“AÑO DEL BICENTENARIO DEL PERU: 200 AÑOS DE INDEPENDENCIA”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE AGRONOMÍA
ESCUELA DE AGRONOMÍA
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE AGRONOMÍA Y FITOTECNIA

CURSO: PROPAGACION DE LAS PLANTAS

TEMA: MICROPROPAGACION

DOCENTE: ING. VICTOR SANDOVAL CRUZ

INTEGRANTES:CULQUICONDOR CHUMACERO JESSICA

DURAND MONTEJO ESTHER
FLORES CRUZ JESUS
GONZALES REYES PATRICIA
 INTRODUCCIÓN
En el siguiente informe hablaremos detalladamente de la micropropagación en plantas, forma y
técnicas.
Las plantas superiores pueden propagarse o reproducirse de forma sexual y/o asexual, dependiendo de
su estado evolutivo. Si se emplea la propagación sexual las nuevas plantas surgen de la fusión de
gametos parentales, dando lugar a embriones (semillas) que representan una nueva combinación de
genes y por ello diferentes genéticamente de sus progenitores. Por el contrario, la reproducción
asexual implica la formación de las nuevas plantas a partir de células somáticas, y por tanto con
idéntica composición genética, denominándose clones
Historia
El término clon fue aplicado por primera vez en 1903 por H. J. Webber para definir a las plantas que se
propagaban vegetativamente. El código oficial de nomenclatura de las plantas cultivadas define clon
como “el conjunto genéticamente uniforme de individuos (que pueden ser de naturaleza quimérica)
originalmente derivados de un solo individuo mediante propagación asexual”.
La agricultura actual se basa en el cultivo de un número muy limitado de especies, que presentan una
variación genética reducido en comparación con las especies silvestres de las que proceden. Esto
provoca que sean más vulnerables a las enfermedades y limita su potencial de mejora. La
biotecnología, y más concretamente la micropropagación, puede ayudar a conseguir una mayor
productividad, ya que permite la obtención de plantas resistentes a patógenos, como hongos, virus y
artrópodos, que atacan a las cosechas.
CONCEPTO
La micropropagación de plantas es una técnica que consiste en propagar plantas de forma asexual a
partir de un explante, de hojas, tallos, raíces, semillas o cualquier otro órgano, para cultivarlo en un
laboratorio, de esta forma podemos crear un ambiente artificial y controlarlo la poder llegar al éxito
deseado.
El resultado de este proceso son plantas idénticas a la planta madre de la que se tomó el explante. Sus
frutos y demás características tendrán el mismo sabor, tamaño, color, resistencia a enfermedades, al
medio ambiente, entre otros.
ETAPAS DE LA MICROPROPAGACIÓN
 Etapa 0. Selección del material vegetal.

 Etapa I. Iniciación del cultivo.

 Etapa II. Multiplicación.

 Etapa III. Inducción y desarrollo de raíces

 Etapa IV. Aclimatación
CULTIVO DE EMBRIONES
Tipos de cultivos de embriones
1. Cultivo de embriones inmaduros
Se originan en semillas no acabadas de madurar, se utiliza para impedir el aborto
embrionario (muerte prematura del embrión), y con el fin de obtener una planta viable.
2. Cultivo de embriones maduros
Se encuentran en semillas maduras relativamente fácil y se utiliza para eliminar la inhibición
de germinación de las semillas.
TÉCNICAS
En el cultivo de embriones generalmente no se encuentran problemas en su desinfección.
Las semillas maduras se encuentran desinfectadas en su exterior; a partir de ellas se obtiene los
embriones abriendo la cubierta seminal.
Si las semillas están todavía inmaduras, el fruto aun cerrado permanece estéril y al abrirlo se
obtienen los óvulos sin infectar.
FACTORES QUE AFECTAN EL ÉXITO DE CULTIVO DE EMBRIONES
 Genotipo. - en algunos cultivos especies los embriones son difíciles de cultivar, mientras que
en otras resulta fácil.
Estado de desarrollo del embrión
Embriones muy pequeños, indiferenciados es imposible desarrollarlos en in vitro. Cuanto más
desarrollado este un embrión in vivo, más fácil resulta su cultivo in vitro, es posible con la ayuda de
técnicas especiales, cultivar embriones muy pequeños; por ejemplos incubando, en estrecho contacto
con el embrión un fragmento de endospermo de una semilla madura, o una porción de tejido
hipocotilar.
Se puede realizar un trasplante del embrión inmaduro, el endospermo de una semilla normal de la
misma especie.
Condiciones de crecimiento de la planta madre
Las plantas madre son cultivadas en invernadero, aunque a veces se utiliza material cultivado en
campo, ejemplo la cebada.
Estas plantas se cortan y transfieren a soluciones aireadas, en un fitroton, la mejora del desarrollo del
endospermo y por consiguiente mejor crecimiento de los embriones aislados.
Condiciones
El crecimiento del embrión puede ser estímulo se desarrolla más los cotiledones, lo cual depende del
crecimiento de la planta madre. Se pueden trabajar plátano (inflorescencias) con giberelinas, antes de
aislar los embriones; este tratamiento incrementa su tamaño haciéndolos fácil de manejar.
Composición del medio nutritivo
Generalmente se usan medios sólidos con un pH entre 5-6.
• La sacarosa fuente de energía tiene el papel de rebajar el potencial osmótico negativo de
los medios nutritivos sobre todo en embriones jóvenes.
• El agar se utiliza a una concentración 0.8% produciéndose inhibiciones en el crecimiento
si se utilizan concentraciones altas.
 Oxígeno. - factor importante, en algunas ocasiones las necesidades de oxígeno de los cultivos de
embriones, superiores a las concentraciones que normalmente se encuentran en el aire.
 Luz. - A veces los embriones aislados necesitan ser cultivados en la oscuridad durante 7-14 días,
pudiendo luego ser transferidos a la luz, para determinar la formación de la clorofila.
 Temperatura. - Depende de la especie del vegetal. Normalmente se utiliza una temperatura alta (22-
28°C) para el crecimiento. Un tratamiento de frío puede ser necesario para romper la dormición.
Aplicaciones prácticas
 Eliminar inhibición absoluta de germinación de las semillas.
 Germinación de semillas de Parásito obligados que resulta imposible in vivo sin la presencia del
huésped, pero que puede conseguirse con el cultivo de embriones.
 Acortar el ciclo de mejora, existen muchas especies que presentan dormición seminal, la cual
frecuentemente se localiza en la cubierta de la semilla y /o en el endospermo, aislando los
embriones se puede producir una germinación inmediata.
 Producción de haploides.
 Prevención del aborto embrionario en frutales de hueso precoces. El transporte de agua y nutrientes
al embrión todavía inmaduro, en cruces con frutales de hueso queda corto a veces demasiado
temprano, produciéndose el aborto del embrión.
FASES DEL CULTIVO DE EMBRIONES
Cultivos de meristemas
Características
 Son células pequeñas
 Tienen forma poliédrica, paredes finas y vacuolas pequeñas y abundantes.
 Siempre permanecen jóvenes y poco diferenciadas.
 Tienen capacidad de dividirse rápidamente en los tejidos.
¿Pará qué sirve?
La técnica de meristemos fue utilizada en la iniciación de los cultivos in vitro obteniendo así el
crecimiento de plantas sanas libres de patógenos. En estudio realizado en los laboratorios se detectó la
presencia de virus "el virus S de la papa PVS" ; el objetivo primordial al momento de utilizar la técnica
del cultivo de meristemos era determinar un grado óptimo de tamaño de los meristemos que les
permitieran liberar a las plantas del virus PVS.
Después de concluir el trabajo se obtuvo como buenos resultados plantas libres del virus S y en la
medida en que fueron disminuyendo de tamaño los meristemos el virus se logró combatir así se
encontrará en los tejidos internos de la planta.
A través de la técnica de cultivo de meristemos fue posible obtener plantas sanas que a su vez se
multiplicaron y se emplearon en la producción in vitro de minituberculos.
FASES DEL CULTIVO DE MERISTEMOS
CULTIVO DE CALLO IN VITRO
El cultivo de tejidos, como técnica, consiste esencialmente en aislar una porción de la planta (explanto) y
proporcionarle artificialmente las condiciones físicas y químicas apropiadas para que las células expresen
su potencial intrínseco o inducido. Se basa en el concepto de "totipotencialidad" de las células vegetales,
que dice: "una célula vegetal o grupo de células colocadas en condiciones adecuadas es capaz de regenerar
un individuo completo e idéntico al que le dio origen".
1.-Producción de productos farmacéuticos: se puede orientar el mecanismo vegetal hacia la producción de
un determinado compuesto, obteniendo muy altas relaciones de producción de dichas sustancias. Por
ejemplo: esencias de plantas aromáticas, sacáridos para jarabes, edulcorantes.
2.-Mejoramiento genético de cultivos:
a) cultivo de embriones, ovarios u óvulos.
b) cultivo de anteras y microsporas
c) cultivo de protoplastos
d) cultivo de callos y suspensiones celulares Se pueden obtener variantes genéticas con resistencia o
tolerancia a diversas adversidades del medio y a patógenos.
3.- Recuperación de clones enfermos y su conservación en bancos de germoplasma: a través de técnicas de
termoterapia (tratamiento de plantas a altas temperaturas) y posterior cultivo "in vitro" de meristemas, para
obtener plantas "libres" de virus.
4- Multiplicación clonal rápida de plantas seleccionadas (micropropagación): consiste en la propagación
"in vitro" de plantas a partir de meristemas, yemas, estacas u otros tejidos.
Es necesario además adoptar procedimientos de asepsia para mantener los cultivos libres de
contaminación microbiana. Aunque estos principios son básicamente invariables en todos los laboratorios
de cultivo de tejidos vegetales, su aplicación puede presentar variaciones en magnitud y complejidad,
dependiendo de los objetivos del laboratorio; así mientras que un laboratorio de investigación puede ser
pequeño en tamaño pero muy especializado en equipos e instalaciones, uno de producción comercial
tiende a ser más grande y simple
FASES DEL CULTIVO DE CALLO IN VITRO
 Se parte de un trozo de hoja o de tallo; bien de una planta madre de maceta o de una
planta que viene de cultivo in vitro.
 El medio puede ser sólido o líquido.
 Se forma entonces una estructura de callo, de la que parten brotes, o también
preembriones, que al unirse forman una estructura similar al embrión.
 A partir de entonces se desarrolla normalmente.
OBTENCIÓN DE PLANTAS HAPLOIDES
Embriogénesis: se forman células (poliembriones).
Organogénesis: se forma una estructura de callo que puede venir o bien de tejidos de la antera
(diploide), o bien del grano de polen (haploide).
Subcultivo o replicado
 El medio nutritivo se agota y se seca.
 El material vegetal ocupa todo el tubo.
 Se produce un cambio de olor en el medio (sustancias tóxicas).
 El medio se hace líquido.
MEDIO DE CULTIVO IN VITRO
La expresión cultivo in vitro de plantas, significa cultivar plantas dentro de un frasco de vidrio en un
ambiente artificial. Esta forma de cultivar las plantas tiene dos características fundamentales: la
asepsia (ausencia de gérmenes, etc), y el control de los factores que afectan el crecimiento.
AMBIENTE QUÍMICO
• Composición del medio de cultivo
• pH
AMBIENTE FÍSICO
• temperatura
• luz y fotoperíodo
• humedad
EQUIPOS NECESARIOS PARA EL CULTIVO IN VITRO
 Autoclave
 Cámara de flujo laminar
 Medio de cultivo
 Planta
 Cámara de cultivo
INCONVENIENTES Y VENTAJAS DE LA MICROPROPAGACIÓN.
VENTAJAS:
 Permite sanear las plantas con virus, mediante el cultivo de meristemos.
 Facilita la realización de una propagación clonal masiva de las plantas idénticas en un corto tiempo.
 Permite la ampliación de la base genética de una especie.
 Las plántulas se mantienen libres de plagas y enfermedades, por ser una técnica que requiere de mucha
especie.
 Permite someter a una población de plántulas a pruebas de resistencia a factores de salinidad ,
temperaturas bajas o altas.
DESVENTAJAS
 Los materiales químicos empleados en la preparación de los medios de cultivos son costosos y poco
disponibles en nuestro medio.
 Requiere de la implementación de una infraestructura y equipos costosos, como la cámara de flujo
laminar.
 Se requiere de personal de laboratorio especializado como biólogos, químicos fisiólogos, agrónomos y
forestales.
 Linkografía
http://www.bioplaninvitro.com/micropropagacion-de-plantas/
https://es.calameo.com/read/001269180080b629ff30e
https://es.slideshare.net/janethbonilla927/cultivo-in-vitro-de-tejidos-vegetales?next_slideshow=1