ESTABILIDAD DE UNA SUSPENSIÓN DE AMPICILINA

OBJETIVOS:

Analizar una muestra de suspensión de ampicilina a 0, 7, 14 días a

temperatura ambiente y a 30ºC.

Determinar los parámetros farmacocinéticos de la suspensión de

ampicilina: orden de reacción (duración para tres meses), la constante
de degradación (K), el t50 y t90 tiempo de degradación, tiempo de
vida útil.

Realizar las gráficas respectivas para conocer el orden de reacción y

usar el método de Arrhenius para conocer el tiempo de vida útil del
medicamento

MARCO TEORICO

Cinética química

La cinética química es un área de la fisicoquímica que se encarga del

estudio de la rapidez de reacción, cómo cambia la rapidez de reacción bajo
condiciones variables y qué eventos moleculares se efectúan durante la
reacción general (Difusión, ciencia de superficies, catálisis).

Es muy importante resaltar que la cinética química es hoy por hoy un estudio
puramente empírico y experimental, pues a pesar de la gran cantidad de
conocimientos sobre química cuántica que se conocen, siguen siendo
insuficientes para predecir ni siquiera por aproximación la rapidez de una
reacción química.
Por lo que la rapidez de cada reacción se determina experimentalmente

Velocidad de reacción
Está conformada por la velocidad de formación y la rapidez de
descomposición. Esta rapidez no es constante y depende de varios factores,
como la concentración de los reactivos, la presencia de un catalizador, la
temperatura de reacción y el estado físico de los reactivos.

Uno de los factores más importantes es la concentración de los reactivos.

Cuanto más partículas existan en un volumen, más colisiones hay entre las
partículas por unidad de tiempo.
La rapidez de reacción se mide en unidades de concentración/tiempo, esto
es, en (mol/l)/s es decir moles/(l·s).

Orden de reacción

Para cada reacción se puede formular una ecuación, la cual describe

cuantas partículas del reactivo reaccionan entre ellas, para formar una
cantidad de partículas del producto.

El orden de reacción está definido como la suma de los exponentes de las

concentraciones en la ley rapidez de la reacción.

Existen varios factores que afectan la rapidez de una reacción química: la

concentración de los reactivos, la temperatura, la existencia de catalizadores
y la superficie de contactos tanto de los reactivos como del catalizador.

Los catalizadores negativos se llaman electrocatalizadores y los positivos

catalizadores normales

Temperatura.-
Por norma general, la rapidez de reacción aumenta con la temperatura
porque al aumentarla incrementa la energía cinética de las moléculas.
Con mayor energía cinética, las moléculas se mueven más rápido y chocan
con más frecuencia y con más energía.
El comportamiento de la constante de rapidez o coeficiente cinético frente a
la temperatura = lnA − (Ea / R)(1 / T2 − 1 / T1)
Esta ecuación linealizada es muy útil a puede ser descrito a través de la
Ecuación de Arrhenius K = Aexp( − EA / RT) donde K es la constante de la
rapidez, A es el factor de frecuencia, EA es la energía de activación
necesaria y T es la temperatura, al linealizarla se tiene que el logaritmo
neperiano de la constante de rapidez es inversamente proporcional a la
temperatura.

Para un buen número de reacciones químicas la rapidez se duplica

aproximadamente cada diez grados centígrados.

Estado Físico de los Reactivos.-

Si en una reacción interactúan reactivos en distintas fases, su área de
contacto es menor y su rapidez también es menor. En cambio, si el área de
contacto es mayor, la rapidez es mayor.

Al encontrarse los reactivos en distintas fases aparecen nuevos factores

cinéticos a analizar. La parte de la reacción química, es decir hay que
estudiar la rapidez de transporte, pues en la mayoría de los casos estas son
mucho más lentas que la rapidez intrínseca de la reacción y son las etapas
de transporte las que determinan la cinética del proceso.

Presencia de un catalizador.-
Los catalizadores (La sustancia que acelera o retarda un proceso químico)
aumentan la rapidez de una reacción sin transformarla, además empeoran la
selectividad del proceso, aumentando la obtención de productos no
deseados. La forma de acción de los mismos es modificando el mecanismo
de reacción, empleando pasos elementales con mayor o menor energía de
activación.

Concentración de los reactivos.-

La mayoría de las reacciones son más rápidas cuanto más concentrados se
encuentren los reactivos. Cuanta mayor concentración, mayor frecuencia de
colisión...

Presión.-
En una reacción química, si existe una mayor presión en el sistema, ésta va
a variar la energía cinética de las moléculas. Entonces, si existe una mayor
presión, la energía cinética de las partículas va a disminuir y la reacción se
va a volver más lenta. Excepto en los gases, que al aumentar su presión
aumenta también el movimiento de sus partículas y, por tanto, la rapidez de
reacción.

METODOLOGÍA

METODO ESPECTROFOTOMÉTRICO
La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las
investigaciones químicas y biológicas.
El espectrofotómetro permite comparar la radiación absorbida o transmitida
por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una
que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.

La estructura básica de las

penicilinas es el ácido 6-
aminopenicilánico (6-APA), que
consiste en un anillo tiazolidínico con
un anillo ß-lactámico condensado.
El 6-APA lleva una parte variable
acilada en la posición 6.

Para realizar los ensayos.-

1. Reconstituir la suspensión de
ampicilina con agua destilada.
2. Tomar el equivalente a 100mg de principio activo, en nuestro caso 4ml.
3. Aforar a 100ml con agua destilada, filtrar la solución.
4. Tomar una alícuota de 2ml del filtrado y aforar a 100ml con solución
amortiguadora de sulfato de cobre (pH 5.2)
5. Trasvasar a dos tubos de ensayo y con la ayuda de dos pinzas de calor
calentar a baño María a 75ºC; enfriar.
6. Leer en el espectrofotómetro a una longitud de onda de 320nm.
7. Usar como blanco la solución amortiguadora con la que se realizó el
segundo aforo de la solución. (no calentar).
Para preparar el estándar llegar seguir el mismo procedimiento llegando a la concentración
de 20μg/ml

RESULTADOS

MUESTRA
Nombre: Ampicilina
Forma Farmacéutica: Suspensión
Laboratorio:
Registro Sanitario#:
Fecha de Fabricación:
Fecha de Vencimiento:
Lote:
Dosis: 125mg/5mL

CONTROLES FÍSICOS
Temperatura Ambiente Temperatura 30ºC
DÍA 0 7 14 0 7 14
pH 6,55 6,19 6,18 6,55 5,85 5,86
Temperatur
25 25 23 25 24 24
a ºC
Peso
1,1087 1,0997 1,0988 1,1087 1,0985 1,0755
Específico

Características Organolépticas

Temperatura Ambiente Temperatura 30ºC

 DÍA 0 7 14 0 7 14
Naranja Naranja
Color Naranja Naranja Naranja Naranja
intenso bajito
Banano Banano Banano
Olor Banano Banano Banano
maduro maduro maduro
Dulce algo
Sabor Dulce Dulce Dulce Dulce Amargo
fermentado

CONTROL QUÍMICO

Valoración espectrofotométrica.

Absorbancia del Estándar: 0,609

Concentración del Estándar: 20μg/mL

Temperatura Ambiente Temperatura 30ºC

DÍA 0 7 14 0 7 14
Absorbancia 0,635 0,530 0,522 0,635 0,491 0,447
Concentración
16,1248
de principio 20,8539 17,4056 17.1428 20,8539 14,6798
activo (μg/ml)
Concentración
en Porcentaje 104,27 87,025 85,715 104,27 80,625 73,400
(%)

CALCULOS
Peso Específico
Control Químico:

Datos

Cst= 2µ g/ml Abst7-Ambiente= 0,530

AbsAbs= 0,609 Abst14-Ambiente= 0,522
Absto= 0,635 Abst7-30^C= 0,491
Abst14-30^C= 0,447

 Cálculo de la Concentración

Cst xAbsM
CM =
AbsM

˗ T0
20x 0,635 µg
CM = = 20,8539
0,609 ml

˗ T7
Ambiente

20x 0,530 µg
CM = = 17,4056
0,609 ml

30oC

20x 0,491 µg
CM = = 16,1248
0,609 ml

˗ T14

Ambiente

20x 0,522 µg
CM = = 17,1428
0,609 ml

30oC

20x 0,447 µg
CM = = 14,6798
0,609 ml
 Cálculo del Porcentaje
20µ g 100%

20,854 g X = 104,27% T0

17,405µ g X = 87,025% T7 -- Ambiente

17,143µ g X = 85,715% T14 – Ambiente

16,125µ g X = 80,625% T7 – 30oC

14,680g X = 73,400% T14 – 30oC

Concentración, % P.A.
t, días
T ambiente T 30oC

0 104,27 104,27

7 87,025 80,625

14 85,715 73,400

 Cálculo de Orden de Reacción

– T ambiente, 200C
%
t, días
Conc. ln Conc. 1/Conc.
0 104,27 4,6470 9,590E-03
7 87,025 4,4662 0,0115
14 85,715 4,4510 0,0117

A= 101,6142 4,6194 9,88E-03

B= -1,3254 -0,0140 1,48E-04
r= 0,8959 0,8987 0,9016

Orden de Reacción 2

Gráficas
 ˗ T 30oC

%
t, días
Conc. ln Conc. 1/Conc.
0 104,270 4,6470 2,152E-01
7 80,625 4,3898 2,278E-01
14 73,400 4,2959 2,328E-01

A= 101,5333 4,6198 2,16E-01

B= -2,2050 -0,0251 1,26E-03
r= 0,9559 0,9658 0,9700

Orden de reacción 2
 Cálculo de Kd (Constante de degradación)

1/ot, oK x 1000 K
3,4130 1,48E-04
3,3003 2,88E-04
3,3557 2,19E-04

A= 0,004384683
B= -0,001241263
r= -1

Y= a+bx
Y= 2,19E-04

0,105
Kd =
K 25
 Días
0,105
Kd = = 478,6138
2,19 x10− 4

 Cálculo de T50

0,693
t50 =
K 25

Días
0,693
t 50 = = 3164,3836
2,19x10− 4

 Cálculo de T90 (Tiempo de vida útil)

0,105
t90 =
K 25

Días
0,105
t 90 = = 479,4520
2,19 x10 − 4

CONCLUSIONES

– La estabilidad química nos permite conocer el tiempo de vida útil de

un medicamento, de su principio activo sin embargo deben realizarse
pruebas de estabilidad de sus excipientes ya q pueden ser los
causantes de la aceleración en la degradación del principio activo.

– Al realizar el análisis espectrofotométrico a los siete días a

temperatura ambiente podemos observar que el contenido de
principio activo se ha degradado más del 10% (87,03%) de su
contenido inicial (104,27%) lo cual nos indica que la suspensión es
muy inestable y una vez reconstituida su tiempo de vida útil es menor
a una semana.

– En el control físico de las suspensiones a diferentes temperaturas,

podemos ver que el olor con el pasar del tiempo se intensifica, con
respecto al sabor en t0 y t7 el en los dos se aprecia un sabor dulce,
pero a t14 mientras a temperatura ambiente se potencializa el sabor,
30oC se hizo un poco amarga, algo similar pasó con el color en t 14, a
 temperatura ambiente el color naranja se intensificó y a 30oC
disminuyó la coloración hasta alcanzar un naranja pastel.

– Al realizar la prueba de sedimentación, obtuvimos cero como

sedimento lo cual está dentro de los parámetros para suspensiones.

– Tanto a temperatura ambiente como a 30oC se obtuvieron órdenes de

reacción tipo 2, lo que quiere decir que el orden de reacción es
directamente proporcional al cuadrado de la concentración.

– La constante de degradación en la suspensión de Ampicilina fue de

478,61 días, lo que equivale a 16 meses.

– El tiempo necesario para que se degrade el 50% del principio activo

fue de 3164,38 días, lo que equivale aproximadamente a 9 años.

– El tiempo necesario para que la concentración de principio activo

disminuya a 90%, la cual es la cantidad inferior de las
especificaciones es de 16 meses, (tiempo de vida útil).

– En el estudio de 14 días podemos observar que la concentración de

principio activo disminuye considerablemente a mayor temperatura
que a temperatura ambiente, por lo que se recomienda almacenarlo
en un lugar fresco.

DISCUSIONES

– Al reconstituir la suspensión, hay que tener precaución de agitar bien

para que todo el principio activo se disuelva en agua ya que si no lo
hacemos por 10 minutos aproximadamente, podemos tener un valor
erróneo de principio activo.

– Al someter a calentamiento la solución con Buffer en los tubos hay

que tener precaución con la introducción de agua dentro de estos al
igual que dejarlos mucho tiempo al aire libre ya que pueden
descomponerse al contacto con el ambiente.

– Al tener una solución a diversas temperaturas, es mejor tener varias

suspensiones, ya que si sólo trabajamos con una variando la
temperatura, esta se puede descomponer y alterar los valores que
vamos a obtener.

– La vida útil obtenida de la suspensión de ampicilina fue de un año

cuatro meses y en el envase está reportado que es de dos años, esto
 pudo deberse a que la concentración del principio activo fue menor al
obtenido en realidad ya que al realizar los controles al día 7 y 14, la
solución estaba muy sedimentada y es posible que no todo el
principio activo que había en el frasco, se reconstituyó nuevamente
obteniendo un valor menor al que debimos obtener, también pudo ser
por la calidad de los reactivos con los que trabajamos o puede ser
que el almacenamiento del producto en bodega no fue en las
condiciones adecuadas por lo que la composición de la suspensión se
alteró teniendo una vida útil menor a la reportada.

CUESTIONARIO

Describir otros métodos para determinar el orden de reacción

Determinación del orden de reacción. Es un fin primordial de la Cinética
Química. Entre otros métodos tenemos:
a) Uso de las ecuaciones integradas de velocidad en dos modalidades:
a-l) Directamente: Se supone un orden, se compara la representación de
c = c (t) con la experimental.
Se repite hasta ajustar lo más posible los datos.
El método no es preciso y se usa fundamentalmente para distinguir entre
primer y segundo orden. '
a-2) Método de Powell. Este método se aplica cuando la ecuación cinética
tiene la forma v = k cn.
Definamos los parámetros adimensionales α y ø, como:
α = c /c
o ø = kcon-1 . t

C
Co

α1-n -1 = (n - 1)ø n≠1

= 1 + c3-1(n - l)kt
ln α = - ø n=1
Se usa una representación de α frente a log ø (representaciones de tipo
general, tal y como se representa en la Fig. 1)
Haciendo ahora un experimento donde se mida α en función de log t se
representa en un papel transparente y se procura hacer coincidir con una
curva tipo, dado que lo que diferencia t de ø es kcon-1, que es constante
durante el experimento, al ajustar la curva experimental con la teoría, se
obtiene n.,
b) Uso de las vidas de la reacción química.
Este método se puede emplear cuando las ecuaciones cinéticas son de la
forma: v = kcn.
En esos casos:
t1/2 ~ (1 - n) . log co + constante
 Fig 1. Representación típica semilogarítmica de los
parámetros α y ø para distintos órdenes de reacción.
Ilustración del método Powell.
Luego una representación de log tl/2 frente a log co permitiría obtener n a
partir de la pendiente. .
c) Método de las velocidades iniciales de Van't Hoff.
Este método usa como su nombre indica las velocidades iniciales. Como se
indica en la figura 2, las velocidades iniciales se determinan para distintos
experimentos donde se ha cambiado la concentración inicial. A partir del
conjunto de valores (v, c) el orden de reacción puede determinarse mediante
una representación log v frente a log c pues log v es proporcional a n log c
como se indica en la misma figura. Este método tiene la ventaja de que se
conoce con certeza lo que hay presente al principio, es decir, está exento de
perturbaciones debidas a sustancias producidas por la propia reacción.
d) Método diferencial.
Es una variante del anterior y se emplea solo una curva. Se van midiendo
las diversas pendientes para diversos (c1, t1) (c2, t2) (c3, t3); c ada p e ndiente e sv y
luego se representa log v frente a log c, tal y como se muestra en la figura
anterior.
Como ahora el tiempo varía, este orden suele calificarse de «orden respecto
al tiempo t».
En general, ambos ordenes no tienen porque coincidir, el verdadero (punto
anterior) y el temporal o el de Letort, pues la propia reacción puede formar
inhibidores o lo contrario, es decir, sustancias que activan la reacción.
En este caso se dice que la reacción se autocataliza.
 FIG. 2 representaciones típicas de concentración en
función del tiempo (izquierda) y velocidad, en función de
la concentración (derecha). Parte superior: ilustración del
método las velocidades iniciales de Van't Hoff. Parte
inferior: ilustración del método diferencial.
Comprendemos ahora que los órdenes de velocidad basados en la vida
media no son muy precisos para la determinación de órdenes de reacción, la
propia vida media está relacionada con el orden respecto al tiempo.
e) Método de aislamiento.
En este método se añaden todos los reactivos menos uno en gran exceso.'
Así puede estudiarse la variación de la concentración de éste con el tiempo.
.
Ejemplo: v = k[A]x[B]y[C]z. Si ponemos A y B en gran exceso
puede escribirse v = k'[ C Z]
Por lo que el orden parcial z puede obtenerse por los métodos señalados
anteriormente. Una vez terminado este proceso se repite, pero ahora
añadiendo un gran exceso de A y C para determinar el orden y de B.
Dicho proceso se continúa hasta acabar con todos los reactivos.

BIBLIOGRAFÍA

LEVINE, Ira; FISICOQUÍMICA; volumen 2; quinta edición; España; 2004;

páginas 672-678
GONZÀLEZ, A; CINÉTICA Y DINÁMICA MOLECULAR DE LAS
REACCIONES QUÍMICAS; primera edición; España: 1985; páginas 20-22

http://www1.uprh.edu/inieves/macrotema/CINETICA_macrotema.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Cin%C3%A9tica_qu%C3%ADmica
http://www.monografias.com/trabajos14/cinetica-quimica/cinetica-
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http://nostoc.usal.es/sefin/MI/tema15MI.html