CENTRO DE BACHILLERATO TCNOLOGICO Industrial y de Servicios No.

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Manual de prcticas

Milady Moreno Garca

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24 agosto del 2009

PRACTICA No. 1 Determinacin de Hemoglobina

Generalidades: La hemoglobina es una protena que contiene hierro y que le otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glbulos rojos y es la encargada del transporte de oxgeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. La hemoglobina tambin transporta el dixido de carbono, que es el producto de desecho del proceso de produccin de energa. La forman cuatro cadenas polipeptdicas (globinas) a cada una de las cuales se une un grupo hemo, cuyo tomo de hierro es capaz de unirse de forma reversible al oxgeno. El grupo hemo se forma por:
1. Unin de la Succinil CoA (formado en ciclo de Krebs o ciclo del

cido ctrico) a un aminocido glicina formando un grupo pirrol. 2. Cuatro grupos pirrol se unen formando la Protoporfirina IX. 3. La protoporfirina IX se une a una molcula de hierro ferroso (Fe2+) formando el grupo hemo.

Cuando la hemoglobina est unida al oxgeno, se denomina oxihemoglobina o hemoglobina oxigenada, dando el aspecto rojo o escarlata intenso caracterstico de la sangre arterial. Cuando pierde el oxgeno, se denomina hemoglobina reducida, y presenta el color rojo oscuro o bord de la sangre venosa (se manifiesta clnicamente por cianosis).

Oxihemoglobina (HbO 2): Hb unida al oxgeno. Desoxihemoglobina: Desoxigenada (Hb reducida) Carboxihemoglobina: Hb unida a CO2. Letal en grandes concentraciones. Carbaminohemoglobina o carbohemoglobina: ciertos aminocidos de la Hb se asocian al CO2. Metahemoglobina: Hb con Fe3 (oxidado), as no se une al oxgeno. Hemoglobina glucosilada (HbA 1c ): Glucosa unida a valina terminal de cadena Beta. Aumenta en diabetes mal controlada.

Materiales utilizados: Boquilla con ligadura tubos de ensayo Pipetas de shali colormetro Cubetas para colorimetra Reactivo de cianometa Estndar equivalente a 20 mg de hemoglobina/dl. Sangre total anticoagulada con EDTA. Tcnica

-Tener limpio todo el material a usar. -Colocar la boquilla a la pipeta y absorber, hasta 5 micras de sangre. -Vaciar el contenido de la pipeta cianometa. a un tuvo que contiene 5 ml. De

-Tapar el tubo invertirlo dando un giro de 260 y dejar reposar 10 minutos. -pasado los 10 min. Ni un minuto ms y ni un minuto menos, vaciar el contenido a la cubeta dejando un dedo libre de espacio- Meterlo al colormetro que en el ya tiene adentro una cubeta con cianometa, y esta a una frecuencia de luz de 420, meterlo mirando las rayas de la cubeta as a ti mismo. - leer lo marcado en el colormetro, y reportarlo.

Resultados:

Mediante la frmula:

ABS. Problema/ ABS. Estndar (.8)(251)=

Valores de referencia Neonatos, sangre de cordn: 13.6 - 19.6 g/dl Nios de 1 ao : 11.2 dl Nios de 10 aos : 12.9 g/dl Hombres : 13.5 - 18.0 g/dl Mujeres : 12.0 - 16.5 g/dl

PRACTICA No. 2 Determinacin de Hematocrito

Generalidades: El hematocrito es el porcentaje del volumen de la sangre que ocupa la fraccin de los glbulos rojos. Las cifras normales de hematocrito en personas oscilan entre: Hombres: de 40.7 a 50.3 % Mujeres: de 36.1 a 44.3 % Estas cifras pueden cambiar de acuerdo a diversos factores fisiolgicos, como la edad y la condicin fsica del sujeto, como tambin del laboratorio donde se realiza el examen. Valores bajos de Hematocrito estn asociados a mltiples posibilidades: desde anemia, hasta leucemia o artritis reumatoidea, entre otras. Valores altos de Hematocrito se pueden asociar a deshidratacin, eritrocis o hipoxia, entre varios. Se define como la relacin entre el volumen de GR con el de sangre entera. El hematocrito venoso coincide estrechamente con el obtenido por puncin cutnea. Se puede medir directamente por centrifugacin con macromtodo o micromtodo. Indirectamente por VCM x recuento de hemates en aparatos automticos. El HCT puede determinarse por mtodos manuales o por mtodos automticos. Los mtodos manuales consisten en la centrifugacin de la sangre, aplicndola una fuerza de 2.000 a 5.000 g (macrometodo) o de 12.000 a 15.000 g (micrometodo). Los mtodos automticos pueden basarse en 2 principios: El calculo matemtico del HCT a partir de los valores de RBC y de volumen corpuscular medio, obtenidos electrnicamente con anterioridad. El anlisis de la sombra que produce la poblacin eritrocitaria, al reflejarse en un campo oscuro.

Con los mtodos manuales tambin se cuentan, junto con el volumen de los hemates, el de los leucocitos, el de las plaquetas y el del plasma que queda atrapado entre los hemates. Por ello, el valor de HCT conseguido con mtodos automticos es mas exacto y suele ser 1 o 2 unidades mas bajo que el logrado con mtodos manuales.

Materiales utilizados: Tubos capilares. Si la muestra es sangre capilar, estos han de estar heparinizados interiormente; mientras que si la muestra es sangre venosa y ha sido adecuadamente anticoagulada, pueden no estar heparinizados. Los heparinizados tienen una franja roja en uno de sus extremos.
Plastilina.

Algodn o gasas.
Una

centrifuga de microhematocrito. Esta consta de una especie de plato horizontal -con unos surcos para colocar los capilares, y permite aplicar una fuerza centrifuga de 12.000 a 15.000 g durante un tiempo controlado automticamente. Una regla milimetrada o un lector de microhematocrito.

Procedimiento: 1. La determinacin ha de hacerse por duplicado.

2. Llenar cada tubo capilar con la sangre, hasta las 3/4 partes de su longitud. El Llenado se efecta por capilaridad y se realiza poniendo en contacto uno de los extremos del tubo capilar con la gota de sangre, o introducindolo en el tubo de sangre e inclinando este, posteriormente, para facilitar el proceso. 3. Limpiar el exterior de cada tubo con un trozo de algodn o con una gasa. 4. Sellar el extremo de cada tubo por el que ha entrado la sangre con plastilina. Para ello, se hace penetrar el tubo en la plastilina, o incluso se atraviesa esta con aquel. 5. Colocar, debidamente equilibrados, los tubos en la centrifuga. En ella los tubos se sitan con su extremo tapado hacia afuera, ajustados al borde exterior y adecuadamente encajados en sus surcos. 6. Centrifugar los tubos a unas 12.000 g durante 5 minutos.

Resultados: Puede realizarse de 2 maneras:

Midiendo

las columnas formadas en el interior de cada tubo con una simple regla milimetrada y calculando, seguidamente, el porcentaje que le corresponde a la columna de eritrocitos, mediante una sencilla regla de tres Mediante un lector de microhematocrito

Formula: Paquete globular/ paquete total (100) =

Valores de referencia 7

Al nacer: 44 - 62 % Nios de 1 ao : 35 % +/- 5 Nios 10 aos : 37% +/- 5 Hombres : 40 - 54 % Mujeres : 36 - 47 %

PRACTICA No. 3 Recuento Leucocitario Generalidades: La sangre anticoagulada se deposita en un lquido que permite evidenciar los leucocitos, mantenindolos visibles, mientras que los eritrocitos son hemolizados. El recuento del nmero de leucocitos o glbulos blancos se expresa por mm3 (milmetro cbico).

La cmara de Neubauer es una cmara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresin en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrcula como la que se ve en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separacin entre dos lineas consecutivas de 0.25 mm. As pues el rea sombreada y marcada L corresponde a 1 milimetro cuadrado.

La depresin central del cubreobjetos est hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos ste dista de la superficie marcada 0.1 milmetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1 milmetro cbico, es decir 0.1 microlitro. Si contamos las cuatro reas sombreada (L) observando un total de x clulas entre las cuatro reas, la concentracin en la suspensin celular ser : concentracin en la suspensin (clulas / mL) = 10000 (x/4) En la imagen puedes observar el 9

aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una cuadrcula de 16 pequeos cuadrados de 0.25 milmetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases.

Material -

Microscopio. Hemocitmetro (Cmara de Neubauer): Una lmina portaobjeto gruesa, en el centro se hallan dos superficies cuadriculadas iguales separadas del resto de la lmina por surcos y dos barras transversales algo ms elevadas.

Una laminilla cubreobjetos pticamente plana, que, al colocarse sobre las barras elevadas de la lmina forma una cmara entre el cubreobjetos y la superficie cuadriculada. La altura entre el cubreobjetos y la lmina portaobjetos es de 0,1 mm. Cada cuadrcula mide 3 mm de lado y se divide en 9 cuadrados grandes. Cada uno de los cuales mide 1 mm2 de superficie, que se subdivide a su vez en 16 cuadrados medianos. El cuadrado grande central se divide en 25 cuadrados pequeos y cada uno de ellos en 16 cuadraditos. Cada cuadrado pequeo mide 0,2 mm de lado (0,04 mm2 de superficie), y cada cuadradito mide 0,05 mm de lado (0,0025 mm2 de superficie).
- Pipeta de glbulos blancos (De Thoma) o pipeta automtica (de

0 a 100 mL): Presenta cerca del extremo superior una marca de 11,

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inmediatamente contina una dilatacin (bulbo) que contiene una perla que funciona como mezcladora, luego sigue el extremo ms largo de la pipeta (tallo) que est dividida en 10 partes, con 2 marcas: 1 (parte final del bulbo) y 0,5 (a la mitad del tallo). Se le acopla a su extremo superior 1 tubo de goma y una bombilla para aspirar. Diluyente de glbulos blancos: Solucin de Turk al 1%. Contador manual (Slo si fuera necesario). Papel filtro.

Procedimiento Una vez obtenida la sangre con anticoagulante o sangre capilar del dedo, se procede a aspirar la sangre con la pipeta de glbulos blancos hasta la marca de 0,5 y a limpiar la punta con papel absorbente. Introducir la pipeta en el tubo que contenga solucin de Turk y absorber hasta la marca de 11 (no debe haber burbujas). Tapar ambos extremos y proceder a mezclar manualmente o en un rotador automtico por 2 3 minutos. Monte la laminilla de vidrio en la cmara para recuento que debe estar limpia y seca. Agitar la pipeta y descartar las dos primeras gotas para luego colocar una gota pequea de esta solucin en la cmara.
-

Deje reposar por espacio de 3 minutos para que las clulas se sedimenten. Enfocar con objetivo de 10x y contar en 4 cuadrados grandes angulares. Cuando se usa la pipeta automtica, se toma 20 mL (0,02 mL) de sangre total con anticoagulante o sangre capilar con anticoagulante y se diluye en un tubo que contenga 380 mL de solucin de Turk (aqu tenemos una dilucin 1:20). Lectura La lectura se realiza en los campos 1, 3, 7 y 9. Adems de los leucocitos contados dentro de cada uno de los cuadrantes, se deben contar
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todos los leucocitos que se encuentren adheridos en la lnea horizontal superior y vertical exterior, o de lo contrario, todos los leucocitos, adheridos a la lnea horizontal inferior y vertical interior.

Valores de Referencia 5000 - 10 000 leucocitos / mm3

Resultado Leucocitos contados en 4 campos

N de leucocitos x mm3 = Altura x dilucin x rea

Leucocitos contados en 4 campos

Reemplazando = 1/10 x 1/20 x 4

Leucocitos contados en 4 campos = 4/200

= X/1 = N leucocitos contados x 50

4/200 Correccin de valores para restar eritrocitos nucleados Los normoblastos no se destruyen (lisis) en el lquido de dilucin, por lo

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tanto pueden observarse al realizar el recuento leucocitario y confundirse con los leucocitos, de tal manera que se debe emplear la Siguiente frmula:

Clculo:

La concentracin del nmero de normoblastos (por litro) es: Nmero de normoblatos contados x concentracin o nmero de leucocitos 100 + N de normoblastos contados

Ejemplo:

Si se cuentan 50 normoblastos y la concentracin del nmero de leucocitos es 16 x 109/l, la concentracin del nmero de normoblastos ser:

50

x 16 = 5,3 x 109/l

100 + 50 y la concentracin de leucocitos corregida ser: 16 - 5,3 = 10,7 x 109/l En unidades tradicionales las concentraciones de normoblastos y leucocitos se expresan por milmetro cbico. En tales unidades el clculo correspondiente al ejemplo que se ha dado sera: 50

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x 16 000 = 5300 / mm3

100 + 50

Recuento corregido de glbulos blancos o leucocitos = 16 000 -5300 = 10 700 / mm3

PRACTICA No. 4 Tincin de un Frotis sanguneo Generalidades: Una extensin o frotis sanguneo consiste en recubrir parcialmente un porta con una gota de sangre, de tal manera que las clulas de sta se dispongan formando una sola capa de ellas. Esto puede hacerse

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manual o automticamente. Lo ltimo se realiza mediante un aparato (spinner) que centrifuga rpidamente el porta con la sangre depositada en su centro. Con este aparato se obtienen unos frotis que presentan una distribucin celular muy homognea. PARTES DE UNA EXTENSIN. 1.1. CABEZA.

Es la zona inicial de la extensin. Es la regin ms gruesa. En ella se encuentra una mayor proporcin de linfocitos, y los hemates forman aglomerados (pilas de monedas).

1.2. CUERPO.

Es la zona media del frotis. Su espesor es el apropiado. En ella existe una adecuada proporcin entre los distintos tipos de leucocitos. Contiene la "zona ideal" de observacin, que corresponde a la porcin que limita con la cola.

1.3. COLA.

Es la zona final de la extensin. Suele tener un aspecto redondeado. Es la regin ms fina. En ella se encuentra una mayor proporcin de leucocitos grandes (granulocitos y monocitos), y adems. los hemates estn deformados y presentan una tonalidad uniforme. En su porcin terminal suelen ser ms abundantes las plaquetas, sobre todo si son grandes.

1.4. BORDES.

Contienen una mayor proporcin de leucocitos grandes. Si estn deshilachados, en ellos las clulas son difciles de reconocer por estar deformadas o destruidas 15

Materiales utiliza Tubo con EDTA Porta tubos Aguja Alcohol Algodn Compresor 2 Portaobjetos Guantes Pipeta Pasteur

Procedimiento: En primer lugar precederemos a la extraccin de sangre para a continuacin hacer la extensin o frotis sanguneo, actuaremos de la siguiente manera:
1.

Palpar el sitio donde queremos puncionar(venas ceflica, baslica o cubital media) 2. Desinfectar con alcohol. 3. Para escoger el lugar de puncin, se escogen venas que sintamos, no venas que veamos. 4. El compresor, el cual debemos de colocar, no puede esta puesto mucho tiempo ya que puede provocar un xtasis sanguneo. 5. Realizar un anlisis de la direccin de la vena. 6. Si pincho y no sale sangre puede ser debido a: Pinchar al lado de la vena pero no la vena Pinchar superficialmente Pinchar la vena pero atravesada 7. Pinchar siempre en la direccin de la vena.

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Si se pincha mal, sacar el compresor, la aguja y volver a intentarlo. Con jeringa se retira un poco el mbolo para saber si se ha pinchado bien viendo sangre. El puo se abre una vez encontrada la canalizacin de la vena. Este procedimiento se repite en todas las prcticas hechas en el laboratorio en las que necesitemos sangre. La tcnica para realizar la extensin sera la siguiente:
A.

B.

C.

D.
E. F.

G. H.

Con los dedos ndice y pulgar de una mano, sujetar un extremo del porta normal (porta soporte), a nivel de sus bordes, y situarlo sobre una mesa. Tambin puede apoyarse, simplemente, el porta soporte sobre el extremo del dedo corazn de la mano que lo sujeta. De esta forma, el porta soporte forma un ngulo con la mesa. Con una pipeta pasteur coger un poco de sangre problema, depositar una pequea gota de esta (de unos 5 l) en la cara superior de ese porta, a no menos de 2 cm del extremo opuesto al que agarra la mano. Colocar un extremo del porta esmerilado (porta difusor o extensor) un poco por delante de la gota de sangre y formando un ngulo de 45 con el porta soporte. Es conveniente utilizar siempre el mismo porta extensor, para adaptarlo a esta funcin. Desplazar suavemente hacia atrs el porta extensor, hasta que alcance la gota de sangre. Dejar que la gota se extienda, por capilaridad, a lo largo del extremo del porta extensor que toca el porta soporte. Antes de que la sangre alcance los bordes de ese extremo, deslizar el porta extensor hacia delante, con un movimiento firme y uniforme, y a una velocidad media. Este deslizamiento debe acabar, aproximadamente, a 1 cm del extremo final del porta soporte, con un movimiento de ascensin del porta extensor. Secar rpidamente la extensin, agitndola al aire, para que sus clulas no se distorsionen. Escribir el nombre del enfermo, en el porta que soporta la extensin.

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Zona excesivamente gruesa: Se halla en la regin inmediata al punto departida de la extensin (cabeza). En ella se aprecia siempre un aumento delinfocitos.

Zona excesivamente fina: Corresponde al final de la extensin y termina enun rea donde las clulas adoptan una posicin acartonada (barbas). Enesta regin existe un exceso de granulocitos y monocitos.

Zona ideal: Corresponde a la regin intermedia del frotis y en ella existe unreparto equilibrado de clulas.

COLORACIONES USADAS Una vez seco el frotis, se procede a la tincin hematolgica con el colorante de Romanowsky, constituido por la mezcla de eosina y azul de metileno. Dentro de stas tenemos: 1.0 Colorante de Giemsa. 1.2 Colorante de May-Grunwald. 1.3 Colorante de Wright. 1.4 Colorante de Leishman. Preparacin de colorantes (Anexo A) Para el estudio de las clulas sanguneas utilizar el colorante 1.3 y 1.4. Para el estudio de hemoparsitos utilizar el colorante 1.0 Utilizar el colorante1.2 para casos especiales en que se desee observar con mayor claridad y especificidad los grnulos de los neutrofilos. Resultados: Depositamos una gota de aceite de inmersin sobre el frotis y observamos con el objetivo de 100X. Analizamos si el frotis y la tincin estn bien realizados. El frotis ser correcto si: Tiene las dimensiones adecuadas No tiene artefactos provocados por anticoagulantes No tiene artefactos provocados por tcnicas defectuosas de extensin No tiene artefactos provocados por defectuosa fijacin o coloracin No tiene artefactos provocados por defectos del portaobjetos Otros defectos a la hora de realizarlo, contaminacin por polvo, hemlisis...

La tincin ser correcta si: 18

La tincin no es excesivamente rosada o azulada Tiene ausencia de precipitados Se diferencian bien las estructuras subcelulares en los leucocitos. Interpretacin de los resultados: Dependiendo de la zona del frotis podemos leer, linfocitos, realizar la frmula leucocitaria y visualizar neutrfilos y monocitos.

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PRACTICA No. 5 Recuento Diferencial

Generalidades: El recuento diferencial de leucocitos es una parte rutinaria de la biomtrica hemtica que puede ser til en la valoracin de una infeccin o inflamacin, en la determinacin de los defectos de intoxicacin posible por sustancias qumicas o drogas, en el monitoreo de trastornos sanguneos como la leucemia, y en los efectos secundarios de tratamientos como la quimioterapia. El procedimiento consta de una toma de sangre, la misma se disemina en un portaobjetos de vidrio y luego se tie. A continuacin se determina el porcentaje de cada tipo de leucocitos. LOs valores normales expresados en porcentajes son los siguientes: neutrfilos 60-70%, eosinfilos 2-4%, basfilos 0,5-1%, linfocitos 20-25% y monocitos 3-8%. Es una de las partes ms importantes del cuadro hemtico, se coloca una gota de sangre anticoagulada en una lmina que debe ser preferiblemente nueva o en su defecto lminas completamente desengrasadas y con una lmina (Extensora) en un ngulo de 30 - 45 grados sobre la primera de forma tal que la sangre se extienda por capilaridad a lo largo del ngulo agudo formado por dos lminas y se deja secar.

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El extendido de sangre debe hacerse mximo una hora despus de que se tome la muestra.

Material:

-Colorante de Wright -buffer -haber hecho correctamente un Frotis sanguneo - aceite de inmersin

Procedimiento TINCIN CON COLORANTE DE WRIGHT Fundamento El colorante de Wright va a permitir suministrar un medio para estudiar la sangre y determinar las variaciones y anormalidades de estructura, forma y tamao de los eritrocitos, su contenido de hemoglobina y sus propiedades de coloracin. La informacin obtenida de un frotis de sangre perifrica depende en gran parte de la calidad del extendido y la coloracin.

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Procedimiento Una vez obtenido el frotis sanguneo, se le dejar secar entre 15 y 20minutos. Luego se coloca la preparacin en un soporte y se cubre con el colorante de Wright, dejndolo por espacio de 5 minutos. Posteriormente se aade solucin amortiguada tamponada en partes iguales hasta obtener un brillo metlico, dejando 6 minutos adicionales. Finalmente se lava con agua corriente y se deja secar. Se coloca en el microscopio y, con pequeo aumento, se revisa la calidad de la coloracin, la cantidad aproximada de glbulos blancos y se escoge el sitio para iniciar el recuento. Se coloca una gota de aceite de inmersin y se enfoca a un aumento de 100x La forma de los glbulos rojos se examinar detenidamente observando adems del color (cantidad de hemoglobina), presencia de plaquetas, su agrupacin y distribucin.

Posteriormente, se hace el recuento diferencial glbulos blancos en 100 clulas, para lo cual se deber conocer las diferencias entre neutrfilos, eosinfilos, linfocitos y monocitos. Una extensin de sangre bien teida debe caracterizarse por una buena diferenciacin de las estructuras subcelulares en los leucocitos, una coloracin rosada de los hemates y la ausencia de precipitados. Los defectos ms frecuentes observados en la tincin del frotis sanguneo son: Coloracin excesivamente azul, debido a: Frotis excesivamente grueso. Lavado insuficiente. Tincin muy prolongada. Empleo de colorante excesivamente alcalino. Coloracin con una tonalidad rosada: El colorante, el tampn o el agua de lavado tienen un pH demasiado cido. Presencia de precipitados: Obedecen a una accin excesiva del colorante. Esto se puede evitarcon la filtracin. Valores de referencia: Neutrofilos: 45 65 % Monocitos: 10 15 %

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Eosinofilos: 0 1 % Basofilos: 0 1 % Linfocitos: 10 20 %

PRACTICA No. 6 Velocidad de Sedimentacin Globular Generalidades:

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La velocidad de sedimentacin es un examen hematolgico que no est incluido en el desarrollo de un hemograma; sin embargo, es una prueba muy importante por su gran sensibilidad, pues resulta normal en las enfermedades funcionales, as como en los procesos inactivos o estrictamente locales.
Utilizada frecuentemente en medicina. Consiste en medir la velocidad con la que sedimentan (decantan, caen) los glbulos rojos o eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra sangunea anticoagulada con citrato sdico, en un periodo determinado de tiempo, habitualmente una hora.

La velocidad de sedimentacin globular, tambin conocida como "velocidad en la sangre" o velocidad de eritrosedimentacin, es una prueba inespecfica, o lo que es lo mismo, una prueba no concluyente ni definitiva de ninguna enfermedad o lesin determinada. Se solicita como apoyo al diagnostico de procesos inflamatorios, neoplsicos, e infecciosos. No obstante, esta prueba puede usarse para averiguar enfermedades no sospechadas, usndose en la valoracin rutinaria y en la evolucin de la enfermedad, pudiendo controlar el resultado del tratamiento. La VSG se encuentra elevada en: Todas las enfermedades de la colgena,SLE. Infecciones, neumona, sfilis. Enfermedades inflamatorias. Carcinoma, linfoma, neoplasias. Intoxicacin aguda por metales pesados. Destruccin de clulas o tejidos. Toxemia. Macroglobulinemia de Waldenstrom. Nefritis, nefrosis. Endocarditis bacteriana subaguda. Anemia. Artritis reumatide, gota. La sedimentacin globular es normal en: Policitemia vera. Eritrocitosis. Anemia de clulas falciformes. Enfermedad de La hemoglobina C. Insuficiencia cardiaca congestiva. Hipofibrinogenemia (por cualquier causa). Deficiencia de cinasa piruvato. Esferocitosis hereditaria. La sedimentacin globular es normal o variable en:

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Enfermedades agudas: la VSG cambia entre 6 y 24 hrs despus de que se eleva la temperatura y existe leucocitosis, y as alcanza su mximo valor das despus. Convalecencia: el aumento de la sedimentacin tiene a persistir durante ms tiempo que la hipernatremia o la leucocitosis. Apendicitis aguda no perforada (primera etapas): Incluso si es supurativa o gangrenosa, la velocidad de sedimentacin normal, pero si existe absceso o peritonitis, la velocidad de sedimentacin aumenta rpidamente. Trastornos musculosqueleticos. En artritis reumatoide, gonorreica y gotosa la velocidad de sedimentacin aumenta sobremanera. En osteoartritis, la velocidad de sedimentacin aumenta ligeramente. En la neuritis, miositis y lumbalgia, la VSG se encuentra dentro de los lmites normales. Problemas vasculares: Infarto al miocardio la VSG aumenta. En al agina de pecho, la VSG no aumenta. Cncer: En el mieloma mltiple, linfoma o cncer metasttico, la VSG es muy elevada. Sin embargo, existe poco correlacin entre el grado de aumento de La VSG y el pronostico en cualquier caso. Infecciones virales no complicadas y mononucleosis infecciosa. Insuficiencia renal activa con insuficiencia cardiaca. Alergia activa. Ulcera pptica. Aviso clnico: La velocidad de sedimentacin globular aumenta exageradamente en el linfocarcinoma maligno de colon y mama, mieloma y artritis reumatoide.

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5.1 MTODO DE WINTROBE

Materiales requeridos: -Tubo de Wintrobe graduado de 0 - 100 mm. -pipeta pasteur

Procedimiento: En un tubo se extrae sangre venosa, se mezcla mediante movimientos rotatorios sobre una superficie lisa. Se vierte mediante una pipeta Pasteur o una jeringa de metal en el tubo de Wintrobe, el cual tiene una graduacin de 0 - 100 mm de arriba hacia abajo y presenta ambos extremos abiertos. La sangre debe llenarse hasta la marca cero, se coloca en posicin vertical sobre una gradilla especial que obtura ambos extremos.

Resultados Medir los milmetros descendidos de glbulos rojos mediante la columna de plasma por encima del paquete globular.

Valores de referencia:

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Hombres menores de 50 aos: 0 15 mm/hora Hombres mayores de 50 aos: 0 20 mm/hora Mujeres menores de 50 aos: 0 25 mm/hora Mujeres mayores de 50 aos: 0 30 mm/hora 5.2 MTODO DE WESTERGREN

Este examen mide la tendencia de los eritrocitos a sedimentar, al colocar sangre anticoagulada en un tubo en posicin vertical. Se lee macroscpicamente la columna de plasma al cabo de una hora de reposo.

Material -Tubos de Westergren. -Soporte para tubos de Westergren. -pipeta pasteu Procedimiento

En un tubo que contiene 0,5 ml de anticoagulante citrato de sodio al 3,8% se extrae sangre venosa, se mezcla mediante movimientos rotatorios sobre una superficie lisa. Se vierte mediante una pipeta Pasteur o una jeringa de metal en el tubo de Westergren, el cual tiene una graduacin de 0 a 200 mm de arriba hacia abajo y presenta ambos extremos abiertos. La sangre debe llenarse hasta la marca cero, se coloca en posicin vertical sobre una gradilla especial que obtura ambos extremos.

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Resultados Medir los milmetros descendidos de glbulos rojos mediante la columna de plasma por encima del paquete globular.

Valores de referencia Hombres : 1 - 10 mm de altura/hora Mujeres : 3 - 14 mm de altura/hora

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Bibliografa:

http://www.scribd.com/doc/6657469/HEMOGLOBINA1 http://es.wikipedia.org/wiki/Hematocrito http://es.wikipedia.org/wiki/Hemoglobina http://www.scribd.com/doc/9246458/hemogramafrotis07b http://www.scribd.com/doc/14386436/camara-de-neubaber http://www.scribd.com/doc/16034154/Frotis-Sanguineo http://www.blogmedicina.com/2007/12/26/recuento-diferencial-deleucocitos-en-sangre/ http://www.scribd.com/doc/7374401/HEMATOLOGIA http://es.wikipedia.org/wiki/Velocidad_de_sedimentaci%C3%B3n_globular http://www.scribd.com/doc/8489784/Velocidad-de-SedimentacionGlobular

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