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Tecnicascalibracio vr1 PDF
Tecnicascalibracio vr1 PDF
Facultad de Ciencias
Departamento de
Qumica
Mrida - Venezuela
INTRODUCCIN
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14
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BIBLIOGRAFA
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Introduccin
En la aplicacin de un mtodo de anlisis qumico, se llevan a cabo una serie de pasos
consecutivos con la finalidad de obtener la informacin necesaria. Entre estos se tiene: el
muestreo con el objetivo de realizar una seleccin adecuada de la muestra de manera que
sea representativa del problema planteado, el tratamiento de la muestra (llevar la muestra a
un estado adecuado para el anlisis Ejm., disolver un slido), medicin de la seal analtica
de la respuesta instrumental debida al analito, tratamiento de los datos experimentales, y
por ltimo la obtencin del resultado.
Especficamente en esta gua se discuten los diferentes mtodos de calibrado que se utilizan
una vez que se tiene la seal analtica, ya que las concentraciones qumicas de especies de
inters, se obtienen a travs de medidas indirectas que se basan en mediciones directas con
calibracin. El trmino calibracin, se refiere a la determinacin de la relacin entre la
concentracin del analito contenido en un estndar y la respuesta debido a la presencia del
analito por la tcnica de medida.
Por otra parte, los estndares qumicos usados para la calibracin de una metodologa de un
anlisis qumico son en general, sustancias puras, mezclas, disoluciones, gases, aleaciones
sustancias biolgicas. Estos estndares tambin son utilizados para determinar factores de
recuperacin del mtodo.
Los mtodos de calibracin se pueden dividir en dos tipos principales: los que utilizan
estndares externos y los que utilizan estndares aadidos a la muestra.
Un estndar externo se analiza separadamente de la muestra desconocida y una serie de
tales estndares, contiene distintas concentraciones conocidas del analito, junto a la matriz
la cual es similar idntica a la de la muestra. En cuanto a los estndares aadidos, se
requiere agregar una cantidad conocida del estndar a cada muestra que se analiza.
Idealmente, la seal analtica debera representar solo la contribucin del analito, sin
embargo, cuando los componentes de la matriz afectan por exceso defecto la respuesta
instrumental del analito, estamos en presencia de un efecto de matriz.
Los resultados de un anlisis qumico, pueden verse afectados por la presencia de efectos de
matriz por errores inherentes al mtodo en estos casos, se requiere la utilizacin de
mtodos de calibracin que permitan minimizar y/o eliminar estos inconvenientes. Para la
realizacin de un anlisis en el que se presente este tipo de problemas, los mtodos de
calibracin sugeridos son la adicin de estndar y de estndar interno. A continuacin se
discute cada uno de los mtodos de calibracin reportados en la literatura.
Respuesta instrumental
0
1
2
3
4
5
6
7
0,001
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
Una vez que se calibra el instrumento, utilizando los estndares y aplicando el mismo
procedimiento, se miden las muestras de agua y se registran los resultados que se presentan
en la tabla 2.
Respuesta instrumental
A
B
C
0,39
0,45
0,41
Tanto los resultados obtenidos de las seales medidas correspondientes a las soluciones
estndares como a las muestras, deben corregirse utilizando la medida del blanco. Luego se
procede a realizar el anlisis estadstico de la data experimental y la grfica correspondiente.
A partir de la grfica 1, se observa que la relacin entre la respuesta instrumental y la
concentracin de los estndares de cobre, muestran una relacin lineal indicativo de que la
respuesta instrumental es directamente proporcional a la concentracin. Por ello, es posible
relacionar la respuesta del instrumento con el contenido de Cu en las muestras de agua, y la
cual puede expresarse por la ecuacin (1) :
Seal analtica (y) = constante x concentracinestndares + SealBlanco (Ec.1)
Por mnimos cuadrados se obtiene:
Constante = 0,1 seal analtica/concentracin
Intercepto=5,5 E-17 seal analtica
Sustituyendo estos valores en la Ec.1 se obtiene
Seal (y) = 0,1 x concentracin de Cu (mg/L) + 5,5E-17, la cual se utiliza para determinar las
concentraciones de Cu en las muestras de agua potable analizadas, y que se presentan en la
tabla 3.
Seal Analtica
0.8
y = 0,1x + 5,5E-17
R = 1
0.6
0.4
0.2
0
0
Concentracin de Cu (mg/L)
Figura 1. Curva de calibracin sencilla para cobre.
Cu (mg/L)
A
B
C
9,75
11,25
10,25
Si se cumple una relacin lineal entre la seal analtica y el volumen del estndar aadido
(VS), se tiene para la muestra (SM) sin adicin de estndar que:
(Ec.2)
Donde: k corresponde a una constante de la curva de calibrado y CM a la concentracin del
analito en la muestra.
Por otra parte, para una alcuota de muestra con adicin de estndar la seal total (SM+S)
viene dada por la siguiente expresin:
Por: Mara A. Snchez P. Mrida - Venezuela
(Ec.3)
A partir de la Ec.3 una grfica de la SealM+S en funcin de VS es una lnea recta con pendiente
e intercepto igual a:
A partir del cociente del intercepto entre la pendiente se obtiene la Ec.7 y de la que se puede
determinar la concentracin de la muestra:
(Ec.7)
En este caso la CM que se obtiene con la Ec.7 corresponde a la muestra diluida, ya que todos
los estndares con lo que se realiza la curva de calibrado fueron medidos en el volumen final
de dilucin. Siendo necesario considerar el factor de dilucin para obtener el valor real de CM.
(Ec. 8)
Un segundo procedimiento que ser puede llevar a cabo, implica la dilucin de la muestra en
ausencia de estndar y la muestra en presencia del estndar a un volumen final constante
(VT). Las expresiones matemticas que relacionan la seal con la concentracin vienen dadas
en este caso por las Ec. 2 y 3.
Dividiendo la ecuacin 3 entre la ecuacin 2, reordenando, multiplicando y dividiendo por S M,
finalmente se obtiene:
(Ec.12)
(Ec. 13)
Donde,
(Ec. 14)
A partir de la Ec. 14 se obtiene que:
A partir del cociente del intercepto entre la pendiente se obtiene la Ec.15 y de la que se
determina directamente, la concentracin de la muestra:
(Ec.15)
Ejemplo 2: Para la determinacin de aluminio en muestras de agua de ro, se utiliz el
mtodo de adicin de estndar. En todos los casos se empleo un volumen de muestra de 10
mL a las cuales se les adiciono una solucin patrn (S) de aluminio 0,15 mM. Por ltimo, todas
las soluciones se diluyeron a un volumen final de 25 mL, y se obtuvieron los resultados
presentados en la tabla 4.
Seal analtica
Cs x10-5, M
Csalpicadox10-5, M
5,0
10,1
15,1
20,0
0
1,2
2,2
3,6
0
3
6
9
Muestra
Muestra + 2 mL de S
Muestra + 4 mL de S
Muestra + 6 mL de S
pendiente
intercepto
Coeficiente de correlacin
(R2)
416.666 Seal/M
2,5 Seal/M
166.666 Seal/M
5,05 Seal
5,05 Seal
5,05 Seal
0,999
0,999
0,999
Solucin:
a) Aplicando la Ec.(8) se obtiene que C M=3,03E-5 M.
b) A partir de la Ec. (4) se obtiene que C M=3,03E-5 M.
c) Empleando la Ec. (13) se obtiene que C M=3,03E-5 M.
10
20
Seal Analtica
15
y=416.666x +5,05
R2=0,999
10
5
CM
-1.3
0
-0.3
0.7
1.7
2.7
3.7
Tambin se puede realizar la curva de calibrado con adicin de estndar sobre una nica
alcuota de muestra, a la cual se van aadiendo progresivamente, volmenes variables del
estndar, y luego de cada adicin de estndar se realiza la medida de la seal.
En este caso para la muestra sin adicin de estndar, la relacin de la seal analtica con la
concentracin puede expresarse por la Ec.5, mientras que para la muestra con adicin de
estndar:
(Ec.16)
(Ec.17)
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A partir de una grfica de la SealM+S* V/Vo versus Cs(Vs/V0) se obtiene una lnea recta con:
Seal analtica
Seal*V/V0
Cs*Vs/V0
0
100
200
300
400
102
185
250
325
415
0,0000
0,0021
0,0042
0,0062
0,0083
102,00
185,74
252,00
328,90
421,64
0,0000
0,0021
0,0042
0,0063
0,0084
pendiente
36.476,19 Seal/M
37.259,05 Seal/M
intercepto
Coeficiente de
correlacin (R2)
102,2 Seal
101,6 Seal
0,999
0,999
Solucin:
a) Aplicando la Ec. 7 se obtiene que C M=0,00280 M.
b) Usando la definicin de pendiente de la Ec. 17 se obtiene que CM=0,00274 M.
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Respuesta Instrumental
12
10
8
6
4
CM=0,36 unidades
concentracin
2
0
-1.5
-0.5
0.5
1.5
2.5
3.5
4.5
5.5
6.5
Concentracin analito
Figura 3. Comparacin de la curva de calibracin con adicin de estndar y la curva para el
blanco.
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(Ec. 21)
Donde, f corresponde al factor de respuesta f=kM/kEI este debe ser constante en un
determinado intervalo de concentracin. Adems, f tambin viene dado por el producto de la
pendiente de la curva de calibrado por la concentracin del patrn interno, cuando se grfica
la relacin de las seales versus la concentracin del estndar. Mientras que si se grfica la
relacin de las seales versus la relacin de las concentraciones, la pendiente es
directamente el factor de respuesta. Re-escribiendo la Ec. 21 en trminos de los estndares
del analito (CS, SealS), se tiene la expresin que describe la curva de calibrado, dada por:
(Ec. 22)
(C6H6), ppm
(C6D6), ppm
Seal (C6H6)
Seal (C6D6)
1
2
3
1,0
5,0
10,0
10,0
10,0
10,0
304
3520
3025
2992
6145
2819
15
1.2
y=0,108x + 0,009
0.9
0.6
0.3
0
0
12
Naftaleno, ppm
Figura 4. Curva de calibracin de estndar interno.
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Lmite de cuantificacin (LOQ): indica la mnima concentracin de analito con que se puede
realizar medidas precisas. Matemticamente, se define como el cociente de diez veces la
desviacin estndar de la medida del blanco ( b) entre la pendiente (m) de la curva de
calibracin.
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Bibliografa
D. A. Skoog y J. L. Leary, "Anlisis Instrumental", 4ta Edicin, McGraw-Hill, Espaa
1993.
D. Skoog, D. West, J. Holler y S. Crouch, Fundamentos de Qumica Analtica, 8ta
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B. Welz, Atomic Absorption Spectrometry, 2da Edicin, VCH, Alemania, 1985.
D. C. Harris, Anlisis qumico cuantitativo, 6ta Edicin, Reverte, Espaa 2007.
Galen W. Ewing, Instrumental methods of chemical analysis, 2da Edicin, McGrawHill, New York, 1960.
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