UNIVERSIDAD DE CORDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS

DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA
CURSO: GENÉTICA II

Práctica 1. ESTUDIO DE POLIMORFISMOS (Análisis del grupo sanguíneo)

Introducción

Los polimorfismos son el reflejo de la diversidad genética de la especie.

Se dice que existe un polimorfismo en un determinado locus cuando hay más
de un alelo presente en la población con una frecuencia superior al 1%.
Aunque un individuo sólo puede presentar como máximo dos alelos distintos
para un locus, un estudio poblacional puede revelar la presencia de múltiples
alelos para ese locus, especialmente en ciertos loci que son altamente
polimórficos.
La determinación de grupo sanguíneo se basa en la reacción antígeno-
anticuerpo, la cual se puede llevar a cabo de forma directa (determinando los
antígenos presentes en la superficie del eritrocito del paciente al contacto del
reactivo anti A, B, AB o D) o indirecta (determinando los anticuerpos presentes
en el suero del paciente y enfrentándolo a eritrocitos conocidos (A, B o AB).
El grupo sanguíneo son los tipos en que se ha clasificado la sangre de las
personas en relación con la compatibilidad de los hematíes y suero de otro
individuo que la recibe.
Según la clasificación de Landsteiner (clasificación hoy universal) y se
denominan: O, A, B, AB. Se caracterizan por las diferentes combinaciones de
dos aglutinógenos existentes en los glóbulos rojos y de dos aglutininas
contenidas en el suero.
Los eritrocitos poseen antígenos en su membrana que son distintos para
cada individuo; las pruebas utilizadas para establecer la hemoclasificación
sanguínea relacionada a los diversos grupos sanguíneos, aprovechan las
características inmunológicas que expresa cada individuo de acuerdo a su
particular codificación genética. En dichas pruebas se evidencian los antígenos
y/o anticuerpos del grupo sanguíneo, de acuerdo a su comportamiento in vitro.
En el sistema ABO se investigan tanto antígenos o aglutinógenos como
los anticuerpos o isoaglutininas naturales.
El factor Rh es un aglutinógeno encontrado en 1940 por Landsteiner y
Weiner, en los glóbulos rojos de primates (Macacus rhesus) y que también
existe normalmente en el 85% de los humanos, que por esta causa se
denomina Rh positivos. En el sistema Rh, existen varios antígenos: D, C, c, E,
e; sin embargo, de rutina, solo se determina la presencia del antígeno D en los
eritrocitos y de acuerdo a su presencia o ausencia se dice que un individuo es
Rh D positivo o Rh D negativo.

Objetivos
 Comprender las bases teóricas de la reacción de aglutinación para la
determinación de grupo sanguíneo
 Análisis de un polimorfismo fenotípico: determinación del grupo
sanguíneo.
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Materiales

 Alcohol al 70%
 Algodón
 Descartadores de punzo cortantes
 Sangre total
 Láminas de reacción de fondo oscuro
 Palillos
 Lancetas
 Antisueros comerciales (Anti-A, Anti-B, Anti-Rh)
 Placas de vidrio

Procedimiento
Método en lámina
1. Marcar tres placas de vidrio.
2. Adicionar una gota de anti A, anti B, anti AB y Rh en su lugar
correspondiente.
3. Agregar una gota de eritrocitos del paciente a cada antisuero.
4. Mezclar cada preparación con un palillo de madera.
5. Rotar manualmente cada lamina con cuidado de que no se mezclen.
6. Observar aglutinación y registrar los resultados:

Lectura

Reacción negativa: ausencia de aglutinación al cabo de los 2 minutos.

Reacción positiva: aglutinación visible a los dos minutos y ausencia de
aglutinación con el autocontrol. La reacción positiva indicará cuál es el antígeno
presente en los eritrocitos (por ej. si sale aglutinación en la casilla “A” el grupo
sanguíneo será A).

Si los hematíes presentasen aglutinación en el Autocontrol, dar el

resultado como no válido.

Cuidados y otros aspectos relevantes de seguridad

Recuerde que las muestras de pacientes son potencialmente infectivas,

por lo que debe observar las medidas universales de bioseguridad.
Aplique también las medidas de bioseguridad en el descarte de los
materiales.

Bibliografía
 Rose NR et al. Manual of Clinical Laboratory Immunology. 6th ed.
Washington, ASM, 2000.
 Stites D et al. Inmunología Clínica. México, El Manual Moderno,
1998.

Preguntas:
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1. Cuáles son los carbohidratos presentes en los grupos A, B, AB y O

R: Los grupos sanguíneos dependen del tipo de glicoproteína que
contienen la membrana de los eritrocitos; el grupo A tiene como
oligosacárido una cadena de N-acetilgalactosamina, mientras que el
grupo B tiene una cadena de galactosa, y por tanto, el grupo AB
presenta los dos tipos de glicoproteínas y el grupo 0 carece de
ambos. Para determinar el grupo sanguíneo se usan antisueros, que
contienen anticuerpos que reconocen determinado tipo de
glicoproteína (el antisuero A reconoce la glicoproteína A). El
conocimiento del grupo sanguíneo es importante para hacer
transfusiones y evitar la formación de coágulos que provocan infartos
y trombosis cerebrales mortales.

los antígenos del sistema ABO están compuestos por azúcares que
protruyen de la membrana de la superficie de los eritrocitos,unidos a
un componente denominado ceramida,el cual se encuentra en la
membrana de los eritrocitos.una serie de cuatro azúcares se une a la
ceramida. a esta estructura de 4 azúcares o sustancia precursora,se
le unen otros azúcares mas que le dan la especificidad a cada
antígeno ABO.

en el caso del sistema sanguíneo ABO,muy poco se conoce acerca

de las funciones de estos azúcares en los eritrocitos,excepto que ellos
hacen parte del glucocálix,una matriz de azúcar que rodea la célula y
la protege de daños químicos e invasión de patógenos

2. Anotar los resultados obtenidos y deducir el genotipo ó genotipos

posibles.

3. ¿Por qué se tiene en cuenta el grupo sanguíneo de las series AB0 y

Rh en las transfusiones y no la serie MN?

4. ¿Por qué el antígeno D define básicamente al grupo Rh?

5. ¿Por qué el análisis de los grupos sanguíneos sólo sirve en algunos

casos para excluir la paternidad y no para asignarla?

6. ¿En qué casos la eritroblastosis fetal puede manifestarse en el primer

embarazo asumiendo incompatibilidad Rh?