DIVISIN DE BIOTECNOLOGA

ENSAYO DE: CULTIVO MONOXNICO SUMERGIDO DEL NEMATODO ENTOMOPATGENO, Steinernema carpocapsae CABA01, EN BIORREACTOR AIRLIFT CON RECIRCULACIN INTERNA.

ALUMNO: LUIS FERNANDO ALLENDE FLIX

ASIGNATURA: INGENIERA DE LAS FERMENTACIONES

PROFESOR: EDUARDO CUEVAS RODRGUEZ

GRUPO: 8IBT1
FECHA DE ENTREGA: 29 DE NOVIEMBRE DE 2013.

La contaminacin actual en campos de agricultura mexicana se ve afectada principalmente por el uso de fertilizantes y plaguicidas a base de sustancias qumicas, estos no solo contaminan el suelo, sino por lixiviacin pasan a los mantos acuferos y contaminan el agua, llevando as un grave efecto a la salud humana que consume este lquido. El presente ensayo trata acerca del uso de un parasito entomopatgeno en fase infectiva juvenil de los gneros Steinernema y Heterorhabditis para el control biolgico de un amplio nmero de insectos plaga como larvas de escarabajos en viedos y pastos.

Pero Cmo se lleva a cabo el control biolgico de plagas? Steinernema y Heterorhabditis forman una relacin simbitica con bacterias Gram negativas de los gneros Xenorhabdus y Photorhabdus, estos son llevados al intestino del parsito infectivo juvenil, el cual es el nico nematodo

entomopatgeno que puede vivir fuera del insecto husped y tiene la habilidad de buscar a su presa e invadirla, liberando as a su bacteria simbionte dentro de la plaga, donde esta bacteria liberar toxinas y enzimas responsables de la muerte del insecto as como un medio nutritivo capaz de producir el crecimiento y reproduccin de nematodos entomopatgenos que posteriormente se liberarn y buscaran un nuevo husped.

Conociendo la importancia de este entomopatgeno la produccin masiva ha sido de gran inters actual. Se ha buscado un mtodo para su produccin a gran escala, uno de ellos es el cultivo monoxnico sumergido usando biorreactores, tambin se ha utilizado la tcnica de cultivo in vivo tras obtener nematodos de mayor calidad. Sin embargo aun falta disponer de bioprocesos ms confiables, se requieren ms estudios concernientes a la formulacin de medios de cultivo, cintica de crecimiento poblacional, diseo de biorreactores y mejor exploracin de las condiciones de operacin.

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Y a todo esto Dnde entra la Biotecnologa? El corazn de la biotecnologa se encuentra en el proceso de produccin masivo del parasito entomopatgeno en el biorreactor agitado neumticamente del tipo airlift con recirculacin interna a travs de un cilindro concntrico.

Uno de los intereses principales que busca este ensayo es conocer las condiciones de proceso que cambian con el tiempo, para lo cual el nmero de Reynolds (Re) y el coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno (KLa) fueron tomados como indicadores.

As el proceso de operacin inicia esterilizando el biorreactor durante 1.5 h con vapor saturado a 98C. Luego el cultivo bacteriano fue incubado a 30C con aireacin de 1 volumen de aire por volumen de medio por minuto (vvm) durante 48 horas. Transcurrido este tiempo, las fases infectivo juveniles de S. carpocapsae fue inoculado hasta una concentracin de 1000 infecto juveniles/ml y cambiando la temperatura a 22C y una aireacin de 1 a 1.5 vvm. Cabe sealar que se realizaron dos fermentaciones, para su comparacin final.

Cada 4 das se tom 30 ml de caldo para determinar las propiedades reolgicas de los caldos de fermentacin tales como su viscosidad aparente, su densidad, etc.

Para qu se realiza el clculo del nmero de Reynolds? Dentro del biorreactor se midi el nmero de Reynolds en la seccin ascendente y descendente del flujo, se determin que si el flujo es laminar las condiciones de apareamiento del nematodo eran favorecidas, en este sentido un incremento en el nmero de Reynolds podra traducirse en una disminucin de productividad de nematodos entomopatgenos infectivos juveniles.

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Cmo afectan las condiciones de oxigenacin durante las fermentaciones? El coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno KLa fue considerado como el ndice de eficiencia de oxigenacin lograda en los bioprocesos. As la demanda especfica de oxgeno de los nematodos entomopatgenos puede cambiar si este alcanza un nuevo estadio de desarrollo.

Despus de 16 das las fermentaciones realizadas, que comenzaron con aproximadamente 1000 nematodos infectivos juveniles por mililitro de medio alcanz concentraciones de 127 220 y 92 897 nematodos/ml con 99.6% y 96.56% en fase infectiva juvenil para las dos fermentaciones respectivamente. Como conclusin fue posible lograr la propagacin masiva del nematodo

entomopatgeno usando el biorreactor airlift de circulacin interna. (Vergara, Rodrguez, & Chavarra, 2010)

REFERENCIAS
Vergara, G. M., Rodrguez, A. I., & Chavarra, N. (2010). Cultivo Monoxnico Sumergido del Nematodo Entomopatgeno. Recuperado el 26 de Noviembre de 2013, de http://www.smbb.com.mx/revista/Revista_2010_1/cultivo.pdf

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