sumario

EUROPEAN JOURNAL OF

obstetrics & GYNECOLOGY

AND REPRODUCTIVE BIOLOGY

European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology (Ed. Espaola) 2002; 2: 142-146

Apoptosis en la placenta humana durante el primer trimestre: papel para mantener el privilegio inmune en la superficie materno-fetal y en el remodelado del trofoblasto
Malgorzata Jerzaka,b, Paul Bischofc
a

Laboratorio de Inmunologa Reproductiva, Instituto de Inmunologa y Terapia Experimental, Academia de Ciencias Polish, 12 R. Weigl St., 53-114 Wroclaw, Polonia
b

Departamento de Obstetricia y Patologa de la Gestacin, Facultad de Medicina de la Universidad, Lubln, 16 S. Staszic St., 20-081, Lubln, Polonia
c

Departamento de Obstetricia y Ginecologa, Hospital de la Universidad de Ginebra, Bd de la Cluse, 32, CH-1211, Ginebra, Suiza Aceptado: 28 mayo 2001

Resumen Se ha propuesto que la apoptosis es un mecanismo para mantener el privilegio inmune. Se cree que la expresin del ligando Fas (FasL) en el trofoblasto humano es un mecanismo que protege frente a la accin ltica de las clulas inmunes activadas de la decidua que expresan el receptor Fas (Fas-R). Por esto, el objetivo de esta revisin fue determinar el papel de la apoptosis en el mantenimiento de la gestacin precoz, de acuerdo con los ltimos trabajos publicados. Realizamos una bsqueda de todos los artculos sobre el tema publicados en MEDLINE. Los datos indican que la apoptosis puede servir como un mecanismo no sospechado antes que permite la tolerancia del feto frente al sistema inmune materno. La apoptosis de clulas inmunes maternas se produce en la decidua humana principalmente por medio de seales Fas-FasL o del receptor del ligando inductor de la apoptosis relacionado con TNF (TRAIL-R)-ligando inductor de la apoptosis relacionado con TNF (TRAIL). Esto podra ser un mecanismo de defensa frente al rechazo del injerto fetal por el sistema inmune materno. Adems, en esta revisin tambin se discute la contribucin de la muerte celular programada al recambio celular placentario y al remodelado durante el primer trimestre de la gestacin. 2002 Elsevier Science Ireland Ltd. Reservados todos los derechos.
Palabras clave: Apoptosis; Lingando fas; Clulas natural killer; Placenta; Clulas T.

Introduccin Durante la gestacin, el tero y la placenta son zonas inmunolgicamente privilegiadas, en las cuales la actividad inmune disminuye eficazmente [1]. Se han descrito varios mecanismos protectores de las clulas del trofoblasto de la destruccin inmune mediada por linfocitos T activados y clulas natural killer (NK) CD16+. Entre ellos, los ms importantes son: separacin parcial del embrin de la madre, niveles bajos del complejo de histocompatibilidad principal (MHC) en las clulas fetales [2], fenmeno de citocinas de Th2 inducido por la gestacin [3-6], privilegio inmune de la superficie materno-fetal [1,2,7]. El privilegio inmune se expresa sistemticamente, puede ser transitorio (durante la gestacin) y es necesario para la supervivencia del implante del feto hata llegar al perodo a trmino, a pesar de que haya linfocitos T maternos especficos frente a los antgenos MHC heredados del padre [1]. Se ha propuesto que la apoptosis de las clulas inmunes es un mecanismo para mantener el privilegio inmune [8].

La induccin de la muerte de las clulas apoptsicas puede ser tambin un factor que limita la proliferacin de los linfocitos despus de la activacin [9]. Las caractersticas de la apoptosis son: contraccin celular, reorganizacin del ncleo celular, desarrollo de ampollas activas en la membrana y fragmentacin en vesculas unidas a las membranas conocidas como cuerpos apoptsicos. Estos cuerpos, despus, son fagocitados por los macrfagos, sin que se produzca una respuesta inflamatoria (al contrario que la necrosis). La apoptosis se asocia con fragmentacin del ADN oligonucleosmico que produce una forma de "escalera" en la electroforesis en gel de agarosa [10,11]. La regulacin de la apoptosis es compleja y afecta a una familia de protenas relacionadas que pueden promover o inhibir este proceso. La susceptibilidad de la clula para someterse a apoptosis est controlada a travs de la interaccin de inhibidores relacionados con bcl-2 (por ejemplo, producto del protooncogen bcl-2) y promotores de la apoptosis (por ejemplo, bax) [11-13]. Algunos datos recientes indican que Fas (CD95), un receptor de superficie que per-

Jerzak M, Bischof P. Apoptosis in the first trimester human placenta: the role in maintaining inmune privilege at the maternal-joetal interface and in the trophoblast remodeling. European Journal of Obstetrics & Gynecology and reproductive Biology 2002;100:138-142 (usen esta cita al referirse al artculo).

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tenece a la familia de los receptores del factor de necrosis tumoral (TNFR) es un mediador de la apoptosis por medio de su unin a su ligando FasL [8,9,14]. Fas se expresa mucho en los linfocitos T activados y en las clulas NK [14]. Se ha sugerido la importancia del sistema Fas-FasL en el mantenimiento del privilegio inmune de diferentes compartimentos tisulares, incluidos los testculos [15], ojos [16] y placenta [1].

TNFR1 THANK

FAS

TRAIL-R1 DR4

TRAIL-R2 DR5 DR6

TRADD

La incidencia del papel de la apoptosis en el mantenimiento del privilegio inmune en la superficie maternofetal Algunos estudios indican que la capa citotrofoblstica interna (CTB) y sinciotiotrofoblstica externa (STB) de anclaje y las vellosidades flotantes de la placenta en el primer trimestre expresan FasL [17-29]. La expresin de FasL por el trofoblasto humano se ha propuesto como un mecanismo para dar proteccin frente a la accin ltica de las clulas inmunes de la decidua [17,19,20,25]. En ratones, FasL se posiciona para evitar el intercambio de clulas inmunes activadas entre la madre y el feto. FasL impide el trfico de clulas inmunes activadas Fas+ en la superficie materno-fetal [19]. Fas se expresa en linfocitos CD45+ (antgeno comn de leucocitos), encontrados en la decidua materna [26-28]. Se ha observado que los linfocitos de sangre perifrica, activados por fitohemaglutinina e interleucina-2, que fueron cocultivados con trofoblasto, experimentaron apoptosis [28]. De acuerdo con Coumans et al., la frecuencia de muerte celular en la poblacin de linfocitos CD3+ en sangre perifrica es mayor cuando estas clulas linfoides se cocultivan con trofoblasto que expresa FasL que cuando se cultivaron solas [24]. Nuestros datos demuestran la expresin de Fas en linfocitos T CD3+ de la decidua en el primer trimestre de la gestacin humana [21]. Se ha demostrado recientemente que el Fas expresado por las clulas de la CTB de la placenta humana no regula la apoptosis. Esto indica que la respuesta Fas se inactiva por un mecanismo desconocido que evita la muerte por FasL expresado constitutivamente en la capa CTB o STB vecinas [29]. Por tanto, el FasL de la superficie materno-fetal probablemente protege a la placenta contra un efecto de los leucocitos maternos. El papel de las molculas reclutadas por el sistema de seales Fas-FasL, como, por ejemplo, las caspasas, parece ser importante en el desarrollo de la placenta humana. Las caspasas son una familia de cistena-proteasas itracelulares que dividen sus sustratos especficos en residuos de cido asptico [30-32]. Estas proteasas participan en el proceso y regulacin de la apoptosis por las citocinas. Los miembros de la familia similares a la caspasa-3 (caspasa-2, caspasa-3, caspasa-6, caspasa-8, caspasa-9, caspasa-10) son responsables de la apoptosis. Se ha demostrado recientemente la expresin de las caspasas iniciadoras 8 y 10 y la actividad de la caspasa-8 en la capa CTB villosa y tambin se expresan en esta zona las proformas de las caspasas ejecutoras 3

TRADD

FADD
CASPADE-8 (CASPASE-10)

APOPTOSIS
Figura 1. Activacin de las caspasas por la familia TNFR en la placenta humana. Se han identificado seis miembros de la familia TNFR que contienen dominios de muerte citoslicos en la placenta humana. En la agrupacin inducida por ligandos, estos dominios citoslicos reclutan a las protenas adaptadoras: TRADD y/o protena de dominio de muerte asociada a Fas (FADD) y, probablemente, a otras que no se han descubierto todava. Entonces FADD se une al dominio del efector de muerte (DED) que contiene procaspasas, procaspasa-8 y quizs procaspasa-10, lo que produce la activacin de las caspasas y desencadena la cascada apoptsica. La proteasa en esta va puede dividir y activar a la procaspasa-3. La caspasa-3 es una protesa clave que se activa durante los estadios precoces de la muerte celular programada, por lo que es un marcador de las clulas que van a someterse a apoptosis.

Otras L FasL

PS-flip Familia caspasa-1 PS-flip Procaspasa-3 Caspasa-3 Bcl-2

Fas

Otros R Activacin de nucleasas Degradacin del ADN

Figura 2. Molculas que participan en la cascada apoptsica de las clulas trofoblsticas. Parte del dominio extracelular de FasL se divide para unirse al receptor Fas, activando as a la familia de las caspasas, que inicia la cascada apoptsica. La activacin de las caspasas origina que el extremo superior de la fosfatidilserina de la cubierta membranosa interna se proyecte hacia la externa y, finalmente, en la secuencia de la va de la apoptosis est la activacin de la caspasa-3, que es la ejecutora de la apoptosis. Bcl-2 codifica las protenas de la membrana mitocondrial externa y puede inhibir la activacin de la caspasa-3. La caspasa-3 divide el citoplasma y las protenas nucleares e inicia los estadios reversibles de la cascada apoptsica.

y 6. Sin embargo, la activacin de las caspasas 3 y 6 slo pudo demostrarse en la capa STB despus de la fusin sincitial [30,31,33]. La activacin de las caspasas por los miembros de la familia TNFR se muestran en las Figuras 1 y 2. El ligando inductor de la apoptosis relacionado con TNF (TRAIL), como FasL, es un miembro de la familia

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TNFR y por medio de la unin a su receptor (TRAIL-R) controla las vas de transduccin de la seal apoptsica. TRAIL-R activa la va de seales de TRAIL, por ejemplo, DR4 (TRAIL-R1) y DR5 (TRAIL-R2) o puede actuar como reclamo, por ejemplo, DcR1/TRID y DcR2/TRUNDD [32]. Phillips et al. demostraron la presencia de ARNm codificadores de TRAIL, as como los cuatro receptores de TRAI-L (DR4, DR5, DcR1, DcR2) en la placenta humana [34]. La protena TRAIL abunda en la capa STB, que est en contacto cercano con la sangre materna que contiene clulas inmunes, y la expresin de TRAIL-R aumenta en presencia de INF-. Recientemente, se ha identificado en la placenta un nuevo dominio de muerte que contiene a TNFR, denominado receptor de muerte-6 (DR6), que interacciona con el dominio de muerte asociado con TNFR1 (TRADD) [35]. Otra nueva citocina, que pertenece a la familia TNF, llamada THANK (un homlogo de TNF que activa la apoptosis), parece activar la apoptosis en la placenta, pero se expresa en este rgano en valores bajos [36]. La apoptosis de clulas inmunes maternas activadas en la decidua humana, principalmente a travs de Fas-FasL o de seales de TRAIL-R-TRAIL, puede ser un mecanismo de defensa contra el rechazo del injerto fetal por el sistema inmune materno. Los FasL o TRAIL expresados por las clulas trofoblsticas fetales pueden inducir la apoptosis en linfocitos activados y constituir un mecanismo para el privilegio inmune materno del feto [17,19,20,25]. Sin embargo, en estudios con ratones deficientes en interacciones FasFasL se ha indicado que este defecto no tiene ningn efecto adverso sobre el resultado de la gestacin [6,37]. Por otra parte, los ratones linfoproliferativos (lpr), que carecen de Fas, y los ratones con enfermedad linfoproliferativa generalizada (gld), que carecen de FasL, se caracterizan por el desarrollo de autoinmunidad parecida a la del lupus eritematoso sistmico [8,38,39] que se sabe que tiene una influencia negativa sobre la gestacin [40]. Adems, los ratones gld que muestran infiltrados de leucocitos en la superficie de contacto de decidua y la placenta tienen ms abortos [19]. Actualmente, se sabe que TRAIL coopera con FasL, limitando la proliferacin de linfocitos en un proceso denominado muerte celular activada [41,42]. Esto supone un posible mecanismo potencial de la muerte de los linfocitos activados y puede establecer un privilegio inmune en la placenta [41,42].

Evidencia del papel de la apoptosis en el remodelado placentario Hay evidencias que indican que la regulacin de la apoptosis puede ser importante durante la implantacin y el desarrollo embrionario precoz. Recientemente, se ha demostrado que la apoptosis en las glndulas endometriales puede servir como marcador del endometrio receptivo para la implantacin. Von Rango et al. detectaron la apoptosis en el epitelio glandular del basalis al comienzo de la ventana de implanta-

cin que se extenda hacia el funcionalis en la fase ltea [43]. La proliferacin y la expresin de bcl-2, que son predominantes en el compartimento glandular durante la fase proliferativa, estn limitadas al compartimento estrmico durante la fase ltea del ciclo menstrual [43,44]. Adems, la apoptosis puede estar relacionada con la prdida del efecto protector de bcl-2, que va acompaado de un aumento de la expresin de la protena bax [43,45]. Sin embargo, el descenso de la expresin de bcl-2 y el aumento de la expresin de bax en la decidua caracteriza el fallo de las gestaciones en el primer trimestre [46]. Los datos de Yui et al. indican que el papel fisiolgico de la expresin del factor de necrosis tumoral alfa (TNF-) y del interfern gamma (IFN-) en las vellosidades placentarias puede ser inducir la muerte apoptsica de la capa CTB [47,48]. Ambos receptores de TNF- se localizan en el trofoblasto fibrovilloso, sin embargo, la muerte apoptsica del CBT primario est regulada casi exclusivamente por el receptor de TNF- p55 (TNFR-1), mientras que el receptor de TNF- p75 (TNFR-2) parece ejercer escaso efecto sobre este proceso (47). El factor de crecimiento epidrmico (EGF) inhibe la apoptosis inducida por las citocinas (TNF- o INF) del trofoblasto humano primario [48]. La cascada apoptsica parece iniciarse en el CTB villoso que, como consecuencia, promueve la fusin sincitial [49]. Adems, los datos de Ho et al. demuestran que TNF- e INF estimulan la apoptosis en el CTB de las vellosidades placentarias que expresan niveles bajos de protena bcl-2 [50]. Chan et al. describieron la apoptosis en agrupaciones principalmente confinadas a STB que no estaban en divisin, mientras que la actividad proliferativa se limita a los CTB [51]. Se ha demostrado la fragmentacin del ADN apoptsico en CTB, siendo ms abundante al principio de la gestacin [52]. Por el contrario, se ha encontrado la expresin de protena bcl-2 en STB, siendo menos abundante al comienzo de la gestacin [13,52]. Estos datos indican que la placenta se caracteriza inicialmente por una actividad muy proliferativa de las clulas de la capa CTB asociada con aumento de la incidencia de apoptosis [52]. Por tanto, bcl-2 puede evitar la apoptosis en la capa STB [53,54]. Al contrario que en la gestacin normal, las clulas apoptsicas predominan en la capa STB en casos de aborto espontneo [55]. Adems, la expresin de bcl-2 es uniformemente ms baja en STB de mujeres que sufren abortos espontneos o recurrentes [13]. La apoptosis placentaria aumenta al avanzar la gestacin, lo que indica que es un fenmeno fisiolgico normal a lo largo de la gestacin [56]. TRAIL, como FasL, parece regular la homeostasis placentaria durante la invasin trofoblstica [20,34]. Estos resultados explican potencialmente el remodelado villoso durante la placentognesis [20,34].

Conclusiones Es evidente que en el mantenimiento de la homeostasis tisular normal desempea un papel fundamental el equilibrio entre la muerte y la proliferacin celular.

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Esto puede ser particularmente importante para el desarrollo satisfactorio de la gestacin humana. La apoptosis en la decidua materna parece ser importante para establecer el privilegio inmune en el tero gestante para proteger a las clulas fetales de la muerte por las clulas maternas, mientras que, en la parte villosa de la placenta, la muerte celular programada parece participar en la regulacin del crecimiento placentario [27,31]. Sin embargo, el papel exacto de las interacciones Fas-FasL o TRAIL-R-TRAIL durante la gestacin humana no se ha determinado todava. La cascada de la apoptosis se regula en paralelo con la diferenciacin del trofoblasto, la funcin sincitial y el recambio trofoblstico. La diferenciacin de la placenta depende de la incorporacin continua de la CTB villosa mediante fusin en STB a travs de las vas apoptsicas [30,31,49]. Por tanto, la apoptosis es un proceso fisiolgico normal a lo largo de la gestacin [56]. Las alteraciones de la muerte celular programada en la placenta parecen asociarse con una alteracin del resultado de la gestacin. La disminucin de la funcin de las molculas reclutadas por el sistema de seal Fas-FasL puede tener influencia en el resultado de la gestacin humana [17,19,20,25]. En conjunto, el conocimiento completo de las vas apoptsicas de la placenta puede ser importante para entender la patogenia de los abortos y otras enfermedades relacionadas con la gestacin. No puede excluirse que la influencia sobre este proceso puede tambin permitir la introduccin de nuevas modalidades de tratamiento.

Agradecimientos Este trabajo fue financiado por una beca del Comit de Investigacin (KBN) n 4 PO5E 005 18 (a M. Jerzak). Referencias
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