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PRÁCTICA No.

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE TOTAL, SUERO, PLASMA, SANGRE


DESFIBRINADA.
RECONOCIMIENTO DE ELEMENTOS FORMES EN SANGRE FRESCA Y
COLOREADA. RESISTENCIA GLOBULAR
1.1 Marco Teórico
La toma de muestra de sangre tiene importancia en la buena determinación de los
análisis clínicos ya que constituyen el primer paso en todo el proceso dependiendo
de una serie de factores. El reconocimiento de los elementos formes brinda
información acerca de las características y diferenciaciones en una muestra de sangre
fresca y sangre coloreada.

Las determinaciones hematológicas y bioquímicas pueden realizarse en sangre total,


suero o plasma.

1.2 Materiales y Equipos

 Materiales
1. Agujas descartables 20 G x 1 ½
2. Algodón
3. Alcohol
4. Tubos de ensayo
5. Viales con anticoagulantes
6. Perlas de vidrio
7. Matraz
8. Pipetas

 Reactivos
a. Anticoagulantes:
De Wintrobe:
Oxalato de Amonio 1.2 g
Oxalato de Potasio 0.8 g
Agua destilada 100 mL
Formol al 40% 1 mL

Haskins Trotman: Oxalato de potasio al 2%


Citrato Trisódico al 3.8%
Oxalato de Sodio al 1.34%
Heparina al 0,75%
EDTA

1.3 Procedimiento
TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA:
1. El paciente permanecerá sentado con el brazo extendido reposando sobre la mesa
apoyado sobre una almohadilla.
2. Se colocará una ligadura de goma a unos 7 cm. por encima del codo, teniendo la
precaución de no comprimir fuertemente.
Esta ligadura colocada más de 2' provoca una hemoconcentración con
acumulación de subproductos metabólicos.
Se elige la vena más prominente sobre la superficie de flexión del codo (VENA
MEDIANA CEFALICA)
3. Se desinfecta la región con una torunda de algodón empapada al alcohol yodado.
4. Se atraviesa la piel con la aguja manteniendo el bisel hacia arriba directamente
sobre la vena penetrando en ella.
5. Una vez lograda la cantidad de sangre necesaria se afloja la ligadura mientras la
aguja permanece aún en la vena.
6. Se saca la aguja y se aplica una torunda ligeramente humedecida en alcohol
flexionando el codo.
7. Para efectuar los frotises se tomará una gota de sangre tomada directamente de
la aguja antes de mezclarla con el anticoagulante sobre cubreobjetos
desengrasados y secos.

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE CAPILAR:


Se obtiene por punción cutánea y se utiliza cuando se requieren pequeñas cantidades
de sangre.
Debe utilizarse una lanceta
En la yema del dedo. En los niños en el lóbulo de la oreja o bien en el talón dilatado
y la sangre fluya espontáneamente.

Obtener los siguientes componentes:

1. SANGRE TOTAL Y PLASMA


En un vial con anticoagulante colocar 5 ml. de sangre.
Mezclar.
Colocar en un tubo de ensayo.
Centrifugar 10 minutos a 1500 rpm.

2. SUERO
En un tubo de ensayo colocar 5 mL. de sangre
Centrifugar 10 minutos a 1500 rpm.

3. SANGRE DESFIBRINADA
En un vaso pequeño o matraz que contiene perlas de vidrio, colocar 3 a 5 mL. de
sangre sin anticoagulante. Se agita durante 15 minutos. La FIBRINA se deposita
sobre estos cuerpos en forma de filamentos elásticos y blancos.
El líquido que queda se denomina sangre desfibrinada y está constituida por suero
y glóbulos que se puede confirmar por centrifugación.
La fibrina es de color blanco y se observa lavando con agua destilada.

RECONOCIMIENTO DE ELEMENTOS FORMES:


a. EN MUESTRA FRESCA
b. EN MUESTRA COLOREADA
1. Colocar 1 gota de sangre en un portaobjeto
Colocar un cubreobjeto y observar al microscopio.
Elementos de forma discoidea de color amarillo: eritrocitos unidos formando
pilas por el fenómeno de la tensión superficial, estos discos se observan de
color rosado.
Elementos transparentes e incoloros: Leucocitos.
Plaquetas: no se visualizan por ser muy pequeños.
Tamaño: Eritrocitos: 7.2 u
Leucocitos: 5 a 20 u
Plaquetas: 2a4u
2. Otro portaobjeto: 1 gota en uno de los extremos y con otro portaobjeto
haciendo un ángulo de 45 grados hacer un frotis. Secar al medio ambiente.
Se lleva a colorear con colorante Wright: con 10 a 12 gotas cubriendo el frotis.
Mezclar soplando por 30 segundos.
Se adhiere agua destilada, nuevamente se sopla mezclando.
Dejar en reposo por 10 minutos.
Lavar con agua de caño escurrir la lámina en forma vertical.
Una vez seco se coloca 1 gota de aceite de cedro, elevar el condensador y
observa con objetivo de inmersión.
Se observa: Eritrocitos en forma discoidea con un halo en la parte central
Leucocitos: Mononucleares: Monocito 16 a 22 u
Linfocito 7 a 10 u
Polimorfonucleares: Neutrófilos, Eosinófilos, Basófilos: 9 a 12 u

1.4 Resultados
Los alumnos reportaran en su informe los resultados obtenidos en ésta práctica.

1.5 Cuestionario
1. ¿Qué diferencia encuentra Ud. entre sangre capilar, sangre venosa y sangre
arterial?
2. ¿Cómo se obtiene la sangre desfibrinada?
3. ¿Cuál es la composición química del anticoagulante de Wintrobe y como actúa
en la sangre evitando la coagulación de la misma?
4. ¿Qué diferencias existen entre suero y plasma?
5. ¿Cómo se observan los elementos formes en sangre fresca y sangre coloreada?
Dibuje utilizando colores.

1.6 Fuentes de información


1. Bernard J, Lévy JP. Manual de Hematologia. 7a ed. Barcelona: Toray Masson S.A;
2001.
2. Guerci A. Laboratorio métodos de análisis clínicos y su interpretación. 3a ed.
Buenos Aires: El ateneo; 1985.
3. Robbins S, Cotran R, Kumar V, Collins T. Manual de patología estructural y
funcional. 6a ed. Madrid: Mc Graw-Hill Interamericana; 1999.
4. Wintrobe M, Maxwell M. Hematología clínica. 6a ed. Buenos Aires: Interamericana;
1999.

TUBOS PARA MUESTRA DE SANGRE


Código Internacional de Color

Código de
Tipo de muestra Aditivo Exámenes realizables
color

Con oxalato de fluoruro de


sodio / potasio y fluoruro de
Aluminio Sangre Laboratorio de microbiología.
sodio / fluoruro de amonio /
potasio oxalato

Azúl Plasma Con citrato de sodio Pruebas regulares de tiempos de coagulación.

Amarillo Suero Determinaciones en suero y química clínica.


Con gel
Determinaciones de serologías y química
clínica. La FDA lo recomienda para pruebas de
Rojo Suero, coágulo. Sin anticoagulante inmuno-hematología como: agrupación ABO,
grupo RH, anticuerpos, fenotipos de glóbulos
rojos.

Verde Plasma Con heparina Determinaciones de químicas clínicas.

Morado Sangre Total Hematología


Con EDTA