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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Facultad de Ciencias Biológicas

Curso de Genética Microbiana

Conjugación bacteriana

DR. PABLO RAMÍREZ ROCA


pramirezr@unmsm.edu.pe
Definición
Es uno de los mecanismos de recombinación genética
mediante el cual el genoma de una célula bacteriana (DNA
plasmidial o cromosómico) se transfiere a otra,
involucrando un contacto físico entre ambas.

2
Conjugation Lederberg & Tatum, 1947
• Started with two strains of E. coli that had
different nutritional deficiencies caused by
mutations in genes that normally synthesize
biotin, cysteine, leucine, phenylalanine, thiamine,
and threonine
“... single nutritional requirements were established
as single mutational steps under the influence of X-
ray or ultra-violet. By successive treatments, strains
with several requirements have been obtained”

• Strains were both triple auxotrophic mutants, as


shown below, where the genes are listed
alphabetically: 
3
Conjugation Lederberg & Tatum, 1947

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Conjugation Lederberg & Tatum, 1947

5
Conjugation Lederberg & Tatum, 1947

o Premio Nobel de Fisiología o


Medicina en el año 1958, compartido
con George W. Beadle y Edward
Lawrie Tatum.
o Premio que ganó gracias a los
descubrimientos de su mujer Esther
Lederberg.

Esther Lederberg (Esther Zimmer) en su


laboratorio de la Universidad de Standford,
6

1977
Plásmido F (fertilidad)
• Puede estar libre o
integrado al
cromosoma
• 1 copia
Cepa bacteriana con plásmido F libre = F+ (donadora)

Cepa bacteriana sin plásmido F = F- (receptora)

Cepa bacteriana con plásmido F integrado = Hfr (donadora)

Cepa bacteriana con plásmido F libre


+ genes cromosomales = F’ (donadora)
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Genes tra: 11 o
más presente en
este plasmido
autotransferible

- oriT: origen
necesario para la
conjugación
• Pili de F+ hace contacto con receptores
-
de F
• Contacto inicial es frágil pero luego se
estabiliza (OmpA y LPS)
• Célula F+ tiene típicamente 2 a 3 pili
• Pili son cilindros huecos de aprox. 8nm
de diámetro
• Pili se retrae o
desensambla ,
llegando las células
transconjugantes a
estar en íntimo
contacto
• Luego se inicia la
transferencia del
DNA
Los genes tra codifican 2 grupos de proteínas:

 Componente Mpf (mating-pair formation):


• Proteínas que forman una gran estructura asociada a la membrana
involucrada en el mantenimiento de la pareja de células juntas y en
la formación del canal a través del cual se transfiere el DNA.
• Forman parte de Mpf: el pili, el canal y las proteínas de
acoplamiento.
Componente Dtr (DNA transfer and replication):
• Proteínas involucradas en el procesamiento del DNA plasmidial y su
transferencia.
• Sus genes tienden a formar un “cluster” alrededor del sitio oriT.
• Forman parte de Dtr: el relajosoma (relajasa, helicasa y otras
proteínas) y la primasa.
F-Plasmid
Replication
for Transfer
• “Rolling Circle Mechanism”
• Relaxosome nicks DNA
• Extend at 3’-OH.
• Displace parent strand.
• Synthesize complement for
displaced strand.

• Viral Replication
• Same mechanism
• Multiple copies made from a
single initiation.
Genes cromosomales
llevados por F’ son
diploides.
F’ secundaria o
meroploide.
Si donadora es: El DNA transferido será: El resultado
será:
F+ El del plásmido F nueva F+

Hfr El de una parte de F+ F- con genes


seguido del DNA adquiridos de la
cromosómico donadora

F’ El de F+ más el frag- F’ secundaria


mento cromosómico
Plásmidos
movilizables
OJO no son
autotransferibles!
En Grampositivos
Fatal attraction
Streptomyces
Enterococcus

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