BACILOS GRAM

NEGATIVOS
ENTEROBACTERIAS
Curso Microbiologa Bsica Mdica
E . A. P. Medicina
Dra. Nelly Borja SC.
ENTEROBACTERIAS

2
 FAMILIA

ENTEROBACTERIACEAS

8 TRIBUS
14 GENEROS

*SECCIN 5, 2da EDICIN BERGEY

 Estos bacilos se encuentran distribuidos en
la naturaleza tanto en el agua como en la
tierra las plantas y el tracto digestivo del
hombre y los animales.

4
 La presencia de estos microorganismos en
el agua o alimentos indica contaminacin
fecal.
Son cosmopolitas o ubicuas como el gnero
Klebsiella o de distribucin limitada como
el Gnero Salmonella typhi.

5
 TRIBU I Escherichieae , dos
gneros Escherichia y Shiguella
 TRIBU III
Salmonelleae : las que estn agrupadas
sobre la base de antgenos somticos O
(A,B,y C) y serotipos por el antgeno
flagelar H (A1,A2,B1 y B2)
TRIBU V :
Klebsielleae : con cuatro gneros
Klebsiella, Enterobacter, Hafnia y
Serratia

KLEBSIELLA
TRIBU VI
Proteae : tres gneros Proteus,
Morganella,Providencia
TRIBU VII
Yersinieae : con un solo gnero
Yersinia
 CARACTERSTICAS BIOLOGICAS

Las enterobacterias son bacilos

Gram negativos rectos de 0.4 a
0.6 de dimetro por 2 a 3 micras
de largo.

11
 No forman esporas, son
anaerobios facultativos, mviles o
inmviles, fermentan los azucares
como la glucosa, son catalasa
positivos y oxidasa negativos.

12
 CLASIFICACION
De cuerdo a sus caractersticas
bioqumicas, antignicas y genticas as
como por su capacidad patognica.
Se reconocen las patgenas verdaderas o
primarias y las oportunistas o
potenciales,cuando se ubican en tejidos u
rganos distintos a su hbitat natural.

13
 PATOGENICIDAD
Factores de virulencia: Adhesinas ,
Endotoxinas, Cpsula y algunas
protenas de membrana externa.
Estas caractersticas se dan por la
presencia de genes de virulencia
presentes en el cromosoma bacteriano
muchos de ellos procedentes de
plsmidos, transposones o bacterio fagos
que lo adquieren del medio externo. 14
 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN
Las enterobacterias pueden crecer en medios
simples No enriquecidos o en medios selectivos
diferenciales o enriquecidos .
Los medios de cultivo deben contener sustancias
que inhiban el crecimiento de otras bacterias como
las Gram positivas y Gram negativas NO
entricas ejem. Citrato sdico, Eosina, Sales
biliares, Cristal violeta etc.; siendo el Agar de Mac
Conkey el tradicionalmente usado.

15
AGAR MAC CONKEY
En este medio se puede clasificar e
identificar a las entero bacterias por su
capacidad de utilizar la Lactosa por la va
de la fermentacin alcohlica
produciendo CO2 y gas.
Se identifican los gneros denominados
Lactosa (+) como Eschericchia,
Klebsiella, Enterobacter y los NO
fermentadores Lactosa () como
Salmonella, Proteus, Shiguella, etc.)

16
LACTOSA NEGATIVO LACTOSA POSITIVO
17
 Recuperada la bacteria de la muestra
clnica se procede a identificarla mediante
pruebas bioqumicas (biotipificacin)que
detecten el uso de los nutrientes durante
el metabolismo de la bacteria.

18
En determinadas circunstancias para precisar
el poder patgeno de la bacteria se requiere
realizar adems pruebas para la deteccin de
sus Antgenos como el O (Somtico), K Vi
(Capsulares) Y H (Flagelares) lo que permite
clasificarlas en Serogrupos y Serotipos.

19
 Fagotipificacin: de valor en Salmonella
Y E. coli
Antibiotipificacin: patrn de
susceptibilidad a antibiticos.
Virotipificacin: apara detectar Genes
de virulencia.
Genotipificacin molecular : para
clasificarlos por grupos clonales, etc.
 PRUEBAS BIOQUIMICAS
CONVENCIONALES
TSI : Triple Sugar Iron).
Este medio se emplea
para detectar la
fermentacin de lactosa,
sacarosa y glucosa, con
formacin de cido y gas
y, tambin para detectar
la produccin de cido
sulfhdrico. Como
hidrogeno sulfurado.

21
RM-VP: Las Enterobacterias que no utilizan la
va de la fermentacin alcohlica se evalan
mediante las pruebas de Rojo de metilo y
Voges Proskauer (Caldo RM VP)
La prueba de Voges-Proskauer
(VP)sirve para comprobar la capacidad
de algunos organismos de producir un
producto final neutro, el
acetilmetilcarbinol (acetona) a partir
de la fermentacin (butilengliclica)
de la glucosa.
La prueba del rojo de metilo (RM) sirve
para comprobar la capacidad de un
organismo de producir y mantener
estables los productos terminales
cidos de la fermentacin (cido
mixta) de la glucosa.
22
Medio Movilidad-Indol-
Ornitina (MIO)
Se emplea para determinar
la movilidad de la bacteria
y la presencia de la enzima
ornitina decarboxilasa con
la produccin de Indol.

23
 Agar Citrato de
Simmons (Simmons
Citrate Agar).
Esta prueba sirve para
determinar si un organismo
es capaz de utilizar citrato
como nica fuente de
carbono y compuestos
amoniacales como nica
fuente de nitrgeno en su
metabolismo, provocando
una alcalinizacin del medio
virando de verde a azul.
24
Catalasa.
Esta prueba sirve para comprobar en
el microorganismo aislado la
presencia de la enzima catalasa.

+
25
Ureasa.
Esta prueba detecta la presencia de la
enzima ureasa , la que al hidrolizar la urea
forma productos como amoniaco que
alcalinizan el medio y se evidencia con el
cambio de color del medio desde un
amarillo plido hasta un rojo fucsia. El
indicador de pH utilizado es el rojo fenol

26
Por su importancia desde el punto de vista
clnico se pueden clasificar en
Gneros patgenos para el hombre:
Escherichia: algunos serogrupos de E. coli
Shigella
Salmonella
Yersinia
Gneros patgenos oportunistas:
Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Proteus,...

27
GENERO ESCHERICHIA

28
 Son colonizadores
normales del tracto
intestinal de seres
humanos y
animales
No se encuentran
normalmente en
sitios corporales
fuera del tracto
gastrointestinal

29
 INFECCIONES TRACTO
DIGESTIVO
Gastroenteritis en sus cuatro formas
clnicas dependiente de la cepa
involucrada:
1.Enterotoxigenica
2.Entero patgena
3.Entero invasiva
4.Entero hemorrgica

30
31
INFECCIONES DEL TRACTO
URINARIO
Infecciones del tracto
urinario bajo (ITU)
Infecciones delo tracto
urinario alto (pielonefritis)

32
INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

Neumonas y Septicemias por contaminacin

de heridas quirrgicas o traumticas

33
 DIAGNOSTICO
MICROBIOLOGICO

34
MUESTRAS
Las muestras estriles
como la orina se CALDO SELENITO
siembran directamente
en el agar de Mac
Conkey
Las NO estriles como
las heces se deben
sembrar en medios
selectivos y de
enriquecimiento como
el CALDO SELENITO
con la finalidad de
inhibir el crecimiento de
la flora acompaante.

35
AGAR MAC
CONKEY
FERMENTA
LA
LACTOSA
(+)

36
 GENERO ESCHERICCHIA

MOTILI
DAD CITRA UREAS
TSI/KIA H2S GAS INDOL RM/VP LISINA
TO A

A/A - + +/- + +/- - - +

Diferenciacin bioqumica de diagnstico microbiolgico

GENERO SHIGUELLA

38
Son bacterias parsitos
exclusivos del hombre, muy
parecidos bioqumica y
antignicamente a E. coli.

Son BGN inmviles,no

formadoras de esporas no
fermentadora de la Lactosa,
anaerobias facultativas con
fermentacin acido mixta
descubierta en 1897 por el
cientfico japones Kiyoshi
Shiga.

39
Se reconocen cuatro especies :

Shigella dysenteriae,
Shigella flexneri,
Shigella boydii,
Shigella sonnei,

Shigella dysenteriae el ms virulento.

40
 CUADRO CLINICO
Con una dosis muy baja hasta de
100 bacilos se puede dar la
infeccin.
Va oral, Mecanismo a travs de
los alimentos o agua
contaminada con la bacteria.
Se presenta como :
Gastroenteritis en portador
asintomtico y
Disentera con diarrea
sanguinolenta, como moco y pus.

41
Cuadro clnico en el hombre con
diarreas, fiebre y dolor abdominal,
las muestras pueden contener moco
y sangre por la capacidad de la
bacteria de invadir la mucosa y
pared intestinal.
42
La patogenicidad de la
bacteria esta ligada a una
protena invasiva (Ipa invasin
plasmid antigen) tipo A,B,C, y
D, que le permite invadir a los
macrfagos y escapar de la
fagocitosis ( vacuola
(fagosoma) y as activar las
Interleuquinas pro inflamatorias.

43
 DIAGNOSTICO
MICROBIOLOGICO

44
45
 GENERO SHIGELLA
MOTILID
TSI H2S GAS AD INDOL RM/VP CITRAT UREA LISINA

ALK/A - - - V -/- - - -

Diferenciacin bioqumica de diagnstico microbiolgico

V=VARIABLE
GENERO SALMONELLA

47
 Se les denomina as a este gnero en
honor al microbilogo americano D. E.
Salmn.
Crecen entre 7 - 48C, pH 4 y 8, son
anaerobios facultativos y Lactosa negativos,
mviles a excepcin de S. gallinarum
pullorum.
 HABITAT
Organismos ubicuos , colonizan el intestino
de homeotermos y poiquilotermos .
Resisten en el medio ambiente e infectan a
animales observndose en estos estados de
portador.
Su rango de hospedador es amplio.
 PATOGENICIDAD
La va de infeccin es la oral y el
mecanismo a travs de la ingesta de
alimentos y agua contaminado
Las formas clnicas de presentacin
pueden ser entricas, septicmicas y
abortivas.
 CLASIFICACION
Son bacterias complejas con mas de
2,200 serotipos .
Se agrupan en serogrupos A,B,C,D,
sobre la base de antgenos somticos
O y subdivididos en serotipos (1,2,
etc.) por sus antgenos flagelares H
( A1,A2,B1,B2,C1)
 Propuesta actual : 3 Especies (S. enterica
-6 subspp.-; S. bongori y S. typhi)
Los laboratorios hospitalarios reportan
como serogrupo especifico Ej.
Salmonella serogrupo C.
Los laboratorios de referencia incluyen el
nombre de estos Ej. Salmonella serotipo
typhimurium
 ESTRUCTURA
ANTIGNICA
antgenos somticos (O): 46 serogrupos
designados con nmeros arbigos
Antgenos flagelares (H): Fase 1 (Letras
minsculas ), Fase 2 (Nmeros arbigos)
EJEMPLO: 1,4,5,12:i,1,2 (S. typhimurium)
Antigenos capsulares (K) llamados Vi que se
relaciona con la invasividad
 Las Salmonellas pueden perder los
antgenos H y convertirse en no
mviles.
Cuando pierden el antgeno O las
colonias se tornan de lisas a
rugosas.
El antgeno Vi tambin puede
perderse en parte o completo, o
adquirirse en el proceso de
transduccin.
 CUADROS CLINICOS

Tres formas importantes:

Fiebres intestinales (fiebre tifoidea)
Bacteriemia con lesiones focales
Enterocolitis
*Estado de portador crnico
 Gastroenteritis:
Examen microscpico de heces
Coprocultivo
Fiebre tifoidea y Septicemia:
Hemocultivo
Cultivo de Mdula sea.
Coprocultivo
Deteccin de Anticuerpos : no muy
fiable
 CUADRO CLINICO
Son microorganismos ubicuos que
colonizan el intestino de aves y
mamferos, resisten en el medio
ambiente e infectan a animales
observndose en estos estados de
portador.
Su rango de hospedador es amplio.
La va de infeccin es la oral y el
mecanismo a travs de la ingesta
de alimentos y agua contaminado
Las formas clnicas de presentacin
pueden ser entricas, septicmicas
y abortivas.

57
 PATOGENICIDAD
Estas bacterias producen una
entero toxina (stn) que
incrementa la actividad del
cAMP , es citotoxica
afectando la sntesis proteica
de la clula, y mediante un
LPS sobrevive en el tracto
gastro intestinal permitiendo
su penetracin a la mucosa
intestinal y resistencia a la
fagocitosis.
58
 FACTORES DE VIRULENCIA
SIDERFOROS:
CAPTACIN Fe (?)
FLAGELOS: POLARES (>
INVASIVIDAD)
PROTENA SHOCK
TRMICO: SOBREVIDA EN
MACRFAGOS
ADHESINAS (3 TIPOS)
59
 ANTIGENOS SOMATICOS (O): 46
SEROGRUPOS DESIGNADOS CON NUMEROS
ARBIGOS
ANTGENOS FLAGELARES (H): FASE 1 (LETRAS
MINSCULAS ), FASE 2 (NMEROS ARBIGOS)
EJEMPLO: 1,4,5,12:I,1,2 (S. TYPHIMURIUM)

60
 CUADRO CLINICO

Gastroenteritis
Fiebre tifoidea
Bacteriemia
Estado de portador crnico

61
 DIAGNOSTICO
Gastroenteritis:
Examen microscpico de heces
Coprocultivo
Fiebre tifoidea y Septicemia:
Hemocultivo
Cultivo de M. O.
Coprocultivo
Deteccin de Ac.: no muy fiable

62
 DIAGNOSTICO
MICROBIOLOGICO

63
 GENERO SALMONELLA

MOTILID
TSI/KIA H2S GAS AD INDOL RM/VP CITRATO UREASA LISINA

ALK/A V V + - -/- V - +

Diferenciacin bioqumica de diagnstico microbiolgico

V=VARIABLE
 MEDIOS
SELECTIVOS/DIFERENCIALES

MEDIO
Salmonela Shigella MEDIO XLD
65
 DIFERENCIACION BIOQUIMICA

TSI O KIA :PICO DE FLAUTA

ACIDO Y PROFUNDIDAD ACIDA.
HIDROGENO SULFURADO
POSITIVO
GAS POSITIVO
MOTILIDAD POSITIVO
INDOL NEGATIVO
CITRATO DE SIMMONS
POSITIVO
UREASA NEGATIVO
LISINA DECARBOXILASA
POSITIVO

66
IDENTIFICACIN SEROLGICA

SUEROS
POLIVALENTES

67
GENERO KLEBSIELLA

68
 El Gnero fue denominado as por
Edwin Klebs, anteriormente conocido
como el bacilo de Friedlander agente
causal de neumonias graves.
Klebsiella pneumoniae es la especie
tipo de este gnero.

69
 Son bacilos Gram
negativos inmviles que
crecen en agar de Mac
Conkey, sangre y
chocolate.
Colonias grandes de
consistencia mucoide.
No decarboxilan ornitina.
Hidrolizan la urea
lentamente.
La mayora de cepas son
Indol negativo excepto
Klebsiella .oxitoca

70
 CUADRO CLINICO
Agente causal de las
neumonas adquiridas en
la comunidad.
La necrosis del pulmn
produce hemorragia
dando un esputo espeso,
mucoide y de color rojo
ladrillo como gelatina.
En casos graves da
abcesos pulmonares y
enfermedad cavitaria
crnica y hemoptisis.

71
 DIAGNOSTICO
MICROBIOLOGICO

72
CULTIVO

COLORACION DE GRAM 73
 GENERO KLEBSIELLA

MOTILID
TSI/KIA H2S GAS AD INDOL RM/VP CITRATO UREASA LISINA

A/A - + - - -/+ + + +

Diferenciacin bioqumica de diagnstico microbiolgico

V=VARIABLE
75
GENERO PROTEUS

76
77
78
79
80
 DIAGNOSTICO
MICROBIOLOGICO

81
82
 SWARMING EN MEDIOS SLIDOS

Reaccin
positiva de
DIFERENCIACION BIOQUIMICA ureasa

Colonias de Proteus mviles

Aspecto de enjambre en la superficie del agar

83
 GENERO PROTEUS

MOTILID
TSI/KIA H2S GAS AD INDOL RM/VP CITRATO UREASA LISINA

ALK/ALK + + + + +/- - + +

Diferenciacin bioqumica de diagnstico microbiolgico

 Proteus mirabilis
Es la especie mas frecuentemente recuperada
de humanos como agente causal de infecciones
urinarias y de heridas.
Proteus vulgaris se recupera mas en humanos
con tratamiento antibitico prolongado.
Proteus mirabilis es la nica especie de Proteus
que es Indol Negativo.

85
86