Análisis de Anfetaminas

NACIONES UNIDAS
OFICINA CONTRA LA DROGA Y EL DELITO
MTODOS RECOMENDADOS
PARA LA IDENTIFICACIN Y EL ANLISIS DE
ANFETAMINA, METANFETAMINA
Y SUS ANLOGOS CON ANILLO
SUSTITUIDO
EN MATERIALES DECOMISADOS
(Revisados y actualizados)
MANUAL PARA USO

DE LABORATORIOS NACIONALES DE ENSAYO
DE ESTUPEFACIENTES
V.05-86469
Seccin de Laboratorio y Asuntos Cientficos

OFICINA DE LAS NACIONES UNIDAS CONTRA LA DROGA Y EL DELITO
Viena
MTODOS RECOMENDADOS
PARA LA IDENTIFICACIN Y EL ANLISIS DE
ANFETAMINA, METANFETAMINA
Y SUS ANLOGOS CON ANILLO
SUSTITUIDO
EN MATERIALES DECOMISADOS
(Revisados y actualizados)
MANUAL PARA USO

DE LABORATORIOS NACIONALES DE ENSAYO
DE ESTUPEFACIENTES
NACIONES UNIDAS
Nueva York, 2005
La mencin de nombres de empresas y productos comerciales no implica

opinin alguna de parte de las Naciones Unidas.
La presente publicacin no ha pasado por los servicios de edicin.
ST/NAR/34
AGRADECIMIENTOS
La Seccin de Laboratorio y Asuntos Cientficos de la ONUDD desea expresar su
agradecimiento a los expertos que participaron en la Reunin de Consulta sobre El examen de
los mtodos para la identificacin y el anlisis de estimulantes de tipo anfetamnico y sus
anlogos con anillo sustituido en material decomisado por su contribucin al contenido del
presente manual.
Sra. Rosa Alis Rodrguez, Laboratorio de Drogas y Sanidad de Baleares, Palma de Mallorca
(Espaa)
Dr. Hans Bergkvist, SKL Laboratorio Nacional de Ciencias Forenses, Linkping (Suecia)
Sra. Warank Boonchuay, Divisin de Anlisis de Estupefacientes, Departamento de Ciencias
Mdicas, Ministerio de Salud Pblica, Nonthaburi (Tailandia)
Dr. Rainer Dahlenburg, Bundeskriminalamt / KT34, Wiesbaden (Alemania)
Sr. Adrian V. Kemmenoe, The Forensic Science Service, Birmingham Laboratory, Birmingham
(Reino Unido)
Dr. Tohru Kishi, Instituto Nacional de Investigacin de Ciencia Policial, Chiba, Japn
Dr. Waldemar Krawczyk, Laboratorio Forense Central de Polica, Ministerio del Interior y
Administracin, Varsovia, Polonia
Sr. Ira Lurie, Special Testing and Research Laboratory, Drug Enforcement Administration,
McLean, Virginia (Estados Unidos de Amrica)
Dr. Yukiko Makino, Departamento de Fiscalizacin de Estupefacientes, Kanto-Shinetsu Oficina
de Salud y Bienestar, Ministerio de Salud, Trabajo y Bienestar, Tokio (Japn)
Sr. Tim McKibben, Special Testing and Research Laboratory, Drug Enforcement Administration,
McLean, Virginia (USA)
Sra. Anneke Poortman, Laboratorio de Ciencias Forenses, Ministerio de Justicia, Rijswijk (Pases
Bajos)
Sra. Jana Skopec, Australian Government Analytical Laboratories, Pymble, NSW (Australia)
Sr. Takahiro Terasaki, Kanto-Shinetsu Oficina Regional de Fiscalizacin de Estupefacientes,
Ministerio de Salud, Trabajo y Bienestar, Tokio (Japn)
La Seccin de Laboratorio y Asuntos Cientficos de la ONUDD desea tambin expresar su
agradecimiento a la Sra. Jana Skopec por la revisin, actualizacin y finalizacin del manuscrito,
tambin con contribuciones adicionales de los participantes en la reunin1.
Tambin se agradece mucho la revisin del proyecto del manual que hizo el Dr. Ken Tanaka, de la
Agencia Nacional de Polica del Japn.
iii
ndice
I.
INTRODUCCIN ..........................................................................................................
II.
EMPLEO DEL MANUAL ...............................................................................................
III.
CLASIFICACIN / DEFINICIONES..............................................................................
IV.
DESCRIPCIN DE LOS COMPUESTOS PUROS ......................................................
A.
Estereoqumica ....................................................................................................
B.
Caractersticas fsicas ..........................................................................................
FABRICACIN ILCITA DE ETA ..................................................................................
A.
Sntesis de la anfetamina.....................................................................................
B.
Sntesis de la metanfetamina...............................................................................
C.
Sntesis de ETA con anillo sustituido ...................................................................
10
ANLISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO DE ETA ................................................
13
V.
VI.
A.
Ensayos presuntivos ............................................................................................
13
1.
Ensayos cromticos.....................................................................................
13
2.
Ensayo de aniones ......................................................................................
17
3.
Ensayos de microcristales ...........................................................................
19
B.
Cromatografa de capa delgada (CCD) ..............................................................
19
C.
Cromatografa en fase gaseosa (CG) detector de ionizacin por llama (FID)
25
1.
Anlisis cualitativo .......................................................................................
26
2.
Anlisis cuantitativo .....................................................................................
27
i.
Mtodo A: mtodo estndar nico ........................................................
27
ii.
Mtodo B: mtodo estndar mltiple sin derivatizacin ......................
29
iii. Mtodo B: mtodo estndar mltiple con derivatizacin .....................
31
D.
Cromatografa en fase gaseosa espectrometra de masas (CG-EM) ............
31
E.
Cromatografa lquida de gran rendimiento (CLGR) ...........................................
33
F.
Espectrometra infrarroja transformada de Fourier (FTIR) .................................
35
G.
Anlisis de ismeros pticos................................................................................
37
1.
Punto de fusin ............................................................................................
38
2.
Ensayos de microcristales ...........................................................................
38
3.
Tcnicas instrumentales ..............................................................................
40
i.
Tcnicas de CG ....................................................................................
40
ii.
Tcnicas de CLGR................................................................................
42
iii. Tcnicas de EC.....................................................................................
42
iv. Tcnicas IR ...........................................................................................
43
VII. OTRAS TCNICAS ANALTICAS PARA EL ANLISIS DE ETA.................................
45
A.
Tcnicas de resonancia magntica nuclear H (RMN) .......................................
45
B.
Electroforesis capilar (EC) ..................................................................................
46
C.
Cromatografa en fase slida microextraccin en fase slida (CG-SPME)
46
1.
Mtodo de anlisis de cabeza ....................................................................
47
2.
Anlisis (de trazas) de muestras acuosas..................................................
47
Cromatografa en fase gaseosa espectroscopa infrarroja transformada de

Fourier (CG-FTIR) ...............................................................................................
47
ANEXOS................................................................................................................................
49
D.
vi
I.
INTRODUCCIN
En el plano internacional la atencin se centra cada vez ms en una cuestin de importancia

creciente: los estimulantes de tipo anfetamnico (ETA). En particular durante los ltimos 10 a 15
aos, el uso indebido de ETA relacionado con las anfetaminas (anfetamina y metanfetamina) y
sustancias del grupo xtasis (MDMA, MDA, MDEA, etc.), ha pasado a ser un problema mundial.
Aunque hay diferencias regionales, en la actualidad ningn pas est a salvo de una de las
mltiples facetas de la fabricacin, el trfico o el uso indebido de ETA.
Esta nueva situacin, que con frecuencia abarca ETA nuevos y desconocidos, o combinaciones,
y las tendencias del trfico plantean un desafo tanto a las autoridades nacionales encargadas de
hacer cumplir la ley como al personal cientfico de los laboratorios forenses.
Hoy en da, los analistas deben estar en condiciones de analizar una amplia gama de sustancias
y preparados, y deben utilizar mtodos ms precisos y cientficos de identificacin y anlisis a fin
de hacer frente al mayor nmero de anlisis necesarios y a los requerimientos de las leyes
nacionales ms estrictas contra las drogas. Adems, el carcter internacional del trfico de
drogas requiere el intercambio oportuno de datos analticos entre laboratorios y los servicios de
represin en los planos nacional, regional e internacional. Por estas razones, la Seccin de
Laboratorio y Asuntos Cientficos de la ONUDD comenz a principios de los aos 80 a ejecutar
un programa de armonizacin y establecimiento de mtodos de ensayo recomendados para
laboratorios nacionales de ensayo de drogas.
En septiembre de 1998, la Seccin de Laboratorio y Asuntos Cientficos de la ONUDD, en
cooperacin con el Servicio de Ciencias Forenses del Reino Unido, organiz una reunin
consultiva con la participacin de 13 expertos para examinar mtodos para la identificacin y el
anlisis de estimulantes de tipo anfetamnico (ETA) y sus anlogos con anillo sustituido en
material decomisado. El presente manual refleja las conclusiones de esa reunin, que fueron
revisadas y actualizadas nuevamente en 2004/2005. Ofrece asistencia prctica a las autoridades
nacionales describiendo mtodos recomendados para su empleo en laboratorios de ensayo de
drogas con miras a identificar y analizar estimulantes de tipo anfetamnico (ETA) y sus anlogos
con anillo sustituido.
El presente manual forma parte de una serie de publicaciones similares que tratan de la
identificacin y el anlisis de diversos grupos de drogas sometidas a fiscalizacin internacional.
Combina y reemplaza manuales publicados anteriormente sobre Mtodos recomendados para
el ensayo de anfetamina y metanfetamina (ST/NAR/9, 1987) y Mtodos recomendados para el
ensayo de los derivados anfetamnicos ilcitos con anillo sustituido (ST/NAR/12, 1988).
El presente manual y los anteriores proponen enfoques que pueden ayudar a los analistas de
drogas a seleccionar mtodos apropiados a la muestra que se examina, con la posibilidad
tambin de adaptarlos al nivel de adelanto de los diferentes laboratorios. Por primera vez en esta
serie de publicaciones, el presente manual tiene tambin anexos con mtodos validados
seleccionados. La mayora de los mtodos que se describen han sido publicados en la
bibliografa cientfica, y han sido utilizados durante un cierto nmero de aos por laboratorios de
reputacin conocida. Al identificar esos mtodos, la Reunin Consultiva tuvo presente que haba
varios otros mtodos publicados en la literatura de las ciencias forenses que tambin producan
resultados aceptables.
El presente manual se limita a los mtodos analticos para los ETA. Un manual separado sobre
tcnicas analticas ms generales, y sus caractersticas y empleos prcticos para el anlisis de
drogas, complementa esta serie de manuales sobre mtodos recomendados.
II.
EMPLEO DEL MANUAL
No todos los mtodos descritos en el presente manual deben aplicarse a todas las muestras
sospechosas de ser o contener anfetamina, metanfetamina u otros ETA. La eleccin del mtodo
y el enfoque de su anlisis quedan a la discrecin de los analistas y dependen del tipo de droga
de que se trate, la disponibilidad de los instrumentos y los materiales de referencia apropiados,
as como del nivel de prueba jurdicamente aceptable en la jurisdiccin en que trabajan los
analistas.
Por consiguiente, si bien se reconoce que los requisitos exclusivos de diferentes jurisdicciones
pueden determinar las prcticas que aplican los diferentes laboratorios, las Buenas Prcticas de
Laboratorio exigen que un enfoque analtico para determinar la identidad de una sustancia
sometida a fiscalizacin en material sospechoso comprenda, como mnimo, la determinacin de
por lo menos dos parmetros no relacionados entre s. La seleccin de esos parmetros en
cualquier caso particular deber tener en cuenta la droga de que se trate y los recursos de
laboratorio de que dispone el analista. Cuando sea posible, se deben utilizar tres tcnicas
analticas totalmente diferentes: ensayos cromticos, cromatografa (por ejemplo, CCD, CG o
CLGR) y espectroscopa (por ejemplo, IR o UV). Las tcnicas compuestas, como CG-EM,
cuentan como dos parmetros, siempre que se utilice la informacin de ambas tcnicas (por
ejemplo, el tiempo de retencin y las caractersticas del espectro de masa).
Se hace hincapi tambin en la importancia fundamental de que los analistas de drogas
dispongan de libros de referencia sobre drogas de uso indebido y tcnicas analticas. Adems, el
analista debe necesariamente estar al corriente de las tendencias del momento en el anlisis de
drogas, ajustndose coherentemente a la literatura sobre ciencias forenses y anlisis de
actualidad. La ONUDD ayuda a los laboratorios a este respecto proporcionando, previa solicitud,
artculos seleccionados de la literatura cientfica.
La Seccin de Laboratorio y Asuntos Cientficos de la ONUDD agradecer todas las
observaciones que se le hagan llegar sobre el contenido y la utilidad del presente manual. Los
comentarios y las sugerencias se pueden dirigir a:
Seccin de Laboratorio y Asuntos Cientficos
Oficina de las Naciones Unidas Contra la Droga y el Delito
Centro Internacional de Viena
P. O. Box 500
A-1400 Viena (Austria)
Fax: +43-1-26060-5967
Correo-e: lab@unodc.org
Todos los manuales, as como las directrices y otras publicaciones cientficas y tcnicas se
pueden solicitar a la direccin mencionada ms arriba.
III.
CLASIFICACIN / DEFINICIONES
Los estimulantes de tipo anfetamnico (ETA) son un grupo de sustancias, en su mayora de

origen sinttico, estructuralmente derivadas de la -fenetilamina (-PEA, grfico 1). Los ETA por
lo general estimulan el sistema nervioso central. Por lo tanto son considerados, en diverso grado,
como prototipos de estimulantes del sistema nervioso central con un potencial de toxicidad
sictica cuando se usan en dosis excesivas o por largos perodos. Los
NH2
ETA pueden producir uno o ms sntomas relacionados con la dosis,
incluido un estado de mayor alerta y euforia, pulsaciones aceleradas,
mayor presin arterial, respiracin y temperatura corporal. El uso
indebido crnico puede producir agitacin, temblores, hipertensin,
prdida de memoria, alucinaciones, episodios sicticos, ilusiones
Grfico 1
paranoicas y comportamientos violentos. La abstinencia despus de
haber tomado dosis altas de ETA puede provocar depresin grave. Los
ETA se producen ilcitamente en una variedad de preparados (polvo, tabletas o cpsulas), y se
pueden inyectar, ingerir oralmente, esnifar o fumar.
La modificacin qumica en los puntos R1 a R9 (grfico 2)2
produce un nmero prcticamente ilimitado de compuestos
farmacolgicamente activos, algunos de los cuales son
estimulantes ms potentes que otros. Aunque hay varias
posibilidades para la modificacin de la cadena lateral, la
sustitucin en el anillo aromtico aporta la mayor contribucin a
diferencias cualitativas sustanciales en los efectos
farmacolgicos.
R9
R4
R1
R8
R7
R5
R2
R3
R6
Grfico 2
En cuanto a las caractersticas estructurales, los ETA se pueden dividir en tres grandes
subgrupos, que corresponden en gran parte a las siguientes pautas de sustitucin en el anillo
aromtico:
i.
ii.
iii.
Ninguna sustitucin en el anillo aromtico (por ejemplo, anfetamina, metanfetamina,

fenetilina);
Grupo metilendioxi: sustitucin en el anillo aromtico (por ejemplo, MDA, MDMA,
MBDB);
Otras pautas de sustitucin, por lo general incluyendo uno o ms de los grupos alkiloxi
(por ejemplo, 2C-B, STP/DOM).
Por razones de orden prctico, el presente manual contiene datos especficos slo para una
seleccin de los ETA ms comunes. En particular, incluye ETA sometidos a fiscalizacin
internacional y ETA seleccionados sometidos a fiscalizacin nacional. Los analistas deben tener
presente que se pueden encontrar otros anlogos estrechamente relacionados. En la mayora de
los casos, la metodologa presentada se podr aplicar tambin a esos anlogos.
Las estructuras qumicas de los ETA seleccionados, junto con los nombres comunes y de la
nomenclatura de la Unin Internacional de Qumica Pura y Aplicada (Nomenclatura IUPAC)
figuran en el anexo I.
No se muestran todos los otros sustituyentes para saturar las valencias, ya que por lo general se utiliza
hidrgeno (H).
IV.
DESCRIPCIN DE LOS COMPUESTOS PUROS
Los ETA se decomisan normalmente en forma de sales, en particular como clorhidratos, sulfatos,
fosfatos o sales de bromuro. No obstante, no es difcil que en las investigaciones de laboratorios
clandestinos se encuentren esos compuestos tambin en forma de bases (por lo general, un
lquido aceitoso de color pardo). Las sales son sustancias cristalinas o en polvo, que varan en
coloracin desde el blanco (similar a los productos de calidad farmacutica) hasta el rosado, el
amarillo o el pardo. Con frecuencia se encuentran hmedos y despiden un olor desagradable
caracterstico, debido a la presencia de residuos de disolventes y/o precursores.
Los ETA tambin se pueden encontrar en forma de tabletas. Adems de los ETA activos, las
tabletas suelen contener diferentes adulterantes, agentes reductores, colores de alimentos
comunes y/o diferentes excipientes y agentes aglutinantes.
Anfetamina
La anfetamina ilcita se suele encontrar en forma de polvo como sal sulfatada, y rara vez como
tableta. En los laboratorios clandestinos se suele decomisar anfetamina base, normalmente
como lquido aceitoso pardo con un olor desagradable caracterstico de 1-fenil-2-propanona (P-2P) y/o residuos de disolvente.
Metanfetamina
La metanfetamina fabricada en forma ilcita est disponible en diferentes formas, segn la regin
geogrfica. Estas formas incluyen el polvo, los cristales (comnmente conocidos como Cristal,
Ice o Shabu) y las tabletas (comnmente conocidas como Yaba). La forma de sal ms
comn es el clorhidrato.
ETA con anillo sustituido con un grupo metilendioxi
MDMA, MDA y MDEA se encuentran comnmente como tabletas que pueden estar marcadas
con un emblema. Rara vez se encuentran en forma de polvos, pero stos contienen
concentraciones elevadas de sustancias activas. Las tabletas suelen tener colores brillantes y
con frecuencia varan en tamao. El contenido de droga suele oscilar entre 40 y 140 mg. Se
sabe de diferencias regionales en el contenido de droga y cambios que se producen con el
tiempo. En Europa, por ejemplo, el contenido medio de MDMA en las tabletas de xtasis ha
bajado a unos 60-70 mg (en comparacin con unos 100 mg a mediados de los aos 90).
La forma de sal de ETA de tipo metilendioxi que se encuentra con ms frecuencia es el
clorhidrato, pero tambin se han visto sales de bromuro y fosfatos.
A.
ESTEREOQUMICA
La mayora de los ETA tienen por lo menos un centro quiral y, por lo tanto, pueden encontrarse
como mezcla racmica o como enantimeros individuales3. En los mercados ilcitos, la mayora
de los ETA se encuentran en un compuesto estereoqumico tpico. La anfetamina, por ejemplo, y
la mayora de los ETA con anillo sustituido, se encuentran normalmente como racematos,
mientras que la metanfetamina se suele encontrar como enantimero S- o dextro (tambin
3
Los trminos (d) o (+), (l) o () y (d, l) o () se utilizan normalmente para designar la rotacin ptica de
sustancias quirales. (R) y (S) describen la configuracin estrica absoluta de sustituyentes en centros
quirales individuales, y se prefieren sobre todo en el caso de los diasteremeros.
conocido como Ice o Shabu), adems del racemato. En el captulo VI.G., infra, se describe el
anlisis de ismeros pticos.
B.
CARACTERSTICAS FSICAS
Puntos de fusin y de ebullicin

Se conocen los puntos de fusin y/o ebullicin de los ETA que se encuentran con ms
frecuencia. Los analistas deben tener presente, sin embargo, que esos datos se refieren a
sustancias puras4. Con excepcin de los ETA de alta pureza, como la metanfetamina cristalina
(Ice), los puntos de fusin se deben utilizar, por lo tanto, slo como ensayo presuntivo (respecto
del uso de los puntos de fusin para la diferenciacin de ismeros, vase el captulo VI.G.1,
infra).
Solubilidades
Las solubilidades de ETA seleccionados y sus sales se proporcionan en la seccin sobre ensayo
de aniones (pgina 17, infra). La recristalizacin selectiva basada en las diferencias de
solubilidad se puede utilizar para la separacin de algunas sales de ETA (vase el captulo VI.F.
sobre FTIR).
Datos espectroscpicos
Los datos del anlisis de espectro de masa (EM), infrarrojo (IR) y de resonancia magntica
nuclear (RMN) de los ETA ms comunes aparecen en ediciones anteriores de los dos manuales
de las Naciones Unidas relacionados con el anlisis de ETA, es decir, Mtodos recomendados
para el ensayo de anfetamina y metanfetamina (ST/NAR/9) y Mtodos recomendados para el
ensayo de los derivados anfetamnicos ilcitos con anillo sustituido (ST/NAR/12). Los datos
tambin se pueden encontrar en la pgina web de la Seccin de Laboratorio y Asuntos
Cientficos.
Los analistas tambin deben tener presente que los puntos de fusin de algunos ETA pueden variar en
funcin del disolvente que se utilice para la cristalizacin.
V.
FABRICACIN ILCITA DE ETA
El conocimiento del mtodo utilizado en la fabricacin ilcita de drogas de uso indebido puede
cumplir una funcin importante en la interpretacin de los resultados de anlisis, especialmente
en casos en que se han realizado anlisis ms a fondo de impurezas y subproductos de la
fabricacin, denominados estudios de perfil de impurezas.
El uso de mtodos de sntesis obtenidos o publicados ilcitamente (literatura subterrnea o
Internet), los qumicos clandestinos sin experiencia, el equipo de laboratorio inapropiado y la
falta de control de calidad en los laboratorios suelen dar por resultado productos impuros y de
calidad inferior, y variaciones en la calidad y la potencia. En consecuencia, las drogas fabricadas
ilcitamente suelen contener subproductos e intermedios derivados de materias primas con
impurezas, reacciones incompletas y purificacin inadecuada de los intermedios y el producto
sinttico final. Los tipos y las cantidades de impurezas que se encuentran en muestras de ETA
ilcitos (el perfil de impurezas) dependen en gran parte de los mtodos de sntesis, las
proporciones, la fuente y la pureza de las materias primas, las condiciones de la reaccin y los
procesos de purificacin, si los hubiere.
La presencia o ausencia de impurezas especficas (marcadores) puede ser til para determinar
el mtodo de sntesis empleado y las materias primas (precursores) utilizadas. El anlisis de
disolventes puede aumentar el cuerpo de informacin y, de esa forma, puede constituir un
instrumento til para la comparacin y caracterizacin de muestras de ETA.
Si bien los estudios de perfil de impurezas no son el tema del presente manual, algunos de los
mtodos descritos se pueden adaptar para ese propsito5.
En la literatura se encuentran descripciones de varios mtodos de sntesis de ETA que utilizan
los fabricantes ilcitos o clandestinos. Los mtodos de sntesis de uso ms comn para la
fabricacin ilcita de anfetamina se pueden modificar tambin para producir metanfetamina o
anfetaminas con anillo sustituido. Esto se logra frecuentemente sustituyendo la fuente amina o la
fuente del anillo aromtico, respectivamente, durante el proceso de reaccin. En general, la
disponibilidad de precursores determina en gran medida la eleccin del mtodo de sntesis
utilizado en las operaciones ilcitas.
A continuacin se presentan descripciones breves de los mtodos de sntesis ms comnmente
utilizados para la anfetamina, la metanfetamina y la MDMA6.
Los mtodos de sntesis se clasifican sobre la base de los tipos de reduccin utilizados en la
reaccin y del mecanismo de reduccin. En la prctica, muchas de esas reacciones se conocen
por nombres populares como mtodo Leuckart, o mtodos del cido hidridico/fsforo rojo,
oxima, nitrostireno, Birch o Emde. Esos nombres populares se basan en el qumico que
descubri el mtodo, o en los reactivos caractersticos o los intermedios importantes. Siempre
que es posible se incluyen los nombres populares.
Para una introduccin general a este tema, se remite al lector al manual de las Naciones Unidas
Caracterizacin de drogas y elaboracin de perfiles de impurezas (ST/NAR/32/Rev.1, 2001); para
mtodos y enfoques ms especficos para la elaboracin de perfiles de impurezas de la metanfetamina,
vase tambin ONUDD, publicacin cientfica y tcnica No. 17 (SCITEC/17), 2000.
6
Para ms detalles, se remite al lector al manual de las Naciones Unidas Clandestine manufacture of
substances under internacional control (ST/NAR/10/Rev. 2, 1998).
A.
SNTESIS DE LA ANFETAMINA
La reaccin central de todos los mtodos utilizados para la sntesis de la anfetamina se basa en
la reduccin cataltica del 1-fenil-2-propanona (P-2-P, bencil metil ketona, BMK, fenilacetona), en
presencia de amonaco o metilamina. Los mtodos de reduccin ms populares de la actualidad
son el mtodo Leuckart (reduccin no metlica) y el mtodo de reduccin metlica cataltica
(aminacin reductiva, hidrogenacin cataltica o hidrogenlisis).
Reaccin Leuckart (reduccin no metlica)
En razn de su sencillez, la reaccin Leuckart sigue siendo uno de los mtodos de sntesis
ms populares para la fabricacin ilcita de anfetaminas. La sntesis Leuckart es una reduccin
no metlica que normalmente se realiza en tres etapas.
Para la sntesis de la anfetamina, se calienta una mezcla de P-2-P y formamida (algunas veces
en presencia de cido frmico), o formiato de amonio hasta que se obtiene una reaccin de
condensacin en el producto intermedio N-formilanfetamina. En la segunda etapa, la Nformilanfetamina se hidroliza, normalmente utilizando cido clorhdrico (vase el grfico 3). La
mezcla de la reaccin se hace bsica, se asla y se destila (vapor). En la etapa final, el producto
se precipita de la solucin, normalmente como sal sulfatada. La anfetamina base es un lquido
aceitoso con un olor a pescado y amina caracterstico.
Grfico 3. Reaccin Leuckart utilizada en la fabricacin ilcita de anfetamina

El mtodo Leuckart es uno de los ms estudiados. En la literatura se identifican y describen
varias impurezas especficas del mtodo. Las impurezas ms prominentes son el intermedio Nformilanfetamina (por lo general, arrastrado al producto final) y 4-metil-5-fenil pirimidina. Otros
mtodos sintticos no dan tantas impurezas especficas como el mtodo Leuckart.
Aminacin reductiva (reduccin metlica cataltica)
La aminacin reductiva es un proceso de reduccin qumica o cataltica de aldehdos y cetonas
en presencia de amonaco, o una amina primaria o secundaria, que resulta en la amina
relacionada de orden superior. El mecanismo de reaccin pasa por la formacin de una imina o
producto intermedio de iminio por la reaccin de un compuesto de carbonilo con un compuesto
amino apropiado, seguida de la reduccin. En la sntesis de la anfetamina que utiliza mtodos
de aminacin reductiva se emplea P-2-P y un catalizador preferido. Los mtodos utilizados con
ms frecuencia se pueden dividir en tres tipos diferentes basados en las especies de reduccin:
a)
b)
c)
Reduccin cataltica heterognea utilizando xido de platino, paladio o nquel Raney;

Reduccin metlica por disolucin utilizando aluminio, zinc o amalgamas de
magnesio;
Reduccin metlica utilizando hidruro de aluminio-litio (LiAlH4), borohidruro de sodio
(NaBH4) o, con menos frecuencia, cianoborohidruro de sodio (NaCNBH3).
La reduccin cataltica heterognea se logra normalmente utilizando una mezcla de P-2-P y gas
de amonaco cargado con hidrgeno en presencia de un catalizador seleccionado. El paladio en
carbn (Pd/C) o el xido de platino son los catalizadores de uso ms comn, seguidos por el
nquel Raney. Las reducciones se logran normalmente a baja presin y baja temperatura. En
raras ocasiones, tambin se han encontrado aminaciones a alta presin en un reactor a presin
Parr (presin o bomba de tubo).
La reduccin metlica por disolucin utilizando aluminio, zinc o amalgamas de magnesio es uno
de los mtodos de aminacin reductiva de uso ms comn. El procedimiento ms popular
emplea amalgama de aluminio y mercurio (Al-Hg). El mecanismo de reduccin de la amalgama
se produce mediante la reduccin de un aducto de base Schiff de P-2-P y la amina apropiada.
En condiciones de clandestinidad difciles, este mtodo utiliza un recolector de aluminio o
arenisca, y cloruro de mercurio (HgCl2).
Las impurezas ms caractersticas de las aminaciones reductivas son las bases Schiff, que se
supone son formadas por la condensacin de P-2-P y anfetamina, pero no son impurezas
especficas del mtodo y pueden estar presentes en cualquier procedimiento de sntesis que
incluya P-2-P. Los compuestos de tipo P-2-P e imina tambin pueden aparecer como impurezas.
Las impurezas inorgnicas resultantes del empleo de un catalizador determinado pueden servir
de marcadores.
Otros mtodos de aminacin reductiva de uso menos frecuente son las reducciones de hidruro
metlico, como el mtodo del nitropropano y el mtodo de la oxima, denominados en funcin
de los intermedios caractersticos (fenil-nitropropeno y oxima, respectivamente), que se forman
durante la reaccin.
El mtodo de la oxima es una reaccin de P-2-P con hidroxilamina. El intermedio de oxima es
posteriormente hidrogenado para obtener anfetamina. Un intermedio de oxima suele ser
hidrolizado por reduccin metlica utilizando Pd/H2, o por reduccin de hidruro metlico
utilizando LiAlH4.
El mtodo del nitropropeno comprende la condensacin de benzaldehdo con nitroetano, que
produce 1-fenil-2-nitropropeno. La hidrogenacin subsiguiente del doble enlace y la reduccin del
grupo nitro produce anfetamina. La fase de reduccin se completa por lo general utilizando Pd/H2
o LiAlH4.
B. SNTESIS DE LA METANFETAMINA
La metanfetamina tambin se puede sintetizar utilizando los mtodos mencionados ms arriba
pero sustituyendo el amonaco con metilamina.
Ahora bien, los mtodos de sntesis de la metanfetamina ms populares emplean efedrina o
seudoefedrina como precursor, en lugar de P-2-P. Las reacciones se logran por lo general
mediante una de las reacciones siguientes (vase el grfico 4):
a)
b)
Reducciones no metlicas, como el mtodo 'cido hidridico/fsforo rojo;

La reduccin metlica por disolucin, como la reduccin Birch; o
c)
La reduccin cataltica heterognea utilizando tionilcloruro y paladio u xido de platino

como catalizador (mtodo Emde).
Es raro encontrar otras reacciones, como el mtodo del nitropropeno o el de la oxima.
Grfico 4. Mtodos comunes para la fabricacin ilcita de metanfetamina

La efedrina y la seudoefedrina estn presentes en muchos preparados farmacuticos contra la
tos, muchos de los cuales se pueden obtener sin receta. La hierba china Ma-huang, que se
encuentra en varios suplementos alimenticios y productos de estilo de vida, es otra fuente de
esos precursores.
A diferencia del P-2-P, la efedrina y la seudoefedrina son sustancias quirales. Son
diasteremeros y existen en una dos formas enantiomricas cada una, (d- y l-efedrina, y d- y lseudoefedrina), adems de dos racematos. El anlisis quiral de los ismeros de efedrina o
seudoefedrina tambin puede ayudar a determinar el proceso de fabricacin de la metanfetamina
ilcita.
Todos los mtodos de fabricacin que comienzan con la produccin de I-efedrina o dseudoefedrina producen (+)-(S)-metanfetamina como nico ismero ptico, que es por lo menos
dos veces ms potente que la mezcla racmica producida por reacciones a partir de P-2-P.
El mtodo del cido hidridico-fsforo rojo se realiza normalmente calentando efedrina o
seudoefedrina con fsforo rojo y cido hidridico. La mezcla de la reaccin se filtra, se hace
bsica y se extrae en un disolvente. La metanfetamina base resultante es un lquido aceitoso,
comnmente denominado meth oil. De este lquido se cristalizan sales de clorhidratos
utilizando ter/acetona y cido clorhdrico. Alternativamente, un gas de cloruro de hidrgeno (de
un cilindro, una solucin acuosa o generado utilizando cido sulfrico y cloruro sdico) se bulle
en el meth oil para que la sal clorhdrica precipite fuera de la solucin.
El Hl y el fsforo rojo se pueden sustituir por yodo y cido hipofosfrico (hipofosfato sdico), o
por agua y yodo. Raras veces, la mezcla de la reaccin, a veces denominada ox-blood, se
utiliza sin ms purificacin, principalmente por inyeccin. La mezcla de color rojo, causada por un
exceso de yodo, contiene meth oil y diferentes impurezas provenientes del mtodo Hl/fsforo
rojo.
Las impurezas tpicas encontradas en muestras producidas por reducciones con Hl/fsforo rojo o
yodo/cido hipofosfrico son efedrina o seudoefedrina, aziridinas y dimetilnaftalinas. Las
aziridinas no se pueden considerar como impurezas especficas del mtodo, dado que tambin
se producen a partir de la clorefedrina por eliminacin algena y cierre de los anillos (mtodo
Emde), o de un intermedio de oxima y N-hidroximetanfetamina.
El proceso de la reduccin Birch se realiza mediante una reduccin metlica por disolucin de
efedrina o seudoefedrina en presencia de amonaco. La reaccin comprende mezclar efedrina o
seudoefedrina con gases de amonaco anhidro y metal de sodio o de litio. La mezcla se deja
reposar hasta que se evapora el amonaco. La separacin del meth oil se realiza mediante
extraccin directa por disolvente y filtracin. El producto de la reaccin se purifica luego mediante
la formacin de la sal de clorhidrato y la recristalizacin. En la prctica ilcita, la reduccin Birch
se realiza normalmente en una reaccin de un paso utilizando amonaco, que est disponible en
grandes cantidades, y cintas de litio de bateras. Pese a esto, la reduccin Birch produce
normalmente un producto final muy limpio. En la literatura se informa de varias impurezas
especficas del mtodo, como el N-metil-1-(1,4-ciclohexadienil))-2-propanamina. La reaccin
que incluye amonaco anhidro es peligrosa y las explosiones en los laboratorios
clandestinos no son raras.
En el mtodo Emde, la efedrina o la seudoefedrina se hacen reaccionar normalmente con
tionilcloruro para obtener el intermedio clorefedrina, que luego es hidrogenado sobre un
catalizador de platino o paladio para obtener metanfetamina. En los procedimientos analticos
basados en la CG, el intermedio clorefedrina se encuentra raras veces como impureza, porque
se descompone durante el anlisis para formar aziridinas. La clorefedrina tambin se
descompone rpidamente durante la extraccin bsica de metanfetamina.
C. SNTESIS DE ETA CON ANILLO SUSTITUIDO

El estimulante anfetamnico de tipo metilendioxi que se encuentra ms comnmente es MDMA, y
ocasionalmente MDEA y MDA. En general, los mtodos de sntesis utilizados para la MDMA se
aplican, con ligeras modificaciones, a otros anlogos metilendioxi con anillo sustituido.
El principal precursor utilizado para esa sntesis es 3,4-metilendioxifenil-2-propanona (tambin
conocido como 3,4-MDP-2-P, 3,4-metilendioxi-fenilacetona, piperonil metil cetona, o PMK). El
3,4-MDP-2P est disponible en el comercio como precursor sometido a fiscalizacin
internacional.
La MDMA se puede sintetizar tambin a partir del safrol (3,4-metilendioxialilbenceno), ya sea
directamente o utilizando isosafrol obtenido por isomerizacin del safrol. El safrol est disponible
10
en el comercio, o se puede extraer del aceite de sasafrs u otras partes de plantas o aceites
esenciales con alto contenido de safrol. El piperonal (heliotropin, 3,4-metilendioxibenzaldehdo),
un producto qumico industrial de gran uso, es otro precursor alternativo para la sntesis de 3,4MDP-2-P.
El mtodo ms directo para la sntesis de la MDMA es la aminacin reductiva de 3,4-MDP-2-P
con metilamina y gas de hidrgeno sobre un catalizador de platino (reduccin metlica cataltica).
La reduccin se puede lograr tambin mediante una reduccin metlica disolvente utilizando
amalgama de aluminio (hoja de aluminio y mercuriocloro), o por reduccin de hidruro metlico
utilizando cianoborohidruro sdico (vase el grfico 5).
Sustituyendo la metilamina por etilamina se obtiene MDE; el gas de amonaco produce MDA, y la
dimetilamina produce MDDMA.
Un mtodo anlogo para la fabricacin ilcita de anfetamina comnmente utilizado para la
fabricacin ilcita de MDMA es el mtodo Leuckart. Se reducen 3,4-MDP-2-P y Nmetilformamida utilizando cido frmico. El intermedio resultante, N-formil-MDMA se hidroliza por
reflujo con un cido o una base fuerte para producir MDMA.
Grfico 5. Aminacin reductiva utilizada en la fabricacin ilcita de MDMA

El mtodo del nitropropeno adquiri popularidad a principios del decenio de 1990.
Comprende la reaccin de piperonal con nitroetano en presencia de un catalizador bsico,
normalmente n-butilamina. En la literatura se informa de diversos procedimientos para la
produccin del intermedio fenil-nitropropeno, pero normalmente se deja reposar una mezcla de
piperonal y nitroetano durante unos pocos das en la oscuridad. Alternativamente, se produce un
reflujo de piperonal y nitroetano en cido actico y acetato amnico.
Los intermedios formados en estas reacciones son muy caractersticos en cuanto a apariencia, y
por lo general precipitan de la solucin de la reaccin como cristales amarillos brillantes. Para
producir MDA, el intermedio se suele reducir con hidruro de aluminio-litio. Para la sntesis de
MDMA, MDEA u otros ETA, el nitropropeno intermedio se convierte en 3,4-MDP-2-P, que luego
se reduce mediante uno de los mtodos de aminacin reductiva descritos ms arriba. Los
intermedios nitropropeno y nitroestireno son sustancias cristalinas de color amarillo o naranja
brillante.
11
La MDMA tambin se fabrica normalmente utilizando el denominado mtodo del

bromosafrol. La reaccin se produce mediante la brominacin del safrol con cido
hidrobrmico a baja temperatura, seguida de un tratamiento con metilamina para formar el
producto final. El rendimiento depender del contenido de agua de la mezcla de la reaccin. La
sustitucin de la metilamina con otras aminas produce diferentes productos de tipo MDMA (por
ejemplo, MDA, MDEA, o MDDMA).
Las drogas de tipo metoxianfetamina se sintetizan normalmente utilizando aldehdo y nitroetano
con anillos sustituidos apropiados, mientras que para la mescalina, el 2C-B y otras fenetilaminas
con anillo sustituido se utiliza nitrometano.
El 2C-B se fabrica haciendo reaccionar 2,5 dimetoxibenzaldehdo y nitroetano, seguida de una
reduccin LiALH4 para formar 2,5-dimetoxifenetilamina, que es luego brominada para obtener el
producto final.
12
VI.
ANLISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO DE ETA
Por lo general, cuando se intenta determinar la identidad de una sustancia sometida a

fiscalizacin en el material sospechoso, el enfoque analtico debe comprender la determinacin
de por lo menos dos parmetros no correlacionados. Se reconoce que la seleccin de estos
parmetros en cualquier caso particular tendr en cuenta la droga de que se trate y los recursos
de laboratorio de que dispone el analista. Tambin se acepta que los requisitos especiales
establecidos en diferentes jurisdicciones pueden determinar las prcticas que se sigan en un
laboratorio particular.
A. ENSAYOS PRESUNTIVOS
Los ensayos presuntivos son procedimientos de clasificacin rpidos que por lo general
consisten en dos o tres ensayos independientes. Estn diseados para dar una indicacin de la
presencia o ausencia de tipos de drogas en la muestra ensayada y eliminar rpidamente las
muestras negativas. Las buenas tcnicas de ensayos presuntivos, como todas las tcnicas
analticas, maximizan la probabilidad de un resultado verdadero y reducen al mnimo la
probabilidad de un positivo falso. Ahora bien, los ensayos presuntivos no se consideran
suficientes para identificar drogas y los resultados deben ser confirmados mediante otros
ensayos de laboratorio.
En los ltimos tiempos, los ensayos presuntivos se utilizan con ms frecuencia en pruebas de
campo, aunque tambin se realizan en laboratorios como primer procedimiento de clasificacin.
Para la clasificacin de los ETA, se usan normalmente ensayos cromticos, o pruebas rpidas,
aunque tambin se dispone de ensayos de inmunoanlisis y varias tcnicas rpidas y con
instrumentos porttiles. Los mtodos de clasificacin con instrumentos, como el espectrmetro
de movilidad de iones (escaneo de iones), el espectrmetro de masas porttil y los
espectrmetros FTIR o Raman, han obtenido popularidad en los ltimos aos. Se dispone
tambin de muchos estuches de ensayos comerciales para la clasificacin de ETA, aunque
deben ser evaluados internamente en funcin de su especificidad y sensibilidad.
1.
Ensayos cromticos
Los ensayos cromticos suelen ser los ensayos clnicos ms sencillos y ms rpidos que un
analista puede aplicar a una muestra. Los ensayos cromticos son muy sensibles; por lo tanto,
slo se necesitan cantidades muy pequeas de la muestra para completar con xito el ensayo, y
con frecuencia los mejores resultados se obtienen con las cantidades de muestras ms
pequeas, generalmente menos de un miligramo.
Dado que las muestras pueden variar en pureza (concentracin de ETA) y pueden contener
sustancias ajenas, los colores que aparecen en estos ensayos deben interpretarse con cuidado.
Adems, hay que tener presente el aspecto subjetivo de la evaluacin del color.
Tcnicas de ensayos cromticos
Normalmente se utilizan varios reactivos diferentes en los ensayos cromticos de sustancias de
tipo anfetamnico y sus anlogos con anillo sustituido. Los ms importantes para estas
sustancias son los ensayos de Marquis, de Simon y de Chen. El ensayo de Marquis permite
distinguir entre la anfetamina y sus anlogos con anillo sustituido. El ensayo de Simon se utiliza
generalmente para aminas secundarias, por ejemplo, la metanfetamina y las anfetaminas
secundarias con anillo sustituido, incluidas la MDMA y la MDE. Ahora bien, otras aminas
secundarias, por ejemplo la dietilamina y la piperidina, pueden dar colores similares. En general,
13
los colores son intensos pero pueden desaparecer rpidamente en presencia de algunas
impurezas. Por estas razones, es esencial que el analista confirme los resultados del ensayo de
Simon realizando un ensayo suplementario, por ejemplo, un ensayo de Marquis. El ensayo de
Chen se utiliza para distinguir la efedrina, la seudoefedrina, la norefedrina, la fenilpropanolamina
y la metcatinona de la anfetamina y la metanfetamina, que no reaccionan con el reactivo del
ensayo de Chen.
Un cuarto ensayo, el ensayo del cido glico, proporciona un medio simple de distinguir
MDMA, MDA y MDEA de la anfetamina o la metanfetamina, porque reacciona especficamente
con los compuestos aromticos de metilendioxi sustituido. Tambin reaccionan los precursores
que contienen la subestructura metilendioxi, como el safrol y el isosafrol.
MTODOS
En el anexo II se describe la preparacin de reactivos. Los reactivos se deben preparar en el
momento.
Ensayo de Marquis
1)
Colocar una pequea cantidad (1-2 mg de polvo, o 1-2 gotas de lquido) del material
sospechoso en una ranura de una placa de ensayos.
2)
Agregar una gota de reactivo de Marquis 1, luego una gota de reactivo 2, y mezclar.
3)
Observar el color de la mezcla.
Ensayo de Simon
1)
2)
Agregar una gota de reactivo de Simon 1, y mezclar.
3)
Agregar una gota de reactivo de Simon 2, luego una gota de reactivo 3.
4)
Ensayo de Chen
1)
2)
Agregar 2 gotas de reactivo de Chen 1.
3)
Agregar 2 gotas de reactivo de Chen 2, y luego 2 gotas de reactivo 3 y mezclar.
4)
Ensayo del cido glico
1)
2)
Agregar una gota de reactivo de cido glico.
3)
RESULTADOS
En el cuadro 1 se proporcionan resultados de los tres principales ensayos cromticos para la
mayora de los estimulantes de tipo anfetamnico y sus anlogos con anillo sustituido que se
encuentran ms comnmente.
Dado que el ensayo de cido glico se utiliza principalmente para identificar, por lo general, el
sustitutivo metilendioxi del anillo y no un ETA individual con esa subestructura, en este cuadro
los resultados no se incluyen separadamente para sustancias individuales. Un color verde oscuro
14
brillante indica la presencia de MDA, MDMA, MDE, N-hidroxi-MDA o MMDA. En algunos casos,
por ejemplo MDE y N-hidroxi-MDA, el color verde puede cambiar a pardo durante el ensayo.
Cuadro 1. RESULTADOS DE LOS ENSAYOS CROMTICOS
Compuesto
Reactivo
de Marquis
Reactivo
de Simon
Reactivo
de Chen
Anfetamina
Naranja, lentamente
pasando a pardo
SR *
SR *
Catinona
SR
SR *
Pasa gradualmente
del amarillo al
naranja
Dimetilanfetamina
Naranja
SR *
SR *
Efedrina Seudoefedrina
SR
SR *
Prpura
N-Etilanfetamina
Naranja, pasando a
pardo
Metanfetamina
Naranja, lentamente
pasando a pardo
Azul intenso
SR *
Metcatinona
SR
Azul plido,
precipitado como
mancha o anillo
Pasa gradualmente
del amarillo al
naranja
Norefedrina
SR
SR
Prpura
2C-B
Amarillo--> verde
SR *
SR *
2C-T-2
Rosa plido, naranja
SR *
2C-T-7
SR
SR *
DMA
Verde-->verde
oscuro
SR *
DOB
Amarillo--> verde
SR *
DOET
Pardo amarillento
SR *
FLEA
Azul oscuro/negro
MBDB
Azul oscuro/negro
Azul intenso
SR *
MDA
Azul oscuro/negro
SR *
SR *
MDDM
Azul oscuro/negro
MDEA
Azul oscuro/negro
Azul (intenso)-->
pardo
SR *
MDMA
Azul oscuro/negro
Azul intenso
SR *
MDOH
Azul oscuro/negro
MMDA
Prpura
SR *
SR *
4-MTA
SR
SR *
PMA
SR--> verde plido
SR *
STP / DOM
Amarillo
SR *
TMA
Naranja
SR *
SR = sin reaccin. * El color del reactivo se debe considerar negativo.
15
SR *
SR *
Notas analticas
a)
ETA especficos
Dado que los ETA, en especial la metanfetamina y los anlogos con anillo sustituido en Asia
sudoriental, se encuentran con frecuencia en forma de tabletas de colores brillantes, el resultado
de los ensayos cromticos puede quedar oculto, o se puede producir un cambio en el resultado
de esos ensayos.
Aunque se utiliza una gran variedad de colores para producir tabletas de ETA, la mayora de los
colores son solubles en agua, y su solubilidad se puede manipular cambiando el pH de la
solucin. En esos casos, por lo tanto, el anlisis se debe ajustar al procedimiento de extraccin y
se debe eliminar el color totalmente antes de proceder al ensayo cromtico propiamente dicho.
En algunos casos, cuando el ensayo cromtico no se puede interpretar claramente debido a la
presencia de un colorante en la tableta, el procedimiento siguiente suele producir resultados
aceptables:
Colocar una pequea cantidad (aproximadamente 10 mg) de la muestra en un tubo de ensayo
pequeo. Agregar aproximadamente 1 ml de metanol (o una mezcla de 4:1 metanol:cloruro de
metileno). Despus de filtrar la mezcla por lana de vidrio, se la evapora hasta que quede seca.
La muestra se reconstituye en una pequea cantidad de agua y luego se procede a realizar el
ensayo cromtico depositando cuidadosamente la solucin de la muestra acuosa en una placa
de ensayos y agregando el reactivo de color. Dado que la muestra ya est diluida, bastarn 3
gotas de reactivo por una gota de muestra.
La presencia de disolventes y adulterantes tambin puede perturbar las reacciones de coloracin
y dar resultados negativos falsos. El ensayo de Simon puede dar resultados negativos falsos en
muestras de ETA con adulterantes o disolventes; el ensayo de Marquis es menos sensible a las
muestras adulteradas y, por lo tanto, es preferible cuando la concentracin de ETA en la muestra
es muy baja.
b)
General
Los colores descritos son juicios subjetivos debido a que la percepcin de los colores es
individual. Por esta razn, es decir, el aspecto subjetivo de la evaluacin del color, es necesario
que cada analista ensaye estndares de referencia apropiados para asegurar que puede
reconocer cada resultado del ensayo cromtico. Asimismo, es conveniente realizar un ensayo
con una muestra en blanco sin la sustancia de que se trata para asegurar la familiaridad con el
color del reactivo.
Si se realiza adecuadamente, un ensayo de coloracin negativo es por lo general bastante
fidedigno para establecer la ausencia de un compuesto determinado; no obstante, los resultados
positivos son slo indicaciones presuntivas de la posible presencia de un compuesto. Muchos
otros compuestos, con frecuencia benignos y no sometidos a fiscalizacin por las leyes
nacionales o los tratados internacionales, pueden dar colores similares con un reactivo de
ensayo cromtico determinado.
Por lo tanto, es obligatorio que el analista confirme un ensayo cromtico positivo de cualquier
compuesto sometido a fiscalizacin por ley utilizando otros ensayos de laboratorio.
Para eliminar la posibilidad de que una placa de ensayo contaminada d un resultado positivo
falso, conviene colocar el reactivo en la placa y luego agregar una cantidad pequea de la
muestra al reactivo.
16
Lecturas recomendadas
Naciones Unidas (1995), Mtodos para el ensayo inmediato de drogas de uso indebido: Manual
para uso del personal de laboratorios nacionales de estupefacientes y de los organismos de
represin (ST/NAR/13/Rev.1)
S. A. Johns, A. A. Wist y A. R.Najam (1979), Spot tests: a colour chart reference for forensic
chemists, J. Forensic Sci., vol. 24, pgs.631 a 649.
E. Jungreis (1985), Spot test analysis, Clinical, environmental, forensic and geochemical
applications, John Wiley & Sons, Nueva York-Chichester-Brisbane-Toronto-Singapur.
A. C. Moffat, M. D. Osselton y B. Widdop (eds.) (2004), Clarkes Analysis of Drugs and Poisons,
3ra. ed., Pharmaceutical Press, Londres-Chicago.
C. L. ONeil y otros (2000), Validation of twelve chemical spot tests for the detection of drugs of
abuse, Forensic Sci. Int., vol.109, pgs.189 a 201.
R. A. Velapoldi y S. A. Wicks (1974), The use of chemical spot test kits for the presumptive
identification of narcotics and drugs of abuse, J. Forensic Sci., vol. 19, pgs. 636 a 654.
2.
Ensayo de aniones
El ensayo de aniones con fines forenses utiliza normalmente las solubilidades combinadas con
reacciones selectivas en que los resultados estn determinados por la presencia o ausencia, y la
solubilidad, de un precipitado.
A continuacin se describe la solubilidad de diferentes ETA y sus sales en agua y en varios
sistemas de disolventes comunes.
Anfetamina y sus sales
Base
Clorhidrato
Fosfato
Sulfato
Agua
Ligeramente
soluble
Soluble
Soluble
Soluble
Metanol o etanol
Soluble
Soluble
Ligeramente
soluble
Ligeramente
soluble
ter dietlico
Soluble
Insoluble
Insoluble
Insoluble
Cloroformo
Soluble
Soluble
Insoluble
Insoluble
Metanfetamina y sus sales

Base
Clorhidrato
Agua
Ligeramente
soluble
Soluble
Metanol o etanol
Soluble
Soluble
ter dietlico
Soluble
Insoluble
Cloroformo
Soluble
Soluble
17
ETA con anillo sustituido y sus sales

Las bases libres de ETA con anillo sustituido son por lo general insolubles en agua y solubles en
etanol, ter dietlico, cloroformo y otros disolventes orgnicos. Sus sales clorhdricas son
solubles en agua y etanol, ligeramente solubles en cloroformo, e insolubles en ter dietlico. Las
solubilidades de las diferentes sustancias de este grupo dependen del ETA con anillo sustituido
especfico de que se trate.
MTODOS
Todos los reactivos se deben preparar con arreglo a un procedimiento establecido. En el anexo II
se describe detalladamente la preparacin de los reactivos.
Ensayo del nitrato de plata
La muestra del ETA desconocido se disuelve en varias gotas de agua desionizada y se trata con
1-2 gotas de solucin de AgNO3. A continuacin se dan los resultados para los aniones
comunes. Dado que otros aniones pueden dar resultados similares, se deben realizar ensayos
adicionales o trabajos de familiarizacin con las limitaciones del ensayo.
Cloruro Forma un precipitado cremoso que es insoluble en cido ntrico concentrado.
Despus de lavarlo con agua, el precipitado es soluble en una solucin de amonaco diluida, a
partir de la cual se lo puede volver a precipitar aadiendo cido ntrico.
Bromuro Forma un precipitado de color amarillo plido a crema que es insoluble en cido
ntrico. Despus de lavarlo con agua, el precipitado se disuelve muy lentamente en soluciones de
amonaco diluidas y es soluble en soluciones de amonaco concentradas. Se lo puede volver a
precipitar a partir de ambas soluciones agregando cido ntrico.
Yoduro Forma un precipitado amarillo brillante que es ligeramente soluble en una solucin de
amonaco concentrada pero soluble en una solucin de tiosulfato.
Sulfato Forma un precipitado cristalino ligeramente coloreado que se puede identificar
fcilmente colocando la solucin de ensayo en una placa de microscopio y buscando los
caractersticos cristales de sulfato de plata en forma de diamantes.
Fosfato Forma un precipitado amarillo plido, que ese soluble en una solucin de amonaco
diluida, o en cido ntrico fro.
Para las sales sulfatadas y fosfatadas se pueden realizar otros ensayos especficos:
Ensayo de sal sulfatada
La muestra del ETA desconocido (unos 100 mg) se disuelve en agua y se trata con una solucin
de cloruro de bario. Un precipitado blanco, que es insoluble en cido clorhdrico, indica la
presencia de una sal sulfatada.
Ensayo de sal fosfatada
La muestra del ETA desconocido (unos 100 mg) se disuelve en una solucin compuesta de
volmenes iguales (por ejemplo, 1 ml cada uno) de solucin de cido ntrico (10% v/v) y solucin
de molibdato de amonio (10% p/v). Al calentarla lentamente, la formacin de un precipitado de
color amarillo canario brillante, que es soluble en una solucin de amonaco, indica la presencia
de una sal fosfatada.
18
Notas analticas
Dado que todos los ensayos de aniones se realizan en soluciones acuosas, la solubilidad en
agua de las sales de ETA es una condicin para obtener resultados significativos.
Es esencial lavar el precipitado con agua antes de realizar el ensayo de disolucin del
precipitado, a fin de remover cualquier anin soluble (no precipitado).
McKibben, T., Chappell, J. S., Evans, H., Mausolf, N., Analyses of Inorganic Components Found
in Clandestine Drug Laboratory Evidence, J. Cland. Lab. Invest. Chem. Ass., 5(4), 1995, 19 a 33.
3.
Ensayos de microcristales
Los ensayos de microcristales son rpidos, sencillos y extremadamente sensibles para identificar
sustancias y sus ismeros pticos. Comprenden la formacin de cristales a partir de la reaccin
del compuesto objetivo con un reactivo qumico, seguida del anlisis de los cristales resultantes
utilizando un microscopio de polarizacin y comparndolos con los materiales de referencia, por
lo general fotografas de cristales conocidos.
MTODOS
La forma ms simple del ensayo consiste en agregar una gota de un reactivo adecuado a la
sustancia que se ensaya, y observar y analizar luego los cristales formados en el microscopio de
polarizacin.
A fin de mantener un registro preciso, se deben describir las caractersticas principales de los
cristales. El registro ms preciso de los resultados del ensayo son las fotografas. Si no se
dispone de fotografas, un esbozo de las formas de los cristales puede resultar til.
En el captulo Anlisis de ismeros pticos (pgina 37) se describen mtodos y procedimientos
detallados para el ensayo de microcristales de ETA. En el anexo III se dan trminos descriptivos
para las formas de los cristales y fotografas de cristales de los principales ETA, as como los
requisitos en materia de equipo e instrumentos bsicos.
Cunningham, M. D. (1973), Rapid and sensitive technique for the differentiation of the optical
isomeric forms of methamphetamine and amphetamine, Microgram, vol. 6, No.6, pgs.87 a 95.
Fulton, C. C. (1969), Modern Microcrystal Tests for Drugs, Wiley-Interscience, A Division of John
Wiley & Sons, Nueva York-Londres-Sydney-Toronto.
no, M., Microcrystal Test, Japn, 1996
Proporciona una introduccin amplia a la tcnica de los ensayos de microcristales, con fotografas de
resultados de ensayos de microcristales de 39 ETA y sus precursores.
B. CROMATOGRAFA DE CAPA DELGADA (CCD)

La cromatografa de capa delgada (CCD) es una de las tcnicas usadas con ms frecuencia
para separar e identificar drogas fabricadas ilcitamente. Es rpida (un anlisis rara vez toma
19
ms de 30 minutos), sensible (se requieren cantidades inferiores a 1 mg del analito),

extremadamente flexible en las fases estacionaria y mvil y, por lo tanto, adecuada para una
amplia variedad de sustancias en forma de bases o de sales, que van desde los materiales ms
polares hasta los ms no polares. Tambin se presta a una variedad de tcnicas de
visualizacin, y es poco costosa.
Pese a las ventajas obvias de la CCD, en muchos pases no se la acepta como tcnica nica de
identificacin de drogas.
Placas de CCD (fases estacionarias)
Recubrimiento:
Gel de slica G con un espesor de capa de 0,25 mm, y con un

indicador inerte, que fluorece bajo luz UV de longitud de onda de
254 nm
Nota: Las placas preparadas por el analista debe ser activadas antes de
utilizarlas, colocndolas en un horno por lo menos durante 10 a 30 minutos
a 120 C. Las placas se almacenan luego en un desecador libre de grasas
sobre gel de slica azul. La activacin por calor normalmente no se
requiere para capas enlazadas qumicamente (placas comerciales).
Tamaos de placa tpicos:
20x20 cm, 20x10 cm, 10x5 cm (la placa de 10x5 cm se debe utilizar
nicamente con el lado de 10 cm en posicin vertical en el tanque
de CCD.
Sistemas de disolventes (fases mviles)

Sistema A: Metanol
Amonaco concentrado
100
1,5
Sistema B: Acetato etlico

Metanol
Amonaco concentrado
85
10
5
Sistema C: Cicloexano
Tolueno
Dietilamina
75
15
10
En relacin con sistemas de CCD ms normalizados, vase:

Thin-layer chromatographic Rf values of toxicologically relevant substances on standardized
systems, second, revised and enlarged edition, Report XVII of the DFG Commission for clinicaltoxicological analysis, volumen especial del boletn TIAFT, VCH Verlagsgesellschaft mbH, 1992.
MTODOS
A continuacin se proporcionan mtodos recomendados y resultados seleccionados, pero el
analista deber familiarizarse con los resultados especficos para ETA individuales.
Sistemas de disolventes
Preparar sistemas de disolventes de desarrollo en la forma ms precisa posible utilizando
pipetas y cilindros de medicin. Dejar el sistema de disolvente en el tanque de CCD durante un
tiempo suficiente para permitir la saturacin de la fase de vapor antes del anlisis (con tanques
revestidos con papel absorbente, esto toma aproximadamente 5 minutos).
20
Preparacin de muestras y soluciones estndar de ETA

La forma de los estndares y las muestras (en sales o bases), no tiene importancia. Cualquiera
de las dos es satisfactoria. Debido a la naturaleza bsica de los disolventes de desarrollo, los
compuestos emigran como bases libres.
Soluciones estndar de ETA
Las soluciones estndar de ETA se deben preparar a una concentracin de aproximadamente
2 mg/ml en metanol. Deben almacenarse a oscuras y en un lugar fro.
Soluciones de muestras de ETA (muestra de ETA desconocido)
Las soluciones estndar de ETA se deben preparar a una concentracin de aproximadamente
5 mg/ml en metanol. En algunos casos, cuando se sospecha que la pureza del ETA es
demasiado baja debido a que ha sido adulterado, quiz sea necesario preparar soluciones de
muestras ms concentradas (se recomiendan soluciones 10 veces ms concentradas como
punto de partida).
Para las muestras de ETA en otras formas distinta del polvo, las soluciones de muestra se deben
preparar de la siguiente manera:
Tabletas: Triturar un nmero representativo de tabletas (siguiendo planes generales de
muestreo) hasta obtener un polvo fino y preparar una solucin con ese polvo.
Cpsulas: Extraer el contenido de una muestra representativa de las cpsulas (siguiendo planes
generales de muestreo) y preparar una solucin con ese polvo.
Soluciones acuosas: Aplicar directamente sobre la placa, o el equivalente de 5 mg/ml, si se
conoce la concentracin del ETA.
Aplicacin y desarrollo
Aplicar sobre la placa de CCD 1 l y 5 l de una solucin de la muestra, junto con 2 l de la
solucin o soluciones estndar (de preferencia, aplicar tambin a la placa un disolvente como
control negativo). La aplicacin se debe hacer con cuidado para no daar la superficie de la
placa.
El punto de partida del anlisis, es decir, la lnea de aplicacin, debe ser 2 cm desde el fondo
de la placa. El espacio entre aplicaciones de la muestra (puntos de aplicacin) debe ser de por lo
menos 1 cm, y las aplicaciones no se deben colocar a menos de 1,5 cm del borde lateral de la
placa. Para evitar aplicaciones difusas durante el desarrollo, el tamao de la aplicacin de la
muestra debe ser lo ms pequeo posible (>2 mm).
Dejar que la aplicacin se seque, y colocar la placa en el tanque de CCD saturado de disolvente
(la saturacin de la fase de vapor se logra utilizando almohadillas o papel de filtro saturados con
disolvente como revestimiento del tanque). Extraer la placa del tanque de revelado tan pronto
como el disolvente alcance la lnea de revelado marcada de antemano; de otra forma, se
producirn puntos difusos.
Visualizacin/deteccin
Las placas se deben secar antes de la visualizacin: el disolvente se puede dejar secar a
temperatura ambiente, o extraer con un secador de aire caliente. Si se utiliza aire caliente, hay
que tener cuidado en razn de la volatilidad de las bases libres de ETA. Para el desarrollo del
color apropiado, es importante que se eliminen de la placa todas las trazas de amonaco.
21
La siguiente es una seleccin de mtodos de visualizacin. Sobre la base de los resultados de

los ensayos presuntivos, los ETA previstos se deben seleccionar utilizando uno de los siguientes
mtodos y reactivos, o una combinacin de ellos:
Mtodo/
reactivo de visualizacin
Analitos objetivo y resultados
A.
Luz UV a 254 nm
Mtodo universal. Muchas sustancias, incluidos los ETA,

producen manchas prpura en una placa normalmente de color
verde fluorescente.
B.
Reactivo de ninhidrina
Muchas aminas primarias y secundarias, adheridas a un tomo

de carbono aliftico, como la anfetamina y la metanfetamina, dan
manchas violeta o rosa.
C.
Reactivo de
yodoplatinato de potasio
acidificado
Reactivo general sensible. Muchas aminas primarias y

secundarias dan manchas de color azul plido.
D.
Reactivo negro slido

de potasio
Las aminas primarias y secundarias dan manchas de diversos

colores, desde el violeta (aminas primarias) hasta el naranja o el
rojo-naranja (aminas secundarias).
E.
Reactivo de Marquis
Distincin entre ETA con y sin anillo sustituido.
F.
Reactivo de
fluorescamina (Fluram)
Reactivo sensible para aminas primarias. Recomendado para la

deteccin de concentraciones de aminas primarias.
G.
Reactivo de Simon
Reactivo general para aminas secundarias (la efedrina y la

seudoefedrina no reaccionan).
H.
Reactivo de Dragendorff
Reactivo general para alcaloides y bases nitrogenadas.
A.
Luz UV
Observar la placa seca bajo luz UV a 254 nm y 366 nm.
B.
Reactivo de ninhidrina
Preparar una solucin en etanol al 10%.
Rociar la placa con el reactivo de ninhidrina y calentar en un horno a 120 C por lo menos
durante 15 minutos. Las aminas primarias, como la anfetamina, y las aminas secundarias,
como la metanfetamina, producen manchas violetas o rosas. La efedrina tambin produce
una mancha violeta.
C.
Reactivo de yodoplatinato de potasio acidificado

Disolver 0,25 g de cloruro platnico y 5 g de cloruro potsico en agua y preparar hasta
100 ml. Agregar 2 ml de cido clorhdrico concentrado.
Rociar la placa con la solucin de yodoplatinato de potasio acidificado y observar las
manchas de colores. La anfetamina y la metanfetamina producen manchas difusas de color
gris-violeta-pardo sobre un fondo rosa.
La solucin tambin se puede utilizar para rociar las superficies de las placas que
anteriormente haban sido rociadas con ninhidrina.
22
D.
Reactivo negro slido de potasio

Solucin A: Preparar una solucin de sal de reactivo negro slido de potasio en agua al 1%
[2,5-dimetoxi-4-((4-nitrofenil)azo)benceno diazonio tetraclorozincato (2:1)]
Solucin B: 1N NaOH
Rociar la placa con la solucin A y observar las manchas de colores. Las aminas
secundarias como la metanfetamina y la MDMA producen manchas inmediatamente. El
nuevo rociado con solucin B produce manchas de colores para la anfetamina y otros ETA
con anillo sustituido. Secar las placas con aire y rociar una vez ms con la solucin A. Esto
produce manchas de colores ms intensos. Los colores varan del violeta para las aminas
primarias al naranja o el naranja-rojo para las aminas secundarias como la metanfetamina y
el MDMA.
E.
Reactivo de Marquis
Agregar de 8 a 10 gotas de solucin de formaldehdo al 40% a 10 ml de cido sulfrico
concentrado. Preparar fresco antes de cada uso.
No se recomienda rociar con el reactivo de Marquis debido a la presencia de cido sulfrico
concentrado. No obstante, proporciona informacin adicional til para diferenciar entre los
ETA, por ejemplo, despus de la deteccin con ninhidrina. A tal fin, verter el reactivo de
Marquis con una pipeta Pasteur sobre las manchas ya detectadas.
F.
Reactivo de fluorescamina (Fluram)

Disolver 10 mg de fluorescamina en 50 ml de acetona. Preparar diariamente.
Rociar la placa con el reactivo de fluorescamina. Secar utilizando aire caliente. Observar la
placa con una luz UV a 366 nm. La anfetamina da una mancha fluorescente amarilla
brillante. La metanfetamina no se detecta. (Para la estabilizacin en 366 nm, rociar con una
solucin de trietilamina al 10% v/v en diclorometano).
G.
Reactivo de Simon7
Disolver 100 mg de nitroprusiato de sodio y 2 g de carbonato de sodio en 10 ml de agua (es
decir, una solucin acuosa que contiene nitroprusiato de sodio a una concentracin del 1%
y carbonato de sodio al 20%). Preparar el reactivo fresco antes de usarlo.
Rociar la placa con el reactivo de Simon. Colocar la placa en un tanque de desarrollo vaco
junto con un vaso de precipitacin con acetaldehdo. Cubrir el tanque. El vapor de
acetaldehdo har que una mancha de metanfetamina se vuelva de color azul intenso.
H.
Reactivo de Dragendorff
Solucin madre: disolver 0,85 g de subnitrato de bismuto (bsico) en 10 ml de cido
actico. Disolver 50 ml con agua y agregar 8 g de yoduro de potasio en 20 ml de agua.
Rociar la placa con una solucin preparada de 1 ml de solucin madre de Dragendorff, 2 ml
de cido actico y 10 ml de agua. Los colores varan del naranja al violeta.
Este mtodo modificado mejora la sensibilidad para la metanfetamina a 0,1 (LOD). Las aminas primarias
no se pueden detectar en razn de la baja sensibilidad del sistema a este grupo de sustancias, y a la
interferencia con el color de fondo cuando se utiliza amonaco en el disolvente de desarrollo.
23
Interpretacin
Despus de la visualizacin, marcar las manchas (por ejemplo, con lpiz), y calcular los valores
del factor de retardacin (Rf):
Distancia de migracin: del origen al centro de la zona del analito (mancha)
Distancia de desarrollo: del origen al frente del disolvente
Rf =
Es muy comn expresar factores de retencin como Rf x 100, denominado hRf.

RESULTADOS
Comparar los colores y los valores Rf de la muestra del ETA desconocido con los de normas de
referencia de ETA autnticos que se analizaron simultneamente en la misma placa. En el
cuadro 2 se dan los valores Rf de algunos de los ETA ms comunes.
Cuadro 2.
Valores Rf de los ETA y adulterantes que se encuentran

con mayor frecuencia
Sistema de CCD*
Nombre del ETA
0,48 (0,43)**
0,37 (0,43)
(0,20)
Catinona
0,66
0,56
DOB
0,37
0,32
(0,13)
DOET
0,36
0,32
(0,24)
DMA
0,37
0,33
(0,19)
N-Etilanfetamina
0,47
0,37
(0,47)
Metanfetamina
0,35 (0,31)
0,22 (0,42)
(0,28)
MDA
0,36 (0,39)
0,33 (0,42)
(0,18)
MDMA
0,31 (0,33)
0,21 (0,39)
(0,24)
MMDA
0,40
0,31
PMA
0,41 (0,73)
0,33 (0,43)
(0,23)
STP/DOM
0,35 (0,51)
0,31 (0,41)
(0,15)
0,35
0,20
Efedrina
(0,30)
(0,25)
(0,05)
Cafena
(0,52)
(0,52)
(0,03)
Anfetamina
TMA
*Sistemas de disolventes: A, B o C; placa de CCD: Gel de slica G con espesor de capa

de 0,25mm
Sistema A: metanol : amonaco concentrado (100:1,5)
Sistema B: acetato etlico: metanol : amonaco concentrado (85:10:5)
Sistema C: ciclohexano : tolueno : dietilamina (75:15:10)
** Los valores Rf entre parntesis se obtuvieron utilizando placas de slica impregnadas
con KOH metanlico (0,1mol/l).
24
Notas analticas
Debido a que pequeos cambios en la composicin y activacin de la placa de CCD, los
sistemas de disolventes, la saturacin del tanque o la distancia de desarrollo pueden resultar en
cambios significativos en los valores Rf, los valores proporcionados deben considerarse slo
como una indicacin del comportamiento cromatogrfico de los ETA y adulterantes enumerados.
Es esencial que los patrones de referencia de los ETA se analicen simultneamente en la misma
placa. Alternativamente, se puede aumentar significativamente la posibilidad de reproduccin
utilizando compuestos de referencia y valores Rf corregidos (Rfc).
A los fines de la identificacin, siempre se deben considerar tanto los valores Rf como los colores
de las manchas despus del rociado con reactivos de visualizacin
Fried y J. Sherma (Eds.), Practical Thin-Layer Chromatography, A Multidisciplinary Approach,
Boca Raton Press, 1995.
Jork y otros, Thin-Layer Chromatography, Reagents and Detection Methods, Weinheim, VCH,
vol.1 (1990), Vol.2 (1992).
Neumann, H. (1987), Nachweis und Identifizierung von Feniletilaminen (Stimulantien und
Halluzinogene), Sci. Pharm., 55, 1 a 11.
Ojanper, I., Whl, K., y Hase, T. A. (1990): Fast black K salt: a versatile thin-layer
chromatographic visualization reagent for the differentiation of aliphatic amines, Analyst, vol. 115,
pgs. 263 a 267.
Stead, A. H., Gill, R., Wright, T., Gibbs, J. P., Moffat, A. C. (1982), Standardized thin-layer
chromatographic systems for the identification of drugs and poisons, Analyst, vol. 107, pgs.
1106-1168.
C.
CROMATOGRAFA EN FASE GASEOSA (CG) DETECTOR DE IONIZACIN

POR LLAMA (FID)
Para el anlisis de ETA por CG, los principios generales de las tcnicas son vlidos. En la
actualidad el instrumento preferido de CG para trabajos analticos de rutina es el cromatgrafo
de columna capilar de calibre menor, utilizando columnas capilares con dimetros internos entre
0,2 y 0,32 mm.
Se reconoce que, por diversas razones, hay laboratorios que quiz deseen mantener un sistema
de columna rellena. Para esos laboratorios, en una edicin anterior del presente manual se
describe un mtodo que utiliza columnas rellenas. Los procedimientos de CG que utilizan una
columna capilar de calibre mayor (0,53 mm de dimetro interno) representan un medio de
mejorar el poder de resolucin en comparacin con las columnas rellenas, y son ms robustos
que los sistemas de columna capilar de menor calibre. Los sistemas de CG ms antiguos, que
fueron diseados para columnas rellenas, se pueden adaptar para utilizarlos con columnas de
mayor calibre.
25
MTODOS
1.
Anlisis cualitativo

a)
Poner unos 25 mg de sales estndar de ETA8 (debidamente pesados), en una probeta graduada
de 25 ml y aadir agua hasta la marca. Colocar con una pipeta una alcuota de 1 a 5 ml de esta
solucin en un tubo de ensayo de vidrio con tapn de rosca de 10 ml. Aadir por goteo una
solucin de hidrxido de sodio al 5% hasta obtener un pH 10. Luego aadir 5 ml de disolvente de
extraccin9.
Tapar e invertir el tubo de ensayo por lo menos 10 veces o mezclar en un mezclador Vortex
durante 1 minuto y dejar reposar hasta que se separen las capas10. Utilizando una pipeta
Pasteur, transferir la capa de disolvente (por ejemplo, el cloroformo) a travs de la capa de
sulfato de sodio anhidro a un vial de CG.
Inyectar 1-2 l de la capa de disolvente en el CG.
b)
Pesar de 25 a 150 mg de la muestra, segn la pureza anticipada, para obtener una

concentracin final de aproximadamente 1 mg/ml de sal del analito, y colocarla en una probeta
graduada y aadir agua hasta la marca. La pureza prevista de la muestra se determina
empricamente11.
Colocar con una pipeta una alcuota de 1 a 5 ml de esta solucin en un tubo de ensayo de vidrio
con tapn de rosca de 10 ml. Aadir por goteo una solucin de hidrxido de sodio al 5% hasta
obtener un pH 10. Aadir luego 5 ml de disolvente de extraccin (por ejemplo, cloroformo).
durante 1 minuto y dejar reposar hasta que se separen las capas. Utilizando una pipeta Pasteur,
transferir la capa de disolvente a travs de la capa de sulfato de sodio anhidro a un vial de CG.
Inyectar 1-2 l de la capa de disolvente en el CG.
Si se requiere una muestra rpida del producto, se pueden tomar muestras directamente en
etanol/amonaco acuoso (99:1), e inyectarlas en el cromatgrafo de fase gaseosa. Con el empleo
de este mtodo, la condicin del inyector y la columna pueden deteriorarse ms rpidamente que
Ocasionalmente, los estndares de ETA se pueden obtener en forma de base. En esos casos, no se
requiere extraccin. En general, sin embargo, es importante que la forma de los estndares y las muestras
sea siempre la misma.
9
Todos los analitos deben ser completamente solubles en el disolvente de extraccin, y ste ltimo debe
ser inmiscible con una capa acuosa. Los disolventes adecuados son, entre otros,
n-hexano, cloroformo, cloruro de metileno y acetato de butilo.
10
Cuando se emplea cloroformo como disolvente de extraccin, se pueden formar emulsiones. En esos
casos, la adicin de NaCI mejora la taza de extraccin al romper la emulsin. Si se utilizan agitadores
modernos y luego se centrifuga la muestra para la separacin de las dos capas, normalmente no se forman
emulsiones.
11
La pureza de la muestra se puede determinar en base a la experiencia del qumico, o utilizando el
siguiente mtodo aproximativo: disolver 100 mg de la muestra en 2-3 ml de cloroformo; filtrar la solucin,
recoger los insolubles, secar y pesar. La cantidad soluble (es decir, el peso original menos los insolubles
secos) es la pureza prevista de la muestra. Hay que tener presente, sin embargo, que ste mtodo puede
resultar en una pureza anticipada de la muestra inferior a la real para las sales que no son solubles en
cloroformo (vase el captulo VI.A.2, sobre el ensayo de aniones, supra)
26
con las muestras extradas. (Nota: Este mtodo no es adecuado para anlisis cuantitativos dado
que es difcil producir una buena cromatografa en presencia de amonaco.)
Condiciones de trabajo con un CG
Detector:
Columna:
Longitud:
Espesor de la pelcula:
Gas portador12:
Tasa de
desdoblamiento:
Temperatura de la
columna:
Temperatura de
inyeccin:
Temperatura del
detector:
FID (o NPD, si est disponible o es conveniente)

DB-5 (5% fenil, 95% dimetilpolisiloxano), DB-1 (100% dimetilpolisiloxano), o equivalente
10-30 m, ID 0,20-0,53 mm
0,10-0,50 m
Nitrgeno, helio o hidrgeno, a aprox. 0,8ml/min (N2) o 1-1,2 ml/min
(He o H2)
20:1 a 50:1
La temperatura inicial debe ser suficientemente baja (por ejemplo,
60-90C) en razn de la alta volatilidad de los ETA bases, por ejemplo,
60C, mantener por 0,5 min, a 280C, a una tasa de 12C/min, mantener
la temperatura final durante 30 min.
210-250C
310C
RESULTADOS
La identificacin se realiza comparando el tiempo de retencin del analito con el de una norma
de referencia. El orden de elucin es como sigue: anfetamina < metanfetamina < seudoefedrina
< efedrina < PMA < PMMA < MDA < MDMA < 4-MTA < MDEA < MBDB < 2C-B.
En las condiciones descritas, la cafena y la ketamina, que se encuentran con frecuencia en las
muestras de ETA en algunas regiones, elucidan despus de 2C-B.
2.
Anlisis cuantitativo
A continuacin se presentan tres mtodos para el anlisis cuantitativo de ETA por CG-FID: Un
mtodo estndar nico (A) y dos mtodos estndar mltiples (B y C). Los mtodos A y B no
requieren derivatizacin, mientras que el mtodo C requiere sililacin. Los tres mtodos se
describen para uso general. En el anexo IV hay ejemplos de mtodos de CG validados para la
cuantificacin de ETA seleccionados.
i.
Mtodo A: mtodo estndar nico
El mtodo A es adecuado para la cuantificacin de la mayora de los ETA. Comprende la

preparacin de slo una solucin estndar de ETA en una concentracin similar a la
concentracin prevista del analito.
Preparacin de la solucin estndar interna (SI)
Pesar con precisin unos 25 mg de la solucin estndar interna seleccionada (por ejemplo,
n-tetradecano u otros n-alcanos con un nmero par de tomos de carbono, o difenilamina) y
disolver en 25 ml de disolvente de extraccin (por ejemplo, cloroformo). Si la solucin estndar
12
El flujo de gas depende de la columna ID; se puede utilizar la programacin del gradiente de presin, si
est disponible.
27
interna se utiliza para la extraccin, la concentracin objetivo se debe preparar dentro del
intervalo lineal del instrumento (no ms de 0,5 mg/ml).
Preparacin de muestras y soluciones estndar de ETA13
Las muestras y soluciones estndar de ETA se deben preparar siguiendo los procedimientos
esbozados ms arriba para el anlisis cualitativo, utilizando la solucin estndar interna para la
extraccin de muestras y estndares de ETA, de la siguiente manera:
a)
Pesar con precisin unos 25 mg de sales estndar14 del ETA de inters en una probeta graduada
y aadir agua hasta la marca. Transferir con precisin una alcuota de 1 a 5 ml de esta solucin a
un tubo de ensayo de vidrio con tapn de rosca de 10 ml. Aadir por goteo una solucin de
hidrxido de sodio al 5% hasta obtener un pH 10. Aadir luego con precisin 5 ml de solucin
estndar interna.
Inyectar 1-2 l de la capa de disolvente en el CG. Analizar la solucin estndar tres veces o ms.
b)
Pesar con precisin de 25 a 150 mg de la muestra, segn la pureza anticipada, para obtener una
concentracin final de aproximadamente 1 mg/ml de sal del analito, ponerla en una probeta
graduada y aadir agua hasta la marca. La pureza prevista de la muestra se determina
empricamente.
Con una pipeta, poner una alcuota de 1 a 5 ml de esta solucin en un tubo de ensayo de vidrio
con tapa de rosca de 10 ml. Aadir por goteo una solucin de hidrxido de sodio al 5% hasta
obtener un pH 10. Aadir luego con precisin 5 ml de la solucin estndar interna.
Inyectar 1-2 l de la capa de disolvente en el CG. Analizar la solucin de la muestra del ETA
desconocido de preferencia dos veces o ms.
Condiciones de trabajo con CG
Las mismas que para el anlisis cualitativo por CG (pg. 26).
13
Las muestras y soluciones estndar de ETA y sus concentraciones estn diseadas para usar con
columnas capilares y los procedimientos que se describen ms abajo. El empleo de columnas y sistemas
de CG alternativos puede requerir cambios en trminos tanto de la composicin relativa como de las
concentraciones de los diferentes componentes.
14
Si se utilizan estndares de ETA en forma de base, no se requiere extraccin. En esos casos, pesar no
menos de unos 10 mg del estndar de ETA y disolver directamente en 10 ml de solucin estndar interna
dispensada con precisin. Para una cuantitacin precisa, es importante que la forma del analito (sal o base)
sea igual a la del estndar de ETA.
28
Clculos
De las inyecciones mltiples, calcular las tasas medias de las reas del pico: 1) del estndar de
ETA pertinente en relacin con el estndar interno (ASt/IS), y 2) del ETA desconocido en relacin
con el estndar interno (AATS/IS).
El porcentaje de contenido de droga de la muestra se puede calcular utilizando la siguiente
frmula:
ATS (%) =
CSt
CATS
AATS/IS
ASt/IS
* 100
donde
ATS (%) =
CSt
CATS
AATS/IS
ASt/IS
Contenido del ETA desconocido (como base o sal; vase la nota 14) en
el material de muestra original (= pureza de la muestra)
= Concentracin de la solucin estndar de ETA (mg/ml), preparada de

conformidad con a) supra (= peso del ETA estndar puro por mililitro de
disolvente)
= Concentracin de la solucin de la muestra del ETA desconocido
(mg/ml), preparada de conformidad con b) supra (= peso de la muestra
del ETA desconocido por mililitro de disolvente)
= Recuentos del rea del pico del ETA desconocido dividido por el
recuento del rea del pico del estndar interno (de preferencia, una
media de dos determinaciones)
= Recuentos del rea del pico del ETA estndar dividido por el recuento
del rea del pico del estndar interno (de preferencia, una media de
dos determinaciones)
El mtodo A se puede modificar de nico a mltiple diluyendo secuencialmente alcuotas de la

solucin estndar de ETA con la solucin estndar interna utilizando probetas graduadas de 10
ml. De esta forma, se pueden preparar concentraciones estndar de ETA, en funcin de la
concentracin apropiada dentro del intervalo lineal del instrumento, y lograr una calibracin de
puntos mltiples.
ii.
Mtodo B: mtodo estndar mltiple sin derivatizacin
El que sigue es un mtodo de calibracin de puntos mltiples recomendado; en el anexo IV

figuran mtodos de CG validados para el anlisis cuantitativo de ETA, con y sin derivatizacin.
Preparacin de la solucin estndar interna (SI)
Pesar cuidadosamente de 0,3 a 0,4 g de la solucin estndar interna seleccionada (ntetradecano, otros n-alcanos, difenilamina o ETA estructuralmente relacionado en forma de
base)15 en una probeta graduada de 500 ml y diluir al volumen con cloroformo para obtener una
solucin estndar interna de 0,6 a 0,8 mg/ml.
15
Si se utiliza un estndar interno en forma de sal (por ejemplo, la sal de un ETA estructuralmente
relacionado), se requiere una extraccin. En esos casos, pesar no menos de unos 10 mg de estndar de
ETA y disolver directamente en 10 ml de solucin estndar interna dispensada con precisin.
29
Preparacin de soluciones estndar de ETA (soluciones de calibracin de CG)

Las soluciones madre estndar deben contener todos los compuestos de inters en
concentraciones de aproximadamente 1000 mg/l. Se pueden mantener en una probeta cerrada
en un refrigerador por un perodo de hasta un ao. Para la preparacin de soluciones madre:
a)
b)
c)
d)
Pesar con precisin unos 1000 mg de la sal o sales del ETA de inters y ponerlos en
una probeta graduada de 1000 ml; aadir agua hasta la marca;
Transferir con precisin mediante una pipeta, 5 ml de esta solucin a un tubo de
ensayo de vidrio con tapa de rosca de 20 ml. Hacer bsica al tornasol aadiendo unas
pocas gotas de solucin de amonaco concentrada. Aadir con precisin 5 ml de
cloroformo;
Cerrar y agitar bien, y dejar reposar hasta que se separen las capas. Utilizando una
pipeta Pasteur, transferir aproximadamente 1 ml de la capa de cloroformo a travs de
sulfato de sodio anhidro a un pequeo vaso de precipitacin. Esta solucin estndar
no debe permanecer en reposo ms de media hora antes de utilizarla para la
calibracin;
Para la preparacin de los estndares de calibracin en una calibracin de 5 puntos,
preparar los diferentes niveles de la siguiente manera:
Preparacin de estndares de calibracin de puntos mltiples
Solucin
estndar
de ETA (l)
Solucin
SI (l)
CHCl3
(l)
Concentracin
aproximada de sal
de ETA (mg/l)
Nivel 1
20
100
880
20
Nivel 2
40
100
860
40
Nivel 3
60
100
840
60
Nivel 4
80
100
820
80
Nivel 5
100
100
800
100
Nivel de
calibracin
Inyectar, por lo menos tres veces, 1-2 l de cada nivel en el CG y utilizar los valores medios para
establecer la curva de calibracin.
Preparacin de soluciones de muestras de ETA (muestra de ETA desconocido)
En general, pero especficamente para los anlisis cuantitativos, homogeneizar las muestras
antes de iniciar cualquier ensayo o submuestreo.
a)
Pesar con precisin una cantidad de muestra suficiente en una probeta graduada de
25 ml para obtener una concentracin final de aproximadamente 0,2-1 mg/ml del
analito. Agregar agua hasta la marca.
Nota: La cantidad de la muestra que se pese depender de la pureza anticipada, como se
indica en el mtodo de clasificacin preliminar. Por ejemplo, si la pureza anticipada es de un
40%, la cantidad de muestra utilizada deber ser aproximadamente 60 mg;
b)
Transferir con precisin mediante una pipeta 5 ml de esta solucin a un tubo de

ensayo de vidrio con tapa de rosca de 20 ml. Hacer bsica al tornasol aadiendo unas
pocas gotas de solucin de amonaco concentrada. Aadir con precisin 5 ml de
cloroformo;
30
c)
Cerrar y agitar bien, y dejar reposar hasta que se separen las capas. Utilizando una
pipeta Pasteur, transferir aproximadamente 1 ml de esta muestra a travs de sulfato
de sodio anhidro a un pequeo vaso de precipitacin. Medir 100 l de la solucin de la
muestra, 100 l de la solucin estndar interna y 800 l de cloroformo y ponerlos en el
vial de CG;
Inyectar 1-2 l en el cromatgrafo de fase gaseosa. Analizar la solucin de la muestra
del ETA desconocido, de preferencia dos veces o ms.
d)
Condiciones de trabajo con un CG

Para los anlisis cuantitativos, es preferible utilizar un CG equipado con un instrumento de
muestreo automtico. Las condiciones de trabajo pueden ser las mismas que para el anlisis
cualitativo (pg. 26).
Clculos
El porcentaje de droga contenido en la muestra se calcula a partir de la concentracin de la
solucin de la muestra del ETA desconocido y los correspondientes valores de la curva de
calibracin. Con instrumentos y programas informticos de CG modernos, y despus de conocer
a travs del operador las concentraciones de los diferentes estndares de calibracin y la
solucin de la muestra desconocida, se establece la curva de calibracin y se realizan los
clculos automticamente para un punto nico de la curva a la terminacin del anlisis.
Normalmente, el resultado se expresar como contenido porcentual de la droga desconocida en
el material de muestra original, es decir, como la pureza de la muestra (peso del analito en
relacin con el peso de la muestra).
iii.
Mtodo C: mtodo estndar mltiple con derivatizacin
Preparar muestras y soluciones estndar de ETA derivatizadas midiendo una alcuota (por
ejemplo, 100 l de base seca liberada (es decir, despus de haber transferido las muestras y
soluciones estndar a travs de sulfato de sodio anhidro a un pequeo vaso de precipitacin;
pasos (c) supra) junto con una alcuota de 100 l de solucin estndar interna, 750 l de
cloroformo y 50 l de BSTFA (o BSTFA + TMCS al 1%) a un vial de muestras de CG.
Para la calibracin de puntos mltiples, seguir el mtodo B (vase el cuadro titulado Preparacin
de estndares de calibracin de puntos mltiples), utilizando 50 l de BSTFA en cada paso para
la preparacin de muestras y soluciones estndar, y aadiendo cloroformo hasta 1 ml.
D.
CROMATOGRAFA EN FASE GASEOSA ESPECTROMETRA

DE MASAS (CG-EM)
La CG-EM es una de la tcnicas ms utilizadas para la identificacin, y recientemente tambin

para la cuantificacin de muestras de drogas forenses. Como tcnica compuesta, combina el
poder de separacin y la sensibilidad de la CG-FID con la especificidad por analito de una
tcnica espectroscpica, produciendo datos espectrales muy especficos de compuestos
individuales en una mezcla compleja de compuestos sin separacin previa.
Preparacin de muestras y soluciones estndar de ETA:
Se preparan las muestras en la forma descrita ms arriba para los mtodos de CG.
Se mejoran la sensibilidad del anlisis y la especificidad del espectro de masas del ETA
mediante derivatizacin (vase el anexo VII). La preparacin de derivativos es particularmente
conveniente cuando el espectro de masas de la molcula no derivatizada tiene poco valor de
31
diagnstico. La mayora de los ETA no derivatizados tienen fragmentos de iones de bajo

cociente masa/carga (m/z), baja intensidad y slo un ion fragmentado ms abundante (pico
bsico). La derivatizacin de ETA produce por lo general iones fragmentados de cociente m/z
ms alto y mayor abundancia. Los iones de gran masa son ms especficos y tienen un mayor
valor de diagnstico, ya que no se ven afectados por iones de fondo que interfieren, como
material de la purga de la columna u otros contaminantes.
Igual que el anlisis de CG descrito ms arriba, si se requiere una muestra rpida, se puede
tomar directamente en el etanol/amonaco acuoso (99:1) e inyectar en el CG-EM. Ahora bien, en
este caso, la condicin del inyector y de la columna se puede deteriorar ms rpidamente que
con las muestras extradas. Para utilizar en CG-EM, las muestras de aminas primarias tambin
se pueden tomar directamente en disulfito de carbono (CS2), que resulta en la formacin de una
isotiocianato, un derivativo que da un espectro de masas ms caracterstico que los compuestos
iniciales.
Condiciones de trabajo con CS-EM
Condiciones del horno
de CG:
Columna:
Igual que para el anlisis de CG (se pueden utilizar las condiciones

de los mtodos A, B o C)
Igual que para el anlisis de CG, por ejemplo: DB-5 (5% fenil, 95%
dimetilpolisiloxano), DB-1 (100% dimetil-polisiloxano), 0,25mm x 30m
x 0,25m, o equivalente
Punto de inyeccin
Modalidad:
Temperatura:
Gas portador:
Modalidad:
Desdoblada/sin desdoblar
250C
Helio, 1 ml/min
Flujo constante (o presin constante)
Detector
Modalidad de
ionizacin:
Temperatura de la
transferencia:
Temperatura de la
fuente de iones:
Parmetros de
escaneo:
Modalidad EI, 70 eV (Modalidad CI, si se prefiere)

280C
230C
Cmaras de escaneo de imgenes trmicas (microscopio de
escaneo de iones, si se requiere), intervalo de escaneo: 35-450 (para
sustancias como 2C-B se puede comenzar a m/z 29)
RESULTADOS
La identificacin se realiza comparando el tiempo de retencin y el espectro de masas del analito
con el de un estndar de referencia.
Todos los compuestos identificados por CG-EM y comunicados por el analista se deben
comparar con un espectro de masas actual del estndar de referencia apropiado, de preferencia
obtenido con el mismo instrumento y utilizado en las mismas condiciones. Se cuenta con varias
bibliotecas de referencia comerciales sobre espectro de masas. Respecto de la mayora de los
instrumentos de CG-EM, muchas de esas referencias estn disponibles en lnea. En general, sin
embargo, es importante utilizar las bibliotecas de espectros de masas, ya sea de una fuente
comercial o generada por el usuario, slo con fines de referencia.
32
No se dispone de una fuente de bibliografa nica para la interpretacin del espectro de masas
de los ETA, pero hay varias fuentes generales buenas, que en conjunto presentan datos
razonablemente amplios, por ejemplo:
Karl Pfleger, Hans H. Maurer, Armin Weber (2000), Mass Spectral and GC Data of Drugs,
Poisons, Pesticides, Pollutants and Their Metabolites: Parts I-IV, Wiley.
La ONUDD tambin tiene una coleccin limitada de espectros de masas relativos a los
principales ETA. La coleccin se puede consultar por la Internet o, previa peticin, tambin est
disponible en un CD-ROM.
E.
CROMATOGRAFA LQUIDA DE GRAN RENDIMIENTO (CLGR)
Adems de la CG, la CLGR es otra importante tcnica de separacin utilizada comnmente en el

anlisis de drogas forense.
Para facilitar la preparacin de muestras y obtener una mejor reproducibilidad y estabilidad, se
recomienda la cromatografa de fase inversa para el anlisis de ETA y sus anlogos con anillo
sustituido. La columna ms universal y verstil es una columna de slica gel ligada con octadecilo
(C18). La longitud y el dimetro de la columna, el tamao de las partculas, el tamao de los
poros y la carga de carbono se deben examinar antes de la seleccin final de la columna.
Dado que hay una gran variedad de fases estacionarias y mviles a disposicin del analista, a
continuacin slo se dan directrices.
MTODO
Disolver una cantidad apropiada del estndar o la muestra en la fase mvil, apuntando a una
concentracin del componente activo entre 0,05-0,50 mg/ml. Las soluciones de la muestra se
deben filtrar antes del anlisis.
Las soluciones madre y estndar se deben preparar a partir de estndares de referencia. Los
estndares de trabajo deben estar comprendidos en el intervalo lineal del detector y
aproximadamente 80%-120% de la concentracin objetivo. Es conveniente realizar una
calibracin de puntos mltiples pero tambin es aceptable un mtodo estndar nico.
Condiciones de trabajo
Detector:
Fase estacionaria:
Longitud de la columna:
Dimetro de la columna:
Columna preliminar:
Temperatura de la columna:
Tampn de la fase mvil:
Detector de ordenacin de diodos, escaneo rpido o longitud

de onda variable, UV 200-210nm (utilizar tambin 280-290nm
para las fenetilaminas con metilendioxi sustituido)
C8 o C18 con partculas de 5 m o ms pequeas
< 30 cm
< 5,0 mm
Dimetro: 2-4 mm, longitud: 25 mm, fase inversa C8 o C18
15-35C (se recomienda enrgicamente controlar la
temperatura en entornos sin termostato)
Tampn de fosfato pH 2,0-3,2 (por ejemplo, 50 mM fosfato de
sodio monobsico ajustado con cido fosfrico). Para los
picos de los residuos, se pueden necesitar aditivos de fase
mvil como sulfatos de alkilo o sulfonatos de alkilo o aminas.
33
Modificador orgnico
de fase mvil:
Tasa de flujo:
Volumen de inyeccin:
Separacin:
Metanol o acetonitrilo entre 2% y 20% (con grupos alkilos

ms altos, sobre sulfatos de alkilo o sulfonatos de alkilo, se
puedan requerir concentraciones orgnicas ms altas).
0,1-2,0 ml/min
1-100 l
Se debe realizar un anlisis isocrtico o de gradiente referido
a tiempos de retencin de menos de 30 minutos.
RESULTADOS
La identificacin se realiza comparando el tiempo de retencin del analito con el del estndar de
referencia y, si es posible, utilizando mltiples longitudes de onda UV o deteccin por
ordenamiento de diodos o escaneo rpido. Para los anlogos con anillo sustituido como MDA,
MDMA y MDEA, se pueden utilizar tambin escaneos fluorescentes. La especificidad del mtodo
es importante, ya que siempre existe la posibilidad de que compuestos similares elucidan en el
mismo tiempo de retencin.
Un orden de elucin tpico es el siguiente: norefedrina, efedrina, anfetamina, metanfetamina,
MDA, MDMA y MDEA. La separacin de los pares efedrina/seudoefedrina y norefedrina/
norseudoefedrina puede ser difcil, o puede requerir ligeros ajustes de las condiciones de la
CLGR.
Cuantitacin
Se puede utilizar una calibracin estndar externa o interna (se recomienda la calibracin
estndar externa especialmente si se utiliza un inyector basado en vlvulas en modalidad de
sobrecarga). Se recomienda el uso del rea del pico para la cuantitacin CLGR, porque el
aplastamiento del pico (disminucin de la altura del pico) puede ocurrir como resultado del
deterioro de la fase estacionaria, haciendo que la altura del pico no sea adecuada para la
cuantitacin. Se puede aumentar la especificidad de la deteccin utilizando mtodos de
deteccin fluorescente o de longitudes de onda UV mltiples. En el anexo V se describe uno de
mtodo de CLGR validado para la cuantitacin de ETA.
Aalberg, L., DeRuiter, J., Noggle, F. T., Sippola, E. y Clark, C. R. (2000), Chromatographic and
Mass Spectral Methods of Identification for the Side-Chain and Ring Regioisomers of
Methylenedioxymethamphetamine, J. Chromatogr. Sci., 38, pgs. 329 a 337.
Clark, C. R., DeRuiter, J., Valer, A. y Noggle, F. T. (1995), Gas Chromatographic-Mass
Spectrometric and Liquid Chromatographic Analysis of Designer Butanamines Related to MDMA,
J. Chromatogr. Sci., 33, pgs. 328 a 337.
Lurie, I. S. (1995), Reversed-Phase High Performance Liquid Chromatographic Analysis of Drugs
of Forensic Interest, cap. 4 en Analysis of Addictive and Misused Drugs, Adamovics, J. A., (Ed.),
Marcel Dekker, Nueva York, NY, U.S.A., pgs. 51 a 132.
Malone, J. V. (1998), HPLC Quantication of Clandestinely Manufactured Mixtures of
Amphetamine and Methamphetamine, Microgram, 31, pgs. 304 a 307.
Sadeghipour, F., Giroud, C., Rivier, L., y Veuthey, J.-L. (1997), Rapid Determination of
anfetaminas by High-Performance Liquid Chromatography with UV Detection, J. Chromatogr.,
761, pgs.71 a 78.
34
Sadeghipour, F., y Veuthey, J.-L. (1997), Sensitive and Selective Determination of

Methylenedioxylated Amphetamines by High-Performance Liquid Chromatography with
Fluorimetric Detection, J. Chromatogr., 787, pgs.137 a 143.
Schneider, R. C., y Kovar, K. A. (2003), Analysis of Ecstasy with a Monolithic Reversed-Phase
Column, Chromatographia, 57, pgs. 287 a 291.
F. ESPECTROSCOPA INFRARROJA TRANSFORMADA DE FOURIER (FTIR)

La espectroscopa infrarroja se utiliza mucho como mtodo cualitativo, y desde hace
tambin cuantitativo, para la determinacin y el anlisis estructural de ETA. El anlisis
puede ser particularmente til para la clasificacin rpida de tabletas y polvos de
proporcionando indicaciones sobre la homogeneidad de las tabletas o la presencia de
mixtos.
poco
FTIR
ETA,
lotes
Preparacin de la muestra16
Los mtodos preferidos para la preparacin de muestras son la disolucin de la muestra en un
disolvente apropiado, o su suspensin en una pasta aceitosa. Una tcnica menos conveniente es
la del mtodo del disco de haluro, en que la muestra se dispersa en un haluro de potasio
finamente molido (KBr o KCl) que se imprime en un disco delgado.
Ahora bien, la mayora de los laboratorios forenses prefieren el mtodo del disco de haluro por
dos razones: i) los haluros de potasio son transparentes en IR en la denominada regin de las
huellas digitales ((2000-400 cm-1), y ii) el disco de haluro de potasio por lo general se puede
volver a analizar muchas veces si se lo almacena sobre un desecante.
El mtodo del disco de haluro17 consiste en golpear una muestra seca hasta obtener un polvo
muy fino, mezclar luego aproximadamente 1 mg del polvo de la muestra homogeneizado con
200 mg de haluro lcali molido y secado. Tras la molienda, la mezcla se imprime en un disco
transparente delgado.
El KCl y el KBr son igualmente apropiados. Ahora bien, el KCI es ligeramente menos
higroscpico y en general se lo recomienda en lugar del KBr, especialmente cuando el analito es
una sal clorhdrica (para eliminar el problema del intercambio de haluros). El KBr o el KCl que se
utilicen deben ser de pureza IR y haber sido secado a 110C durante por lo menos una hora.
Se lo puede almacenar sobre un desecante fuerte (por ejemplo, pentxido de fsforo) en un
desecador, o dejado en un horno y utilizado cuando se necesite. Esto puede ser importante en
cualquier accin judicial subsiguiente. Asimismo, el material investigado se puede recuperar del
disco de haluro para nuevos ensayos.
El mtodo de la pasta de Nujol requiere la mezcla de una muestra de polvo fino (2-3 mg) con
una gota de Nujol (parafina lquida o perfluorinato alcano de cadena larga), y luego moler la
mezcla en un mortero de gata. La cantidad de Nujol aadido se ajusta para que la pasta final
tenga la consistencia de una crema fina. La pasta resultante se distribuye en un disco de haluro
lcali (por lo general, KBr) y un disco similar colocado encima. La pelcula entre los discos de
haluro no debe contener burbujas de aire. La desventaja evidente de este mtodo es la
interferencia del Nujol en el espectro. Un enfoque similar, la tcnica de la pelcula delgada, se
16
Un manual separado complementa la serie de manuales de las Naciones Unidas sobre mtodos
recomendados. Proporciona ms detalles sobre las caractersticas y usos prcticos para anlisis de drogas
de diferentes tcnicas analticas.
17
Para slidos, es importante i) reducir el tamao de las partculas moliendo hasta una dimensin inferior a
la longitud de onda analtica ms corta (para evitar la dispersin), y ii) diluir la muestra a fin de reducir al
mnimo la absorcin en el disco preparado.
35
utiliza tambin para el anlisis directo de bases libres de ETA, que por lo general son lquidos
aceitosos.
El mtodo ATR de diamante de reflexin simple (por ejemplo, el dispositivo Golden Gate) es
un mtodo relativamente nuevo para lquidos y slidos, que no requiere de preparacin de
muestras. Sin embargo, el espectro obtenido con este mtodo no se puede comparar
directamente con los obtenidos con cualquiera de los mtodos descritos ms arriba. Por ltimo,
el mtodo de la clula de gas es un instrumento prctico para el anlisis rpido de disolventes
y algunos precursores de los laboratorios clandestinos.
Aislamiento de la droga pura de una muestra

a)
Aislamiento de la base libre del ETA
Disolver 25-50 mg de la muestra en 1 ml de 0,1N de cido tartrico. Agregar 4-5 gotas de

hidrxido de amonaco y extraer con cloroformo. Pasar la capa de cloroformo por una columna
pequea tapada con un algodn para eliminar las partculas en suspensin. Dejar que una parte
de la solucin de cloroformo se evapore directamente en un disco de KBr y registrar el espectro
infrarrojo de la base libre, por ejemplo, utilizando la tcnica de la capa delgada en discos de KBr.
b)
Aislamiento de las sales del ETA
Triturar una porcin de 20-50 mg de la muestra con 1-2 ml de cloroformo. Filtrar, recoger el
extracto y el concentrado utilizando un chorro suave de nitrgeno. Inducir la cristalizacin, filtrar,
secar los cristales y analizar el espectro infrarrojo de la sal de ETA resultante utilizando uno de
los mtodos que se describen a continuacin.
MTODOS
El espectro de las sales del ETA se registra utilizando muestras preparadas por los siguientes
mtodos:
Disco de haluro KBr (1-1,5%)
Mtodo del aceite de Nujol
Mtodo directo, por ejemplo, reflectancia difusa ATR
Mtodo de la reflectancia difusa

El espectro de bases de ETA se registra utilizando muestras preparadas por los siguientes
mtodos:
Mtodo de la pelcula delgada
Tarjetas IR
Mtodo directo, por ejemplo, la reflectancia difusa ATR
Mtodos alternativos de preparacin de muestras IR para la metanfetamina

Mtodo de extraccin seca en serie
Colocar 200 mg de muestra de metanfetamina en polvo en una pipeta Pasteur descartable con
un tapn de lana de vidrio al final. Lavar la muestra con dos partes de 1 ml de acetona y recoger
la fraccin de acetona. Despus de secarla con aire, lavar la columna con dos partes de 1 ml de
cloroformo y recoger la fraccin de cloroformo. Dejar que la columna se vuelva a secar y luego
enjuagarla con dos alcuotas de 1 ml de metanol y recoger la fraccin de metanol. El material
insoluble se puede retirar luego de la pipeta. Todas las fracciones se examinan por
espectroscopa infrarroja con fines de identificacin.
Separacin fsica/recristalizacin selectiva
36
Los procedimientos que se explican a continuacin funcionan bien para el tipo de mezclas
indicado; no funcionan tan bien con hidrocloruro de anfetamina.
Una mezcla con contenido de metanfetamina
Mezclar en un vaso de precipitacin 25 mg de una muestra con 20 ml de una mezcla 2:1 de
cloroformo y hexano, y concentrar la solucin hasta aproximadamente la mitad del volumen
original. Aadir ter dietlico al precipitado de metanfetamina. Filtrar, secar y obtener el espectro
IR (hidrocloruro de metanfetamina).
Una mezcla con contenido de metanfetamina, seudoefedrina y efedrina
Colocar 100 mg de muestra en un pedazo de papel de filtro y lavar con 40 ml de una mezcla 3:1
de cloroformo y hexano. Lavar la parte insoluble con cloroformo, secar y recuperar con fines de
examen (hidrocloruro de efedrina). Evaporar la solucin original hasta que se seque y dividirla en
dos partes iguales. Disolver la mitad de esta muestra en 20 ml de una mezcla 2:1 de cloroformo
y hexano, concentrar hasta aproximadamente la mitad del volumen original y aadir ter dietlico
para precipitar la metanfetamina. Filtrar, secar y obtener el espectro IR (hidrocloruro de
metanfetamina). Disolver la otra mitad de la muestra en 2 ml de cloroformo y aadir 1,6 ml de
hexano para precipitar la seudoefedrina. Filtrar, secar y obtener el espectro IR (hidrocloruro de
seudoefedrina).
Lecturas recomendadas (mtodos alternativos de preparacin de muestras IR para la

metanfetamina)
Ely, R. A. (1993), Dry Serial Extraction of Illicit metanfetamina Powders For the Identification of
Adulterants and Diluents By Infrared Spectroscopy, Journal of the Clandestine Laboratory
Investigating Chemists Association (JCLIC), 3(1), pgs. 21 a 25.
Oulton, S. R. (1997), Separation and Identification of Ephedrine, Pseudoephedrine and
Methamphetamine Mixtures, Microgram, 30(12), pgs. 289 a 296.
Stinson, S. B. y Berry, M. R. (1974), Separation and identification of amphetamine or
methamphetamine in combination with ephedrine or caffeine, 7(4), pg. 51.
RESULTADOS
La identificacin se logra comparando el espectro del analito con el del estndar de referencia, o
de una biblioteca espectral.
Laboratory Methods in Vibrational Spectroscopy (third ed.), editado por Willis, H. A., van der
Maas J. H. y Miller, R. G. J., John Wiley & sons, Chichester, 1987
G. ANLISIS DE ISMEROS PTICOS

La mayora de los ETA tiene un tomo de carbono asimtrico resultante en un par de
enantimeros para cada ETA. En funcin de la fuente, por lo tanto, se pueden encontrar formas
enantiomricas diferentes de anfetamina, metanfetamina y otros ETA en muestras incautadas
sometidas a anlisis
De conformidad con el Convenio sobre Sustancias Sicotrpicas de 1971 de las Naciones Unidas,
37
cada ismero ptico ( d- y I-), as como la mezcla racmica (dl) de anfetamina y metanfetamina,
estn sometidos a fiscalizacin. Con respecto a la mayora de los ETA con anillo sustituido, slo
los racematos estn sometidos a fiscalizacin, y los enantimeros genricos se incluyen
mediante una frase genrica.
Los ismeros pticos difieren en cierta medida en cuanto a la actividad farmacolgica y en
ciertos pases estn sujetos a diferentes medidas de reglamentacin. En los pases en que la
legislacin nacional exige la identificacin del ismero ptico especfico presente, se pueden
utilizar los siguientes procedimientos analticos.
1. Punto de fusin
La comparacin del punto de fusin de la mezcla de la muestra con el estndar de referencia
enantiomricamente puro es un ensayo rpido y sencillo para distinguir ismeros pticos.
Por ejemplo, d- y l-hidrocloruro de metanfetamina tienen el mismo punto de fusin (170-175C),
pero una mezcla de cantidades iguales de ambos ismeros pticos (mezcla racmica) tiene un
punto de fusin ms bajo (130-135C).
Este mtodo requiere muestras bastante puras. En general, los puntos de fusin se deben
determinar utilizando muestras secas.
2. Ensayos de microcristales
(Vase tambin la seccin sobre el ensayo de microcristales como ensayo presuntivo, supra.)
Para los ETA, normalmente se utiliza la tcnica de la gota en suspensin, o ensayo de
volatilidad. Esta tcnica requiere una placa con cavidades, una cubierta de vidrio, el reactivo de
ensayo y un reactivo de volatilizacin. En el anexo III se describen los reactivos de ensayo y de
volatilizacin.
Ensayos de microcristales para ismeros pticos de anfetamina
Ensayo del cloruro de oro [HAuCl4 al 5% en H3PO4]
Transferir una pequea cantidad del polvo de la muestra a la depresin de la placa de cavidad, y
aadir una o dos gotas del reactivo de volatilizacin (solucin de NaOH al 5%). Esto libera la
amina libre en forma de base libre voltil, que emerge de la solucin como un vapor. Transferir
inmediatamente una gota del reactivo de ensayo (HAuCl4 al 5% en H3PO4) a la placa de vidrio e
invertir y cruzar la placa sobre la cavidad de muestra. El reactivo reacciona entonces con el
vapor de aminas presente en la cavidad. Tras un intervalo apropiado, volver a invertir la placa del
reactivo y examinar los cristales en el reactivo o en el borde de la cuota de reactivo.
RESULTADOS
La d- y la l-anfetamina dan microcristales idnticos, que se asemejan a largas varillas amarillas o
agujas speras y largas hojas angostas. La forma de distinguirlas es formar el racemato, que
produce cristales diferentes. El racemato de dl-anfetamina da al principio gotas aceitosas y
luego cristales escamosos coloreados. Estos cristales se forman en general despus de la
inversin.
Distincin de d- y l-anfetamina
Si el ensayo explicado ms arriba indica que la muestra es de d- o l-anfetamina, se debe
determinar cul est presente. A tal fin, aadir parte del polvo de la muestra desconocida a una
pequea cantidad de sal de d-anfetamina conocida en una cavidad y a una pequea cantidad de
38
sal de l-anfetamina en otra. Repetir el ensayo. La mezcla que sea (d+d) o (l+l) producir largas
varillas amarillas, etctera. La mezcla que sea (d+l) dar los cristales escamosos del racemato
descritos ms arriba.
Metanfetamina
La d-metanfetamina ensayada con HAuCl4 al 5% en H3PO4 da hojas V con un lado ms corto
que el otro. stas se desarrollan muy rpidamente si el ensayo se realiza directamente sobre la
muestra seca, o ms lentamente si la muestra se diluye o el ensayo se realiza utilizando la
tcnica de la gota en suspensin
La l-metanfetamina da hojas cruzadas singulares y hojas V, que forman extremos en forma de
cigarros caractersticos (afiladas a ambos lados en el extremo de la hoja).
La d,l-metanfetamina forma hojas singulares y X, que a veces tienen forma de cuchillo. Los
extremos de la hoja slo estn afilados en un lado, igual que un cuchillo.
MDMA
La MDMA ensayada con HAuCl4 al 5% en H3PO4 da cristales blancos en forma de X de doble
refaccin con conglomerados en forma de estrella bajo luz polarizadora. Estos cristales son
similares a los de la d,l-metanfetamina con cloruro de oro, pero con un poco de prctica se
pueden diferenciar.
Nota: Dado que la MDMA es muy sensible a la reaccin con el reactivo de cloruro de oro, slo basta una
parte muy pequea para obtener buenos resultados.
El ensayo del cloruro de oro es tambin til para los precursores efedrina y seudoefedrina, y
puede ser til para la nicotinamida y la cafena. Se deben utilizar muestras de referencia de estas
sustancias para obtener cristales de referencia.
Ensayos de microcristales para ismeros pticos de la metanfetamina
[H3BiI6 en H2SO4]
Utilizar el procedimiento de la gota en suspensin descrito ms arriba para la anfetamina pero
utilizando el reactivo de ensayo H3BiI6 en H2SO4 (vase el anexo III en relacin con la
preparacin del reactivo).
RESULTADOS
La d-metanfetamina da agujas largas de color naranja. La dl-Metanfetamina da varillas naranjarojizas caractersticas con extremos sesgados.
Fulton, C.C. (1969), Modern Microcrystal Tests for Drugs, Wiley-Interscience, Nueva York
no, M., Microcrystal Test, Japn, 1996 (presenta una introduccin amplia a la tcnica de los
ensayos de microcristales, e incluye fotografas de resultados de ensayo de microcristales de 39
ETA y sus precursores).
Ruybal, R. (1986), Microcrystalline test for MDMA, Microgram, 19 (6), pgs. 79 y 80.
39
American Society of Analytical Chemistry: AOAC Official Methods of Analysis (1984), pgs. 704 a
714.
Stall, W. J. (1981), The separation of methamphetamine and procaine utilizing the volatility test /
hanging drop method for amphetamines, Microgram, 14 (10), pg. 148.
3.
Tcnicas instrumentales
Hay varios mtodos instrumentales directos (CG quiral, CLGR o EC) y mtodos de derivatizacin
indirectos que se pueden utilizar en el anlisis de los ismeros pticos de ETA. La eleccin del
mtodo depende del alcance del anlisis y la disponibilidad de equipo y otros instrumentos de
laboratorio. Los mtodos directos e indirectos se deben considerar como complementarios, ya
que ninguno ofrece una solucin universal para la separacin quiral. Las ventajas y desventajas
de ambos criterios se deben examinar con cuidado.
Los mtodos instrumentales directos permiten analizar los ismeros pticos sin derivatizacin,
utilizando fases estacionarias quirales y/o aditivos quirales como tampn de corrida (EC).
Los mtodos indirectos se basan en la derivatizacin del analito con un reactivo quiral para
producir dos diastereoismeros diferentes con propiedades fsicas y qumicas diferentes que se
pueden separar en una fase estacionaria aquiral. La eleccin del reactivo quiral depende de
varios factores, como el poder de separacin, la sensibilidad, la eficiencia de la derivatizacin y
sus compatibilidades con la tcnica instrumental. Los mtodos que emplean la derivatizacin
quiral son normalmente menos costosos y no requieren columnas o equipo especializado. El uso
de columnas aquirales normales facilita la integracin de las separaciones quirales en programas
de anlisis de rutina.
i. Tcnicas de CG
La cromatografa de fase gaseosa es una tcnica probada de separacin quiral. Se puede
realizar utilizando mtodos directos, empleando columnas capilares quirales, o mtodos
indirectos, que logran la separacin utilizando reactivos quirales y fases estacionarias aquirales.
a)
Cromatografa en fase gaseosa quiral (mtodo directo de CG)
Las fases estacionarias disponibles en el comercio para la separacin de ismeros pticos por
CG se producen normalmente aadiendo macromolculas de ciclodextrina a una fase
estacionaria comn. La fase estacionaria quiral ms comn utilizada para los ETA es la betaciclodextrina hecha base.
MTODO
La preparacin (extraccin) de muestras para anlisis por CG quiral es igual a la de la CG
normal (vase supra).

Columna:
Gas portador:
Temperatura del horno:
Temperatura del inyector:
Temperatura del detector:
Dexcst, pelcula de 0,25 mm x 30m x 0,25 micrones, o equivalente

Helio a aprox, 1,2 ml/min
120C durante 1 min, luego 1,5C/min a 175C, mantener durante
1,5 min
1 l
190 C
280 C
40
Nota: Se pueden utilizar otras condiciones de trabajo con la CG, pero hay que ensayarlas para la
separacin ptima de compuestos quirales. l empleo de nitrgeno como gas portador requiere tasas de
flujo ms bajas (aprox. 0,8 ml/min) para la velocidad ptima, lo que da lugar a picos ms amplios.
b)
Derivatizacin quiral (mtodo de CG indirecto)
Se pueden preparar diastereoismeros de ETA utilizando diferentes reactivos como acilcloruros,

alkilsulfonatos, isotiocianatos, cloroformatos. Los ms populares son el cido de Mosher [R(+)- o
S(-)--metoxi-a-(trifluorometil)-cido fenilacetico], cloruro de cido de Moshers, y N-trifluoroacetil1-prolil cloruro (TPC, tambin conocido como TFAP-Cl).
El cido de Mosher y el cido clorhdrico dan lugar a una derivatizacin cuantitativa de la
mayora de las aminas, con excepcin de la efedrina y la seudoefedrina. Se pueden utilizar como
reactivos para anlisis de CG y CLGR.
Se sabe que el TPC produce de derivativos estables de casi todos los ETA, incluidas las
efedrina. Se presta mejor al anlisis por CG.
En el anexo VII figuran detalles de la preparacin de muestras de ETA utilizando cido de
Mosher para las derivatizaciones quirales.
Las condiciones de trabajo con CG para anlisis cualitativos (vase ms arriba) tambin se
pueden utilizar para el anlisis de derivativos quirales.
Beckett, A. H. y Testa, B. (1972), Stereochemical separation and configural assignment by gasliquid chromatography of N-trifluoroacetyl-l-prolyl amides of asymmetric l-fenilisopropyl-amines, J.
Chromatogr., 69, pg. 285.
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differentiation. III: A comparative study of the use of chiral and achiral capillary column gas
chromatography/mass spectrometry for the determination of methamphetamine enantiomers and
possible impurities, J. Forensic Sci., 27 (1), pgs. 39 a 48.
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Chloride Derivatization, Journal of the Clandestine Laboratory Investigating Chemists
Association, 2 (1), pgs. 21 a 20.
Esta referencia incluye la derivatizacin de enantimeros de anfetamina, metanfetaminas, efedrina,
seudoefedrina, MDA, MDMA, DOB, DOM, 2,4,6-TMA, 3,4,5-TMA, propilhexedrina y PMA.
41
Moshers acid, R. Kaslauskas, G. Trouth and A. Lissi (AGAL), 16 Seminario de Colonia sobre
anlisis de presencia de drogas.
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Chem., 53, pg.113.
ii. Tcnicas de CLGR

Para la CLGR se han utilizado varios criterios, incluida la derivatizacin con reactivos quirales, la
incorporacin de aditivos quirales en la fase mvil, y el empleo de fases estacionarias quirales.
En el comercio hay una variedad de columnas para CLGR quirales. El comportamiento de las
fases estacionarias quirales se ha mejorado mucho en los ltimos aos, aunque esos anlisis
siguen siendo costosos.
Lemr, K., Jirovsky, D. y Seveik, D. (1996), Effect of Some Parameters on Enantiomer Separation
of Ephedrine, Methamphetamine and Selegiline using HPLC with -Cyclodextrin Stationary
Phase, J. Liq. Chrom. & Rel. Technol., 19, pgs. 3173 a 3191.
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Pihlainen, K. y Kostiainen, R. (2004), Effect of the Eluent on Enantiomer Separation of Controlled
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Chromatographic Analysis of Enantiomeric Composition of Abused Drugs, Forensic Sci. Rev., 8,
pgs. 92 a 108.
iii. Tcnicas de EC
La electroforesis de zona capilar es muy ventajosa para el anlisis quiral ya que permite la
separacin sumamente eficiente de enantimeros sin derivatizacin ni columnas especiales
42
(capilares). Para la separacin de ETA, se utilizan normalmente aditivos quirales como tampones
de corrida (como hidroxil-propil beta-ciclodextrin).
Iwata, Y. T., Garcia, A, Kanamori, T., Inoue, H., Kishi. T. y Lurie, I. S. (2002), The Use of Highly
Sulfated Cyclodextrin for the Simultaneous Chiral Separation of Amphetamine-type Stimulants by
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Design in the Chiral Analysis of Amphetamines by Capillary Electrophoresis, Electrophoresis., 18,
pgs. 931 a 937.
iv.
Tcnicas IR
Aunque los enantimeros tienen el mismo espectro infrarrojo, la espectroscopia IR se puede

utilizar para distinguir los enantimeros de un compuesto determinado despus de convertirlos
en los correspondientes diasteremeros.
Los ETA, como todas las bases orgnicas, se pueden hacer reaccionar fcilmente con cidos
orgnicos quirales para formar diasteremeros. Las d- y l-anfetamina, por ejemplo, se pueden
acoplar con d-cido mandlico para formar dos diasteremeros, d-anfetamina-d-mandelato y lanfetamina-d-mandelato, que tiene un espectro IR diferente.
MTODO
Se hace bsica una solucin acuosa de sal de ETA (10-50 mg) y se extrae el ETA en cloruro de
metileno. El cloruro de metileno se seca sobre sulfato de sodio anhidro y se concentra hasta
aproximadamente 2 ml. Se aade una solucin saturada de d-cido mandlico en cloruro de
metileno, varias gotas a la vez, hasta que la solucin de ETA se neutraliza (papel pH). Se deja
cristalizar la sal de d-mandelato-ETA, la solucin se filtra por succin, y los cristales se lavan con
una pequea parte de cloruro de metileno. Despus de secada, se prepara un disco de KBr con
los cristales y se adquiere el espectro infrarrojo. El procedimiento se repite utilizando ismeros
conocidos pticamente puros de los ETA correspondientes.
RESULTADOS
La identificacin de los ismeros pticos se logra comparando el espectro resultante con uno de
los obtenidos a partir de los estndares de referencia puros. Las bandas de IR en la regin de
800-1600cm-1 proporciona la informacin analticamente ms diferenciada.
El espectro IR de las sales de ismeros pticos de anfetamina con cido mandlico figuran en
una edicin anterior de manual de las Naciones Unidas sobre Mtodos recomendados para el
ensayo de anfetamina y metanfetamina (ST/NAR/9). Los datos se pueden consultar en la pgina
web de la Seccin de Laboratorio y Asuntos Cientficos.
43
Chappell, J.S. (1997), Infrared discrimination of enantiomerically enriched and racemic samples
of methamphetamine salts, Analyst, 122, 755 a 760.
Chappell, J.S. (1998), A novel infrared method for the determination of the enantiomeric
composition of methamphetamine salts, Proceedings of the American Academy of Forensic
Sciences, 4, 32.
Heagy, J. (1970), Infrared method for distinguishing optical isomers of amphetamine, Analytical
Chemistry, 42 (1970), pg. 1459.
44
VII.
OTRAS TCNICAS ANALTICAS PARA EL ANLISIS

DE ETA
Hay otras tcnicas analticas adecuadas para la identificacin forense y/o la cuantitacin de ETA,
entre ellas:
Electroforesis capilar (EC)
Cromatografa en fase gaseosa espectroscopa infrarroja transformada de Fourier

(CG-FTIR)
CL-EM y CG-EM
Espectroscopa casi infrarroja (NIR)
Espectroscopa de resonancia magntica nuclear (RMN) (cualitativa y cuantitativa)
FTIR cuantitativa
CCD cuantitativa
Espectroscopa FTIR Raman
Cromatografa en fase gaseosa-microextraccin en fase slida (CG-SPME)

La descripcin de la mayora de estas tcnicas escapa al alcance del presente manual sobre
mtodos recomendados para el anlisis de ETA, por lo que el analista debe remitirse a un
manual complementario de carcter general sobre tcnicas analticas, sus caractersticas y sus
usos prcticos para el anlisis de drogas. A continuacin se describen brevemente cuatro
tcnicas cualitativas: RMN, EC, CG-SPME y CG-FTIR porque constituyen opciones especficas
atractivas para el anlisis de ETA.
A. TCNICAS DE RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR 1H (RMN)

La disponibilidad de un gran nmero de ismeros posicionales de ETA estructuralmente
relacionados, especialmente ETA con anillo sustituido, requiere instrumentos eficaces que
proporcionen la informacin estructural necesaria para su diferenciacin. La RMN permite al
analista distinguir inequvocamente entre diferentes derivativos de anfetamina con anillo
sustituido, aun en presencia de diluyentes y otros adulterantes. Aunque ciertas pautas de
sustitucin se asemejan entre s en el rea correspondiente a los protones de la cadena lateral
alkil, el espectro integrado y la pauta de las seales de protones aromticos permite distinguir
unos de otros. Aunque se trata de un poderoso instrumento para la identificacin de anlogos, el
costo de la espectroscopa de RMN y la experiencia tcnica necesaria impide su aplicacin en
gran escala a los anlisis de rutina.
MTODO
Disolver unos 20 mg de la muestra de la droga en 1 ml de D2O. Si hay materiales insolubles,
centrifugar; en caso contrario, transferir directamente el supernatante a un tubo de RMN.
Registrar el espectro de esta solucin que contiene el ETA en forma de sal.
Liberar la base libre del ETA in situ aadiendo 20-30 mg de K2CO3 slido y 0.5 ml de CDCl3 y
registrar el espectro de la base libre. Comparar el espectro de la sustancia desconocida con el
espectro de referencia, que se registr en un instrumento de transformacin de Fourier a 90 MHz
utilizando un ngulo de 18 (1 sec) sin demora tras la adquisicin de los datos.
El espectro de RMN de referencia del ETA seleccionado figura en una edicin anterior de los dos
manuales de las Naciones Unidas relativos al anlisis de ETA, es decir, Mtodos recomendados
para el ensayo de anfetamina y metanfetamina (ST/NAR/9) y Mtodos recomendados para el
ensayo de los derivados anfetamnicos ilcitos con anillo sustituido ((ST/NAR/12). Los datos se
pueden consultar tambin en la pgina web de la Seccin de Laboratorio y Asuntos Cientficos.
45
Dawson, B. A. (1991), The use of Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy for the detection
and quantitation of abused drugs, en: The analysis of drugs of abuse, T. A. Gough (ed.), Wiley &
Sons Ltd, pgs. 284 a 296.
Lee G. S. H, Craig D. C., Kannangar G. S. K., Dawson, M., Conn C., Robertson J., Wilson M. A.
(1999), Analysis of 3,4-methylenedioxy-N-methylamphetamine (MDMA) in ecstasy tablets by
13
C solid state nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy, J. Forensic Sci., 44 (4), 761 a
771.
Chew, S. L., y Meyers, J. A. (2003), Identification and quantitation of gamma-hidroxibutyrate
(NaGHB) by nuclear magnetic resonance spectroscopy, J. Forensic Sci., 48 (2), 292.
Rothchild, R. (2003), Identification of heroin diluent: one- and two-dimensional proton and carbon13 NMR studies of procaine hydrochloride: computational studies of procaine and its conjugate
acid, Spectroscopy Letters, 36 (1 & 2), 35 a 42.
B.
ELECTROFORESIS CAPILAR (EC)
La EC, igual que la CLGR, no requiere pasos de derivatizacin o extraccin y, por lo tanto, es
ms conveniente que la CG para el anlisis de compuestos de ETA. En contraste con la CLGR,
la EC ofrece un mayor poder de resolucin para el anlisis de estos solubles, lo que confiere
mayor rapidez al anlisis. El empleo de capilares revestidos dinmicamente constituye una
importante mejora en la precisin, la eficiencia de los picos y/o los tiempos de separacin para
los compuestos de ETA en comparacin con mtodos semejantes que utilizan capilares no
revestidos. Adems, el enfoque de los capilares dinmicamente revestidos puede facilitar el
anlisis quiral rpido de una muestra utilizando el mismo capilar y el mismo vial de muestra pero
con una corrida de tampn diferente. En el anexo VI se incluye un mtodo de EC para la
cuantitacin de ETA seleccionados y para la metodologa de diferenciacin de ismeros pticos.
Lurie, I. S., Hays, P. A. y Parker, K. P. (2004), Capillary Electrophoreis Analysis of a Wide Variety
of Seized Drugs Using the Same Capillary with Dynamic Coatings, Electrophoresis., 25, pgs
1580 a 1591.
Lurie, I. S., Bethea, M. J., McKibben, T. D., Hays, P. A., Pellegrini, P., Sahai, R., Garcia, A. G. y
Weinberger R. (2001), Use of Dynamically Coated Capillaries for the Routine Analysis of
Methamphetamine, Amphetamine, MDA, MDMA, MDEA and Cocaine using Capillary
Electrophoresis, J. Forensic Sci., 46, pgs. 1025 a 1032.
Piette, V. y Parmentier, F. (2002), Analysis of Illicit Amphetamine Seizures by Capillary Zone
Electrophoreis, J. Chromatogr. A., 979, pgs. 345 a 352.
C.
CROMATOGRAFA EN FASE GASEOSA MICROEXTRACCIN EN FASE

SLIDA (CG-SPME)
La SPME (microextraccin en fase slida) es una tcnica de preparacin de muestras libres de

disolventes, que se puede utilizar para anlisis de cabeza sobre soluciones o directamente sobre
polvos de ETA, o que se puede utilizar para anlisis (de trazas) de soluciones acuosas que
contienen ETA. La SPME se realiza normalmente con una jeringa especial con una fibra de
silicio colocada en la punta del pistn de la jeringa. La fibra est revestida con una fase
polimrica como las que se utilizan en las columnas capilares. Durante el muestreo, el
revestimiento de fibra absorbe los compuestos de la fase gaseosa en la cabeza, o directamente
46
de la fase acuosa. Hay muchos revestimientos de fibra diferentes disponibles para el anlisis de
ETA y otras sustancias. Uno de los ms utilizados es una fibra revestida de polidimetilsiloxano
(PDMS).
1.
Mtodo de anlisis de cabeza
Una muestra acuosa de ETA se hace alcalina para convertir las aminas en bases libres,
aumentando de esta forma su volatilidad. La muestra se puede tambin calentar para aumentar
la cantidad de aminas en la fase gaseosa sobre la solucin de la muestra. La jeringa con la fibra
expuesta se coloca en el espacio superior sobre la solucin y las bases libres del ETA son
absorbidas en la fibra. En la situacin de equilibrio, la cantidad extrada de cada compuesto
absorbido en la fibra es proporcional a su concentracin en la solucin, aunque con diferentes
coeficientes de distribucin. Una vez completada la extraccin, la jeringa se transfiere al
instrumento de anlisis escogido. Cuando la fibra se inserta en el punto calentado del inyector de
CG, las aminas extradas son desorbidas en forma trmica. En CLGR, CEC y EC, la mezcla
disolvente produce la elucin de las aminas de la fibra.
2.
Anlisis (de trazas) de muestras acuosas
La fibra se sumerge directamente en la solucin de la muestra acuosa, que se hizo alcalina a fin
de liberar las bases libres de ETA. La solucin de la muestra se revuelve para aumentar el
intercambio de los compuestos entre la solucin y la fibra, a fin de acelerar la extraccin. El
anlisis de la muestra se realiza en la misma forma que se describi para el mtodo del anlisis
de cabeza.
Battu, C., Marquet, P., Fauconnet, A. L., Lacassie, E. y Lachtre, G. (1998), Screening procedure
for 21 amphetamine-related compounds in urine using solid-phase microextration and gas
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Yashiki, M., Kojima, T., Miyazaki, T., Nagasawa, N., Iwasaki, Y. y Hara, K. (1995), Detection of
amphetamines in urine using head space-solid phase microextration and chemical ionization
selected ion monitoring, Forensic Science International, vol. 76, pgs. 169 a 177.
Zhang, Z., Yang, M. J. y Pawliszyn, J. (1994), Solid-Phase Microextraction, Analytical Chemistry,
vol. 66, No.17, pgs. 844A a 855A.
D.
CROMATOGRAFA EN FASE GASEOSA ESPECTROSCOPA INFRARROJA

TRANSFORMADA DE FOURIER (CG-FTIR)
La CG-FTIR, otra tcnica compuesta, combina las ventajas de la tcnica de separacin por CG
con la alta especificidad por analito de la IR. La CG-FTIR con una clula de flujo ligera no tiene
limitaciones en cuanto a la corriente de gas portador, por lo que es ideal cuando se la utiliza con
columnas cortas de gran calibre, que permiten anlisis eficientes y rpidos. Por ejemplo, los ETA
ms comunes se pueden analizar en menos de cinco minutos. Sin embargo, como esta tcnica
es ms bien insensible, hay que insertar grandes cantidades de sustancia, y el espesor de la
pelcula de la fase estacionaria es fundamental para no sobrecargar la columna.
47
MTODO
Preparacin de muestras de ETA
La preparacin de la muestra es similar a la del anlisis por CG cualitativo descrito ms arriba,
pero las concentraciones del analito objetivo deben ser de 1-10 mg/ml.
Se pueden utilizar las condiciones de trabajo con CG indicadas ms arriba (por ejemplo,
mtodos CG-FID or CG-EM), con las siguientes modificaciones:
Columna del CG:
Longitud de la columna:
Espesor de la pelcula:
Temperaturas de la lnea de transferencia:
Resolucin espectral:
Columna de calibre mayor 0,32-0,53 mm ID

3-10 m
>1,0 m
300C
8 cm-1
RESULTADOS
La identificacin se realiza comparando el tiempo de retencin y el espectro FTIR del analito con
el de un estndar de referencia.
Bergkvist, H., Eyem. J. y Lundberg, L. en: Sandra, P. (Ed), Proceedings of the Thirteenth
International Symposium of Capillary Chromatography, Riva del Garda, 13 a 16 de mayo de
1991, Huertig, Heidelberg, pgs. 1160 a 1170.
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Sci., 26, 1988, 521 a 526.
Griffiths, P. R. y de Haseth, J. A., Fourier Transform Infrared Spectrometry, John Wiley & sons,
Nueva York, 1986.
48
ANEXOS
Anexo I.
Estructuras qumicas de ETA seleccionados

Cuadro 3.
ANFETAMINAS SIN ANILLO SUSTITUIDO

R4
R1
N
R2
R3
Nota: A menos que se indique especficamente, los nombres no se refieren a enantimeros individuales
Nombre comn
Nombre de la IUPAC
R1
R2
R3
R4
Anfetamina
1-metil-2-feniletilamina
CH3
Metanfetamina
N-metil-N-(1-metil-2-feniletil)amina
CH3
CH3
N-etilanfetamina
N-etil-N-(1-metil-2-feniletil)amina
C2H5
CH3
Dimetilanfetamina
N,N-dimetil-N-(1-metil-2-feniletil)amina
CH3
CH3
CH3
N-hidroxianfetamina
N-(1-metil-2-feniletil)hidroxilamina
OH
CH3
N-hidroximetanfetamina
N-metil-N-(1-metil-2-feniletil)hidroxilamina
CH3
OH
CH3
Catina
(1S,2S)-2-amino-1-fenilpropano-1-ol
CH3
OH
Catinona
2-amino-1-fenilpropano-1-ona
CH3
=O
Metcatinona
2-(metilamino)-1-fenilpropano-1-ona
CH3
CH3
=O
Fenetillina
1,3-dimetil-7-{2-[(1-metil-2-feniletil)amino] etil}-3,7dihidro-1H-purina-2,6-diona
teofillina
CH3
Fenilpropilmetilamina (PPMA)
N-metil-N-(2-fenilpropil)amina
CH3
CH3
CH3
49
Cuadro 4. ANFETAMINAS SUSTITUIDAS CON METILENEDIOXI

R1
N
R2
R3
R6
Nombres comunes (acrnimos)
Nombre IUPAC
R1
R2
R3
R6
3,4-metilenedioxianfetamina (MDA,
tenanfetamina)
1-(1,3-benzodioxol-5-il)propan-2-amina
CH3
3,4-metilenedioximetanfetamina (MDMA)
N-[2-(1,3-benzodioxol-5-il)-1-metiletil]-N-metilamina
CH3
CH3
3,4-metilenedioxietilanfetamina (MDE, MDEA)
N-[2-(1,3-benzodioxol-5-il)-1-metiletil]-N-etilamina
C2H5
CH3
3,4-metilenedioxi-N,N-dimetilanfetamina
(MDDM)
N-[2-(1,3-benzodioxol-5-il)-1-metiletil]-N,Ndimetilamina
CH3
CH3
CH3
N-hidroxi-3,4-metilenedioxianfetamina (Nhidroxi-MDA, N-hidroxitenanfetamina)
N-[2-(1,3-benzodioxol-5-il)-1-metiletil]hidroxilamina
OH
CH3
N-hidroxi-N-metil-3,4-metilenedioxianfetamina
(N-hidroxi-MDMA, FLEA)
N-[2-(1,3-benzodioxol-5-il)-1-metiletil]-Nmetilhidroxilamina
CH3
OH
CH3
N-metil-1-(3,4-metilenedioxifenil)-2-butanamina
(MBDB)
N-[1-(1,3-benzodioxol-5-ilmetil)propil]-N-metilamina
CH3
C2H5
1-(3,4-metilenedioxifenil)-2-butanamina (BDB)
1-(1,3-benzodioxol-5-il)butan-2-amina
C2H5
5-metoxi-3,4-metilenedioxianfetamina (MMDA)
1-(7-metoxi-1,3-benzodioxol-5-il)propan-2-amina
CH3
OCH3
50
Cuadro 5. OTRAS ANFETAMINAS CON ANILLO SUSTITUIDO

R1
R8
NH
R7
R5
R3
R6
Nombres comunes (acrnimos)
Nombre de la IUPAC
R1
R3
R5
R6
R7
R8
2,4,5-Fenetilaminas con anillo sustituido

4-bromo-2,5-dimetoxifenetilamina (2C-B,
Nexus)
2-(4-bromo-2,5-dimetoxifenil)etanamina
OCH3
Br
OCH3
4-metiltio-2,5-dimetoxifenetilamina (2C-T)
2-[2,5-dimetoxi-4-(metiltio)fenil]etanamina
OCH3
SCH3
OCH3
4-etiltio-2,5-dimetoxifenetilamina (2C-T-2)
2-[4-(etiltio)-2,5-dimetoxifenil]etanamina
OCH3
SC2H5
OCH3
4-propiltio-2,5-dimetoxifenetilamina (2CT-7)
2-[2,5-dimetoxi-4-(propiltio)fenil]etanamina
OCH3
SC3H7
OCH3
4-cloro-2,5-dimetoxifenetilamina (2C-C)
2-(4-cloro-2,5-dimetoxifenil)etanamina
OCH3
Cl
OCH3
4-yodo-2,5-dimetoxifenetilamina (2C-I)
2-(4-yodo-2,5-dimetoxifenil)etanamina
OCH3
OCH3
2,4,5-Anfetaminas con anillo sustituido

2,4,5-trimetoxianfetamina (TMA-2)
1-(2,4,5-trimetoxifenil)propan-2-amina
CH3
OCH3
OCH3
OCH3
4-metil-2,5-dimetoxianfetamina (DOM,
STP)
1-(2,5-dimetoxi-4-metilfenil)propan-2-amina
CH3
OCH3
CH3
OCH3
4-bromo-2,5-dimetoxianfetamina (DOB,
bromo-STP, BDMA)
1-(4-bromo-2,5-dimetoxifenil)propan-2-amina
CH3
OCH3
Br
OCH3
4-cloro-2,5-dimetoxianfetamina (DOC)
1-(4-cloro-2,5-dimetoxifenil)propan-2-amina
CH3
OCH3
Cl
OCH3
4-yodo-2,5-dimetoxianfetamina (DOI)
1-(4-yodo-2,5-dimetoxifenil)propan-2-amina
CH3
OCH3
OCH3
4-etil-2,5-dimetoxianfetamina (DOET)
1-(4-etil-2,5-dimetoxifenil)propan-2-amina
CH3
OCH3
C2H5
OCH3
51
Otras pautas de sustitucin de anillos (fenetilaminas y anfetaminas)

3,4,5-trimetoxifenetilamina (mescalina)
2-(3,4,5-trimetoxifenil)etanamina
OCH3
OCH3
OCH3
para-metoxianfetamina (PMA)
3-(4-metoxifenil)-1-metilpropilamina
CH3
OCH3
para-metoximetanfetamina (PMMA)
N-[2-(4-metoxifenil)-1-metiletil]-N-metilamina
CH3
CH3
OCH3
2,5-dimetoxianfetamina (DMA)
1-(2,5-dimetoxifenil)propan-2-amina
CH3
OCH3
OCH3
3,4,5-trimetoxianfetamina (TMA)
1-(3,4,5-trimetoxifenil)propan-2-amina
CH3
OCH3
OCH3
OCH3
4-metiltioanfetamina (4-MTA)
1-[4-(metiltio)fenil]propan-2-amina
CH3
SCH3
52
Anexo II. Preparacin de reactivos para ensayos cromticos y de aniones

Todos los reactivos se deben preparar de conformidad con un procedimiento establecido.
Ensayo de Chen
Reactivo 1:
Reactivo 2:
Reactivo 3:
Aadir 1 ml de cido actico glacial a 100 ml de agua (= 1% (v/v)

solucin de cido actico acuosa)
Disolver 1 g de sulfato de cobre (II) en 100 ml de agua (= solucin
acuosa (v/v) de CuSO4 al 1%)
Disolver 8 g de hidrxido de sodio en 100 ml de agua (= 2N solucin
acuosa de hidrxido de sodio).
Ensayo del cido glico

Reactivo :
Disolver 0,1 g de cido glico en 20 ml de cido sulfrico concentrado

(= 0,5% (p/v) solucin)
Ensayo de Marquis
Reactivo 1:
Reactivo 2:
Aadir de 8 a 10 gotas (aproximadamente 0,25 ml) de solucin de

formaldehdo al 37% a 10 ml de cido actico glacial
cido sulfrico concentrado
Ensayo del fosfato

Molibdato
amnico:
cido ntrico:
Disolver 10 g de molibdato amnico [(NH4)6Mo7024 x 4H20] en 100 ml

de agua (=solucin acuosa (p/v) de molibdato amnico al 10%)
Aadir cuidadosamente 10 ml de cido ntrico a 90 ml de agua
(= solucin de cido ntrico (v/v) al 10%)
Ensayo del nitrato de plata (tambin conocido como el ensayo del cloruro)
Disolver 1,7 g de nitrato de plata en 100ml de agua (= solucin acuosa de nitrato de plata
al 1,7%).
Ensayo de Simon
Reactivo 1:
Reactivo 2:
Reactivo 3:
Disolver 2 g de carbonato de sodio en 100 ml de agua (= solucin

acuosa de carbonato de sodio al 2%)
Disolver 0,9 g de nitroprusiato de sodio en 90 ml de agua (= solucin
acuosa de nitroprusiato de sodio al 1%)
Mezclar 10 ml de solucin de acetaldehdo y 10 ml de etanol
(= solucin etanlica de acetaldehdo (v/v) al 50%)
Ensayo del sulfato

Disolver 5 g de cloruro de bario dihidrato en 100 ml de agua (= solucin acuosa de cloruro
de bario aprox. al 5%).
Hay tambin otros procedimientos establecidos para la preparacin de reactivos para ensayos
cromticos, por ejemplo, el mtodo de Clarke, que muestra una ligera variacin en las recetas.
53
Anexo III. Ensayos de microcristales

Microcristales tpicos clasificados
Las formas tpicas de los microcristales se pueden clasificar en nueve grupos, empleando los
trminos descriptivos que se indican a continuacin. A fin de describir todos los tipos de
microcristales, se pueden aadir adjetivos como irregular, fino o cuadrangular a los trminos
bsicos
Fuente: no, M., Microcrystal Test, Japn, 1996
Reactivos
Reactivo de ensayo HAuCl4 en H3PO4 al 5%
Disolver 1 g de cido tetracloro urico (HAuCl4.4H2O) en 20 ml de una solucin que contenga un
volumen de H3PO4 concentrado y dos volmenes de agua.
Reactivo de ensayo H3BiI6 in H2SO4
Disolver 1,25 g de yoduro de potasio en 2,0 ml de agua. Aadir 2,5 ml de una solucin de H2S04
diluida al 1:7 con agua, 0,5 ml de solucin de Bi(NO3)3 concentrada y 0,1 g de hipofosfito de
sodio. La solucin madre de Bi(NO3)3 concentrada se prepara disolviendo 50 g de subnitrato de
bismuto en 70 ml de una solucin de HNO3 (diluida al 1:1 con agua) y completada a 100 ml con
agua. El reactivo de ensayo se puede mantener durante varios meses.
54
Reactivo de volatilizacin
Preparar una solucin acuosa de NaOH al 5%.
55
Anexo IV. Mtodos de CG validados para la cuantitacin de ETA

seleccionados
A continuacin se proporcionan ejemplos de mtodos de CG validados para el anlisis
cuantitativo de ETA seleccionados. El mtodo B no requiere derivatizacin; el mtodo C requiere
sililacin.
Las soluciones estndar y muestras de ETA descritas y sus concentraciones estn diseadas
para usar con columnas capilares y con los procedimientos que se describen ms abajo. El
empleo de columnas y sistemas de CG alternativos puede requerir cambios tanto en la
composicin relativa como en las concentraciones de componentes individuales.
Equipo y reactivos
Contenedores de cristal graduados de grado B o mejores.
Cromatgrafo de gas con detector de llama de ionizacin.
Balanza analtica capaz de pesar con una exactitud de 0,0001 g.
Todos los reactivos deben ser de calidad analtica.
MTODO B:
Mtodo de calibracin de puntos mltiples sin derivatizacin
El mtodo B es un mtodo validado para el anlisis cuantitativo por CG de ETA no derivatizados,

especficamente los siguientes: anfetamina, metanfetamina, MDA, MDMA, MDEA y MBDB.
Preparacin de la solucin estndar interna (SI): fenilbencilamina (PBA)
Pesar con exactitud 0,3 a 0,4 g de PBA en una probeta graduada de 500 ml y diluir a volumen
con cloroformo para obtener una solucin estndar interna de 0,6 a 0,8 mg/ml.
Preparacin de soluciones estndar de ETA (soluciones de calibracin de CG)
Las soluciones madre estndar deben contener todos los compuestos de inters en
concentraciones de aproximadamente 1000 mg/l. Se pueden mantener en una probeta cerrada
en un refrigerador hasta un ao. Para la preparacin de soluciones madre:
a)
Medir con exactitud unos 1000 mg del compuesto o los compuestos de inters en una
probeta graduada de 1000 ml y completar hasta la marca con agua.
b)
Con una pipeta, transferir exactamente 5 ml de esta solucin a un tubo de ensayo de

vidrio con tapa de rosca de 20 ml. Hacer bsica a tornasol aadiendo unas pocas
gotas de solucin de amonaco concentrada. Aadir exactamente 5 ml de cloroformo.
c)
Tapar y batir bien, luego dejar reposar hasta que se separen las capas. Utilizando una
pipeta de Pasteur, transferir aproximadamente 1 ml de la capa de cloroformo a travs
de sulfato de sodio anhidro a un vial pequeo. Esta solucin estndar no se debe
dejar reposar ms de media hora antes de utilizarla en la calibracin.
d)
Para la preparacin de estndares de calibracin para una calibracin de 5 puntos,

preparar los diferentes niveles de la siguiente manera:
56
Preparacin de estndares para una calibracin de 5 puntos

Solucin
estndar
de ETA (l)
Solucin
SI (l)
CHCl3
(l)
Concentracin
aproximada de sal
de ETA (mg/l)
Nivel 1
20
100
880
20
Nivel 2
40
100
860
40
Nivel 3
60
100
840
60
Nivel 4
80
100
820
80
Nivel 5
100
100
800
100
Nivel de
calibracin
Preparacin de soluciones de muestras de ETA (muestra de ETA desconocido)

En general, pero especficamente para anlisis cuantitativos, homogeneizar las muestras antes
de iniciar cualquier ensayo o submuestreo.
a)
Pesar exactamente una cantidad de muestra suficiente en una probeta graduada de

25 ml para obtener una concentracin final de aproximadamente 0,2-1 mg/ml del
analito. Completar con agua hasta la marca.
Nota: La cantidad de muestra que se pese depender de la pureza anticipada en funcin del
mtodo de clasificacin preliminar. Por ejemplo, si la pureza anticipada es del 40%, la cantidad
de muestra debe ser aproximadamente 60 mg.
b)

vidrio con tapa de rosca de 20 ml. Hacer base a tornasol aadiendo unas pocas gotas
de solucin de amonaco concentrada. Agregar exactamente 5 ml de cloroformo.
c)
Cerrar y batir bien, y luego dejar reposar hasta que se separen las capas. Utilizando
una pipeta de Pasteur, transferir aproximadamente 1 ml de esta solucin de muestra a
travs de sulfato de sodio anhidro a un vial pequeo. Colocar 100 l de la solucin de
muestra, 100 l de la solucin estndar interna y 800 l de cloroformo en un vial de
muestra de CG.
d)
Inyectar en el cromatgrafo de gas.

Para el anlisis cuantitativo, es preferible un CG equipado con un extractor de muestras
automtico. Se reconoce que el empleo de instrumentos diferentes puede requerir ajustes en las
condiciones de trabajo.
Columna:
Portador de gas:
Detector:
HP-5, 0,32mm x 30m x 0,5m

Helio a aprox. 1,2 ml/min (presin de cabeza 12 psi)
100C durante 4 min, luego 10C /min a 270C, y mantener 1 minuto
1 l
190C
Detector de llama de ionizacin a 270C
Tiempos de retencin aproximados

Anfetamina
7,18 min
Metanfetamina
8,25 min
MDA
13,16 min
57
MDMA
13,93 min
MDEA
14,58 min
MBDB
15,17 min
Fenilbencilamina (IS)
16,33 min
Cafena
17,92 min
Ketamina
18,33 min
Clculos
En los anlisis de rutina, el programa informtico realizar los clculos una vez terminado el
ensayo analtico. El resultado se imprimir automticamente en un informe expresado como
%w/w del analito como una base (es decir, peso del analito en relacin con el peso de la
muestra).
MTODO C: Mtodo de calibracin utilizando BSTFA como un reactivo de derivatizacin
(calibracin de puntos mltiples o de punto nico)
El mtodo C es un mtodo validado para el anlisis cuantitativo por CG de ETA derivatizados,
especficamente
los
siguientes:
efedrina,
seudoefedrina,
BDMA
(4-bromo-2,5dimetoxianfetamina) y 2C-B
El empleo del mtodo C se recomienda especficamente para muestras de ETA que contienen
efedrina y/o seudoefedrina, que frecuentemente no se resuelven con otro tipo de analitos y
producen picos amplios. Vase el anexo VII, que contiene detalles sobre derivatizacin.
Preparacin de la solucin estndar interna (SI): fenilbencilamina (PBA)
Igual que para el mtodo B, supra.
Preparacin de soluciones estndar de ETA (soluciones de calibracin para CG)
Para las calibracin de puntos mltiples utilizando BSTFA, preparar los diferentes niveles igual
que para el mtodo B supra, de la siguiente manera: tomar 20, 40, 60, 80 y 100 l de soluciones
madre estndar de ETA, para cada nivel de calibracin, aadir 100 l de la solucin estndar
interna, y 50 l de BSTFA. Aadir cloroformo hasta completar 1 ml.
Preparacin de soluciones de la muestra (muestra de ETA desconocido)
a)
Pesar con precisin la muestra en una probeta graduada de 25 ml hasta obtener una
concentracin final de aproximadamente 0,2-1 mg/ml de analito. Completar con agua
hasta la marca.
Nota: La cantidad de la muestra depender de la pureza anticipada en funcin del mtodo de
clasificacin preliminar. Por ejemplo, si la pureza anticipada es de un 40%, la cantidad de
muestra debe ser aproximadamente 60 mg.
b)

vidrio con tapa de rosca de 20 ml. Hacer base a tornasol aadiendo unas pocas gotas
de solucin de amonaco concentrada. Aadir exactamente 5 ml de cloroformo.
c)
Cerrar y batir bien, y luego dejar reposar hasta que se separen las capas. Utilizando
una pipeta de Pasteur, transferir aproximadamente 1 ml de esta solucin a travs de
sulfato de sodio anhidro a un vial pequeo. Colocar 100 l de la solucin de muestra,
750 l de cloroformo y 50 l de BSTFA en un vial de muestra de CG.
58
d)
Inyectar en el cromatgrafo de gas.

Columna:
Portador de gas:
Detector (FID):
HP-5, 0,32 mm x 30m x 0,5 m

Helio a aprox. 1,2 ml/min (presin de cabeza 12 psi)
100C 4 min., luego 5C/min a 200C, luego 10C/min a 270C, y
mantener 1 minuto
1 l
190 C
270C
Tiempos de retencin aproximados

Seudoefedrina-TMS
14,99 min
Efedrina-TMS
15,16 min
Fenilbencilamina-TMS (SL)
23,49 min
Cafena
26,22 min
Ketamina-TMS
26,75 min
2C-B-TMS
27,91 min
Clculos
En los anlisis de rutina, el programa informtico realizar los clculos una vez terminado el
ensayo analtico. El resultado se imprimir automticamente en un informe expresado como
%w/w del analito como una base (es decir, peso del analito en relacin con el peso de la
muestra).
59
Anexo V.
Mtodo CLGR para la cuantitacin de ETA seleccionados
A continuacin se examina un mtodo validado para la cuantitacin por CLGR de ETA

seleccionados solubles, incluidas la anfetamina, la metanfetamina, la fentermina y la MDMA.
MTODO CLGR PARA LA CUANTITACIN DE ETA

Solucin estndar de ETA
Pesar una cantidad apropiada de estndar de ETA en una probeta graduada hasta obtener una
concentracin final de aproximadamente 0,50 mg/ml. Diluir a volumen con metanol.
Solucin de la muestra del ETA
Pesar una cantidad apropiada de muestra en una probeta graduada para obtener una
concentracin final de fenetilamina aproximadamente igual a la de la solucin estndar. Diluir a
volumen con metanol.
Condiciones de trabajo con CLGR
Columna:
Temperatura de la columna:
Inyeccin:
Fase mvil:
Longitud de onda UV:
5 m Luna C18 (Phenomenex, Torrance, CA, USA) 150 x 3,0 mm

35C
5 l
10% acetonitrilo, 90% (50 mM fosfato + 50 mM trietanolamina,
pH 2,2)*; tasa de flujo 1,0 ml/min
210 nm
*El tampn se prepara disolviendo 22,5 ml de cido fosfrico concentrado en 4 l de agua de calidad para
CLGR. Aadir lentamente unos 25 ml de trietanolamina para ajustar la solucin a un pH de 2,2.
Tiempos de migracin relativos aproximados

Nicotinimida
0,28
Fenetilamina
0,55
Fenilpropanolamina
0,56
Doxilamina
0,56
Procaina
0,62
Efedrina
0,64
Seudoefedrina
0,65
Anfetamina
0,82
Acetominifen
0,93
metanfetamina
1,00 (2,7 min)
MDA
1,00
Quinina
1,04
Cloroquina
1,09
Dimetilanfetamina
1,12
60
MDMA
1,18
Cafena
1,48
Lidocaina
1,50
MDEA
1,55
Ketamina
1,95
Clorofeniramina
1,99
P2P
3,17
Safrol
3,50
Quaifenesin
3,61
Aspirina
5,09
Clculos
El porcentaje de contenido de ETA de la muestra se calcula a partir del rea de pico del ETA y el
rea de pico y la concentracin del estndar de ETA pertinente.
Malone, J. V. (1998), HPLC Quantification of Clandestinely Manufactured Mixtures of
Amphetamine and Methamphetamine, Microgram, 31, pgs. 304 a 307
61
Anexo VI. Mtodo de EC validado para cuantitacin de ETA seleccionados

A continuacin se explica un mtodo validado para la cuantitacin por EC de ETA seleccionados
solubles, incluidas la anfetamina, la metanfetamina, MDA, MDMA y MDEA en un instrumento de
EC Agilent HP3D. Hay que tener presente que algunas condiciones, como la longitud capilar, el
voltaje, los tiempos de lavado y las presiones y parmetros de seccin pueden cambiar con otros
fabricantes de instrumentos.
MTODO DE CAPILARES DINMICAMENTE REVESTIDOS PARA CUANTITACIN DE ETA

Disolvente de inyeccin
Pesar 1034 mg de fosfato de sodio monobsico en una probeta graduada de 100 ml. Diluir a
volumen con agua de calidad para CLGR (ajustar el pH a aproximadamente 2,6 utilizando cido
fosfrico y aadir por goteo). Transferir el contenido a una probeta graduada de 2000 ml con
ayuda de agua de calidad para CLGR. Diluir a volumen con agua de calidad para CLGR. Esta
solucin final contiene 3,75 mM de fosfato, con un pH de 3,2. Alternativamente, transferir todo el
contenido (con ayuda de agua de calidad para CLGR) de la botella de 250 ml de concentrado de
disolvente de inyeccin (MicroSolv, Eatontown, NJ, USA) a una probeta de 5 litros. Diluir a
volumen con agua de calidad para CLGR.
Solucin estndar interna de ETA
Pesar una cantidad apropiada de N-butilanfetamina HCl (o un estndar interno apropiado a una
probeta graduada) y colocar en una probeta graduada para obtener una concentracin final de
aproximadamente 1,0 mg/ml. Diluir a volumen con disolvente de inyeccin.
Solucin estndar de ETA
Pesar una cantidad apropiada de estndar de ETA en una probeta graduada para obtener una
concentracin final de aproximadamente 0,08 mg/ml. Con una pipeta, transferir una cantidad
apropiada de solucin estndar interna para obtener una concentracin final de 0,1 mg/ml. Diluir
a volumen con disolvente de inyeccin.
Solucin de muestra de ETA
Pesar una cantidad apropiada de muestra en una probeta graduada para que la concentracin
final de fenetilamina sea aproximadamente igual a la de la solucin estndar. Con una pipeta,
transferir una cantidad apropiada de solucin estndar interna para obtener una concentracin
final de 0,1 mg/ml. Diluir a volumen con disolvente de inyeccin.
Condiciones de trabajo para EC (aquiral)

Capilaridad:
Temperatura capilar:
Acondicionamiento:
Inyeccin:
Corrida de tampn:
Voltaje:
Slica pura 32 cm (23,5 cm a la ventana del detector) por 50 m i.d.

15C
1 min 0,1N hidrxido de sodio; 1 min agua; 1 min CElixir A (MicroSolv);
2 min CElixir B, pH 2,5 (MicroSolv).
50 milibares x 2 s de muestra seguida de 35 milibares x 1 s de agua
CElixir B, pH 2,5
10 kV
195 nm
62
Tiempos de migracin relativa aproximados

Doxilamina
0,76
Clorfeniramina
0,78
Quinina
0,80
Beta-fenetilamina
0,81
Cloroquina
0,81
Nicotinimida
0,84
Anfetamina
0,87
Metanfetamina
0,88
Procana
0,88
MDA
0,90
Norseudoefedrina
0,91
MDMA
0,91
Norefedrina
0,92
Seudoefedrina
0,92
Tetracana
0,93
Efedrina
0,93
Fenilefrina
0,95
MDEA
0,96
Ketamina
0,96
Feniltoxilamina
0,97
N-butilanfetamina (SI)
1,00 (4,6 min)
Metorfn
1,00
Lidocana
1,03
Benzocana
1,25
Acetominofn
2,11
Cafena
2,14
Quaifenesina
2,14
P2P
2,24
DMSO (marcador neutral)
2,40
Aspirina
2,71
Clculos
El contenido (%) del ETA desconocido se calcula a partir de su rea de pico, y el rea de pico y
la concentracin del estndar de ETA, en relacin con el rea de pico del estndar interno
(estndar y muestra).
63
Condiciones de trabajo para EC (quiral)

Capilaridad:
Temperatura capilar:
Acondicionamiento:
Inyeccin:
Voltaje:
Slica pura 32 cm (23,5 cm a la ventana del detector) por 50 m i.d.

15C
1 min 0,1N hidrxido de sodio; 1 min agua; 1 min CElixir A (MicroSolv);
2 min CElixir B, pH 2,5 + 50 mM 2-hidroxipropil--Ciclodextrina (MicroSolv).
50 milibares x 2 s de muestra seguido de 35 milibares x 1 s de agua
20kV
195 nm (longitud de banda 10 nm)
Tiempos de migracin relativa aproximados

l-norseudoefedrina
0,81
d-norefedrina
0,83
l-norefedrina
0,83
l-seudoefedrina
0,83
l-anfetamina
0,85
d-efedrina
0,86
d-anfetamina
0,86
l-efedrina
0,87
l-metanfetamina
0,87
d-norseudoeferina
0,88
d-metanfetamina
0,89
d-seudoefedrina
0,90
N-butilanfetamina*
1,00 (3,75 min)
N-butilanfetamina*
1,02
MDA*
1,03
MDA*
1,04
MDMA*
1,05
MDMA*
1,07
MDEA*
1,10
MDEA*
1,12
* d- o l-enantimero.
Lurie, I. S., Hays, P. A. y Parker, K. P. (2004), Capillary Electrophoresis Analysis of a Wide
Variety of Seized Drugs Using the Same Capillary with Dynamic Coatings, Electrophoresis., 25,
pgs. 1580 a 1591.
Lurie, I. S., Bethea, M. J., McKibben, T. D., Hays, P. A., Pellegrini, P., Sahai, R., Garcia, A. G. y
Weinberger R. (2001), Use of Dynamically Coated Capillaries for the Routine Analysis of
Methamphetamine, Amphetamine, MDA, MDMA, MDEA and Cocaine using Capillary
Electrophoresis, J. Forensic Sci., 46, pgs. 1025 a 1032.
64
Anexo VII. Derivatizaciones

La derivatizacin de ETA no es obligatoria, ya que la mayora se presta a los anlisis por CG y
son termoestables. No obstante, la derivatizacin de ETA (aminas primarias o secundarias)
mejora sus propiedades cromatogrficas al reducir la absorcin en columnas no deseable y no
especfica, as como las interferencias con la matriz.
Los mtodos de derivatizacin que se recomiendan ms abajo funcionan bien para la mayora de
los ETA que se encuentran con ms frecuencia; ahora bien, en raras ocasiones, algunas
condiciones de la reaccin, como el tiempo o la temperatura de reaccin, deben ajustarse.
Nota analtica
Si se escoge la derivatizacin como mtodo de preparacin de muestras, la extraccin de la
muestra se debe realizar en la forma descrita en las secciones pertinentes ms arriba. Despus
de la extraccin, el disolvente debe secarse por evaporacin bajo una ligera corriente de
nitrgeno a temperatura ambiente, o alternativamente a 30C. A fin de evitar prdidas del analito
por evaporacin, este paso se debe realizar con mucho cuidado, especialmente para el anlisis
cuantitativo de ETA. La forma ms eficiente de prevenir la evaporacin del analito es evaporar el
disolvente hasta aproximadamente 1 ml y luego aadir unas pocas gotas (50 l) de un disolvente
con alto punto de ebullicin (conservador de disolvente), por ejemplo, dimetilformamida. Tras
aadir el conservador de disolvente, se puede continuar la evaporacin hasta que quede slo
una delgada capa de disolvente. La muestra est ahora lista para la derivatizacin utilizando uno
de los mtodos recomendados.
Procedimientos de derivatizacin
Acetilaciones
Anhdrido heptafluorobutrico (HFBA)
Procedimiento A (acetilacin con anhdrido)
Aadir 50 l de HFBA al residuo seco del ETA extrado en un vial de reaccin18. Tapar el vial,
batir por 30 segundos e incubar durante 20 min a 75C. Evaporar el exceso de reactivo.
Reconstituir el residuo seco en 50 l de acetato etlico, e insertar 1-2 l en la columna del CG.
Procedimiento B (acetilacin con anhdrido en presencia de un catalizador bsico)
Aadir 50 l de 0,5M hidrxido de potasio al residuo seco de ETA extrado y seguidamente 500
l de tolueno. Despus de mezclar y centrifugar, transferir la capa orgnica a un tubo de ensayo
limpio, y aadir 50 l de HFBA. Mezclar cuidadosamente y en seguida aadir 500 l de
bicarbonato de sodio p/v al 10% mezclando continuamente. Centrifugar el tubo de ensayo hasta
que se separe la capa superior de tolueno. Inyectar 1-2 l de la capa de tolueno en la columna
del CG.
Anhdrido pentafluoroactico (PFAA)
Aadir 50 l de PFAA al residuo seco del ETA extrado en un vial de reaccin. Tapar el vial, batir
durante 30 segundos e incubar durante 20 min a 75C. Evaporar el exceso de reactivo.
Reconstituir el residuo seco en 50 l de acetato etlico, e inyectar 1-2 l en la columna del CG.
18
Los viales de reaccin son viales con tapa de rosca de vidrio grueso resistente a las temperaturas, por lo
general con un fondo cnico dentro del vial. Si no se dispone de viales especializados, la derivatizacin se
puede hacer en cualquier tubo de ensayo revestido de Teflon con tapa de rosca.
65
Anhdrido trifluoroactico (TFAA)

Aadir 100 l de acetato etlico y 50 l de TFAA al residuo seco del ETA extrado en un vial de
reaccin. Tapar el vial, batir durante 30 segundos e incubar durante 20 min a 60C. Evaporar el
exceso de reactivo. Reconstituir el residuo seco en 50 l de acetato etlico, e inyectar 1-2 l en la
columna del CG.
N-metilbis-trifluoroacetamida (MBTFA)
Aadir 500 l de MBTFA al residuo seco del ETA extrado en un vial de reaccin. Tapar el vial,
batir durante 30 segundos e incubar durante 30 min a temperatura ambiente. Evaporar el exceso
de reactivo. Reconstituir el residuo seco en 50 l de acetato etlico, e inyectar 1-2 l en la
columna del CG.
Dado que eluce temprano en el anlisis de CG, la evaporacin del exceso de reactivo puede no
ser necesaria si se prev que la concentracin de analito ser suficientemente grande para la
inyeccin directa de la mezcla de derivatizacin.
M. Doneke, J. Chromatography, 78, 273 (1973).
Sililacin
N-metil-N-tert.-butil-dimetilsilil trifluoroacetamida (MTBSTFA)
Aadir 100 l de acetonitrilo y 150 l de MTBSTFA al residuo seco del ETA extrado. Tapar el
vial y calentar durante 15 min a 90C. Dejar la muestra a temperatura ambiente por otras
2 horas, o ms, especialmente si se han de sililizar grupos amino secundarios. Aadir 500 l de
acetonitrilo, mezclar bien e inyectar 1-2 l en la columna del CG (si se prevn concentraciones
bajas del analito, la muestra se puede inyectar directamente sin dilucin con acetonitrilo).
Alternativamente, para evitar un pico temprano de MTBSTFA en el cromatograma de CG,
combinar el residuo seco del ETA extrado con 100 l de acetonitrilo y 100 l de MTBSTFA en un
vial de 3 ml. Sellar el vial y dejar reposar la mezcla durante 2 horas. Aadir 100 l de agua para
hidrolizar cualquier parte de MTBSTFA que no haya reaccionado. Aadir 250 l de n-hexano,
mezclar vigorosamente y centrifugar. Decantar la capa superior de hexano e inyectar 1-2 l en la
columna del CG.
R. Melgar, R. C. Kelly, J. Anal. Toxicol., 17 (nov./dec., 1993), pg. 399.
N,O-bis-[(trimetilsilil)trifluoroacetamida] (BSTFA)
Aadir 50 l de BSTFA y 100 l de acetonitrilo al residuo seco del ETA extrado en un vial de
reaccin. Tapar el vial, batir e incubar durante 15 min a 70 C. Inyectar 1-2 l en la columna del
CG.
66
Derivatizacin quiral
Se puedan preparar sustratos de diastereoismero de ETA utilizando muchos reactivos
diferentes, como los acilcloruros, alkilsulfonatos, isotiocianatos, cloroformatos, pero los dos que
se indican a continuacin son los ms populares.
1. cido R(+)/S(-)-a-metoxi-a-(trifluorometil)-fenilactico (cido de Mosher), o
cloruro de cido R(+)/S(-)-a-metoxi-a-(trifluorometil)-fenilactico (cloruro de cido
de Mosher)
Disolver el residuo seco de la muestra del ETA extrado en 1 ml de THF y mezclar con 0,5 ml de
0,2 M solucin de cido de Mosher en THF en un vial de reaccin revestido de Teflon con tapa
de rosca. Aadir 0,5 ml de solucin de bicarbonato de sodio p/v al 10%, tapar el vial y calentar a
65C durante 1 hora. Extraer la fase acuosa con cloroformo, secar con un sulfato de magnesio y
secar por evaporacin. Reconstituir el residuo en un disolvente adecuado para el anlisis por CG
(por ejemplo, cloroformo; vase la seccin sobre anlisis cualitativo por CG, supra).
En lugar del cido de Mosher, se puede utilizar el cloruro correspondiente. Est disponible en el
comercio o se puede preparar por reflujo del cido con cloruro de tionilo. Los cloruros cidos
suelen ser ms reactivos, aunque el propio cido de Mosher produce la derivatizacin
cuantitativa de la mayora de las aminas, con excepcin de la efedrina y la seudoefedrina. El
cido de Mosher o sus derivados se pueden utilizar como reactivos para anlisis tanto por CG
como por CLGR.
2. Cloruro de N-trifluoroacetil-L-prolil (TPC, o TFAP-Cl)
Disolver el residuo seco de la muestra del ETA extrado en 2 ml de cloroformo seco. Aadir 4 ml
de reactivo de TPC. Revolver la mezcla, y luego aadir 40 mg de trietilamina seca. Continuar
revolviendo durante 15 minutos. Lavar con 3 ml de 6 N HCl y luego con agua. Aadir MgSO4 y
dejar reposar la mezcla durante 15 minutos. Inyectar 1-2 ml en la columna del CG.
Se sabe que el TPC produce derivativos estables de casi todos los ETA, incluidas las efedrinas.
Se presta mejor al anlisis por CG.
67

Análisis de Anfetaminas

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OFICINA CONTRA LA DROGA Y EL DELITO

MANUAL PARA USO

Seccin de Laboratorio y Asuntos Cientficos

MANUAL PARA USO

La mencin de nombres de empresas y productos comerciales no implica

EMPLEO DEL MANUAL ...............................................................................................

DESCRIPCIN DE LOS COMPUESTOS PUROS ......................................................

Caractersticas fsicas ..........................................................................................

FABRICACIN ILCITA DE ETA ..................................................................................

Sntesis de ETA con anillo sustituido ...................................................................

ANLISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO DE ETA ................................................

Ensayos presuntivos ............................................................................................

Ensayo de aniones ......................................................................................

Ensayos de microcristales ...........................................................................

Cromatografa de capa delgada (CCD) ..............................................................

Cromatografa en fase gaseosa (CG) detector de ionizacin por llama (FID)

Anlisis cualitativo .......................................................................................

Anlisis cuantitativo .....................................................................................

Mtodo A: mtodo estndar nico ........................................................

Mtodo B: mtodo estndar mltiple sin derivatizacin ......................

iii. Mtodo B: mtodo estndar mltiple con derivatizacin .....................

Cromatografa en fase gaseosa espectrometra de masas (CG-EM) ............

Cromatografa lquida de gran rendimiento (CLGR) ...........................................

Espectrometra infrarroja transformada de Fourier (FTIR) .................................

Anlisis de ismeros pticos................................................................................

Punto de fusin ............................................................................................

Ensayos de microcristales ...........................................................................

Tcnicas instrumentales ..............................................................................

iii. Tcnicas de EC.....................................................................................

iv. Tcnicas IR ...........................................................................................

VII. OTRAS TCNICAS ANALTICAS PARA EL ANLISIS DE ETA.................................

Tcnicas de resonancia magntica nuclear H (RMN) .......................................

Electroforesis capilar (EC) ..................................................................................

Cromatografa en fase slida microextraccin en fase slida (CG-SPME)

Mtodo de anlisis de cabeza ....................................................................

Anlisis (de trazas) de muestras acuosas..................................................

Cromatografa en fase gaseosa espectroscopa infrarroja transformada de

En el plano internacional la atencin se centra cada vez ms en una cuestin de importancia

EMPLEO DEL MANUAL

Los estimulantes de tipo anfetamnico (ETA) son un grupo de sustancias, en su mayora de

Ninguna sustitucin en el anillo aromtico (por ejemplo, anfetamina, metanfetamina,

DESCRIPCIN DE LOS COMPUESTOS PUROS

Puntos de fusin y de ebullicin

FABRICACIN ILCITA DE ETA

Grfico 3. Reaccin Leuckart utilizada en la fabricacin ilcita de anfetamina

Reduccin cataltica heterognea utilizando xido de platino, paladio o nquel Raney;

Reducciones no metlicas, como el mtodo 'cido hidridico/fsforo rojo;

La reduccin cataltica heterognea utilizando tionilcloruro y paladio u xido de platino

Es raro encontrar otras reacciones, como el mtodo del nitropropeno o el de la oxima.

Grfico 4. Mtodos comunes para la fabricacin ilcita de metanfetamina

C. SNTESIS DE ETA CON ANILLO SUSTITUIDO

Grfico 5. Aminacin reductiva utilizada en la fabricacin ilcita de MDMA

La MDMA tambin se fabrica normalmente utilizando el denominado mtodo del

ANLISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO DE ETA

Por lo general, cuando se intenta determinar la identidad de una sustancia sometida a

Rosa plido, naranja

SR--> verde plido

SR = sin reaccin. * El color del reactivo se debe considerar negativo.

Metanfetamina y sus sales

ETA con anillo sustituido y sus sales

B. CROMATOGRAFA DE CAPA DELGADA (CCD)

ms de 30 minutos), sensible (se requieren cantidades inferiores a 1 mg del analito),

Gel de slica G con un espesor de capa de 0,25 mm, y con un