II.

ESTRUCTURA Y
FUNCION DE LAS
PROTEINAS Y ENZIMAS

PROTEINA
S
Macromolculas de alto
peso molecular, formado
por aminocidos unidos por
enlaces peptdicos.

PROTEINAS:
IMPORTANCIA

>50% del peso seco de las

>50% del clulas.
peso seco de las
clulas.
Sin ellas es imposible la
Sin ellas es
imposible la
vida.
vida.
Presente hasta en las

Presente
hastade
envida:
las
formas
simples
formas simples
virus. de vida:
virus.
Su importancia biolgica
esta
Su importancia
biolgica
en las funciones
que
esta en las
funciones que
realiza.
realiza.

PROTEINAS: FUNCIONES

Reacciones qumicas: enzimas

velocidad

Funcin estructural: membranas celulares

Funcin energtica: 15%

requerimientos en adultos
Transporte intra y extracelular: Hb
O2, albumina
ac graso,
transferrina
Fe
Respuesta inmune: Ag y Ac

PROTEINAS: FUNCIONES

Hormonas: insulina, glucagon, ACTH, H.

crecimiento, HCG.
Receptores
Contraccin muscular: actina y miosina
Coagulacin sangunea: protrombina,
fibringeno, etc.
Crecimiento y proliferacin celular.
Regulacin de [H+].

PROTEINAS:
COMPOSICIN
SIMPLES
Constituidas solo
por aminocidos.
C:50%, O:23%,
N:16%, H:7%, S:3%

CONJUGADAS
Constituida por
aminocidos +
grupo prosttico
(compuesto
orgnico o
inorgnico)

P= Np (100/16)
P: contenido proteico de una muestra.
Np: contenido de nitrgeno de la muestra

PROTENAS:
Prot
en
COMPOSICIN
as

as
(>5
0aa,
PM
>50
Cadenas
00)
polipeptdicas
Aminocidos

PPTIDO: cadena <50aa.

AMINOACIDOS
Unidades estructurales de
las protenas, son de bajo
peso molecular, 20 clases
diferentes.

AMINOCIDOS:
ESTRUCTURA
Carbono alfa

Grupo carboxilo

Grupo amino
NH2

COOH

Cadena lateral

AMINOCIDOS:
CLASIFICACIN
Segn el carcter polar o apolar

de R

Grupo I: 8 aa
- R no polar
- hidrofobicos, excepto alanina

AMINOCIDOS:
CLASIFICACIN

Grupo II: 7 aa
- R polar, si
- sin carga elctrica a pH cerca
neutro

AMINOCIDOS:
CLASIFICACIN

Grupo III: 2 aa
- R polar,
- carga negativa a
pH cerca neutro

AMINOCIDOS:
CLASIFICACIN

Grupo IV: 3 aa
- R polar,
- carga positiva
a pH cerca neutro

AMINOCIDOS: PROPIEDADES
FISICAS

ACTIVIDAD OPTICA: son capaces de desviar

el plano de luz polarizada, excepto glicina.

ABSORCION DE LUZ: no absorben luz en la

regin visible del espectro luminoso, pero si
en el ultravioleta lejano. (280nm = trp, tyr,
fen)
- estimar la [] proteica en una muestra.

PROPIEDADES ELECTRICAS

AMINOCIDOS:

PROPIEDADES

FISICAS
PROPIEDADES ELECTRICAS

-COOH

-NH2 + H

pK1

-COO- + H+
CIDO

pK2

-NH3+

BASE

pK1

pK
2

15

ZWITTERIN

AMINOCIDOS: PROPIEDADES

FISICAS

Punto isoelctrico:
A pH cido: prevalece la especie con carga +
A pH bsico: prevalece la especie con carga
Hay un valor de pH para el cul la carga de la
especie es cero. (zwitterin)
pI = pK1 + pK2
para un aa neutro
2
Punto isoelctrico: valor de pH al cul la
carga neta del aminocido es cero.

AMINOCIDOS: PROPIEDADES
FISICAS
PROPIEDADES ELECTRICAS
Separacin de aa por cromatografa de
intercambio inico:
los aa se pasan por
una columna de resina

AMINOCIDOS: PROPIEDADES
FISICAS
Separacin
electrofortica
Representacin
simplificada de la
separacin electrofortica
de la alanina, lisina y cido
asprtico a pH = 6.
La lisina catinica es
atrada hacia el ctodo, el
cido asprtico aninico es
atrado hacia el nodo y la
alanina se encuentra en su
punto isoelctrico, por lo
que no se mueve

AMINOCIDOS:

PROPIEDADES

QUIMICAS
Reaccion

Reactivo

Aminocido

Color

Millon

Nitrato de mercurio en ac.

nitrico

Tirosina

Rojo

Triptofano

Azul

Ehrlich
Nitroprusito

Nitroprusiato de sodio en
amoniaco diluido

Cisteina

Rojo

Sullivan

Sulfonaptoquinona e
hidrosulfito de sodio

Cisteina

Rojo

Pauli

Ac. Sulfamilico en medio

alcalino

Histidina y
tirosina

Rojo

Folin

Ac. fosfomolibdotungstico

Tirosina

Azul

PROTENAS : NIVELES DE ORGANIZACON

ESTRUCTURAL

la secuencia lineal de los aa puede

adoptar mltiples conformaciones en el
espacio
estructura tridimensional

ESTRUCTURA PRIMARIA

Secuencia de aa en la cadena
polipeptidica.

ENLACE PEPTIDICO:
Grupo alfa carboxilo de
un aa se une al grupo
alfa amino del aa
siguiente. (enlace
amida)
-CO-NH-

ESTRUCTURA SECUNDARIA

La cadena no es lineal, adopta formas

en el espacio.
Se relacionan aa prximos, mediante
enlaces de hidrogeno.
Tipos de estructuras secundarias:
HLICE ALFA
HOJA PLEGADA BETA
AL AZAR.

ENLACES DE
HIDROGENO : entre el
grupo NH de un aa y el
grupo co de un aa cercano.

ESTRUCTURA SECUNDARIA
HELICE ALFA
espiral o resorte.
3,6 aa por cada vuelta.
Puentes H son lineales y
paralelos al eje.
Puede ser:
- alfa helice derecha
(Hb, mioglobina, queratina)
- alfa helice izquierda
(colageno)

Prolina impide espiral.

ESTRUCTURA SECUNDARIA

LAMINA PLEGADA
Puentes H son
perpendiculares
Gran estabilidad
Puede ser:
-paralela
- antiparalela:

Fibrona (seda)

ESTRUCTURA TERCIARIA

estructura secundaria
adquiere una
determinada
disposicin en el
espacio por
interacciones entre
aa que se encuentran
en sitios alejados de
la cadena.

ESTRUCTURA TERCIARIA

ESTRUCTURA CUATERNARIA

>1 cadena polipeptidica (subunidad)

Intervienen las mismas interacciones

que en la estructura terciaria.
Pueden ser:
- homogenea
- heterogenea

DESNATURALIZACIN DE
PROTENAS

Proceso generalmente irreversible

mediante el cul la protena pierde su
estructura 2, 3 y 4, careciendo de
importancia biolgica.
-

incrementa la viscosidad
perdida de capacidad de cristalizacin
disminucin solubilidad
cambia coeficiente de sedimentacin
cambia coeficiente de difusin

DESNATURALIZACIN DE
PROTENAS

Agentes
Fsicos:
Calor
Radiaciones:

rayos x, luz
ultravioleta
Grandes
presiones
Agitacin
mecnica

Agentes Qumicos

Solventes orgnicos:
etanol, acetona,
metanol
Solucin concentrada
de urea (8M) y de sales
Sales de guanidina

Detergentes:

SDS( dodecil sulfato de

sodio)
Soluciones con pH<3
o>10

MIOGLOBINA

Es una protena
conjugada
(hemoprotena)
formada por:
Fraccin proteica:
globina
Fraccin no proteica
(grupo prosttico)
Porcin orgnica: grupo
HEM
Porcin inorgnica: tomo
de Fe+2.

Funcin: transporte de
O2 en el msculo
31

HEMOGLOBINA

HEMOGLOBINA

Protena conjugada.
Transporta oxigeno en sangre.
Formada por 4 subunidades
2 cadenas y2 cadenas adulto
2 cadenas y2 cadenas adulto 2%
2 cadenas y 2 cadenas F (feto)

Hemoglobinas anormales:
- ejm. Hb S anemia falciforme (glu/val en
la cadena

INMUNOGLOBULINAS

INMUNOGLOBULINAS

Ig A, Ig M, Ig E, Ig G, Ig D.
Poseen 4 subunidades unidas por
puentes disulfuro.

L: cadenas livianas
H: cadenas pesadas
Existen 5 tipos:

37

Fc: con actividad

biolgica, define la clase
de cadena pesada.
Fab: unin al Ag.
Dominios ctes: CH
CL

Dominios variables:
Responsables de la unin
al Ag.
VH: definen los 5 tipos de

cadenas H.
VL

ENZIMAS
Protenas con
funcincataltica.

ENZIMAS
Regulan

las reacciones qumicas en los

seres vivos.

Facilitan las
transformaciones
qumicas:
acelerando las
reacciones y
disminuyendo la
energa de
activacin.

ENZIMAS:CARACTERIST
ICAS

Intervienen en reacciones en muy

pequeas concentraciones
No se consumen
No se alteran durante la reaccin
Pueden actuar sucesivas veces
No forman nunca parte del producto
Son especificas (Cada enzima cataliza
un solo tipo de reaccin)

ENZIMAS: MECANISMO DE
ACCION
(E) + (S)(ES)(P) + (E)

ENZIMAS: MECANISMO DE
ACCION
Modelo llavecerradura

Modelo inhibicin
alostrica

ENZIMAS:
CLASIFICACION

1. Oxidorreductasas
2. Transferasas
3. Hidrolasas
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas

ENZIMAS: CLASIFICACION
No
.

Clase

Tipo de reaccin
que catalizan

Oxidorreductasa De xido reduccin

s
(transferencia de e-)

Ejemplo
Deshidrogenasa
s
Peroxidasa
Oxidasas
Oxigenasas
Reductasas

La Oxidacin y la Reduccin son reacciones acopladas

(REDOX)

Si una
molcula se
reduce, tiene
que haber
otra que se
oxide

ENZIMAS: CLASIFICACION
No.

Clase

Transferasas

Tipo de reaccin
que catalizan
Transferencia de grupos

Ejemplo

Kinasas
Transaminasas

ENZIMAS: CLASIFICACION
No
.
3

Clase

Hidrolasas

Tipo de reaccin
que catalizan
Hidrlisis, con
transferencia de grupos
funcionales del agua

Ejemplo
Pirofosfatasa
Tripsina
Aldolasa

Transforman
polmeros en
monmeros.

ENZIMAS: CLASIFICACION
No Clase
.
4

Liasas

Tipo de reaccin que Ejemplo

catalizan
Lisis de un substrato,
(Sintasas)
generando un doble enlace,
o
Descarboxilasa
Adicin de un substrato a un pirvica
doble enlace de un 2o.
substrato

ENZIMAS: CLASIFICACION
No.

Clase

Isomerasas

Tipo de reaccin
que catalizan
Transferencia de grupos
en el interior de las
molculas para dar
formas ismeras

Ejemplo

Mutasas
Epimerasas
Racemasas

ENZIMAS: CLASIFICACION
No.

Clase

Tipo de reaccin
que catalizan

Ligasas

Formacin de enlaces C-C,

C-S, C-O y C-N. Mediante
reacciones de
condensacin, acopladas a
la ruptura del ATP

Ejemplo

Sintetasas

CINETICA ENZIMATICA
ecuacin de Michaelis-Menten
Vmax: cuando la
velocidad de reaccin se
hace independiente de la
concentracin de sustrato

KM
: co
nce de K da idea
de
M
n
sus Valor
aci
cua
trade latrafinidad
del
t
l
rea la ve o par n
a lpor
el
loenzima
cci
c
a
i
d
n esustrato:A
ad
de
s
l
la v
a m de <KM,
e
cid itad del
m lo>afinidad
a
xim enzima
a. d por el
sustrato, y a >KM,
<afinidad.

REGULACION DE LA
ACTIVIDAD ENZIMTICA
Temperatura

A > temperatura >velocidad de

reaccin.

La T a la cual la actividad
cataltica es mxima se llama
temperatura ptima.

Al ser protenas, a partir de

cierta temperatura, se empiezan
a desnaturalizar por el calor, y
la actividad enzimtica decrece
rpidamente hasta anularse

FACTORESQUE INFLUYEN
ENLA ACTIVIDAD ENZIMTICA
pH

Cada enzima necesita unos

valoreslmites para poder
desarrollar su actividad.
Traspasados estos valores, la
enzima se desnaturaliza y pierde
su actividad.
A un pH determinado la enzima
desarrolla su actividad mxima
(pH ptimo)
La mayora de las enzimas
intracelulares poseen un pH
ptimo cercanoa la neutralidad

FACTORESQUE INFLUYEN
ENLA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Concentracindel sustrato.
si se incrementa la [sustrato] se produce un
aumento de la velocidad de formacin del
producto, para restablecer el equilibrio
qumico entre la concentracin del sustrato y
la del producto.

COFACTORES
ENZIMTICOS

Algunas enzimas estn asociadas con

otro tipo de molculas que tienen
naturaleza no proteica y de las cuales
depende su actividad.

cofactor
cofactor

apoenzim
a

holoenzim
a

COFACTORES
ENZIMTICOS
Cationes metlicos

Zn2+, Ca2+, Fe2+o

Mg2+, que se unen
al apoenzima o
regulan su
activacin.

Molculas

orgnicas
Coenzimas: cuando se
unen dbilmentea la
apoenzima (NAD+,FAD+,
NADP+, etc).Muchas
vitaminas funcionan como
coenzimas.
Grupo prosttico: Cuando
se unen fuertemente a la
apoenzima

GRACIA
S