DEFINICIÓN

Consiste en la propagación de
plantas en un ambiente artificial,
controlado ,aséptico, en
recipientes que lo separan del
medio exterior empleando, un
medio de cultivo adecuado. Partir
de un fragmento(ex plante)de
una planta madre
 Producción de plantas de
calidad uniforme a escala
comercial El medio de cultivo se
compone de sales
minerales,vitaminas,re
guladoras de
crecimiento ,azúcar
aguay agar
A partir de un genotipo
selecto y con una tasa de
multiplicación ilimitada.

Se controla cantidad
de horas de luz

Se utiliza una parte del órgano

o tejido vegetal que se cultiva
(yemas vegetativas de las
plantas
Plantas en estantes Se fija temperaturas
,con luz artificial, que oscilan entre
dentro de la cámara los 21 y 23 °C
de crecimiento
 FACTORES NO BIOLOGICOS QUE AFECTAN
LA MICROPROPAGACION

-COMPOSICION DEL
MEDIO DE CULTIVO
AMBIENTE QUIMICO -PH

-Temperatura
AMBIENTE FISICO -Luz y fotoperiodo
-Humedad
 FASES DE LA MICROPROPAGACION

Fase O :PREPARACIÓN DE LA PLANTA MADRE

Asepsia Riego para

Crecimient
o vigoroso
y libre de
Nivel enfermeda
nutricional des
y grado de
desarrollo Condiciones
adecuado Tiempo
Sanitarias
optimas
 FASE 1 : DESINFECCION DEL MATERIAL VEGETAL

Antes de extraer los

Se extraen ex plantes, se realiza Desinfección del
fragmentos a partir una desinfección, material con
de las cuales se para eliminar los hipoclorito de sodio
obtendrán los ex contaminantes pura o diluida
plantes: Los ex externos (hongos, durante 5 a 15
plantes pueden ser bacterias). minutos seguidos
yemas ,trozos de Mantener en por 3 a 4 enjuagues
hojas ,porciones de condiciones de en agua esterilizada
raices,semillas etc. asepsia.
 FASE 2 : INTRODUCCION DEL MATERIAL IN VITRO

Luego de la desinfección
superficial ,se pone tanto
semillas como en medio de
cultivo estéril un periodo de
una semana o quince días
,comienza el proceso de
germinación o regeneración a
nuevos tejidos vegetales
,iniciando el ciclo de cultivo in
vitro
 FASE 3 : MULTIPLICACION DE LOS BROTES

 Mantener y aumentar la cantidad de brotes .

 Es conveniente evitar la variación soma clonal.
 Muy importante los medios de cultivos,
reguladores del crecimiento como auxinas
,giberelinas y citoquininas y las condiciones
de crecimiento

 Periódicamente los nuevos brotes se deben

subcultivar en un nuevo medio en un nuevo medio
mediante divisiones y siembras en tubos de cultivo u
otros recipientes adecuados .
 Estas operaciones se realizan en la cámara de flujo
laminar o en un lugar aislado ,condiciones de asepsia.
 El numero de plantas que se obtiene dependerá de las
especie vegetal y de las condiciones del medio de
cultivo
FASE 4 : ELECCION DE UN MEDIO DE ENRAIZAMIENTO
DE LOS EXPLANTES

 Para enraizar los explantes se utiliza

plantines individuales de un tamaño
aprox. de 2cms
 Los brotes ,obtenidos durante la fase de
multiplicación se transfieren a un medio
libre de reguladores de crecimiento o que
solo contenga hormonas del tipo auxinas.
 Algunas especies de plantas no necesitan
pasar por esta etapa y emiten sus raíces en
el mismo medio de cultivo donde
desarrollan yemas nuevas ,por lo tanto el
proceso de enraizamiento transcurren al
mismo tiempo en forma simultanea.
FASE 5 :ACLIMATACION DE LOS EXPLANTES ENRAIZADOS

Los explantes recién enraizados son muy sensibles a los

cambios ambientales ,el éxito o fracaso de todo el proceso
depende de La aclimatación

En esta etapa sufren cambios de diferentes tipos que permiten

la adaptación de vivir en condiciones naturales

Cuando se extraen los explantes o plantines de los frascos

,están poco adaptados a crecer en un invernáculo ,ya que estos
explantes han enraizado y crecido en ambientes con humedad
relativa muy elevada

Tienen estomas (estructuras responsables de regular la

transpiración y perdida de agua en la planta
 DESINFECCION DEL MATERIAL
VEGETAL

 Trabajar en cabinas de flujo laminar para extraer los explantes a partir del material
vegetal.
 Introducir en un tubo de cultivo conteniendo medio de iniciación para poder
controlar la sanidad y la viabilidad.
 Realizar la desinfección del material con hipoclorito de sodio (agua clorada
comercial), pura o diluida durante un período de 5 a 15 minutos, seguido por 3 a 4
enjuagues en agua esterilizada.
 Lavar el material biológico con detergente y enjuagar para eliminar polvo, insectos
etc.… Mantener el material en un ambiente aséptico, donde se sumerge por unos
minutos en etanol al 70%.
 Sumergir el material biológico en el agente desinfectante para eliminar los
microorganismos.
 El tiempo de desinfestación es importante ya que si es prolongado puede dañar el
tejido del inóculo y si es corta los microorganismos no serán removidos.
 Lavar el material biológico con agua destilada estéril para eliminar el agente
desinfectante, el inóculo debe mantenerse en agua destilada hasta el momento de
la siembra
 DIFERENCIA DE PLANTAS IN VITRO E IN VIVO

Plantas en condiciones
Plantas en laboratorio( in vitro) Naturales ( in vivo)

 Realiza fotosíntesis.
 No realiza fotosíntesis
 Crecimiento en condiciones
 Crecimiento en condiciones
no controladas .
controladas
 Exposición a los patógenos
 Crecimiento en condiciones
y gérmenes del ambiente.
de asepsia
 Humedad relativa variable.
 Alta humedad relativa.
 Estomas funcionales.
 Estomas no funcionales.
 Presencia de pelos
 Ausencia de pelos radiculares.
radiculares.
 Ausencia de ceras en la
 Presencia de cera en la
cutícula.
cutícula.
Micropropagación in vitro de la variedad de tomate
Unapal-Arreboles
 MICROPROPAGACION
VENTAJAS
 Los cultivos pueden iniciarse
con partes muy pequeñas de
la planta.
 Se puede producir plantas
difíciles de propagar ,de
cualquier parte del mundo.
 El proceso es independiente
de las condiciones externas.
 La multiplicación in vitro es
mucho mas rápida
 La producción en serie en
grandes cantidades.
 Plantas libres de bacterias,
hongos ,nematodos
DESVENTAJAS
 Alto costo inicial del laboratorio.
 Las plantas inicialmente obtenidas
son pequeñas y algunas veces con
características indeseables .
 Debe prevenirse la contaminación
de las plantas madre.
 Necesita largos tiempos para
enraizamiento y aclimatación.
 Se requiere de personal capacitado.
 En caso de introducir nuevas
especies se requiere largos periodos
de investigación