AUTOMATIZACIÓN

EN HEMATOLOGÍA E
INTERPRETACIÓN DE HISTOGRAMAS
Y DISPERSOGRAMAS

100 101 102 103 104

CD11b FITC ->
MON2-L.N.002
AUTOMATIZACIÓN EN HEMATOLOGÍA
 AUTOMATIZACIÓN EN HEMATOLOGÍA
Actualmente podemos encontrar diversos tipos de analizadores
automatizados:
TECNOLOGÍA 3 DIFF:

Miden aproximadamente 18 para metros, tienen 3

canales 1 canal para medir HB, un segundo canal para
eritrocitos y plaquetas y un tercer canal que permite
diferenciar poblaciones leucocitarias
Permiten un diferencial leucocitos en tres categorías:

* Neutrófilos
* Linfocitos
* Monocitos en combinación con otras células
Utiliza métodos como la impedancia
TECNOLOGÍA 5 DIFF:

Miden hasta 28 parámetros,

Permite un diferencial de leucocitos en 5 tipos
en la sangre periférica:
• Neutrófilos
• Eosinófilos
• Basófilos
• Linfocitos
• Monocitos
 Utilizan varios métodos como impedancia
eléctrica , dispersión óptica, tinción de
mieloperoxidasa, citometría de flujo, etc

Dispersogramas o escategramas
TECNOLOGÍA 7 DIFF:

Además de las poblaciones que diferencias

sus antecesores, puede distinguir:
• Eritrocitos nucleados
• Células anormales, atípicas inmaduras
(LUC)

Utiliza métodos
como citometría
de flujo,
radiofrecuencia,
peroxidasa,
fluorescencia, etc
 v
v o
o l
l u
u m
m e
e n
n

Peroxidasa Lobularidad
 Principio de los analizadores
hematológicos

IMPEDANCIA

RADIOFRECUENCIA DISPERSIÓN ÓPTICA

CITOMETRIA DE FLUJO
FLUORESCENCIA
MÉTODOS AUTOMATIZADOS: PRINCIPIO DE
IMPEDANCIA
ACUMULACIÓN DE PULSOS O EVENTOS SEGÚN SU INTENSIDAD:
GENERACIÓN DEL HISTOGRAMA
PRINCIPIOS DE INSTRUMENTACIÓN
PRINCIPIOS DE INSTRUMENTACIÓN
IMPEDANCIA EN
LA SERIE BLANCA
 Antes del lisante

Después del lisante

Los leucocitos se cuentan entre dos límites;
uno bajo y un alto
Los histogramas de leucocitos presenta dos depresiones o hendiduras
identificada por dos discriminadores

El pico entre LD y T1
representa células
pequeñas:
- Linfocitos
Los histogramas de leucocitos presenta dos depresiones o hendiduras
identificada por dos discriminadores

El pico entre T1 y T2
incluye:

EOSINÓFILOS
BASÓFILOS
MONOCITOS
BLASTOS
PROMIELOCITOS
MIELOCITOS
METAMIELOCITOS
Los histogramas de leucocitos presenta dos depresiones o hendiduras
identificada por dos discriminadores

EL pico después T2 incluye

a los neutrófilos
NOTAS IMPORTANTES
LaLadistribución
distribuciónde delala
curva
curvadebe debeestar
estar
dentro de los
dentro de los
discriminadores
discriminadoresyy
empezar
empezaryyterminar
terminaren en
lalalínea
líneabase
base
LD es flexible
LD es flexible
UD es fijo
UD es fijo
El canal de Globulos
El canal de Globulos
blancos puede mostrar solo
blancos puede mostrar solo
leucocitos y plaquetas
leucocitos y plaquetas
ALTERACIONES CUANTITATIVAS
ALTERACIONES CUANTITATIVAS
 DISPERSIÓN ÓPTICA/ CITOMETRÍA DE FLUJO
La dispersión óptica como metodología primaria o en combinación con otros
métodos.

PRINCIPIO
En los sistemas de dispersión
óptica (llamados citómetros de
flujo) una corriente de la
muestra centrada en forma
hidrodinámica se dirige por un
cuarzo para el flujo celular por
el que pasa una fuente de luz
centrada (laser)
 DISPERSIÓN ÓPTICA

La fuente de luz
generalmente es una
lámpara halógena de
tungsteno o un láser
de helo o neón. La
cual es Laser helio-neón
monocromática.
A medida que las células
atraviesan la zona sensora e
interrumpen el haz de luz y
ésta se dispersa en todas las
direcciones dependiendo de
las propiedades de la célula
(tamaño y complejidad
célula).

Señales electrónicas
 DISPERSIÓN OPTICA

Neutrof
Eosinófilos
Monocitos
- Tamaño celular +

Basófilos
Linfocitos

Plaquetas Cel. Destruidas

- Complejidad celular +
 RADIOFRECUENCIA (conductividad)

La conductividad de las
ondas de radio a través
de las células, nos
revelan su composición
interna

Una frecuencia alta,

generada por un oscilador
de cristal, sobreimpuesta a
la corriente directa, que
incide sobre las células
para medir su densidad
Tinción citoquímica: Peroxidasa
 Tinción peroxidasa

Monocitos
LUC: Neutrófilos
Células
grandes no
teñidas

Linfocitos y
basófilos

Eritrocitos Eosinófilos
nucleados

Agregados
Ruido plaquetarios
electrónico