TÉCNICAS MOLECULARES

Presentado Por: Paula Andrea Portela Franco

Laura Cristina Gutiérrez Cadavid

Posgrado de Ortodoncia I Semestre

Universidad Antonio Nariñ o
 OBJETIVOS
Analizar, reconocer e interpretar las té cnicas moleculares
que se usan en la prá ctica científica.

Relacionar la importancia de estas té cnicas moleculares en

la especialidad de ortodoncia.

Diferenciar las té cnicas moleculares que se usan para

interpretar los mé todos científicos usados en los estudios.
¿A que se denominan técnicas de biología
molecular ?
AISLAR
MOLECULAS
EXTRAERLAS EN
ALTA PUREZA

VISUALIZARLO
PARA VER SU
ESTADO
¿PARA QUE SE UTILIZAN ?
DIAGNÓ STICO
ENFERMEDADES
HEREDITARIAS

-CONOCIMIENTO
ACERCA DEL CUERPO - TEST DE PATERNIDAD.
,DESARROLLO DE LOS -IDENTIDAD FORENCE .
ORGANOS .

- MEJORAMIENTO
DIAGNÓ STICO GENÉ TICO DE UNA
ENFERMEDADES ESPECIE.
HEREDITARIAS - EVALUAR
CARACTERÍSTICAS

DIAGNÓ STICO DE
DIAGNOSTICO DE
CONTAMINACIÓ N
CONTAMINACIÓ N VIRAL
BACTERIANA
 EXTRACCIÓN DEL ADN

://www.youtuhttpsbe.com/watch?v
=TalHTjA5gKU
 TÉCNICAS QUE SE UTILIZAN APARTIR DE LA
EXTRACCIÓN DEL ADN
•Reacció n en cadena de polimerasa (PCR).
•Reacció n en cadena de la polimerasa con transcriptasa
reversa RT-PCR.
•QRT- PCR. Real-time Quantitative ReverseTranscripcion
PCR
•PCR- nested o anidada.
•Técnica del polimorfismo de longitud de fragmento de
restricció n (RFLP)
•Secuenciació n del ADN
•Electroforesis en gel
•Hibridació n ( In situ, southern, western y northern)
•Clonació n.
REACCIÓN EN CADENA DE POLIMERASA
(PCR)

OBTENER UN GRAN
NUMERO DE COPIAS
MÉ TODO IN VITRO DE UN PEQUEÑ O
FRAGMENTO DE
ADN
REACCIÓN EN CADENA DE POLIMERASA
(PCR)

AMPLIFICACIO
PREMIO NOVEL
DR KARY DE QUIMICA
•N 1993
DEL GEN DE
LA B-
MULLIS 1987
1993 HEMOGLOBINA
HUMANA
 HUELLA
GENÉ TICA
CLONACIÓ N DE GENES
MUTAGENESIS

COMPARACIÓ N
DE LA BIOTECNOLOGIA.
EXPRESIÓ N AGRICULTURA
GENÉ TICA. EN
CIENCIAS MODERNA
FORENCES, APLICACIONES
(PCR)

ANÁ LISIS DE
ADN TEST DE
ANCESTRAL PATERNIDAD

DETECCIÓ N DE
ENFERMEDADES GENOTIPIFICACIÓ N
HEREDITARIAS DE POLIMORFISMOS
 HUELLA DIGITAL GENÉTICA

Toma de huellas
digitales de
ADN para aná lisis
forenses.
 TERMOCICLADOR
• “ thermo cycler” o
termociclador.
PCR
• Es una maquina que calienta
y enfría la reacció n de
PCR periodos cortos de tiempo.
 DESVENTAJAS
No una prueba cuantitativa.

Puede contaminarse con

otro ADN.

La polimeració n puede
tener errores al sintetizar el
ADN

Se necesitan “primers”
específicos
QRT- PCR. Real-time Quantitative
ReverseTranscripcion PCR
DETECTA EN TIEMPO REAL
LA AMPLIFICACIÓ N DE
NUESTRO GENOMA

SU GRAN VENTAJA ES
LA RAPIDEZ, YA QUE NO
SE NECESITA NINGUN
OTRO PROCESO
ADICIONAL DE
DETECCIÓ N
QRT- PCR. Real-time Quantitative
ReverseTranscripcion PCR
APLICACIONES
*IDENTIFICACIÓN DE
ORGANISMOS FACILMENTE
CULTIVABLES.
*DETECCIÓN RÁPIDA DE
MUTACIONES ASOCIADAS
CON RESISTENCIAS A
MEDICAMENTOS
RT-PCR (PCR TRANSCIPTASA INVERSA)
*Ú til para el
diagnó stico
de diversas
Se obtiene enfermedades
copias de ARN genéticas
Generació n Variació n *Evaluacion
de c-ADN de la mediante
ADNc por de expresion
apartir de técnica de genética.
ARN PCR transcripció n
inversa. *Detecció n
virus de ARN
*Genotecas de
c-ADN
 PCR- NESTED
Ú til para
la secuenciació
n o el aná lisis
genético.

Reacciona en Detecta
cadena de la productos de
polimerasa en Gran ADN
tiempo real. sensibilidad. amplificados
(2012).
 Técnica del Polimorfismo de Longitud
de Fragmento de Restricción (RFLP)

*Identifica una fracció n Evaluar las relaciones de

parentesco. Analizar
corta del gen.
muestras mixtas
*Refiere a secuencias
del genoma.
especificas de nucleotidos
en el ADN, que presenta
ciertas diferencias en los Determinar la identidad
individuos. taxonó mica. (virus y
bacterias)
 Secuenciación del ADN
MÉ TODOS Y TÉ CNICAS APORTA
BIOQUÍMICAS QUE DETERMINAN INFORMACIÓ N EN
EL ORDEN DE LA ESTRUCTURA Y
LOS NUCLEÓ TIDOS (A, C, G Y T) EN FUNCIÓ N DE LOS
UN OLIGONUCLEÓ TIDO DE ADN. GENES.

https://www.youtube.com/watch?v
=iMJXmI4pN0Q
 Secuenciación del ADN
Campos de estudio:
explorando la idea de que en
el futuro este tipo de
tecnología analice,
marcadores específicos de
tumores para asignar un
fá rmaco especifico para cada
persona
 Aplicaciones
-Detecció n de mutaciones
-Diagnó stico de enfermedades
genéticas prenatales
-Identificació n de especies y
control de cruce entre animales
-Proyecto genoma humano
-Secuenciació n de ADNs fó siles

https://www.youtube.com/watch?v=ewiBPv
FsaGU
ELECTROFORESIS EN GEL

Utilizada para Ayuda a

A través de
Es un grupo de separar identificar
fuerzas
té cnicas moléculas genes
electromotrice
dañ ados,
(1992) ( ADN-ARN- s por medio de
incluyendo
Proteinas) un gel
oncogénesis
TIPOS DE ELECTROFORESIS EN GEL
La electroforesis de
proteínas se lleva a
cabo en geles de Extracció n en gel.
poliacrilamida-
SDS (SDS-PAGE)

Zimografía o
Electroforesis
zimogramas
capilar
 Hibridación 
In situ: Nourthern
detecta una sola
secuencia de
ADN especifica Western
en un
cromosoma
Técnica que se usa
para aparear 2
hebras de ADN o
ARN para
convertirlas en
una doble hélice.
Southern
 HIBRIDACIÓN IN SITU
Localiza secuencias de á cido
nucleico especificas dentro de
cromosomas intactos , células
eucariotas y bacterianas.1993

Desventaja:
Incapaz de detectar secuencias
con bajo numero de copias de
ADN
HIBRIDACIÓN SOUTHERN

SINDROME ANGELMAN
HIBRIDACIÓ N NORTHERN

- TEJIDOS
- ORGANOS
- ESTADIOS DEL DESARROLLO
- NIVEL DEL ESTRES AMBIENTAL
-INFECCIONES CAUSADAS POR
- PATOGENOS
 HIBRIDACIÓN WESTERN
Técnica analítica
 universidad de stanford (edwin southern).

Aplicaciones:
 Prueba de VIH
 Prueba definitiva de la encefalopatía espongiforme bovina,
comú nmente llamada "enfermedad de las vacas locas".
 FIV en gatos.
 CLONACIÓN
Copia idéntica de un organismo a partir de su ADN, se
puede definir como el proceso por el que se consiguen,
de forma asexual,​copias idénticas de
un organismo, cé lula o molécula ya desarrollado

http://cnnespanol.cnn.com
/video/cientificos-afirmaron-lograron-clonar-simios-usando-la-tecnica-usada-con-d
 APLICACION

Producció n de células
-Reproducció n de -Reproducció n donantes humanas
animales de animales en universales para tratar
transgénico. via de extinsió n. enfermedades.
Transplantes.
 REPETICIONES PALINDRÓMICAS CORTAS AGRUPADAS Y
REGULARMENTE INTERESPACIADAS CRISPR

Técnica permite modificar los genomas de

células humanas , plantas , bacterias.
 APLICACIÓN

Inmunizació n de
Discriminació artificial
cepas contra fagos.
bacterianas.
La ingeniería genética.​
 CONCLUSIONES
Conocer las diferentes técnicas moleculares nos brindan
herramientas para entender los métodos científicos
usados en las investigaciones.

Es relevante entender los avances en las técnicas

moleculares utilizadas para el diagnó stico, tratamiento
de enfermedades, cultivos , industria alimentaria,
animales.
 Bibliografía
Kendrew, encyclopedia of molecular biology, 1994, p 503.
Biología molecular y celular conceptos y experimentos
Gerald Karp quinta edició n.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/.
https://es.wikipedia.org/wiki/Clonaci%C3%B3n.