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Proyecto Regional TCP/RLA/3107
Proyecto Regional TCP/RLA/3107
Taller Nacional
Santiago, 27 de octubre 7 de noviembre de 2008
Contenido de Agua y Materia
Grasa
Prof. Lilia Masson Salaue
lmasson@ciq.uchile.cl
Universidad de Chile,
Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacuticas ,
Centro de Investigacin y Desarrollo en Grasas y
Aceites, CIDGRA
Departamento de Ciencia de los Alimentos y
Tecnologa Qumica,
Mtodos de determinacin de agua
en un alimento o bebida
La determinacin del porcentaje de agua en un
alimento natural o procesado tiene diversas
connotaciones:
1.- Es la base de referencia para calcular su
aporte energtico a partir de los porcentajes de
macronutrientes:
Protenas
Hidratos de carbono
Materia grasa: AG Sat. Monoinsat. Poliinsat. 6,
3, AG.trans, colesterol
Es la base del etiquetado nutricional en la
expresin porcentual o por porcin, no
slo de macronutrientes sino de:
- Cenizas o contenido mineral
- Fibra dietaria
- Micronutrientes: minerales y vitaminas
- Componentes bioactivos
Informacin complementaria
Contaminantes inorgnicos y orgnicos
Componentes txicos naturales o
generados en el procesamiento
Importancia de su determinacin
Es la base de referencia para:
Caracterizar un alimento
Comparar alimentos en base seca o a un
contenido de agua fija pre-determinada
Realizar estudios de variaciones estacionales
que se producen en diversos alimentos, como
peces grasos, en que la relacin agua,
contenido graso es inversa, mantenindose
constante el contenido proteico
Extraccin de materia grasa en alimentos
frescos
Mtodos de determinacin de
humedad
Los mtodos para determinar el contenido
de agua en alimentos naturales y
procesados se basan en la medida directa
o indirecta del agua retirada de un
alimento
La medicin de algunas propiedades
fsicas del alimento que cambian
sistemticamente con el contenido de
agua
La medicin de la reactividad qumica del
agua
Mtodos de secado
Los mtodos de secado son mas
convenientes para alimentos que se estn
analizando con fines nutricionales
La liofilizacin o secado por congelacin
ofrece la ventaja que el agua se retira
bajo condiciones muy suaves
El tejido deshidratado puede emplearse
para la determinacin de diversas
sustancias y es fcil de homogeneizar
El material liofilizado es liviano y fcil de
transportar
Desventaja: Los liofilizadores son caros
El agua residual debe retirarse de la
muestra liofilizada por presin reducida
O sobre desecantes adecuados
Esto aade una segunda etapa en el
anlisis
El desecado de la muestra en estufa de
vaco entre 60 70C es ms eficiente, si
una corriente de aire seco lenta se pasa a
travs del horno.
Tiene la ventaja que las porciones
analticas pueden mantenerse por un
tiempo (toda la noche) antes de su
posterior tratamiento
Requieren mnima intervencin del
personal del laboratorio
Costos de capital bajos
Este mtodo es preferible al secado en
estufa de aire forzado a 100-105C, un
procedimiento ampliamente usado y de
bajo costo
Secado en aire a presin normal
No es conveniente para muchos alimentos
Especialmente los con alto contenido de
azcares que puede caramelizar
Grasas que pueden sufrir oxidacin o
prdida de materias voltiles como aceites
o aceites esenciales
Secado en microonda
Ofrece la ventaja de la rapidez
Requiere permanente vigilancia del
personal del laboratorio para prevenir que
la muestra se queme
Mtodo termovolumtrico
Mtodo de destilacin por arrastre de
vapor con tolueno o xilol de acuerdo a
Dean y Stark
Es aplicable a muchos alimentos y sobre
todo a los que contienen cantidades
significativas de compuestos voltiles
diferentes al agua como las especias, que
contienen aceites esenciales
Mtodo qumico
Karl Fisher. Tiene una exactitud mayor
que la necesaria para un anlisis
nutricional de un alimento
Es til en alimentos de muy bajo
contenido de agua, menos de 5 %,
principalmente los higroscpicos.
Mtodos Instrumentales
Se basan en una propiedad fsica del alimento
Alta velocidad en la obtencin de resultados
Ej: NMR, NIR, Irefraccin
Se emplean en laboratorios que manejan un alto
nmero de muestras de alimentos similares
Tienen mayor aplicacin en alimentos de humedad
intermedia 5 - 20%.
ADVERTENCIA!
Todos los mtodos de secado liberan
compuestos voltiles junto con el agua. Y
deben hacerse correcciones por voltiles
obvios como el etanol.
Mtodos para determinar Materia
grasa
Grasa Total
La grasa de un alimento consiste de un
nmero de diversos compuestos tanto
unidos como libres.
Encontrar un mtodo que como una
entidad nica. mida la grasa total,
normalmente presenta bastante
problemas
Por lo tanto, hay diversos mtodos
disponibles y que se practican
habitualmente en los laboratorios
analticos
Los valores obtenidos por cada mtodo
para grasa total dependen en gran
medida del mtodo empleado,
especialmente en el caso de alimentos
bajos en grasa.
Mtodos de extraccin con
solvente
Soxhlet es de extraccin discontinua
Butt extraccin continua
Se debe trabajar sobre muestra seca en el
laboratorio
Tienen aplicacin limitada, no son los mas
recomendados, dado que en muchos
alimentos naturales y especialmente los
procesados la materia grasa se une a
carbohidratos y protenas
Hay muchos tejidos que contienen
cantidades importantes de fosfolpidos
Gran consumo de tiempo
Extracciones incompletas
especialmente en cereales
Las muestras estn sometidas a altas t
por tiempos prolongados
No es recomendable para materias grasas
altamente poliinsaturadas
Es mtodo oficial para la extraccin de
aceite de semillas
Variante Mtodo Foss automtico usa
tetracloro etileno para extraer la rasa
rpidamente
Ha funcionado bien en productos crneos
Problemas adicionales
Uso de solventes inflamables:
ter etlico, ter de petrleo, hexano
Son solventes txicos
Los valores del extracto graso no son los
mismos si se usa eter etlico que es mas
polar que hexano o ter de petrleo 40-
60C que son menos polares
CONLUSIN
Empleo de Mtodos alternativos
Mtodos Alternativos
Empleo de mezcla de solventes polares y
no polares
Mtodo de Bligh y Dyer y de Folch
Ambos extraen los lpidos en forma ms
completa, pues extraen los fosfolpidos
Dependiendo de la muestra a veces se
requiere una purificacin del extracto
Aplicaciones:
En nuestra experiencia cuando se va a
estudiar o a investigar los lpidos del
extracto, como composicin en cidos
grasos, tocoferoles, fitosteroles,
pigmentos carotenoides, clorofila, se
recomienda aplicar estos Mtodos.
Para Alimentos aplicamos normalmente
Bligh y Dyer
Para fluidos biolgicos: plasma. glbulos
rojos Folch
Fundamento
Cuando se tiene un alimento hmedo y se
homogeniza con una mezcla de cloroformo
metanol en determinadas proporciones, que
son Cloroformo: Metanol : Agua 1:2:0.8 se
forma entre los tres solvente un sistema
miscible.
Este sistema permite extraer los componentes
lipdicos del tejido, sean triglicridos,
fosfolpidos, derivados lipdicos, etc. en su
totalidad.
Esta primera extraccin exige que la matriz del
alimento a extraer contenga 80% de humedad
Para lo cual es requisito indispensable
determinar previamente el contenido de agua
del alimento y ajustar a 80% en caso necesario
Una vez efectuada la primera homogeneizacin
y extraccin simultnea de la materia grasa del
alimentos con la mezcla cloroformo, metanol,
agua en la proporcin sealada, se
desestabiliza esta mezcla homognea de
solventes por adicin de 1 parte adicional de
cloroformo y 1 parte de agua, se llega a esta
proporcin:
Cloroformo: Metanol: Agua = 2:2:1.8
En esta proporcin se desestabiliza la
mezcla terciaria de los tres solventes y se
separa la capa clorofrmica que disuelve
los lpidos y la fase agua /metanol que no
disuelve lpidos.
3.- FUNDAMENTO
El mtodo se basa en la determinacin gravimtrica de
la perdida de masa, de la muestra desecada hasta masa
constante en estufa de aire.
4.- REFERENCIAS
4.1 Instituto Nacional de Normalizacin, NCh 841 of 78
4.2 Official Methods of Analysis. A.O.A.C. 15th Edition 1990
5.- TERMILOGIA
N/A
7.- PROCEDIMIENTO
7.1.- Efectuar el anlisis en duplicado
7.2.- Colocar la cpsula destapada y la tapa durante al
menos 1 hora en la estufa a la temperatura de secado
del producto.
7.3.- Empleando pinzas, trasladar la cpsula tapada al
desecador y dejar enfriar durante 30 a 45 min. Pesar la
cpsula con tapa con una aproximacin de 0.1 mg. Registrar
7.4.- Pesar 5 g de muestra previamente homogeneizada.
Registrar (m2).
7.5.- Colocar la muestra con cpsula destapada y la tapa en
la estufa a la temperatura y tiempo recomendado 105 C
x5 horas.
7.6.- Tapar la cpsula con la muestra, sacarla de la estufa,
enfriar en desecador durante 30 a 45 min.
7.7.- Repetir el procedimiento de secado por una hora
adicional, hasta que las variaciones entre dos pesadas
sucesivas no excedan de 5 mg (m3).
8.- CALCULO Y EXPRESIN DE RESULTADOS
La humedad del producto expresada en porcentaje, es igual
a:
m2 - m3
% Humedad = ---------------- x 100
m2 - m1
donde:
m1: masa de la cpsula vaca y de su tapa, en gramos
m2: masa de la cpsula tapada con la muestra antes del
secado, en gramos
m3: masa de la cpsula con tapa ms la muestra desecada,
en gramos
Promediar los valores obtenidos y expresar el resultado con
dos decimales.
Repetibilidad: La diferencia de los resultados no debe ser
superior al 5% del promedio.
En el informe de resultado, se indicar mtodo utilizado,
identificacin de la muestra, temperatura, tiempo de secado y
DETERMINACIN DE
PROTEINAS
Mtodo Kjeldahl
1.- OBJETIVO
Determinar la concentracin de nitrgeno presente en la
muestra para luego ser transformado a travs de un
factor en protena.
3.- FUNDAMENTO
El mtodo se basa en la destruccin de la materia
orgnica
con cido sulfrico concentrado, formndose sulfato de
amonio que en exceso de hidrxido de sodio libera
amonaco, el que se destila recibindolo en:
a) Acido sulfrico donde se forma sulfato de amonio y el
exceso de cido es valorado con hidrxido de sodio en
presencia de rojo de metilo, o
b) Acido brico formndose borato de amonio el que se
4.- REFERENCIAS
4.1.- A.O.A.C. Official Methods of Analysis 13 th Edition,
1984.
4.2.- FAO Food and Nutrition Paper 14/7 Roma, 1986
5.- TERMINOLOGIA
N/A
3.0 FUNDAMENTO
Los cidos grasos metilados de las muestras son
separados y cuantificados por cromatografa gaseosa con
detector FID en columna capilar de fase reversa.
4.0 REFERENCIAS
ISO 15304 Animal and vegetable fats and oils
Determination of the content of trans fatty acid isomers of
vegetable fats and oils Gas chromatographic method.
5.0 TERMINOLOGA
Acidos grasos trans: ismeros de configuracin trans de
todos aquellos cidos grasos que contienen dobles
enlaces.