Pruebas de

Inmunodiagnostico
(serologias)

Qu son?
Son una herramienta elemental en

algunos trastornos patolgicos, adems de

darnos un diagnostico rpido, tambin una
alta especificidad, sensibilidad y un valor
predictivo; esto nos otorga una capacidad
de deteccin muy buena, el resultado sea
positivo o sea negativo tendr un alto
valor de prediccin de alguna patologa.

 Especificidad: en referencia a una prueba, es

la capacidad de que sta presente reacciones

positivas verdaderas.(capacidad para clasificar
correctamente a un individuo sano)
Sensibilidad: es la induccin de una respuesta
inmunitaria por la exposicin a un
antgeno.(capacidad de la prueba para detectar
la enfermedad)

 Validacin: es el grado en que una

prueba mide lo que se supone debe medir

con que frecuencia el resultado de la
prueba es confirmado por procedimientos
diagnsticos mas complejos y rigurosos?
La sensibilidad y la especificidad de un
test son medidas de su validez.

Tcnicas serolgicas 3 categoras

1. Pruebas de Unin Primaria: miden

directamente el enlace de antgenos y

anticuerpos.
2. Pruebas de Unin secundaria: miden los
resultados de la interaccin antgenoanticuerpo (in vitro)
3. Pruebas de Unin Terciaria: miden el
efecto protector real de los anticuerpos
en un animal

Reactivos que se emplean en las

pruebas serolgicas
Suero: la fuente mas comn de

anticuerpos, se obtiene dejando coagular

una muestra de sangre y se espera a que
el coagulo se retraiga. Se guarda en
congelacin. Si es necesario, puede
suprimirse la actividad del sistema de
complemento calentando el suero a 56C
durante 30 minutos.

 Complemento: es un constitutivo normal

de todos los sueros frescos, el suero
fresco de cobayo es la fuente mas
eficiente de complemento en las pruebas
hemolticas. Debe guardarse congelado en
pequeos volmenes una vez
descongelado debe usarse pronto. No
debe someterse a procesos repetidos de
congelacin-descongelacin.

 Antiglobulinas: las Inmunoglobulinas

pueden funcionar como antgenos cuando

se inyectan en un animal de una especie
diferente.
Por ejemplo: en el conejo se pueden
inyectar inmunoglobulinas purificadas de
perro; l responde fabricando anticuerpos
especficos, los cuales son llamados
antiglobulinas (antisueros).
Inespecficas
Especificas

 Anticuerpos monoclonales: los

anticuerpos monoclonales derivados de

hibridomas son puros y especficos, se
usan como reactivos qumicos
estandarizados, y se obtienen en
cantidades abundantes. A menudo
sustituyen a las antisueros convencionales
en las pruebas inmunodiagnosticas.

Pruebas de unin primaria

Se realiza combinando antgenos y

anticuerpos y despus de medir la

cantidad de complejos inmunitarios que se
hayan formado, se utilizan colorantes
fluorescentes o un marcador enzimtico,
para identificar alguno de los reactivos.

Radioinmunoanlisis
Inmunofluorescencia
ELISA
Inmunoperoxidasa
Western-blot

Pruebas de unin secundaria

A la unin ag-ac por lo general le sigue

una segunda reaccin.

Precipitacin
Inmunodifusin
Inmunoelectroforesis
Titilacin de anticuerpos
Pruebas de antiglobulina
Aglutinacin pasiva
Hemoaglutinacin viral y su inhibicin
Fijacin del complemento

Pruebas de unin terciaria

Son pruebas en sistemas vivos:
Pruebas de neutralizacin
Pruebas de proteccin

Aplicaciones de las pruebas

serolgicas
La presencia de anticuerpos contra un

microorganismo especifico en un suero

determinado indica la exposicin previa a
un epitopo que existe en ese
microorganismo. Sin embargo no
proporciona en forma automtica una
prueba de que en ese momento exista la
infeccin o enfermedad.

Las pruebas con mayor importancia

en inmunologa
Reaccin en cadena de polimerasa (PCR)
Inmunoensayo enzimtico (ELISA)
Inmunoelectroforesis
Inmunofluorescencia
Reaccin de hemoaglutinacin
Western-blot