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Describe el procedimiento paso a paso para sembrar en una placa con un

asa de siembra a partir de una muestra líquida que se encuentra en un


tubo.
1º. Despejar la zona de trabajo de material u objetos innecesarios.
2º. Preparar todo el material necesario y llevarlo a la zona de trabajo.
3º. Encender el mechero siguiendo el protocolo. (Escribir el protocolo de encendido)
4º. Esperar a que se cree la zona aséptica. Mientras se crea la zona aséptica preparar el
material que se va a utilizar de forma que quede colocado lo más práctico posible: a la
derecha del mechero se coloca el asa de siembra y a la izquierda se coloca la gradilla
con la muestra liquida, la placa y el vórtex.
5º. Rotular la placa. ( Indicar aquí qué datos hay que escribir en ella)
6º. Comprobar que el hilo del asa está firme y el círculo está correctamente cerrado.
7º. Coger el asa de siembra con la mano derecha y flamearla, para ello:
a. Comenzar flameando el aro del asa introduciéndolo en la llama sobre el cono
interior azul, de forma perpendicular a ella, hasta que esté al rojo vivo.
b. Ir subiendo ligeramente el brazo que sujeta el asa hasta que quede
prácticamente paralela a la llama y todo el asa propiamente dicha esté
incandescente.
c. Flamear la varilla metálica: realizando unas pasadas rápidas ( dos o tres) de la
varilla en la parte alta de la llama a todo lo largo de la varilla , a la vez que se
gira.
d. Dejar que el asa se enfríe depositándola en la base del mechero, con el asa
hacia arriba, y sin sacarla de la zona aséptica. ( o bien sostenerla en la mano
derecha sin sacarla en ningún momento de la zona aséptica)
8º. Coger el tubo con la muestra líquida de la gradilla.
9º. Agitar el tubo en el agitador vortex (presionando sobre el tapón con el dedo
índice).También se puede agitar haciéndolo girar entre las palmas de las manos
llevándolas hacia atrás y hacia delante.
10º. Depositar el tubo en la gradilla.
11º. Coger el asa con la mano derecha y mantenerla en la zona aséptica.
12º. Coger nuevamente de la gradilla, con la mano izquierda, el tubo y acercarlo a la
mano derecha (que tiene sujeta el asa).
13º. Con el dedo meñique de la mano derecha sujetar el tapón del tubo abrirlo y
mantener el tapón sujeto en ese dedo.
14º. Flamear la boca del tubo haciendo unas pasadas rápidas de la boca por la llama
del mechero a la vez que éste se gira.
15º. Introducir el asa de siembra dentro del tubo y coger muestra de forma que
quede una película de líquido en el círculo de la misma.
16º. Flamear la boca del tubo de nuevo siguiendo el procedimiento anterior (paso
13).
17º. Acercar el tubo al dedo meñique de la mano derecha y taparlo (con cuidado de
no sacar el asa cargada de la zona aséptica ni hacer movimientos bruscos).
18º. Depositar el tubo en la gradilla.
19º. Coger la placa de Petri con la mano izquierda, e introducirla en la zona
aséptica ( la placa debe de estar invertida).
20º. Abrir la placa: para ello levantar la base de la placa de Petri y orientarla a la
llama del mechero ( dentro de la zona aséptica pero sin aproximarla mucho a ella) . La
tapa queda sobre la poyata y hacia arriba.
21º. Acercar el asa cargada a la superficie de la placa.
22º. Sembrar en la superficie del medio de cultivo con la técnica requerida.
23º. Cerrar la placa: para ello colocar la base de la placa sembrada sobre su
tapadera, quedando invertida y retirarla de la zona aséptica.
24º. Flamear el asa de siembra de nuevo procediendo como en el paso 6º.
25º. Depositar el asa en la base del mechero.
26º. Apagar el mechero según el protocolo.

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