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De Colageno A Gelatina Ingenieria
De Colageno A Gelatina Ingenieria
en gelatina
POR
RESUMEN
Se ha realizado un estudio del proceso de transformacin de colgeno
en gelatina utilizando la viscosidad reducida como parmetro de control.
Se ha observado una gran influencia de la temperatura y del tiempo de
calentamiento sobre este proceso, as como sobre la temperatura de desnaturalizacin. Se han determinado igualmente las entalpia y entropa de
desnaturalizacin.
SUMMARY
A study of the process of conversin of collagen to gelatin has been
carried out using reduced viscosity as indicative parameter. We have
observed an important influence of temperature and heating time on that
process as well as on denaturalization temperature. Denaturalization entalphy and entrophy have been also determined.
INTRODUCCIN
El colgeno, el ms comn de los componentes orgnicos de los tejidos conectivos (tejidos relacionados fundamentalmente con aspectos es-
136
137
PARTE EXPERIMENTAL
138
M. C. Bonmat
Limarte
y G. Len
Albert
t-to
''lie
to C
donde t es el tiempo de flujo de la disolucin, to el tiempo de flujo del disolvente puro (ambos en segundos) y c la concentracin proteica (gramos
por mililitro).
No se aplicaron a las medidas realizadas las correcciones debidas a
energa cintica, flujos anmalos cercanos a la pared del viscosmetro,
tensin superficial y drenaje, por ser las condiciones experimentales las
adecuadas para minimizar hasta valores totalmente despreciables los
errores inherentes a estos efectos.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Puede apreciarse, en el examen de los resultados obtenidos (tabla I),
que el proceso de desnaturalizacin supone la disminucin de la viscosidad reducida desde un valor inicial constante con el tiempo (para nosotros el determinado a 30 G), que representa la totalidad de la protena
en estado nativo (es decir, cuando no se ha iniciado la desnaturalizacin)
hasta otro valor igualmente constante (el determinado a 41 C), que representa la totalidad de la protena en estado desnaturalizado (es decir, cuando se ha completado el proceso de desnaturalizacin). Los valores intermedios de la viscosidad reducida representan etapas o estados tambin
intermedios en el proceso de desnaturalizacin, en los que coexisten distintas proporciones de colgeno nativo y colgeno desnaturalizado.
TABLA I
VALORES MEDIOS A DISTINTOS TIEMPOS Y TEMPERATURAS DE LA VISCOSIDAD REDUCIDA DE UNA DISOLUCIN DE COLGENO DE TENDN
DE TERNERO (CONCENTRACIN 0,043% EN TAMPON CITRICO-CITRATO
DE p H 3,6)
Temperatura
30
36
37
38
39
41
1.483
1.410
1.207
552
230
70
1.482
1.154
1.485
1.071
923
265
77
68
768
205
69
69
685
149
68
67
90
1.482
1.484
1.483
1.482
942
498
89
67
68
829
386
72
69
68
786
307
68
68
69
715
248
69
67
68
Estudio
del colgeno
en gelatina
139
De acuerdo con lo anterior, hemos de admitir que el proceso de transformacin de colgeno en gelatina se encuentra muy influenciado por la
temperatura a la que el mismo tenga lugar (fig. 1). As, a temperaturas de
36 a 37 C, el trnsito se realiza de forma gradual e incompleta, llegndose
a un estado de equilibrio en el que coexisten colgeno nativo y colgeno
desnaturalizado en determinadas proporciones {54 % de gelatina y 46 %
de colgeno a 36 C, y 87 % de gelatina y 13 % de colgeno a 37 C). Por
el contrario, a temperaturas iguales o superiores a 38 C el trnsito es ya
muy rpido y prcticamente total.
Para caracterizar de una forma completa el proceso de desnaturalizacin de una protena es necesario conocer algunos parmetros caractersticos, como son temperatura, entalpia y entropa de desnaturalizacin.
Si se tiene en cuenta que la temperatura de desnaturalizacin de una
protena se define como aquella temperatura a la que se ha desnaturalizado el 50 % de las molculas ^lo que corresponde a un 50 % de variacin de la viscosidad reducida, es posible calcular la temperatura de
desnaturalizacin del colgeno representando el porcentaje de disminucin de la viscosidad reducida frente a la temperatura y determinando,
en la grfica as obtenida, la temperatura a la que se ha producido el 50 %
de disminucin (fig. 2).
Los resultados as obtenidos (tabla II) ponen de manifiesto la gran
dependencia entre el valor de la temperatura de desnaturalizacin y el
tiempo de calentamiento, observndose que al aumentar ste disminuye
la temperatura de desnaturalizacin. Se hace, pues, necesario, al hablar
'de una temperatura de desnaturalizacin, especificar la temperatura de
calentamiento a la que ha sido obtenida.
TABLA II
5
37,67
10
37,21
15
36,95
20
36,75
30
36,42
45
36,13
60
35,98
90
35,95
No obstante, puede tambin apreciarse (tabla II, fig. 3) que las diferencias entre las temperaturas de desnaturalizacin disminuyen al aumentar el tiempo de calentamiento, pudindose considerar, en el presente
caso, prcticamente constantes las obtenidas para tiempos de calentamieno iguales o superiores a 60 minutos.
red
ISOOr
I o
iiO
>
.o
1 lo
fOOO
S6X
soo .
37'C
^c
sJ^
0
1
10
1
6fi
tiempo
FIGURA
(minutos)
100--
75
50
Tiempos de calentamiento:
2 5
30
35
,0
temperatura
(C)
142
Esto sugiere la posibilidad de definir una temperatura de desnaturalizacin independiente de la velocidad de calentamiento por extrapolacin
a tiempo infinito de las obtenidas a distintas velocidades de calentamiento. Tal temperatura de desnaturalizacin independiente del tiempo es para
el caso del colgeno de tendn de ternero 'la de 35,95 C.
El segundo parmetro de inters que caracteriza el proceso de desnaturalizacin es la entalpia de desnaturalizacin (AHD) que viene a ser una
medida de la variacin energtica que se produce como consecuencia de
la ruptura de las interacciones por puente de hidrgeno.
Si admitimos que el proceso de desnaturalizacin tiene lugar en una
sola etapa (protena nativa 5=^ protena desnaturalizada), puede considerarse regido por la ecuacin de Van't Hoff:
log K = cte.
2,303 RT
TQ{C)
38
37
35--
36--
30
60
tiempo
90
(minutos)
144
M. C. Bonmat
TABLA
Limorte
y G. Len
Albert
III
PORCENTAJES DE PROTEINA EN ESTADO NATIVO, ?, Y PROTEINA EN ESTADO DESNATURALIZADO, PD, EXISTENTES DESPUS DE CALENTAMIENTO
A LOS TIEMPOS Y TEMPERATURAS QUE SE INDICAN
Temperatura
CC)
30
PN
PD
10
100
0
100
0
Tiempo
15
(minutos)
20
30
45
60
90
99,86 100
0,14
O
99,86
0,14
99,72
0,28
99,79
0,21
99,86
0,14
36
PN
PD
95,04
4,96
86,97
13,03
76,91
23,09
71,03
28,97
61,90
38,10
53,90
46,10
50,85
49,15
45,82
54,18
37
PN
PD
80,67
19,33
60,55
39,45
49,58
50,42
43,70
56,30
30,45
69,55
22,52
77,48
16,93
83,07
12,75
87,25
38
PN
PD
34,28
65,72
13,95
86,05
9,70
90,30
5,74
94,26
1,49
98,51
1,35
O
98,65 100
39
PN
11,47
88,53
0,66
99,34
0,07
O
99,93 100
O
100
41
PN
0,07
0
99,93 100
0
100
PD
PD
0,14
O
99,86 100
0,07
O
99,93 100
0
100
0,07
99,93
O
100
0,07 O
99,93 100
(minutos)
Pendiente
\HD(Kcal mot^)
5
72,871
10
77,562
15
71,641
20
77,158
(*) Valores calculados considerando un
lcula de colgeno de 300.000.
333,461
1,11
354,927
1,18
327,832
1,09
353,075
1,17
peso molecular medio para la mo-
Estudio
145
146
M. C. Boiimati
Limorte
y G. Len
Albert
BIBLIOGRAFA
1.
2.
Biophys.,
88 (1960), 373.
6 (1963), 635.
3.
4.
54 (1955), 486.
5.