Sebastian Velasco Rueda COD: 2142138

Simon Gonzales Acevedo COD: 2142121

Jess David Ramrez Pez COD: 2142115
Alvaro Bohrquez Prez COD: 2132512
DIAGRAMA DEL PROCESO

Figura 1. Diagrama de bloques del proceso de obtencin del cido

Succnico. Adaptado de: (Hyohak M, Maria MM) [2][7].
 MATERIAS PRIMAS
Tabla 1. Comparacin en %Peso Seco componentes del Bagazo de la Caa de Azcar
(Valencia DM) [4].

= CELULOSA

100 % -Glucosa Figura 2. Caa de azcar (Maria MM, et

Figura 3. Estructura de la celulosa. Disponible:
https://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa [5].
al. [2]
CARACTERIZACIN FISICO-QUMICA DEL SUSTRATO
Tabla 2. Propiedades Fisico-Qumicas del Bagazo de Caa B. (Hames et Al,) [3].
 MANNHEIMIA SUCCINIPRODUCENS
MBEL55E

Es una bacteria Gram negativa, capnfila,

aislada del rumen bovino.
El precultivo de M. Succiniciproducens
MBEL55E se realiz en una matriz
anaerbica sellada que contena 250mL de
un medio compuesto por extracto de
levadura 5 g/L, NaCl 1g/L, CaCl2.2H20 0,2
g/L, MgCl2.6H20 0,2 g/L y K2HPO4 8,709
g/L [7].
 El
medio con CO2 como la fase gas fue esterilizado
con calor a 121C por 15min.
El
pH del medio fue ajustado a 7.0 adicionando 5N
de NaOH.
Seaadi glucosa esterilizada por separado en el
medio hasta una concentracin final de 50 mM como
fuente de carbono justo antes de la inoculacin[7].

M. Succiniciproducens MBEL55E [7]

CH1.736O0.367N0.240

PESO MOLECULAR =22.968
 CRECIMIENTO MICROBIANO
Tabla 3. Datos de tiempo vs concentracin de glucosa vs
concentracin de biomasa vs concentracin de cido succnico. [7]

Tiempo(h) X(g/L) S(g/L) P(g/L) Curva de crecimiento

0 0,0200 18 0 microbiano
1,0034 0,1380 17,6 0,3031 3.5

2,0072 0,3966 17,3 0,5317 3

2,4978 0,6363 16,7 0,7579 2.5

X (g/L)
3,0122 1,0165 15,9 1,2080 2

3,5039 1,5776 13,7 2,1059 1.5

1
4,5096 2,3983 8,42 4,3493
0.5
5,5142 2,8978 4,82 5,7720
0
6,5176 3,0359 1,39 7,1572 0 1 2 3 4 5 6 7 8

Tiempo (h)
7,5203 2,9932 0,0279 7,9081
Figura 4. Perfiles de tiempo de la biomasa en cultivos batch con M.
Succiniproducens MBEL55E con concentracin inicial de glucosa de 18
(g/L). S. Hyohak et al (2008) [7].
CRECIMIENTO MICROBIANO REGRESIN
LOGARTMICA
Curva de crecimiento microbiano
2

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8

-1
ln(X)

-2

-3

-4

-5

Tiempo (h)
Figura 5. Perfiles de tiempo de la biomasa en cultivos batch con M. Succiniproducens
MBEL55E con concentracin inicial de glucosa de 18 (g/L) Modelo adaptado ajustado
logartmicamente. S. Hyohak et al (2008) [7].
 FACTORES AMBIENTALES

La M. Succiniciproducens MBEL55E es una

bacteria:
Mesfila: Temperatura ptima entre 20 y 40C.
Neutrfila: pH ptimo entre 5.5 y 7.5
Hetertrofa: Fuente de carbono orgnico para
su alimentacin.
Capnfila: Favorecimiento al crecimiento
cuando el medio es CO2.
 GLUCOSA

Monosacrido, C6H12O6.
Compuesto orgnico ms abundante de
la naturaleza.
Se puede encontrar en:
Almidn de cereales
Plantas
Frutas
Figura 6. Estructura molecular de la glucosa.
Disponible: https://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa [5].
 ESTEQUIOMETRA DEL
PROCESO
NaCl + CO2
CaCL2.2H2O
MgCl2.6H2O
+ H2O
Anaerobio
K2HPO4
NaOH
+ O2 CH1.736O0.367N0.240 + C 4 H 6 O4 Producto
Biomasa
C6H12O6 Fuente de C
NH3 Fuente de N
+ C 2 H 4 O2
Subproductos + CH2O2
+ C 3 H 6 O3
 BALANCE ELEMENTAL
C6H12O6 + bNH3 cCH1.736O0.367N0.240+ dCO2 + eH2O+ fC4H6O4

Balance de C 6 = + + 4 = 1.2962
Balance de H 12 + 3 = 1.736 + 2 + 6
Balance de O 6 = 0.367 + 2 + + 4 b = 0.3111
Balance de N = 0.24 c = 1.2962
d = -0.5675

2.9932 0.02 e = 1.3880
Yxs = = 0.1654 f = 1.3178
18 0.0279


180
Yxs = 0.1654 =
22.968

 BALANCE ELEMENTAL
C6H12O6 + dCO2 + bNH3 cCH1.736O0.367N0.240 + fC4H6O4
+ eH2O
Balance de C 6 + = + 4 = 1.2962

Balance de H 12 + 3 = 1.736 + 2 + 6
Balance de O 6 + 2 = 0.367 + + 4 b = 0.3111
Balance de N = 0.24 c = 1.2962
d = 0.5675
e = 1.3880
2.9932 0.02 f = 1.3178
Yxs = = 0.1654
18 0.0279


180
Yxs = 0.1654 =
22.968

C6H12O6 + 0.5675CO2 1.2962CH1.736O0.367N0.240
+ 0.311NH3 + 1.3178C4H6O4
+ 1.388H2O
 INHIBICIN POR SUSTRATO

Se realizaron experimentos para 1, 3, 6, 10,

18, 28, 41, 49, y 66 g/L.

Cuando S> 18 g/L de Glucosa empieza a

disminuir.

A estas condiciones se debe considerar

inhibicin por sustrato en el modelo.

Figura 7. Velocidad de crecimiento especfico vs sustrato

inicial.

S. Hyohak et al (2008) [7].

 DATOS Y CONDICIONES PARA EL EXPERIMENTO EN
BATCH
Tabla 4. Datos experimento batch. Condiciones
V= 5 L / Vtr=2,5 L T=39C
tiempo(h) X(g/L) S(g/L) P(g/L)
0 0,0200218 18 0 Velocidad de agitacin: 200 rpm
1,00338 0,138045 17,6 0,303121
2,00717 0,396572 17,3 0,531716 pH: 6,5 estabilizado con solucin de 3 28% v/v
2,49778 0,636306 16,7 0,757904
3,01219 1,01654 15,9 1,20797 Glucosa como sustrato 18 g/L
3,50388 1,57756 13,7 2,1059
4,50958 2,39834 8,42 4,34932 Anaerobio: Burbujeo de 2 0,25 vvm constante y
5,51419 2,89783 4,82 5,77195 trampa de oxgeno a la salida del tanque.
Procedimientos
Analticos
Concentraciones de Glucosa y cido Succnico HPLC con ndice de refraccin (Varian
ProStar).

Anlisis crecimiento celular Espectofotmetro (Ultrospec3000)

S. Hyohak et al (2008) [7], J. Huwaldt [9] .
 AJUSTE DE PARMETROS PARA ENCONTRAR
EL MODELO DE CRECIMIENTO CINTICO
Tabla 5. Velocidades especficas experimentales y vs s
modeladas.
30
monod inhibicion
2,37792691 28,4220848 0,79587727 25

0,42604088 28,4095453 0,77866602

(1/h)
20
0,32472147 28,3997678 0,76574379
experimental
0,38396994 28,379181 0,73986379
15 monod
0,36356919 28,3493679 0,70528322
0,36163553 28,2498844 0,6097488 10

0,40806404 27,807634 0,37781239

5

0
6 8 10 12 14 16 18 20
s (g/l)

Ecuacin 1. Modelo de inhibicin sustrato Figura 8. Velocidad de crecimiento versus concentracin de

producto original del estudio. sustrato.

S. Hyohak et al (2008) [7].

 MODELO DE INHIBICIN POR SUSTRATO NO
COMPETITIVO
vs s
2.5

=
2 2
+ +

1.5
Modelo de inhibicin por
sustrato NO competitivo
(1/h

experimental
inhibicion Modelo de velocidad de
1
crecimientoM. L. Shuler et al [10].

0.5
29
=
2
637,8795 + +
0 625835,67
6 8 10 12 14 16 18 20
S (g/l)
Figura 9. Velocidad de cremiento versus concentracin de
Solucin para el modelo
sustrato. NO competitivo
DATOS Y CONDICIONES PARA EL EXPERIMENTO EN CONTINUO

Condiciones
Tabla 6. Datos experimento en Continuo.
= 1 L (FBB) / =0,6 L T=38C

D X(g/L) S(g/L) P(g/L) Velocidad de agitacin: 150 rpm

0,1 8,28320714 3,4 38,72 pH: 6,5 estabilizado con solucin de 2 M

0,2 8,37555125 12,7247625 32,6401
Glucosa como sustrato 50 g/L
0,4 8,370045 29,299425 15,999525
Anaerobio: flujo constante de 2 y 2 0,1 L/min
Procedimientos
Analticos Muestras 4-6 h de la salida de B

Concentraciones de Glucosa y cido Succnico UPLC con ndice de refraccin (Aminex

HPX-87H).

Anlisis crecimiento celular Densidad ptica calculada con 660

nm(660 )
Y. Qiang et al [8], J. Huwaldt [9].
DATOS Y CONDICIONES PARA EL EXPERIMENTO EN CONTINUO
Figura 11. Experimento en Continuo

Figura 10. Efecto del flujo de dilucin en las sustancias del proceso en un
reactor continuo con concentracin inicial de glucosa de 50
(g/l) Y. Qiang, el al (2017) [8].
 PRUEBA DE MONOD
Linealizacin de Monod
0.35

0.3

0.25
1 1
= 0,0359 0,0736
0.2
1/

0.15
y = 0.0359x - 0.0736
R = 0.9704 El modelo tendra una
0.1
razn de crecimiento
mxima negativa
0.05

0
0 2 4 6 8 10 12

1/s
Figura 12. Linealizacin del modelo de Monod.
 PRUEBA DE MODELOS PARA EL AJUSTE DE
PARMETROS CINTICOS
vs s experimental

0.45 inhibicion sustrato no

competitiva Tabla 7. Datos modelos en Contnuo.
blackman
0.4 inhibicion sutrato no competitiva KI>>Ks
max Ks KI inhibicion error
0.35 1,5341243 75,5483358 100 0,06597221 0,00115789
0,217163969 0,0002946
0.3 0,396262355 1,397E-05
promedio error 0,00048882
(1/h)

0.25 modelo blackman

max Ks blackman error
0.2 0,26771644 9,45811207 0,04811932 0,002691605
0,18009028 0,000396397

0.15
= 0,41466721 0,000215127
2
promedio error 0,001101043
0.1
inhibicion competitiva
max Ks KI inhibicion error
0.05
1,5341243 75,5483358 100 0,06398695 0,00129694
0,19942871 3,2637E-07
0
0 5 10 15 20 25 30 35 =
0,35397623 0,00211819
1+ +
s (g/l)
promedio
error 0,00113848
Figura 13. Velocidad de crecimiento versus concentracin de
sustrato. Y. Qiang et al [8].
 BIBLIOGRAFA
[1] El Sector Azucarero Colombiano En La Actualidad. Sector Agroindustrial de la
Caa. Disponible en: http://www.asocana.org/publico/info.aspx?Cid=215. Acceso
29 de Octubre de 2017.
[2] Mara MM ,Castillo AA ,Rosales TC, Baeza MJ, Campos FJ, Octaviano VH.
Estudio de la cintica de la hidrlisis cida del bagazo de caa de azcar sin
pretratamiento para la obtencin de azcares reductores. 2011;12(1): 154-158
[3] B. Hames, R. Ruiz, C. Scarlata, A. Sluiter, J. Sluiter, and D. Templeton,
Preparation of Samples for Compositional Analysis, National Renewable Energy
Laboratory, 2008.
[4] Valencia DM. Produccin de etanol a partir de bagazo de caa panelera
mediante un sistema hbrido de fermentacin y pervaporacin. Manizales,
Colombia; Universidad Nacional de Colombia. 2011.
[5]Glucosa. Wikipedia. Disponible en: https://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa.
Acceso Acceso 29 de Octubre de 2017.
[6] ASADULLAH, M. et al. Production of bio-oil from fixed bed pyrolysis of bagasse
Fuel. 2007; 86: 2514-2520
[7] S. Hyohak, H. H. Seh, M. P. Jong, Y. L. Sang, Modeling of batch fermentacion kinetics
for succinic acid production by Mannheimia succiniciproducens. Biochem. Eng. J. 40
(2008) 107115.
[8] Y. Qiang, Z. Pu, T. Sheng-Tao, D. Jin-Jun, Fermentation process for continuous
production of succinicacid in a fibrous bed bioreactor, Biochem. Eng. J. 91 (2014) 9298.
[9] Joseph A. Huwaldt Plot Digitizer. Disponible en: http://plotdigitizer.sourceforge.net/.
Acceso 26 de Octubre de 2017.
[10] Shuler M, Kargi F. Bioprocess Engenieering Basic Concepts. Editorial Pearson
Education. 2002. pag 130-150