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VIROLOGÍA.

GENERALIDADES DE LOS VIRUS EN


MICROBIOLOGÍA.

Helen González Villalba.


Estudiante de Medicina 3° año.
Cartagena, Colombia.
2021
CONTENIDO
1. Concepto de virus.
2. Clasificación y nomenclatura de los virus.
3. Principales virus de interés médico.
4. Ciclo de un retrovirus.
5. Técnicas de diagnóstico virológico.
6. Técnicas de diagnóstico inmunológico y molecular.
7. Diagnóstico serológico.
8. Medios de cultivo.
VIRUS: CONCEPTOS GENEREALES.
• Formados por un fragmento de ADN o ARN.
• Capsómeros: forman una cubierta denominada cápsida. Son las principales proteínas
víricas.
• Nucleocápsida: ARN y la cápsida. En su interior pueden existir polimerasas para la
replicación de los ácidos nucleicos y proteínas. Permite a los virus salir al exterior sin ser
destruidos en el medio extracelular.
• Virus envueltos: La nucleocápside está recubierta por una envoltura lipídica originada en la
membrana citoplasmática.
• Viriones tienen tamaño submicroscópico entre 30 y 300nm.
• Virus bacteriófagos: se multiplican en células procariotas.

Bibliografía: Biología de los Microorganismos de Brock 14° Ed, Microbiología Clínica de G-Prats Ed Panamericana, Microbiología Médica de Murray 7°ma Ed, Introducción a la Microbiología de Tortora Funke 9° Ed.
ESTRUCTURA DE LOS VIRUS

 Cápsida.
 Envoltura.
 Nucleocápsida.
 Virión.
 Genoma vírico.
 Proteínas de superficie del virión.
 Enzimas víricas específicas.

Bibliografía: Biología de los Microorganismos de Brock 14° Ed, Microbiología Clínica de G-Prats Ed Panamericana, Microbiología Médica de Murray 7°ma Ed, Introducción a la Microbiología de Tortora Funke 9° Ed.
Morfología de los viriones.
Partícula vírica en la que
Partícula vírica en que los
los capsómeros se sitúan
capsómeros se disponen
alrededor y a lo largo de
alrededor del ácido
la cadena del ácido
nucleico formando un
nucleico presentando
icosaedro.
simetría helicoidal.

Partícula vírica Partícula vírica


formada por una formada por una
nucleocápsida con nucleocápsida con
simetría icosaédrica simetría helicoidal,
recubierta por la plegada y recubierta
envoltura. por la envoltura.

Bibliografía: Biología de los Microorganismos de Brock 14° Ed, Microbiología Clínica de G-Prats Ed Panamericana, Microbiología Médica de Murray 7°ma Ed, Introducción a la Microbiología de Tortora Funke 9° Ed.
GENOMAS VÍRICOS
Pueden ser de DNA o de RNA, y se subdividen según sean bicatenario o
monocatenario.
Pueden ser circulares o lineales, y los que son monocatenarios pueden ser
de cadena positiva o de cadena negativa en cuanto a su secuencia de
bases.
Comúnmente son más pequeños de los de otras células, y éstos codifican
desde unos pocos hasta aprox 350 genes. Los genomas víricos más
pequeños son los de algunos virus de RNA que infectan animales.
Los virus pueden clasificarse según el hospedador al que infectan y
también por su estructura genómica. Así: virus bacterianos, virus
arqueanos, virus de animales, virus de plantas, virus protozoarios, etc.

Bibliografía: Biología de los Microorganismos de Brock 14° Ed, Microbiología Clínica de G-Prats Ed Panamericana, Microbiología Médica de Murray 7°ma Ed, Introducción a la Microbiología de Tortora Funke 9° Ed.
CLASIFICACIÓN DE LOS VIRUS

Se clasifican dependiendo de

El tipo de ácido nucleico El tipo de célula a la La posesión de envolturas El tipo de cápsida


que contienen que parasita membranosas

TIPO DE VIRUS ÁCIDO NUCLEICO CÁPSIDA ENVOLTURA EJEMPLOS


Virus Vegetales ARN monocatenario Helicoidal Ausente V. del mosaico del
tabaco
V. de tumores
vegetales

Bacteriófagos ADN bicatenario Compleja Ausente Fago T2, fago T4, etc.

Virus Animales Todas las opciones Icosaédrica Frecuente Herpes, polio, gripe,
viruela, SIDA

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PRINCIPALES VIRUS DE INTERÉS MÉDICO.
VIRUS RESPIRATORIOS

Virus de la gripe (A, B y C), Virus respiratorio sincitial (RSV), virus


parainfluenza, adenovirus, rinovirus, coronavirus, enterovirus.

VIRUS CAUSANTES DE ENFERMEDADES EXANTÉMICAS

Virus del sarampión, Herpesvirus 6, Virus B19, Enterovirus


(coxsackie y echo), Virus de Epstein-Barr, Citomegalovirus,
Escarlatina estreptocócica.

VIRUS CAUSANTES DE GASTROENTERITIS VÍRICA

Rotavirus, Calicivirus (géneros Norovirus y Sapovirus),


Adenovirus F (serotipos 40, 41) y Coronavirus.

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PRINCIPALES VIRUS DE INTERÉS MÉDICO.
VIRUS CAUSANTES DE HEPATITIS

Virus de la Hepatitis (A, B, C, D, E)

VIRUS CAUSANTES DE ENFERMEDADES GENITOURINARIAS

Papilomavirus, Poliomavirus BK y JC

VIRUS TRANSMITIDOS POR ARTRÓPODOS

Arbovirus, Flaviviridae, Togaviridae, Flebovirus y Bunyaviridae

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PRINCIPALES VIRUS DE INTERÉS MÉDICO.
VIRUS CON RESERVORIO EN ROEDORES

Arenaviridae, Bunyaviridae, Hantavirus.

VIRUS CAUSANTES DE FIEBRES HEMORRÁGICAS

Marburgvirus, Ebolavirus.

VIRUS ASOCIADOS A INFECCIONES CONGÉNITAS

Virus del Herpes Simple, Varicela-Zóster, Rubéola,


Citomegalovirus, VIH, Virus B19.
Bibliografía: Biología de los Microorganismos de Brock 14° Ed, Microbiología Clínica de G-Prats Ed Panamericana, Microbiología Médica de Murray 7°ma Ed, Introducción a la Microbiología de Tortora Funke 9° Ed.
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TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO VIROLÓGICO
EXAMEN DIRECTO

MICROSCOPÍA ÓPTICA

 Tinciones citológicas convencionales: Hematoxilina-Eosina.

MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA

 Utilización de anticuerpos marcados con fluoresceína


dirigidos contra los antígenos de un virus.

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA

 Diagnóstico eficaz y rápido.


 Se utiliza en centros especilizados.

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TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO VIROLÓGICO
CULTIVO

AISLAMIENTO EN CULTIVOS CELULARES

 Son células vivas mantenidas in vitro.


 Son el sistema más utilizado en laboratorios.

CULTIVOS CELULARES

 Las células se propagan en frascos o tubos que contienen


medios líquidos que permiten su multiplicación y
mantienen su viabilidad.
 Pueden ser primarios o de línea.
 Medios de cultivo de las células: 1) Medios de crecimiento,
y 2)Medios de mantenimiento.

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TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO VIROLÓGICO
CULTIVO

INOCULACIÓN E INCUBACIÓN DE LOS CULTIVOS CELULARES

 El material estéril se inocula directamente a los tubos de


ensayo que contienen las células.
 Una vez seleccionadas las líneas celulares, el volumen de
muestra a inocular en los tubos con la monocapa celular es
de 0,3ml aproximadamente.
 33°C / 35-37°C.
 Shell-vial.

INOCULACIÓN A ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN

 Hoy en día se dispone de células primarias que permiten el aislamiento de distintos virus.
 Se utiliza para el aislamiento de virus que no se propagan bien en cultivos celulares o en el
embrión de pollo.
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TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO
INMUNOLÓGICO Y MOLECULAR
1) Aglutinación de partículas de látex: utilizada para la detección de rotavirus y adenovirus
en las heces.
2) Enzimoinmunoanálisis (EIA): utilizada para la detección de un gran número de virus,
como los Rotavirus, Calicivirus, Astrovirus, Adenovirus, Virus Respiratorio Sincitial, Virus de
la gripe, Virus de la Hepatitis B, VIH.
3) Inmunocromatografía: Utilizada para la detección del antígeno de Virus Respiratorio
Sincitial, Gripe A y B, Rotavirus y Adenovirus causantes de gastroenteritis.
4) Sondas genéticas: Utilizadas en técnicas de hibidración in situ para detectar el genoma de
virus como papilomavirus, entre otros.
5) Técnicas de amplificación: Permiten diagnosticar infecciones víricas y cuantificar la
viremia.

Bibliografía: Biología de los Microorganismos de Brock 14° Ed, Microbiología Clínica de G-Prats Ed Panamericana, Microbiología Médica de Murray 7°ma Ed, Introducción a la Microbiología de Tortora Funke 9° Ed.
DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO

Pruebas de fijación del


Aglutinación pasiva
Complemento

Enzimoinmunoanálisis Inmunofluorescencia

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MEDIOS DE CULTIVOS: DESCRIPCIÓN
MEDIO DE CRECIMIENTO
Medio mínimo esencial de Eagle sin
MEDIO DE MANTENIMIENTO
bicarbonato ni glutamina (10x), 100ml; L-
glutamina (200mm) 10ml; aminoácidos no Medio basal de Eagle sin bicarbonato ni
esenciales 10ml; suero bovino fetal 100ml; glutamina (10x), 100ml; L-glutamina
Hepes pH 7,4 30ml; solución de (200mm) 10ml; suero bovino fetal 25ml;
antibióticos: penicilina 200.000 Ul; Hepes pH 7,4 30ml; solución de
estreptomicina 200mg; neomicina 30mg. antibióticos: penicilina 200.000 UI;
Añadir agua destilada estéril para obtener estreptomicina 200mg; neomicina 30mg.
1L de medio. Ajustar el pH a 7,2 – 7,4 con Añadir agua destilada para obtener 1L de
hidróxido sódico 1N. medio. Ajustar el pH a 7,2 – 7,4 con
hidróxido sódico 1N.

Bibliografía: Biología de los Microorganismos de Brock 14° Ed, Microbiología Clínica de G-Prats Ed Panamericana, Microbiología Médica de Murray 7°ma Ed, Introducción a la Microbiología de Tortora Funke 9° Ed.

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