UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

Ingeniería de los Bioprocesos

Esterilización

Ing. C. Mabel Luna

Asepsia Desinfección

Esterilización
 Asepsia

Se dice que un ambiente es aséptico cuando se

han eliminado todos los microorganismos
patógenos.
Un ambiente aséptico no tiene porqué ser estéril.
La asepsia también se puede conseguir por
procedimientos físicos y químicos.
Muerte celular equivale a decir incapacidad de reproducción celular: (no viable)
METODO CONDICIONES USO OBSERVACIONES

Calor 121°C (250F), Medios Barato

Húmedo 14.7 psig, 15 Líquidos Eficiente
(vapor) minutos Sólidos

Calor seco 130 - 150°C Elementos Más caro que el calor húmedo y más lento.
1 - 2 horas de Vidrio,
Sólido
Filtración 0.2 mm Para productos sensibles a la temperatura,
tales como enzimas, aire.
Agentes Capacidad Oxidativa o alcalina:   Cloración
químicos que requiere de etapas posteriores para
eliminar el cloro. Ozonificación.
Mecánicos Vibración
·     Ultrasonido
·      Centrifugación a alta velocidad
Radiación Degradación del DNA
UV, Rayos Utilizada en tratamiento de efluentes con
X flujos bajos
 ¿Qué esterilizar?
– El inóculo, para mantener su pureza
– El medio de cultivo y los aditivos.
– El material en contacto con el medio (recipiente,
fermentador, válvulas y conductos)
– Los gases entrantes y salientes.
 Mantener las condiciones asépticas durante la
manipulación.
 Construcción apropiada del biorreactor para su
esterilización y para la prevención durante la fermentación.
 Antisépticos
Desarrollan su acción letal interaccionando de
forma inespecífica con los componentes celulares
de forma que no existe una acción selectiva frente a
grupos de microorganismos sino que su acción es
más general

Los antisépticos no suelen ser demasiado tóxicos y

pueden aplicarse sobre tejidos vivos.
 Germicidas

Desinfectantes Antisépticos
matan los microorganismos por su menor toxicidad,
y se aplican sobre objetos se emplean sobre tejidos
inanimados. Puede vivos
reemplazar a la esterilización
por calor en caso de
materiales sensibles a éste .
Esterilización por calor
ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

Por ebullición
Vapor de agua sin presión Consiste en colocar el
material a esterilizarse a la acción del vapor de agua y a
temperatura no mayor de 100 oC. Para esterilizar sustancias
que de otra manera se alteran o destruyen a elevadas
temperaturas como la leche, caldo selenito, medios de cultivo
azucarados, etc.
Por vapor de agua con Presión
 ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO
Por tindalización : esterilización fraccionada, que consiste en calentar
el material a 100o C por 30 minutos durante tres días consecutivamente,
con incubación de los intervalos. Se emplean para esterilizar medios de
cultivo y otras sustancias que no pueden ser calentadas a temperaturas
superiores a 100o C.

Pasteurización
Cuando es lenta, consiste en someter el liquido a esterilizar a una
temperatura que fluctúa alrededor de los 63o C durante 20 minutos y
cuando es rápida, alrededor de 73o C durante 20 minutos aunque no
destruye la totalidad de organismos.
Se usa para la conservación de la leche, de bebidas alcohólicas,
como vinos, cervezas, etc.
 ESTERILIZACION POR FILTRACION

Se utiliza frecuentemente para todos los componentes de la

solución de nutrientes que son sensibles al calor y que
serían por tanto desnaturalizados durante el proceso de
esterilización por vapor utilizado normalmente en
fermentación industrial. Las vitaminas, los antibióticos o
los componentes de la sangre son ejemplos de compuestos
lábiles al calor que deben ser esterilizados por filtración.

El aire exterior tiene 10 - 100.000 partículas por m3 y 5 - 2.000

microorganismos por m3. De estos, el 50% son esporas de
hongos y el 40% son bacterias. (filtros de lana de vidrio, filtros
de cartucho)
Esterilización por eliminación con medios físicos

Filtros absolutos Filtros fibrosos

 Esterilización Química
 
No se utiliza ampliamente dado que la mayoría de los
desinfectantes tienen baja acción. Adicionalmente pueden
interferir en el crecimiento de los m.o.
 Se buscan agentes que:
 ·        Actúen en forma rápida
·        No sean caros
·        No sean inflamables
·        No sean explosivos
·        No sean tóxicos
 
Los más utilizados :
• b-propiolactona
• Oxido de etileno (en medio frio)
• Fenol o compuestos fenílicos (Cresol, ortofenil fenol)
• Alcoholes: Etanol, Metanol
• Halógenos: Hipoclorito, Cloroaminas.
Esterilización por agentes químicos
Oxido de etileno: es un líquido que hierve a 10,7° C.
Se usa en la industria para la esterilización de
placas Petri, jeringas y otros objetos de plástico
que se funden a temperaturas superiores a los 100°
C. Debido a su alto poder de penetración estos
objetos se empaquetan primero y después se
esterilizan. El óxido de etileno actúa inactivando
enzimas y otras proteínas que contienen grupos (R-
SH) mediante una reacción llamada alquilación (R-
S-CH2CH2O-H).
 ESTERILIZACIÓN POR RADIACION

La esterilización por rayos ultravioleta (UV) desinfecta alterando el componente

DNA de los microorganismos e impidiendo su reproducción, por tanto es un medio

no-químico que inactiva bacterias, esporas, protozoos, levaduras y virus. El UV es un

proceso en  línea, por lo tanto no requiere tanque de contacto, el tiempo de retención

requerido se mide en segundos en lugar de minutos.

Esterilización por radiación UV
Esterilización por gas –plasma de Peróxido de hidrógeno
 Antibióticos (Quimioterápicos)

Interfieren el crecimiento y supervivencia de los

microorganismos interactuando específicamente con
alguno de sus componentes celulares. Debido a esta
especificidad, los antibióticos tienen un espectro de
acción limitado; esto es, en general son activos frente a
ciertos microorganismos e inactivos frente a otros, lo
que permite usarlos como agentes selectivos.
 Antibióticos: clasificación
Procariontes: Presentan baja toxicidad frente a los eucariontes
(células humanas) aunque hay que considerar que existen en estas
ciertos orgánulos celulares de origen procariótico que pueden verse
afectados y, por consiguiente, afectada la actividad celular general.
Eucariontes: suelen presentar más problemas de toxicidad frente a
células humanas ya que estas son eucarióticas.

Ambos grupos.

Antivirales: bloquean el proceso de replicación y multiplicación vírica.

Puesto que los virus son parásitos intracelulares que utilizan los
componentes celulares del huésped para su multiplicación, los
antivirales son en general tóxicos para las células eucarióticas (o
procarióticas).
 Antibióticos: clasificación

Bacteriostáticos cuando frenan el crecimiento microbiano.

Los m.o no crecen en presencia del antibiótico; pero tampoco
mueren de forma inmediata. Si se elimina el antibiótico, los
microorganismos pueden recuperarse y volver a crecer. Los
microorganismos cuyo crecimiento está detenido por acción de un
antibiótico bacteriostático mueren lentamente.

Bactericidas cuando la presencia del antibiótico produce la

muerte del microorganismo afectado rápidamente. Esta muerte
puede ir acompañada de la lisis de las células (y se habla entonces
de antibiótico bacteriolítico) o no.