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I.-ABSORCIN:
Esta tcnica busca separar mezclas de anticuerpos del plasma de un paciente que este
sensibilizado con varios aloanticuerpos o que posea una combinacin de aloanticuerpos
ms autoanticuerpos. El mecanismo para hacer esto es mediante el uso de clulas con
antgenos conocidos que puedan atraer alguno de los anticuerpos presentes en la mezcla y
dejar otros libres para posteriormente poder identificar cada uno de ellos.
Uso de la absorcin
Elegir g rojos que expresen el antgeno sobre el cual sospechamos est dirigido el
anticuerpo. Lavar 3 a 4 veces con PBS. (verificar que estas clulas no estn
sensibilizadas previo a la absorcin haciendo un C directo)
En el ltimo lavado extraer el sobrenadante con una pipeta para no perder clulas
por inversin, adems a este sobrenadante se le debe enfrentar con clulas testigos A
y B para comprobar que no tenga anticuerpos anti A o B, seguir con los lavados
hasta que este paso d negativo.
Agregar la muestra del paciente (plasma con mezcla de Ac) en igual volumen a las
clulas que tenemos lavadas, mezclar suavemente por inversin. (Ej: 1ml GR
lavados + 1ml Plasma problema).
Trabajar con el plasma haciendo un Coombs indirecto para probar que el anticuerpo
que se sospechaba se peg a las clulas.
II.- ELUCION
De forma habitual, las tcnicas de elucin y absorcin son utilizadas en conjunto para
resolver problemas en laboratorio de inmunohematologa. El objetivo de toda elucin es
interferir con las fuerzas no covalentes que mantienen unido el complejo Ag-Ac. Estas
interferencias pueden ser fsicas (calor, ultrasonido, congelamiento, descongelamiento,
detergentes, etc.), o una accin qumica directa sobre las fuerzas de unin del complejo AgAc, usando, por ejemplo, alteracin de Ph o concentraciones de sal.
USO
Su mayor uso se desarrolla en estudios donde se necesita remover Ac pegados al glbulo
rojo, para luego utilizarlos con diferentes fines, ejemplo:
CONSIDERACIONES
El tipo de anticuerpo que se desea eluir nos dir que tipo de elucin utilizar al momento de
intentar trabajar con una muestra en particular.
Elucin por calor
Se aplica preferentemente en el estudio de la enfermedad hemoltica del recin nacido por
incompatibilidad ABO, y en la elucin de anticuerpos IgM de los eritrocitos (Ejemplo:
enfermedad por aglutininas fras).
En cada mtodo la solucin salina sobrenadante del ltimo lavado se analiza en paralelo
con el eludo, para determinar si la reactividad encontrada en ste ltimo representa la
recuperacin de anticuerpos de la superficie clular, o es el resultado de la contaminacin
por suero residual.
Elucin por cloroformo
Se usa en el estudio de un Coombs directo positivo asociado a anticuerpos reactivos en
caliente (IgG), ya sean auto o aloanticuerpos. En conjunto con tcnicas de absorcin, sirve
para separar mezclas de anticuerpos IgG presentes en un suero.
Elucin cida
Se usa en estudios similares a la elucin por cloroformo, es decir, para separar anticuerpos
de tipo IgG que estn pegados a glbulos rojos.