Preparaciones

Microbiolgicas
Preparaciones en fresco (microorganismos vivos)
Preparaciones fijas y teidas (microorganismos muertos)

Frotis
Una capa delgada de muestra extendida sobre un
portaobjetos que permite el paso de la luz a travs de ella.

Impronta

Frotis sanguneo

Gota de cultivo
lquido

Cinta adhesiva
transparente

Cultivo slido
resuspendido

Hisopo

Tinciones
Positivas

Negativas

Se observa teida la clula

sobre un fondo claro.

El fondo se tie de oscuro

para observar clulas o
estructuras refringentes.

Frotis Sanguneo

Cryptococcus neoformans

Tinciones
Simples
Se utiliza un solo colorante
(bsicos).
- Azul de metileno
- Safranina
- Cristal violeta
Compuestas
Se utilizan dos ms
colorantes. Pueden usar
mordentes y decolorantes
- Giemsa
- Wrigth
- May Grnwald
(Eosina-Azul de metileno)

Bacillus
megaterium. Tincin
simple con cristal
violeta.

Frotis sanguneo con

Yersinia pestis.
Tincin de Wrigth.

Mdula sea.
Tincin de May
GrnwaldGiemsa.

Trypanosoma sp
en sangre.
Tincin de
Wrigth.

Tinciones
Tincin negativa de
Cpsula
Selectivas
Son utilizadas para dar
color y aislar partes
especficas de los
microorganismos

- Endosporas
- Flagelo
- Ncleo

Tincin
negativa de
cpsula.
Streptococcus
pneumoniae.

Tincin de
endosporas.
Bacillus subtilis.

Tincin de
flagelos.
Proteus sp

Tinciones
Tincin de
Ziehl-Neelsen.

Diferenciales
Reaccionan de manera
diferente entre las distintas
clases de bacterias.
- Ziehl-Neelsen

Tincin de
Gram.

- Gram

Tincin de
Gram.

Colorantes
Compuestos coloridos que al combinarse con otras sustancias les
imparten color; estn formados por un grupo cromforo que es la
parte responsable del color, y un grupo auxcromo que al formar
sales le permite disociarse y combinarse. Mordente : compuesto
qumico intensificador de color.
cidos.

Bsicos.

El cromforo es el anin de
la molcula.

El cromforo es el catin
de la molcula.

Br
NaO

Br
O

Br

Cl-

Br
COO- Na +

Eosina

(CH3)2N

S
+

N(CH3)2

Azul de metileno

Tcnicas de tincin
Frotis

Tincin simple
Colorante bsico
(1 minuto)
Enjuagar con agua

Bacillus anthracis
Tincin simple con
cristal violeta.

Neisseria
gonorrhoeae.
Tincin simple con
safranina.

Pseudomonas
aeruginosa.
Tincin simple
con safranina.

Staphylococcus
aureus.Tincin
simple con azul
de metileno.

Tcnicas de tincin
Tincin de cpsula

Streptococcus pneumoniae

Extendido
Muestra + tinta china o
nigrosina
Secar al aire

Acinetobacter calcoaceticus

Safranina de Gram o
Cristal Violeta (1 minuto)

Tcnicas de tincin
Tincin de endosporas
Verde de maquila 5% con
emisiones de vapor de
agua (10 minutos)
Bacillus subtilis

Lavar con agua

Safranina 0.5% (1minuto)

Clostridium tetani

Tcnicas de tincin
Tincin de flagelo

Colorante primario. Pararosa anilina

Proteus vulgaris
Mordente. Acido
tnico
Colorante de
contraste. Azul de
metileno

Vibrio cholerae

Tcnicas de tincin
Tincin de Gram
Colorante primario. Cristal
violeta 1% en solucin de
oxalato de amonio al 0.85%
(1 minuto)
Mordente. Lugol I/KI 1g/2g
en 300 mL de agua (1 minuto)

Streptococcus pyogenes

Decoloracin. Alcohol-Acetona
70:30. Hasta eliminar el exceso
de colorante
Colorante de contraste.
Safranina 0.25% (1 minuto)

Bacilos Gram
negativos y levaduras

Tcnicas de tincin
Tincin de Ziehl-Neelsen
Colorante primario. Fucsina
fenicada con emisiones de
vapor de agua (10 minutos)
Mycobacterium tuberculosis
Decoloracin. Alcohol-Acido
(etanol-HCl) 97:3. Hasta eliminar
el exceso de colorante

Colorante de contraste.
Azul de metileno de Loeffler
(1 minuto)

Mycobacterium tuberculosis

Microscopa

Microscopa

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Microscopa ptica y
electrnica

Tipos de microscopas
ptica de campo claro

Contraste de fases

ptica de campo oscuro

Diferencial de contraste
de interferencia (DIC).

Tipos de microscopas
Confocal

Electrnica de barrido

De fluorescencia

Electrnica de transmisin

Microscopa

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arly_microscope.jpg