 15 20 p.p.m. A

Ecuacin de la recta de regresin: Concentracin de hierro en la muestra de vino (mg/L)

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Prctica 3 DETERMINACION ESPECTROFLUORIMETRICA QUININA EN AGUA TONICA

Objeto de la prctica El objetivo de la prctica es la determinacin del contenido de quinina en una muestra de agua tnica comercial, para lo cual, previamente se registran los espectros de excitacin y emisin fluorescentes de la quinina en medio acuoso cido, tras lo cual se obtiene la curva de calibrado correspondiente, procediendo finalmente a la determinacin propuesta. Caractersticas fluorimtricas de la quinina La quinina es un compuesto que presenta una intensa fluorescencia en medio cido diluido, con longitudes de onda de mxima excitacin a 250 y350 nm y una emisin fluorescente mxima a 450 nm, fcilmente apreciables para concentraciones del orden de 2 p.p.m.

DE

Sin embargo, pueden apreciarse otros picos debido a peculiaridades de la red del monocromador y a efectos de dispersin Rayleigh, Tyndall y Raman. Reactivos Disolucin stock de quinina conteniendo 100.0 g mL-1 (p.p.m.), preparada disolviendo 100.0 mg de quinina (o 120.7 mg de sulfato de

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quinina di-hidratado) en 50 mL de H2SO4 1 M, diluyendo seguidamente con agua des-ionizada a 1 L en matraz aforado. Disolucin 0.05 M de H2SO4 . Disolucin-madre o de trabajo de quinina, de 10.0 g mL-1, preparada recientemente a partir de la disolucin concentrada, por dilucin con H2SO4 0.05 M Material y aparatos Matraces aforados de 25.0, 50.0, 100.0, 250.0 y 1000.0 mL de capacidad. Pipetas de varios volmenes Espectrofluormetro con cubeta de cuarzo de 1 cm de paso ptico. Tcnica experimental a) Preparacin de la curva de calibrado

Preparar una serie de disoluciones patrn de quinina a partir de la disolucin stock de 100.0 p.p.m., haciendo diluciones secuenciales de orden 1:10 o similar (cada vez) con H2SO4 0.05 M. De este modo se obtendrn concentraciones de: 10.0, 5.00, 2.00, 1.50, 1.00, 0.800, 0.500, 0.200, 0.100, 0.0100 y 0.00100 g mL-1. Efectuar diluciones hasta que la disolucin ms diluida proporcione una seal de fluorescencia similar a la del blanco (H2SO4 0.05 M). Registrar los espectros del excitacin y emisin y construir la curva de calibrado.
Sol. de partida (p.p.m.) 100.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 5.00 1.00 1.00 0.100 Vol.pipeta (mL) 25.00 25.00 20.00 15.00 10.00 4.00 10.00 10.00 5.00 5.00 Vol. matraz (mL) 250.0 50.0 100.0 100.0 100.0 50.0 100.0 50.0 50.0 50.0 Sol. preparada (p.p.m.) 10.0 5.00 2.00 1..50 1.00 0.80 0.50 0.200 0.100 0.0100

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b) Determinacin del contenido de quinina en muestras desconocidas.

Desgasificar el contenido de una botella o una lata de agua tnica comercial mediante ultrasonidos (5 minutos aproximadamente) y hacer las diluciones correspondientes con H2SO4 0.05 M para que la intensidad de la emisin fluorescente se encuentre en la zona lineal del calibrado. (Normalmente esto se consigue con una dilucin global de 1 a 50, que habra que efectuar en dos etapas, si bien, por economa de tiempo puede hacerse en una sola, pipeteando 5.00 mL y diluyendo a 250.0 mL). Medir la intensidad de fluorescencia y calcular el contenido de quinina en la muestra original.
Resultados de excitacin: de emisin: Quinina g mL-1 If Quinina g mL-1 If

Ecuacin de la recta de regresin:

Intensidad de la fluorescencia emitida por la disolucin diluida de la tnica:

Concentracin de quinina en la muestra de agua tnica comercial:

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Prctica 4 POTENCIOMETRIA CON ELECTRODOS SELECTIVOS: DETERMINACION DE FLUORURO EN AGUAS DE CONSUMO

Objeto de la prctica Llevar a cabo medidas de potenciales redox con un electrodo selectivo de iones fluoruro para determinar la concentracin de este elemento en aguas de consumo. El flor en las aguas de consumo El flor es considerado como un oligoelemento esencial para la formacin de dientes y huesos, pero es txico en exceso. En un hombre adulto hay del orden de 2.5 g de flor. Se considera que dosis diarias de hasta 5 mg de flor pueden ser necesarias para sobrevivir, mostrndose deficiencias cuando la ingestin es inferior a 2 mg/da. Los efectos txicos se presentan en dosis de 10-20 mg/da y efectos letales se manifiestan cuando la ingestin es superior a 200 mg diarios. Desde hace tiempo se conoce la necesidad de controlar el contenido de flor en las aguas de consumo humano, por ser sta la fuente de mayor aporte de este elemento. La Organizacin Mundial de la Salud recomienda consumir aguas con contenido de flor entre 1 y 1.5 mg/L. Un aporte insuficiente tiene mucha incidencia sobre las caries dentales, e ingestas superiores provocan fluorosis, alteraciones del tiroides, retrasos en el crecimiento y otras enfermedades seas. Caractersticas del mtodo analtico El mtodo analtico utilizado para la determinacin de fluoruro en aguas es la medida potenciomtrica con un electrodo selectivo de fluoruro. Se trata de un electrodo de membrana homognea compuesto por un monocristal de LaF3 que contiene pequeas cantidades de Eu(II), con objeto de crear vacantes de fluoruro que permitan la conduccin inica de iones F- a travs del cristal. En su interior contiene una disolucin de NaF 0.1 M y NaCl 0.1 M, as como un electrodo de referencia interno de Ag/AgCl. La medida del potencial se realiza mediante un montaje potenciomtrico en el que la clula electroqumica est constituida por el electrodo selectivo de fluoruro, que acta como electrodo de medida y un electrodo de referencia

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externo (Ag/AgCl) que posibilita la medida de la diferencia de potencial que se establece entre ambos electrodos.
E lec tr o d o d e r e fe r e n c i a i n t e r n o Ag/AgC l

E, m V

E le c t ro d o s e le c t i v o d e F -

E le c t r o d o d e r e f e r e n c ia ex terno

N a F 0 .1 M y N a C l 0 .1 M

M o n c r is t a l d e L a F 3

El potencial medido responde a la expresin: E(V)=E(Ag/AgCl)ext E(Ag/AgCl)int Ea Ej 0.059 log [F-] donde Ea es el potencial de asimetra de la membrana, Ej es el potencial de unin lquida y [F-] es la actividad del in fluoruro en la disolucin problema, si bien, no es necesario conocer el valor de las constantes que implica la cadena de potenciales que mide el potencimetro, siempre que el electrodo se calibre con disoluciones de concentracin conocida. En estas condiciones existe una relacin lineal entre el potencial medido y el valor logartmica de la concentracin de fluoruro. Esto se conoce como respuesta nernstiana, por cumplirse la ecuacin de Nernst: E(mV)=constante 59 log [F-] Reactivos Disolucin patrn de 1000 p.p.m. de fluoruro preparada por pesada de 0.2210 g de NaF y disolucin en 100 mL (Disolucin M) Disolucin de TISAB (Total Ionic Strength Adjustement Buffer) que contiene por litro: 15 mL de cido actico glacial; 58.5 g de NaCl; 102.6 g de acetato sdico trihidratado y 0.3 g de citrato sdico trihidratado, ajustando el pH con NaOH hasta el valor de 5.5.

Material y aparatos Matraces aforados de capacidad. 50.0, 100.0, 250.0, 500.0 y 1000.0 mL de

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Pipetas de varios volmenes Potencimetro provisto de un electrodo selectivo de fluoruro y el correspondiente electrodo de referencia. Tcnica experimental

a) Preparacin de la curva de calibrado

Tomar 5.00 mL de la disolucin M (1000 p.p.m.) y diluir a 500 mL (disolucin R1). De esta disolucin R1 se toman 0.2, 1, 2, 5, 10 y 20 mL y se diluyen a 100 mL. Por otra parte, se toman 10 mL de la disolucin M y se diluyen a 100 mL (disolucin R2). De esta disolucin se toman 5, 10, 15 y 20 mL y se diluyen a 100 mL. Poner en un vaso 50 mL de cada una de las disoluciones patrn de fluoruro y 5 mL de la disolucin de TISAB. Se introducen los electrodos, se agita suavemente y se mide el potencial.
b) Determinacin del contenido de quinina en muestras desconocidas.

Se opera de igual modo que en la construccin del calibrado, tomando 50 mL de agua y 5 mL de TISAB. Es frecuente realizar tres medidas con tres alcuotas de la muestra y obtener el valor medio.
Resultados N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 mL 0.2 (R1) 1 (R1) 2 (R1) 5 (R1) 10 (R1) 20 (R1) 5 (R2) 10 (R2) 15 (R2) 20 (R2) [F-], p.p.m. 0.02 0.1 0.2 0.5 1.0 2.0 5.0 10.0 15.0 20.0 log [F-] E, mV

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Ecuacin de calibracin:

Anlisis de las muestras: Muestra E(mV) log [F-] [F-], p.p.m.

Agua

Contenido (p.p.m.)

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Prctica 5 CROMATOGRAFIA FENOLES DE GASES: DETERMINACION DE

Objeto de la prctica Llevar a cabo una determinacin analtica por cromatografa de gases utilizando el mtodo de calibrado del patrn interno. Caractersticas de los fenoles Los fenoles son compuestos ampliamente distribuidos en la naturaleza en concentraciones a nivel de trazas. Se han identificado en un gran nmero de plantas y tambin se forman por ruptura de compuestos orgnicos naturales, como cidos hmicos o lignina. Sin embargo, la presencia de fenoles en el medio ambiente proviene sobre todo de las aguas residuales de un gran nmero de industrias: qumica, petroqumica, papelera, farmacutica, etc, hasta el punto de que los fenoles son ndices de la contaminacin orgnica. Uno de los mtodos ms ampliamente utilizados para la determinacin de fenoles es la cromatografa de gases con deteccin por ionizacin de llama o espectrometra de masas. Reactivos Disolucin madre que contiene, disueltos en metanol, los cuatro analitos: fenol, m-cresol, 2,4 dimetilfenol y -naftol. (Esta disolucin debe conservarse a 4C)

fenol

m-cresol

2,4 dimetil fenol

-naftol

Metanol, calidad HPLC

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Material y aparatos Matraces aforados de 10.0 y de 50.0 mL de capacidad. Pipetas de varios volmenes Cromatgrafo de gases, equipado con una columna capilar SPB-5 (poli (5%-difenil-95%-dimetil siloxano)) de 30 m de longitud, 0.25 mm de dimetro interno y 0.25 m de espesor y un detector de ionizacin de llama de hidrgeno. El gas portador es nitrgeno. La temperatura del detector es de 350 C y la del inyector de 250 C. Para la columna se trabaja con una rampa de temperaturas como la indicada en la figura.

El volumen de inyeccin de muestra es 1 L, en la modalidad split.

Tcnica experimental

A partir de una disolucin madre de los cuatro analitos en metanol se preparan cuatro disoluciones patrn de concentraciones del orden de 50, 100, 200 y 300 p.p.m. de fenol, m-cresol y 2,4-dimetilfenol y 150 p.p.m. de -naftol que se utilizar como patrn interno.Se registran los cromatogramas correspondientes y con los resultados de las alturas o de las reas de pico obtenidos se construyen las rectas de calibrado.

Disoluciones madre de fenoles: Fenol: 0.0509 g + metanol -> 50.0 mL => 1018 ppm m-cresol 0.0583 g + metanol -> 50.0 mL => 1166 ppm 2,4-dimetilfenol 0.0514 g + metanol -> 50.0 mL => 1028 ppm -naftol (p. interno) 0.1020 g + metanol -> 50.0 mL => 2040 ppm

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Patrones de calibrado: Patrn 1: 0.50 mL de cada analito + 0.75 mL de -naftol + metanol -> 10.0 mL (fenol=50.9 ppm; m-cresol=116.6 ppm; 2,4-dimetilfenol=102.8 ppm; -naftol=153.0 ppm). Patrn 2: 1.00 mL de cada analito + 0.75 mL de -naftol + metanol -> 10.0 mL (fenol=101.8 ppm; m-cresol=58.3 ppm; 2,4-dimetilfenol=51.4 ppm; -naftol=153.0 ppm). Patrn 3: 2.00 mL de cada analito + 0.75 mL de -naftol + metanol -> 10.0 mL (fenol=203.6 ppm; m-cresol=233.2 ppm; 2,4dimetilfenol=205.6 ppm; -naftol=153.0 ppm). Patrn 4: 3.00 mL de cada analito + 0.75 mL de -naftol + metanol -> 10.0 mL (fenol=305.4 ppm; m-cresol=349.8 ppm; 2,4dimetilfenol=308.4 ppm; -naftol=153.0 ppm). Resultados Patrn 1 fenol m-cresol 2,4-dimetilfenol -naftol (p.i.) Patrn 2 fenol m-cresol 2,4-dimetilfenol -naftol (p.i.) Concentracin (p.p.m.) 50.9 58.3 51.4 153.0 Concentracin (p.p.m.) 101.8 116.6 102.8 153.0 Area de pico
Area analito/area p. interno

Area de pico

Area analito/area p. interno

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Patrn 3 fenol m-cresol 2,4-dimetilfenol -naftol (p.i.) Patrn 4 fenol m-cresol 2,4-dimetilfenol -naftol (p.i.)

Concentracin (p.p.m.) 203.6 233.2 205.6 153.0 Concentracin (p.p.m.) 305.4 349.8 308.4 153.0

Area de pico

Area analito/area p. interno

Area de pico

Area analito/area p. interno

Recta de calibrado: Muestra desconocida fenol m-cresol 2,4-dimetilfenol -naftol (p.i.) 153.0 Concentracin (p.p.m.) Area de pico
Area analito/area p. interno