Inmunohistoqumica

Expositor : interno Tec.med Richard Aguirre Barrientos

Primer antecedente : Inmunofluorescencia

ALBERT COONS

HUGH CREECH

Albert Coons, al vincular una molcula de una sustancia fluorescente a un anticuerpo, pudo as visualizar el sitio donde iba a ubicarse la reaccin inmune e identificar un antgeno del neumococo.

Sustancia fluorescente

Antgeno

Anticuerpo

La evolucin de las investigaciones de Coons llev a la creacin de la primera tcnica inmunohistoqumica: la INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA.

El ao 1966 represent el comienzo de la inmunohistoqumica enzimtica .

En los aos siguientes (1969) la tcnica inmunoenzimtica se perfeccion, por mrito de Sternberger, Mason, Hammerling y Avrameas

En la segunda mitad de la dcada de los aos 70 se comenz a usar la inmunohistoqumica en tejido fijado en formol y parafinado (Nakane, Taylor y Nayak, 1974).

Al comienzo de los aos 80 Nadji puso las bases tcnicas para realizar las inmunotinciones en muestras citolgicas y luego apareci inmunocitoqumica.

la

En el ao 1981 Hsu introdujo las tcnicas que utilizaban el sistema de la avidina y de la biotina para vincular la enzima peroxidasa.

Avidina Biotina-peroxidasa Complejo (ABC)

Anticuerpo primario Antgeno

Anticuerpo segundario ligado con biotina

El ao 1975 representa un momento muy importante en la evolucin de la inmunohistoqumica, pues Kohler y Milstein idearon los anticuerpos monoclonales.

A principios de los aos 90 la inmunohistoqumica experiment un gran adelanto tecnolgico, pues se introdujeron los mtodos para reactivar los antgenos bloqueados por el formol...

El progreso tecnolgico de las maquinas mecnicas puestas al servicio de la inmunohistoqumica permiti incrementar el numero de inmunotinciones y la velocidad de ejecucin de las reacciones con ahorro de tiempo.

El presente

Adems con el reconocimiento de que algunos marcadores pueden relacionarse con el comportamiento y la evolucin biolgica de una neoplasia empieza el uso pronstico de la inmunohistoqumica.

Ki67

p53

En los ltimos aos, con el desarrollo de las terapias antineoplsicas especificas con anticuerpos monoclonales, las inmunotinciones se utilizan tambin para determinar la respuesta a medicamentos especficos.

HER-2

sst-2R

CD117

ER

PgR

Timidilato sintasa

HER-2

mTOR

Citoqueratinas
CONDICIN SINE QUA NON DE DIFERENCIACION EPITELIAL Acida / Bsica 2-10 queratinas en todos los epitelios

Citoqueratinas
Filamentos intermedios Familia de protenas del citoesqueleto Al menos 20 tipos descritos

Peso molecular Ph

Moll R, FrankeWW, Schiller DL. The catalog of human citokeratins: patterns of expression in normal epithelia, tumors and cultured cells. Cell 1982, 31:11-24

Citoqueratinas
Tipo I (Acidas)
K9 K10 K11 K12 K13 K14 K15 K16 K17 K18 K19 K20 64 kd 56.5 kd 56 kd 55 kd 51 kd 50 kd 50 kd 48 kd 46 kd 45 kd 40 kd 45 kd

Tipo II (Bsicas) K1 K2 K3 K4 K5 K6 K7 K8 67 kd 65 kd 63 kd 59 kd 58 kd 56 kd 54 kd 52 kd

Bajo peso molecular: 7,8,13,14,15,16,17, 18,19 y 20 Alto peso molecular: 1,2,3,4,5,6,9,10,11, y 12

K7+/K20+ Urotelial Pancretico Mucinoso de Ovario Gstrico Colangio.carcinoma

K7-/K20Prstata Epidermoide Clulas Renales Hepatocelular Adrenocortical Tumores germinales Mesotelioma Gstrico Timoma Neuroendcrino

K7+/K20Mamario Endometrial Endocervical Seroso de ovario Pulmn Colangiocarcino ma Carcinoma tmico Mesotelioma Tiroides Epidermoide cervical Glndula salival Urotelial Gstrico

K7-/K20+ Colorectal Carcinoma de clulas de Merkel Gstrico

Screening panel primario

Marcadores
S 100:Protena es un miembro de la superfamilia de unin a calcio protena EFmano que est ampliamente distribuida y se conserva en el sistema nervioso central de los verte, y se ha implicado en enfermedades neuropatolgicas.
Vimentina :es una de las protenas fibrosas que forman los filamentos intermedios del citoesqueleto intracelular en particular de clulas embrionarias, ciertas clulas endoteliales, as como en las clulas sanguneas. LCA (CD45):La protena codificada por este gen es un miembro de la protena tirosina fosfatasa familia (PTP). PTP son conocidos por ser molculas de sealizacin que regulan una variedad de procesos celulares incluyendo el crecimiento celular, la diferenciacin, ciclo mittico, y la transformacin oncognica, Un anticuerpo monoclonal para CD45 se utiliza en la rutina de inmunohistoquimicas para diferenciar entre las secciones histolgicas de los linfomas y carcinomas

LCA (CD45)

Screening panel secundario

Desmina :Es una de las protenas de tipo III de los filamentos intermedios del citoesqueleto intracelular en particular de clulas musculares, tanto estriadas como lisas. Actina : es una familia de protenas globulares que forman los microfilamentos, uno de los tres componentes fundamentales del citoesqueleto de las clulas. En cuanto a la clnica, dado que algunas variantes anmalas de la actina estn relacionadas con la aparicin de patologas, su deteccin es un criterio diagnstico