TOXICOLOGÍA ANALÍTICA

(Solo la dosis hace que una sustancia sea medicamento o veneno)

Alumno: José Hurtado Lévano

 INTRODUCCIÓN
Es indudable que al hablar de Toxicología,
relacionemos el nombre de Mateu J. B. Orfila (1787 –
1853) «médico de profesión» considerado como el
padre de la Toxicología Moderna. Su aplicación a
Medicina Forense fue inmediata y propició la
resolución de sonados casos penales , como el
célebre crimen de la señora Lafarge, que apasionó a
la opinión pública y marco un hito en el papel de las
técnicas de Laboratorio para el esclarecimiento de
hechos criminales. Su obra cumbre fue «Tratado de
Pociones» en 1813.
 DEFINICIÓN

La Toxicología Analítica, permite identificar y

cuantificar un cierto tóxico presente en un
organismo vivo, tipo de alimento o en el medio
ambiente (airea, agua, suelo). Esto implica el
estudio metabólico del tóxico dentro del sistema
en donde se producen sus efectos, para poder
predecir alternativas de solución y proveer la
información necesaria para establecer parámetros
de evaluación en el control preventivo.
DIVISIÓN DE LA TOXICOLOGÍA ANALÍTICA

Toxicología analítica

Toxicología Toxicología Toxicología

Alimentaria Ambiental Forense
 TOXICOLOGÍA FORENSE

Es aquella rama de la Toxicología que estudia los métodos

de investigación médico – legal en los casos de
envenenamiento y muerte. Muchas sustancias tóxicas no
generan ninguna lesión característica, de tal manera que si
se sospecha alguna reacción tóxica, la investigación visual
no sería del todo suficiente para llegar a una conclusión.
Uno de los principios fundamentales de la Toxicología
Forense, es que cuando dos objetos entran en contacto,
habrá un intercambio entre los dos. Es decir, «cada
contacto deja un rastro» frase que popularizó Edmund
Locard, Padre de la Criminalística Moderna.
 Tipos de muestra

• Sangre.
• Orina.
• Contenido gástrico.
• Vísceras (hígado, cerebro, pared gástrica, etc).
• Otros: humor vítreo, hisopado nasal, hisopado
de manos, cabellos, restos óseos y alimentos)
 Prueba de Alcoholemia
Muestras de sangre provenientes de:

• Suceso de tránsito.
• Tanatología.
• Particulares.

Concentración máxima: 0.5 g/L

 Aplicaciones de la Toxicología Forense
• Test de drogas.

• Análisis de residuos de disparos y balas.

• Análisis cualitativo en caso de envenenamiento.

• Detección de manchas de sangre.

• Análisis de muestras biológicas (orina, sangre, etc.)

 Test de drogas
En la actualidad se busca presencia o ausencia
de drogas, ya sea en polvos, líquidos, tabletas o
cápsulas. Son pruebas cualitativas de laboratorio
que se hacen uniendo un antígeno y su
anticuerpo homólogo (Inmunoensayos). El
método consiste en el uso de mezclas de
anticuerpos selectivos para las distintas drogas y
sus metabolitos, se obtiene un resultado con
alto grado de sensibilidad.
 Análisis de residuos de disparos de balas
Cuando un arma de fuego es disparada, se generan
gases que contienen componentes incinerados y no
incinerados provenientes del casquillo de la bala y
del propulsor del arma.
Este material se puede depositar en la ropa de la
víctima o la mano del sospechoso, mediante el uso
de un microscopio de barrido electrónico acoplado
con un Espectrómetro de energía dispersiva se
puede examinar la muestras recolectadas.
 Análisis cualitativo de venenos
En este caso se determina la molécula individual
que está presente en la muestra. Con el tiempo se
ha podido recolectar acerca de este tipo de
sustancias, su composición, etc. Este tipo de
ensayo generalmente se hace por fotometría, aun
cuando existen ensayos químicos específicos para
algunas específicas. Cuando se trata de venenos
naturales es más difícil su identificación, por lo que
se recurre a estudios de composición molecular.
 Detección de huellas de sangre
Todos los ensayos empleados en la detección de
sangre se basan principalmente en la actividad de
las enzimas peroxidasas presente en la sangre, las
cuales reaccionan con los agentes químicos
provocando un cambio de color. Algunas de las
pruebas son: el ensayo con benzidina, tetrametil
benzidina. Pero el más famoso es el uso del
Luminol (derivado de ácido ftálico) que cataliza la
reacción con H2O2 bajo emisión de luz.
 Análisis de muestras biológicas
Las muestras biológicas entregan información de
la presencia del tóxico o su metabolitos. Se debe
tomar en cuenta los tiempos de vida media de
los tóxicos, el volumen de distribución y su
afinidad por los distintos tejidos. Para
intoxicaciones o muertes por envenenamiento
se prefiere las muestras de contenido gástrico,
para el caso de restos de droga puede extraerse
orina.
 TOXICOLOGÍA AMBIENTAL
Llamada también Ecotoxicología, se encarga de
evaluar los impactos que producen en la salud
pública la exposición de la población la
exposición a los tóxicos ambientales y presentes
en un sitio contaminado. Se habla de la Química
Toxicológica, como aquella que relaciona la
toxicología con la naturaleza química de los
compuestos tóxicos.
 Aspectos Claves
Relaciones Dosis – Respuesta
La mayor parte de la información cuantitativa relacionada
con la toxicidad de sustancias, se obtiene de experimentos
realizados mediante la administración de dosis de las
sustancias a los animales, aunque recientemente se han
utilizado ensayos sobre ciertas bacterias para determinar si
una sustancia es un probable cancerígeno o no.
Los individuos difieren significativamente en su
susceptibilidad a un compuesto químico dado.
LD50 Toxicidad
 Aspectos Claves
Sinergismo, potenciación y antagonismo
Los efectos biológicos de dos o más sustancias tóxicas juntas
puede ser diferentes en tipos y grados. La interacción química
entre las sustancias puede afectar sus toxicidades. Ambas
sustancias pueden actuar con la misma función fisiológica, o
bien, pueden competir por enlazarse al mismo receptor.
Cuando ambas sustancias tienen la misma función fisiológica,
sus efectos pueden ser simplementes aditivos o pueden ser
sinérgicos (el efecto total es mayor que la suma de los efectos
individuales). Ocurre potenciación cuando una sustancia
inactiva refuerza la acción con otra activa y antagonismo
cuando una sustancia activa disminuye el efecto de otra activa.
 Contaminantes Típicos
• Pesticidas: HCB, DDT, Toxafeno, Dieldrín,
Mírex, Malatión, Paratión, Atrazina, etc.

• PCBs, dioxinas y furanos.

• Metales Pesados: Hg, Pb, Cd, As, Sn, etc.

• COPs, PAHs, entre otros.

 Detección de pesticidas por captura de
electrones
La amplia variedad de química de los pesticidas en el
medio ambiente hace que su detección sea una tarea
importante, si bien su presencia a menudo a tan bajas
concentraciones hace que ésta sea una labor difícil. Una
forma de detectar pequeñas cantidades de compuestos
químicos ambientales es utilizando detectores
cromatográficos muy sensibles. El detector de CG más
común para los pesticidas que contiene átomos de
halógeno es el detector de captura de electrones (ECD).
Por éste método puede detectarse DDT, lindano, clordano.
Los pesticidas con alto punto de ebullición no pueden
detectarse por éste método.
 TOXICOLOGÍA ALIMENTARIA
La Toxicología de alimentos o bromatológica, se refiere
al conocimiento sistemático y científico de la presencia
de sustancias potencialmente dañinas en los alimentos y
evitar hasta donde sea posible la ingesta de una
cantidad que ponga en riesgo la salud del consumidor.
Al tener la capacidad de seleccionar con criterio la
metodología adecuada para el aislamiento y detección
de residuos tóxicos en alimentos e interpretar dichos
resultados puede lograrse minimizar dicho problema.
Tóxicos en alimentos y bebidas
Análisis Toxicológico de alimentos
 TÉCNICAS ANALÍTICAS
Los tóxicos que se puedan investigar incluyen
diversos analitos y sus metabolitos. Se pueden
citar gases, drogas, solventes, plaguicidas, sales
metálicas, líquidos corrosivos. Pueden realizarse
ensayos simples utilizando los procedimientos
descritos en las monografías. Por otro lado el
analista debe realizar prueba de rutina
considerando que la evidencia circunstancial del
tóxico puede ser engañosa.
 Clasificación de las técnicas analíticas

Las técnicas analíticas pueden presentarse de dos

formas: por vía clásica o instrumental.
• Vía Clásica: Examen físico de la muestra (color,
olor), pruebas cromáticas de screening, ensayos
inmunológicos (screening en orina),
microdifusión, aislamiento y extracción del
analito, identificación del analito.
• Vía instrumental: CG, HPLC, IR, Absorción
Atómica, Sistemas acoplados.
 Por Vía Clásica
• Examen físico de la muestra (color, olor): las
elevadas concentraciones de algunas drogas o
metabolitos, pueden impartir algunos colores
característicos.
• Pruebas cromáticas de screening: algunas
drogas y otros tóxicos se encuentran en
concentraciones altas y en ausencia de
compuestos que interfieran dan colores
característicos con reactivos apropiados.
 Por vía clásica
• Reacciones cromáticas: se refiere al empleo de
reactivos para generar sustancias coloreadas, como
la reacción de Bouchardat (para identificar sales de
alcaloides, con precipitado marrón), la reacción de
Forrest (en orina, para identificar iminaprina).
• Ensayos inmunológicos: Son útiles para detectar
drogas o sus metabolitos en los fluidos biológicos
de aquellos individuos que ingresen en estado de
coma e hicieran sospechar una intoxicación.
 Por vía Instrumental
Espectroscopia de Absorción en el Infrarrojo

La región del IR abarca la región comprendida desde los

0,8 μm hasta los 1000 μm, es conveniente dividir el
espectro IR en tres secciones: IR cercano, IR medio e IR
lejano.
Aplicación: El análisis cualitativo (y algunas veces
cuantitativo) de compuestos orgánicos, los cuales
presentan espectros complejos con numerosos máximos y
mínimos que resultan útiles al efectuar comparaciones. El
propósito de FTIR es determinar grupos funcionales.
Por vía instrumental

Fig. 1 Espectro IR para el éter dietílico

Frecuencias de Absorción en IR
 Cromatografía de Gases
Es un método físico de separación para la caracterización
de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las
ramas de las ciencias. Es un conjunto de técnicas basadas
en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es
separar los distintos componentes de una mezcla
permitiendo identificar y determinar las cantidades de
dichos componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente
de partición de los compuestos da como resultado una
retención diferencial de sobre la fase estacionaria y por
tanto una separación efectiva en función de los tiempos de
retención de los componentes de una mezcla.
Tipos de Cromatografía
Cromatograma
 Espectrómetro de Masas
Es una técnica para medir la masa y, en consecuencia, el
peso molecular (PM) de una molécula. Además, con
frecuencia es posible adquirir información sobre la
estructura de una molécula midiendo la masa de los
fragmentos que se producen cuando las moléculas se
desintegran. Se evapora una cierta cantidad de muestra,
que entra al espectrómetro de masas; allí es bombardeado
por un haz de electrones de alta energía. Por lo general 70
eV, cuando un electrón de alta energía choca con una
molécula orgánica, expulsa un electrón de valencia de ella
y produce un radical catión. Estos fragmentos pasan a
través de un tubo curvo, dentro de un campo magnético y
luego por un detector.
Esquema de Fragmentación
Espectro de masas
 Espectroscopia UV - VIS
Al irradiar una molécula con luz visible o ultravioleta, puede
originarse una transición electrónica durante la cual la
molécula absorbe un cuanto de energía, y se excita un
electrón desde el orbital que ocupa en el estado
fundamental a otro orbital de energía más elevada.
Los espectros visibles y UV de las moléculas son
espectros de absorción. Se realizan colocando la sustancia
en un espectrómetro que analiza la energía transmitida,
comparándola con la incidente, para cada longitud de
onda. La mayor parte de los estados excitados tienen vidas
muy cortas, y es lógico preguntarse qué es lo que ocurre
con la energía absorbida.
Absorciones características
Espectro de Absorción
Espectrofotometría de Absorción Atómica
Proceso mediante el cual un átomo libre en estado
fundamental absorbe energía y pasa a un estado de
energía superior, llamado estado excitado.
Componentes:
• Fuente de luz.
• Óptica de la unidad de atomización.
• Unidad de atomización.
• Monocromador.
• Detector.
• Unidad convertidora de respuesta.
• Pantalla de presentación de datos.
Equipo de Absorción Atómica
 Ministerio Público
En el Instituto de Medicina Legal y Ciencias
Forenses del Ministerio Público (ubicado en Av.
Abancay cd. 5) se realizan los siguientes exámenes
periciales: Toma de muestras en personas, toma de
muestras en cadáveres, dosaje etílico, exámenes
tóxicos orgánicos fijos, exámenes de solventes
orgánicos volátiles, de tóxicos metálicos, de gases
tóxicos y cáusticos, determinación de sustancias
químicas y ampliación de peritaje.
 Mensaje Final
Si bien es cierto existen hoy en día profesiones
como las de Ingeniería Química, Química,
Medicina, Ingeniería Ambiental, Biología,
Farmacia y Bioquímica y Toxicología que no
hacen más que orientar una disciplina científica,
tenemos que definir como profesionales en
Toxicología nuestros lineamientos y
posibilidades de desarrollo, para poder afrontar
con éxito los retos que nos depara el futuro.
GRACIAS POR SU ATENCIÓN
 BIBLIOGRAFÍA
• Toxicología Analítica, Slide Share, tema 3,
www.slideshare.net/.../clase-3-tema-3-toxicologia-an
alitica
.
• Toxicología Analítica UNED, versión pdf,
www.uned.es/departamento de -ciencias analitica
s/Posgrado/ToxiAna/toxiana.
• Toxicología Analítica, REDALYC,
www.redalyc.org/articulo.
• Manual de Procedimientos Analíticos Toxicológicos,
www.ataonline.org.ar/bibliotecavirtual/.../
toxicologia_libro_analitica.pdf