Coliformes

Coliformes: Son un grupo de especies bacterianas que tienen ciertas caractersticas bioqumicas en comn y que colonizan el intestino. Agrupa a todas las enterobacterias:

Escherichia Salmonella Shigella Klebsiella Enterobacter Citrobacter Yersinia Serratia Proteus

Caractersticas generales del grupo:

Bacilos Gram (-). Su tamao oscila entre 0.5 y 2.0 m de ancho y de 2.0 a 4.0 m de largo. Bordes rectos y extremos curvos. Temperatura ptima de crecimiento: 37C. Aerobias o anaerobias facultativas. Mviles o inmviles Poseen o no capsula. Fermentan o no la lactosa.

Salmonella
Clasificacin:
Subgrupo 1
S. S. S. S. S. typhi choleraesuis paratyphi gallinarum pullorum

Subgrupo 2
S. salamae

Subgrupo 3
S.arizonae S. diarizonae

Subgrupo 4 Subgrupo 5
S. houtenae S. bongori

Subgrupo 6
S. indica

 Bacilos Gram (-). Anaerobios facultativos. Flagelos periticos. No posee cpsula No forma esporas Mviles. Producen H2S. Glucosa (+). Lactosa (-)

Colonias transparentes

MacConkey

EMB

Salmonella-Shigella Agar

Hektoen Enteric Agar

Colonias transparentes con centro negro

Colonias azul-verdosas con centro negro de H2S.

XLD Medium

Agar sulfito de bismuto

Colonias rojas con centro negro (H2S).

Colonias negras con brillo metlico.

GENERO Salmonella

KIA K/A

GAS

H2S

IND

CIT

MOV

LIS

ARG

ORN

URE

+ + +/- +

Shigella
Clasificacin:
Serogrupo A Serogrupo B Serogrupo C
S. dysenteriae S. flexneri S. boydii

Serogrupo D
S. sonnei

Bacilos Gram (-) No forma esporas Inmviles Aerobios-anaerobios facultativos. Citocromo-oxidasa negativos. Fermentan la glucosa sin produccin de gas. No decarboxilan la lisina. No fermentan la lactosa. No utilizan el citrato como nica fuente de carbono.

Colonias transparentes

Agar Hektoen entrico

Agar Salmonella-Shigella

Colonias verdosas y plidas en la periferia

Colonias transparentes sin ennegrecimiento, traslcidas u opacas y lisas

XLD Medium Colonias rojas transparentes

GENERO
Shigella Grupos A,B y C. S. sonnei

KIA
K/A

GAS

H2S

IND

CIT

MOV

LIS

ARG

ORN

URE

-/+ -

K/A

Klebsiella
Clasificacin:
ESPECIES
K. oxytoca K. ornithinolytica K. planticola K. pneumoniae Subespecies: K. ozanae K. rhinoscleromatis K. terrigena

Bacilos Gram (-) Inmviles Anaerobios facultativos. Fermentadora fuerte de lactosa Fermenta la glucosa Poseen una prominente cpsula de polisacridos Descarboxilan la lisina No decarboxilan la ornitina (excepto K. ornithinolytica) Hidrolizan lentamente la urea Utilizan el citrato como fuente de carbono

MacConkey:Colonias grandes mucoides de color rosa fuerte

EMB:Colonias grandes color prpura, aspecto mucoide, sin brilo metlico.

XLD: Colonias amarillo brillante por fermentacin de ms de un carbohidrato.

GENERO K. pneumoniae K. oxytoca

KIA A/A A/A

GAS

H2S

IND

CIT

MOV

LIS

ARG

ORN

URE

++ ++

+ +

+ +

+ +

Enterobacter
Clasificacin:
ESPECIES Y SUBESPECIES
E. aerogenes E. amnigenus E. asburiae E. cancerogenus E. cloacae E. sakazakii E. gergoviae E. hormaechei E. dissolvens E. intermedius E. pyrinus

Bacilos Gram (-) Movilidad por flagelos Anaerobios facultativos. Fermentadora de lactosa Fermenta la glucosa Decarboxilan la ornitina Indol negativo Utilizan el citrato como fuente de carbono.

E. Aerogenes y E. coli

K. pneumoniae y E. coli

EMB

E. Aerogenes

K. pneumoniae

XLD: E. aerogenes. Colonias amarillas de 2-5 mm, brillantes y prominentes.

GENERO E. Aerogenes E. cloacae

KIA A/A A/A

GAS

H2S

IND

CIT

MOV

LIS

ARG

ORN

URE

++ ++

+ +

+ +

+ +

+ -

+ +

-/+

Serratia
Clasificacin:
ESPECIES Y SUBESPECIES
S. entomophila S. ficaria S. Fonticola Gpo: S. liquefaciens S. grimesii S. proteamaculans S. marcescens S. plymuthica S. rubidaea

Bacilos Gram (-) Movilidad por flagelos Anaerobios facultativos. Productora de Dnasa, lipasa y gelatinasa Algunas cepas son productoras de pigmento rojo (S. marcescens). Resistentes a la cefalotina y colistina. No fermenta la lactosa. Fermenta la glucosa. Productora de gas.

XLD: colonias pequeas de borde entero con pigmentacin roja y halo amarillo. Brillantes.

Serratia marcescens

Neisseria gonorrhoeae

 Agente causal de la gonorrea

Hombre: uretritis; secrecin purulenta , prurito y miccin dolorosa.

Mujer: endocervicitis; disuria, leucorrea, prurito genital y dolor abdominal.

Infecciones no tratadas: bacteriemia gonocccica; lesiones cutneas: ppulas o pstulas hemorrgicas.

Oftalmia neonatal gonocccica.

Identificacin en medios de cultivo

Exigente a nivel nutricional.
Medios selectivos enriquecidos: Thayer Martin modificado: vancomicina (3 g/ml), colistina (7,5 g/ml),nistatina (12,5 g/ml) y lactato de trimetropim (5 g/ml) . New York City. Agar Mueller Hinton modificado. Agar Martin Lewis. Medios enriquecidos: Gelosa chocolate. Se caracteriza por ser de difcil cultivo. Se incuban a 35 C durante 24- 48 horas. Atmsfera hmeda con 5% de CO2. pH: 7.2 7.6. Sensibles a las desecacin, luz UV, cambio de temperatura y pH.

Morfologa colonial
Colonias pequeas Elevadas Convexas Brillantes Aspecto mucoide Cremosas Bordes enteros Color blanco grisceo Tamao de 0.5 a1 mm. Cultivos clnicos o subcultivos selectivos: T1 y T2: colonias brillantes y pequeas (0.5mm). Poseen pili.

Subcultivos no selectivos: T3, T4 y T5: colonias grandes( 1.0 1.2 mm), planas y casi incoloras y opacas(no poseen pili).

Morfologa microscpica.

Diplococos. Gram (-). Lados adyacentes planos . Tamao (0.6 1 m) de dimetro. Dispuestos aisladamente con apariencia de rin o granos de caf. Ttradas (colonias jvenes). Intracelulares (PMN N). Carece de cpsula. Posee pilis (factor de virulencia). Inmvil. No forma esporas.

Identificacin presuntiva: Prueba de la oxidasa

Prueba de oxidasa Utiliza reactivo de Kovac (una solucin al 1% (p/vol) de N,N,N,Ntetrametil-p-dihidroclorofenilendiamina) para detectar la presencia de citocromo c en la cadena respiratoria de un microorganismo bacteriano; si el reactivo de oxidasa es catalizado, se torna color prpura. Mtodo del hisopo. Mtodo del papel de filtro humedecido. Mtodo directo en placa. Nota: Deben utilizarse en crecimientos de 24 horas. los diplococcos gramnegativos, oxidasa positivos aislados en medios selectivos para gonococos deben identificarse presuntivamente como N. gonorrhoeae.

Pruebas suplementaria enzima-substrato: Prueba de la catalasa

Las cepas de N. gonorrhoeae tienen una reaccin tpica muy fuerte (4+),explosiva al contacto con el reactivo superoxol.

Pruebas suplementarias bioqumicas

Reaccin de azcares en agar cistina tripticasa para la produccin de cido de los carbohidratos por aislamientos de Neisseria gonorrhoeae.

Chlamydia trachomatis

 Carecen de mecanismos para la produccin de energa (ATP).

Bacterias intracelulares obligadas aerobias e inmviles. Poseen membrana interna y externa Carecen de peptidoglicano. Replicacin a travs de un ciclo de crecimiento nico. Poseen un cuerpo elemental de 0.2-0.4 m (nunca se divide y es infeccioso). Poseen un cuerpo reticulado de 0.5-1.0 m (se multiplica al interior de la vacuolas de la clula hospedera y no es infeccioso). La replicacin intracitoplasmtica produce la formacin de inclusiones compactas con una matriz de glucgeno en las cuales estn incluidos los cuerpos elementales (cuerpos de inclusin).

Los cuerpos de inclusin de C. trachomatis contienen glucgeno, que se tien con yodo y Giemsa, despus de incubar 48 a 72 h, los cubreobjetos se extraen y se tien. Las inclusiones se localizan dentro del citoplasma de las clulas epiteliales, a menudo su ubicacin es perinuclear.

Se requiere de microscopia especializada en las clulas epiteliales del raspado conjuntival teido con anticuerpos fluorescentes o Giemsa. Sensible para el diagnstico de infecciones oculares en recin nacidos y en uretritis.


Es el mtodo ms sensible considerado como la prueba de oro para el diagnstico de infecciones causadas por C. trachomatis, del tracto genital. Sensibilidad de 70-85%. Muestras uretrales de hombres y mujeres asintomticas, las nasofarngeas, rectales, vaginales. Las lneas celulares ms utilizadas son las clulas McCoy (fibroblastos de ratn), HeLa 299 (carcinoma humano), las BHK-21 (clulas de ovario de hmster) y recientemente las clulas BGMK. Inoculacin en el saco vitelino de huevos de pollos embrionados de 6-8 das de edad.

El cultivo se propaga en una monocapa sobre un cubreobjetos inoculado con las muestras. Si hay suficiente nmero de cuerpos elementales de clamidias ellos infectarn las clulas y crecern en forma de inclusiones citoplsmicas, luego de ser infectadas, las inclusiones pueden observarse despus de 48-72 h de incubacin y teidas con anticuerpos marcados con fluorescena.

La observacin directa de las inclusiones que posee una morfologa distintiva contribuye al 100% de especificidad.