Objetivos del Ciclo de Krebs

Los objetivos del Ciclo de Krebs

son:
• Oxidar acetil~CoA a CO2
• Generar equivalentes de
reducción (NADH y FADH2).
• Suministrar intermediarios
para la síntesis de otros
compuestos (Aminoácidos,
Ácidos grasos, Colesterol,
Gluconeogénesis,
Porfirinas).
• Vincular derivados de
aminoácidos al proceso
terminal de oxidación.
 Coenzima A (CoA)
La coenzima A, cuya función es activar ácidos grasos y transportar grupos acilo esta compuesta por:
• Adenosina
• Acido pantoténico
• Cisteína

NH2

N C
C N
HC
C C
N
N
H2 H
CH3 O O O
C
H3C CH
O H2 C C O P O P O
C CH CH
NH C CH H2 OH OH
O OH
O OH
C
CH2
H2 HO P O
CH
HN C SH
OH
O C

OH
 Origen del Acetil~CoA
• Por descarboxilación
del piruvato.
• Por oxidación
de los ácidos
grasos.
• A partir de O
aminoácidos H3C C

cetogénicos (L, K, F, CoA

Y, I, W, T)
 Fases del Ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs, como todo proceso cíclico, se inicia con la condensación de

un aceptor y el abastecedor del ciclo, seguida por una serie de reacciones
para eliminar el abastecedor y otras que regeneran el aceptor.
Reacciones generales del Ciclo de
Krebs
6
C

Condensación
Oxidación No Oxidación
Descarboxilant Descarboxilante I
e
C
4

C
4
 CONDENSACIÓN
• La reacción inicial del Ciclo de
O
Krebs es la condensación del
oxalacético (aceptor de 4 H3C C

carbonos) con el abastecedor, Acetil-CoA S-CoA- Coenzima A

Acetil Coenzima A (2 carbonos)

para formar un ácido O O OH
tricarboxílico de 6 carbonos, H2 C
C C OH
ácido cítrico. HO C C
HO C CH2
• La enzima que cataliza la O O HO CH2 C OH
reacción es la acetil-CoA : C
O
Oxalacético
oxaloacetato C-acetiltransferasa, O
usualmente conocida como Cítrico
citrato sintasa o enzima
condensadora del citrato.
 Preparación para la primera
descarboxilación
• La posición del grupo OH en O OH
el ácido cítrico no permite C
la oxidación sin riesgo de HO C CH2
romper el enlace formado C OH
HO
en la condensación, por tal C
CH2
O
razón mes necesario
O
cambiar la posición del OH y
transformar el cítrico en Cítrico
isocítrico.
OH
• La enzima encargada de O C
esta reacción es la citrato
O CH CH2
(isocitrato) hidro-liasa EC
4.2.1.3, comúnmente C CH C

conocida como aconitasa HO OH HO O

Isocítrico
 Primera descarboxilación
OH
• El ácido isocítrico es O C
oxidado por NAD+, con O CH CH2
eliminación de un átomo C CH C O NAD+
de carbono en forma de HO OH HO

CO2.
Isocítrico
• La reacción es catalizada NADH + H+
O
por la enzima H2
CO2
HO C C OH
isocitrato : NAD+ C C C
H2
oxidoreductasa O O
(decarboxilanate), -cetoglutárico
comúnmente conocida
como isocítrico
ceshidrogenasa
 Segunda descarboxilación
• El - cetoglutárico es oxidado por
NAD+, con eliminación de un átomo O
de carbono en forma de CO2. La H2
HO C C OH CoASH
oxidación genera suficiente energía C C C
para la formación de un tioéster H2
NAD+
entre el producto de oxidación y la O O
coenzima A .
• La reacción es catalizada por el -cetoglutárico
complejo enzimático 2-oxoglutarato O
deshidrogenasa (transferente de H2
succinato). Consiste de tres enzimas: HO C C NADH + H+
E1 (alfa-cetoglutarato C C S -CoA
deshidrogenasa, EC 1.2.4.2), E2 H2
CO2
(dihidrolipoil transsuccinilasa, EC O
Succinil-CoA
2.3.1.61) y E3 (dihidrolipoil
deshidrogenasa, EC 1.8.1.4)
 Formación de GTP
• La única fosforilación a O
nivel de sustrato en el H2
C
HO C
Ciclo de Krebs, ocurre a C C
H2
S -CoA GDP + P
expensas de la hidrólisis O
Succinil-CoA
del tioéster de el succinil
CoA. El nucleótido tri O
CoASH
H2
fosfato formado es GTP HO C C GTP
C C OH
• La reacción es O
H2

catalizada por la enzima

Succinico
succinato - CoA ligasa
(EC 6.2.1.4), conocida
también como succinato
quinasa
 Recuperación del aceptor 1
• La recuperación del aceptor se
realiza de acuerdo con el modelo
general de oxidación, por lo tanto O
H2
el primer paso es la formación HO C C Ubiquinona
de un doble enlace en una C C OH FAD
oxidación dependiente del FAD. H2

El producto formado es el ácido O

fumárico Succinico
• La reacción es catalizada por la O
succinato : ubiquinona H Ubiquinol
oxidoreductasa (EC 1.3.5.1) una HO
C
C FADH2
C C OH
flavoproteina (FAD), que contiene
H
centros de azufre y hierro. Se O
conoce tambien con el nombre Fumárico
de scuccinico deshidrogenasa.
 Recuperación del aceptor 2
• En el segundo paso se
hidrata el fumárico para O

dar ácido málico. HO

H
C
C H2O
C C OH
• La reacción es O
H

catalizada por la malato

hidroliasa (formadora O
de fumarato) C
H2
C OH
EC 4.2.1.2 , también HO CH C

conocida OH O

como Málico

fumarato
hidratasa
 Recuperación del aceptor 3
• La recuperación del
O
aceptor termina H2
mediante la oxidación del HO
C
CH
C
C
OH
NAD+
ácido málico a
OH O
oxalacético, en una
reacción dependiente de O
Málico

NAD+. C
H2
C OH
• La reacción es HO C C NADH + H+
catalizada por la O O

malato : NAD+
Oxalacético
oxidorreductasa (EC
1.1.1.37), también
conocida como malato
deshidrogenasa.
Resumen del Ciclo de Krebs
Acetil CoA 2C
CoA-SH

Oxalacético 4C

NAD+
Cítrico 6C
NADH + H +

Málico 4C

H 2O

Fumárico 4C Isocítrico 6C
NAD+
NADH + H+ CO2
Ubiquinol FADH2
Ubiquinona FAD -cetoglutárico 5C
NAD +

Succínico 4C CoA-SH
NADH + H+
CO2
Succinil CoA 4C

GTP
GDP + P
 Integración con otros procesos
Glicólisis
Cuerpos
Acetil CoA 2C cetónicos
CoA-SH
oxidación
Oxidación y síntesis de
aminoácidos Oxalacético 4C Colesterol
Ácidos grasos
Gluconeogénesi s Cítrico 6C

Málico 4C
Fosforilación oxidativa
NADH

Fumárico 4C FADH2 Isocítrico 6C

Oxidación y síntesis de
Oxidación de aminoácidos

aminoácidos -cetoglutárico 5C

Succínico 4C
Porfirinas

Succinil CoA 4C
Ácidos grasos de cadena impar
Oxidación de

aminoácidos
 Localización del Ciclo de Krebs y la
Fosforilación Oxidativa
H+ H+ H+

Espacio intermembranal
c
I Q III IV
Membrana interna
ATP sintasa
NAD+ + H+ NADH H2 O
O2
ATP Citocromo c
ADP + P H+
Ciclo
MATRIZ MITOCONDRIAL de Ubiquinona
Krebs Complejo I
O2 Succinato
H2O Fumarato Complejo II
Membrana interna
Complejo III
II
IV III Q I Complejo IV

Espacio intermembranal
H+ H+
 Complejo I
• Es conocido como NADH : Ubiquinona – reductasa.
• Esta compuesto por 16 o más cadenas
polipeptídicas.
• Tiene FMN como grupo prostético.
• Presenta de 5 a 8 centros ferrosulfurados (Fe – S).
• Puede
Es el complejo más por:-
ser inhibido grande de la(barbitúrico),
Amital cadena respiratoria.-
Rotenona
( producto vegetal tóxico.)
• La Ubiquinona puede estar insertada en el complejo,o
estar li
bre
 Complejo II
• Recibe el nombre de Succinato : UQ – reductasa.
• Es la única enzima del ciclo de Krebs unida a la membrana mitocondrial
interna.
• Consta de
• 4 cadenas polipeptídicas.
• 1 citocromo.-
• Una molécula de FAD como grupo prostético.
• 2 a 3 centros Fe – S
Hemo Q
QH2

2H+

FAD FADH2

Succinato Fumarato + 2H+

 Complejo III
• Se conoce como Ubiquinona : citocromo c reductasa.
• Contiene 2 tipos distintos de citocromo b.
• Su función es transferir los equivalentes de reducción desde la
Ubiquinoina hasta el citocromo c.
• El complejo es inhibido por la antimicina

cox cox
2H+ 2H+
cred cred

QH2 Q QH2 Q
Q QH2
Q 1 e- Q- 1 e-

2H+
 Complejo IV

• Se conoce como citocromo c oxidasa. 4 cred

4 H+
Recibe los electrones del citocromo c.
4
• El citocromo c oxidasa almacena los electrones para cox

cederlos después al oxigeno. 4 e-

• El complejo IV puede ser inhibido por: Cu
• Cianuro (CN-) Fe
• SH2 Cu Fe
• CO 4 H + + O2

• Azida (N3-) 2 H2O

4 H+
 Ubiquinona
• Su función es recoger electrones de los complejos I y II
• Es liposoluble, por lo que puede desplazarse por el interior de
las dobles membranas lipídicas, para llegar al complejo III.-
Puede ser reversiblemente reducida o pasar por estados de semi
reducción:
• UQ (Ubiquinona)
• UQH (Semiquinona)
• UQH2 (Ubiquinol).
• Se puede encontrar libre o asociada a proteínas.-
• Tiene una cadena lateral isoprenoide:
• n= 6-8 en microrganismos .
O CH H C
• n=10 (Q10) en mamíferos
3 2

C C H
O C HC C

H3C C C C 6 - 10
CH2 CH3

H3 C O

O
 Citocromos
• Son componentes de la cadena respiratoria.-
• b
• c
• C1 presenta movilidad a través de la membrana llevando electrones del
complejo III al complejo IV
• a
• a3
• Son proteínas transportadoras de electrones
• Contienen un grupo hemo que puede estar oxidado o reducido.
• No pueden ser oxidadas por el oxigeno molecular, excepto el citocromo a3. Es
el único que puede ceder electrones al oxigeno.
• Los citocromos actúan en forma secuencial
Flujo de electrones en la Cadena
Respiratoria

H+ H+ H+

FeS
C
C1
b a3
CoQ CoQH
FeS b FeS

NAD+
NADH
H+

½ O2+ 2 H+ H2O
 Integración en el Ciclo de Krebs
Monosacáridos Aminoácidos Ácidos grasos
Glicerol

Aminoácidos
Potenciales redox
Reacción o '(V)
O2 + 2H+ + 2 e- H2O 0.816
Fe3+ + e - Fe2+ 0.771
Fotosistema P700 0.430
NO3 - +2 H++2 e - NO2 - +H2 O 0.421
Citocromo f ( Fe3+)+ e - citocromo f (Fe2+) 0.365
Citocromo a 3 ( Fe3+)+ e - citocromo a 3 (Fe2+) 0.350
Citocromo a (Fe3+)+ e - citohromo a (Fe2+) 0.290
Citocromo c ( Fe3+)+ e - citocromo c (Fe2+) 0.254
Citocromo c 1 ( Fe3+)+ e - citocromo c 1 (Fe2+) 0.220
UQH + H+ + e - UQH2 (UQ=coenzima Q) 0.190
UQ + 2 H+ + 2 e - UQH2 0.060
Citocromo bH(Fe3+) + e - citocromo bH(Fe2+) 0.050
Fumarato + 2 H+ + 2 e - succinato 0.031
UQ + H+ + e - UQH 0.030
Citocromo b 5 ( Fe3+)+ e - citohromo b 5 (Fe2+) 0.020
FAD+2 H++2 e - FADH2 0.003-0.091
Citocromo b L ( Fe3+)+ e - citocromo b L (Fe2+) -0.100
Oxaloacetato + 2 H+ + 2 e - malato -0.166
Piruvato + 2 H+ + 2 e - lactato -0.185
Acetaldehído+ 2 H+ + 2 e - etanol -0.197
FMN + 2 H+ + 2 e - FMNH2 -0.219
FAD + 2 H+ + 2 e - FADH2 -0.219
Glutatión (oxidado) + 2 H+ + 2 e - 2 glutatón (reducido) -0.230
Acido lipoico + 2 H+ + 2 e - acido dihidrolipoico -0.290
1 ,3-Bisfosfoglicerato + 2 H+ + 2 e - gliceraldehído-3-fosfato+Pi -0.290
NAD+ + 2 H+ + 2 e - NADH + H+ -0.320
NADP+ + 2 H+ + 2 e - NADPH + H+ -0.320
Lipoil dehydrogenasa [FAD ] +2 H++2 e - lipoil dehidrogenasa [FADH2] -0.340
-cetoglutarato + CO2 + 2 H+ + 2 e - isocitrato -0.3802
H+ + 2 e - H2 -0.421
Succinato + CO2 + 2 H+ + 2 e - -cetoglutarato + H2O -0.670
Potenciales de reducción en la adena
respiratoria
 Enzimas respiratorias y pares
.
redox en eucariontes
Enzima respiratoria Par redox E (Voltios)
NADH deshidrogenasa NAD+ / NADH −0,32

Succinato deshidrogenasa FMN o FAD / FMNH2 o FADH2 −0,20

Complejo del citocromo bc1 Coenzima Q10 ox / Coenzima Q10 red +0,06

Complejo del citocromo bc1 Citocromo b ox / Citocromo b red +0,12

Complejo IV Citocromo c ox / Citocromo c red +0,22

Complejo IV Citocromo a red / Citocromo a red +0,29

Complejo IV O2 / HO- +0,82

Condiciones: pH = 7
 Formación de ATP
• El proceso de fosforilación del
ADP para formar ATP se realiza a
expensas de la llamada fuerza
protomotriz que es generado por
un gradiente de protones a través
de la membrana interna de la
mitocondria.
• Los complejos de la cadena
respiratoria bombean protones
de la matriz mitocondrial al
espacio inter membrana.
• Los protones regresan a la matriz
gracias a la ATP sintasa, enzima
que aprovecha la fuerza
protomotriz para formar el ATP.
Esquema generaldelmetaboloismo