PDF Libro de Ejercicios de Cromatografia

UNIVERSIDAC NATIONAL AUTGNOMA DE MEXICC
FAC iJ_TAD DE CUiMiCA

DEPAR TAMENTO DE CUIMICA Ai'iALlTICA
Araceli Peña Alvarez

Ernestina Cerverc Flores
Corm«n Labastida Rubio
EJERCICIOS DE ANÁLISIS
CUANTITATIVO
PARA CROMATOGRAFÍA
GASES Y LÍQUIDOS
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE QUÍMICA
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA
EJERCICIOS DE ANÁLISIS
CUANTITATIVO
PARA CROMATOGRAGFAÍSAES Y
LÍQUIDOS
ARACELI PEÑA ÁLVAREZ

ERNESTINA CERVERA FLORES
CARMEN LABASTIDA RUBIO
Agradecimientos
Se agradece al M. en C. Irán Ocaña Ríos

y al M. en C. Jerónimo Cabrera Peralta
por sus contribuciones a este manuscrito.
Primera edición: 2017
Fecha de edición: 12 de septiembre de 2017
D.R. © 2017 UNIVERSIDAD NACIONAL
AUTÓNOMA DE MÉXICO
Ci.Pu.d0a4d5U10n,ivCeirusditadriad,eDMeléexgiaccoi.ón Coyoacán,
ISBN: 978-607-02-9774-8
“Prohibida la reproducción total o parcial por cualquier medio,

sin la autorización escrita del titular de los derechos patrimoniales”.
Impreso y hecho en México
ÍNDICE
INTRODUCCIÓN......................................................................................9
MÉTODOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO
a) Normalización de áreas.......................................................11
b) Factores de respuesta.........................................................11
c) Estándar externo..................................................................12
d) Estándar interno..................................................................12
e) Adiciones patrón..................................................................14
COLECCIÓN DE EJERCICIOS
Problema 1.......................................................................................................................15
Problema 2.......................................................................................................................17
Problema 3.......................................................................................................................19
Problema 4.......................................................................................................................21
Problema 5.......................................................................................................................23
Problema 6.......................................................................................................................25
Problema 7.......................................................................................................................28
Problema 8.......................................................................................................................29
Problema 9.......................................................................................................................32
Problema 10.....................................................................................................................38
Problema 11.....................................................................................................................41
Problema 12.....................................................................................................................44
Problema 13.....................................................................................................................47
Problema 14.....................................................................................................................50
Problema 15.....................................................................................................................53
Problema 16.....................................................................................................................55
Problema 17.....................................................................................................................57
Problema 18.....................................................................................................................59
Problema 19a...................................................................................................................61
Problema 19b...................................................................................................................63
Problema 20.....................................................................................................................65
Problema 21.....................................................................................................................66
Problema 22.....................................................................................................................69
Problema 23.....................................................................................................................70
Problema 24.....................................................................................................................71
Problema 25.....................................................................................................................73
Problema 26.....................................................................................................................75
Problema 27.....................................................................................................................77
Problema 28.....................................................................................................................79
Problema 29.....................................................................................................................81
Problema 30.....................................................................................................................83
RESPUESTAS........................................................................................................85
∆t R
tR1
tR2
∆tR= wb2 = 4 σ Rs = 1
Resolución = 1
tM
wb1 wb2
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA. FACULTAD DE QUÍMICA, UNAM
INTRODUCCIÓN
La Cromatografía es una técnica de separación que tiene un amplio espectro de
aplicación en diferentes áreas de la química: farmacéutica, alimentaria, ambien-
tal, petróleo y bioquímica, entre otras. Es una poderosa técnica analítica bien
consolidada, que actualmente se encuentra en una gran cantidad de
laboratorios. El acelerado desarrollo tecnológico de los últimos 20 años, en la
instrumentación, el procesamiento de datos y la tecnología de columnas
cromatográficas, ha resultado en que actualmente la Cromatografía de gases y
la Cromatografía líquida de alta eficiencia sean técnicas más versátiles y amables
con el usuario general. Sin
embargo, sus virtudes son inútiles si en el procedimiento analítico los procesos
de preparación de muestras y manejo de datos no son los apropiados.
Es esencial comprender las bases teóricas de la Cromatografía y de la
Química Analítica general para que la interpretación y manejo de los resultados
cromatográficos generen información confiable. Hay un gran número de libros
excelentes que narran la historia, explican la teoría, presentan los conceptos fun-
damentales y describen la instrumentación. También es posible encontrar
tutoria- les en Internet que presentan de forma muy clara y didáctica diversos
aspectos de la técnica.
Sin embargo, usualmente el manejo de los datos cromatográficos para rea-
lizar los análisis cualitativo y cuantitativo de las muestras se tratan de manera
muy general. En nuestra experiencia, los estudiantes encuentran
particularmente confuso y difícil integrar los procedimientos de manejo de los
estándares y de las muestras en los cálculos de calibración y de obtención del
resultado de la muestra.
El material que presentamos en este texto tiene el objetivo de consolidar
los conocimientos teóricos mediante la aplicación a una amplia gama de
problemas- tipo. No pretende ser un conjunto exhaustivo de problemas, pero sí
ofrece a los estudiantes la oportunidad de enfrentarse con una diversidad
amplia de las diferentes maneras con las que en la práctica se realizan los
análisis cuantitativos. Si no todos, al menos la gran mayoría de los problemas
que presentamos se gene- raron a partir de casos reales que se han tratado en
nuestro laboratorio.
que l oE s
peestruadmiaonsteqsuedesctaubcroalneclocsiónprdinecipriobslebmásaicsosecaou
mnuanhesrra mtoideanstalaústitlépcanria- cas, que si bien son simples,
generalmente aparecen ocultos en los protocolos de análisis. También
deseamos que les sea de utilidad a los profesores para ilustrar sus clases.
ARACELI PEÑA ÁLVAREZ

MÉTODOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO
Existen cinco métodos generales para realizar cálculos cuantitativos en un análisis cro-
matográfico. De acuerdo con las características del análisis, de la precisión y exactitud
que se requiera, será el método que se utilizará para efectuar los cálculos.
a) Normalización de áreas
Es el cálculo del porcentaje de área del analito a cuantificar, la cual se asume es igual al
por ciento en peso del analito presente.
Si consideramos que X es el analito,
% área X = [Ax / Σ (Ai)] X 100

picos cromatográficos.
Para utilizar este método se deben tener ciertas consideraciones:

• Todos los analitos deben eluir.
• Todos los analitos deben ser detectados.
• Todos los analitos deben tener la misma sensibilidad.
b) Factores de respuesta
Las áreas de los analitos no son directamente proporcionales a la composición porcen-

tual, es decir, analitos diferentes tienen distintas respuestas del detector; por lo tanto,
es necesario establecer los factores de respuesta. Estos factores, una vez determinados,
pueden usarse para calcular la composición porcentual. Como el funcionamiento de los
detectores se basa en principios diferentes, habrá que calcular distintos factores de res-
puesta para cada analito en los diversos detectores.
El factor de respuesta del compuesto “Fx” se calcula dividiendo su área entre la

respectiva concentración de cada pico cromatográfico:
Fx = Ax /Cx
12
Donde:
Fx = Factor de respuesta del analito x
Ax = Área para el analito x

Cx = Concentración del analito x
c) Estándar externo
En este método se inyectan disoluciones de diferente concentración del analito o

compuesto a determinar puro (estándar). Se grafican los valores de área del pico
cromatográfico en función de la concentración de la disolución inyectada. Se obtie-
ne
hayasí una curva de calibración que debería ser lineal y pasar por el origen, si de
no
muestra, no hay señal. Sin embargo, siempre se debe considerar el blanco
la muestra. Una vez obtenida la curva de calibración, el área del pico de la muestra
es interpolada para calcular la concentración en la solución inyectada proveniente
de la muestra inyectada.
400
350
300
X250
e
d20
0
a
er
150
Á
100
50
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4
0 Concentración de X
Figura 1. Curva de calibración estándar externo.
d) Estándar interno
Este método también es nombrado calibración relativa. Se preparan disoluciones de
concentración conocida del analito adicionadas con otro analito conocido llamado
estándar interno y se separan en el cromatógrafo. Se miden las áreas de los analitos
y se grafica la relación de las áreas en función de la relación de concentración.
13
1.8
1.6
X1.
e
4
d
1.2
a
v
i 1
t
al 0
e
r
.8
0.6
a
r0.4
e
Á
0.2
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6
0
Concentración relativa de X
Figura 2. Curva de calibración estándar interno.
Después de añadir a la muestra desconocida una cantidad exactamente conocida del

estándar interno, esta mezcla se analiza por cromatografía. Se calculan las relaciones de
área y, utilizando la curva de calibración, se interpolan las relaciones de concentración
de la disolución desconocida con respecto al estándar. Como se conoce la cantidad del
estándar interno añadido con un cálculo sencillo, se determina la cantidad de
compuesto desconocido presente.
Este método de calibración tiene la ventaja de que no es necesario medir exactamente
las cantidades inyectadas, ni conocer la respuesta del detector y que ésta permanezca
constante, ya que ningún cambio en la respuesta alterará la relación de áreas. La princi-
pal desventaja del método es la de encontrar un estándar o patrón interno que no inter-
fiera con algún componente de la muestra.
El estándar interno debe tener las características siguientes:

• Separarse bien de los otros picos cromatográficos.
• Similitud estructural con la sustancia que se determina.
• Eluir muy cerca de los picos que interesan.
• Concentración aproximada a la de la sustancia que se determina.
• Preferentemente puro, estable, no tóxico y económico.
EJERCICIOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO PARA CROMATOGRAFÍA. GASES Y LÍQUIDOS
14
e) Adiciones patrón
Este método consiste en la adición de concentraciones conocidas de estándar a la

muestra y, posteriormente, se grafican las áreas obtenidas contra la concentración
adicionada y se extrapola al punto del eje x en que y = 0. Este valor negativo sobre
el eje x (tomado como absoluto) corresponde a la concentración de analito en la
muestra analizada.
5
4
a er 3
Á 2
1
0
-2-101 2 3 4 5 6
-1
-2
Concentración del analito añadido

COLECCIÓN DE EJERCICIOS
Problema 1
Se requiere analizar una mezcla de dos compuestos A y B en una relación 1:1, se inyec-
taron los vapores de la disolución en un sistema cromatográfico. El análisis se realizó
isotérmicamente a tres temperaturas.
Condiciones cromatográficas
HornoIsotérmico: 40, 50 y 60°C
Inyectorsplit/splitless: split 30:1; 200°C vol. inyección: 1 µL
Capilar de sílice fundida PEG 600 ATM
Columna(fase polar). 10 m x 0.25 mm x 0.2 µm
Flujo H2: 1 mL/min

Detector Ionización de llama: 200°C
Resultados experimentales:
Temperatura 40°C
tm (min) tr (min) Área W(min)
1/2
0.32 0.610 559.79 0.016
0.930 511.86 0.024
Temperatura 50°C
tm (min) tr (min) Área W1/2 (min)
0.32 0.530 559.70 0.012
0.740 515.09 0.016
Temperatura 60°C
tm (min) tr (min) Área W1/2 (min)
0.32 0.47 558.99 0.011
0.58 514.55 0.014
16
a) Utilizando los resultados experimentales en cada temperatura de trabajo,
calcula e l f ac t o r de r e t e n ci ó n ( k ’ ) , l a eficiencia (N), la

C o m p l e ta la s i g u ie n t e t a b l a .
selectividad (α) y la resolución (Rs).
Temperatura del hornoCompuesto k’ N α Rs

40°C
A
BABA
50°C B
60°C
b) Con base en los resultados de la tabla anterior responde:

1. ¿Cómo se modifican los parámetros cromatográficos al variar la temperatura?
2. ¿Qué significado tienen estos resultados en la separación cromatográfica?

3. ¿Qué temperatura de horno sería adecuada para realizar el análisis
cromatográfico? Justifica tu respuesta.
17
Problema 2
Se requiere determinar por cromatografía de gases el contenido de etanol en una mues-
tra farmacéutica líquida que contiene una mezcla de sulfas. Para realizar el análisis, se
prepararon las siguientes disoluciones.
Preparación de estándares:
Estándar interno (EI): se transfiere una alícuota de 5.0 mL de acetonitrilo a un matraz
aforado de 250 mL y se lleva a la marca del aforo con agua.
Disolución patrón de etanol (DP): se transfiere una alícuota de 5.0 mL de etanol
(99.8%) a un matraz aforado de 250 mL y se lleva a la marca del aforo con agua.
Disolución estándar
de etanol (DP) de lase
y 10 mL(DE): transfieredeuna
disolución alícuota
estándar de 10 (EI)
interno mL de la llevan
y se disolución patrón
al aforo de
100 mL con agua.
Muestra:
Se transfiere una alícuota de 40 mL de la muestra a un matraz aforado de 100 mL, se
adicionan 10 mL de la disolución de estándar interno (EI), se centrifuga (si hay residuos
se filtra) y se lleva a la marca de aforo con agua.
Los análisis de la disolución estándar y la muestra se realizaron por triplicado, inyec-
tándose 1.0 µL en el cromatógrafo de gases.
Horno Isotérmico 60°C
Inyectorsplit/splitless: split 30:1; 150°C
vol. Inyección: 1 µL
Capilar de sílice fundida Carbowax (fase
Columna polar). 30 m x 0.25 mm x 0.25 µm
Flujo H2: 1 mL/min

Ionización de llama: 150°C
Detector
18
Área de EtOH Área EI
87,153 86,290
81,210 78,844
86,500 84,804
Muestra farmacéutica
Área de EtOH Área EI
20,418 85,190
24,512 102,133
19,820 82,928
a) Calcula el contenido de etanol en la muestra, expresa el resultado en % v/v.
b) La concentración máxima permitida de alcohol en este tipo de fármacos es de

5% v/v, con base en el resultado obtenido. ¿Hay indicios de que el producto
cumple la norma?
19
Problema 3
Se desea determinar el contenido de etanol en una bebida alcohólica. Para ello se realizó
un análisis cromatográfico utilizando una curva de calibración relativa.
Disoluciones preparadas:
Estándar interno (EI): disolución de acetona al 10% en agua.
Disolución patrón (DP): disolución de etanol al 10% en agua.
Empleando estas disoluciones se preparó la siguiente curva de calibración.
Preparación de la Curva de calibración relativa

Punto de la DP EI Vol. Final
curva (mL) (mL) (mL)
1 0.1 1 10
2 0.5 1 10
3 1.0 1 10
4 1.5 1 10
5 2.0 1 10
De cada concentración de la curva patrón se inyectó 1.0 µL en el cromatógrafo de gases
por triplicado.
Preparación de la muestra:
Se tomaron 5.0 mL de licor, se adicionó 1.0 mL de la disolución de EI, se llevó al aforo de
10 mL con agua. De la muestra se inyectó 1.0 µL y el análisis se realizó por quintuplicado.

80°C durante 1.3 min, incrementando

Horno
20°C/min hasta 130°C durante 5 min
split/splitless: split 30:1; 150°C

Inyector
Capilar de sílice fundida SP 1000
Columna (fase polar). 30 m x 0.25 mm x 0.25 µm
Flujo H2: 1 mL/min

20
Curva de calibración relativa
Punto de Áreas EtOH Áreas EI

la curva 1 2 3 1 2 3
1 30,545 25,864 30,743 290,080 249,370 287,220
2 109,170 123,050 139,240 214,770 246,810 266,110
3 228,380 247,660 255,520 241,720 263,180 261,540
4 321,700 371,000 387,370 220,850 254,990 265,390
5 481,390 481,950 433,470 261,410 261,700 247,950
Muestra de licor
Inyección Área de EtOH Área Acetona
1 296,800 187,150
2 290,840 185,900
3 287,960 185,880
4 285,800 183,680
5 291,010 187,180
a) Calcula la concentración de etanol en la muestra y expresa el contenido en % v/v.

21
Problema 4
En una muestra de agua residual se identificó entre los contaminantes al diclorobenceno
(C6H4Cl2). Para conocer la concentración de éste se realizó un análisis por cromatografía
de gases, utilizando una curva de calibración relativa (estándar interno).

Disoluciones preparadas:
Estándar interno (EI): fenantreno 5.0 mg/mL en hexano.
Disolución patrón (DP): diclorobenceno 1.0 mg/mL en hexano.
Empleando estas disoluciones, se preparó la siguiente curva de calibración.

Punto de la DP EI Volumen final
curva (µL) (µL) (mL)
1 20 10 10
2 40 10 10
3 60 10 10
4 80 10 10
Se tomaron 10 mL de agua residual, se adicionaron 10 mL de la solución de estándar in-
terno (EI), se realizaron 3 extracciones con 10 mL de hexano, los extractos se colectaron
y concentraron a un volumen final de 10 mL utilizando un rotaevaporador. Se inyectó
por triplicado 1.0 µL de la muestra en el cromatógrafo de gases.
40°C durante 2 min, incrementando
Horno
10°C/min hasta 200°C durante 5 min split/splitless: split: 30:1; temp: 250°
Inyector Columna capilar de sílice fundida OV-1.
(fase no polar) 25 m x 0.25 mm x 0.25 µm
Columna
2
22

Punto de la Conc. C6H4Cl2 Área C6H4Cl2 Área EI
curva (mg/mL)
1 19,998 275,556
2 39,899 242,563
3 61,000 255,448
4 81,010 247,076
Muestra de agua residual

Inyección Área Área EI
1 65,430 275,556
2 65,400 242,563
3 65,430 255,448
a) Calcula la concentración de diclorobenceno en cada punto de la curva patrón y com-

pleta la tabla de resultados de la curva de calibración relativa.
b) Calcula la concentración de C6H4Cl2 en la muestra y expresa el resultado en ppm.

23
Problema 5
Se desea determinar si es factible utilizar la cromatografía de gases para el análisis ruti-
nario de sacarosa en melaza en un ingenio azucarero.
Preparación de disoluciones:
Disolución estándar (DE): se utilizaron 600 mg de sacarosa y 650 mg de trihalosa como
estándar interno (EI) para formar los respectivos derivados metilados en 3.0 mL de dime-
tilformamida.
Se utilizaron 1.5 g de melaza y 650 mg de trihalosa (EI), se formaron los derivados meti-
lados respectivos en 3.0 mL de dimetilformamida.
El análisis de la disolución estándar y la muestra se realizó por triplicado, inyectándose
1.0 µL en el cromatógrafo de gases.
Co8n°0C
diciones
durantecromatográficas
1 min, incrementando
Horno
Cold on column; oven track on

Inyector
Volumen de inyección: 1 µL
Columna capilar de sílice fundida OV-1
Columna(fase no polar). 10 m x 0.53 mm x 0.1 µm
H2: 1 mL/min
DetectorIonización de llama: 330°C
Datos experimentales:
Velocidad de papel del integrador: 0.5 cm/min
Tiempos de retención y w½de los compuestos analizados
Compuesto tr (min) w1/2 (mm)
Sacarosa Trihalosa
11.47 0.5
12.022 0.5
tm (min) = 0.47
24
Inyección Área de sacarosa Área EI
1 188,585 184,823
2 191,080 186,854
3 185,811 181,750
Muestra de melaza
Inyección Área de sacarosa Área EI
1 274,933 228,946
2 255,862 206,273
3 274,489 228,532
a) Calcula la selectividad (α) de la columna cromatográfica así como la resolu-

ción (Rs) de los compuestos analizados.
b) Con los resultados del inciso a) de parámetros cromatográficos, analiza si las

condiciones cromatográficas de análisis fueron adecuadas para realizar el
análisis cuantitativo.
c) Calcula la concentración de sacarosa en la muestra y reporta el resultado en

g de sacarosa por 100 g de melaza.

25
Problema 6
Los lupinos son plantas con un alto contenido de alcaloides, compuestos que perjudican
la salud. Los alcaloides encontrados comúnmente en este tipo de plantas son
esparteína, lupanina, citisina, 3-OH-lupanina y 13-OH-lupanina. El colorín es una
variedad de lupino y se desea conocer el contenido de estos alcaloides para determinar
si puede ser utilizado
cporempoaraólilma esnigtouiepnatrea deisl oglauncaiódno.esPtaárnadarer.alizar el

análisis por cromatografía de gases se
Disolución estándar (DE): se pesaron 0.757 mg de esparteína, 0.5 mg de citisina,
3.42 mg de lupanina, O.22 mg de 3-OH-lupanina, 0.215 mg de 13-OH-lupanina y
0.500 mg de cafeína, que se utilizó como estándar interno (EI), se disolvieron y se
llevaron al aforo de 5.0 mL con metanol. El análisis se realizó por triplicado inyectando 1
µL de esta disolución en el cromatógrafo de gases.
Preparación de la muestra problema:

Un gramo deambiente
harina dedurante
colorín 1semin,
extrajo con 10 mL deseparó
ácido tricloroacético al 5%
temperatura se centrifugó y se el sobrenadante, estaa
operación se realizó dos veces más; los extractos se juntaron y se agregó 1.0 mL de
NaOH para neutralizar. Se extrajeron nuevamente con 2 porciones de 10 mL de CH 2Cl2 y
lo extraído se evaporó a sequedad.
El residuo con los alcaloides se disolvió en 4.0 mL de metanol y después de cerciorar-
se que el extracto no contenía cafeína (prueba colorimétrica) se adicionaron 0.500 mg
de cafeína (EI). Finalmente se ajustó el volumen a 5.0 mL con metanol. Se inyectó 1.0
µL de esta disolución por triplicado en el cromatógrafo de gases.
Horno h1a5s0ta°C20d0u°rCanpteor01. 5 min, incrementando 250°°C/m/minin hasta 2

split/splitless: splitless1 min. temp: 240°C
Inyector Volumen de inyección:1 µL
Columna capilar de sílice fundida OV-1 (fase no

Columnapolar). 10 m x 0.53 mm x 0.25 µm
H2: 1 mL/min
26
a er á
ed
sed
a
i nU
d1
2 3
5 6
5 10 15 20 25 30
Tiempo (min)
Cromatograma 1. Disolución estándar de alcaloides.
Disolución estándar de alcaloides

Número Alcaloide tr(min) Áreas
de pico 1 2 3
1 Esparteína 6.20 690,515 584,481 587,884
2 Cafeína 6.80 244,120 207,082 209,090
3 Citosina 13.40 619,612 599,045 569,910
4 Lupanina 20.40 2,948,813 2,527,575 2,516,182
5 3-OH-lupanina 23.50 138,221 123,711 121,251
6 13-OH-lupanina 28.60 162,242 146,096 142,558
27
a
er á
ed
5
ese
d
a
id n U 3
4 67
12
5 10 15 20 25
Tiempo (min)
Cromatograma 2. Muestra de colorín (L. exaltatus).
Tiempos de retención y áreas de la muestra de colorín

Número de pico tr (min) Áreas
1 2 3
1 6.20 145,848 175,345 147,997
2 6.80 220,097 245,890 237,698
3 17.50 189,340 214,836 198,532
4 18.60 143,214 163,689 145,290
5 20.31 2,191,599 2,573,631 2,263,740
6 21.00 145,960 167,583 154,369
7 23.47 147,762 175,634 159,083
De acuerdo con los resultados experimentales responde:

a) ¿Qué alcaloides están presentes en la muestra?
b) ¿Qué factores de respuesta se obtienen para cada uno de los alcaloides
identificados?
c) ¿Qué concentración se obtiene de cada uno de los alcaloides presentes en
el colorín en mg/g de muestra?
d) ¿Cuál es el contenido total de alcaloides por 100 g de colorín?
28
Se quiere cuantificar el contenido de o-Cloro-p-Bencilfenol (OCPB) y o-Bencilfenol
(OB) en una muestra en medio acuoso alcalino. Para ello se realiza un análisis
cromatográfico utilizando las siguientes disoluciones:
Disolución estándar (DE): se pesaron 30.4 mg de OCPB y 20.93 mg de OB se disol-
vieron con tolueno y se llevó al aforo a 10 mL con el mismo disolvente.
Un mL de muestra se llevó a pH ácido (0-2), se extrajo con 3.0 mL de tolueno, se
separó la fase orgánica y se realizaron 2 extracciones más, se juntaron los extractos
y se llevaron al aforo de 10 mL con tolueno.
50°C durante 1 min, incrementando 10°C/min hasta
Horno
280°C
split/splitless: splitless1 min. temp: 240°C
Columna capilar de sílice fundida DB-5 (5% fenilmetil

Columna silicón, fase poco polar). 25 m x 0.25 mm x 0.25 µm
Flujo H2: 1 mL/min

Detector
El análisis se realizó inyectando 1.0 µL de la disolución estándar y de la muestra por
triplicado en el cromatógrafo de gases obteniéndose las siguientes áreas promedio:
Áreas promedio de la disolución estándar y la muestra
Disoluciones Área OB Área OCPB
Estándar 1,650,008 771,567
Muestra 532,048 375,730
a) Calcula el contenido de o-Cloro-p-Bencilfenol (OCPB) y o-Bencilfenol (OB)

en la muestra y expresa el resultado en ppm.
b) Enumera las posibles fuentes de error en este análisis.
29
Problema 8
Se quiere determinar la distribución de alcoholes en mezcal y su concentración relativa
por normalización de áreas.
Se vierten 2.0 mL de mezcal en un vial de 8.0 mL al cual se le adicionan 0.5 g de ácido
silícico; se agita vigorosamente en vórtex durante 2 min. Se deja separar las fases. La
fase líquida es transferida a un matraz aforado de 5.0 mL mientras que a la fase sólida se
le adicionan 1.5 mL de acetona. Se agita nuevamente durante 2 min. Y se deja separar
las fases. La fase líquida se junta con la anterior en el matraz aforado de 5.0 mL. Se
repite nuevamente la operación de lavado con acetona. La fase líquida se lleva al aforo
con acetona y se inyecta 1.0 µL de esta disolución.
Horno 40°C durante 10 min, incrementando 10°C/min

hasta 240°C durante 1 min.
split/splitless: split 30:1.

Inyector temp: 240°C
Volumen de inyección:1 µL
Columna capilar de sílice fundida Carbowax

Columna (fase polar). 30 m x 0.32 mm x 0.25 µm
Flujo H2: 1 mL/min

Detector
Información experimental:
En el cromatograma obtenido del análisis del mezcal se indican las señales que corres-
ponden a la acetona y al acetato de etilo.
30
1 4
a
n ot
e
cA
8 13
a
er
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lit
ed
d o
sed
a t
at
id n U e
cA2 6 1011
5
14 15
7 12
9
5 10 15 20 25 30
Tiempo (min)
Cromatograma 1. Extracto de mezcal.
Áreas obtenidas de los compuestos analizados en el extracto de mezcal

Área
Pico Compuesto
1 2 3
1 Acetona 3,568,263 3,958,428 3,725,892
2 Acetato de etilo 300,364 293,722 270,821
Nonanol 154,264 163,405 146,662
Alcohol bencílico 37,519 38,971 34,766
Etanol 3,417,384 3,539,710 3,274,528
Alcohol Amílico 0 0 0
Feniletanol 12,231 13,084 11,726
Butanol 0 0 0
Alcohol Isoamilico 474,225 494,192 446,721

Hexanol 45,866 48,451 44,430
Propanol 106,710 109,274 99,385
Isobutanol 168,896 174,293 157,479
Metanol 365,134 350,714 334,699
7 No identificado 11,563 12,019 10,693
9 No identificado 5,235 5,982 4,857
11 No identificado 36,539 37,391 35,632
12 No identificado 9,752 10,384 9,137
31
a) Indica el orden de elución de los compuestos presentes en el extracto de mezcal.

Señala qué criterio seguiste y por qué es apropiado.
b) Determina por normalización de áreas la concentración relativa de los alcoholes
identificados.
c) Indica el alcohol que se encuentra presente en menor proporción en el mezcal.
32
Problema 9
Se requiere identificar el contenido de algunos ácidos grasos en muestras de jabón
quemado (JQ) y Nigie (JN) y cuantificar el contenido del ácido graso de 16 átomos
de carbono en las muestras. Para realizar el análisis se preparó una disolución
estándar y la muestra con el siguiente procedimiento:
Disolución patrón (DP): se pesaron 10.91 mg de los ésteres metílicos (EM) EM15,
EM16:0, EM18:0 y EM18:1 y se disolvieron en 100 mL de hexano.
Estándar Interno (EI): se utilizó como estándar interno el éster metílico del ácido
undecanoico (hendecanoico, EM 11), se pesaron 1.62 mg y se disolvieron en 100
mL de hexano.
Disolución Estándar (DE): se tomó 1.0 mL de solución patrón (DP) y 1.0 mL de
estándar interno (EI), y se llevó a la marca de aforo de 5.0 mL con hexano. Se
inyectó
1.0 µL en el cromatógrafo.
Preparación de muestras de jabón:

Se pesaron 31 mg del jabón quemado (JQ) y 32.43 mg de jabón Nigie (JN) por separa-
do y se colocaron en viales de reacción. Se saponificaron con 2.0 mL de disolución
de KOH/MeOH al 10%(p/v) a 80°C durante 1 h, se dejó enfriar. Se realizó la
esterifica-
ción con 2.0 mL HCl/MeOH al 15%(v/v) y 100 µL BF 3/MeOHa 80°C durante 1 h, se
dejó enfriar.
Se añadieron 2.0 mL de H2O y se extrajeron los ésteres metílicos con 2 mL hexa-
no, la fase orgánica se separó, se realizó una segunda extracción con 2.0 mL de
hexano. Los extractos se juntaron y se adicionaron 2.0 mL de NaHCO 3 al 3% para
neutralizar, seguidos de 2.0 mL H 2O para lavar, la fase acuosa se descartó y la fase
orgánica se filtró a través de Na2SO4 anhidro. Finalmente, se llevó a la marca de
aforo de 10 mL con hexano. De cada disolución se tomó 1.0 mL y 1.0 mL de están-
dar interno (EI),

cromatógrafo dese llevaron
cada al aforo de 5.0 mL con hexano y se inyectó 1.0 µL en el
disolución.
33
Horno40°C durante 1 min, incrementando 10°C/min hasta 300°C durante 10 min.
split/splitless: 1 min. temp: 250°C

Columna capilar de sílice fundida DB-5
Columna (255%mfexn0il.m25etmilmsilxic0ó.n2,5fµasme poco polar).

Flujo H2: 1 mL/min
Detector
3
a er á 1
ed
se
d
a di n
U
2 45
5 10 15
Tiempo (min)
Cromatograma 1. Disolución estándar de ésteres metílicos.
34
Datos de la disolución estándar de ésteres metílicos
Número de Éster metílico tr (min) Área

pico
1 EM11 7.593 87,175
2 EM15 10.903 7,138
3 EM16:0 11.640 102,860
4 EM18:1 12.816 8,385
5 EM18:0 13.003 7,718
4 81112
3 5
a
er
á
ed
sed
da
i nU
2 7
6 10
9
5 Tiempo (min) 10 15
Cromatograma 2. Muestra de jabón quemado (JQ).
35
Tiempos de retención y áreas de la muestra de jabón quemado (JQ)
Éster metílico tr (min) Área

Identificado
4.611 34,691
6.645 29,685
7.593 126,345
8.491 241,523
10.018 8,514
10.140 135,534
0 9 2 0 0 5
11 .4 3 4,5 4
0 1
6 2 6
11.649 329,981
12.148 17,110
12.332 19,882
12.755 38,975
12.832 450,020
12.870 105,309
13.012 227,444
3 913 14
4
7
a er á
ed
sed
6
a
di n U
8
12
1 11
2
5 10
Cromatograma 3. Muestra de jabón Nigie (JN).
36
Muestra de jabón Nigie (JN)
Éster metílico tr (min) Área

Identificado
4.687 29,976
6.645 20,140
7.596 177,953
8.489 126,800
10.012 8,280
10.139 85,172
10.909 124,869
11.465 58,895
11.653 290,152
12.149 16,570
12.334 19,281
12.758 64,004
12 836 510 067
12.872 115,233
13.014 227,025
a) Completa las tablas de resultados experimentales de cada jabón.
b) ¿Qué ácidos grasos como ésteres metílicos contienen las muestras?
c) Calcula la concentración de EM16:0 en la solución final, reporta los

resultados en mg/mL.
Área Conc. mg/mL

EM11 (EI)
EM16:0
Frr
37
Muestra de jabón quemado (JQ)
JQ Área Conc. final mg/mL

EM11 (EI)
EM16:0
JN Área Conc. final mg/mL

EM11 (EI)
EM16:0
d) Calcula la concentración de EM16:0 en % en peso en cada jabón
EM16:0 % en peso en JQ
EM16:0 % en peso en JN
e) Menciona cuál de las dos muestras contiene más ácido graso de 16 átomos de
carbono (EM16:0):
38
Problema 10
Se requiere identificar y cuantificar por cromatografía de gases el contenido de trigli-
céridos (TG) en una muestra de grasa de un producto alimenticio.
Se preparó y analizó una disolución estándar que contenía 7 triglicéridos disueltos

en hexano, la concentración de cada triglicérido se enlista en la siguiente tabla.
Disolución estándar de triglicéridos analizados
Concentración
Triglicérido (TG)
mg/ mL
TG-C8 Tricaprilina 0.033
TG-C10 Tricaprina 0.020
TG-C12 Trilaurina 0.023
TG-C14 Trimiristina 0.020
TG-C16 Tripalmitina 0.020
TG-C18 Triestearina 0.020
TG-C18:1 Trioleína 0.024
Preparación de muestra:
Se pesó 1.5 g del producto alimenticio, se disolvió en 10 mL de hexano y de esta
disolución se inyectó 1.0 µL al cromatógrafo.
Horno15°C/min hasta 150°C, incrementando a 8°C hasta 350°C durante 10 min
Cold on column; oven track on
Inyector
Volumen de inyección:1 µL
Columna capilar de sílice fundida OV-1

Columna (fase no polar). 10 m x 0.53 mm x 0.1 µm
H2: 1 mL/min
Detector
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1 2 34
5
6
89
a
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r
á
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s
e
d
a
d
i
Un
Cromatograma 1. Disolución estándar de triglicéridos (TG) analizada.

Tiempos de retención y áreas de la disolución estándar de triglicéridos
Número de pico Triglicérido tr(min) Área

1 -- 6.958 118,509
2 TG-C8 10.183 137,315
3 TG-C10 11.728 101,252
4 TG-C12 13.078 126,558
5 TG-C14 14.267 94,368
6 TG-C16 15.330 107,682
7 -- 15.653 7,469
8 TG-C18 16.500 97,061
9 TG-C18:1 16.658 98,597
40
1
34
a er á
ed
s
e
d a di n
U
5 Tiempo (min) 15
Cromatograma 2. Muestra de grasa de un producto alimenticio.
Tiempos de retención y áreas de la muestra de grasa

Número Triglicérido tr (min) Área W 1/2
de pico identificado (min)
1 15.356 171,984 0.037
2 15.676 12,004 0.016
3 16.535 145,681 0.059
4 16.706 148,440 0.075
a) ¿Qué triglicéridos están presentes en el producto alimenticio?
b) Calcula la resolución y el número de platos de los compuestos encontrados

en la muestra.
c) ¿Cuál es la concentración de cada uno de ellos?
d) Reporta los resultados en mg/g de muestra.
41
Problema 11
S e r e q u i e re s a b e r si u n a m u e s t ra d e
y pr o p i l- p a ra b e n o y c u a n tifi c a rl o s s i
c ha m p ú c o n t ien e l o s c o n s er v a d o re s m e til -
s e e nc u e n tr a n p re s e n te s . P a r a e s te a n ális
p a ra b e n o
is s e p r e - pararon las siguientes disoluciones.
Estándar interno (EI): se pesaron 50 mg de butil-parabeno, se disolvieron en 50 mL de
una mezcla de éter isopropílico/acetato de etilo (2:1).
Disolución estándar (DE): se pesaron 100 mg de metil-parabeno y 50 mg de propil-
parabeno, se disolvieron en 50 mL de metanol. De esta solución se tomó 1.0 mL y se
adicionaron 2.0 mL de disolución de EI, se llevó al aforo a 10 mL con una mezcla de éter
isopropílico/acetato de etilo (2:1). Se inyectó 1 µL al cromatógrafo.
Se pesaron 2.0719 g de champú, se adicionaron 2.0 mL de metanol y 2.0 mL de disolu-
ción EI se centrifugaron. Se realizaron 3 extracciones con 2.0 mL de la mezcla de éter
isopropílico/acetato de etilo (2:1) cada una. Los extractos se juntaron y se llevó al aforo
de 10 mL con la misma mezcla de disolventes. De esta disolución se inyectó 1.0 µL al
cromatógrafo.
120°C durante 1 min, incrementando 10°C/min

Horno hasta 200°C, enseguida incrementando a 20°C/min hasta 310°C durante 10 m
Inyectortemp: 290°C
vol. inyección: 1 µL
(5% fenilmetil silicón, fase poco polar).
Columna30 m x 0.25 mm x 0.25 µm
Flujo H2: 1 mL/min
a) ¿Qué conservadores están presentes en la muestra?

b) Cuantifica el contenido de conservadores en el champú, reporta el resultado en %
en peso.
42
a er
á
e
d
s e d a di n
U
2
5 Tiempo (min) 10
Cromatograma 1. Disolución estándar de conservadores en champú.
Disolución estándar de conservadores de champú
Número Conservador tr (min) Área

de pico
1 Metil-parabeno 5.701 62,783
2 Propil-parabeno 7.434 36,926
3 Butil-parabeno 8.583 73,883
43
19
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id n U
1
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3 7 10 18
45 12
2 16
9 11 14 15
5 10
Tiempo (min)
Cromatograma 2. Muestra de champú analizada.
Tiempos de retención y áreas de la muestra analizada

Número de pico tr (min) Área
1 4.910 32,592
2 5.223 4,770
3 5.309 2,935
4 5.361 6,404
5 5.594 11,737
6 5.689 33,205
7 5.830 10,998
8 5.898 22,537
9 5.982 12,481
10 6.149 5,164
11 6.366 11,288
12 6.927 12,101
13 7 006 34 473
14 7.061 3,231
15 7.642 4,527
16 7.968 5,386
17 8.364 5,485
18 8.500 73,079
19 8.867 14,762
44
Problema 12
Se desea cuantificar por cromatografía de gases el contenido de ácido laúrico (C 12)
y oleico (C18:1) en una solución de jabón, utilizando el ácido mirístico (C 14) como
estándar interno. Para el análisis se prepararon las siguientes disoluciones.
Estándar interno (EI): se pesaron 20 mg de ácido mirístico (C14) y se disolvió en 5.0
mL de acetato de etilo.
Disolución estándar (DE): se pesaron 3.0 mg de C12 y 5.34 mg de C18:1 en un
matraz aforado de 5.0 mL se disolvieron con acetato de etilo y se adicionó 1.0 mL
de la disolución de EI llevándose a un volumen final de 5.0 mL. De esta disolución
se inyectó 1.0 µL al cromatógrafo.
Se tomó 1.0 mL de la disolución de jabón, se adicionó 1.0 mL de la solución de EI y
2 gotas de HCl concentrado. Se realizaron dos extracciones con 2.0 mL de butanol
cada una, los extractos obtenidos se mezclaron y se llevaron a un volumen final de
5.0 mL. Se inyectó 1.0 µL de esta disolución en el cromatógrafo.
80°C durante 1 min incrementando 20°C/min
Horno
hasta 280°C durante 10 min
Inyector split/splitless: split 30:1.

temp: 280°C
Columna capilar de sílice Polietilen glicol
(fase polar). 10 m x 0.25 mm x 0.25 µm
Columna Flujo H2:1 mL/min Ionización de llama: 280°C
Detector
45
1 5 7
10
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ed
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23
4
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5 Tiempo (min) 10
Cromatograma 1. Disolución estándar de ácidos grasos.
Tiempos de retención y áreas de la disolución estándar de ácidos grasos
Número de pico Ácido graso tr (min) Área

1 -- 1.48 6.91
2 -- 2.81 1.20
3 -- 2.92 7.38
4 -- C12 3.21 1.58
5 -- 3.34 167.04
6 C14 (EI) 3.53 1.64
7 -- 3.75 151.93
8 -- 4.28 2.13
9 C18:1 5.77 2.63
10 8.74 303.20
46
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6
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U
9
5 8
2 12
10 15
1 11 14
3 4
13 16
5 Tiempo (min) 10
Cromatograma 2. Muestra de jabón analizado.

Tiempos de retención y áreas de la muestra de jabón
1 1.73 5.52
2 2.25 10.65
3 2.50 4.87
4 2.92 4.16
5 3.16 17.39
6 3.34 34.01
7 3.76 82.74
8 4.03 10.79
9 4.13 25.36
10 4.28 16.58
11 4.38 2.11
12 5.76 28.64
13 6.09 1.91
14 8.28 25.27
15 8.73 53.27
16 9.69 3.47
a) Calcula el contenido de cada ácido graso presente en el jabón, expresa el

resultado en % en peso.
47
Problema 13
Se realizó por cromatografía de gases un análisis para cuantificar los ácidos grasos como
ésteres metílicos EM16, EM18 y EM18:1 en una muestra de grasa de avestruz, utilizando
el éster metílico de 15 átomos de carbono (EM15) como estándar interno.
Calcula el contenido de ácidos grasos (como ésteres metílicos) en la muestra y reporta
los resultados en mg/g de grasa. Para realizar el análisis se prepararon las siguientes
disoluciones.
Disolución patrón (DP): se pesaron en un matraz volumétrico 2.0 mg de EM16, 1.03
mg de EM18 y 3.06 mg de EM 18:1 y se disolvieron con 10 mL de hexano.
Estándar interno (EI): se pesaron 5.0 mg de EM15 en un matraz volumétrico de 10 mL,
se disolvió y se llevó al aforo con hexano.
Disolución estándar (DE): se tomó 1.0 mL de la disolución patrón más 1.0 mL de la
diso- lución de EI, se llevó a un volumen final de 5.0 mL con hexano. Se inyectó 1.0 µL
de esta disolución en el cromatógrafo.
Se pesaron 15 mg de grasa de avestruz, se saponificaron con 2.0 mL de solución
de KOH en MeOH al 10% (p/v) y se calentó a 80°C durante 1 h, se dejó enfriar. Se
realizó la esterificación con 2.0 mL de HCl en MeOH al 15% (v/v) y 100 µL de BF 3a 80°C
durante 1 h, se dejó enfriar. Posteriormente, se extrajeron los ésteres con 2.0 mL de H2O
y 2.0 mL dehexano, la fase orgánica se separó, se realizó unasegunda extracción con
otros
2.0 mL de hexano. Los extractos se juntaron y se adicionaron 2.0 mL de NaHCO 3 al 3%
para neutralizar, seguidos de 2.0 mL de H2O para lavar, la fase acuosa se descartó y la
fase orgánica se secó filtrándola con Na2SO4 anhidro. Finalmente, se llevó al aforo de
10 mL con hexano.
De esta disolución se tomó 1.0 mL y se transfirieron a un matraz volumétrico de 5.0 mL,
se añadió 1.0 mL de la disolución de EI y se llevó al aforo con hexano. De esta disolución
se inyectó 1.0 µL en el cromatógrafo de gases.
48
Horno
5°C/min hasta 250°C durante 3 min.
InyectorTemp: 200°C
Columna Capilar de sílice Carbowax
(fase polar).
Flujo H2, 1 mL/min
25 67
a er á
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se
d
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U
34
8
5 10 15
Tiempo (min)
Cromatograma 1. Disolución estándar de ésteres metílicos.

49
Tiempos de retención y áreas de la disolución estándar de ésteres metílicos
Número de pico Ésteres metílicos tr (min) Área

1 E 14 10.142 42,947
2 E 15 10.940 2,609,276
3 -- 11.120 16,679
4 -- 11.358 7,727
5 E 11.691 1,621,271
16
6 E 18:1 12.890 2,632,936
7 E 18 13.052 983,778
8 -- 13.637 7,010
2 4 6
a
ráere
ed
se
d 3 5
a di n
U
8
1
Cromatograma 2. Muestra de grasa de avestruz analizada.
Tiempos de retención y áreas de la muestra de grasa de avestruz
No. de tr (min) Área

pico
1 10.140 6,557
2 10.916 2,949,266
3 11.467 65,714
4 11.648 2,370,241
5 12.759 77,274
6 12.829 2,907,016
7 13.005 308,768
8 13.785 1,910

50
Problema 14
Se Identificaron y cuantificaron por cromatografía de gases los ácidos grasos pre-
sentes en mantequilla. Identifica los ácidos grasos presentes en una muestra y
calcula la concentración en mg/g del ácido graso que se encuentra en mayor y en
menor proporción. Para el análisis se prepararon las siguientes disoluciones.
Estándar interno (EI): disolución del éster metilundecanoato (E11) en una concentra-
ción de 10 mg/mL en hexano.
Disolución patrón (DP): se utilizó una mezcla estándar que contiene los
siguientes ésteres metílicos: miristoleato (EM14.1), palmitato (EM16:0),
palmitoleato (EM16:1), estearato (EM18:0), oleato (EM18:1), linoleato (EM18:2) y
linolenato (EM18:3) en concentración de 10 mg/mL en hexano.
Disolución estándar (DE): se tomó 1.0 mL de la disolución patrón (DP) y 1.0 mL
de estándar interno, se llevaron a un volumen final de 5 mL con hexano. Se
inyectó
1.0 µL de esta disolución en el cromatógrafo.
Se obtuvieron los ésteres metílicos a partir de 15 mg de muestra de mantequilla.
El tratamiento de la muestra incluyó las etapas de saponificación, neutralización,
derivación con BF3/MeOH y finalmente extracciones con hexano. Se adiciona 1.0
mL
de EI y el volumen final fue de 5 mL. De esta solución se inyectó 1.0 µL en el cro-
matógrafo.
Horno 160°C durante 1 min incrementando 5°C/min hasta

250°C durante 3 min. split/splitless: split 30:1. temp: 200°C
Inyector
Columna capilar de sílice Carbowax (fase polar).

Columna 30 m x 0.32 mm x 0.25 µm
Flujo H2: 1 mL/min Ionización de llama: 200°C
Detector
51
34
2
a er á 1 5 6
ed
sed
7
a 8
i
d
nU
Tiempo (min) 5 10
Cromatograma 1. Disolución estándar de ésteres metílicos analizados.
Tiempos de retención y áreas de la disolución estándar de ésteres metílicos
Número Estermetílico tr (min) Área

de pico
1 E 11 (EI) 4.309 12,182
2 E 14:1 6.381 13,356
3 E 16:0 7.302 14,617
4 E 16:1 7.448 15,272
5 E 18:0 8.599 14,098
6 E 18:1 8.749 15,376
7 E 18:2 9.111 14,586
8 E 18:3 9.681 11,721
52
10 11
8
ae 4
r áe
se
d
a di n
U
6
12
3
1 2 5 13
7 9 14
Cromatograma 2. Muestra de mantequilla analizada.
Tiempos de retención y áreas de la muestra de mantequilla analizada

1 1.192 1,958
2 1.565 1,527
3 2.103 3,438
4 4.300 12,237
5 4.945 2,435
6 6.020 2,881
7 6.161 1,517
8 7.292 8,640
9 8.584 4,237
10 8.735 16,688
11 9.095 8,317
12 9.665 1,932
13 15.001 1,868
14 20.023 2,013
53
Problema 15
Se requiere determinar el % de etanol en dos muestras de gel antibacterial para manos,
para lo cual se realizó un análisis cromatográfico tomando una porción del vapor sobre-
nadante de la muestra (HS, por sus siglas en inglés), bajo las siguientes condiciones.
Disolución patrón (DP): se tomaron 0.7 mL de etanol y se llevaron a 10 mL con H2O.
Estándar interno (EI): se utilizó una disolución de propanol de 60 mg/mL en H2O.
Disolución estándar (DE): se tomó 1.0 mL de disolución patrón y 1.0 mL de estándar
interno, se llevaron a un volumen final de 10 mL con H 2O y se trató de la misma manera
que la muestra.
Se pesó la muestra (tabla) y adicionó 1.0 mL de estándar interno, se llevaron al aforo de
10 mL con H2O, la disolución se introdujo en un vial que se selló herméticamente y se
dejó equilibrar a 68°C durante 2 min, pasado este tiempo con una jeringa se tomaron
200 µL del vapor sobrenadante y se inyectaron en el cromatógrafo, cada muestra se
analizó por triplicado.
80°C durante 1.3 min, incrementando
Horno
Columna capilar de sílice SP 1000
Columna(fase polar). 30 m x 0.32 mm x 0.25 µm
Flujo H2: 1 mL/min
Información experimental
Características químicas del etanol estándar:
Pureza: 99.8%
Densidad: 0.78 g/mL
54
Peso de gel antibacterial analizado

1a 135.72 2a 116.75
1b 123.26 2b 156.35
1c 150.28 2c 204.00
Áreas de la disolución estándar
Disolución Área EtOH Área EI

Estándar 1,105.81 1,606.98
Áreas de las muestras de gel antibacterial analizado
Disolución Área EtOH Área EI

M1a 738.26 680.62
M1b 1,085.65 1,067.70
M1c 519.11 441.33
M2a 529.35 583.11
M2b 1,119.06 905.54
M2c 488.67 320.83
a) Calcula el % en peso de etanol en cada muestra.
55
Problema 16
Se desea identificar y cuantificar alcanfor (C 10H160) y naftaleno (C10H8) de un producto
que se utiliza para la manufactura de plásticos. Para ello se prepararon una disolución
estándar y una disolución problema las cuales se inyectaron en un sistema acoplado:
Cromatógrafo de Gases-Espectrómetro de Masas (CG-EM).
Disolución estándar: se pesaron 23 mg de naftaleno y 23 mg de alcanfor se disolvieron
en isoctano y se llevaron al aforo de 10 mL. Se inyectó 1.0 µL.
Se pesaron 200 mg de la muestra y se disolvieron en isooctano llevándolo a un aforo
de 10 mL, de esta disolución se inyectó 1.0 µL. El análisis de la disolución estándar y la
muestra se realizó por triplicado.
Condiciones cromatográficas y espectrómetro de masas
80°C durante 1.3 min, incrementando 20°C/min

Horno
hasta 130°C durante 5 min
Capilar de sílice fundida 5% difenilo -95%
polidimetilsiloxano (fase poco polar).
Columna 30 m x 0.25 mm x 0.25
µm Flujo He: 1 mL/min
Impacto electrónico. Línea de transferencia:
280°C. Energía de ionización (EI): 70 EV. Barrido
Espectrómetro
de masas total de iones (SCAN).
Áreas promedio y tiempos de retención de la disolución estándar

No. de Compuesto tr (min) Área promedio
pico
1 Naftaleno 8.778 41,962,757
2 Alcanfor 9.453 56,887,110
56
Tiempos de retención y áreas promedio de la muestra
Número de pico tr (min) Área promedio

1 3.452 2,354
2 5.362 1,937
3 8.739 15,492,843
4 9.012 1,235
5 9.412 56,389,894
Ea)spIdeecntrtoifsicdaelomsacsoams poubetesntoidsops:resentes en la muestra analizada. ¿Se en
100
50
51 64 102
39 77
0 40
20 30 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140
(m a in lib) Naphtalene
95
100
41
81
50
69 108
55
27 39 83
152
67
29 53
43 51 77 9 93
65 1 137
124
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160
(m a in lib) Camphor
b) ¿Qué concentración de naftaleno y alcanfor hay en la muestra? Expresa la

concentración en mg/g de muestra.
c) En los espectros de masa identifica el ion molecular y el pico base de cada
compuesto.
57
Problema 17
Se sabe que los terpenos son compuestos que contribuyen al aroma y al sabor, por lo
que se quiere caracterizar la composición de ellos en una bebida de frutas.
Para ello se preparó una disolución estándar en diclorometano, con los siguientes terpe-
nos: linalol, isoborneol, borneol, 4-terpineol, α-terpineol, eugenol, nerolidol, α-bisabolol
y farnesol, todos a una concentración de 50 ppb. De esta disolución se inyectó 1 µL en
el
cromatógrafo.
La muestra se preparó extrayendo estos compuestos con diclorometano. Para ello se
tomó una alícuota de 50 mL de la bebida y se diluyó con 50 mL de agua extrayéndose
3 veces con 10 mL de diclorometano, se juntaron los extractos y se concentraron utili-
zando un aparato de Kuderna-Danish y se llevó a un volumen final de 1.0 mL. De esta
disolución se inyectó 1.0 µL en el cromatógrafo de gases.
40°Cdurante1minincrementando
Horno
split/splitless: splitless 1 min.

Flujo H : 1 mL/min
2
58
Compuesto tr (min) w1/2 (min) Áreas
linalol 12.740 0.042 233,667
isoborneol 14.400 0.032 54,216
borneol 14.660 0.040 303,773
4-terpineol 15.001 0.039 287,734
α-terpineol 15.380 0.042 153,212
ug e n 1 9 9 7 4 4 6 ,2
ne r o li 2 4. 3 0.0 3 7 1 42 ,
l 0 9 4
do l 5 1 3 0 1
α-bisabolol 27.830 0.035 160,668
farnesol 28 631 0 044 35 424
Bebida de frutas
Compuesto tr (min) w1/2 (min) Área
1 12.742 0.044 118,818
2 14.659 0.040 157,569
3 14.999 0.041 155,170
4 15.381 0.041 72,668
5 24.349 0.035 73,970
6 27.828 0.037 83,503
a) ¿Qué terpenos identificas en la bebida?
b) Calcula la concentración de los 3 compuestos más retenidos en la bebida

(ésta se presenta comercialmente en un volumen de 355 mL).
c) Calcula la resolución para los 3 compuestos menos retenidos.
59
Problema 18
Una industria de frituras desea saber qué contaminante(s) están presentes en la tinta
utilizada en la elaboración de la envoltura, porque se sospecha que son los causantes
de generar un olor y sabor desagradable al producto. Se sabe que entre los disolventes
utilizados en estas tintas se encuentran: etanol, xileno y acetato de etilo.
Para el análisis se preparó una disolución estándar con los tres disolventes utilizando
como estándar interno acetona. De esta disolución se inyectó 1.0 µL al cromatógrafo.
Se tomó 100 mg de tinta, se agregó 1.5 mL de acetona y se llevó al aforo de 5.0 mL con
pentano. Se inyectó 1.0 µL y el análisis se realizó por triplicado.
Horno 85°C Isotérmico
split/splitless: split 200:1
Columna capilar de sílice fundida Carbowax

Columna(fase polar). 30 m x 0.32 mm x 0.25 µm.
Flujo H2: 1 mL/min
Disolvente Conc. (%) tr (min) Áreas
Etanol 25 5.785 85,242
Acetato de etilo 10 9.153 41,433
Acetona 30 14.182 97,562
Xileno 35 17.569 12,761
60
Muestra de tinta analizada
Número tr (min) Áreas

de pico
1 5.932 24,683
2 7.625 35,271
3 14.184 12,347
4 14.357 1,034
5 17.571 18,792
6 19.931 1,450
a) Indica cuál es el disolvente presente en la muestra.

b) ¿Cuál es la concentración de éste? Expresa el resultado en %.
61
Problema 19 a
El Cromatograma 1 se obtuvo al analizar una muestra de plaguicida con una columna
OV-17, clasificada como moderadamente polar (50% fenilpolisiloxano), cuyas
dimensiones son 10 m x 0.25 mm x 0.25 µm.
CROMATOGRAMA 1
RESPUESTA DEL
DETECTOR
10000
9000
E
8000
C D
7000
6000
5000
4000
3000
2000
A
1000
0
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360
TIEMPO (seg)
a) Identifica en el cromatograma la información requerida, calcula los parámetros

croma- tográficos y completa las siguientes tablas con los resultados obtenidos (expresa
todas las unidades de tiempo en minutos).
Datos experimentales:
Velocidad del papel: 1 cm/min

Pico cromatográfico tm (min) tr (min) t’r (min) w½ (min) k’
A
B
CD
E
62
Par de picos Rs α
B-C
D-E
Pico N H (mm)
D
b) Con los resultados obtenidos de parámetros cromatográficos responde las

siguientes preguntas:
1. ¿La resolución (Rs) entre los picos D y E es aceptable? ¿Por qué?
2. ¿La selectividad (α) para los picos D y E es aceptable? ¿Por qué?

3. Suponiendo que los compuestos de interés sean D y E. ¿Qué puedes decir
acerca de los valores de k’ para estos picos?
4. En general, tomando en cuenta la eficiencia de la columna, indica si el

análisis de D y E debe realizarse con esta columna. Justifique su respuesta.
63
Problema 19 b
La misma muestra de plaguicidas se analizó nuevamente en el mismo cromatógrafo,
pero se cambió la columna por una SE-54, clasificada como ligeramente polar (5%
fenil polisiloxano), cuyas dimensiones son 15 m x 0.25 mm x 0.25 µm, se obtuvo el
Cromatograma 2:
RESPUESTA
DEL DETECTOR CROMATOGRAMA 2
10000
9000
D E
8000
C
7000
6000
5000
4000
3000
2000
A B
1000
0
40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 110 115 120
TIEMPO (seg)
Identifica en el cromatograma la información requerida, calcula los parámetros cromato-

gráficos y completa las tablas (expresa todas las unidades de tiempo en minutos).
Pico cromatográfico tm (min) tr (min) t’r (min) w½(min) k’
A
BCD
E
Par de picos Rs α
cromatográficos
D-E
Pico N H (mm)
cromatográfico
E
64

siguientes preguntas
2. ¿La selectividad (α) y el factor de capacidad (k’) para los picos D y E son
aceptables? ¿Por qué?
3. En el caso de que la selectividad (α) y el factor de capacidad (k’) sean

óptimos para la separación, ¿qué factor modificarías para que el valor de
resolución (Rs) sea aceptable?
4. Suponiendo que los compuestos de interés sean D y E, ¿qué puede decir
acerca de los valores de k’ para estos picos?

5. ¿Considera que el análisis de E debe realizarse con esta columna? Justifique
su respuesta.
65
Problema 20
Se requiere cuantificar el acetaldehído presente en una muestra de queso, para ello se
realiza un análisis cromatográfico por adiciones patrón.
Se extrae 1.0 g de queso con diclorometano y se afora a 5.0 mL. Se toman 5 alícuotas
de 0.5 mL cada una y se transfieren a matraces volumétricos de 1.0 mL. Se les adiciona
diferentes volúmenes de una solución de 10 ppb de acetaldehído para tener respectiva-
mente 0, 1, 2, 3 y 4 ppb de acetaldehído. Se forma un derivado, aforándose a 1.0 mL. Se
inyecta por triplicado 1.0 µl de cada solución al cromatógrafo.
40°C durante 1 min incrementando

Horno
split/splitless: splitless 1 min.
vol. inyección: 1 mL
Flujo H2: 1 mL/min
Datos:
Matraz Volumen (μl) Conc(ppb) Área

1 0 19,998
2 1 39,899
3 2 61,000
4 3 81,010
5 4 101,000
a) ¿Qué volumen de la solución de 10 ppb de acetaldehído se adiciona a las muestras?
b) ¿Qué concentración de acetaldehído hay en el queso?
66
Problema 21
Los filtros UV son compuestos químicos orgánicos que absorben la radiación ultra-
violeta y se utilizan como ingredientes en productos de cuidado personal (cosmé-
ticos, cremas, lociones, lápices labiales, aerosoles, tintes de cabello y champús,
entre otros). Al ser usados diariamente por millones de personas, son liberados al
ambiente y por su carácter lipofílico tienden a bioacumularse en organismos como
los peces, por lo cual existe una necesidad de monitorear estos compuestos, ya
que son disruptores endócrinos.
Se hizo un muestreo de peces en un río contaminado con cuatro de estos
compuestos, se quiere determinar su concentración en el músculo fresco utilizando
cromatografía con las siguientes condiciones.
Condiciones cromatogáficas
ColumnaSymmetryShield C18 Longitud: 150 mm Diámetro interno: 4.6 mm Tamaño de partícula: 5 µm Temp. 40°C
Flujo: 1 mL min-1
Fase móvilA: Agua acidificada con 1% de H3PO4 0.1 M
B: Etanol
Gradiente
Tiempo %A %B
0 40 60
13 40 60
23 0 100
35 0 100
36 40 60
39 40 60
Detector UV-VIS λ = 312 nm
Volumen de inyección Bucle (Loop): 20 µL
67
0.07 19.879
14.129
0.06
0.05
0.04 28.210
U
A 31.620
0.03 8.944
0.02
0.01
0.00
OXI IAMC OC 2-EHMC AVO
Minutes
5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00
Compuestos: Oxibenzona (OXI), Estándar Interno (EI)= isoamil p-metoxicinamato,
octocrileno (OC), 2-etilhexil metoxicinamato (2-EHMC), avobenzona (AVO)
Para cuantificar se realizaron curvas de calibración, usando como estándar interno

isoamil p-metoxicinamato (IAMC) a una concentración de 200 ng/mL, los resultados
obtenidos se presentan a continuación.
Área
Concentración Áreas
Nivel Nivel Concentración
EI
(ng/mL) OXI OC 2-EHMC AVO (ng/mL) IAMC
1 100 4706 38773 5369 5496 1 200 34768
2 200 708564276 8829 8900 2 200 33673
3 400 14973140823 20768 19858 3 200 34704
4 600 20968214851 26804 28046 4 200 34654
5 800 28103313078 37583 40045 5 200 35801
Se analizaron 3 muestras de músculo de pescado. Para el análisis de cada muestra el
músculo fresco se liofilizó, perdiendo un 80% de agua y dando un peso seco de 2 g. Se
pesó 1 g del músculo liofilizado y se realizó una extracción Soxhlet con 100 mL de una
mezcla hexano-acetona (9:1) durante 2.5 horas. El extracto se evaporó a sequedad y se
redisolvió en 0.5 mL de etanol; posteriormente, se limpió con cromatografía de permea-
ción en gel (GPC) y se aforó a un volumen de 2 mL con etanol. Por último, fue inyectado
en un cromatógrafo de líquidos, dando los siguientes resultados:
68
Áreas
Muestra OXI IAMC OC 2-EHMC AVO
A 10,522 33,791 88,523 30,521 13,356
B 5,073 34,592 235,621 10,223 7,806
C 24,211 34,004 324,378 40,945 43,109
Determinar la concentración de los analitos en el músculo fresco (ng/g).

69
Problema 22
El siguiente cromatograma se obtuvo de la inyección de 20 µL de una disolución estándar
de metil, etil, propil y butilparabeno con las siguientes condiciones cromatográficas:
columna Inertsil ODS 2 (150 mm x 4.6 mm x 5 µm); Fase móvil: MeOH-H2O 70:30; Detec-
ción UV: 260 nm; flujo 1.0 mL/min.
tR1 = 2.7 min
tR2 = 3.09 min

tR3 = 3.77 min tR4 = 4.85 min
ta = 1.68 min
(calc.)
w
0 1 2 3 4 5 6 7
Resultados experimentales
tr (min) Área Wb % Área

(μV*min) (min)
2.706 1675277 0.087
3.090 1509911 0.095
3.766 1661197 0.112
4.851 1679078 0.136
Del cromatograma calcula:

b) N para el etilparabeno
c) R para etil y propilparabeno
d) k´ para etilparabeno
70
Problema 23
Se desea cuantificar el contenido de vitamina E de una crema humectante enri-
quecida con vitaminas A y E. Para ello se prepara una disolución estándar de la
vitamina A y E a 10 µg/mL en acetona. Se inyecta 10 µL y se obtienen los siguientes
resultados:
Área de 153587 para la vitamina E y Área de 143587 para la vitamina A.
to = 1.2 min; tr (Vit. A) = 5.8 min; w1/2= 0.2 min;tr (Vit. E) = 7.2 min; w1/2 = 0.3 min
Muestra:
Se preparó una disolución (por triplicado) pesando 100 mg de crema, realizando
todo el procedimiento de extracción y el volumen final fue de 100 mL en acetona.
De esta solución se inyectó 10 µL, obteniéndose un área de 35186 para la vitamina
E.
1. Calcular: factor de retención, selectividad, resolución y eficiencia para las
vitaminas A y E.
2. ¿Cuál es la concentración (% en peso) de la vitamina E en la crema?
3. ¿Qué cromatografía se utilizó?
4. ¿Qué condiciones cromatográficas se utilizaron (columna, detector, fase móvil,

etc.)? Explica ampliamente.
71
Problema 24
Se requiere determinar la concentración de Piroxicam e Ibuprofeno (antiinflamatorios)
en tabletas. Para ello se realizó un análisis por HPLC,bajo las siguientes condiciones
cromatográficas.
OH O
O
N N
N H
HO S
CH3 O
O
Ibuprofeno Piroxicam
ColumnaHypersil (fase inversa) Longitud: 150 mm Diámetro interno: 4.6 mm Tamaño de partícula: 5 µm Temp. Ambien
Flujo: 1 mL min-1
Fase móvilA: 0.1% ácido fórmico B: Acetonitrilo
Gradiente55-100%B en 5 min
Detector UV-VISλ = 220 nm
Volumen de inyecciónBucle (Loop): 10 µL
Las tabletas tienen un peso promedio de 600 mg y 250 mg de cada principio activo
por tableta. Para la determinación se preparó una disolución estándar de 1.0 mg/mL
(0.1% ácido fórmico: acetonitrilo) de cada uno de los principios activos, se tomó una
alícuota de 1 mL y se aforó a 2.0 mL. De esta disolución se inyectaron 10 µl al
cromatógrafo. Para la muestra se pesaron 100 mg de muestra y se extrajeron
totalmente los principios activos llevándose a un volumen final de 100 ml, de aquí se
tomó una alícuota de
1.0 mL y se aforó a 2.0 mL. De esta disolución se inyectaron 10 µL al cromatógrafo.
72
Área Piroxicam Área Ibuprofeno

Estándar 673446 346638
Estándar 673333 347894
Estándar 692999 346663
Muestra* 328878 168394
*área promedio n=3
¿Cuál es el contenido de Piroxicam e Ibuprofeno por tableta? De acuerdo con lo

especificado en la farmacopea, la tableta debe contener de cada principio activo
250 mg ± 5%, ¿se aceptan o se rechazan las tabletas?

73
Problema 25
Se desea cuantificar, en panqués, el posible contenido de tetrahidrocannabinol (THC),
sustancia psicoactiva de la marihuana. La técnica propuesta es CLAE con un detector
UV-Visible. Cuatro panqués fueron molidos y mezclados homogéneamente, se pesaron
tres fracciones de 5 g cada una en matraces Erlenmeyer de 100 mL. Se extrajeron adicio-
nando 20 mL de ter-butilmetil éter a cada matraz y colocándolos en un baño ultrasónico
durante 20 min, al término de los cuales, los extractos fueron filtrados y pasados a
través
de columnas empacadas con sílica gel. Posteriormente, se concentraron en un rotaeva-
porador hasta un volumen final de 5 mL. De esta solución se inyectaron 10 µL de cada
muestra al cromatógrafo de líquidos bajo las condiciones abajo descritas.
ColumnaC-18 (Fase inversa) Longitud: 4.6 cm Diámetro interno: 4.6 mm Tamaño de partícula: 5 µm Temp. Ambiente
Flujo: 1.2 mL min-1
Fase móvilacetonitrilo-agua, 70/30; análisis
isocrático
Para cada muestra se obtuvo un cromatograma con un pico al tiempo de retención del
THC con las áreas que se muestran en la tabla.
Muestra Área tr (min)
1 163.20067 2.412
2 161.5121 2.403
3 161.7500 2.408
Para la cuantificación se realizó por triplicado una curva de calibración con un estándar
de alta pureza del THC. Los datos se muestran en la tabla.
Curva de calibración
THC µg/mL Área promedio tr (min)
1 11.8267 2.407
5 71.1157 2.410
10 140.2586 2.401
30 470.2890 2.406
60 940.4270 2.411
74
Calcular la concentración (masa/volumen) de THC en los extractos (5 mL)

inyectados al cromatógrafo de líquidos y calcular la concentración en los panqués
expresada en ppm (masa/masa).

75
Problema 26
Se analizó agua de un río para determinar si existe contaminación de hidrocarburos aro-
máticos policíclicos (HAPs), debido a que hubo un derrame de petróleo crudo. Para ello
se realizó la preparación de la muestra con base en extracción líquido-líquido con diclo-
rometano. Para la extracción se tomó una alícuota de 25 mL de agua. El residuo se redi-
solvió con 200 µL de acetonitrilo-agua 50:50.
Determinar qué concentración de contaminantes se tiene en la muestra de agua de
río, en la cual se identificaron antraceno y fluoranteno.
Se preparó una disolución estándar con los 16 HAPs considerados contaminan-
tes prioritarios de acuerdo con la Agencia de Protección Ambiental (EPA, por sus siglas
en inglés), a una concentración de 10 ng/µl en acetonitrilo. Se realizaron las diluciones
necesarias para llegar a una concentración de 500 ng/L y se inyectó el estándar a un
cromatógrafo de líquidos bajo las condiciones indicadas en la tabla.
ColumnaC-18 (Fase inversa)
Longitud: 25 cm Diámetro interno: 4.6 mm
Tamaño de partícula: 5 µm Temp. Ambiente
Flujo: 1.5 mL min-1
Fase móvilacetonitrilo-agua 50/50
Gradienteacetonitrilo-agua 50/50 durante 3 min incre-
mentar acetonitrilo hasta 100% en 10 min y mantenerlo durante 20 min.
Antraceno* Fluoranteno*
Estándar 473,424 246,638
Estándar 473,311 247,894
Estándar 492,977 246,663
Muestra 1 328,856 88,394
Muestra 2 300,098 89,119
Muestra 3 328,099 87,932
*unidades de área
76
)
V/ Naphtalene 10 Benzo (a) anthracene
(m 25 Acenaphthylene Chrysene
e
g
Acenaphthene 9 Benzo (b) fluoranthene
a
lt Fluorene Benzo (k) fluoranthene
o Phenanthrene
V
20 11Benzo (a) pyrene
Anthracene Dibenzo (a,h) anthracene
Fluoranthene Benzo (g,h,l) pyrelene
Pyrene 5
12 13 16. Indeno (1,2,3-cd) pyrene
15
78 16
10
1 6
4
5 2
15
3 14
0
0 5 10 15 20
Time (min.)
Cromatograma de la disolución estándar de 16 HAPs. Concentración 500 ng/L,

en acetonitrilo:agua (50:50).
Calcular la concentración de los contaminantes antraceno y fluoranteno en el río.
77
Problema 27
El sulfato de abacavir es un fármaco utilizado en el tratamiento contra el VIH, causante
del sida. Se administra por vía oral y posee una elevada biodisponibilidad (aproximada-
mente el 83%). Su estructura se presenta a continuación:
HN
N
N
H2N N N
HO .H2SO4
La configuración absoluta del fármaco es (1S, 4R), pero durante su síntesis se produ-
ce una impureza que es el enantiómero de configuración opuesta (1R, 4S), y debe ser
controlado a no más de un 0.3% en el fármaco final, ya que los estereoisómeros de un
fármaco pueden tener diferentes efectos farmacocinéticos, farmacológicos y toxicológicos.
Para determinar la cantidad de la impureza en un lote de sulfato de abacavir, se
utilizó cromatografía de líquidos en fase normal con las siguientes condiciones:
ColumnaChiralPAK AD-H Longitud: 250 mm Diámetro interno: 4.6 mm Tamaño
Flujo: 1.0 mL min

Fase móvil Hexano-ETOH-MeOH (70:15:15);
análisis isocrático
Detector UV-VIS λ = 220 nm
Volumen de inyección Bucle (Loop): 20 µL
La muestra se preparó disolviendo 125 mg en un matraz volumétrico de 10 mL, de esta

solución se tomó una alícuota de 1 mL, la cual se llevó a un volumen de 25 mL.
78
mAU 46700.35
2
1868.01
0 5 10 15 20 25
Tiempo de retención (min)
Cromatograma del análisis por HPLC del sulfato de abacavir.

Pico 1. Enantiómero (1R, 4S); Pico 2. Sulfato de abacavir (1S, 4R).
Determinar el porcentaje de impureza.
79
Problema 28
El alendronato de sodio trihidratado se usa para tratar y prevenir la osteoporosis
(afección en la que los huesos se vuelven delgados y débiles), actúa previniendo la
degradación de los huesos y aumentando su densidad (grosor). Su estructura es la
siguiente:
HO ONa
P P
H2N HO •3HOH
O
OH
2
Se desea determinar el contenido del principio activo en tabletas por cromatografía de

líquidos. Cada tableta contiene 92 mg de trihidrato de alendronato monosódico, equiva-
lente a 70 mg del ácido libre y el peso promedio por tableta es de 300 mg.
ColumnaAllsepAnion
LDoiánmgietturdo: i1n5te0rnmom: 4.6 mm

Tamaño de partícula: 7 µm Temp. 32°C
Flujo: 1.2 mL min-1
Fase móvilÁcido fórmico 0.2% en agua, ajustado
a pH 3.5 con NaOH 1N. Isocrático
Detector IR (Índice dePolaridad: positiva
Refracción)Temp. unidad óptica: 40°C
La solución estándar se preparó disolviendo el equivalente a 50 mg de ácido libre en

25 mL de ácido fórmico 0.2% en aguay se analizó por HPLC.
Se tomaron tres muestras de tabletas molidas y homogenizadas. Cada muestra se disol-

vió con 25 mL ácido fórmico 0.2% en agua, se centrifugó y filtró la disolución, la cual se
analizó por HPLC. Calcula la concentración del principio activo en las tabletas.
80
RID1 A, RID A, Refractive Index Signal (RID TESTRIDC0011.D)

nRIU
35000
30000
25000
20000
15000
10000
Alendronato
5000
0 2 4 6 8 min
Cromatograma del análisis por HPLC de trihidrato de alendronato de sodio

en tabletas.
Inyección Peso muestra Muestra Inyección Estándar

muestra 1 (mg) área 232000 estándar 1 área 246,638
2 200 172846 2 247,894
3 150 347093 3 246,663
300
81
Problema 29
El topiramato es un fármaco antiepiléptico y estabilizador del estado de ánimo, usado
principalmente para tratar epilepsia, migraña, Trastorno Límite de la Personalidad (TLP)
y, en ciertas ocasiones, para el tratamiento de episodios maníacos. Este fármaco es un
monosacárido sustituido con sulfamato, su estructura se muestra en la siguiente figura:
o NH
2
s
o o o
o o
o o
Topiramato
Cuando se almacena en condiciones ambientales es muy estable en estado sólido; sin

embargo, con elevadas temperaturas y humedad, se degrada produciendo los aniones
inorgánicos sulfato (SO -2) y sulfamato (NH SO -), por lo cual al monitorear estos iones se
4 2 3
puede confirmar su degradación.
En un lote de este fármaco se estudiaron estos productos de degradación usando
cromatografía iónica con las condiciones mostradas en la tabla.
ColumnaDionex AS11 Longitud: 250 mm
Diámetro interno: 4 mm Tamaño de partícula: 13 µm Temp. 25°C
Flujo: 1.5 mL min-1
Fase móvilNaOH 30 mM
Isocrático
SupresorASRS 300, 4 mm
Intensidad de corriente: 112 mA
DetectorConductividad
Temperatura de celda: 35°C
82
TOP0617 #9 STD CD_1

20.0
µS
fato
ul
3: S
15.0 .30
to
a3
lfam
Su
33:
10.0 2.0
5.0
-3.0 min
0.00 1.25 2.50 3.75 5.00 6.25 8.00
Cromatograma de la solución estándar.

Pico 1. Sulfamato; Pico 2. Sulfato.
La muestra se preparó disolviendo 200 mg del principio activo en 10 mL agua

desionizada-acetonitrilo (80:20). Para que cumpla con la especificación los valores
de los iones deben ser menores al 0.05% m/m en el principio activo. Área promedio
de la muestra: sulfamato= 112.4590 y sulfato= 300.4567.
Los estándares se prepararon disolviendo 10 mg de ácido sulfámico y 18 mg de
sulfato de potasio en 100 mL de agua desionizada-acetonitrilo (80:20). Se
realizaron diluciones para tener las concentraciones de sulfamato y de sulfato para
calcular la curva de calibración, analizándose bajo las mismas condiciones que la
muestra.
Determinar si cumple con la especificación.
Concentración Sulfamato Sulfato

µg/mL Área* Área*
1 11.8267 31.8267
5 59.1157 159.1157
10 110.2586 319.2586
20 236.2890 636.2890
30 354.4270 954.4270
*área promedio n=3
83
Problema 30
Los mono y disacáridos en leches de fórmula son indicadores de su estabilidad, sobre
todo cuando se tienen almacenadas por largos periodos de tiempo, es por esto que se
necesita evaluar su concentración para observar si hay diferencias con las condiciones y
el tiempo de almacenamiento. Por ejemplo, la degradación de lactosa forma lactulosa,
la cual no está de manera natural en la leche. Esta evaluación se realizó por
cromatografía de líquidos con las condiciones indicadas en la tabla.
ColumnaTracercarbohydrates Longitud: 250 mm Diámetro interno: 4.6 mm
Tamaño de partícula: 5 µm
Temp. 25°C
Flujo: 1.8 mL min-1
Fase móvilAcetonitrilo-Agua (75:25) Isocrático
Detector IRPolaridad: positiva
Temp. de la unidad óptica: 35°C
600 mg de leche en fórmula se disolvieron en 10 mL de etanol-agua (50:50). La sus-
pensión se colocó en un baño de agua a 60°C y se agitó hasta su completa disolución.
Se adicionaron 250 mL de las soluciones de Carrez I y II, así como 5 mL de acetonitrilo
(usados para precipitar proteínas). Se le adicionaron 15 mL de una solución etanol-agua
(50:50) y se dejó precipitar durante 2 horas. La solución se filtró y se limpió con EFS en
un cartucho C18 Sep-Pak Plus. El extracto se filtró con una membrana de 0.45 µm y se
inyectó en el sistema HPLC.
84
µRIU
14 000
A
1
2 4
3 6
5
0
0 5 10 15 20 min
µRIU
14 000
B
0
0 5 10 15 20
min
Cromatograma del análisis de azúcares por HPLC.
A. Estándar de sacáridos con fructosa, glucosa y galactosa (3 mg mL-1), sucrosa
(2 mg mL-1), lactulosa y lactosa (1 mg/mL-1). B. Muestra de una leche infantil en
fórmula. 1. Fructosa, 2. Glucosa, 3. Galactosa, 4. Sucrosa, 5. Lactulosa, 6. Lactosa.
1. Identificar qué azucares están en la leche fórmula.

2. Determinar si la leche fórmula se encuentra en condiciones para su consumo
(expresa la concentración en mg/mL y en %).
Azúcar Estándar* Muestra*

1200 1100
978990 Nd
900 870
*Áreas promedio, n=3600 155
710 720
Nd = No detectada
85
RESPUESTAS
Problema 1
a) Utilizando los resultados experimentales de cada temperatura de trabajo calcula el

factor de retención (k’), la eficiencia (N), la selectividad (α) y la resolución (Rs). Completa
la siguiente tabla.
Temp tr wb1+wb2 tr2-tr1

(°C) (min)
W
1/2
(tr/W
1/2
) (tr/W
1/2
)2
(min) (min)
N R k´ α
(min)
A 0.61 0.016 38.13 1453.52 8052.48 0.906
40 0.068 0.32 9.41 2.10
B 0.93 0.024 38.75 1501.56 8318.66 1.906
A0.530.01244.17 1950.69 10806.85 0.656

50 0.047 0.21 2.00
B0.740.01646.25 2139.06 8.94 1.313
11850.41
A0.470.01142.73 1825.62 10113.93 0.469
60 0.043 0.11 1.73
B0.580.01441.43 1716.33 5.12 0.813
b) Compara los resultados de la tabla anterior de parámetros cromatográficos en cada
temperatura y responde:
1. ¿Cómo se modifican los parámetros cromatográficos al variar la temperatura?

Al aumentar la temperatura, los parámetros de capacidad, selectividad y resolución
disminuyen, mientras que el número de platos teóricos aumenta.
2. ¿Qué significado tienen estos resultados en la separación cromatográfica?

Que, al aumentar la temperatura, la separación entre los picos disminuye.
3. ¿En qué temperatura de horno sería adecuada para realizar el análisis

cromatográfico? Justifica tu respuesta.
De estas 3 la mejor es a 60°C, R es mayor a 1.5 y el tiempo de análisis es menor.
86
Problema 2
a) Calcula el contenido de etanol en la muestra, expresa el resultado en % v/v.
EI 2% v/vDE 0.2% v/v EI

DP 1.99% v/v EtOH 0.19% v/v EtOH
Área EtOH Área EI A rel C rel Frr Frr prom
87153 86290 1.01 0.998 1.012
81210 78844 1.03001 0.998 1.032 1.022
86500 84804 1.02 0.998 1.022
Muestra farmacéutica
Área EtOHÁrea EIA relCon %%v/v final
20418 85190 0.240 0.047 0.117
24512 102133 0.240 0.047 0.117
19820 82928 0.239 0.047 0.117
R = 0.117% v/v EtOH
b) La concentración máxima permitida de alcohol en este tipo de fármacos es de
5% v/v, con base en el resultado obtenido. ¿Se debe aceptar o rechazar el
producto? Se debe aceptar.
Problema 3
a) Calcula la concentración de etanol en la muestra y expresa el contenido en % v/v.

Curva calibración relativa
DP EI Vol. Conc Arel
Arel 1Arel 2 Arel 3
( mL) (mL) mL (% EtOH) prom.
0.1 1 10 0.1 0.105 0.103 0.107 0.105

0.5 1 10 0.5 0.508 0.498 0.523 0.510
1 1 10 1 0.944 0.941 0.976 0.954
1.5 1 10 1.5 1.456 1.454 1.459 1.457
2 1 10 2 1.842 1.842 1.748 1.810
87
2.0
1.8
1.6
1.4
l 1.2
er 1.0
A
0.8
0.6 y = 0.9068x + 0.0422 R2 = 0.9968
0.4
0.2
0.0
00.0511.52
% Et OH
Muestra
% v/v
Iny A EtOHA Acet Arel Con % Prom.
final
1 296800 187150 1.586 1.702 3.405
2 290840 185900 1.564 1.679 3.358
3 287960 185880 1.549 1.662 3.324 3.352
4 285800 183680 1.556 1.669 3.339
5 291010 187180 1.555 1.668 3.336
R = 3.35% v/v EtOH
Problema 4
a) Calcula la concentración de diclorobenceno en cada punto de la curva patrón y

completa la tabla de resultados de la curva de calibración relativa.
Pto. Conc. Área Área EI Arel

1 0.002 19998 275556 0.073
2 0.004 39899 242563 0.164
34 0.0068 6810010 25457404786

0.233298
88
0.35
0.3
0.25
l 0.2
reA0.15
y = 42.011x - 0.0091 R2 = 0.9985
0.1
0.05
0
0 0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.0080.009
C C6H4Cl2 (mg/mL)
b) Calcula la concentración de C6H4Cl2 en la muestra y expresa el resultado en ppm.
Conc
Iny Área Área EI Arel Conc (mg/mL) ppm
1 65430 275556 0.237 0.0059 5.868
2 65400 242563 0.270 0.0066 6.634
3 65430 255448 0.256 0.0063 6.313
R = 6.27 ppm
Problema 5
a) Calcula la selectividad (α) de la columna cromatográfica así como la resolución

(Rs) de los compuestos analizados.
Tr W1/2 R α
0.5
Sacarosa11.47 0.5 2.75 1.05
Trihalosa12.022
b) Con los resultados del inciso a) de parámetros cromatográficos, analiza si las

condiciones cromatográficas de análisis fueron adecuadas para realizar el análisis
cuantitativo.
Sí son adecuadas ya que presenta valores adecuados en todos los paráme-
tros calculados que nos indican una buena separación.
89
c) Calcula la concentración de sacarosa en la muestra y reporta el resultado en g de

sacarosa por 100 g de melaza.
Conc (mg/mL) sacarosa = 200

Conc (mg/ml) trihalosa = 216.6
Área Frr
Arel Crel Frr prom.
Iny Área EI Sac
1 184,823 188,585 1.020 0.923 1.105
2 186,854 191,080 1.023 0.923 1.108 1.107
3 181,750 185,811 1.022 0.923 1.108
Muestra
Área Conc Conc Con

Iny Área EIA rel
sac (mg/ml) (mg/g mel) (g/100 g mel)
1 274933 228946 1.201 235.031 470.062 47.006
2 255862 206273 1.240 242.770 485.539 48.554
3 274489 228532 1.201 235.076 470.153 47.015
R = 47.52 g sacarosa / 100 g melaza
Problema 6
Esparteína, lupanina y 3-OH lupanina
b) ¿Qué factores de respuesta se obtienen para cada uno de los alcaloides identificados?
Crel mg/
Alcaloide Arel Prom F rr
mL
Esparteína 2.816 1.514 1.860
Lupanina 12.1 6.84 1.769
3-OH lupanina 0.576 0.44 1.309
90
c) ¿Qué concentración se obtiene de cada uno de los alcaloides presentes en el

colorín en mg/g de muestra?
Conc Conc
Alcaloide Arel 1Arel 2 Arel 3 A prom (mg/mL) (mg/100g)
Esparteína 0.663 0.713 0.623 0.666 0.0358 17.907
Lupanina 9.957 10.467 9.524 9.983 0.5643 282.152
3-OH lupanina 0.671 0.714 0.669 0.685 0.0523 26.164
d) ¿Cuál es el contenido total de alcaloides por 100 g de colorín?
326.2 mg alcaloides / 100 g colorín
Problema 7
a) Calcula el contenido de o-Cloro-p-Bencilfenol (OCPB) y o-Bencilfenol (OB) en la

muestra y expresa el resultado en ppm.
Conc
Disolución Área (ppm) Fr
Estándar OB 1,650,008 2093 788.34
OCPB 771,567 3040 253.80
OB 532,048 674.89
Muestra OCPB 375,730 1480.38
R = 6748 ppm de OB y 14800 ppm OCPB
b) Enumera las posibles fuentes de error en este análisis.
Debido a que el factor de respuesta considera una relación lineal entre con-
centración y área, un error común es cuantificar con áreas muy distintas a
las utilizadas en el cálculo del factor de respuesta sin antes comprobar la
linealidad en el intervalo de trabajo.
91
Problema 8
a) Indica el orden de elución de los compuestos presentes en el extracto de mezcal.

Los alcoholes más volátiles son los primeros en eluir. Debido a que la
estructura química de éstos es similar, su interacción con la fase estacionaria
debe de ser parecida; por lo tanto, el orden de elución depende principalmente
del punto de ebullición de los mismos. El orden sería: metanol à etanol à
propanol àisobutanol à alcohol isoamílico. Para los cuatro alcoholes más
retenidos, la interacción con la fase estacionaria empieza a cobrar mayor
importancia, por lo que un orden posible sería: hexanol à alcohol bencílico à
alcohol isoamílicoànonanol.
b) Determina, por normalización de áreas, la concentración relativa de los alcoholes

identificados.
Compuesto A1 A2 A3 Cr1 Cr2 Cr3 Cr %

1 Acetona 3568263 3,958,428 3,725,892
2 Acetato de etilo 300364 293722 270821
13 Nonanol 154264 163405 146662 2.998 3.088 3.004 3.030
15 Alcohol bencílico 37519 38971 34766 0.729 0.736 0.712 0.726
4 Etanol 3417384 3539710 3274528 66.413 66.893 67.080 66.795
- Alcohol Amílico 0 0 0 0.000 0.000 0.000 0.000
14 Feniletanol 12231 13084 11726 0.238 0.247 0.240 0.242
- Butanol 0 0 0 0.000 0.000 0.000 0.000
8 Alcohol 474225 494192 446721
Isoamílico 9.216 9.339 9.151 9.235
10 Hexanol 45866 48451 44430 0.891 0.916 0.910 0.906
5 Propanol 106710 109274 99385 2.074 2.065 2.036 2.058
6 Isobutanol 168896 174293 157479 3.282 3.294 3.226 3.267
3 Metanol 365134 350714 334699 7.096 6.628 6.856 6.860
7 No identificado 11563 12019 10693
11 No identificado 36539 37391 35632
Total 5,145,682 5,291,592 4,881,536
c ) I n d ic a e l a lc o h ol q u e s e e n
E l F e n i le ta n o l e s e l a lc o h o l
c u e n t r a p re s e nt e e n m e n o r p r o p o r c ión en e l
p r e s e n t e e n m e n o r co n c e n t r a c i ó n en el m
m e z c a l.
ez c a l .
92
Problema 9
a) Completa las tablas de resultados experimentales de cada jabón.
Pico EM tr Área Arel Crel Fr

1 EM11 7.593 87175 X X X
2 EM15 10.930. 7138 0.08 0.94 0.09
3 EM16:0 11.640 102860 1.18 0.94 1.26
4 EM18:1 12.816 8385 0.10 0.94 0.10
5 EM18:0 13.003 7718 0.09 0.94 0.09
Jabón Quemado Jabón Nigie
EM tr (min) Área EM tr (min) Área
4.611 34,691 4.687 29,976
6.645 29,685 6.645 20,140
EM11 7.593 126345 EM11 7.596 177953
8.491 241,523 8.489 126,800
10.018 8,514 10.012 8,280
EM15 EM16:0
10.140 135,534 EM15 EM16:0
10.139 85,172
10.901 20,505 10.909 124,869
EM18:1 11.462 34,546 11.465 58,895
EM18:1
11.649 329981 11.653 290152
12.148 17,110 12.149 16,570
12.332 19,882 12.334 19,281
12.755 38,975 12.758 64,004
12.832 450,020 12.836 510,067
EM18 123.807102120257,4340494 EM18 123.801742211257,203235
b) ¿Qué ácidos grasos contienen las muestras?

Ambas muestras contienen todos los ácidos grasos como ésteres
metílicos usados en la disolución estándar.
c) Calcula la concentración de EM16:0 en las soluciones finales, reporta los resul-

tados en mg/mL.
Área Conc. Mg/mL
87175 0.023
EM11 (EI) EM16:0 Frr: 1.26
102860 0.022
93
Muestra de jabón quemado (JQ)
Conc. Final
JQ Área mg/mL
EM11 (EI) 126345 0.023
EM16:0 329981 0.048
Conc. Final
JN Área mg/mL
EM11 (EI) 177953 0.023
EM16:0 290152 0.030
d) Calcula la concentración de EM16:0 en % en peso en cada jabón

EM16:0 = 7.79% en peso en JQ
EM16:0 = 4.86% en peso en JN
e) Menciona cuál de las dos muestras contiene más ácido graso de 16 átomos de
carbono (EM16:0).
El jabón quemado contiene mayor cantidad de EM16.
Problema 10
a) ¿Qué triglicéridos están presentes en el producto alimenticio?

Se encuentran presentes tripalmitina, triestearina y trioleína.
b) Calcula el número de platos teóricos y la resolución de los compuestos encontrados

en la muestra.
Triglicérido N R
TG-C16 954234 14.5
TG-C18 435125
TG-C18:1 274873 1.5
94
c) ¿Cuál es la concentración de cada uno de ellos?
Conc
Triglicérido Área (mg/mL) Fr
TG-C16 107682 0.02 5384100
TG-C18 97061 0.02 4853050
TG-C18:1 98597 0.024 4108208
Muestra
Conc Conc
Triglicérido Área (mg/mL) (mg/g)
TG-C16 171984 0.0319 0.213
TG-C18 145681 0.0300 0.200
TG-C18:1 148440 0.0361 0.241
d) Reporta los resultados en mg/g de muestra.
Triglicérido mg/g alimento

TG-C16 0.213
TG-C18 0.200
TG-C18:1 0.241
Problema 11
a) ¿Qué conservadores están presentes en la muestra?

Sólo está presente el metil-parabeno.
b) Cuantifica el contenido de conservadores en el champú, reporta el resultado

en % en peso.
El contenido de metil-parabeno es de 0.051%.
Problema 12
a) Calcula el contenido de cada ácido graso presente en el jabón, expresa el resul-

tado en % de peso.
Ácido % peso
C12 C18:1 1.121
1.722
95
Problema 13
a) Calcula el contenido de ésteres metílicos en la muestra y reporta los resultados en

mg/g de grasa.
Concentración
Compuesto (mg/g)
EM16 EM 18:1 172.457
EM18 199.270
19.067
Problema 14
a) Identifica que ácidos grasos están presentes en la mantequilla.
COOH COOH COOH COOH COOH

18:3
C 16:0
,C 18:0
,C 18:1
,C 18:2
yC
b) Calcula la concentración en mg/g del ácido graso que se encuentra en mayor propor-
ción en la muestra.
Corresponde al ácido CCOOH en una concentración de 720.30 mg/g de muestra de
1
mantequilla.
c) Calcula la concentración en mg/g del ácido graso que se encuentra en menor propor-
ción en la muestra.
Es el ácido CCOOH el cual se encuentra con una concentración de 109.39 mg/g de
1
muestra de mantequilla.
Problema 15
a) Calcula el % en peso de etanol en cada muestra.

Muestra %peso
1a 63.299
1b 65.325
1c 62.024
2a 61.567
2b 62.603
2c 59.166
96
Problema 16
a) Identifica los compuestos presentes en la muestra analizada, ¿se encuentran

presentes el naftaleno y alcanfor?
Sí, se encuentran ambos, naftaleno y alcanfor.
b) ¿Qué concentración de naftaleno y alcanfor hay en la muestra? Expresa la

concentración en mg/g de muestra.
El naftaleno se encuentra con una concentración de 42.45 mg/g y el alcanfor
con 113.99 mg/g.
c) En los espectros de masas identifica el ion molecular y el pico base de cada

compuesto. Para el naftaleno, el ion molecular (IM) y su pico base (PB)
corres- ponden a la misma señal en 128 m/z; mientras que para el alcanfor
su ión molecular (IM) es 152 m/z y su pico base (PB) es 95 m/z.
Problema 17
a) ¿Qué terpenos identificas en la bebida?

Linalol, borneol, 4-terpineol, α-terpineol, nerolidol y α-bisabolol.
b) Calcula la concentración de los 3 compuestos más retenidos en la bebida

(la bebida se presenta comercialmente en un volumen de 355 mL).
Compuesto ng terpeno/Lata
α-terpineol 168.340
nerolidol 184.529
α-bisabolol 184.500
c) Calcula para los 3 compuestos menos retenidos la resolución(R).

Linalol- borneol; R=26.88
Borneol-4-terpineo; R=4.9l

97
Problema 18
a) Indica cuál es el disolvente presente en la muestra.
El disolvente presente en la muestra es Xileno.
b) ¿Cuál es la concentración de éste? Expresa el resultado en %

Su concentración es del 20.363%
Problema 19

croma- tográficos y completa las siguientes tablas con los resultados obtenidos (expresa
todas las unidades de tiempo en minutos).
Pico tm (min) tr (min) tr’ (min) Wb (min) W1/2 (min) k’

A 0.786 0.786 0.000 0.283 0.167 0.000
B 0.786 3.167 2.381 0.283 0.167 3.030
C 0.786 3.905 3.119 0.283 0.167 3.969
D 0.786 5.071 4.286 0.283 0.167 5.454
E 0.786 5.333 4.548 0.283 0.167 5.788
Par de picos Rs α
B-C 2.605 1.310
D-E 0.924 1.061
PDico 5126N.055 H1(.m95m1 )
b) Con los resultados obtenidos de parámetros cromatográficos responde las siguientes

preguntas:
No, es muy baja. Se traslapan los picos.
2. ¿La selectividad (α) para los picos D y E es aceptable? ¿Por qué?

No, es muy cercana a la unidad.

98
3. Suponiendo que los compuestos de interés sean D y E, ¿qué puedes decir acerca
de los valores de K’ para estos picos?
Son valores muy parecidos, lo que puede significar una difícil separación.
4. En general (tomando en cuenta la eficiencia de la columna), indica si el análisis

de D y E debe realizarse con esta columna. Justifica tu respuesta.
No sería recomendable, debido a la baja eficiencia de esta columna.
Problema 19 b

cromatográficos y completa las tablas (expresa todas las unidades de tiempo en
minutos).
Pico tm (min) tr (min) tr’ (min)Wb (min)W 1/2 (min) K’
A 0.734 0.734 0.000 0.067 0.039 0

B 0.734 0.948 0.214 0.083 0.049 0.177
CD 0.734 1.708 0.974 0.033 0.020 1.326
E 0.734 1.776 1.042 0.033 0.020 1.418
0.734 1.828 1.094 0.033 0.020 1.489
Par de picos Rs α
D-E 1.563 1.049
Pico N H (mm)
D 48124.95 0.312

siguientes preguntas:
Sí, es mayor a 1.5, lo que significa que se logró una separación a línea base.
2. ¿La selectividad (α) y el factor de capacidad (K’) para los picos D y E son acep-
tables? ¿Por qué?
Sí, los valores obtenidos para estos parámetros cromatográficos sugieren
que la separación de los compuestos es aceptable.
99
3. En el caso de que la selectividad (α) y el factor de capacidad (K’) no sean óptimos para
la separación, ¿qué factor modificarías para que el valor de resolución (Rs) sea
aceptable? Se modificaría el número de platos teóricos (N).
4. Suponiendo que los compuestos de interés sean D y E, ¿qué puede decir acerca de
los valores de K’ para estos picos?
Que son muy cercanos, pero aun así se obtiene una resolución aceptable.
5. ¿Considera que el análisis de E debe realizarse con esta columna? Justifica tu

respuesta.
Sí, pues se logra una mayor eficiencia y separación que con la primera columna.
Problema 20
a) ¿Qué volumen de la solución de 10 ppb de acetaldehído se adiciona a las muestras?
0, 100, 200, 300 y 400 µL.

b) ¿Qué concentración de acetaldehído hay en el queso?
9.826 ng acetaldehído/g queso.
Problema 21
Determinar la concentración de los analitos en el músculo fresco (ng g -1).
Concentración en el extracto (ng/g) de músculo
Muestra OXI OC fresc2o-EHMC AVO

A 116.701 102.531 265.270 113.598
B 52.509 256.468 84.877 67.777
C 272.812 356.651 354.589 349.331
100
Problema 22
Resultados experimentales
tr Área Wb % Área
(min) (μV*min) (min)
2.706 1675277 0.087 25.67
3.090 1509911 0.095 23.13
3.766 1661197 0.112 25.45
4.851 1679078 0.136 25.73
Del cromatograma calcula:
a) α para etil y propilparabeno = 1.47

b) N para el etil parabeno = 16,924.1
c) R para etil y propilparabeno = 6.53
d) k´ para etil parabeno = 0.839
Problema 23
1. Parámetros:
k’A= 3.83; k’B= 5
α = 1.3
R = 3.29
NA = 4659.14
NE = 3191.04
2. 0.229% de Vitamina E.
3. Cromatografía de líquidos de alta eficiencia (HPLC, por sus siglas en inglés).
Problema 24
1. Piroxicam/Ibuprofeno= 290.4 mg / 294.2 mg/tableta
2. Se rechazan.
101
Problema 25
1. 9.6817 µg/mL de THC
2: 9.6817 µg THC/g panqué
Problema 26
Concentración de antraceno = 0.3323 ng/L

Concentración de fluoranteno = 0.1794 ng/L
Problema 27
Impureza = 3.99%
Problema 28
Concentración = 70.12 mg/tableta
Problema 29
Concentración Concentración
mg/mL Sulfamato Sulfato % m/m
0.048
0.047
Debido a que sulfamato y sulfato se encuentran por debajo de 0.05% en el principio

activo, la muestra cumple con la especificación.
102
Problema 30
1. Fructosa, sucrosa, lactulosa y lactosa.

2.
Azúcar Concentración
% m/m
Fructosa 13.865
Sucrosa 9.747
Lactulosa 1.302
Lactosa 5.113
Debido a que se determinaron azúcares que indican la descomposición de la leche,

es probable que la muestra no se encuentre en buenas condiciones para su
consumo.

EJERCICIOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO
PARA CROMATOGRAFÍA. GASES Y LÍQUIDOS
es una obra editada por la Facultad de Química.
Se terminó de reproducir el 6 de noviembre de 2017
en los talleres de la misma, Ciudad Universitaria,
Delegación Coyoacán, C.P. 04510, Ciudad de México.
Se tiraron 400 ejemplares, en papel bond de 90 grs.

Se utilizaron en la composición la familia de la fuente
Arial 12 pts, Times New Roman 12 pts y Symbol 1.
Tipo de impresión: offset.
La publicación de esta obra fue posible gracias

al apoyo de la Coordinación de Comunicación,
a través de los Departamentos Editorial y de Información.
El cuidado de la edición estuvo a cargo de

Lic. Brenda Álvarez Carreño
Diseño de portada: DG Norma Castillo Velázquez.
Publicación autorizada por el

Comité Editorial de la Facultad de Química.
Noviembre de 2017

PDF Libro de Ejercicios de Cromatografia

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UNIVERSIDAC NATIONAL AUTGNOMA DE MEXICC

FAC iJ_TAD DE CUiMiCA

Araceli Peña Alvarez

ARACELI PEÑA ÁLVAREZ

Se agradece al M. en C. Irán Ocaña Ríos

“Prohibida la reproducción total o parcial por cualquier medio,

Impreso y hecho en México

MÉTODOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA. FACULTAD DE QUÍMICA, UNAM

ARACELI PEÑA ÁLVAREZ

Si consideramos que X es el analito,

% área X = [Ax / Σ (Ai)] X 100

Para utilizar este método se deben tener ciertas consideraciones:

• Todos los analitos deben tener la misma sensibilidad.

Las áreas de los analitos no son directamente proporcionales a la composición porcen-

El factor de respuesta del compuesto “Fx” se calcula dividiendo su área entre la

Ax = Área para el analito x

En este método se inyectan disoluciones de diferente concentración del analito o

Figura 1. Curva de calibración estándar externo.

Este método también es nombrado calibración relativa. Se preparan disoluciones de

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA. FACULTAD DE QUÍMICA, UNAM

Figura 2. Curva de calibración estándar interno.

Después de añadir a la muestra desconocida una cantidad exactamente conocida del

El estándar interno debe tener las características siguientes:

EJERCICIOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO PARA CROMATOGRAFÍA. GASES Y LÍQUIDOS

Este método consiste en la adición de concentraciones conocidas de estándar a la

Concentración del analito añadido

Flujo H2: 1 mL/min

a) Utilizando los resultados experimentales en cada temperatura de trabajo,

calcula e l f ac t o r de r e t e n ci ó n ( k ’ ) , l a eficiencia (N), la

selectividad (α) y la resolución (Rs).

Temperatura del hornoCompuesto k’ N α Rs

b) Con base en los resultados de la tabla anterior responde:

2. ¿Qué significado tienen estos resultados en la separación cromatográfica?

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA. FACULTAD DE QUÍMICA, UNAM

Flujo H2: 1 mL/min

EJERCICIOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO PARA CROMATOGRAFÍA. GASES Y LÍQUIDOS

a) Calcula el contenido de etanol en la muestra, expresa el resultado en % v/v.

b) La concentración máxima permitida de alcohol en este tipo de fármacos es de

Preparación de la Curva de calibración relativa

10 mL con agua. De la muestra se inyectó 1.0 µL y el análisis se realizó por quintuplicado.

80°C durante 1.3 min, incrementando

split/splitless: split 30:1; 150°C

Flujo H2: 1 mL/min

EJERCICIOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO PARA CROMATOGRAFÍA. GASES Y LÍQUIDOS

Punto de Áreas EtOH Áreas EI

a) Calcula la concentración de etanol en la muestra y expresa el contenido en % v/v.

de gases, utilizando una curva de calibración relativa (estándar interno).

Curva de calibración relativa

Detector Ionización de llama: 250°C

EJERCICIOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO PARA CROMATOGRAFÍA. GASES Y LÍQUIDOS

Curva de calibración relativa

Muestra de agua residual

a) Calcula la concentración de diclorobenceno en cada punto de la curva patrón y com-

b) Calcula la concentración de C6H4Cl2 en la muestra y expresa el resultado en ppm.

Cold on column; oven track on

a) Calcula la selectividad (α) de la columna cromatográfica así como la resolu-

b) Con los resultados del inciso a) de parámetros cromatográficos, analiza si las

c) Calcula la concentración de sacarosa en la muestra y reporta el resultado en

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA. FACULTAD DE QUÍMICA, UNAM

cporempoaraólilma esnigtouiepnatrea deisl oglauncaiódno.esPtaárnadarer.alizar el

Preparación de la muestra problema:

Horno h1a5s0ta°C20d0u°rCanpteor01. 5 min, incrementando 250°°C/m/minin hasta 2