ECOTOXICOLOGIA

DEFINICIONES:

Es la ciencia que estudia los efectos txicos de

sustancias qumicas y agentes fsicos sobre los
organismos vivos, especialmente sobre poblaciones
y comunidades dentro de ecosistemas definidos.
Incluye el estudio de los caminos de transferencia de
estos agentes y sus interacciones con el ambiente
(TRUHAUT, 1977; BUTLER, 1978)

Es la ciencia que investiga los efectos de sustancias

sobre los organismos. El peligro sobre las
poblaciones de animales y plantas puede ser
determinado mediante el uso de datos existentes,
tomados del ambiente (Ecotoxicologa retrospectiva)
o mediante el desarrollo de ensayos especficos
(Ecotoxicologa prospectiva) (RUDOLPH and BOJE,
1986)

Es la ciencia que se propone la la evaluacin, el

monitoreo y la prediccin del destino y efectos de
xenobiticos en el ambiente (MORIARTY, 1988)

Es la ciencia que intenta predecir los impactos de las

sustancias qumicas sobre los ecosistemas (LEVIN et
al., 1989)

Es el estudio de los efectos adversos o dainos

sobre los ecosistemas (WALKER et al., 1996)

ECOTOXICOLOGIA
OBJETIVOS:

Se propone la evaluacin, monitoreo y prediccin del

destino y los efectos de xenobiticos en el ambiente
(MORIARTY, 1988)

Est motivada por el deseo de mantener las

estructura y funcin naturales de los ecosistemas
INTEGRIDAD DEL ECOSISTEMA (HARRIS et al., 1990)

[Los ecosistemas son dinmicos; luego, puede resultar no

natural mantener el status quo]

La investigacin ecotoxicolgica resulta ser tambin

la investigacin del ecosistema (MATHES et al.,
1991)

Se propone proveer una base cientfica que permitir

que las sustancias sean evaluadas con una cantidad
razonable de esfuerzo y costo. La informacin
obtenida provee la base para evaluaciones que
permitan determinar qu sustancias podrn ser
liberadas al ambiente, cules de ellas sern
ambientalmente tolerables y n qu cantidades
(RMBKE and MOLTMANN, 1997)

ECOTOXICOLOGIA
Es el estudio de la relacin dosis o concentracin
/ efecto de txicos liberados al ambiente sobre los
sistemas biticos incluyendo los niveles de
organizacin inferiores y superiores al nivel de
organismos

DAO AL ECOSISTEMA
Involucra tanto la estructura como la funcin del

sistema
La funcin slo es posible si se considera la
estructura
La estructura y la funcin no pueden ser
consideradas aisladamente
Importancia de las relaciones trficas (transferencia
de energa y nutrientes)

TOXICOLOGIA Y
ECOTOXICOLOGIA

TOXICOLOGIA:
Introduccin directa del txico en el organismo
Focaliza su atencin sobre una nica especie,
el hombre
Dosis (DL, DE - tiempo)
ECOTOXICOLOGIA:
Introduccin del txico en el medio
Focaliza su atencin sobre toda la biota
(estructura y funcin del ecosistema)
Considera los procesos de:
Transformacin
Degradacin
Secuestracin
Redistribucin
Bioacumulacin
Concentracin (CL, CE - tiempo)

TOXICOLOGIA

ECOTOXICOLOGIA

COMPUESTO A SER ENSAYADO

ADMINISTRACION
A travs del ALIMENTO, INYECCION
INHALACION (DOSIS)

Introduccin en el MEDIO
DE ENSAYO
(CONCENTRACION)
PARTICION
TRANSFORMACION
DEGRADACION en el medio
CAPTURA por organismos

TRANSPORTE - METABOLISMO
dentro de organismos

REACCION CON EL SITIO SENSIBLE O BLANCO

en organismos

EFECTOS
expresados por el ORGANISMO

expresados por
ORGANISMOS
expresados por
POBLACION
expresados por
COMUNIDAD
expresados por
ECOSISTEMA

QUIMICA AMBIENTAL
La deteccin de una sustancia no es evidencia de sus
efectos potenciales. Su relevancia ecotoxicolgica es
sujeto de controversia.

Aporta evidencia cuantitativa de la presencia de la

sustancia potencialmente txica = ANALISIS DE
RESIDUOS
Estudia los mecanismos y modelos de transporte, el
destino final y el impacto de los xenobiticos en el
ambiente abitico (KORTE, 1980, 1987)

Centra su atencin en la sustancia qumica, su

ingreso, presencia (concentracin), transporte, destino
y procesos de transformacin en el medio abitico
(BOURDEAU et al., 1989)
Se centra ms directamente en el destino de los
productos qumicos desde el momento de su
aplicacin hasta que alcanzan a su receptor biolgico
(STEINEMANN et al., 1990)

ECOTOXICOLOGIA (en sentido tcnico):

Estudia los efectos (a nivel infraindividual, individual,

supraindividual),
mecanismos
de
accin
y
transporte,
metabolismo
y
mecanismos
de
detoxificacin de los xenobiticos sobre el medio
bitico

DEFINICIONES

ECOTOXICOLOGIA ACUATICA:
Es el estudio cuali y cuantitativo de los
efectos adversos de xenobiticos sobre los
ecosistemas acuticos

CONTAMINANTE:
Sustancia introducida en el ambiente como
resultado, por lo menos en forma parcial, de
la actividad humana y que produce efectos
adversos no deseados sobre los organismos
individuales y sobre el ecosistema

ECOTOXICOLOGIA

ECOTOXICOLOGIA PROSPECTIVA O PREDICTIVA:

Evaluacin de la toxicidad antes de la produccin y

comercializacin del producto

ECOTOXICOLOGIA RETROSPECTIVA:

OBJETIVOS DEL ENSAYO DE TOXICIDAD:

Evaluacin de la toxicidad ante la indicacin cierta o

sospecha de que el xenobitico produce efectos adversos
sobre el ecosistema

Investigacin bsica
Criterio de calidad de agua
Evaluacin del impacto ecotoxicolgico o del riesgo
Monitoreo de un cuerpo de agua

IMPACTO ECOTOXICOLOGICO:

Interaccin entre el agente txico y el sistema bitico que

conduce a la interrupcin de la funcin armnica del
sistema
Cadena causal: agente - receptor - efecto
Se manifiesta cuando se exceden las variaciones normales
de las funciones del sistema

DEFINICIONES
TOXICIDAD:

 Es la capacidad de una sustancia de causar algn

efecto nocivo sobre organismos vivos

Depende de:
Cantidad administrada o absorbida
Va de ingreso al organismo
Distribucin a lo largo del tiempo despus de su
administracin
Naturaleza y severidad del dao producido
Tiempo necesario para producir el efecto

RIESGO:
Es la frecuencia esperable de efectos adversos
como consecuencia de la exposicin al xenobitico

SEGURIDAD:
Se establece sobre la base del riesgo socialmente

aceptable,
considerando
las
frecuencias
esperadas de los efectos adversos y de su severidad
sobre el hombre y el ecosistema

Ecosistemas
Composicin de la comunidad

Cambios en la poblacin

Respuestas a nivel de organismo individual

Cambios fisiolgicos

Cambios bioqumicos

Contaminante

Aumento del tiempo de respuesta

Aumento de la dificultad de vinculacin a productos qumicos
especficos
Aumento de la importancia ecolgica

Relaciones de vinculacin entre respuestas de diferentes niveles de

organizacin

NIVELES DE ORGANIZACIONBIOLOGICOS
Caractersticas Estructurales y Funcionales

NIVEL

ESTRUCTURA

FUNCION

Descripcin de formas en ciertos

segmentos de tiempo

Evaluacin durante un
prolongado perodo de tiempo

CELULAS /
ORGANOS

Molculas, membranas, tejidos,

caminos metablicos, tipos de
clulas, tipo de rganos

Crecimiento, metabolismo,
conversin energtica,
detoxificacin

ORGANISMO

Especie, habitat, edad, estado, sexo Metabolismo, crecimiento y

desarrollo, reproduccin, salud,
mortalidad, concentracin en
tejidos, comportamiento

POBLACION

Presencia, nmero de individuos, Fertilidad, reproduccin,

densidad, dispersin, pirmide de eficiencia / produccin
edades, relacin de sexos

COMUNIDAD

Nmero y composicin de especies,

relaciones de dominancia

Regulacin, funcin

ECOSISTEMA

Ubicacin geogrfica, clima, tipo,

sucesin, equilibrio

Resiliencia, estabilidad.
Degradacin,, filtracin,
produccin primaria,
bioretencin

TOXICO

 Es el agente que puede producir un efecto

adverso
Dao referido a la estructura y funcin del
sistema
La introduccin puede ser:
deliberada (efluentes)
accidental (derrames)
El sitio de liberacin es:
no puntual
puntual
La cantidad liberada debe superar un nivel
umbral para que se manifieste el efecto
Se establece la relacin concentracin /
respuesta
Duracin de la exposicin
Ensayos de toxicidad

TIPOS DE TOXICOS
Segn su modo de accin:

 No selectivos
Selectivos
Dificultad
para
establecer
interpolaciones entre especies
Mecanismos:
Presencia o ausencia de sitios
receptores
Alteracin en los procesos de
distribucin del txico
Relaciones estructura / actividad (QSAR)

TIPOS DE CONTAMINANTES

IONES INORGANICOS

Metales pesados : no biodegradables

Aniones: nitratos

Fosfatos

COMPUESTOS ORGANICOS

Hidrocarburos
Alcanos, alquenos, alquinos
Aromticos
Bifenilos policlorados (PCBs)
Dibenzodioxinas policloradas (PCDDs)
Dibenzofuranos policlorados (PCDFs)
Bifenilos polibrominados (PBBs)
Plaguicidas
Detergentes
Clorofenoles

COMPUESTOS ORGANOMETALICOS

ISOTOPOS RADIOACTIVOS

GASES

Ozono
Clorofluorocarbonos (CFCs)
Oxidos de carbono: CO2
Oxidos de nitrgeno: NO, NO2, NOX
Oxidos de azufre: SO2
CLASIFICACION DE PLAGUICIDAS

Segn organismo blanco

PLAGUICIDA
Acaricidas
Algicidas
Bactericidas

ORGANISMO BLANCO
Acaros y termitas
Algas
Bacterias

Fungicidas

Hongos

Herbicidas

Plantas, usualmente malezas terrestres o

acuticas

Insecticidas

Insectos

Molusquicidas

Moluscos (caracoles y babosas)

Nematicidas

Nematodes (parsitos externos)

Rodenticidas

Roedores

Termiticidas

Termitas

Segn tipo de formulacin

PLAGUICIDA
Sprays

Polvos

Insecticidas, herbicidas o fungicidas como

concentrados emulsificables, lquidos miscibles en
agua, polvos solubles en agua (mojables), soluciones
oleosas
Insecticidas y fungicidas como agentes no diludos,
aerosoles de polvos

Granulados

Insecticidas, herbicidas y algicidas bajo la forma de un

carrier (transportador) inerte impregnado con el
plaguicida

Coatings

Insecticidas y fungicidas para tratamiento de semillas

Aerosoles

Insecticidas. Repelentes y desinfectantes bajo la forma

de spray, para aplicacin en interiores

Fumigantes

Lquidos evaporables o gases para tratamiento de

suelos y control de plagas en almacenajes con efecto
nematicida e insecticida

Cebos

Prcticamente, sin liberacin del i.a. en el ambiente; el

txico es ingerido por el organismo blanco (insectos,
moluscos y roedores) atrado por el seuelo

Formulaciones
de liberacin
lenta

Insecticidas microencapsulados, lacas para pinturas y

bandas de resina para uso en interiores

Segn estructura qumica

INSECTICIDAS

CARACTERISTICAS

Organoclorados

HERBICIDAS
Algunos criterios usados para

FUNGICIDAS

Inorgnicos

(hidrocarburos
clorados)

la clasificacin:

Organofosforados
(steres de cido
fosfrico)

Carbamatos

Piretroides naturales
y sintticos

Dinitrofenoles

Organotinas

Microbianos

En relacin a la poca de
siembra del vegetal a ser
protegido
En relacin al mecanismo
de exposicin (va suelo u
hojas)
En relacin al modo de
accin (herbicidas de
contacto, sistmicos)
En relacin a la estructura
qumica:

Acidos fenoxialifticos

Nitroanilinas

Ureas sustitudas

(Sulfuro, cobre o
mercurio)

Orgnicos
(ditiocarbamatos)

Sistmicos
(bencimidazoles)

Antibiticos

(Existe gran
heterogeneidad
qumica)

Carbamatos y
tiocarbamatos

Triazinas (heterocclicos
nitrogenados)

Derivados del fenol y

dinitrofenoles

BIODISPONIBILIDAD DE TOXICOS

En solucin

Adsorbidos sobre:

Slidos en suspensin
Sedimentos
Biota

Incorporados a la biota

CONCENTRACION DE TOXICOS
EN EL AMBIENTE

Concentracin

TOXICO
Propiedades fsicas

Transporte

Propiedades
qumicas
Fuentes
Tasa de ingreso

Transformacin

ECOSISTEMAS
Propiedades fsicas
Propiedades
qumicas

Destino

TRANSPORTE
Involucra, generalmente, mltiples medios:

aire, agua, suelo

Numerosos modelos, desde difusin simple
a ecuaciones multidimensionales complejas
AGUA:

 Varios

modelos
matemticos, etc.

distintos:

fsiscos,

Caracterizados por:
Simulacin de movimientos del agua,
Concentracin o tasa de carga del

contaminante

Dimensionalidad:
una (mayora)
dos (algunos)
tres o ms (muy pocos)

MEDIOS Y COMPARTIMIENTOS AMBIENTALES

MEDIO
AIRE

COMPARTIMIENTOS

Atmsfera
Partculas en aire
Aerosoles
Nubes (vapor)
Biota

AGUA
(MEDIO ACUATICO)

TIERRA
(MEDIO TERRESTRE)

Aguas superficiales
Sedimentos
Slidos en suspensin
Agua subterrnea
Biota
Ambiente marino
Ambiente dulceacucola
Ambientes salobres
Suelo
Agua retenida entre los poros del
suelo
Atmsfera del suelo
Vegetacin superficial
Biota del suelo

PRINCIPALES RUTAS DE INGRESO DE CONTAMINANTES

ORGANICOS EN LOS ORGANISMOS
TIPO DE
ORGANISMO
Vertebrados
Terrestres

RUTA DE INGRESO

FUENTE DE CONTAMINANTES

Sistema digestivo

Alimento y agua ingeridos

Piel

Superficies contaminadas

Pulmones

Aerosoles y partculas en aire

Vapor; gotas y partculas en aire

Invertebrados Tracto alimentario

terrestres
Cutcula (insectos)
Paredes del cuerpo (lombrices)

Alimento y agua
Superficies contaminadas
Ambiente contaminado (suelo)

Trqueas (artrpodos), vas areas

Gotas y partculas en aire

Branquias

Contaminantes
suspendidos
sedimentos

Sistema digestivo

Alimento

Mamferos
acuticos y
aves

Sistema digestivo

Alimento
Cantidades pequeas de agua
ambiental o agua ingerida (aves)

Anfibios

Sistema digestivo

Alimento
Cantidades
ingerida

Peces

Piel
Invertebrados
acuticos

Tracto alimentario
Superficies respiratorias

Plantas

Hojas

Races

disueltos
en
agua

pequeas

de

o
y

agua

Contaminantes
suspendidos
sedimentos
Alimento
Agua ingerida

disueltos
en
agua

o
y

Contaminantes
suspendidos
sedimentos
Contaminantes
partculas
Vapores

disueltos
en
agua

o
y

en

gotas

Contaminantes disueltos en agua

del suelo

CRITERIOS PARA EL ESTABLECIMIENTO

DE PRIORIDADES EN LA EVALUACION
DE TOXICOS

TIPOS DE XENOBIOTICOS:
Consumidos directamente por el hombre
Liberados directamente al ambiente

 Contaminantes de otros productos

CARACTERISTICAS:
Indicacin cierta o sospecha de alta
toxicidad
Alta persistencia en el ambiente
Capacidad para inhibir mecanismos de
detoxificacin de organismos vivos
Acumulacin potencial en la biota y en el
ambiente
Tipo y tamao de las poblaciones potencialmente

DEFINICIONES
DOSIS: Es la cantidad de sustancia administrada a un
organismos, expresada como unidad / peso corporal

CONCENTRACION: Es la cantidad de sustancia

aplicada en el medio, expresada como unidad de
peso o volumen / volumen del medio

 EFECTO: Es el cambio biolgico producido tanto en

el nivel de organismo individual como en niveles de

organizacin inferiores o superiores al individuo,
asociado a la exposicin al txico

RESPUESTA: Proporcin de la poblacin expuesta al

txico que manifiesta el efecto definido

EFECTO CUANTAL: No medible mediante una escala

de intensidad o severidad graduada; se expresa
como presente o no presente

EFECTO NO CUANTAL: Medible mediante una escala de

intensidad graduable

EFECTOS
AGUDO:

Corto tiempo de exposicin (horas, das)

Severidad (mortalidad)
Determinacin de la concentracin que causa la mortalidad del 50%
de la poblacin expuesta (CL50)

CRONICO, SUBCRONICO:

Exposicin simple o exposiciones repetidas de largo tiempo de

duracin
Tiempo de aparicin de los efectos

Efectos seleccionados:

Letal o subletal
Cambios en el comportamiento
Cambios fisiolgicos
Cambios bioqumicos
Cambios histolgicos
Reversible - irreversible (ensayos de recuperacin)

INTERACCION por exposicin a mezclas de txicos

EFECTO LETAL:

Causa la muerte por accin directa como consecuencia de la

exposicin a una determinada concentracin del agente txico

EFECTO SUBLETAL:

Se produce por debajo del nivel que causa la muerte directamente,

como resultado de la exposicin a una determinada concentracin
del agente txico

EFECTOS

CURVA CONCENTRACION-EFECTO:

Expresa la relacin entre concentracin y magnitud de un efecto

determinado, tanto a nivel individual como poblacional

CURVA CONCENTRACION-RESPUESTA:

Expresa la relacin entre concentracin y proporcin de individuos

que responden a un efecto determinado

MEZCLA DE AGENTES TOXICOS

La accin conjunta puede ser:

ADITIVA:

Magnitud del efecto o respuesta numricamente igual a la

suma de los efectos o respuestas de txicos individuales

COMBINADA:

Los txicos producen efectos diferentes o tienen distintos

modos de accin

MAYOR QUE LA ADITIVA - SINERGISMO:

La toxicidad de la mezcla es mayor que la esperada por la

simple suma de la toxicidad de los txicos individuales

MENOR QUE LA ADITIVA - ANTAGONISMO:

La toxicidad de la mezcla es menor que la esperada por la

simple suma de la toxicidad de los txicos individuales

CRITERIO PARA LA SELECCION DE

EFECTOS

Inequvoco
Relevante
Rpidamente observable
De fcil descripcin
Mensurable
Biolgicamente significativo
Reproducible
Screening tests: mortalidad
Subletalidad:
Crecimiento
Reproduccin
Cualitativo
Cuantitativo
Se establecen como ndices de toxicidad:
CL50,CE50 - tiempo

TEMPORAL SCALE
100000 years

CAMBIO
CLIMATIC
O

10000 years
1000 years

ROUTINE
EFFLUENT
S

ACID
DEPOSITION

100 years
10 years
1 year

PESTICIDE
USE

1 month
1 day

SPILLS
PESTICIDE

1 second 1 m

APPLICATION

1 mm

1m

1 km

1000 km

10000 km

SPATIAL SCALE
ARRANGEMENT OF A VARIETY OF ANTHROPOGENIC HAZARDS ON SPATIAL AND TEMPORAL SCALES (Suter, 1994)

TEMPORAL SCALE
100000 years

REGIONAL
DYNAMICS

10000 years
1000 years

ECOSYSTEM
DYNAMICS
MICROORGANISM
POPULATION

100 years
10 years
1 year

POPULATION
DYNAMICS

1 month

MACROORGANISM
PHYSIOLOGY
MICROORGANISM
PHYSIOLOGY

1 day
1 second 1 m

1 mm

1m

1 km

1000 km

10000 km

SPATIAL SCALE
ARRANGEMENT OF LEVELS OF BIOLOGICAL ORGANIZATION ON SPATIAL AND TEMPORAL SCALES (Suter, 1994)

DEFINICIONES
BIOENSAYO: Mtodo para evaluar la potencia relativa
de un agente sobre organismos vivos, mediante la
comparacin del efecto del agente con el de una
solucin patrn o standard
ENSAYO DE TOXICIDAD: Permite la deteccin y
evaluacin de la capacidad de un agente de producir
efectos txicos adversos sobre organismos vivos

ENSAYOS DE ECOTOXICIDAD
CARACTERISTICAS COMUNES:
Exposicin de grupos de organismos
misma poblacin
en buenas condiciones de salud
con aclimatacin previa
Mantenimiento de condiciones ambientales

constantes y estandarizadas
Exposicin a concentraciones graduadas del
agente
Grupos control adecuados
Observacin de signos del efecto presentes
Medicin y registro detallado de efectos
biolgicos en grupos control y tratados
Observacin patolgica de grupos control y
tratados
Anlisis estadstico de resultados

TIPOS DE ENSAYOS

 DE LABORATORIO: Reproduccin parcial de

las condiciones reales del ambiente
DE CAMPO: Organismos mantenidos en
contenedores
adecuados
(limnocorrales)
sometidos a las condiciones del medio
Segn sea la renovacin del medio:
ESTATICO: Se establece la concentracin del
txico al principio del ensayo; el medio no se
renueva
SEMIESTATICO: Renovacin
medio de ensayo y del txico

peridica

del

FLUJO CONTINUO: Renovacin contnua del

medio de ensayo y txico

TIPOS DE ENSAYOS
Segn el tiempo de exposicin:

 AGUDO: Perodo de exposicin corto en

relacin al tiempo de generacin del organismo
de prueba
SUBCRONICO: El perodo de exposicin cubre,
al menos, el 10% del tiempo de generacin del
organismo de prueba
CRONICO: El perodo de exposicin cubre, al
menos, una generacin del organismo de
prueba
DE REPRODUCCION: El perodo de exposicin
cubre, al menos, tres generaciones del
organismo de prueba
DE RECUPERACION: El perodo de exposicin
es seguido por la transferencia y observacin en
un medio no txico

METODOS DE ENSAYO (1)

Concentracin de efecto no observado (NOEC)
Mnima concentracin de observacin de efecto
(LOEC)

ENSAYOS DE TOXICIDAD AGUDA

Peces: mortalidad
Invertebrados: inmovilidad
Microalgas: crecimiento
Indices: CL50 - CE50 - tiempo
Ensayo independiente del tiempo (TI) (CL50 - CE50
incipiente)

ENSAYOS DE TOXICIDAD CRONICA

Ciclo de vida completo

Ciclo de vida parcial
Concentracin mxima aceptable de txico (MATC)
Valor crnico (VC)
NOEC < VC < LOEC

METODOS DE ENSAYO (2)

ENSAYOS CON ESTADIOS TEMPRANOS DE VIDA

Huevo - embrin - larva - alevino

Duracin: 1 2 meses

ENSAYOS DE BIOACUMULACION

Compuestos polares (hidroflicos)

Compuestos no polares (hidrofbicos)
Factor de bioacumulacin (BCF)
Coeficiente de particin n-octanol - agua
Bioconcentracin - biacumulacin biomagnificacin

INCERTEZAS EN DISTINTOS NIVELES DE INVESTIGACION

TIPO DE ENSAYO /
INCERTEZAS POSIBLES EN EXTRAPOLACION
FUENTE DE DATOS
Influencia de condiciones ambientales sobre la funcin concentracin - respuesta y el rgimen de exposicin
ENSAYOS
MONOESPECIFICOSDE Un cierto estado del ciclo de vida como representativo del ciclo completo
Pocas especies seleccionadas por su facilidad de mantenimiento como representativas de la comunidad natural
LABORATORIO

MICROCOSMOS

MESOCOSMOS O
MANIPULACION DE
ECOSISTEMAS
NATURALES

MODELOS

No se considera la relacin con otras especies

Los efectos a nivel individual son aplicados a nivel poblacional sin mecanismos de compensacin o ajustes por
comportamiento
Relaciones artificiales entre especies
Se excluyen importantes relaciones trficas
Los efectos de borde pueden causar alteraciones en resultados
No se considera la heterogeneidad espacial de los ecosistemas naturales en los que se toman las muestras
El enfoque y la metodologa se modifican sobre la base de su aplicabilidad y replicabilidad ms que en relacin
con su acercamiento a los efectos reales
Se excluyen factores climticos naturales
Se considera un ecosistema especfico como representativo de un tipo general de ecosistema
El "stress" generado por la aplicacin de una sustancia qumica determinada se supone representativo del
"stress" generado por sustancias no ensayadas
No se consideran los efectos de condiciones fsicas ambientales y climticas ni de eventos histricos sobre el
comportamiento del ecosistema
Replicabilidad insuficiente
Dificultad en recopilar datos relevantes para la determinacin de la relacin concentracin - respuesta en el
ecosistema
Prolongada duracin del experimento, relacionado con el tiempo requerido por el ecosistema para manifestar una
reaccin adecuada, medible y recuperable
Formulaciones matemticas imprecisas o incorrectas
Efectos basados en una poco uniforme distribucin de los organismos en el campo (agregacin)
Insuficientes bases de datos para la verificacin del modelo
El modelo es aplicado a un nivel que excede el alcance de su capacidad a fin de obtener una evaluacin relevante
Sensibilidad de los resultados frente a la variacin de los parmetros seleccionados o del diseo del modelo.

DISEO DE ENSAYOS

Acercamiento por fases (TIER)

Ensayos simples de corto
exposicin
Ensayos ms complejos

tiempo

de

Controles concurrentes
Control de agua no tratada
Ensayo de control de solventes
Ensayo de referencia (producto qumico de
referencia)

CRITERIOS PARA LA SELECCION DE

PROTOCOLOS DE ENSAYO
Aceptacin de la comunidad cientfica
Capacidad de prediccin de los efectos de un
amplio rango de txicos sobre diferentes
organismos
Base estadstica - reproducibilidad
Rango de concentracin - duracin de la
exposicin
Datos obtenidos utilizables para la evaluacin
de riesgo
Costo - eficiencia
Sensibilidad - realismo
Ensayos uniespecficos
Ensayos multiespecficos
Experimentos de laboratorio en condiciones
controladas
Experimentos de campo con un alto nmero de
variables
Validacin

ESCALAS DE OBSERVACION EN
ENSAYOS DE TOXICIDAD
Espacial

Temporal

Organizacional
Estructural

Funcional

Horas - das

Organismo

Crecimiento
Reproduccin

Microcosmos Das - meses

(cc-m)

Organismo
Poblacin
Comunidad

Produccin
Ciclo de vida
Cadena trfica

Ensayo de
laboratorio
uniespecfico
(cc - m2)

Ensayos de
campo

Das - aos

Idem

Idem

Monitoreo
ambiental

Aos

dem

dem

MEDIO TERRESTRE - ENSAYOS

EXPOSICION

ORGANISMO DE
PRUEBA
Lombriz de tierra

EFECTOS OBSERVADOS
Mortalidad (CL50)

Ave (dosis oral nica)

Mortalidad (CL50)

Ave (dietaria)

Mortalidad, peso corporal,

comportamiento, tasa de
alimentacin

Abejas (por contacto)

Mortalidad (CL50)

Abejas (oral)

Mortalidad (CL50)

Organismos benficos

Mortalidad, tasa de alimentacin

Ave (reproduccin)

Mortalidad, tamao al alcanzar el

acoplamiento, cambios
morfolgicos de huevos, efectos
sobre cras

Microflora

Actividad deshidrogenasa,
respiracin a corto plazo, ciclo
del nitrgeno

Lombriz de tierra

Reproduccin (NOEC)

Organismos benficos

Reproduccin (NOEC)

AGUDA

CRONICA

MEDIO ACUATICO - ENSAYOS

EXPOSICION

AGUDA

ORGANISMO DE PRUEBA

EFECTOS OBSERVADOS

Dos especies diferentes de peces

dulceacucolas,
Cnesterodon decemmaculatus,
Poecilia reticulata

Mortalidad (CL50 96 hs)

Microcrustceo del zooplancton

(Daphnia sp.), Daphnia magna,
Daphnia spinulata

Inmovilidad (CE50 48 hs)

Alga dulceacucola, Scenedesmus

acutus, S. quadricauda,
Selenastrum capricornutum

Inhibicin del crecimiento (CI50 96 hs)

Crustceo bentnico, Hyalella

curvispina, Hyalella azteca

Mortalidad o inmovilidad (CL50 10, 14 das,

CE50)

Pez dulceacucola
(estados tempranos
del ciclo de vida)

Mortalidad de alevinos y juveniles, peso corporal, longitud

del cuerpo, tasa de crecimiento

Pez dulceacucola
(reproduccin)

Mortalidad de adultos, mortalidad de alevinos, tiempo de

puesta, xito en la eclosin, peso y longitud del cuerpo de
adultos y alevinos, tasa de crecimiento, comportamiento

CRONICA

Microcrustceo del
Inmovilidad de adultos, nmero de huevos / hembra,
zooplancton (ciclo de nmero de efipios / hembra, xito en la eclosin, tiempo de
vida completo)
eclosin, inmovilidad de nuevos ejemplares, tasa de
reproduccin, tasa de crecimiento, comportamiento
Crustceo bentnico
(ciclo de vida
completo)

Inmovilidad de adultos, nmero de huevos / hembra, xito

en la eclosin, tiempo de eclosin, inmovilidad de nuevos
ejemplares, tasa de reproduccin, tasa de crecimiento,
comportamiento

CALCULATION METHODS
GRAPHICAL METHOD
LC50
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)
Subjective

BINOMIAL METHOD
LC50 (= 95% confidence intervals)
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)

MOVING AVERAGE ANGLE METHOD

LC50 + 95% confidence intervals
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)
Can be performed manually, but labor intensive

MODIFIED SPEARMAN-KARBER METHOD

LC50 + 95% confidence intervals
Can be performed with 0 or 1 partial kill(s)
The concentrations tested must cover the range 0% - 100% response

LICHFIELD AND WILCOXON METHOD

LC50 + 95% confidence intervals
At least 2 partial kills required
Can easily be performed manually
Subjective to a certain extend

PROBIT ANALYSIS
LC50 + 95% confidence intervals
At least 2 partial kills required
Is difficult to be performed manually

METODOS ESTADISTICOS RECOMENDADOS

PARA ENSAYOS DE TOXICIDAD CRONICA
DATOS OBSERVADOS
ESTIMACION DE CE50
Anlisis Probit

DISTRIBUCION NORMAL

NORMALIDAD DE DATOS

Test de Shapiro-Wilks

DISTRIBUCION NO NORMAL

HOMOGEINEIDAD DE VARIANZAS
Test de Bartlett

HOMOGENEIDAD

HETEROGENEIDAD

IGUAL NUMERO DE
REPLICAS
NO
Test de t con
ajuste de
Bonferroni

SI
Test de Dunnett
con ajuste
de Bonferroni

IGUAL NUMERO DE
REPLICAS
SI

NO

Test de Steel Test de Wil-(ranks)

coxon (ranks)

FACTORES A CONSIDERAR EN EL
DISEO
DE
ENSAYOS
DE
TOXICIDAD

Propiedades fsico-qumicas del producto

Pureza qumica
Presencia de impurezas
Seleccin del organismo de prueba
Variables ambientales

PROPIEDADES FISICO-QUIMICAS DEL

PRODUCTO

Estructura qumica: grupos funcionales

Estabilidad frente a distintos valores de pH
Propiedades fotoqumicas
Coeficiente de particin n-octanol/agua
Naturaleza lipoflica
Potencial de ionizacin
Tamao y forma de las partculas
Densidad

EL ORGANISMO DE PRUEBA
Diferencias en la sensibilidad entre las distintas
especies
Accesibilidad al txico
Tasa y modelo de metabolismo y excrecin
Mayor sensibilidad de los individuos juveniles
Influencia del estado salud / stress sobre la
sensibilidad

CRITERIOS PARA LA SELECCION DEL

ORGANISMO DE PRUEBA

Amplio rango de sensibilidad (batera de ensayos con distintos organismos)

Sensibilidad constante de la poblacin utilizada
Alta disponibilidad y abundancia (amplia distribucin geogrfica)
Estabilidad gentica y uniformidad de las poblaciones usadas en los
ensayos
Organismos autctonos o representativos del ecosistema que se evala
Conocimiento de su biologa, fisiologa y hbitos nutricionales
Preferencia por especies de importancia recreacional, comercial o
ecolgica
Disponibilidad de ejemplares a lo largo de todo el ao
Sencillo mantenimiento y cultivo en condiciones de laboratorio
Preferencia por especies de tamao reducido para facilitar la obtencin de
gran nmero de datos
Existe un limitado nmero de especies standard:

algas fitoplanctnicas
crustceos: Daphnia, camarones, Artemia
peces
rotferos
anfpodos

En ensayos de campo pueden utilizarse especies no estandarizadas

PROCEDIMIENTOS Y CONDICIONES PARA

UNA BUENA PRACTICA DE LABORATORIO
PERSONAL
-Calificacin
-Responsabilidades
-Direccin
-Funciones para garantizar
la calidad

INSTALACIONES
-Mantenimiento y manipulacin de organismos de
prueba
-Manipulacin y almacenamiento de reactivos
-Espacio para el desarrollo
de los ensayos

EQUIPAMIENTO OPERACIONES
TOXICO
DE LABORATORIO
-Localizacin
-Procedimientos operacio- -Manipulacin
-Mantenimiento
nales para ensayos, man- y almacena-Calibracin
tenimiento de organismos miento
y preparacin de solucio-Caracterizanes
cin
REGISTRO DE DATOS
INFORME DE RESULTADOS
-Localizacin
-Recuperacin

GOOD LABORATORY PRACTICE

OECD :

Organisation for Economic Cooperation and

ISBN 92-64-12367-9, Paris 1982.

Development,

U.S.A.:

United States Environmental Protection Agency, Title

40
Code of Federal Regulations Part 160 (FIFRA)
Federal Register,
29
November
1983,
and
Subsequent
Amendment
Federal
Register 17 August 1989.
United States Environmental Protection Agency, U.S. EPA
2185, Good Automated Laboratory Practices, 8 October 1995

Japan:

Japan Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries, 59

NohSan, Notification N
3850, Agricultural Production
Bureau, 10 August 1984.

U.K.:

Good
Laboratory
Practice,
the United Kingdom
Compliance
Program,
Department of Health and
Social Security 1986 and Subsequent
Revision,
Department of Health 1989.

INTERRELACIONES ENTRE LOS FACTORES QUE

DETERMINAN LA SELECCION DE UN PROTOCOLO
DE ENSAYO

Mnimo

VALOR ECONOMICO
Costo
Duracin
Equipamiento

Entrenamiento del
personal

Costo, representatividad, sensibilidad

Captura y mantenimiento de organismos.

PROTOCOLO DE ENSAYO
Eleccin del organismo Eleccin del criterio

Representatividad
ecolgica

Mximo

Sensibilidad

VALOR BIOLOGICO

SECTION 12

REPORT PREPARATION
(Adapted from USEPA, 1989c)
The following general format and content are recommended for the report:

12.1 INTRODUCTION
1. Permit number
2. Toxicity testing requirements of permit
3. Plant location
4. Name of receiving water body
5. Contractor (if contracted)
a. Name of firm
b. Phone number
c. Adress

12.2 PLANT OPERATIONS

1. Product(s)
2. Raw materials
3. Operating schedule
4. Description of waste treatment
5. Schematic of waste treatment
6. Retention time (if applicable)
7. Volume of discharge (MGD, CFS, GPM)
8. Design flow of treatment facility at time of sampling

12.3 SOURCE OF EFFLUENT, RECEIVING WATER AND DILUTION

WATER
1. Effluent samples
a. Sampling point
b. Sample collection method
c. Collection dates and times
d. Mean daily discharge on sample collection date
e. Lapsed time from sample collection to delivery
f. Sample temperature when received at the laboratory
g. Physical and chemical data
2. Receiving Water Samples
a. Sampling point
b. Sample collection method
c. Collection dates and times
d. Streamflow at time of sampling and 7Q10

e. Lapsed time from sample collection to delivery

f. Sample temperature when received at the laboratory
g. Physical and chemical data
3. Dilution Water Samples
a. Source
b. Collection date(s) and time(s) (when applicable)
c. Pretreatment
d. Physical and chemical characteristics (pH, hardness,
salinity, etc.)

12.4 TEST CONDITIONS

1. Toxicity test method used (title, number, source)
2. Endpoint(s) of test
3. Deviations from reference method, if any, and reason(s)
4. Date and time test started
5. Date and time test terminated
6. Type and volume of test chambers
7. Volume of solution used per chamber
8. Number of organisms per test chamber
9. Number of replicate test chambers per treatment
10. Feeding frequency, and amount and type of food
11. Acclimation temperature of test organisms (mean and range)
12. Test temperature (mean and range)

12. 5 TEST ORGANISMS

1. Scientific name
2. Age
3. Life stage
4. Mean lenght and weight (where applicable)
5. Source
6. Diseases and treatment (where applicable)

12.6 QUALITY ASSURANCE

1. Reference toxicant used routinely, source
2. Date and time of most recent reference toxicant test; test results
current cusum chart
3. Dilution water used in reference toxicant test
4. Physical and chemical methods used

12.7 RESULTS

and

1. Provide raw toxicity data in tabular form, including daily records

of
affected organisms in each concentration ( including controls)
2. Provide table of endpoints: LC50, NOEC, LOEC, etc.
3. Indicate statistical methods used to calculate endpoints
4. Provide summary table of physical and chemical data
5. Tabulate QA data

12.8 CONCLUSIONS AND RECOMMENDATIONS

1. Relationship between test endpoints and permit limits
2. Action to be taken

BIOMARCADOR

Son las respuestas biolgicas a los txicos ambientales los

que dan una medida de la exposicin y, a veces, del efecto
txico (WALKER et al., 1997)

Pueden ser respuestas a nivel molecular, celular o del

organismo entero.
Representan una medida del efecto relacionado con la
presencia de niveles particulares de un contaminante.
Proveen un medio de interpretar niveles ambientales de
contaminantes en trminos biolgicos.

BIOMARCADORES A DIFERENTES
NIVELES DE ORGANIZACIN

NIVEL DE ORGANIZACIN

EJEMPLO DE BIOMARCADOR

Molcula
receptor

unida

un TCDD unido a un
acetilcolina
Nonilfenoles
unidos
receptor de estrgeno

Respuesta bioqumica

receptor
a

un

Induccin de monooxigenasas
Inhibicin de

acetilcolinesterasas
Alteraciones fisiolgicas

Grosor de la cscara de huevo

(aves)
Feminizacin de embriones
Efectos a nivel del individuo Cambios de comportamiento
Crecimiento

EVALUACION DEL RIESGO

Proceso de estimacin de la probabilidad de que ciertas actividades
produzcan determinados efectos adversos

SEGURIDAD Y SALUD HUMANAS

ECOSISTEMAS

EVALUACION DEL RIESGO

HUMANO

EVALUACION DEL RIESGO

ECOLOGICO

EVALUACION DEL RIESGO GLOBAL

INVOLUCRA

EVALUACION DE LA
EXPOSICION

EVALUACION DE LOS
EFECTOS

Define el movimiento del agente

desde la fuente hasta su destino
final ltimo.
Origen o fuente
Transporte
Destino final

Define el impacto asociado a

distintos niveles de stress.

EVALUACION DEL RIESGO RELATIVO

OBJETIVO: Desarrollo de indicadores del riesgo total, los que pueden
ser utilizados en el proceso de toma de decisiones.
Es el paso ms difcil en el proceso de Evaluacin del riesgo
Existe carencia de una metodologa de evaluacin slida, ampliamente
aceptada

 Integracin de los factores de riesgo con el costo econmico y social

de la toma de decisin
El apropiado balance entre estas dos clases de factores conduce a
acuerdos entre la comunidad cientfica y los organismos polticos
encargados de la toma de decisiones

EVALUACION DE EFECTOS ECOLOGICOS

Sobre la base de:

1. CLASIFICACION AMBIENTAL

Ambiente urbano
Ambiente productivo
Ambiente natural
Ambiente de uso mltiple

2. DESARROLLO DE FACTORES DE PESO

3. EVALUACION DE RECEPTOR/ES REPRESENTA-TIVOS

Seleccin de especies representativas a nivel poblacional, de
comunidad y de procesos ecolgicos
Seleccin de indicadores apropiados de los efectos que se
manifiestan sobre los receptores representativos

4.

EVALUACION
RESPUESTA

DE

LA

FUNCION

CONCENTRACION-

Recoleccin de datos, teniendo en cuenta:

Tipo de efecto medido
Condiciones de exposicin
Forma de experimentacin
Determinacin de la potencial recuperacin de poblaciones y
procesos expuestos

EL PROBLEMA DE LA EVALUACION DE LA RELACION

CONCENTRACION - RESPUESTA
1. ENFOQUE DIRECTO

Completa batera de ensayos

Implementacin simultnea
Resultados altamente confiables
Alto consumo de tiempo y elevado costo

2. ENFOQUE EN FASES O ETAPAS

Secuencia de actividades de ensayo
Utilizacin de los resultados de las etapas precedentes para el
diseo de cada fase subsiguiente
FASE 1

 Exposicin aguda
Ensayos monoespecficos
Evaluacin rpida y grosera del riesgo relativo
FASE 2 Y SUBSIGUIENTES
Exposiciones de mayor duracin
Ensayos multiespecficos
Mejor utilizacin de los recursos disponibles
Rpido acercamiento a los problemas prioritarios
Optima relacin costo - efectividad
Potencialmente, resulta posible omitir aspectos importantes
del riesgo ecolgico durante la FASE 1
3. ENFOQUE INTERMEDIO
Acercamiento en FASES, incluyendo ensayos de mayor tiempo
de exposicin durante la FASE 1
Puede existir redundancia de informacin en la FASE 1

LEGISLACION NACIONAL Y PROVINCIAL

NACIONAL:
Resolucin No. 440/98 y modificacin
2000 Secretara de Agricultura,
Ganadera,PescayAlimentacin

Ley 24051/92 Decreto

Reglamentario No. 831/93 Residuos
Peligrosos

Ley 17319/67 Decretos y

Disposiciones

modificatorias

Disposicin 52/97 Hidrocarburos,

Exploracin, extraccin, refineras,
construccin, operacin y abandono de
oleoductos y poliductos Proteccin
ambiental.

PROVINCIADEBUENOSAIRES:
Ley11720yDecretoReglamentarioNo.
806/97ResiduosEspeciales

ResolucinNo.601/98 Secretarade
Poltica Ambiental Residuos
txicos con prohibicin de ingreso al
territorio de la Provincia de Buenos
Aires.

CLASEDE
NACIONES
UNIDAS

No.DECODIGO
(LEY11720)

CARACTERISTICAS

H6.1

Txicos (venenos) agudos: Sustancias o desechos que pueden

causarlamuerteolesionesgravesodaosalasaludhumana,
siseingierenoinhalanoentranencontactoconlapiel.

H10

Liberacindegasestxicosencontactoconelaireoelagua:
Sustanciaodesechosque,porreaccinconelaireoelagua,
puedenemitirgasestxicosencantidadespeligrosas.

H11

Sustancias txicas (con efectos retardados o crnicos):

Sustancias o desechos que, de ser aspirados o ingeridos o de
penetrar en la piel pueden entraar efectos retardados o
crnicos,inclusolacarcinogenia.

H12

Ecotxicos:Sustanciasodesechosque,siseliberan,tieneno
pueden tener efectos adversos inmediatos o retardados en el
ambiente debido a la bioacumulacin o los efectos txicos en
lossistemasbiticos.

6.1