Los indicadores son compuestos químicos elaborados

con ácidos o bases débiles, que se caracterizan por dar

lugar al cambio de color de la disolución o sustancia
donde se encuentran al variar el pH. Los indicadores
que forman parte de la fórmula del medio de cultivo,
deben estar en concentraciones muy bajas, para que la
determinación del pH se deba exclusivamente a los
cambios que tiene lugar en la solución.
Los indicadores de pH más
usados son rojo fenol, azul
bromotimol, púrpura de
bromocresol y rojo neutro. Se
usan para demostrar la
producción de ácido por un
hidrato de carbono contenido en
el medio. El azul de metileno y
la resazurina son los indicadores
de Eh (carga iónica) más usados
actualmente. Algunos lotes de
pH y Eh pueden ser tóxicos para
algunos microorganismos y
deben probarse antes de usarlos.
Muy a menudo se añaden al medio de cultivo ciertos
colorantes, bien como indicadores de ciertas
actividades metabólicas o bien por sus capacidades de
ejercer de inhibidores selectivos de ciertos
microorganismos.
Cuando las sustancias añadidas a un medio selectivo
impiden totalmente el crecimiento de una población
microbiana, se denomina inhibidor. Los medios
inhibidores podrían considerarse como una variante
más restrictiva de los medios selectivos. Los medios
inhibidores se consiguen habitualmente por adición de
sustancias antimicrobianas o de cualquier otra que
inhiba completamente el desarrollo de una población
determinada. Un medio inhibidor es el MacConkey
que permite el crecimiento de los gérmenes Gram
negativos e impide el crecimiento de los Gram
positivos.
Au, Ag, Cd, Cr, Pb, y cualquier microelemento a
concentración mayor que 10-4 M puede resultar tóxico
para el desarrollo de los microorganismos.
El Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en
pH básico y amarillo en pH ácido. La Violeta de
Genciana se usa como inhibidor ya que impide el
crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-
positivas).
 Medios Manitol salado Mac Conkey TCBS
selectivos

Tiosulfato de
Carbohidrato Manitol Lactosa sodio, citrato de
sodio, bilis y
sacarosa.

Indicador Rojo fenol Rojo neutro Azul de timol, azul

de bromotimol

Inhibidor NaCl 7 – 7.5 % pH Sales biliares y

cristal violeta

Color del medio Rojo Rojo purpura Verde claro

Vira Amarillo Rosado Amarillo

Microorganismos Staphylococcus Escherichia coli Vibrios

aureus
Un medio de cultivo adecuado ha de contener, como
mínimo, carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales
inorgánicas. En muchos casos serán necesarias ciertas
vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento.
La forma más extendida de aportar estas sustancias a los
medios es utilizar peptona .
Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas
específicas por lo que se añade a muchos medios
sustancias como suero, sangre, líquido ascítico, etc.
Igualmente pueden ser necesarios ciertos
carbohidratos y sales minerales como las de calcio,
magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias
promotoras del crecimiento, generalmente de
naturaleza vitamínica.
Un medio de cultivo está integrado por:
Elementos energéticos y constitutivos:

a) Macroelementos (g/l):
Fuente de carbono: Los hidratos de carbono se
consideran fuente de carbono y energía por excelencia
en los quimio organotrofos. Los más comunes son:
hexosas como glucosa, fructosa, galactosa;
pentosas como arabinosa, xilosa, ramnosa;
disacáridos como lactosa, sacarosa, maltosa;
trisacáridos como rafinosa;
Fuente de nitrógeno: pueden crecer utilizando
moléculas sencillas como NO3-, NH3 ó N2. El nitrógeno
es metabolizado para proveer proteínas, ácidos
nucleicos y polímeros de pared. Otros
microorganismos pueden incorporar nitrógeno en
forma de aminoácidos.
En ciertos medios de cultivo el aporte de nitrógeno es
realizado por las peptonas, que son los productos de
la hidrólisis ácida o enzimática de proteínas de origen
animal o vegetal (carne, soja, caseína, gelatina, harina
de maíz y girasol)., bases púricas o pirimídicas.
Fuente de fósforo: confieren poder buffer al medio de
cultivo (pH cercano a 7). Se incorpora a ácidos nucleicos,
fosfolípidos, polímeros de membrana, ATP, y sustancias
de reserva (gránulos de volutina).

Fuente de azufre: se adiciona como SO4=, cisterna o

metionina. En la célula se incorpora a aminoácidos y
diferentes coenzimas.

Fuente de Ca, Mg y K:. estabilizan macromoléculas

aniónicas. K+ actúa como coenzima y estabilizador de
RNA. Mg2+ se integra a colorofila en organismos
fotosintéticos. Ca2+ abunda en esporas como dipicolinato
de calcio.
b) Microelementos o trazas

Frecuentemente esenciales:
Mn: estimula el crecimiento, favorece la
esporulación.
Fe: cofactor de enzimas para la función respiratoria
en citocromos, catalasa y flavoproteínas.
Co: interviene en la síntesis de vitamina B12.
Cu: presente en oxidasa terminal de la cadena
respiratoria.

Esenciales en casos especiales: B, Al, Si, V, As, Se,

Mo, Sn, Be, F, etc.
Son compuestos orgánicos específicos requeridos en muy
bajas concentraciones que no pueden ser sintetizados por
la célula que los necesita. Deben ser agregados al medio de
cultivo.
Ej.: vitaminas del grupo B, aminoácidos, purinas,
pirimidinas, ácidos grasos, los factores X y V (porfirinas)
de la sangre requeridos por la bacteria Haemophilus
influenzae para crecer. El suero fetal bovino, que aporta
numerosos factores de crecimiento, es imprescindible para
el cultivo de células animales.
Los factores de crecimiento pueden
ser aportados por diversos extractos:
-Extracto de carne: su función es
ser complemento vitamínico de las
peptonas.
Aporta sustancias nitrogenadas
como: aminoácidos, bases púricas y
pirimídicas, ácidos orgánicos,
creatina, xantina, hipoxantina, ácido
úrico, urea, y sustancias no
nitrogenadas como glucógeno,
fosfatos de hexosas, ácido láctico,
sales inorgánicas.
-Extracto de levadura: se obtiene por autolisis o
plasmolisis de las células de levadura. Suplemento
vitamínico de las peptonas, aporta mezclas de
aminoácidos y péptidos, y carbohidratos.

-Extracto de malta: interesante sustituto del extracto

de levadura ya que posee adecuado contenido de
vitaminas, carbohidratos y aminoácidos. Es el extracto
soluble en agua de la malta de cebada.
Químicos Físicos

Factores de
crecimiento
° Físicos

Presión
Temperatura pH
osmótica
• Crecimiento • 6.5 – 7.5 • Requieren
entre 12 y 14 agua para su
hrs. crecimiento
• Carbono

• Nitrógeno, fósforo, azufre

• Elementos trazas (Cu, Fe, Mo, Zn)

• Oxígeno

• Factores orgánicos de crecimiento

Factores intrínsecos (propios del alimento):
Actividad de agua, disponibilidad de nutrientes, pH,
capacidad tampón, sustancias antimicrobianas.

Factores de proceso o tratamiento (Modifican la

composición de micro flora)
Físicos: calentamientos, irradiación
Químicos: cambios de pH, inoculación de
m.o.(producción de ácidos), agentes conservadores
Extrínsecos: T. almacenamiento, Humedad atmosférica,
Gases de la atmosfera
Implícitos : interacciones de los 3 factores anteriores
con otros m.o. del alimento.
Gracias……………………..