Trabajo grupal n°2

Coloraciones especiales

Curso: Microbiología general (90g)

Blga.:Lizbeth Collazos Paucar
Integrantes:
Herrera rivera, Emerson
Cerron Inga Max
Moran zárate, Cristopher
Santillán Ramirez ,Gianpierre
Rivera Girón, David
 COLORACION DE ESPORAS

CUBRIR CON VERDE DE

PREPARAR UN FROTIS MALAQUITA Y
DE LA MUESTRA CALENTAR POR 1 min

COLO VERDE=
ESPORA ENJUAGAR CON
COLOR ROSADO= AGUA
BACILOS

COLOREAR CON
LAVAR Y SECAR SAFRANINA POR 1
MIN
COLORACION DE CÁPSULA(coloración de hiss)

PREPARAMOS LA
EXTENSION TEÑIMOS LA EXTENSION
DEJANDOLA SECAR A CON CRISTAL VIOLETA
TEMPERATURA
AMBIENTE

TRATAMOS LA
EXTENSION CON
SULFATO DE COBRE
QUE DECOLORA LA
CÁPSULA

VISUALIZAREMOS LOS
RESULTADOS EN EL
MICROSCOPIO
 Procedimiento de la coloración Vago

Se basa primeramente en la impregnación con mercurio cromo a

nivel de la pared celular de dichos microorganismos y solo así se
podrán teñir con violeta de genciana

OBJETIVOS MATERIALES.

Observar las bacterias que se encuentra en el • Lamina porta objeto

sarro dentario: • Palito mondadientes
espiroqueta, fusoespiraladas y • Mercurio cromo al 2%
fusobacteria • Colorante violeta genciana
• Muestra de sarro dentario
• Aceite de inmersión
• Microscopio.
• Agua destilada
 PROCEDIMIENTO RESULTADOS

Esquematizar las observaciones

Prepara la extensión del sarro
dentario, empleando el palito
mondadientes
sobre la lámina porta objetos, espiroqueta, fusoespiraladas y fusobacteria.
usando una gota de solución
salina
fisiológica y la fijación se realiza
solo al ambiente.
Impregnar con mercurio
cromo al 2% por espacio
de 3 minutos. Lavar
con agua destilada.

Cubrir con violeta

genciana por
espacio de 3
minutos. Fusobacterium novum en cultivo líquido.

Lavar secar y
observar.
 TINCIÓN
TINCIÓN DE
DE CÓRPUSCULOS
CÓRPUSCULOS METACROMÁTICOS
METACROMÁTICOS POR
POR MÉTODO
MÉTODO DE
DE LOEFFLER
LOEFFLER

Definición: Son gránulos de reserva, normalmente fosfatos, que se encuentran en determinadas bacterias. Suelen ser de gran tamaño y se tiñen
de manera determinada debido a su composición química, en presencia de colorantes.

Método de Loeffler
Estos corpúsculos se tiñen con azul de metileno Loeffler o azul de Loeffler. Este colorante es un derivado preparado a partir de azul de metileno. A él se añaden otros ingredientes
como agua destilada, alcohol y una disolución de (KOH).

 Uno de los microorganismos que poseen estos gránulos es el Corynebacterium Diphteriae

 Azul de metileno… 0,3 g

Corynebacterium Diphteriae
Reactivos:
Reactivos:  Alcohol Etílico 95º … 30 ml
 Agua Destilada …100 ml

Técnica:
Observar la preparación
Teñir con azul de metileno de Lavar con agua Dejar secar la
Fijar la preparación con haciendo uso del
Realizar una extensión sobre el Loeffler durante cinco destilada hasta eliminar preparación al
calor, ayudándonos del microscopio óptico
portaobjetos con la muestra minutos el exceso de colorante. aire.
mechero
TINCIÓN DE
FLAGELOS
 UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Y RECURSOS NATURALES

MÉTODO DE Método para lograr observar los flagelos presentes en las bacterias.
Utiliza mordientes y colorantes, este ultimo llamado “Colorante de

COLORACIÓ Leifson” preparado a base de tres soluciones con contenido de

fucsina básica, alcohol etílico, ácido tánico, agua destilada, y cloruro
de sodio.
N DE
LEIFSON
 Suspensión Asa
bacteriana bacteriológica

Lámina Mechero Bunsen

portaobjetos

Lámina Mezcla crómica

cubreobjetos
MATERIAL
ES Pipetas Pasteur Microscopio

Aceite de
Gradilla
inmersión

Fucsina básica

Etanol 95%

REACTIVOS Colorante
Ácido tánico
Y de Leifson
COLORANTE Agua destilada

S Cloruro Sódico
 PROCEDIMIENT
O PREPARACIÓN Y USO DEL OBSERVACIÓN
COLORANTE DE LEIFSON
• Preparamos 3 soluciones , luego
PREPARACIÓN DE LA realizamos la mezcla y posteriormente • luego colocar una pequeña cantidad de
lo colocamos en un envase hermético aceite de inmersión para una mejor
MUESTRA Coger una
resolución de la imagen captada por el
muestra de la
Pasar la lámina suspensión microscopio
portaobjeto por la microbiana con
llama generada • Observar mediante el microscopio, de
ayuda de la asa
Secar la lámina por el mechero bacteriológica y preferencia con el lente objetivo de
portaobjeto con bunsen para quitar colocarlo en la Solución A: 100X
ayuda de un trozo la grasa. lámina
de tela limpio. 1.2 g de Fucsina • Se observará a los flagelos con un color
portaobjeto. básica 1.2 g en 100
Lavar la lámina rosado oscuro
portaobjeto con mL de Etanol al 95%
agua destilada y
enjuagarlo con
alcohol.
Solución C: Solución B:
1.5g de Cloruro 3g de Ácido tánico en
Sumergir la sódico en 100 mL de 100 mL de Agua
lámina Agua destilada. destilada.
portaobjeto en la
mezcla crómica
para limpiarlo.

• Utilizando la pipeta Pasteur colocamos

el colorante de Liefson en la muestra.