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ENZIMA
ENZIMA
Las enzimas son protenas que actan como biocatalizadores, es decir, se tratan de compuestos naturales de poseen todos los organismos vivos. La vida no es posible sin ellas ya que muy pequeas cantidades de enzimas son capaces de acelerar y multiplicar reacciones qumicas especficas. El uso de las enzimas en la panadera data de mediados del siglo XIX, cuando a los panaderos y molineros les va llegando informacin de que la harina de malta daba color al pan. Entonces la miga era ms hmeda y se conservaba ms tiempo por lo que la alfaamilasa de la malta de la cebada aumentaba la fermentacin con la generacin de azcares fermentables (maltosa) a partir del almidn. Ms tarde se descubri que la enzima activa de la soja blanqueaba la miga y mejoraba la firmeza del gluten a travs de la accin de la lipoxigenasa. Desde finales del siglo pasado, el uso de enzimas especficas para segn qu procesos panarios o caractersticas del pan, se ha generalizado en la industria. Procesos como la fermentacin controlada o la precoccin, sin embargo, obligan a saber perfectamente las reacciones que las enzimas pueden aportar en las masas. Francisco Tejero Director tcnico de Molinera y Panadera
panadero adiciona las enzimas a su pan; a travs de un conjunto enzimtico, que incorpora generalmente tambin cido ascrbico y algn tipo de emulsionante. Por ello, otros factores como la acidez de las masas madres, la temperatura de la masa y de la fermentacin, as como la temperatura del horno, tendrn una repercusin de reacciones bien distintas cuando estos parmetros cambien. Casi todas las reacciones qumicas de las clulas son canalizadas por enzimas, con la particularidad de que cada enzima slo cataliza una reaccin, por lo que existiran tantas enzimas como reacciones. Sustratos disponibles en la harina. La actividad de una enzima responde a la concentracin del complejo enzima-sustrato. Es muy importante que la cantidad de sustrato y enzima estn relacionados. Cuando ste es limitado la accin de la enzima es lenta y limitada la reaccin, y cuando la cantidad de sustrato sea elevada la reaccin ser rpida y efectiva. En una reaccin catalizada por la enzima (E), los reactivos se denomina sustratos (S), es decir, la sustancia sobre la que acta la enzima. El sustrato es modificado qumicamente y se convierte en uno o ms productos (P). Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimtica. En general,
los aumentos de temperatura aceleran las reacciones qumicas y enzimticas: por cada 10 C de incremento, la velocidad de reaccin se duplica. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. Sin embargo, al ser protenas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el calor. La temperatura a la cual la actividad cataltica es mxima se llama temperatura ptima. Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reaccin debido a la temperatura es contrarrestado por la prdida de actividad cataltica debida a la desnaturalizacin trmica, y la actividad enzimtica decrece rpidamente hasta anularse. Las enzimas que se utilizan en la panadera comienzan su actividad desde que sea aade agua en el amasado y terminan en el horno, si por ejemplo la masa sale de la amasadora por debajo de 25 C su actividad es bien diferente a si la masa queda caliente, otro ejemplo es cuando la masa se fermenta a altas temperaturas; si por el contrario es muy fra o tambin si la temperatura inicial del horno es baja o al contrario muy alta, se va a prolongar o reducir la actividad de las enzimas. Normalmente las enzimas que se utilizan en la harina y las que el panadero aporta a travs del mejorante se desnaturalizan y se desactivan en-
tre los 60-70 C. Tambin las enzimas aadidas a las masas de fermentacin controlada, an con actividad reducida debido a la baja temperatura, siguen activas, y tendrn tal repercusin que si bien se paraliza la actividad fermentativa de la levadura, prosigue lentamente la degradacin del gluten y del almidn. La repercusin es que a mayor tiempo de fermentacin baja la fuerza de la masa y el colorido y la cristalizacin del pan una vez cocido aumenta. Efecto del pH sobre la actividad enzimtica. El pH es una medida de la acidez relativa de la masa. La acidez en la que la actividad de las enzimas es ptima, en procesos con fermentaciones cortas, se obtiene difcilmente cuando no se aade una porcin de masa madre. Los aminocidos que forman las protenas pueden estar cargados positivamente o negativamente dependiendo del pH de la masa. A pH neutro (pH=7), la mayor parte de las protenas tienen en ambos signos positivo y negativo cargas disponibles a lo largo la cadena de aminocido. Cargas opuestas se atraen y cargas iguales se repelen. sta fuerza de atraccin/repulsin juega un papel importante en el sostn de toda la estructura de tridimensional de la protena, la cual es importante para su funcionalidad. Como la conforma-
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cin de las protenas depende, en parte, de sus cargas elctricas, habr un pH en el cual la conformacin ser la ms adecuada para la actividad cataltica. ste es el llamado pH ptimo. La mayora de las enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones de pocas dcimas por encima o por debajo del pH ptimo pueden afectar drsticamente su actividad. Amilasas as alfa-amilasas pueden obtenerse a partir de cereales, hongos L (fngicas) o bacterias. La alfa-amilasa de origen cereal (harina de malta). Su elaboracin consiste en la germinacin del
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trigo o para que se movilicen las alfaamilasas naturales del grano. Hasta la dcada pasada los mejorantes completos de panificacin se formulaban con este tipo de amilasas. Estas amilasas se inactivan a 75 C, por lo que en una harina con elevada actividad enzimtica o en el caso de una sobre dosificacin dar mayor estabilidad al calor, lo que podr ocasionar los mismos problemas que las harinas procedentes de trigo germinado. La alfa-amilasa bacteriana. Se produce a partir de la bacteria Bacillus subtilis y es muy resistente al calor por lo que a temperaturas de 70 a 90 C alcanza su mxima velocidad de reaccin. El efecto secundario tpico de la amilasa bacteriana es una disminucin de la viscosidad del en-
grudo del almidn. Amilasa de origen fngico. Se produce por fermentacin de una cepa de hongo Aspergillus niger, y es la ms utilizada en la fabricacin del pan, como alternativa a la harina de malta. Ello es debido al hecho, entre otros, de que la alfa-amilasa fngica tiene una mayor tolerancia a la sobre dosificacin que la de origen cereal, lo que se basa en su desactivacin durante la primera fase de la coccin (60-65 C); con ella que no existe el riesgo de que se produzca exceso de dextrinas, lo cual producira migas pegajosas. La actividad de las alfa-amilasas de origen fngico comerciales se mide en dos unidades: FAU (Unidad Fungal Amilasa), que es la cantidad que dextrinizar
Amilasas fngicas Amilasa Arpesguillus oryzae Almidnmaltosa+dextrina Amilasa del Bacillus amyloliquefaciens Almidndextrinas Amiloglucosidasa del Asperguillus niger Almidnglucosa Amilasa maltognica del Bacilllus amyloliquefaciens Almidnmaltosa Otros polisacridos Pentosanasas
Maltosa+dextrinas
Dextrinas
Glucosa
Maltosa
Desintegracin de pentosanas
Como consecuencia, se produce una mayor retencin de gas y un mayor impulso en el horno debido al retraso en la formacin de la miga. Volumen Conservacin Aumento de volumen y tolerancia en la fermentacin Caractersticas de la masa: Ablandamiento de la estructura del gluten Galletas, craker Blanqueado de la miga Mejora del gluten Aumento de la extensibidad Conservacin del pan Reduce uso de emulgentes
Hemicelulasas Xilanasas
Desintegracin de hemicelulosas Estabilidad de fermentacin Acta sobre la fraccin soluble rompiendo la unin con el gluten Aflojan la estructura del gluten
Proteasas fngicas Oxidasas (Gox y Sox) Reductasa Protenas Lpidos Proteasas bacterianas Lipoxigenasas (mediante harina de soja sin desgrasar y sin tostar) Lipasas
Acortan las cadenas proteicas hasta la eliminacin del gluten Oxidacin de carotenoides
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La alfa-amilasa corta las cadenas en unidades menores, denominadas dextrinas, mientras que la beta-amilasa va separando de las dextrinas unidades de maltosa. Este azcar, formado por la unin de dos molculas de glucosa, es ya asimilable por la levadura. Pese a todo, el contenido en alfa-amilasa no es suficiente para alcanzar el ritmo de fermentacin requerido en los procesos actuales. Por eso es imprescindible corregir el contenido enzimtico va el mejorante
unidades de maltosa. Este azcar, formado por la unin de dos molculas de glucosa, es ya asimilable por la levadura. Pese a todo, el contenido en alfa-amilasa no es suficiente para alcanzar el ritmo de fermentacin requerido en los procesos actuales. Por eso es imprescindible corregir el contenido enzimtico va el mejorante. El efecto principal de las amilasas sobre la masa es el aumento de la velocidad de fermentacin, facilitada por la mayor produccin de gas y por el ligero reblandecimiento de la masa producido por la liberacin del agua absorbida por los grnulos de almidn atacados. Una dosificacin excesiva de amilasas se traduce en masas pegajosas de difcil manipulacin. Al entrar la masa en el horno, y hasta la inactivacin de las enzimas, se produce una aceleracin violenta de las diferentes reacciones implicadas en la fermentacin, aumentando la produccin de gas, dilatndose ste y evaporndose el alcohol y parte del agua de la masa. La gelatinizacin del almidn, mucho ms sensible en ese estado al ataque enzimtico, contribuye tambin. Las dextrinas no consumidas mantendrn a la miga ms jugosa, pero tambin determinar la coloracin de la corteza. Amiloglucosidasa. Tambin denominada glucoamilasa, se obtiene tambin de un hongo. Acta sobre las dextrinas produciendo glucosa, lo que se traduce en una aceleracin de la fermentacin. Se utiliza en procesos rpidos de panificacin donde se desea que la masa fermente rpidamente, esto ocurre al liberar glucosas para que la levadura pueda producir el gas desde el inicio de la fermentacin. Pentosanasas stas enzimas actan sobre las E pentosanas, que son unos polisacridos distintos al almidn. Esta reaccin de hidrlisis aumenta la absorcin de agua en la masa, aumentando la tenacidad y disminuyendo ligeramente la extensibilidad. Como consecuencia, se produce una mayor retencin de gas y un mayor impulso en el horno debido al retraso en la formacin de la miga. Los preparados enzimticos de pentosanasas se aaden con el propsito de frenar el envejecimiento rpido del pan. Se ha podido observar que retardan la velocidad de retrogradacin del almidn. Al mismo tiempo, dichas enzimas retienen agua durante la coccin y posteriormente esta agua puede ser suministrada gradualmente al almidn, lo que permite mantener ms tiempo el pan tierno. Hemicelulasas s una pentosanasa cuya accin se E debe a la hemicelosa o compuestos polisacridos presentes en la harina. Lo ms interesante de esta enzima es que acelera y aumenta la capacidad de coagulacin del gluten, lo que es de inters en los panes precocidos ya que la formacin de la miga en la etapa de precoccin la acelera siendo el resultado favorable para la formacin de la miga y evitar as el colapso del pan precocido. Esta enzima debe siempre estar reforzada por otras ya que acepta bien el sinergismo, por ejemplo lipasa+hemicelulasa; esta combinacin aumenta la fuerza en la masa y sobre
todo la conservacin del producto terminado. Las celulasas actan igual que la hemicelulasa Xilanasas n una hemicelulasa especifica y E en particular endo-1,4--xilanasa se utiliza en la industria de la panificacin para mejorar la textura del pan, el color y el volumen de los productos horneados. Proteasas a utilizacin de enzimas proteolticas en la fabricacin del pan L no es de uso corriente en Espaa, debido a que las harinas son flojas y extensibles y, en muchos casos la harina ya es portadora de dichas enzimas provenientes del ataque del garrapatillo en el trigo. Las proteasas de origen fngico son menos agresivas que las de origen bacteriano y se emplean en las masas fermentadas, exclusivamente cuando son muy fuertes y tenaces, y
Las proteasas de origen fngico son menos agresivas que las de origen bacteriano y se emplean en las masas fermentadas, exclusivamente cuando son muy fuertes y tenaces, y en la fabricacin de magdalenas, bizcochos y plum-cakes
en la fabricacin de magdalenas, bizcochos y plum-cakes. En la fabricacin de galletas y barquillos se utilizan proteasas bacterianas. En estos casos, su efecto se traduce en un debilitamiento del gluten, lo que favorece el laminado de la masa y su expansin sin deformacin
durante la coccin. La degradacin del gluten ayuda a la obtencin de galletas ms crujientes. En la fabricacin de barquillos la viscosidad o fluidez de la masa aumenta con la adiccin de proteasas bacterianas, que ayudan a la evaporacin del agua, lo que repercute en una mayor productividad y una menor fragilidad. La galleta es un producto horneado con un contenido en humedad inferior al 5%. La receta base es grasa, azcar y harina; a partir de esta receta las variedades son ilimitadas, no solamente en la composicin de sta con otros ingredientes sino tambin en su formato. La harina que se utiliza en la fabricacin de galletas debe ser de bajo contenido en protena y con unas propiedades reolgicas muy dbiles y extensibles. No siempre el industrial galletero tiene este tipo de harina, para ello ha de recurrir a enzimas proteolticas que tienen la facilidad de romper las largas molculas de protena que forman el gluten. Las proteasas de origen bacteriano son
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las ms utilizadas en galletera. Otros tipos de proteasas fngicas atacan el gluten pero de forma dbil, rompiendo algunos enlaces, se utilizan principalmente en panificacin y en la elaboracin de craker. El uso de papena (enzima obtenida de la papaya) en la elaboracin de las galletas es para reemplazar el metabisulfito sdico, que se utiliza en algunos pases para suavizar la masa. En la fabricacin de obleas es imprescindible emplear harina con muy
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poco gluten; lo que se consigue con harinas bajas en protenas. Lipoxigenasas a harina de soja activa es el principal portador de la enzima lipoL xigenasa. En la fabricacin de pan de molde y pan de hamburguesas y, en general, en aquellos panes que se desee potenciar la blancura de la miga est recomendado el uso de entre 5 y 10 g/kilo de harina de soja activa.
El efecto de la lipoxigenasa sobre el cido linoleico, es la formacin de hidroxiperxidos, que producen una oxidacin acoplada de sustancias lipfilas, como los pigmentos carotenoides. Esta oxidacin ocurre durante la etapa de amasado y da lugar a una miga ms blanca y brillante, al mismo tiempo que aumenta el volumen del pan y que su sabor sea ms inspido. Con la adiccin de harina de soja activa se puede potenciar el efecto
oxidante sin modificar en exceso el equilibrio de la harina, proporcionando ligeramente el aumento de la extensibilidad. Lactasas l azcar de la leche y sus producE tos derivados se denomina lactosa, y es un disacrido, es decir, est formada por dos azcares simples: la glucosa, que es fermentada por la levadura, y la galactosa, que no es fermentada y tiene poco poder edulcorante. La lactosa puede ser hidrolizada a estos tipos de azcares mencionados por medio de una enzima denominada lactasa. Este fenmeno de degradacin del azcar de la leche produce un aumento en la velocidad de fermentacin y contribuye a la coloracin del pan. En la fabricacin de pan de molde y de hamburguesa, el uso de leche en polvo o suero potenciar el color de la corteza, disminuyendo as el tiempo de coccin y manteniendo el mximo de humedad. Lipasas a lipasa es una enzima que libera L emulgentes (mono y diglicridos de cidos grasos) a partir de las grasas que contiene la masa. Esto se traduce en un aumento de la fuerza de la masa, de la tolerancia en la fermentacin y de la conservacin. Suelen contener lipasas los complejos enzimticos destinados a panes y produc-
tos de bollera de larga conservacin. Tambin reduce o sustituye los emulgentes. En las masas que van a ser sometidas a un laminado est recomendado el uso de las lipasas debido a que stas aumentan la capacidad de estiramiento y laminado por la formacin de monodiglicridos, los cuales no solamente actan sobre la extensibilidad, sino tambin en el retraso en el envejecimiento del pan o bollo. Oxidasas Glucosa-oxidasa (GOX). La glucosa oxidasa en abreviatura GOX es una enzima que en presencia de agua y oxgeno, cataliza la oxidacin de la glucosa a cido glucnico y perxido de hidrgeno, es decir, agua oxigenada. Esta transformacin favorece la oxidacin de las protenas, aumentando la tenacidad del gluten y reduciendo su extensibilidad. Su efecto es como el del cido ascrbico: incrementa la retencin de gas y aumenta el volumen del pan. Aunque a diferencia del cido ascrbico, la glucosaoxidasa acta rpidamente durante el amasado, mientras que el cido ascrbico slo lo hace al final del amasado y durante la fermentacin; esto conlleva una mayor fuerza desde el principio y una mayor absorcin de agua. Despus del amasado la presencia de oxgeno sigue activa en la superficie de la masa. Como ya hemos dicho, la accin de la GOX cuando
interviene glucosa y oxgeno produce un compuesto oxidante: el perxido de oxgeno (agua oxigenada). Esto produce, por un lado, una fuerte oxidacin de la masa que repercute en el gluten aumentado la fuerza. Por otro lado, las recetas que contienen alto contenido en grasas, como por ejemplo el croissant y en general las masas fermentadas hojaldradas, son sometidas al proceso de congelacin una vez fermentadas (bollera prefermentada), donde la masa esponjada y ya en fase de congelacin el oxgeno del tnel mecnico de congelacin oxida las grasas en contacto con la Gox y se produce un comienzo de oxidacin de las grasas que continuar despus en los das siguientes (aunque el producto est perfectamente envasado), producindose un sabor rancio del producto. Por tanto hay que recordar que en la bollera prefermentada cuando se utilizan enzimas oxidasas hay que asegurarse que las grasas estn bien estabilizadas con aditivos antioxidantes para evitar el enranciamiento. Sulfidril-oxidasa (SOX). Durante el amasado, cuando el aporte de oxgeno es mayor en la masa, la sulfidril-oxidasa cataliza la oxidacin del glutatin reducido. En una forma oxidada capaz de reforzar las propiedades reolgicas de las masas Glutatin es una pequea molcula de protena formada por aminocidos presente en cantidad suficiente en la harina. I
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