PRÁCTICA GRUPOS

No. 5 SANGUÍNEOS

CÉLULAS
SANGUÍNEAS Y
Introducción

La sangre es el único tejido conectivo líquido en el cuerpo humano, realiza tres

funciones: 1. Transporta oxígeno, dióxido de carbono, lleva nutrientes, hormonas

de las glándulas endócrinas, elimina calor y productos de desecho. 2. Regula el

pH, y participa en el ajuste de la temperatura corporal. 3. Protege mediante el

proceso de coagulación, fagocitosis, y producción de anticuerpos. La sangre es

más densa y viscosa que el agua, su temperatura es de 38°C y un pH alcalino

(7.34 – 7.45), el volumen sanguíneo es de 5 a 6 litros en el hombre y de 4 a 5 litros

en la mujer. Incluye dos componentes, el plasma sanguíneo, líquido acuoso que

contiene sustancias en disolución, y los elementos formes, que incluye células y

fragmentos celulares. Se compone de 45% de elementos formes (99% glóbulos

rojos y menos del 1% glóbulos blancos y plaquetas) y 55% de plasma (91.5% agua,

8.5% solutos). Todos los elementos formes de la sangre se estudian en

preparaciones coloreadas para determinar la apariencia normal o anormal de las

células y sus porcentajes relativos en el diagnóstico de ciertas enfermedades.

La pérdida de gran cantidad de sangre conduce en poco tiempo a la muerte, por

ello en la antigüedad se intentó reemplazarla con la inyección de sangre de

animales o de semejantes humanos siendo exitosas en algunos casos, pero en la

mayoría los pacientes no pudieron superar la prueba. Esto vino a demostrar que,

en general, la transfusión indiscriminada de sangre tiene consecuencias fatales

para el paciente que la recibe, lo cual se comprende fácilmente si tenemos en

cuenta que la sangre de dos especies distintas es incompatible entre sí. El 22 de

diciembre de 1818, el inglés James Blundell realizó la primera transfusión de

sangre humana con el objeto de reponer la sangre pérdida y corregir el shock

hemorrágico que presentaba el paciente, a pesar de ello, se observaba en una

proporción considerable de casos, reacciones postransfusionales graves y

numerosos accidentes mortales. En 1900, Karl Landsteiner descubrió la causa de

las reacciones postransfusionales al mezclar eritrocitos humanos con suero de

diversos animales, así como de suero humano con eritrocitos de diversas especies

animales, en estos casos se producía la aglutinación de los eritrocitos. Al mezclar

la sangre de algunos de sus colegas con la de otros observó que en algunos casos

se producía aglutinación y en otras no. La incompatibilidad sanguínea observada

por Landsteiner y colaboradores da lugar a una serie de reacciones que son el

resultado de la interacción de grupos químicos presentes en la superficie de los

eritrocitos con macromoléculas presentes en el plasma del sujeto receptor. De

esta forma se estableció la clasificación de los eritrocitos humanos en los cuatro

grupos clásicos que integran el sistema ABO. Por estos trabajos Landsteiner

recibió el premio nobel en 1930.

Los individuos que en la membrana del eritrocito tengan el antígeno A y en el

plasma el anticuerpo Anti-B, serán del grupo sanguíneo A, en caso que el

antígeno sea el B y en plasma el anticuerpo Anti-A, serán del grupo B y cuando

en la membrana existan antígenos A y B y en el plasma no existan anticuerpos,

serán del grupo AB y por último cuando no tengan antígenos en la membrana

del eritrocito pero en el plasma sanguíneo tengan anticuerpos Anti-A y Anti-B,

serán del grupo sanguíneo O.

Además del sistema ABO, se han descrito otros de gran importancia desde el

punto de vista transfusional, genético, médico legal, inmunológico, etc. En la

actualidad se conocen alrededor de 300 antígenos eritrocitarios en diversos

sistemas, entre ellos el sistema Rh. En 1940, Landsteiner y Wiener inmunizaron

conejos y cobayos con eritrocitos obtenidos de Macacus Rhesus, partiendo del

planteamiento de que en los eritrocitos de estos monos podrían existir antígenos

similares a los humanos. El suero obtenido (anticuerpos) aglutinaba los glóbulos

rojos de estos monos y a los eritrocitos de 85% de la población blanca,

estableciendo que el antígeno del mono Rhesus lo poseen la mayoría de los

humanos (Rh positivo).

Grupo
A B AB O
sanguíneo

Glóbulos rojos

En la membrana
Antígeno B No antígenos
del eritrocito Antígeno A Antígenos A y B
Anticuerpos B Anticuerpos A Anticuerpos
No anticuerpos
En el plasma o o AyB
o Aglutininas
Aglutininas Aglutininas o Aglutininas

Competencia. El estudiante la redacta.

Material por Equipo
Proporcionado por el laboratorio
Que llevaran los
Material por
Soluciones y reactivos Equipo estudiantes
equipo
Para diferenciar los elementos formes de la sangre
-Metanol Microscopio - Mechero -Portaobjetos limpios
-Colorante de Wright (un óptico -Lancetas desechables
frasco) estériles
-Agua tamponada (pH 6.7) -Etanol 96%
-Aceite de inmersión -Torundas
-Gasas estériles
-Kleenex

Para la determinación del grupo sanguíneo

Suero anti-A -Papel filtro -Portaobjetos limpios
Suero anti-B -Placa con -Lancetas desechables
Suero anti-D excavaciones estériles
-Etanol 96%
-Torundas
-Gasas estériles
-Kleenex
-Palillos de madera
-Lápiz graso

Metodología

A) Células Sanguíneas

Lavar los portaobjetos que se habrá de usar para extensiones sanguíneas,

limpiarlos con una gasa embebida con alcohol, para eliminar restos de grasa y

humedad flaméalos por ambos lados. Obtenga la muestra sanguínea por punción

de la cara lateral de un dedo, con lanceta estéril. Para preparar la extensión siga

los siguientes pasos:

1. Tome un portaobjetos y sosténgalo por los bordes. Coloque una gota de sangre

sobre el portaobjeto en uno de uno de los extremos de la lámina.

2. Coloque un segundo portaobjetos apoyado sobre el otro (delante de la gota de

sangre) en ángulo de 45º, y retroceda hasta que el borde coincida con la gota. Esta
se extenderá por capilaridad por todo el borde. Deslice el segundo portaobjeto

hacia delante con movimiento firme y rápido, elevando la mano derecha antes

de que el portaobjetos que se desliza llegue al final. Mientras mayor sea el ángulo

que forman las dos láminas, mayor será el espesor de la capa de células, figura 1.

Figura 1. Procedimiento para la preparación de extendidos sanguíneos.

3. Deje secar el extendido.

4. Agregue metanol hasta cubrir el extendido y deje que el alcohol se evapore.

5. Coloque el portaobjetos sobre una rejilla de tinción con el extendido hacia

arriba.

6. Cubra completamente el extendido con el colorante de Wright. Después de 5

minutos, añada un volumen igual de tampón de fosfatos pH 6,8–7,2 y mezclar

bien soplando con cuidado sobre el portaobjetos.

7. Deje actuar el colorante durante 10 min. El colorante deberá cubrir

completamente el portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes. Deberá

agregarse una cantidad adicional si éste se comienza a evaporar.

8. Lave con agua de la llave hasta que la extensión presente un aspecto rosado al

examinarlo a simple vista.

9. Limpie la parte inferior del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido

en alcohol para eliminar cualquier resto de colorante.

10. Deje secar al aire y observe al microscopio a 10X, 40X y 100X.

Estudio de los extendidos sanguíneos

Examine los extendidos con objetivo de 10X, 40X y 100X y visualice los eritrocitos,

leucocitos y plaquetas. Esquematice las células respetando los colores (sin tinción

y con tinción) y describa brevemente sus funciones.

Sin Teñir 10X Con Tinción

Sin Teñir 40X Con Tinción

Sin Teñir 100X Con Tinción

Adjunte a la práctica dos cuartillas de: los elementos formes de la sangre, su

hematopoyesis, anatomía y fisiología de cada una de las células y en una cuartilla

describa para qué se utilizan los colorantes y los diferentes tipos de tinciones.

b) Determinación del Grupo Sanguíneo

1. Lavar tres portaobjetos que se habrán de usar para cada suero, etiquételos con

el lápiz graso de la siguiente forma, Anti-A, Anti-B y Anti-D, limpiarlos con una

gasa embebida con alcohol, para eliminar restos de grasa y humedad flaméelos

por ambos lados.

2. Colocar en el portaobjeto una gota de suero anti-A, una gota de suero anti-B y

una gota de suero anti-D respectivamente. Cuidar de que no se mezclen

accidentalmente.

3. Desinfectar con alcohol el pulpejo del dedo pulgar y puncionar con la lanceta

estéril, con presión suave hacer salir una gota de sangre sobre el dedo, depositar

una gota en cada portaobjeto rotulado.

4. Con un palillo seco y limpio distinto para cada portaobjeto, mezcle la sangre y

la disolución de anticuerpo respectivo, de tal manera que la suspensión quede

extendida en forma de un círculo de 1 cm de diámetro aproximadamente. Esta

operación se tiene que hacer con cierta rapidez, antes de que la sangre coagule.

5. Inclinar cada uno de los portaobjetos de un lado a otro para propiciar la mezcla

del anticuerpo con las células y favorecer la aglutinación. Al cabo de 2 minutos

observar en cuál de los recuadros ha tenido lugar la aglutinación de los

eritrocitos.
Interpretación: Si la gota de sangre presenta aglutinación con el suero anti A,

presenta el grupo A; si lo hace con el suero anti B pertenece al grupo B; si lo hace

en ambos, al grupo AB, si no aglutina en ninguno de los dos pertenece al grupo

0. Si la gota de sangre presenta aglutinación en el suero anti D es factor Rh

positivo, en caso contrario negativo.

Resultados: (Dibujos lo Observado en Cada Portaobjeto)

Anti-A

_______________________

Anti-B

_______________________

Anti-D

_____________________

Grupo Sanguíneo: ___________________

Solicite el resultado a cada uno de los equipos, elabore un cuadro con todos los

resultados obtenidos en el grupo y realice una gráfica.

Grupo sanguíneo
Equipo
A B AB O
1
2
3
4
5
6
7
8
Gráfica

Cuestionario
¿Por qué se califica de dador o donador universal a un individuo cuya sangre
pertenece al grupo O?

El grupo sanguíneo conocido como sistema ABO se basa en la presencia de ¿que

¿Proteínas en las células sanguíneas?

¿Qué se encuentra en el suero sanguíneo que también se encuentra en el plasma

sanguíneo?

¿Qué significa el término “elementos formes” en la descripción de la sangre?

¿Qué tipo de sangre se le puede transfundir a un paciente con grupo sanguíneo

“B+”?

¿Cuál es el primer proceso que ocurre después de que se daña un vaso

sanguíneo?

¿Qué individuos pueden recibir cualquier tipo de sangre y se consideran

destinatarios universales?

¿Qué característica de la sangre se refiere a la concentración de solutos?

¿Cuál es el tipo de glóbulo blanco MENOS común?

¿Qué enzima convierte el fibrinógeno en fibrina?

Discusión

Conclusiones

Referencias

Firma Del Alumno

Fecha De Entrega______________