Cáncer Medicina 2018

Biología Celular y Molecular
del
Prof. Cristiano Trindade, PhD

CONTENIDOS
• El material genético
• El ciclo celular
• Apoptosis
• Genética y cáncer de pulmón
• Genética y cáncer colorrectal
• Genética y cáncer de mama
• Consejo genético en cáncer hereditario
RESUMEN
ADN REPLICACION. El ADN forma copias idénticas.
ARN TRANSCRIPCION. Formación del mARN.
NUCLEO
mARN
Splicing
CITOPLASMA
Proteína TRASLACION. La lectura del mARN se realiza en el citoplasma.
La proteína es liberada al citoplasma.
El ribosoma lee en sentido 5’ 3’

Módulo I 27
REPARACION DEL ADN
Las modificaciones que puede sufrir el ADN por efecto de las mutaciones
se conocen como Lesión del ADN (ADN Damage).
Las células poseen mecanismos para reparar estas lesiones (ADN repair).
Existen distintas causas de lesión que provocan diferentes respuestas
en las células que reparan mediante distintos mecanismos de acción.
En una situación normal, si la lesión del ADN no puede ser reparada
la célula se autodestruye (Apoptosis). En caso que la lesión persista y
la célula escape a la Apoptosis, el daño celular se transmite a través de
la duplicación del ADN.
CAUSAS RESPUESTAS MECANISMOS

• Inversión de la lesión
del ADN • Fotoreactivación del ADN.
• Alteraciones (Reversal of DNA • O6MGT
químicas espontáneas damage).
en las moléculas • Base Excision Repair
• Corte de la lesión ADN
del ADN. • Nucleotide Excision
(Excision of DNA
Repair
• Alteraciones damage). • Mismach Repair
producidas por factores • Tolerancia a la lesión
ambientales. (Tolerance of DNA • Recombinational repair
damage) (HR, RJ)
Módulo I 28
ALTERACIONES QUIMICAS ESPONTANEAS EN LAS MOLECULAS DEL ADN
DEAMINACION DE BASES DEPURINACION

• Pérdida del grupo amino (NH2)
• Pérdida de bases Púricas o
en Adenina. Citosina, Guanina
y Metil-citosina. Pirimidínicas.
NH2 (Perdida)
O
A Pérdida
Adenina A 9
Conversión 5’CH2OH
o
Hypo-Xantina
4’C C 1’
NH2 (Perdida) H H
O H OH La zona sin
G 3’C C 2’ la base se
Guanina conoce como
Conversión OH H
APURINICA
Xantina
NH2(Pérdida) (AP).
O
Citosina C U
Conversión 5’CH2OH
o AP
Uracilo
4’C C 1’
NH2(Pérdida) O H H
CH3 H OH
CH3
Metil mC 3’C C 2’
Conversión T
Citosina OH H
Timina
Módulo I 29
ALTERACIONES PRODUCIDAS POR FACTORES AMBIENTALES-II
RADIACIONES UV
• La radiación ultravioleta (UV) provoca en la cadena de ADN uniones de Timinas que

se conocen con el nombre de anillos de cilobutano o dímeros de timina.
T
5’CH2OH 1 Los dímeros de Timina
o
distorsionan la
4’C C 1’ doble hélice de ADN.
H H
H OH
3’C C 2’
O H
T
O P O 5’CH2 1
o
O 4’C C 1’
H H
H OH
3’C C 2’
OH H
Módulo I 30
ALTERACIONES PRODUCIDAS POR FACTORES AMBIENTALES-III
AGENTES ALKILANTES
• Los agentes alkilantes son componentes químicos que transfieren grupos metílicos
o etílicos a las bases del ADN, por lo tanto modifican químicamente a las bases.
CH3 O
O
La metilación del Carbono 6 6
6 de la Guanina, produce la
metil-Guanina. mG
G
CH
CH3 O 3
La Metil-Guanina se A T G C T G
aparea con la Timina
6 en lugar de la Citosina.
T A C
T G A C
mG
Aparece una mutación puntual.

Módulo I 31
ALTERACIONES PRODUCIDAS POR FACTORES AMBIENTALES-III
CROSS-LINKING
Diversos elementos químicos, como mostazas nitogenadas, ácido nitroso, mitomicina y
los derivados del platino, pueden unirse al ADN provocando abultamientos e inestabilidad
de la doble hélice.
EL Cis-Platino se une a las G del ADN de formas distintas
Interstrand Intrastrand Monoadduct ADN-Protein

cross-linking cross-linking cross-linking
G G G
G
PT PT PT PT
G G G G
P
R
O
T
E
I
N
La unión Intercadenas es la más citotóxica.

Módulo I 32
MECANISMOS DE REPARACION DEL ADN
O6MGT
• La enzima O6 METIL-GUANINA-METILTRANSFERASA (O6MGT) es capaz de
transferir los grupos metilos de la METIL-GUANINA al residuo de CISTEINA del Enzima.
METIL-GUANINA • O6MGT
CH3 O
6
mG HS CH2
CH3 O GUANINA METIL-CISTEINA
6
CH3 HS CH2
La mutación se repara sin corte del ADN.

Módulo I 33
BASE EXCISION REPAIR (BER)

Base Mutada
• ADN
A T G C T G A C G A T G C T G A C G
T A C G C T G C T A C G C T G C
La mutación puede estar producida por una GLICOLASA
La enzima GLICOLASA reconoce y elimina
deaminación o depurinación.
la base mutada.
Zona AP
A T G C T G A C G A T G C T G A C G
T A C G C T G C T A C G C T G C
La enzima AP ENDONUCLEASA elimina AP Endonucleasa
La zona sin la base se conoce como zona AP y es
la ribosa y el fósforo, generando un gap.
donde se une la enzima AP ENDONUCLEASA.
ADN POLIMERASA A T G C T G A C G La ADN POLIMERASA y

+ la LIGASA, restablecen la
LIGASA T A C G A C T G C cadena original.
Módulo I 34
NUCLEOTIDE EXCISION REPAIR (NER)
Lesión del ADN 3º Acción de ENDONUCLEASAS, ERCC1 corta
en 5’ y XPG corta en 3’.
XPA RPA
XPC-R23
1º- Proteínas específicas detectan la lesión. E X
R P
XPA RPA C G
TFIIH
XPC-R23 C
1
Son eliminados de 25 a 30 nucleótidos
cercanos a la lesión.
2º- Desenrollamiento del ADN, cerca de la lesión
por el complejo proteíco TFIIH.
XPA RPA
XPC-R23 4º Polimerasas (Pol d) PCNA y LIGASAS
sintetizan una nueva cadena.
Pol d LIGS
TFIIH
PCNA
Módulo I 35
EL CICLO CELULAR
● La capacidad de una célula en transformarse en dos es una propiedad

fundamental de los organismos vivos. Con el nombre de Ciclo Celular
agrupamos el conjunto de eventos biológicos que permiten la
división celular.
● La división celular consta de cuatro fases coordinadas:
1. Crecimiento Celular.
2. Duplicación del ADN.
3. Correcta distribución del ADN a las células hijas.
4. División en dos células hijas (Cytokinesis).
● La progresión en cada una de estas fases está controlada por

un complejo conjunto proteico.
Módulo II 1
CICLO CELULAR: FASES
2n
4n
I MITOSIS:
IV G2. Intervalo 2n División celular. Cada
antes de la célula hija tiene 2n
Mitosis. Gran cromosomas.
actividad M
metabólica. G2 II G1. Intervalo antes de
Se sintetizan la fase de síntesis.
las proteínas Hay crecimiento y
para la actividad celular,
Mitosis. pero no duplicación
del ADN.
4n La célula es todavía
S 2n.
III S. Fase 2n
de Síntesis. G1
Se duplica el
ADN celular.
La célula es 4n.
Módulo II 2
CICLO CELULAR: TIEMPOS
La duración del ciclo celular varía considerablemente según el
tipo de tejido. En cultivo, el ciclo celular dura 24 horas.
4h M
G2 1h
G2 M
S 11h
8h G1
11h
S 8h G1
4h
1h
M G1 S G2
Módulo II 3
CICLO CELULAR: VARIACIONES
La finalidad del ciclo celular es la división de la célula.

Las células del organismo pueden dividirse en cuatro grupos en
función de sus capacidades de proliferación.
1. Células con alta capacidad proliferativa.
2. Células con nula capacidad proliferativa.
3. Células con capacidad proliferativa ocasional.
4. Células con capacidad proliferativa constante.
El ciclo celular presenta características propias en cada uno de

estos grupos.
Módulo II 4
1. Células con alta capacidad proliferativa.

Es característica de células que se dividen a gran velocidad, como
sucede en las primeras fases de la embriogénesis y ciertos tipos
tumorales. El ciclo celular puede durar 30 minutos. No hay fases G1 y
G2, la Mitosis (M) alterna con la fase de síntesis (S).
M 2n
4n
M 2n
2n
S
4n 4n M
2n 2n
S
4n
S 2n
Módulo II 5
2. Células con nula capacidad proliferativa
Son grupos celulares altamente diferenciados y que han perdido su

capacidad de división. Por ejemplo, “células nerviosas” y músculo
cardíaco.
G2
S
M
G1
División celular Alta diferenciación

sólo durante la celular. Se pierde la
embriogénesis. capacidad de
división.
Módulo II 6
3. Células con capacidad proliferativa ocasional
Algunos tejidos se caracterizan porque sus células abandonan la fase G1 y
entran en fase G0, que se caracteriza por tener baja actividad metabólica y
nula proliferación (quiescencia). Sin embargo, cuando las condiciones lo
requieren, entran de nuevo en G1 y continúan la división celular.
2n
M 4n
G2 2n
Cuando hay lesión o muerte

celular, factores externos
favorecen la entrada en G1.
Fibroblastos y células
S G0 epiteliales de: Hígado,
Pulmón, Páncreas,
Riñón, Próstata y Mama.
G1 Entran en fase
quiescente G0.
Módulo II 7
4. Células con capacidad proliferativa constante.
En los tejidos con alta tasa de proliferación y muerte celular, como tejido
epitelial, tracto digestivo y sangre, existen células con gran capacidad de
división, son las células madre, que reemplazan a las células diferenciadas
que desaparecen.
Diferenciación
Célula madre celular
2n
4n
M
G2
2n Célula madre
S
G1
Algunos tumores se caracterizan por presentar sólo células madre; no hay

diferenciación celular.
Módulo II 8
CONTROL DEL CICLO CELULAR
Diversos factores de crecimiento, permiten que las células en G0, entren en el ciclo
celular al final de la fase G1. Es el Restriction Point (RP). Existen, además, tres
puntos de chequeo “Checkpoints” (ChP). Al final de G1, al final de G2 y al final de
M. Los ChP aseguran que el ADN está en perfectas condiciones para seguir a
través del ciclo celular.
Al final de la Mitosis hay un checkpoint que

asegura una distribución equitativa de cromosomas
a cada célula hija.
Si el ADN no se ha Factores de crecimiento, PDGF,

replicado totalmente ChP EGF e IGF-I, inducen las células
M en G0, entran en el ciclo celular,
en la Fase S, G2 superan el Restriction Point (RP) y
el ciclo se para ChP
en G2, impidiendo siguen por la Fase S.
el inicio de la Mitosis
hasta que la El RP es, además, un punto de
Replicación
es completa. S RP chequeo frente a lesiones
externas del ADN. La p53 actúa
Lesiones en el ADN
frenan el ciclo en G2, G1 a este nivel, frena el ciclo e impide
que el ADN lesionado entre en
hasta su reparación. Fase S.
Módulo II 9
MOLÉCULAS QUE REGULAN EL CICLO CELULAR. NIVEL G2/M
Actúa la proteína cdc2 (cell division cycle mutant) conocida también como Cdk1(Cyclin-
dependent kinase). En la fase G2/M, la Cdk1 se une a una ciclina B (CyB) que se sintetiza
durante la fase S. El dímero Cdk1-CyB, permite la Mitosis. Al complejo Cdk1-CyB también
se le conoce como MPF (Maturation Promoting Factor).
Desfosforilación CyB
CyB aa14 y aa15
CyB Complejo activador
14
P
14
P Cdk1 Cdk1 de la MITOSIS
Cdk1 161 15
15 161
161
P P Al final de la Mitosis se
P P P
degrada la CyB
Se fosforilan los aa 167(THR),15(TYR) y
14 (THR) de Cdk1 CyB
G2 M
CyB Cdk1
161
Cdk1
P
Al inicio de G2, Cdk1 se une a la CyB
S
Síntesis de CiclinaB durante
CyB la fase S. Alcanza un máximo
al inicio de G2 G1
Módulo II 10
MOLÉCULAS QUE REGULAN EL CICLO CELULAR
Distintas ciclinas y Cdk actúan a lo largo de las fases G1 y S.
DURANTE G1
CyD CyD
M
Cdk2 Cdk4
G2
CyD
Cdk6
PROGRESIÓN A
TRAVÉS DE S
FASE S. AL FINAL DE G1
G1
CyE
CyA
Cdk2
Cdk2
Permiten la transición de G1 a S.
Módulo II 11
DIVISIÓN CELULAR: LA MITOSIS
En los mamíferos, durante la mitosis se producen los eventos siguientes:
• El ADN se condensa, se duplica y los cromosomas se hacen visibles al

microscopio.
• Se rompe la membrana nuclear.
• El citoesqueleto celular se reorganiza y forma el huso mitótico.

• Los cromosomas se desplazan y se unen a los filamentos del huso
mitótico.
• Los cromosomas duplicados se separan y se reparten equitativamente a
cada polo celular.
• Aparición de una nueva membrana nuclear que envuelve a los cromosomas.
Módulo II 12
DIVISIÓN CELULAR: FASES DE LA MITOSIS
Todos los eventos anteriormente citados se han

dividido en cuatro períodos de tiempo que se
conocen como:
● PROFASE
● METAFASE
● ANAFASE
● TELOFASE
Módulo II 13
PROFASE-I
CyB Acción del complejo activador de la
Cdk1 MITOSIS.
161
P Condensación del ADN.

Aparición de los cromosomas.
Cada cromosoma está duplicado: 2 cromátidas.
El centrosoma se duplica y
se deplaza hacia los polos.
Los microtúbulos se constituyen a partir de los

centrosomas para formar el huso mitótico.
Se degrada la membrana nuclear.

Módulo II 14
PROFASE-II
Los microtúbulos conectan con zonas
muy específicas de los cromosomas,
denominadas Centrosomas.
Los centrosomas son la zona de unión de las

dos cromátidas.
En los centrosomas
se unen proteínas
específicas para formar
el Kinetocoro.
Los microtúbulos Los microtúbulos están

se unen al Kinetocoro. formados por unidades
de α y β tubulina.
Módulo II 15
METAFASE
Durante la metafase los microtúbulos

se sitúan en el ecuador de la célula
formando el huso mitótico.
Módulo II 16
ANAFASE
En la anafase hay una contracción

(despolimerización) de los microtúbulos,
que separan las dos cromátidas.
Módulo II 17
TELOFASE
Contracción de la membrana Formación de membranas

citoplasmática. nucleares.
Descompactación de las cromátidas y distribución

equitativa de cromosomas en cada núcleo.
Módulo II 18
TELOFASE
Al final de la Mitosis se degrada la CyB CyB
Cdk1
161
Aparece un anillo de contracción formado por ACTINA y MIOSINA II,

que permite la separación de las dos células hijas: es la CITOKINESIS.
Módulo II 19
MUTACIONES: DEFINICIONES
TÉRMINO DEFINICIÓN
MUTACIÓN: Cambio hereditable en la secuencia genética de un

organismo.
MUTANTE: Organismo portador de una o más mutaciones en su genoma.
GENOTIPO: Información genética codificada en el genoma de un organismo.
FENOTIPO: Manifestación externa del genotipo.
MUTÁGENO: Agente que incrementa la frecuencia de mutaciones.
MUTAGÉNESIS: Procesos que conducen a las mutaciones.
Módulo II 20
LOCALIZACIÓN Y EFECTOS DE LAS MUTACIONES
5’ PROMOTOR 3’
C G G C G G C C G A T G C T G ACCATC A C GA CT
G C C G C C G G C TT A
A C G A C TGGTAG T G C T G A 5’
3’ EXÓN 1 Intrón1 EXÓN 2
EN ZONA EN ZONA EN ZONA

PROMOTORA EXÓNICA INTRÓNICA
EFECTOS EFECTOS EFECTOS

• Aumento • Sin efectos
• Mut. Missense
o • Excepto si se
Reducción • Mut. Nonsense producen en
de la áreas de
expresión • Mut. Silentes Splicing.
génica.
Módulo II 29
CANCER
Usted sabe qué es el cáncer y cómo se desarrolla en nuestro
cuerpo ?
 La palabra cáncer proviene de lo griego karkínos , lo que significa cangrejo (Fig.1), y fue
utilizada por primera vez por Hipócrates , el padre de la medicina ( Fig.2) , que vivió entre 460 y
377 aC.
 El hecho de que se ha detectado en momias egipcias demuestra que ha cometido el hombre

desde hace más de 3000 años antes de Cristo.
 En la actualidad , el cáncer es el nombre general dado a un conjunto de más de 100

enfermedades que tienen en común el crecimiento incontrolado de células (Figura 3 ) , que
tienden a invadir el tejido yEl
órganos
cáncercircundantes.
no es una enfermedad nueva
Cáncer: tipos de crecimiento celular
 La proliferación celular puede ser controlada o no controlada.
 En el crecimiento controlado, hay un aumento localizado y auto-limitante en el número de

células de los tejidos normales que forman el cuerpo, causado por estímulos fisiológicos o
patológicos. Allí, las células son normales o con modificaciones menores en forma y
función, y pueden ser el mismo o diferente del tejido donde se instalan. El efecto es
reversible después del final de los estímulos que causó.
 La neoplasia (cáncer in situ y cáncer invasivo) corresponden a un crecimiento celular

incontrolado y, en la práctica, se llama tumor maligno.
Clasificación
 Las neoplasias benignas o tumores benignos tienen su crecimiento de una

manera organizada, por lo general lenta, expansivo y presenta bordes bien
definidos. Aunque no invaden el tejido circundante, puede comprimir los órganos
y tejidos adyacentes. Lipoma (que proviene del tejido graso), el fibroma (que
se origina en el tejido muscular liso) y el adenoma (tumor benigno de las
glándulas) son ejemplos de tumores benignos.
 Las neoplasias malignas o tumores malignos muestran un mayor grado de

autonomía y son capaces de invadir los tejidos vecinos y causar metástasis y
pueden ser resistente al tratamiento, y causar la muerte del huésped.
• Benigno x Maligno
Neoplasias benignas
 Generalmente crecen lentamente y dentro de una cápsula fibrosa.
 Relativamente inocuo, aunque la ubicación podría ser peligroso.
 Los nombres que terminan en "oma" (melanoma y linfoma son excepciones).
Neoplasias malignas
 Ellos están proliferando rápidamente.
 Pueden invadir los tejidos circundantes.
 Los nombres generales contienen "carcinoma" o "sarcoma“.
Ejemplo:
Un tumor óseo benigno es un osteoma, este se maligno, es osteosarcoma.
Benigno Maligno
Formado por células bien diferenciadas (similares al tejido Formado por células anaplásico (diferentes del tejido
normal); Estructura típica de los tejidos de origen. normal); atípica; falta de diferenciación.
Crecimiento progresivo; puede retroceder; mitosis normales Crecimiento rápido; mitosis anormal y numerosos.
y raros.
Bien definido, la expansión de la masa; no es invasivo ni Masa poco delimitada, localmente invasivos; infiltrarse en
infiltrarse en los tejidos circundantes. los tejidos adyacentes.
No hay metástasis. Metástasis a menudo presente.
Cáncer in situ y cáncer invasivo
 El cáncer no invasivo o carcinoma in situ es la primera etapa en la que el cáncer

se puede clasificar (esta clasificación no se aplica a los cánceres del sistema
sanguíneo).
 La mayoría de los cánceres in situ son curables si se tratan antes de pasar a

la etapa del cáncer invasivo.
 En el cáncer invasivo (Fig.6).

 La capacidad de invasión de neoplasmas
malignos es el principal responsable de la
dificultad de la extirpación quirúrgica de la
misma.
La formación del cáncer
 Una célula típica puede tener una mutación genética, o alteraciones en el ADN de los genes.
Las células cuyo material genético ha sido alterado ahora reciben instrucciones equivocadas
por sus actividades.
 Independientemente de la exposición a agentes cancerígenos o carcinógenos, las células se

someten a procesos de mutación espontánea que no afectan el desarrollo normal.
 Los cambios pueden ocurrir en los genes específicos, llamados proto-oncogenes, que al
principio se encuentran inactivos en las células normales. Cuando se activa, los proto-
oncogenes a oncogenes, se hacen responsables por la malignidad de células normales.
Tumorigénesis
 El período de latencia varía con la intensidad del estímulo cancerígeno, con la
presencia o ausencia de agentes oncoiniciadores, oncopromotores y
oncoaceleradores, y el tipo y localización del cáncer primario.
Características de las células tumorales
 El crecimiento y la multiplicación incontrolada

 Cambios morfológicos
 Los cambios en la superficie de la célula
 Pérdida de inhibición de contacto, dando lugar a la formación de varias capas
de células
 Pérdida de afinidad celular específica
 Desarrollo de diferentes propiedades inmunológicas
 Liberación de factores de crecimiento transformado
 Alterada la transcripción de genes
 Mayor y más rápida absorción de la glucosa y el metabolismo de la misma
 Citoplasma indiferenciado
 Inmortalizando línea celular
Algunos términos
La clasificación por tipo de tejido: La clasificación por tipo de células:
 Carcinoma  Adenomatosa
* Células epiteliales Ductal o glandular
* 90% de todos los tumores
* Los derivados del ectodermo (la  Escamosas
mayoría) o endodermo (algunos). células planas
 Sarcoma  Mielógena
* Tejido conectivo células de la sangre
* 2% de los tumores
* Derivado de mesodermo.  Linfoide
Los linfocitos o macrófagos
 Leucemia y linfomas
* Circulatorio o linfático
* 8% de los tumores
* Derivado de mesodermo
Etapas de la carcinogénesis X tasa del processo
Célula normal: 10-6 gene/célula

± 6 mutaciones específicas/célula Cáncer
(probabilidad 1: 1022)
Aceleracion del proceso
Agentes causantes del cáncer (diferentes factores,

genéticos y/o ambientales)
Cáncer = enfermedad multifactorial

Cancer distribution
Aggregation 15%;
5% Hereditary
Sporadic 80 %
Agentes carcinogénicos
 Químicos:
 Drogas, tabaco, alcohol, pesticidas, colorantes, herbicidas, etc.
 Físicos:
 Rayo X, rayo , U.V.
Ambiente
 Biológicos:
 Vírus: HPV, HIV, etc.
 Bactérias: Helicobacter pilori
Genes involucrados
1. (proto)oncogenes
2. supressores de tumor
• Gatekeepers (genes protetores)
• Caretakers (genes de manutención)
Genética
 Proto-oncogenes
genes que actúan positivamente en la regulación de la
división celular
The activities and cellular locations of the products of the main
classes of known proto-oncogenes
Ras proteins PDGF (sis)

PDGF receptor (H-ras) EGF
EGF receptor (erbB) (N-ras) Src protein kinase M-CSF
M-CSF receptor (fms) (K-ras) (src)
growth factors
growth factor receptors GTP-binding membrane/cytoskeleton-

acting via tyrosine-specific proteins associated tyrosine-specific
protein kinase activity (myc)
protein kinases (fos)
(jun)
thyroid hormone
(fes) receptor (erbA) (raf)
nuclear proteins
cytoplasmic tyrosine-specific steroid-type growth serine/threonine-

protein kinases factor receptors specific
protein kinases
¿Cómo las células saben cuando
dividir y cuándo parar de dividir?
Puntos de Control en el Ciclo Celular
Proto-oncogenes
Los productos de proto-oncogenes en la célula
Proto-oncogenes
Oncogenes
* La mutación activa los proto-oncogenes en el desarrollo de
tumores
Oncogenes
 Mutaciones los hacen constitutivamente activos
 Normalmente son altamente regulados

 BRAF = Val a Glu – La glutamato hace como si fuera un
grupo fosfato y la quinasa se activa permanentemente.
 Crecimiento desordenado
 Aumento de función
 Mutación dominante
 Mutación somática
Oncogenes
Cromosoma Filadelfia
Peter Nowell (Izq) y David

Hungerford (Der) en 1960.
Leucemia mielóide crónica
Cromosoma Filadelfia: 90-95% dos casos

Por una translocación
cromosómica, el gen abl
entra sobre el control del
potente promotor bcr. Esto
hace que se produzca un
exceso del producto del gen
abl provocando proliferación
celular.
Dos genes se fucionan : (1) BCR-ABL en el cromosoma derivado 22q– y (2) ABL-BCR en el
cromosoma 9q+. El gen fusión BCR-ABL muestra aumento en su actividad tirosina
• Proteína quimérica: amino-terminal BCR e carboxi-terminal ABL;
tirosina cinase.
Linfoma de Burkitt
Este tumor infantil, generalmente en África se asocia con infecciones con malaria y el virus
Epstein-Barr.
80% t(8;14)(q24:q32); 15% t(8;22)(q24;q11): ativación do oncogene

Myc por el promotor de imunoglobulinas
Linfoma de Burkitt (linfoma de cel B da mandíbula)
Ejemplos
 Genes supressores de tumor =>
genes que previnem la división y diferenciación celular
 Previnem la progresión del ciclo celular (“arrastrar” la fase G1-S).

 Bloque la diferenciación celular.
 Induze la senescência o la muerte celular (apoptosis).
 Mantiene baja las tasas de mutación.
 Mantiene la estabilidad del genoma..
 Genes supressores de tumor =>
genes que previnem la división y diferenciación celular
Genes supressores
• GATEKEEPERS: • CARETAKERS:
genes de genes de
proteción manutención
• Genes supressores tumorales
(especialmente los gatekeepers)
Inactivados: pérdida de control

sobre la progresión del ciclo celular
• Rb y p16 = supresores = inactivados
• Cdk4 y ciclin D1 = oncogenes= activados
En los 90s, se descubrió que “todos” los virus de ADN tumorales

codifican por una proteína que inactiva a ambos p53 y Rb.
Retinoblastoma
 Inactivación de los genes supresores de tumores: hipótesis
de los dos eventos (Knudson, 1971).
leucocoria en ojos
Retinoblastoma
• 1/20.000 nascimentos
• Leucocoria
• Pupilas esbranquiçadas
• 60% - casos unilateral e tardio (esporádicos)
• 40% - casos bilateral e precoce (hereditários)
• 90% de todos los casos son diagnosticados hasta 3 años de edad
• Asociado a predisposición a otros tipos de cáncer
• Proteína pRB (gene RB)
• Hipótese de los dos eventos para
genes de supresión tumoral:
1a mutación 2a mutación
 Hereditários X Esporádicos:
• Hereditários:
1º evento mutacional: célula germinativa
2º evento mutacional: célula somática da
retina
• Esporádicos:
1º e 2º eventos: célula somática da retina
• 100% de los casos de retinoblastoma bilateral (edad de início
média de 8 meses) son hereditários, así como 10-15% dos
unilaterais (edad de início média de 2 años).
Gene RB x outros tumores
• Linfomas
• leucemias,
• mama,
• anogenital,
• sarcomas,
• hepatocarcinoma,
• melanoma
• nasofaringeal . . .
Mutaciones en los supresores tumorales
 Pierda de función
 Mutación recesiva (2 alelos afetados)
 Mutaciones somaticas y germinativas
 Tumores esporadicos y hereditarios

Inactivación de supresores
tumorales
 Interación con proteínas virales:
SV40, E6, E7
 Interación con proteínas celulares:

mdm-2 (oncogene)
 Mutación en la estrutura del gene:

mutación de punto
deleción
 Pierda de heterosigose
 Metilación del ADN

Inactivación por vírus
• Papilomavírus — carcinoma cervical + interacción con proteínas pRB e
p53
 Las proteínas E6 y E7 del papiloma virus son un ejemplo perfecto.
* E6 inactiva p53
* E7 daña la señalización por pRB.
Gen TP53
"Guardián del genoma"
Acción de la proteína p53
Daño ADN
Daño Maior
ADN danificado
p53 mutante p53 selvagem Apoptosis

Daño Menor
Cáncer
Parada do Ciclo
Reparo do ADN
Reentrada en el Ciclo
Gene TP53 x tumores
• Síndrome de Li-Fraumeni
• ovário
• mama
• bexiga
•
•
•
cervical
esofagiano
colorretal
De 50%
• pele
• carcinomas pulmonares
• glioblastoma
• sarcoma osteogênico
• carcinoma hepatocelular
Inactivación por perdida de heterocigosidad
• Perdida del cromosoma con el alelo normal de uno

dado ST
• Común en neoplasias avanzadas
• Associado à instabilidad genética
• Medida a través de polimorfismos de microsatélites
acerca del gene ST
Acción de los ST + oncogenes
Supresor tumoral cambiado
(especialmente gatekeeper)
Proto-oncogenes Proliferación celular

activados descontrolada
Fenótipo transformado, malignização

Acción de los STs do tipo
caretakers
 Función: reparación de daños en ADN
 Resultado: instabilidad genética (o genômica) y

celular
 Genes de reparación. Ej. MMR, NER, VER, HR
 Genes que controlan procesos como recombinación

mitótica. Ej. BRCA1, ATM
 Mantienen alteraciones genéticas en niveles

mínimos
• Marie Claire King (1990) - mapeo del BRCA1 (BReast CAncer 1);
• Wooster et al (1995) - mapeo del BRCA 2 (BReast CAncer 2);

Marcadores genéticos CA:
• BRCA1 (mama, colo, ovário, próstata)
• BRCA2 (mama, colo, ovário, próstata)
• p53 (mama, ossos, leucemia, cérebro)
• APC (colorretal)
• RET (medular da tireóide)
• VHL (Von Hipple Lindau)
• NF1 (Neurofibrosarcoma)
• RB1 (Retinoblastoma)
• BLM (colo, esôfago, língua, leucemia e tumor de Wilms)

CÁNCER DE PULMÓN
• Generalidades.
• Genes y proteínas relacionados con el cáncer de

pulmón.
• Mecanismos de acción de los genes y proteínas

relacionados con el cáncer de pulmón.
1
GENERALIDADES DEL CÁNCER DE PULMÓN
Histológica y clínicamente el cáncer de pulmón se

divide en SCLC (cáncer de célula pequeña) y NSCLC
(cáncer de célula no pequeña).
• SCLC. Características
neuroendocrinas.
• NSCLC. Incluye:
Adenocarcinoma.
Carcinoma escamoso.
Carcinoma células grandes.
2
PRINCIPALES ALTERACIONES MOLECULARES
RELACIONADAS CON EL CÁNCER DE PULMÓN
GENES SUPRESORES GENES RELACIONADOS

TUMORALES (TSG) CON ACTIVACIÓN DE
SEÑALES
p53
p16INK4a-CiclinaD1-CDK4-RB RAS KIT
FHIT EGFR GRP
RASSF1A HER2/neu MYC
ALTERACIONES DE LA INESTABILIDAD
METILACIÓN GENÓMICA (MSI)
p16INK4a
CROMOSOMAS
DAPK
3p, 5q, 9p, 11q, 13q, 17p,
GSTP1
18q y 22q
MGMT
3
GENERALIDADES DEL GEN p53
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 17p3.
GEN: Consta de 11 exones.
PROTEÍNA: Consta de 393 aminoácidos.

 Posee 3 dominios:
* uno, en extremo inicial N, activador de la transcripción;
* uno, central para unirse al ADN,
* y uno, en extremo C terminal de oligomerización.
 p53 es funcional cuando está en forma tetramérica.
MUTACIONES: En el cáncer de pulmón, la mayor parte

de las mutaciones están localizadas en los exones 5 y 8.
EFECTOS DEL TABACO: Produce transversiones G-T y mutaciones en

codones 157, 248 y 273.
4
FRECUENCIA MUTACIONES p53
SCLC
75-100%
NSCLC
47%
Adenocarcinomas - 39%
Carcinomas escamosos - 51%
Carcinomas células grandes - 54%
Tammemagi MC et al. 1999. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 8:625-634 5

CARACTERÍSTICAS DE LAS MUTACIONES DE p53
• 70-80% son mutaciones missense que prolongan

la vida media de la proteína y pueden ser
detectadas por inmunohistoquímica.
• 20-30% son mutaciones nonsense, delecciones,

inserciones o errores de splicing y NO son
detectables por inmunohistoquímica.
• Mutaciones de p53 en adenocarcinomas se

asocian a un mal pronóstico.
Mitsudomi et al 2000. Clin Cancer Res 6:4055-4063. 6

LA PROTEÍNA p53
FORMA LINEAL
Extremo amino-terminal Parte Central Extremo Carboxiterminal
N C
Responsable de activar Zona de unión al ADN. Responsable de la

la transcripción. oligomerización de la proteína.
FORMA GLOBULAR
La forma activa de p53
es globular y
tetramérica
7
CÓMO ACTÚA p53
1º 2º
p53
M
p21 3º
G2
G1
CyE CyD
5º XPA RPA
Cdk2 Cdk4
E XPC-R23 X p21
R
C
P
G
4º
C TFIIH
1
S
1º Una lesión en el ADN estimula la síntesis de p53, su tetramerización y su vida media en el
citoplasma celular.
2º p53 se une al ADN para estimular la síntesis de p21.
3º p21 se une a los complejos CyE/Cdk2 y CyD/Cdk4, parando el ciclo celular en G1.
4º Durante la parada del ciclo celular actúan los enzimas que repararán la lesión del ADN.
5º Una vez reparada la lesión, continúan las fases de síntesis, G2 y mitosis.

8
LA PROTEÍNA p53 MUTADA
FORMA LINEAL
Extremo amino-terminal Parte Central Extremo Carboxiterminal
N 1º C
157 245 /248
273 282
Responsable de la
Responsable de activar Zona de unión al ADN oligomerización de la proteína
la transcripción
2º
FORMA GLOBULAR
p53 MUTADA
1º Las mutaciones más frecuentes aparecen en la zona de la proteína que se une al

ADN.
2º Las mutaciones cambian la estructura de la proteína.
9
CÓMO ACTÚA p53 MUTADA
1º 2º
M
p21 3º
G2
6º G1
CyE CyD
Cdk2 Cdk4
4º
5º
S
1º Una lesión en el ADN estimula la síntesis de 3º La ausencia de p21 impide la parada del ciclo celular.
p53. Si p53 está mutada hay dificultades en la
4ºNo hay reparación de la lesión del ADN.
tetramerización y la vida media de la proteína
en el citoplasma celular es muy corta. 5º Los errores se acumulan y propagan en las fases
de síntesis, G2 y Mitosis.
2º p53 mutada no puede unirse al ADN y, por lo
tanto, no hay síntesis de p21. 6ºLas mutaciones pueden conducir a la carcinogénesis.
10
p53 COMO TERAPIA GÉNICA
En tumores accesibles La finalidad es que p53
por punción active la apoptosis tumoral
Se inyecta p53 normal Con reducción total

o parcial del tumor
11
GENERALIDADES DEL COMPLEJO
p16INK4a –CiclinaD1-CDK4-RB
El complejo p16INK4a –CiclinaD1-CDK4-RB regula la transición de G1
a S en el ciclo celular.
p16INK4a
El gen MTS1 da lugar a un mARN llamado INK4a, que codifica para
una proteína denominada p16INK4a .
GEN MTS1
mARN INK4a
Proteína p16 INK4a
Proteína p16INK4a inhibe el complejo ciclina D1-CDK4

12
El gen Rb
El gen Rb (Retinoblastoma) consta de 27 exones y codifica para una
proteína de 928 aminoácidos.
La proteína Rb se expresa en todas las células del organismo, y cuando

está hipofosforilada se une a las proteínas E2F. El complejo Rb-E2F
bloquea el ciclo celular en las fases de G1 a S.
Rb
E2F
Rb
E2F 13
El complejo proteico Ciclina D1-CDK4 hiperfosforila a la proteína Rb.
P
P Rb P CyD
Cdk4
E2F
Cuando Rb está hiperfosforilada, Rb se libera de E2F, se desbloquea el
ciclo celular y E2F activa la transcripción de genes.
G2 M
P
S P Rb P
G1
E2F 14
p16INK4a –Ciclina D1-CDK4-RB
La proteína p16 inhibe la acción del complejo Ciclina D1-CDK4, por lo
que no hay hiperfosforilización de Rb.
P
p16 INK4a
P Rb P CyD
Cdk4
E2F
Si p16 está inactivado (por mutación, delección o hipermetilación) no hay
inhibición del complejo Ciclina D1-CDK4 y sí fosforilación continua de Rb, con
la consecuente progresión del ciclo Celular y transcripción de genes.
G2 M
P
S CyD
P Rb P
G1
Cdk4
E2F 15
EL COMPLEJO p16INK4a –Ciclina D1-CDK4-RB y
CÁNCER DE PULMÓN
• En NSCLC la hipermetilación en la zona promotora de p16 se ha

observado en un 30-70%.
• La inactivación de RB es más frecuente en SCLC (90%) que en

NSCLC (15-30%).
• La inactivación simultánea de p16 y Rb no es frecuente en el

cáncer de pulmón.
16
GENERALIDADES DEL GEN K-RAS
EN CÁNCER DE PULMÓN
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 12p12.1.

PROTEÍNA: Consta de 189 aminoácidos. Se une
a la cara interna de la membrana
citoplásmatica por el aa 186 y al
GTP por los aa 10-17, 57-61 y 116-119.
MUTACIONES: Localizadas en los codones 12, 13 y 61. En el cáncer de

pulmón la frecuencia de mutaciones es del 15-20%.
• Los adenocarcinomas representan 20-30%.
• El 70% de las mutaciones son transversiones G-T.
• Las más frecuentes en el codon 12, el wt (wild type) es GGT
(Glicina) y las mutaciones pueden ser TGT (Cisteína) o GTT
(Valina). 17
CÓMO ACTÚA Ras NORMAL
1º Ras debe anclarse en la cara 2º Si NO hay estímulo externo,
interna de la membrana celular Ras está inactivo
Farnesilo
Ras P P
Ras
GDP
La proteína Ras (p21) consta de 121 aa.

Como miembro de la superfamilia de
Los tres últimos aa de Ras son eliminados
proteínas G, Ras se une
por la enzima Farnesil Transferasa (FT).
con gran afinidad a GDP o GTP.
La FT incorpora un grupo Farnesilo,
que permite el anclaje de Ras a la cara Cuando Ras está unido a GDP, está
interna de la membrana celular. en forma inactiva.
18
CÓMO SE ACTIVA Ras NORMAL
1º GF
3º
P P 2º 4º
P P
SOS
P P P
P P Grb2 P PP
Ras GTP
Ras GTP
1º Un factor de crecimiento (GF) se une a un receptor de membrana y activa su

fosforilación.
2º La proteína Grb2 actúa como puente entre el GF fosforilado y la proteína SOS

que fosforila Ras.
3º La proteína SOS es una Guanine nucleotide Exchange Factor (GEF), se une a

Grb2 y este complejo permite la fosforilación del GDP del Ras, en GTP.
4º El complejo Ras-GTP es la forma activa de Ras.

19
p16INK4a –Ciclina D1-CDK4-RB
La proteína p16 inhibe la acción del complejo Ciclina D1-CDK4, por lo que no hay
hiperfosforilización de Rb.
P
p16 INK4a
P Rb P CyD
Cdk4
E2F
Si p16 está inactivado (por mutación, delección o hipermetilación) no hay inhibición
del complejo Ciclina D1-CDK4 y sí fosforilación continua de Rb, con la consecuente
progresión del ciclo Celular y transcripción de genes.
G2 M
P
S CyD
P Rb P
G1
Cdk4
E2F 15
CÓMO ACTÚA Ras NORMAL ACTIVADO
1º 2º 3º 4º
P PP ER
Ras GTP MEK ERK K
Raf
5º
1º Ras activado se une a la proteína Raf-kinasa.
2º El complejo Ras-GTP-Raf, activa la proteína MEK (MAP-kinasa/ERK Kinasa).
3º La proteína MEK activa a proteínas de la familia ERK (Extracellular

signal-Regulated Kinase).
4º Las proteínas ERK se unen al ADN y actúan como factores de transcripción.
5º Los factores de transcripción activan la DIVISIÓN CELULAR.

20
CÓMO SE REGULA Ras NORMAL ACTIVADO
GAP
P PP P P
Ras GTP Ras GDP MEK ERK ER
Raf K
Raf
1º 2º
AUSENCIA DE PROLIFERACIÓN CELULAR
1º La actividad de Ras es abolida por la enzima GAP (GTPase Activating Proteins)

que produce la hidrólisis de GTP a GDP.
2º El complejo Ras-GDP, es inactivo, no permite la unión a Raf y, en consecuencia,

no hay activación de MEK, ERK ni actividad mitótica.
21
CÓMO ACTÚA Ras MUTADO
1º 2º GAP 3º
P PP ER
P PP MEK ERK K
Ras GTP
Ras GTP
Raf
Raf
4º
1º Las mutaciones de Ras en el codón 12 son suficientes para cambiar la estructura

de la proteína.
2º Ras mutado impide la actuación de GAP.
3º Al no actuar GAP, Ras está permanentemente en forma activa.
4º Hay proliferación celular constante.
22
OTROS GENES IMPLICADOS EN EL CÁNCER DE PULMÓN
• EGFR
• Sobre-expresado en NSCLC (principalmente en carcinoma escamoso)
Es raro en SCLC.
• HER2/neu
• Se expresa en un 30% en NSCLC (adenocarcinoma) y se asocia a una
pobre supervivencia.
RECEPTOR -KIT
• Actúa como factor autocrino en el desarrollo del SCLC.
• GASTRIN-RELEASING-PEPTIDE (GRP)
• El gen GRP se expresa en un 20-60% en SCLC y es poco frecuente
en NSCLC .
23
OTROS GENES IMPLICADOS EN EL CÁNCER DE PULMÓN
• FAMILIA MYC
La familia MYC consta de 3 miembros: MYC, MYCN y MYCL.
• Amplificaciones de MYCN y MYCL son características de

SCLC. MYC se expresa en SCLC y en NSCLC, aunque de
forma desigual .
• MYC en NSCLC: 8%
• MYC en SCLC: 18%
24
CÁNCER COLORRECTAL
● Generalidades.
● Genes y proteínas relacionados con el cáncer
colorrectal.
● Mecanismos de acción de los genes y proteínas
relacionados con el cáncer colorrectal.
Módulo V 1
GENERALIDADES DEL CÁNCER COLORRECTAL
Entre el 5 y el 10% de los cánceres colorrectales son hereditarios; hay dos

formas de presentación:
1- Poliposis Familiar Adenomatosa (FAP).
Presenta numerosos Adenomas y mutaciones germinativas en el gen APC.
2- Cáncer Hereditario no Polipósico (HNPCC o Síndrome de Lynch).
Presenta mutaciones germinales en los genes que intervienen en la

reparación de ADN, principalmente en hMSH2 en cromosoma 2p21 y
hMSH1 en cromosoma 3p21.
Módulo V 2
ALTERACIONES MOLECULARES RELACIONADAS CON
EL CÁNCER COLORRECTAL
PÉRDIDAS DE
GENES
HETEROZIGOCIDAD
APC (LOH)
p53 CROMOSOMAS
K-ras
DCC 50%
hMSH2 17 18
hMLH1
hPMS1 25%
hPMS2 1q, 4p, 5q, 6p, 6q, 8p, 18p, 22q
GTBP (hMSH6)
hMSH3 (DUG)
Módulo V 3
GENERALIDADES DEL GEN APC
(Adenomatous Polyposis Coli, APC)
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 5q21.
PROTEÍNA: Formada por 2843 aminoácidos. Su función

no está del todo definida, pero se sugiere que regula la unión de la
b-catenina con las proteínas del citoesqueleto.
MUTACIONES: Se han descrito mutaciones en el cáncer colorrectal

que afectan a los aminoácidos siguientes:
890, 906, 911, 1027, 1307, 1313, 1317 y 1422.
Módulo V 4
CARACTERÍSTICAS MOLECULARES DEL APC
GEN: CONSTA DE 15 EXONES
CODIFICA PARA UNA PROTEÍNA DE 2843 AA

171 722 817 890 911 1176 1307 1317 1422 2738
AA1 AA2843
N C
414 784 880 906 1027 1184 1313 1348 1508 2621 2839
Se han detectado mutaciones en el cáncer colorrectal que afectan

a los aminoácidos indicados.
Módulo V 5
CARACTERÍSTICAS DE LAS MUTACIONES-APC
Nº AA AA WT* AA Mutado Localización
171 Ser Ile FAP
414 Arg Cys FAP
722 Ser Gly FAP
784 Ser Thr FAP
880 Ile Thr C Colorrectal, Sind Turcot
890 Val Ile C Colorrectal, Sind Turcot
906 Ser Tyr C Colorrectal
911 Glu Gly FAP, C Colorrectal
1027 Tyr Cys C Colorrectal
1176 Pro Leu FAP
1184 Ala Pro FAP
1307 Ile Lys Población Ashkenazi
1313 Thr Ala C Colorrectal
1317 Glu Glu C Colorrectal
1348 Arg Trp FAP
1422 Asp His C Colorrectal
1508 Ala Val C Colorrectal, Sind Turcot
2621 Ser Cys FAP
2738 Ile Thr FAP
2839 Leu Ph FAP
e
*WT: Wild type.
Módulo V 6
PROBABLE MECANISMO DE ACCIÓN DE LA PROTEÍNA APC
Filamentos de
caderinas cateninas actina
APC APC
APC APC
1º Las caderinas y las cateninas intervienen en las uniones inter-celulares.
2º Las caderinas a b y g se unen entre sí para formar uniones con los

microfilamentos de actina y con las caderinas.
3º La APC se une a la b catenina. Mutaciones que afecten a APC pueden alterar las
uniones con el citoesqueleto (actina) y las cateninas de unión.
4º El gen APC actúa como un gen tumoral supresor.
Módulo V 7
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 17p3, con 11 exones.
PROTEÍNA: Consta de 393 aminoácidos y posee 3 dominios: uno

en extremo inicial N, activador de la Transcripción; uno central para
unirse al ADN, y uno en extremo C terminal de oligomerización .
p53 es funcional cuando está en forma tetramérica.
MUTACIONES: La mayor parte de las mutaciones

están localizadas en los exones 4, 8 y “hotspots”, en los
codones 175, 245, 248 273 y 282.
Módulo V 8
PROTEÍNA: Consta de 189 aminoácidos. Se une a la cara interna de

la membrana citoplásmatica por el aa 186 y al GTP por los aa 10-17,
57-61 y 116-119.
MUTACIONES: Localizadas en los codones 12, 13 y 61.

En el Cáncer Colorrectal los codones 12 y 13 están mutados en el 40% de
los casos.
Módulo V 13
GENERALIDADES DEL GEN DCC
(Deleted in Colorectal Carcinoma, DCC)
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 18q21.3.

GEN: Contiene 27 exones.
PROTEÍNA: La proteína DCC normal consta de 1447 aa.
Es una proteína de membrana celular con dominios extra-celular (aa 1 al
1097), transmembrana (aa 1098 al 1122) y citoplasmático (aa 1123 al
1447). En condiciones normales el dominio extra-celular es un receptor
para netrin-1, que es una proteína que orienta la dirección de los axones.
ALTERACIONES: El DCC se comporta como un gen supresor

tumoral. En el CCR es característica la pérdida de heterozigosidad
en el cromosoma 18q.
Módulo V 19
CARACTERÍSTICAS MOLECULARES DE DCC
La proteína DCC consta de 1447 aminoácidos, distribuidos de la
siguiente forma:
En condiciones normales DCC
es un receptor de netrin-1.
Del aa 1 al 1097 son extra-celular.
Del aa 1098 al 1122 son trans-membrana.
Del aa 1123 al 1447 son citoplasmáticos.
La unión con netrin-1 bloquea la apoptosis y dirige la orientación de los axones.
Módulo V 20
CÁNCER COLORRECTAL Y DCC
En el cáncer colorrectal se pierden los aminoácidos 25 al 1447.
En individuos polimórficos las pérdidas cromosómicas (LOH) del 18q

en la zona donde está el gen que codifica para DCC se asocian a un
mal pronóstico en el cáncer colorrectal.
Módulo V 21
PÉRDIDA DE HETEROZIGOZIDAD Y DCC
Marcadores moleculares Las células tumorales

en el cromosoma 18q. pierden una secuencia
en uno de los cromosomas.
Las secuencias cromosómicas

pueden ser amplificadas por
PCR y detectadas en geles
de agarosa.
Como son polimórficas, En las células tumorales sólo se

las secuencias tienen amplifica la secuencia en uno de
distinto número de bases los cromosomas; en el otro se ha
amplificadas y emigran perdido (deleccionado).
LOH
a distintos niveles.
Módulo V 22
GENERALIDADES DEL GEN hMLH1
(human MutantL Homolog, hMLH1)
GEN: Consta de 19 Exones.
PROTEÍNA: Está formada por 756 aminoácidos y se localiza en el

núcleo celular, donde actúa como proteína reparadora de las
lesiones del ADN.
ALTERACIONES: Mutaciones en este gen se asocian a tumores

hereditarios como:
• Cáncer de colon no polipósico hereditario (Síndrome de Lynch),
• Síndrome de Turcot,
• Síndrome de Muir-Torre,
• Tumores gastrointestinales y
• Tumores urogenitales.
Módulo V 23
CARACTERÍSTICAS MOLECULARES DEL GEN hMLH1
GEN: CONSTA DE 19 EXONES
CON VARIACIONES EN LOS SIGUIENTES EXONES:
Exón Exón Exón Exón Exón Exón Exón Exón Exón Exón
2 4 6 7 8 12 13 16 17 19
CODIFICA PARA UNA PROTEÍNA DE 756 AMINOÁCIDOS.

LAS VARIACIONES EN LOS EXONES AFECTAN A
LOS AA SIGUIENTES:
67 322 487 596

AA1 AA756
N C
62 107 117 226 406 497 616 618 659 714 716
Módulo V 24
CARACTERÍSTICAS DE LAS VARIACIONES DEL
GEN–hMLH1
EXON CAMBIO
Nº AA.AAWT*- MUT
NUCLEÓTIDO
2 184. C-T 62. Gln-Stop
2 199. G-A 67. Gly-Arg
4 320. T-G 107. Ile-Arg
4 350. C-T 117. Thr-Met
6 965. G-A 322. Gly-Asp
7 1216. C-T 406. Arg-Stop
8 676. C-T 226. Arg-Stop
12 1786-ATT Delet 596. Delet Asp
13 1459. C-T 487. Arg-Stop
13 1490. C Insert 497. Frameshif
16 1852. AA.GG 618. Lys-Ala
16 1846. AAG Dele 616. Delet Lys
16 3,5 kilobase delet 3,5. Delet kb
17 1975. C-T 659. Arg-Stop
19 2141. G-A 714. Trp-Stop
19 2146. G-A 716. Val-Met
*WT: Wild type.
Módulo V 25
ALTERACIONES CROMOSÓMICAS Y
CÁNCER COLORRECTAL
• Existe una gran variabilidad de secuencias genéticas entre los individuos y muchas de
estas variaciones se localizan en zonas no codificantes del AND (zonas intrónicas).
Estas regiones no codificantes se utilizan para crear finger-prints genéticos.
• Estas regiones son unidades repetitivas de ADN, que se clasifican en función de su
tamaño de repetición.
TIPOS DE ADN FINGER-PRINTS

• SATÉLITES
• MINISATÉLITES
• MICROSATÉLITES
Módulo V 26
CARACTERÍSTICAS DE LOS FINGER-PRINTS
TAMAÑO TAMAÑO EN KB
TIPO CARACTERÍSTICAS
EN PB* (Cromosoma)
Se localiza en
Satélite 5-200 Megabases heterocromatina y
centrómeros.
Se localiza a lo largo de
Minisatélites 9-70 1-20 kb todo el genoma y de forma
especial en los telómeros.
Son monounidades de
Microsatélite 1-4 menos de 1kb Adeninas o dinucleótidos
de CA/CG a lo largo del
s genoma.
*Pares de bases
Módulo V 27
INESTABILIDAD DE MICROSATÉLITES DEL GEN hMLH1
• El gen hMLH1 tiene la función de codificar para una proteína (hMLH1) que reconoce y
repara las lesiones del ADN.
• En el cáncer de colon no polipósico hereditario es característica la presencia de

alteraciones en el ADN del gen hMLH1, que se conocen como Inestabilidad de
Microsatélites (Microsatellite Instability, MSI).
•Los microsatélites son secuencias altamente polimórficas entre la población sana.
Alelo 1 Alelo 2
CACACACACACACACACACA CACACACACACA
Secuencia CA repetida 10 veces. Secuencia CA repetida 6 veces.
Previa amplificación por

PCR. Las secuencias
(CA)n en un gel migran
a distintos niveles.
Módulo V 28
INESTABILIDAD DE MICROSATÉLITES DEL GEN hMLH1
Células normales que Las células tumorales

son heterozigotas para pierden CA en uno de los
el microsatélite (CA)n alelos.
en el cromosoma 18q.
Las secuencias de microsatélites

pueden ser amplificadas por
PCR y detectadas en geles
de agarosa.
En las células tumorales que han

Como son polimórficas, perdido secuencias CA, emigran
las secuencias tienen a distinto nivel.
distinto número de bases
amplificadas y emigran
a distintos niveles. MSI
Módulo V 29
CÁNCER DE MAMA
● Genes y Proteínas relacionados con el cáncer de mama.
● Mecanismos de acción de los Genes y Proteínas

relacionados con el cáncer de mama.
Módulo IV 1
GENES, PROTEÍNAS Y HORMONAS RELACIONADAS
CON EL CÁNCER DE MAMA
GEN PROTEÍNA
K-ras p21
p53 p21
ERBB2 ERBB2
BRCA1 BRCA1
BRCA2 BRCA2
GEN HORMONA
ESTEROIDEA
Estradiol Estradiol
Módulo IV 2
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 12p12.1

● Se une a la cara interna de la membrana citoplasmática por el aa 186 y
al GTP por los aa 10-17, 57-61 y 116-119.
MUTACIONES: Localizadas en los codones 12, 13 y 61.
● En el cáncer de mama las mutaciones de k-Ras son muy Bajas

(<10%).
Módulo IV 3
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 17p3, con 11 exones.

● Posee 3 dominios: uno en extremo inicial N, activador de
la transcripción; uno central para unirse al ADN y uno
en extremo C terminal de oligomerización.
● p53 es funcional cuando está en forma tetramérica.
MUTACIONES: 20-25% en cáncer de mama.
● El 90% de las mutaciones están localizadas entre los exones 5 al 9.
● Las mutaciones más frecuentes están en los codones 175, 248 y

273.
● Las mutaciones relacionadas con peor pronóstico están en los

codones 165-185 y 235-252.
Módulo IV 9
GENERALIDADES DEL ERBB2 (HER2 /NEU)
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 17q 21.1.
PROTEÍNA: Consta de 1.225 aminoácidos.

● Presenta tres dominios:
* uno extracelular para unión a factores de crecimiento;
* uno transmembrana y
* uno citoplasmático con actividad tirosin-kinasa.
VARIACIONES: El gen ERBB2 está amplificado y sobre expresado en un 20-

25% en el cáncer de mama.
● Los tumores con sobreexpresión de ERBB2 suelen Asociarse a receptores

de estrógenos negativos y son del tipo ductal invasivo.
● Niveles altos de ERBB2 se relacionan con mal pronóstico.
● ERBB2 está permanentemente activado cuando hay una delección de la

zona extracelular de la proteína.
Módulo IV 14
CÓMO ACTÚA ERBB2 NORMAL
1º EGF
2º
3º
4º
P P
MEK ERK
1º ERBB2 presenta tres dominios: extracelular, transmembrana y citoplasmático.

2º Diversos ligandos, como EGF o TGFa, se pueden unir a ERBB2.
3º La unión del ligando con ERBB2 supone la fosforilación de la parte citoplasmática
de la proteína y en consecuencia su activación.
4º La activación de ERBB2 activa la vía de la MAPkinasa y, por lo tanto, la proliferación
celular.
CÓMO ACTÚA ERBB2 AMPLIFICADO
EGF EGF EGF
4º
P P P P P P
MEK ERK
En condiciones anormales, ERBB2 puede estar amplificado. Ello supone que con poco
ligando habrá fosforilación y activación de MAP-Kinasa, con proliferación celular
constante.
Módulo IV 16
CÓMO ACTÚA ERBB2 DELECCIONADO
P P
MEK ERK
En condiciones anormales la parte extracelular de la proteína puede estar

deleccionada.
Este fenómemo supone que ERBB2 permanece fosforilado constantemente,
activando MAPKinasa y la proliferación celular.
Módulo IV 17
GENERALIDADES BRCA1 (BReast CAncer)
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 17q 21.

● El exón 11 representa el 50% de toda la secuencia Codificante
(5592 nucleótidos).
PROTEÍNA: Está formada por 1863 aa y con dominios de unión a ADN,

ARN, p53, BRCA2 y zinc.
● Presenta funciones diversas: reparación de ADN, control ciclo
celular y activación transcripción (gen supresor tumoral).
VARIACIONES: Las mutaciones del gen BRCA1 están asociadas al

cáncer de mama hereditario (15-20%).
● Las mutaciones pueden estar dispersas por todo el genoma. Las

más significativas son las localizadas en las posiciones 185 (delección de
AG), 5382 (inserción de C) y en aa 61 y 64.
Módulo IV 18
BRCA1
24 EXONES
POSICIÓN 185. DELECCIÓN AG POSICIÓN 5382. INSERCIÓN C
1 PROTEÍNA 1863 aa
N RFM p53 NSL BRCA2 ARN C

Pol
61 64 Ph.S
 El gen de BRCA1 consta de 24 exones. Se han detectado unas 500 mutaciones que
están muy dispersas en el genoma. En posiciones 185 y 5382 están localizadas las
mutaciones de la población Judia Ashkenazy.
 El gen BRCA1 codifica para una proteína de 1863 aa, que en zona aminoterminal
presenta dominios RING Finger Motif (RFM). Mutaciones en esta posición y en los
aa 61 y 64, están relacionadas con el cáncer de mama familiar. Hay otros dominios
de unión para p53 y proteínas nucleares (NSL).
 En zona carboxi terminal presenta uniones para BRCA2 y ARN pol II.
 Zona de unión para ATM, que fosforila las Serinas (Ph.S) de BRCA1 en respuesta
al daño celular.
19
GENERALIDADES BRCA2 (BReast CAncer)
LOCALIZACIÓN: Cromosoma 13q 12-13.
● Los exones 10, 11 y 27 son los más largos.
● El gen consta de 10254 nucleótidos.
PROTEÍNA: Está formada por 3418 aa.

● No se conocen con exactitud sus zonas de unión, tan sólo se sabe que se
une a BRCA1 y Rad21.
● Presenta funciones diversas:
* reparación de ADN,
* control ciclo celular y
* activación transcripción (gen supresor tumoral).
VARIACIONES: Las mutaciones del gen BRCA2 están asociadas al

cáncer de mama hereditario y en especial en el varón.
● Las mutaciones más características se han encontrado en las
posiciones 6174 (delección de T), 999 (delección 5 bases) y 6503
(delección de TT).
Módulo IV 20
BRCA2
26 EXONES
Mutaciones en posiciones
999 - 6174 -6503.
Se relacionan con el cáncer
de mama hereditario.
PROTEÍNA
1 3418 aa
N BRCA1 Rad 21 C
 El gen BRCA2 consta de 26 exones. Se han detectado unas 300 mutaciones que
están muy dispersas en el genoma. En posiciones 999, 6174 y 6503 están
localizadas las mutaciones más relacionadas con el cáncer hereditario.
 El gen BRCA2 codifica para una proteína de 3418 aa. No se conocen con
exactitud sus zonas de unión, tan sólo se sabe que se une a BRCA1 y Rad21.
GENERALIDADES ESTRÓGENOS
Y SUS RECEPTORES
 En condiciones fisiológicas, la principal fuente de estrógenos en la mujer sana pre-
menopáusica es el ovario y, en menor cantidad, los tejidos periféricos como adiposo,
muscular, piel y estroma mamario normal.
 En la mujer post-menopáusica, tan sólo los tejidos periféricos sintetizan estrógenos.
 En ambas situaciones los estrógenos se producen a expensas de los andrógenos
(Androstenodiona y Testosterona), que mediante la enzima aromatasa transforma los
andrógenos en estrona (E1) y estradiol (E2).
 El estradiol penetra en el citoplasma de la célula y se une a su receptor.

 La unión estradiol-receptor se une al ADN y activa la transcripción de genes que
estimulan la síntesis proteica.
RECEPTOR DE ESTRÓGENOS
LOCALIZACIÓN DEL GEN. Cromosoma 6q25.1.

PROTEÍNA. Formada por 595 aa, con zonas de unión para el estradiol y el
ADN.
Módulo IV 22
CÓMO ACTÚAN LOS ESTRÓGENOS EN CONDICIONES NORMALES
1º Andrógenos
2º 4º
E2
A
ER
ER
3º
SÍNTESIS DE PROTEÍNAS 5º
1º Los Andrógenos atraviesan la membrana citoplasmática.
2º La Enzima Aromatasa (A) transforma los Andrógenos en estradiol (E2).
3º El E2 se une a su receptor (ER). Los aa 311 y 551 son los que se unen a E2.
4º El complejo E2+ER se une al ADN por los aa 185 a 250.
5º El complejo E2+ER activa la transcripción de genes que estimulan la síntesis proteica
normal.
Módulo IV 23
MECANISMOS CARCINOGÉNICOS DE LOS ESTRÓGENOS
Los Estrógenos pueden transformar las células mamarias en células

neoplásicas por dos mecanismos distintos:
 ESTRÓGENO-RECEPTOR Y PROLIFERACIÓN CELULAR.
 ESTRÓGENO-METABOLITO Y LESIÓN DEL ADN.
Módulo IV 24
ESTRÓGENO-RECEPTOR Y PROLIFERACIÓN CELULAR
1 E2
ER ER
PROLIFERACIÓN
CELULAR
myc 2
1º El complejo E2+ER se une al ADN activando de forma anormal la

transcripción de genes que estimulan el crecimiento celular.
2º Entre los genes que se sobreexpresan destaca el gen myc, que está
amplificado entre un 30-40% en el cáncer de mama. También hay
relación entre amplificación de myc y afectación ganglionar.
Módulo IV 25
ESTRÓGENO-METABOLITO Y LESIÓN ADN
1 E2 2 3
GA GA
4-OHE2 E2.3-4Q
Errores de reparación
pueden provocar
mutaciones oncogénicas. 4
1º El Estradiol puede ser metabolizado a 4-hidroxi estradiol (4-OHE2).
2º El 4-OHE2 puede metabolizarse a 3,4 estradiol quinona (E2 3-4Q).
3º La quinona tiene una gran apetencia para las G y A del ADN, formando
uniones muy estables.
4º Errores en la reparación del complejo quinona G/A pueden producir
mutaciones oncogénicas.
Módulo IV 26
Entonces, cual es la utilidad de la
Biología Molecular x Cáncer?
• Oncogenes X STs gatekeepers X
STs caretakers:
Carro normal: 1 acelerador (oncogene)

2 frenos (pedal e mano) (protectores)
3 revisión general ok! (manutención)
• Oncogenes X STs gatekeepers X
STs caretakers :
1 Acelerador pegado
2 Frenos inactivados velocidade
3 Revisión general ineficaz
De que estoy hablando?
Me
cansé

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Biología Celular y Molecular

Prof. Cristiano Trindade, PhD

ADN REPLICACION. El ADN forma copias idénticas.

ARN TRANSCRIPCION. Formación del mARN.

La proteína es liberada al citoplasma.

El ribosoma lee en sentido 5’ 3’

CAUSAS RESPUESTAS MECANISMOS

DEAMINACION DE BASES DEPURINACION

• La radiación ultravioleta (UV) provoca en la cadena de ADN uniones de Timinas que

Aparece una mutación puntual.

Interstrand Intrastrand Monoadduct ADN-Protein

La unión Intercadenas es la más citotóxica.

CH3 O GUANINA METIL-CISTEINA

La mutación se repara sin corte del ADN.

BASE EXCISION REPAIR (BER)

ADN POLIMERASA A T G C T G A C G La ADN POLIMERASA y

● La capacidad de una célula en transformarse en dos es una propiedad

● La progresión en cada una de estas fases está controlada por

La finalidad del ciclo celular es la división de la célula.

1. Células con alta capacidad proliferativa.

2. Células con nula capacidad proliferativa.

3. Células con capacidad proliferativa ocasional.

4. Células con capacidad proliferativa constante.

El ciclo celular presenta características propias en cada uno de

1. Células con alta capacidad proliferativa.

Son grupos celulares altamente diferenciados y que han perdido su

División celular Alta diferenciación

Cuando hay lesión o muerte

Algunos tumores se caracterizan por presentar sólo células madre; no hay

Al final de la Mitosis hay un checkpoint que

Si el ADN no se ha Factores de crecimiento, PDGF,

En los mamíferos, durante la mitosis se producen los eventos siguientes:

• El ADN se condensa, se duplica y los cromosomas se hacen visibles al

• El citoesqueleto celular se reorganiza y forma el huso mitótico.

• Aparición de una nueva membrana nuclear que envuelve a los cromosomas.

Todos los eventos anteriormente citados se han

P Condensación del ADN.

Cada cromosoma está duplicado: 2 cromátidas.

Los microtúbulos se constituyen a partir de los

Se degrada la membrana nuclear.

Los centrosomas son la zona de unión de las

Los microtúbulos Los microtúbulos están

Durante la metafase los microtúbulos

En la anafase hay una contracción

Contracción de la membrana Formación de membranas

Descompactación de las cromátidas y distribución

Aparece un anillo de contracción formado por ACTINA y MIOSINA II,

MUTACIÓN: Cambio hereditable en la secuencia genética de un

GENOTIPO: Información genética codificada en el genoma de un organismo.

FENOTIPO: Manifestación externa del genotipo.

MUTÁGENO: Agente que incrementa la frecuencia de mutaciones.

MUTAGÉNESIS: Procesos que conducen a las mutaciones.

3’ EXÓN 1 Intrón1 EXÓN 2

EN ZONA EN ZONA EN ZONA

EFECTOS EFECTOS EFECTOS

 El hecho de que se ha detectado en momias egipcias demuestra que ha cometido el hombre

 En la actualidad , el cáncer es el nombre general dado a un conjunto de más de 100

 La proliferación celular puede ser controlada o no controlada.

 En el crecimiento controlado, hay un aumento localizado y auto-limitante en el número de

 La neoplasia (cáncer in situ y cáncer invasivo) corresponden a un crecimiento celular

 Las neoplasias benignas o tumores benignos tienen su crecimiento de una

 Las neoplasias malignas o tumores malignos muestran un mayor grado de

 El cáncer no invasivo o carcinoma in situ es la primera etapa en la que el cáncer

 La mayoría de los cánceres in situ son curables si se tratan antes de pasar a