III) La informacin celular

5) Replicacin del ADN

5) LA REPLICACIN DEL ADN

)CMO ES EL PROCESO DE REPLICACIN DEL ADN? El ADN es una molcula formada por dos hebras complementarias y antiparalelas. Una de las primeras dudas que se plantearon fue la de cmo se replicaba el ADN. A este respecto haba dos hiptesis: 1 0) El ADN se replica de manera conservativa. Esto es cada hebra de ADN forma una copia y una clula hi!a recibe la molcula ori"inal y la otra clula recibe la copia. 2 0) El ADN se replica de manera semiconservativa. #ada hebra de ADN forma una hebra complementaria y cada clula hi!a recibe una molcula de ADN que consta de una hebra ori"inal y de su complementaria sinteti$ada de nue%o. Esta contro%ersia fue &E'E(')N y '*A+( con ele"antes e,periencias. resuelta por una serie de
ADN ori%ina&

0eplicacin

ADN ori%ina&

ADN co'ia

Fig. 1

Replicacin conservativa.

0eplicacin

ADN ori%ina&

ADN co'ia ( ori%ina&

ADN ori%ina& ( co'ia

Fig. 2

Replicacin semiconservativa.

E PERIENCIAS DE MESELSON ! S"A#L$

3
3

12 N3 12N

12 N3 12N

14 N3 14N

Se cultivan bacterias E. coli en un medio con formado por dos "ebras de ' se obtiene el resultado
15

15

N (nitrgeno

A continuacin& se cultivan las bacterias en nitrgeno 1( (1(N)

m$s ligero durante )* minutos& lo rrecta& se deber+a obtener lo ue dura un ciclo de replica# cin% Si la "iptesis de la s+ntesis conservativa fuese la co# ue se ve en la figura& una banda de ADN pesado (15 N#15 N) ' otra con ADN ligero (1( N#1( N) pero%%%

pesado) durante cierto tiempo para ue todo el ADN est! N (15 N#15 N) m$s pesadas% Si se centrifu ga& este ADN m$s pesado migra "acia el fondo del tubo ue se observa en la figura%

14N 312N

12N 314N

14N 312N

14N3 14N

14N3 14N

12N 314N

%% lo

ue se obtiene en realidad es lo

ue se observa en la

Adem$s& si se da otro ciclo de replicacin en

1( 15

1(

N& se obtiene

figura, una sola banda en posicin intermedia& pues est$ formada por ADN mi-to (15 N#1( N)% .sto es& todas las c!lulas "i/as tienen un ADN con una "ebra con
15

una banda de ADN mi-to ( N# N) ' otra de ADN (1( N#1( N)& lo ue tambi!n est$ de acuerdo con la "iptesis de la s+ntesis semiconservativa.

N ' otra con

1(

N% La

"iptesis de la s+ntesis semiconservativa es la correcta%

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5) Replicacin del ADN

LA REPLICACIN SEMICONSER)A"I)A DEL ADN EN E*CARIO"AS #uando una clula se di%ide o cuando se ori"inan los "ametos las nue%as clulas que se forman deben contener la informacin "entica que les permita sinteti$ar todas las en$imas y el resto de las prote nas necesarias para reali$ar sus funciones %itales. 5sta es la principal ra$n por la que el ADN debe replicarse. La re'&icaci+n ,e& ADN es e& 'roceso se%-n e& c.a& .na mo&/c.&a ,e ADN ,e ,o0&e 1/&ice ,a &.%ar a otras ,os mo&/c.&as ,e ADN con &a misma sec.encia ,e 0ases$ En la clula procaritica la replicacin parte de un 6nico punto y pro"resa en ambas direcciones hasta completarse. En la clula eucaritica el proceso de replicacin del ADN no empie$a por los e,tremos de la molcula sino que parte de %arios puntos a la %e$ y pro"resa en ambas direcciones formando los llamados o2os ,e re'&icaci+n. 7rimero se separan las dos hebras y una %e$ separadas %an entrando los nucletidostrifosfato complementarios de cada uno de los de las hebras ori"inales del ADN. (as en$imas ADN polimerasas los unen entre s formando una hebra de ADN complementaria de cada una de las hebras del ADN ori"inal. 'e dice que la sntesis de ADN es semiconservativa porque cada una de las molculas de ADN 8 1i2as8 est. forma3 da por una hebra de ADN ori"inal y otra complementaria sinteti$ada de nue%o. Es de destacar que la direccin en la que pro"resa la replicacin es la misma en ambas hebras. Ahora bien las en$imas que unen los nucletidos slo pueden efectuar la unin en direccin 29 :9. Esto nos indica que ambas hebras al ser antiparalelas deben de sinteti$arse de diferente manera. a) 'ntesis continua de la hebra en direccin 29 :9. (a sntesis de esta hebra no plantea nin"6n problema. As una %e$ separadas ambas hebras la ADN pol. ;;; <una de las

#romosoma: arriba en procariotas aba!o en eucariotas.

Fig. 3 Replicacin del ADN en procariotas y en eucariotas. En procariotas slo hay un ojo de replicacin, mientras que en eucariotas hay varios.

Fig. 4 Microfotografa al MET de un fragmento de la doble hlice de un cromosoma de eucariota replicndose.

Ojos de replicacin

Cromosoma (doble hlice de ADN) replisomas

Fig. 5 Cromosoma de eucariota replicndose. El replisoma es un complejo formado por todas las enzimas que intervienen en el proceso de replicacin.

#e0ra ,e ADN
A # *

A"P asa #e&icasa

"o'oisomerasa
A / *

Prote3nas esta0i&i4a,oras ADN 'o&imerasas

Fig. 6 Enzimas y otras protenas que forman el replisoma. Se muestra en este esquema un detalle del recuadro de la figura anterior.

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5) Replicacin del ADN

en$imas que unen los nucletidos) %a a elon"ar la cadena en direccin 29 :9 a partir de un primer o fra"mento de A0N que despus ser. eliminado. b) 'ntesis discontinua. (a hebra comple3 mentaria no se %a a replicar en sentido :9 29 sino que se replica ,iscontin.amente en direccin 29 :9. (os diferentes fra"men3 tos sinteti$ados llamados fra"mentos de O5a4a5i son posteriormente unidos entre s. El proceso es comple!o y consiste en lo si3 "uiente: En primer lu"ar se sinteti$a un pe3 que=o fra"mento de A0N fra"mento deno3 minado primer. 7artiendo de este primer se sinteti$a un fra"mento de ADN en direccin 29 :9. Al lle"ar al primer del fra"mento anteriormente sinteti$ado ste es de"radado y se rellena el hueco con ADN. 'e dice que la replicacin es discontinua porque el ADN se %a a ir sinteti$ando en fra"mentos que posteriormente son soldados uno al otro.

A U

* A

# /

/ #

A *

A *

# /

# /

/ #

* A

* A

/ #

# /

A *

# /

Fig. 7

Sntesis continua.

A *

* A

A *

A U

# /

/ #

# /

A *

/ #

* A

* A

/ #

/ #

/ /

1er fragmento sinteti ado

2! fragmento sinteti ado

Fig. 8

Sntesis discontinua.

A "

" A

C 6

6 C

A "

" A

C 6

6 C

6 C

6 C

C 6

A "

" A

C 6

6 C

A "

" A

C 6

6 C

6 C

A "

* A

C 6

6 C

A "

" A

C 6

6 C

6 C

6 C

Fig. 9

Replicacin del ADN. Acontecimientos que se dan en un replisoma.

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