Determinacin de hierro total en vinos

mediante espectrofotometra UV Visible

RESUMEN.

El Fe que contiene el vino (aprox. 3 mg/L) se encuentra en dos formas: Fe 2+ o

Fe3+. El ion Fe3+, en un medio moderadamente cido, reacciona con KSCN, para dar
lugar a una serie de complejos de color rojo: [Fe(SCN)] 2+; [Fe(SCN)2]+; [Fe(SCN)6]3-,
siendo los de estequiometria superior los ms coloreados.
Esta reaccin es la base de la determinacin espectrofotomtrica de Fe en
diferentes matrices, entre ellas los vinos blancos o poco coloreados. Previo a la
determinacin del contenido en hierro frrico y total en la muestra de vino
proporcionada, se elabora la recta de calibracin, cuyos resultados se ajustan a un
coeficiente R muy satisfactorio (09999). Los valores de las absorbancias obtenidos
en las muestras, -por duplicado- se han redondeado y el resultado obtenido est
dentro de los rangos legales en cuanto al contenido en hierro de los vinos (hasta 8-10
mg/L para no provocar enturbiamientos).
INTRODUCCION TERICA
Los mtodos pticos de anlisis qumico se basan en la medida de la radiacin
electromagntica emitida por la materia o que interacta con ella. Dichos mtodos se
clasifican en espectroscpicos y no espectroscpicos. Los primeros, que sern los
tratados en esta prctica, se basan en la propiedad que tienen las molculas, los
tomos y los iones de absorber o emitir radiacin electromagntica a una
determinada longitud de onda. Todos ellos implican la medida de la radiacin que es
emitida, absorbida o transmitida al interactuar el campo elctrico o magntico de la
misma con los campos elctricos o magnticos de la materia.
Cuando un tomo o una molcula absorben radiacin electromagntica de
longitud de onda , esto significa que absorbe un fotn de esa . Tras esta absorcin
la especie se excita pasando un electrn de un orbital del estado fundamental a un
orbital excitado de energa superior. Los estados excitados de cada tomo o molcula
dependen de su estructura electrnica y que los distinguen del resto. Como
consecuencia, el espectro de absorcin de cada sustancia constituye una verdadera
sea de identidad de la especie.
Los parmetros que se utilizan para describir este proceso son la Transmitancia
que es la relacin entre la luz incidente I 0 y la luz transmitida I y la Absorbancia que
es el logaritmo decimal con signo negativo de la transmitancia:
T = I/I0
A = -log10 T = log (I0/I).
La ley de Lambert-Beer, que es una ley de proporcionalidad que se cumple para
luz monocromtica y disoluciones diluidas de las especies absorbentes (< 001 M),
establece una relacin directa entreala absorbancia (A) y la concentracin de especies
absorbentes (A):
A = log (I0/I) = l C
donde: A: absorbancia; : absortividad; l: longitud de la trayectoria del haz de
radiacin a travs del medio o camino ptico; C: concentracin del analito.

Determinacin del hierro total en vinos mediante espectrofotometra UVvisible.

Los metales que se encuentran en el vino pueden provenir de diversas fuentes:
desde la propia uva hasta los propios recipientes de almacenamiento por la
transferencia de metales que puede ocasionar el ataque de los cidos presentes en el
vino, pasando por las cesiones en el proceso de elaboracin.
Un alto contenido en metales puede provocar un enturbiamiento del vino ya que
dichos metales se insolubilizan quedando afectado el color o limpidez del vino ,
originando lo que se denominan quiebras o depsitos.
La cantidad mxima de Cu y Fe que tolerar un vino antes de que se produzca
una quiebra depende del tipo de vino, composicin y, hasta en cierta medida, de las
condiciones de almacenamiento. Los lmites mximos recomendados son de 05 ppm
para el Cu y 6 ppm para el Fe.
El Fe que contiene el vino (aprox. 3 mg/L) se encuentra en dos formas: Fe 2+ o
Fe3+. El ion Fe3+, en un medio moderadamente cido, reacciona con KSCN, para dar
lugar a una serie de complejos de color rojo: [Fe(SCN)] 2+; [Fe(SCN)2]+; [Fe(SCN)6]3-,
siendo los de estequiometria superior los ms coloreados.
Esta reaccin es la base de la determinacin espectrofotomtrica de Fe en
diferentes matrices, entre ellas los vinos blancos o poco coloreados.
La espectroscopia UV-Visible se basa en el anlisis de la
cantidad
de radiacin electromagntica (en el rango de
longitudes de onda del ultravioleta y visible) que puede absorber
o
transmitir
una muestra en funcin
de la
cantidad
de
sustancia presente.
La absorcin selectiva de radiacin de determinadas longitudes de onda por
parte de un analito permite obtener el espectro de absorcin caracterstico del mismo,
mediante un instrumento denominado espectrofotmetro.
El primer paso a seguir en cualquier anlisis cuantitativo mediante el tipo de
espectroscopia que nos ocupa es la seleccin de la longitud de onda () de media,
que normalmente ser la de mxima absorcin del compuesto, dado que en las
proximidades del mximo se cumple la ley de Lambert-Beer.
Se procede a la medicin de la absorbancia a la seleccionada de una serie de
disoluciones patrn de concentracin creciente y conocida para elaborar la recta de
calibrado representando las absorbancias medidas frente a su correspondiente
concentracin (en el eje de abscisas). El ajuste se har por el mtodo de mnimos
cuadrados y la pendiente de la recta ser . Cuanto mayor sea la pendiente, mayor
exactitud tendremos en la medida. Finalmente, llevando a la grfica obtenida la
absorcin de una muestra determinada, nos proporcionar su concentracin.
Fundamento qumico de la determinacin.

Se basa en la propiedad mencionada ms arriba. En concreto:

Fe3+ + nSCN-

Fe(SCN)n(3-n)

donde n = 1, 2, 3,, 6
La concentracin de los reactivos y el pH del medio condicionan el predominio
de cada uno de los posibles complejos, todos ellos de color rojo, cuya intensidad
aumenta a medida que lo hace el nmero de coordinacin.
En general, en un medio poco cido y con concentraciones moderadas
de tiocianato, se forma el complejo [Fe(SCN)2]+ en cantidad significativa,
mantenindose estable durante, aproximadamente 45 minutos.
No debe usarse cido sulfrico pues los iones sulfato forman complejos
con los iones frricos, disminuyendo la intensidad del color a medida que
aumenta la concentracin de cido. Usar, en su lugar, cido ntrico o cido
clorhdrico.
El espectro de absorcin vara en el intervalo comprendido entre 470 y 530 nm,
dependiendo del medio de reaccin.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Instrumentacin.

Espectofotmetro de absorcin UV-visible.

Cubetas espetrofotomtricas de 1,0 cm de paso ptico.
Balanza analtica.

Material y reactivos.
Material
1 matraz aforado de 100 mL.
2 matraces aforados de 50 mL.
1 matraz aforado de 25 mL.
10 matraces aforados de 10 mL.
Pipetas graduadas de 5 mL y 10 mL.
Gradilla con 20 tubos de ensayo.
Vasos de precipitados.
Cuentagotas.
4 botes de plstico de 50 mL.
Frasco lavador.
Reactivos
cido clorhdrico concentrado 37%.
Perxido de hidrgeno 30%.
Etanol 95%.
Disolucin partrn de in frrico en medio ntrico 1000 mg/L, pH 1,3.
Tiocianato potsico.

1. Preparacin de las disoluciones de trabajo:

o 50 mL de etanol 20% (v/v). Se prepara por dilucin 1:5 (v/v) de etanol
comercial con agua destilada.
o Disolucin de perxido de hidrgeno al 3% (v/v). Se prepara a partir de una
dilucin 1:10 (v/v) de la existente al 30% en el Laboratorio.
o Disolucin patrn de hierro (disolucin madre) de 50 mg/L, que se
proporciona preparada.
o Disolucin de tiocianato potsico 21 M. 25 mL.
2. Preparacin de las disoluciones de patrn de hierro para la obtencin
del calibrado.
o A partir de la solucin madre de Fe(III) se preparan 6 soluciones patrn de 10
mL de la siguiente forma: Se aade de forma secuencial a cada matraz
aforado de 10 mL: 50 mL de disolucin de etanol al 20% (v/v), 025 mL; 05
mL; 10 mL; 15mL; 20 ,L; 25 mL de la disolucin patrn de hierro de 50
mg/L, respectivamente, para obtener disoluciones patrn que contengan
125; 25; 50; 75; 100 y 125 mg/L de hierro, respectivamente. A
continuacin se adiciona a cada matraz 10 mL de HCl concentrado, 5 gotas
de disolucin de H2O2 al 3% (v/v) y 10 mL de disolucin 21 M de tiocianato
potsico. Se enrasan los matraces con agua destilada y se agitan hasta
homogeneizar.
o Se prepara, adems, un blanco para la recta de calibrado (B 0) que contiene
todos los reactivos excepto el hierro y se aaden de forma secuencial en el
mismo orden que los anteriores.
3. Preparacin de las muestras a analizar.
o La muestra procede de un envase tetra brik, ya abierto, de vino blanco.
o Se va a determinar en ella el contenido total de hierro y el hierro trivalente.
o Para el contenido total de hierro (M1) se toman 70 mL de la muestra de vino
y se lleva a un matraz aforado de 10 mL.
o Se aade de forma secuencial 1 mL de HCl concentrado, 5 gotas de
disolucin de perxido de hidrgeno al 3% (v/v) y 1 mL de disolucin 21 M
de tiocianato potsico. Se enrasa con agua destilada y se agita
vigorosamente.
o Se prepara la muestra (M2) para el hierro trivalente, igual que la muestra
anterior, exceptuando la adicin de agua oxigenada.
4. Preparacin del blanco de la muestra.
o Se preparan sendos blancos B1 y B2, correspondientes a las muestras M1 y
M2, de la misma forma que ellas, con los mismos reactivos a excepcin de las
muestras en s.
Medidas espectrofotomtricas.
Se ajusta el espectrofotmetro a una longitud de onda de 478 nm, usando
una cubeta de 1 cm de paso de luz.
Se ajusta al 0 de absorbancia con el blanco de calibrado.
Se efectan las lecturas con los patrones, comenzando con el de menor
dilucin, obtenindose los siguientes resultados:

Abs
0,178
0,341
0,652
0,976
1,301
1,638

mg/L Patrn
1,25
2,5
5
7,5
10
12,5

Las muestras arrojan los siguientes resultados:

Absorbanci
a
Muestra Media:
1
0.226
1
Lectura
0.225
2
Lectura
0.226
Muestra Media
2
0.114
1
Lectura
0.114
2
Lectura
0.113

RESULTADOS Y CLCULOS

Curva de calibracin, ecuacin y coeficiente de regresin:

Pendiente: 01293.
correlacin: 09999.

Ordenada

en

el

origen:

00124;

Coeficiente

de

Contenidos en hierro:
Total: 165 ppm = 165 mg/L
Frrico: 079 ppm =079 mg/L que representa el 4787% del hierro
total.
Comentario a los datos obtenidos en relacin con los datos de la
bibliografa.

El valor de Fe total est dentro del rango permitido por la legislacin vigente. Los
valores de hierro (II) consultados oscilan entre 090 y 178 ppm frente a las 085 ppm
de la muestra analizada. La variacin observada en la muestra analizada puede ser
debida, casi con toda seguridad, a la exposicin del envase al aire que ha oxidado el
hierro (II) a hierro (III) y ha aumentado, en consecuencia la proporcin de ste.

El valor de la absortividad () es el valor de la pendiente de la recta.

Convirtiendo las concentraciones a moles/L, obtenemos un de 71777 L. mol -1.
cm-1
Lmite de Deteccin
Desviacin estndar 257.10-3. L.D. =771.10-3/01293 = 00596 mg/L =
1067.10-7 mol/L

BIBLIOGRAFA: Gallego Pic A.; Garcinuo Martnez, R.; Morcillo Ortega, M.

Experimentacin en Qumica Analtica. Uned. 2012.Skoog, D.A. et. al. Principios de
Anlisis Instrumental. 5 Ed. MacGraw Hill. ISBN 9788448127756.